人血白蛋白制剂

人血白蛋白多聚体测定法本法系用分子排阻色谱法测定人血白蛋白多聚体含量。照分子排阻色谱法（附录Ⅲ D）测定。色谱条件与系统适用性试验 用亲水硅胶高效体积排阻色谱柱（SEC，排阻极限300kD，粒度10μm），柱直径7.5mm,长60cm；以含1％异丙醇的pH7.0 0.2mol/L磷酸盐缓冲液为流动相；检测波长为280nm ；流速为每分钟0.6ml。取每1ml含蛋白质为12mg 的人血白蛋白溶液20μl，注入色谱柱，记录色谱图,人血白蛋白单体峰与二聚体峰间的分离度应大于1.5，拖尾因子按人血白蛋白单体峰计算应为0.95～1.40。测定法 取供试品适量，用流动相稀释成每1ml约含蛋白质12mg的溶液,取20μl，注入色谱柱，记录色谱图60分钟（色谱柱长60cm）。按面积归一法计算，色谱图中未保留（全排阻）峰的含量(%)除以2，即为人血白蛋白多聚体含量请教：为何除以2呢？很奇怪呀

今天老大接了个活，要测人血白蛋白中的铝，可据说10次测定的结果中有9次都不好，想问问线上的高手，测铝需要注意什么呀？

[align=center][b][font=宋体]附录Ⅵ[/font][font=Times New Roman] Q[/font][font=宋体]人血白蛋白多聚体测定法[/font][/b][/align][font=宋体][size=3]本法系用分子排阻色谱法测定人血白蛋白多聚体含量。[/size][/font][size=3][font=宋体]照分子排阻色谱法（附录Ⅲ[/font][font=Times New Roman] D[/font][font=宋体]）测定。[/font][/size][size=3][b][font=宋体]色谱条件与系统适用性试验[/font][/b][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]用亲水硅胶高效体积排阻色谱柱（[/font][font=Times New Roman]SEC[/font][font=宋体]，排阻极限[/font][font=Times New Roman]300kD[/font][font=宋体]，粒度[/font][font=Times New Roman]10[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]m[/font][font=宋体]），柱直径[/font][font=Times New Roman]7[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]5mm[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]长[/font][font=Times New Roman]60cm[/font][font=宋体]；以含[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]％异丙醇的[/font][font=Times New Roman]pH7[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]0 0[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]2mol/L[/font][font=宋体]磷酸盐缓冲液［取[/font][font=Times New Roman]0[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]5mol/L[/font][font=宋体]磷酸二氢钠[/font][font=Times New Roman]200ml[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]0[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]5mol/L[/font][font=宋体]磷酸氢二钠[/font][font=Times New Roman]420ml[/font][font=宋体]、异丙醇[/font][font=Times New Roman]15[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]5ml[/font][font=宋体]及水[/font][font=Times New Roman]914.5ml[/font][font=宋体]，混匀］为流动相；检测波长为[/font][font=Times New Roman]280nm [/font][font=宋体]；流速为每分钟[/font][font=Times New Roman]0[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]6ml[/font][font=宋体]。取每[/font][font=Times New Roman]1ml[/font][font=宋体]含蛋白质为[/font][font=Times New Roman]12mg [/font][font=宋体]的人血白蛋白溶液[/font][font=Times New Roman]20[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]l[/font][font=宋体]，注入色谱柱，记录色谱图[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]人血白蛋白单体峰与二聚体峰间的分离度应大于[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]5[/font][font=宋体]，拖尾因子按人血白蛋白单体峰计算应为[/font][font=Times New Roman]0[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]95[/font][font=宋体]～[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体].[/font][font=Times New Roman]40[/font][font=宋体]。[/font][/size][size=3][b][font=宋体]测定法[/font][/b][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]取供试品适量，用流动相稀释成每[/font][font=Times New Roman]1ml[/font][font=宋体]约含蛋白质[/font][font=Times New Roman]12mg[/font][font=宋体]的溶液[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]取[/font][font=Times New Roman]20[/font][font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]l[/font][font=宋体]，注入色谱柱，记录色谱图[/font][font=Times New Roman]60[/font][font=宋体]分钟[/font][s][font=宋体]（色谱柱长[/font][/s][s][font=Times New Roman]60cm[/font][/s][s][font=宋体]）[/font][/s][font=宋体]。[/font][/size][size=3][color=#fe2419][font=宋体]按面积归一法计算，色谱图中未保留（全排阻）峰的含量[/font][font=Times New Roman](%)[/font][font=宋体]除以[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]，即为人血白蛋白多聚体含量。[/font][/color][/size][size=3][font=Times New Roman][b][color=#0021b0]计算方法不是很明白，为什么要除以2 ？？？ 全排阻的峰指的是哪一个？？谢谢[/color][/b][/font][/size]

求助大神，最近在做原子火焰测人血白蛋白中钠离子检测，做加标回收，回收率普遍在110%以上…请问大神，有没有成型的方案或者方法借鉴一下！

谁有三羟甲基氨基甲烷、人血白蛋白的质量标准啊，最好是国家标准PDF。谢谢

由武汉大学生命科学院教授、武汉禾元生物科技有限公司董事长杨代常领衔的研发团队从2006年开始进行植物源替代血浆来源的医药蛋白的研究与开发，现已取得突破性进展并已跨入规模化生产的阶段，填补了国际上此项技术空白。相关论文“Large-scale production of functional human serum albumin from transgenic rice seeds ”(利用转基因水稻规模化生产重组人血清白蛋白)于2011年10月31日在线发表于《美国科学院院报》( PNAS ) 。该论文在线之际，受到国外Scientist ， Nature news , The Australian , Thomson Reuters, Fox News , Agence France Presse (AFP法新社) 等美国、英国、俄罗斯、德国、巴西、印度各专业杂志及媒体的广泛关注和报道。该研究表明由转基因水稻种子生产的重组人血清白蛋白(OsrHSA)在生理生化性质、物理结构，生物学功能、免疫原性与血浆来源的人血清白蛋白一致；并建立了大规模生产重组人血清白蛋白的生产工艺，获得了高纯度和高产量重组人血清白蛋白产品。利用大量数据证明了转基因水稻种子可取代现有基于发酵的表达技术来生产重组蛋白质是经济有效的。正如PNAS 审稿人对该文章的评价：“这篇文章解决了在科学上振奋人心、在经济上都非常重要的议题－－即用转基因植物生产血浆产品或其他蛋白产品的技术平台，可代替其他基于发酵的表达技术，其重要性也不言而喻……这篇文章近乎完美地证实了植物生产的医药蛋白和批准临床使用的血浆来源医药蛋白是完全相同的，并提供了翔实数据证明植物系统规模化容易和成本优势。”目前，人血清白蛋白(human serum albumin)广泛应用于临床治疗和细胞培养领域。常见的人血清白蛋白大多数从人的血浆中提取，这样的生产方式不仅受到血浆供应的限制，而且还具有携带病毒传播的高风险性。国际上以重组人血白蛋白替代血源产品的应用已成为趋势，国内市场需求也逐年扩大，2010年已达150吨。尽管市场广阔，但高纯度重组人血白蛋白的规模化生产技术和质量控制技术却是世界性难题。武汉禾元历经多年的技术攻关，利用水稻胚乳表达技术平台，研发出国际先进水平的重组人血白蛋白产品生产技术，并成功实现重组人血白蛋白规模化和产业化，完全摆脱了相关制约，具有纯度更高、无动物组分、安全、高效、绿色环保、廉价、无限量供应等优势。随着植物源重组人血清白蛋白的发展，我国人血清白蛋白日益紧张的局面必将得到缓解。详细论文，请点击下载：http://www.oryzogen.com/category/22/2011-11-01/93315359.html注：《美国科学院院报》(Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 缩写 PNAS，ISSN：0027-8424)是被引用次数最多的综合学科文献之一。它是美国科学院的院刊。自1914年创刊至今，PNAS提供具有高水平的前沿研究报告、学术评论、学科回顾及前瞻、学术论文以及美国国家科学学会学术动态的报道和出版。PNAS收录的文献涵盖生物、物理和社会科学，2008年的影响因子为9.38，2009年影响因子为9.432, 2010年影响因子为9.771。在SCI综合科学类排名第三位，因而已成为全球科研人不可缺少的科研资料。

中文摘要： 目的 实验室规模通过近红外光谱分析技术对人血白蛋白醇沉过程进行监测，为提高组分I+II+III上清液乙醇沉淀环节收率提供支持。 方法 实验室条件下模拟8批正常过程和3批异常过程。定性模型以6个正常批次作为校正集建立主成分分析模型，2个正常批次和3个异常批次作为验证集考察模型过程监测和错误诊断能力。定量模型以醇沉过程中人血白蛋白含量和总蛋白含量作为建模指标，6个正常批次样品作为校正集，2个正常批次样品作为验证集，建立了可用于人血白蛋白和总蛋白含量快速准确测定的偏最小二乘回归模型。 结果 定性的主成分分析模型和定量偏最小二乘回归模型可实现醇沉过程的监测和错误判断。 结论 利用近红外光谱分析技术结合化学计量学对人血白蛋白生产过程中的FI+II+III上清液醇沉过程进行监测的方法可行。关键词：近红外光谱分析技术；组分I+II+III；化学计量学；醇沉淀 人血白蛋白（Human Albumin，HA）是最早从人血浆中提取并应用于临床上的血液制品。组分（Fraction, F）I+II+III上清液醇沉过程是HA生产过程中的重要一步，其目的是去除各种杂蛋白，得到FIV上清液，为下一步醋酸缓冲液沉淀过程做准备。目前人血白蛋白组分I+II+III上清液醇沉过程生产过程的控制模式大都采用离线的方式，即当乙醇加入到含量为40%时醇沉过程结束，然后取样进行实验室化验，其结果严重滞后于生产过程，无法实时的监测指导生产过程的进行。在制药领域，NIRS作为一种重要的PAT工具，已成功用于药物的原辅料质量评价、关键过程的监测和控制、成品的快速放行和质量检测等各个环节，为保证产品质量、降低生产成本、革新生产过程发挥了重要的作用。本研究中利用NIRS结合化学计量学对HA生产过程中的FI+II+III上清液醇沉过程进行监测，以实现醇沉环节的过程控制。1 材料1.1 试剂FI+II+III压滤后上清液（山东泰邦生物制品有限公司）；95%乙醇（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；去离子水。1.2 仪器和软件 Antaris II傅里叶变换近红外（Fourier Transform NearInfrared, FT-NIR）光谱仪（美国Thermo Fisher Scientific公司），液体透射采样模块，内径为4×50 mm的玻璃小管（德国Kimble Chase公司）；低温反应仪（郑州长城科工贸有限公司）；BF300恒流泵（保定齐力恒流泵有限公司）；Alpha 1-2 LD实验室型冻干机（德国Christ公司）；高速离心机（Thermo Fisher Scientific公司）；MATLAB 2010a（美国Mathworks公司）；PLS_Toolbox工具箱（美国Eigenvector Research公司）。2 方法2.1 醇沉过程正常醇沉过程：醇沉过程在低温反应仪中进行，温度设定和实际生产反应温度一致。每个批次取100 mL FI+II+III压滤后上清液置于250 mL的圆底烧瓶中，恒流泵加入95%乙醇的速度为1 mL/min。醇沉开始前以及醇沉过程中每隔3 min取样1 mL用于光谱的采集及蛋白含量的测定。异常醇沉过程：本研究中为考察定性

如果说一个人一次献血200ml，一亩转基因水稻产出的血清白蛋白量约等于300人献的血——转基因水稻胚乳可提取血清白蛋白——转基因水稻胚乳可提取血清白蛋白2012年09月01日 来源： 中国科技网 关注转基因 白蛋白供应紧张一直困扰着人类。我国每年需求150—160吨，全球每年需求量则高达500吨，由于血浆来源紧张，我国目前从血浆中提取量仅可供应1/3，其中2/3依赖进口。 2011年10月31日，武汉大学生命科学学院教授杨代常撰写的论文《利用转基因水稻规模化生产重组人血清白蛋白》在《美国科学院院报》发表，吸引了世界的目光。 文章用翔实的科学数据证明，植物来源的重组人血清白蛋白与临床使用的血浆来源血清白蛋白，无论是在生理生化性质，还是功能用途等方面，都具有高度的等同性。 为何这项研究引发种种关注？稻米血清白蛋白是否会危及生态及人身安全？其何时能用于临床治疗？……带着这些问题，记者采访了杨代常和他的团队。 “借腹生子”：从水稻胚乳中提取血清白蛋白 植物种子生物反应器，是将植物种子作为一个蛋白质“生产车间”，利用植物作为合成蛋白质的“机器”来合成人类所需的蛋白质。“通俗地解释，便是‘借腹生子’。”杨代常说。 国外从1989年已开始利用DNA重组技术生产血清白蛋白，但由于血清白蛋白产量低、纯化工艺复杂、生产成本远高于市场成本，始终无法进入市场。 杨代常带领研究团队，从水稻基因组数据入手，根据水稻种子储藏蛋白与血清白蛋白的生化性质差异，设计出从提取到纯化的一整套工艺方案，最大限度地提取血清白蛋白，最低限度去除种子的内源蛋白，成为一项原始创新的科研成果。 “具体来说，是由表达元件组成的载体，通过遗传工程整合到水稻基因组内，在种子特异性调控元件的指导下，水稻种子在成熟过程中也不断地合成和积累人血清白蛋白，然后通过规模化种植获得原料，再经过提取、纯化等步骤获得高纯度的血清白蛋白。”杨代常介绍，目前大约每亩水稻可以产生1.5—2公斤血清白蛋白，如果说一个人一次能献血200ml，一亩转基因水稻产出的血清白蛋白量约等于300人献血。 “天然屏蔽”：可杜绝肝炎、艾滋病毒等风险 植物源重组血清白蛋白优势明显，它来源于非动物，避免了各种病毒和病原菌的污染，并由于不受血浆供应限制，可无限量供应。但是转基因农业作物安全性向来争议不断，植物源血清白蛋白有望未来直接应用于人体中，有人担心会危及生态及人身安全。 对此，杨代常解释，首先，就人血清白蛋白本身安全性而言，血清白蛋白本就是人体的蛋白质，占血浆中蛋白的30%，是一种安全的蛋白质。目前，根据获取的数据，植物来源的人血清白蛋白从生物活性、分子结构和理化性质与血浆来源的人血清白蛋白完全一致，从水稻胚乳中提取的血清白蛋白可杜绝携带如肝炎病毒、艾滋病毒等风险。研究发现，人体对植物蛋白的耐受能力大于对细菌和酵母的耐受能力。从安全性考虑，已建立高纯度符合医药级别纯度的血清白蛋白。其次，就转基因生物安全而言，由于采取地理和时间双重隔离方法，要求比美国更为严格。第三，为杜绝进入食物链，在研究中采取了专用收割机、烘干机、稻米加工设备以及专用仓库等措施，建立了严格的监管规范，能做到可管可控和可追溯。 未来预期：进入临床需4至5年 从2005年始，杨代常自主研发的水稻胚乳细胞蛋白质高效表达技术平台，填补了国际上此项技术规模化生产的空白，已获美、日、欧盟以及我国的多项专利。 杨代常说，目前，植物源重组血清白蛋白的质量已达到非临床应用标准，可替代血源人血白蛋白用于细胞培养基添加剂，成为细胞培养中血浆来源的血清白蛋白的替代品；可减少培养基中胎牛血清的使用量；还可用于高纯试剂、细胞冷冻保护剂、医疗器械包埋剂、药物载体、化妆品组分、体外诊断等。 国外已在疫苗及生物医药产品的细胞培养的稳定剂上使用。我国按照国家药监局的要求，要通过临床研究后才能进入临床应用。 通过治疗大鼠肝硬化腹水对比，进行植物源重组血清白蛋白的药效研究，发现大鼠肝硬化腹水的治疗效果在降低腹围、增加尿量和尿蛋白量等指标优于血浆来源的血清白蛋白。 “植物源重组血清白蛋白正在进行临床前研究，已完成大部分的药学研究，预计在2013年上半年可望完成临床前研究；预计进入临床研究至少需要2年时间，进入临床应用至少需要4—5年或更长的时间，这取决于临床研究的结果与进度以及国家的法规。”杨代常说。 从实验室走向产业化 去年年初，杨代常带着多年的研发成果，入驻武汉东湖国家自主创新示范区光谷生物城，一年内实现了项目产业化。 “这一过程我们走得很艰难。”杨代常说，为了让投资者更有信心，他在商业模式上从长中短期产品计划入手，将技术做好做精。在科技部转基因重大专项、国家863计划和武汉东湖国家自主创新示范区光谷生物城的支持下，加速了项目产业化进程。 “我国生物产业要走在世界前列，在心理上要打破‘奴性’思维，在政策上要突破传统观念，要敢做别人不能做或不敢做的事情。”杨代常说，“现在一谈到转基因，很多人就‘谈虎色变’。实际上，理解上存在很多误区。转基因技术是通过遗传工程的手段，将人类需要的基因（一段DNA片段）导入到植物或任何一种生物的一项高科技技术，是人类由必然王国走向自由王国的必由之路。” 近日，杨代常的科研团队又传出喜讯，在水稻中“种”出了“人抗胰蛋白酶”。目前，重组抗胰蛋白酶与重组血清白蛋白一样，有效地避免人血液中病毒病原菌感染的风险，但需要进行一系列的免疫原性、急性、毒性等相关实验和临床研究后，方能应用于临床。 杨代常透露，未来，其团队研发重心将着重原创性技术研究，建立单克隆抗体的表达平台，使我国的单克隆抗体药物的价格降到5万元左右，重组血清白蛋白进入临床应用。（记者 马爱平） 《科技日报》（2012-09-01 三版）

尿微量蛋白（尿微量白蛋白/蛋白尿）试验（也称“白蛋白试验”，“尿微量白蛋白”和“蛋白尿”试验）何为尿微量白蛋白（白蛋白）试验？尿微量白蛋白试验是对尿液中的蛋白质进行测定的筛选试验。人体血液中有一种蛋白质称为白蛋白。在正常情况下，几乎无法在尿液中检测到。只有在肾脏受损，尤其是损伤早期，它可以优先于其他肾损伤标志物在尿液中被检测出，因此，尿微量白蛋白在诊断肾脏疾病、早期肾损伤等方面具有重要意义。此项试验有何目的？蛋白质是人体的基本构成“材料”，具备一些重要的功能和作用，可结合营养物质将其运输至各个组织，，并将人体中循环的体液量维持在适当水平。肾脏功能正常时，蛋白质几乎无法通过肾脏进入尿液（仅会排出血液循环产生的废料）。然而，如果人的肾功能受损或衰竭，该肾脏对蛋白质的过滤能力将有所下降，因而一些蛋白质将会透过肾脏而出现在尿液中，称为尿微量蛋白。尿微量白蛋白与蛋白尿有何不同？白蛋白是一种大量存在于血液中的典型蛋白质。因其分子个头小，当肾脏功能出现问题时，白蛋白是能够率先通过肾脏进入尿液的几种蛋白质之一。尿液中出现少量白蛋白的情况称为尿微量白蛋白。若肾脏功能受损严重，尿液中的白蛋白数量呈现出增长趋势，这种症状被改称为蛋白尿。尿微量白蛋白/蛋白尿有何症状？病症早期，并无明显症状或征兆显现。随着肾功能衰竭的加重，大量蛋白质出现在尿液中，手脚、腹部和面部可能出现肿胀。如果蛋白尿的情况加重，可能会造成永久性肾功能损伤，有些病人可能需要做透析或肾移植。不论上述症状是否存在，尿蛋白测定是确定有多少蛋白质进入尿液的唯一办法。蛋白尿还可能引发心血管疾病。血管受损除了会引发肾脏疾病外，还可能会造成窒息和心力衰竭。患蛋白尿（症）的高危人群有哪些？患有糖尿病、高血压、心血管疾病和其他类型肾脏疾病等慢性病的病人易出现蛋白尿。老年人、肥胖人群以及有肾脏疾病家族史的人群。其

β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分？最近看到有两种版本，其一，说是属于乳白蛋白里面的一种成分，乳白蛋白包括α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和血清白蛋白。乳球蛋白即免疫球蛋白。其二，乳白蛋白包括α-乳白蛋白和血清白蛋白，乳球蛋白包括β-乳球蛋白和免疫球蛋白。现在不知道哪种说法对，请各位指教！！！谢谢！！！

中文摘要： 目的 通过近红外光谱技术对组分IV上清液酸沉过程中人血白蛋白的含量进行测定，实现酸沉过程人血白蛋白含量的过程监测。 方法 在实验室条件下模拟8批酸沉过程，以溴甲酚绿（Bromocresol Green, BCG）比色法测定人血白蛋白的含量；然后以5批作为校正集，3批作为验证集，建立人血白蛋白含量的PLSR定量测定模型。 结果 对变量选择方法进行了详细考察，最终选择35个有效变量建立模型，得到的模型Rc2、Rp2、RMSECV和RMSEP分别为0.977、0.978、0.7038 g/L和0.5893 g/L。 结论 评价结果显示模型有较好的预测能力，可用于酸沉过程中人血白蛋白的含量测定。关键词：近红外光谱分析技术；组分IV；化学计量学；酸沉淀人血白蛋白（Human Albumin，HA）是最早从人血浆中提取并应用于临床上的血液制品。在人血白蛋白（Human Albumin, HA）生产过程中，需要对FIV上清液进行酸沉，其目的为酸性条件下使HA沉淀下来，得到FV的沉淀，为下一步HA产品的纯化和精制做准备。在制药领域，NIRS作为一种重要的PAT工具，已成功用于药物的原辅料质量评价、关键过程的监测和控制、成品的快速放行和质量检测等各个环节，为保证产品质量、降低生产成本、革新生产过程发挥了重要的作用。本研究将PAT的理念引入到生产过程，对酸沉过程中HA的含量进行实时监测，根据HA的含量的变化即时调整醋酸缓冲液的加入速度，在保证产品的质量的同时提高生产效率。1 材料1.1 试剂FIV压滤后上清液（山东泰邦生物制品有限公司）；pH 4.0的醋酸缓冲液（山东泰邦生物制品有限公司）；白蛋白检测试剂盒（美国BioAssay Systems公司）；去离子水。1.2 仪器和软件Antaris II FT-NIR光谱仪（美国Thermo Fisherscientific公司）；内径4×50 mm的玻璃小管（Kimble Chase，德国）；低温反应仪（郑州长城科工贸有限公司）；离心浓缩仪（Thermo Fisher Scientific公司）；高速离心机（Thermo Fisher Scientific公司）；酶标仪（Thermo Fisher Scientific公司）；MATLAB 2013b（美国Mathworks公司）；PLS_Toolbox工具箱（美国Eigenvector Research公司）。2 方法2.1 酸沉过程实验室条件下模拟8批酸沉过程，反应在低温反应仪中进行，温度设置和实际生产相一致。具体过程如下：取100 mL FIV压滤后上清液置于圆底烧瓶中，然后将圆底烧瓶置于温度恒定的低温反应仪中；酸沉过程开始前取样1 mL后开始滴加醋酸缓冲液（pH4.0），醋酸缓冲液的加入方式为前9次每次加0.2 mL，后6次每次加0.8 mL；酸沉过程中每4 min加一次醋缓并取样1 mL并做离心处理，用于光谱的采集和HA含量的测定，每个酸沉过程得到16个样品。2.2 样品光谱的采集Antaris II FT-NIR光谱仪的透射模块进行原始近红外光谱的采集。光程4 mm，光谱范围10000-4000 cm-1，分辨率为8 cm-1，扫描次数32；每小时采集一次背景，以空气作为参考。所有样品采集3张原始光谱，以平均光谱作为最终的样品光谱。2.3 白蛋白含量的测定HA含量的测定方法为BCG法，采用市售的试剂盒进行测定。为了去除样品中乙醇对HA含量测定的影响， HA含量测定前通过离心浓缩仪将溶剂去除，然后去离子水复溶。含量测定的具体步骤如下。标准曲线的制作：① 将50 g/L的牛血清蛋白标准品用不同量的蒸馏水稀释，得到牛血清白蛋白含量在0-40 g/L范围内的标准品溶液；② 向96孔板中加入5 μL不同浓度含量值的标准品溶液，然后加入200 μL试剂并轻敲孔板使其混合，使每个板孔中不要留有气泡；③ 室温下静置5 min，利用酶标仪在630 nm处读取吸光度值；④ 根据得到的吸光度值和标准品的浓度值拟合用于测定HA含量的标准曲线。样品的测定：① 向96孔板中加入5 μL的待测样品，然后加入200 μL试剂并轻敲孔板使其混合均匀，并将板孔中气泡赶出；② 室温下静置5 min，利用酶标仪于630 nm处读取吸光度值；③ 根据得到的吸光度值代入拟合的标准曲线中，算得样品的HA含量值。2.4 数据的处理和模型的建立研究中利用MATLAB 2013b 数学软件以及基于该软件的PLS_Toolbox工具箱对光谱数据进行处理，建立酸沉过程中HA含量测定的PLSR定量分析模型。首先将8批样品中的5批样品作为校正集，剩余的3批作为验证集；然后对光谱进行预处理和变量选择，以提取光谱的有效信息，得到稳健性和准确性高的定量模型；最后对模型进行验证和评价。在模型的建立中以留一法作为交互验证方法。为得到最佳的模型结果，本研究中引入缩小浓度区间的策略。3 实验结果3.1 样品原始光谱本实验中平行进行了8个批次的酸沉过程，每个批次收集16个样品，共得到128个样品。图1为128个样品的原始近红外光谱图，。data:image/png;base64,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

前一段一个亲戚生病，医院要求用白蛋白，这东西很贵，是属于血液制品吗？

最近在做公司产品含药量的释放情况，释放液是加了牛血清白蛋白的PBS液，释放后产品从释放液中取出，注射用水洗净后晾干。产品上残留药品再用乙酸乙酯超声洗脱，用UV测定乙酸乙酯中的药品浓度。因最近新换了牛血清白蛋白，后来实验数据与前比似乎有点偏低，怀疑产品上牛血清白蛋白没洗干净，对UV吸收有影响？牛血清白蛋白对UV吸光度值有什么影响呢？哪里有供应质量稳定的牛血清白蛋白？

有谁知道如何用牛血清白蛋白配制空白血浆？文献报道如下：Reconstituted plasma was prepared by dissolving 0.8 g of NaCl, 0.02 g of NaCl, 0.02 g of KH2PO4, 0.11 g Na2HPO4 and 4 g of bovine albumin (Sigma, St. Louis, MO, USA) in 100 ml of water.但是0.8 g of NaCl, 0.02 g of NaCl肯定有一个是重复的，哪位大侠知道如何配制啊

根据《中国生物制品规程》，生物制品系指以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织作为起始材料，采用生物学工艺或分离纯化技术制备，并以生物学技术和分析技术控制中间产物和成品质量制成的生物活性制剂，包括菌苗，疫苗，毒素，类毒素，免疫血清，血液制品，免疫球蛋白，抗原，变态反应原，细胞因子，激素，酶，发酵产品，单克隆抗体，DNA重组产品，体外免疫诊断制品等。体现在批准文号上，为“国药准字S”开头，如乙肝疫苗、人血白蛋白等；医药行业所说的“生物制剂”其实是指“免疫生物制剂”，是指用微生物（细菌、立克次体、病毒等）及其代谢产物有效抗原成分、动物毒素、人或动物的血液或组织等加工而成作为预防、治疗、诊断相应传染病或其他有关疾病的生物制品。从定义上看，它比生物制品的范畴要窄一些；生化药品系指动物、植物和微生物等生物体中经分离提取、生物合成、生物-化学合成、DNA重组等生物技术获得的一类防病、治病的药物。主要包括：氨基酸、核苷、核苷酸及其衍生物、多肽、蛋白质、酶、辅酶、脂质及多糖类等生化物质。批准文号一般为“国药准字H”开头，如胰岛素、18种氨基酸。

[font=宋体][font=宋体]重组人血清白蛋白（[/font][font=Calibri]Recombinant Human Serum Albumin[/font][font=宋体]，简称[/font][font=Calibri]rHSA[/font][font=宋体]）是一种通过基因工程技术合成的白蛋白。其结构和功能与天然人血清白蛋白相似，因此可以作为血浆替代物，适用于临床治疗、细胞培养和生物技术领域的研究等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]人血清白蛋白是一种由[/font][font=Calibri]585[/font][font=宋体]个氨基酸组成的单链蛋白质，分子量为[/font][font=Calibri]66.5kDa[/font][font=宋体]，含有[/font][font=Calibri]17[/font][font=宋体]个二硫键和一个自由半胱氨酸。人血清白蛋白的结构包括三个结构上相似的功能域，而每个功能域又可分为包含两个相似的α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]螺旋结构的亚域，形成了一个心型分子。[/font][/font][b][font=宋体]人血清白蛋白在人体内负责许多细胞功能，如：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]维持胶体渗透压，调节体液平衡[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]结合和运输脂肪酸，胆红素和药物等各种物质[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]通过清除自由基和活性氧作为抗氧化剂[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]调节血液的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和缓冲能力[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5. [/font][font=宋体]调节免疫反应和炎症[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6. [/font][font=宋体]提供配体代谢修饰，使潜在的毒素无害等[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]人血清白蛋白的用途与重要性[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]人血清白蛋白在医学领域的应用广泛，涉及治疗多种疾病和病症。其用途包括但不限于：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]治疗多种疾病：血容量不足、休克、烧伤、手术失血、外伤、出血、体外循环、急性呼吸窘迫综合征等。[/font][font=宋体]支持肝功能：急性与慢性肝病的治疗中，人血清白蛋白有助于肝功能恢复。[/font][font=宋体]营养支持：为患者提供必要的营养。[/font][font=宋体]蛋白质与肽的半衰期延长：有助于药物研发中延长蛋白质和肽的活性时间。[/font][font=宋体]细胞培养中的应用：在细胞培养中，人血清白蛋白的作用包括限制细胞聚集、保护蛋白质免于降解、结合与运输代谢物以及增加疏水分子溶解度。它还能增强培养中细胞的生长和活力，提高重组蛋白的产量和质量。[/font][font=宋体]生物反应器中的用途：在生物反应器中，人血清白蛋白用于减轻物理冲击和剪切，保护细胞。[/font][font=宋体]全球需求增长：随着其在生物学领域的广泛应用，全球对人血清白蛋白的需求逐年增加。[/font][font=宋体]人血清白蛋白的供应挑战与重组人血清白蛋白的发展[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]由于人血清白蛋白的多种重要用途，其全球需求持续增长，但供应却面临挑战：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]供应有限：传统上，人血清白蛋白是通过人类血浆分馏生产的，受限于血浆供应。[/font][font=宋体]原材料的不一致性：这可能影响患者安全、治疗效果，并存在潜在的血液来源病原体污染风险。[/font][font=宋体][font=宋体]重组人血清白蛋白的兴起：鉴于上述挑战，科学家们努力开发重组人血清白蛋白（[/font][font=Calibri]Recombinant Human Serum Albumin, rHSA[/font][font=宋体]）。多个宿主生物（如大肠杆菌、酵母等）被尝试用于生产重组蛋白，最终基于毕赤酵母和水稻的表达系统成为主要选择。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service][b]重组蛋白表达纯化服务[/b][/url]，[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-productio][b]重组蛋白生产[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[em53] ，我最近常用石墨炉[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]（PE公司）测人血白蛋白中的铝，发现重现性很差。请教各位英雄，有没有什么好的解决办法？？急盼回复！谢谢！

Waters XBridge C18柱，进了几针白蛋白，柱效明显下降了，咋办？

T/AHFIA 105-2023 α-乳白蛋白

T/DYZL 006-2019 乳免疫蛋白粉 α-乳白蛋白

T/TDSTIA 026-2022 婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白的测定-凝胶渗透色谱法

最近在做用气相测白蛋白中有机溶剂的残留量.样品只在水中溶解,所以选择的溶剂为水,溶解后为白色胶体状. 采用80度平衡加热20分钟顶空进样.可是进样后发现白蛋白变性了,变成了固体.虽然有机溶剂有检出,但是很担心,溶剂会不会在蛋白变性的过程中封存在样品内啊,此方法可行吗.

请问用高效液相色谱法检测牛血清白蛋白标准品（BSA），用什么柱子比较好？

T/TDSTIA 002-2021 奶及奶制品中α-乳白蛋白的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法

中文摘要： 目的 将近红外光谱技术应用于人血白蛋白酸沉生产过程中，实现了生产过程中pH值的定量测定和过程监测。 方法 首先实验室条件下模拟6批酸沉过程，气相色谱法测定乙醇含量，pH计测定pH值；然后74个样品建立pH值测定的PLSR定量分析模型，在模型的建立中对样品集划分方法、光谱预处理方法以及样品的光谱进行了考察以优化模型。 结果 模型的Rc2=0.968，Rp2=0.956，RMSEC=0.0512，RMSECV=0.0875，RMSEP=0.0594。 结论 模型有较好的预测能力和重复性，可实现酸沉过程pH值的有效测定和终点的准确判断。关键词：近红外光谱分析技术；组分IV；化学计量学；酸沉淀；pH人血白蛋白（Human Albumin, HA）生产过程中，需要对组分IV（FIV）上清液进行酸沉，当pH值达到HA的等电点（大约4.60~4.70左右）时停止醋酸缓冲液的加入，此生产过程结束。人血白蛋白生产过程中对组分IV上清液进行酸沉，由于FIV上清乙醇的含量在40%左右，而乙醇对pH的影响较大，因此在生产中采用离线的方式，当临近终点时需要将反应液稀释至4倍，使乙醇含量在10%左右进行pH的测定。随着醋酸缓冲液的加入，如果同样将反应液稀释4倍则临近终点时测得的pH值有微小的差别，如果每次先测定乙醇的含量然后通过乙醇含量进行稀释得到乙醇含量10%的样品进行pH的测定则会使生产过程变得繁琐。在制药领域，NIRS作为一种重要的PAT工具，已成功用于药物的原辅料质量评价、关键过程的监测和控制、成品的快速放行和质量检测等各个环节，为保证产品质量、降低生产成本、革新生产过程发挥了重要的作用。本研究中利用NIRS结合化学计量学对HA生产过程中的FI+II+III上清液醇沉过程进行监测，以实现醇沉环节的过程控制。1 材料1.1 试剂FIV压滤后上清液（山东泰邦生物制品有限公司）；pH 4.0的醋酸缓冲液（山东泰邦生物制品有限公司）；无水乙醇（色谱纯，山东禹王实业有限公司化工分公司）；去离子水。1.2 仪器和软件Antaris II FT-NIR光谱仪（美国Thermo Fisherscientific公司）；内径4×50 mm的玻璃小管（Kimble Chase，德国）；低温反应仪（郑州长城科工贸有限公司）；气相色谱仪（美国Agilent Technologies公司）；pH计（德国Sartorius公司）；高速离心机（ThermoFisher Scientific公司）；MATLAB 2013b（美国Mathworks公司）；PLS_Toolbox工具箱（美国EigenvectorResearch公司）。2 方法2.1 酸沉过程实验室条件下模拟6批酸沉过程，除第6批外其它5批酸沉的步骤和第三章中的酸沉过程保持一致。第6批中在加酸13次后每次补加乙醇1 ml，共补加2次，其余条件和前5批均一致。每次取样1.2 ml并做离心处理，用于光谱的采集、乙醇含量的测定及pH值的测定。2.2 样品乙醇含量和pH值的测定气相色谱法测定样品中乙醇的含量。该部分实验在华熙福瑞达生物医药有限公司完成。根据测得的结果用去离子水配成乙醇含量为10%的样品，然后用pH计在室温条件下测定样品的pH值。2.3 样品光谱的采集 采用Antaris II FT-NIR光谱仪的透射模块采集样品的原始近红外光谱。光谱范围为10000-4000 cm-1，分辨率为8 cm-1，光程为4 mm，扫描次数32，背景参照为空气。所有样品采集3张原始光谱，以平均光谱作为最终的样品光谱。2.4 样品集的划分在近红外模型的建立中样品集的划分至关重要，对模型的准确性和有效性影响较大。校正集样品应包含所预测未知样品包含的所有化学成分并且化学值的浓度范围涵盖未知样品可能遇到的所有浓度范围，验证集样品应均匀分布于校正集样品中。因此需要科学合理的选择用于建模的样品，使模型既能满足应用的需要又能提高其准确性。目前可以用于校正集和验证集划分的方法较多，包括随机（Random Selection，RS）法、含量梯度法、Kennard-Stone（KS）法、SPXY（Sample Set PartitioningBased On Joint x-y Distances）法、Duplex法等8, 9]。本研究中对不同的样品集划分方法进行考察，以模型RMSEP值作为考察依据，优选出最佳的校正集和验证集，用于后面模型的建立。2.5 预处理方法的选择近红外原始光谱一般需要预处理以提取有效信息、消除无关信息和噪声的干扰。本研究中对正交信号校正（OSC）、一阶导数（First Derivative,FD）SG 15点平滑、二阶导数（SecondDerivative, SD）SG 15点平滑等预处理方法进行了考察，以模型RMSEP值作为考察依据，优选出最佳的预处理方法。2.6 样品光谱的考察由于样品最初是由生理盐水稀释配制而成，因此对样品光谱和生理盐水光谱进行了考察，寻找两者光谱间的异同，去除光谱中相似的光谱区间从而消除背景吸收对模型建立的影响。此外，光谱的吸光度值对光谱的质量以及模型的建立也将产生较大的影响。光谱较高的吸光度将导致检测器检测到的透过样品的光较少，所以此部分信号的信噪比较低；光谱较低的吸光度说明在此区间内样品吸收的近红外光较少，其包含的样品信息也较少。因此需要通过考察以选择最佳的光谱区间建立用于pH值测定的定量分析模型。2.7 模型的建立与评价 本研究中利用PLSR方法建立用于酸沉过程pH值测定的定量分析模型，Venetian blinds法作为校正集交互验证方法，并且对模型的预测能力和重复性进行评价。3 实验结果3.1 pH值测定结果图1和图2分别为气相色谱法测定样品乙醇含量时不含乙醇的空白样品气相色谱图和样品的气相色谱图。图中显示空白样品没有色谱峰出现，在样品色谱图中乙醇含量的峰出现在1.3 min左右，并且周围没有杂峰的干扰。酸沉过程pH值的测定结果，由于初始样品的pH值距离反应终点的pH值较远，在不影响终点判断的情况下第一至三批中0至2号样品、第四批中0至4号样品、第五六批中0至3号样品没有测定pH值，最终6个批次得到74个样品的pH值落在4.30-5.60范围内。[align=center][img=,437,186]data:image/png;base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAo8AAAEXCAYAAADMTa7IAAAAAXNSR0IArs4c6QAAAAlwSFlzAAAWJQAAFiUBSVIk8AAAABl0RVh0U29mdHdhcmUATWljcm9zb2Z0IE9mZmljZX/tNXEAADl+SURBVHhe7d0HfBRl/sfx72bTISQhlNAJXaWDKFhAVOxdAfUAz36C3TvhBEUR+2EvWP9nAawoNs4GIioKVkBBelEgEAIJ6cnuf55dlhMv4EwM45bP83rtyyM3O/P83jM7+92ZeWbi/VYTDQEEEEAAAQQQQAABGwLxNqZhEgQQQAABBBBAAAEEAgKERzYEBBBAAAEEEEAAAdsC+yw8mrPha9euVWVl5a7OxMXFKSsrS/Xq1bPdQSZEAAEEEEAAAQQQCB+BfRYefT6fHn/8ceXl5e2qtrS0VElJSZo8eXL4CNATBBBAAAEEEEAAAd

想通过HPLC建立牛血清白蛋白（BSA）的标准曲线，分别用了甲醇和水 1：1、乙腈和水 1：3， 两种流动相，但是出现奇怪的现象是两种情况出峰时间基本相同，都是在3min左右出的峰，峰高很低都是0.004左右，是不是流动相有问题，还是其他什么原因？ 用的柱子是waters 4.6*250mm ODS2请高人指点。

T/CSIQ 77001-2020 乳制品中ɑ-乳白蛋白含量的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法

荧光光谱研究阿司匹林键联金属卟啉与牛血清白蛋白的相互作用