人肾损伤分子

2013年08月23日 来源： 中国科学报 作者： 黄辛 中国科学报讯（记者黄辛）中科院上海药物研究所沈旭、胡立宏和蒋华良三个研究小组在最近的合作研究中，首次发现天然产物“牛蒡子苷元（ATG）”能够有效改善阿尔茨海默氏症（AD）小鼠的记忆损伤。该研究成果日前在线发表于《神经科学杂志》，并且已经申请了专利。 有关专家认为，该项研究不仅为抗AD创新药物的研发提供了新的研究策略，而且为基于“牛蒡子苷元”的抗AD药物的进一步开发提供了重要依据。 据了解，AD是一种以记忆力损伤为表现的进行性神经退行性病变，由β淀粉样蛋白（Ab）引起的神经退行性病变被认为是导致AD的关键因素。 随着老龄化社会的到来，我国AD的发病率与日俱增，然而迄今为止，市场依然缺乏有效的治疗AD的药物。 研究人员针对目前基于Ab为靶点的抗AD药物研发的困境，首次采用不同于长期以来的“酶活调节”模式的“蛋白表达通路调控”策略，建立了“一石二鸟”的抗AD药物筛选平台——既能抑制Ab产生又能增加Ab清除，发现了天然活性分子“牛蒡子苷元”。研究表明，给予ATG的AD模型小鼠出现明显的脑内蛋白沉淀斑减少，并且小鼠记忆力损伤得到明显恢复。 据了解，牛蒡子是牛蒡的果实，牛蒡为盛产于日本和我国多地区的一种蔬菜。2011年，沈旭和胡立宏研究小组曾合作研究发现“牛蒡子苷元”具有提高机体抗疲劳的功能。

每天都老化气相色谱柱，对柱子损伤大吗

大家搞化学的要多多注意呀，身体要紧(1)神经系统损伤： 如二硫化碳引起的神经炎； 甲醇中毒影响视神经等。代表化学试剂有酒精、苯、氯化乙醇、二氯乙烷、汽油、甲酸戊酯、醋酸戊酯、二甲苯、三氯乙烯、丁醇、松节油、煤油、丙酮、酚、三氯甲烷、异丙苯等。 因抑制神经系统的传导冲动功能，产生麻醉，神经系统障碍或引起神经炎等。 (2)肝损伤： 主要是氯化烃类。此类溶剂有四氯化碳、氯仿、三氯乙烯、四氯乙烷、苯及其衍生物等。 因损伤肝脏机能，引起恶心、呕吐、发烧、黄疸炎及中毒性肝炎； (3)对肾脏机能破坏 代表试剂有烃类之卤化物、苯及其衍生物、二元醇及其单醚类、四氯化碳、乙醇等。肾脏为毒物排泄器官，故最易中毒，且因血氧量减少，亦足以使肾脏受害，发生肾炎及肾病。 (4) 对造血系统破坏： 因破坏骨髓造成贫血现象。代表试剂有苯及其衍生物如甲苯、氯化苯、二元醇等。 (5) 对粘膜及皮肤刺激： 代表溶剂氯仿、三氯甲烷、醚、苯、醋酸甲酯、煤油、丙酮、甲醇、石油、氯酚、二氯乙烯、四氯化碳等。因刺激粘膜，使鼻粘膜出血，喉头发炎，嗅觉丧失或因皮肤敏感产生红肿、发痒、红斑及坏疽病等。

[b][color=#d40a00][size=4]我国手机用户已达到6亿左右，使用手机基本（绝大多数）都是靠近脑部接听，手机发射的高频信号（900MHn/1800MHz)应该是很强的,据我了解还没有人说，只要长期打手机就头疼脑热或脑部不适，虽然有些有关医院的医学研究者报道（包括国外的一些报道），说手机的电磁辐射对人的大脑有损伤，可是没有说服力。而手机生产厂商确对此事的看法，认为医学工作者需要拿出科学的依据（或根据)来说服大众。实际上人们就是生活在错综复杂的电磁波环境中，宇宙电磁波，高压（铁塔）电力输送线路，卫星飞机导航系统，广播电视发射塔，微波中继站，移动通讯基站，大型（冶炼）钢厂，大型电气变电（发电）站，城市电力、通讯密集网络等等。。。。。。，不知道人们生病进医院是否与上述因素有关。值得思考！！！[/size][/color][/b]

请教好心人，有谁测过植物细胞的DNA损伤，具体怎么操作？有没有人用过植物DNA损伤彗星检测试剂盒?样品怎么前处理，前处理前怎么保存？谢谢各位大虾了，望不吝赐教，小弟感激不尽！

毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]柱由两部分组成—管身和固定相。管身一般使用熔融二氧化硅或不锈钢作为基本材质；而固定相种类就有许多了。大部分的固定相是液体或胶状的高分子量，具有高热稳定性的聚合物，常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇，另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石。　　毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]柱的损伤和使用：　　正确的色谱柱使用对于色谱柱的寿命至关重要。损伤包括热损伤、氧损伤、污染、化学损伤和物理损伤。损伤后会影响色谱柱的柱效和分离度。　　热损伤是指过高的温度会导致固定相裂解，骨架断裂。措施是严格按照色谱柱的说明书，使用时不超过其较高温度。　　氧损伤是指在氧存在的条件下，破坏固定相的化学键，是不可逆的损伤。主要表现为基线高、基线噪声大、峰形变差、不出峰和保留时间漂移等。措施是保证载气的纯度、安装捕集阱和保证进样口密封。氧损伤有可能导致色谱柱彻底破坏，这时只能更换新色谱柱。　　污染损伤主要来源于被分析样品。措施是进行样品的前处理，将污染物提前处理掉；再者是更换耗材、隔垫、衬管和分流平板；还有就是进行多次的色谱柱老化或使用保护柱；使用保护柱也可以将样品污染物尽量隔离在色谱柱进口处。　　化学损伤是指色谱柱固定相受到化学物的损伤。被分析物中如含HCl,NH3,KOH等酸碱试剂，会造成色谱柱的损伤。在进行分析时，要尽量避免使用含CF3COOH，CF3CF2COOH，CH3CF2CF2COOH等试剂的样品。　　被分析样品尽量选用有机溶剂作为稀释剂，不选用水。水样分析时进样量要控制在0.5μL以下，进样口温度要高于250度；水样中不能含有酸、碱、盐等不挥发性物质。　　物理损伤指保存时毛细管过于紧绕导致折断，或者放置不当导致其它情况折断。毛细管的外部涂有聚酰胺层，可保护毛细管弹性，不易折断。

[b][font=微软雅黑]毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]柱[/font][/b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]由两部分组成[/font][font=微软雅黑]—管身和固定相。管身一般使用熔融二氧化硅或不锈钢作为基本材质；而固定相种类就有许多了。大部分的固定相是液体或胶状的高分子量，具有高热稳定性的聚合物，常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇，另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石。[/font][/font][font=微软雅黑] [/font][b][font=微软雅黑]毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]柱[/font][/b][font=微软雅黑]的损伤和使用：[/font][font=微软雅黑]　　正确的色谱柱使用对于色谱柱的寿命至关重要。损伤包括热损伤、氧损伤、污染、化学损伤和物理损伤。损伤后会影响色谱柱的柱效和分离度。[/font][font=微软雅黑] [/font][font=微软雅黑]　　热损伤是指过高的温度会导致固定相裂解，骨架断裂。措施是严格按照色谱柱的说明书，使用时不超过其较高温度。[/font][font=微软雅黑] [/font][font=微软雅黑]　　氧损伤是指在氧存在的条件下，破坏固定相的化学键，是不可逆的损伤。主要表现为基线高、基线噪声大、峰形变差、不出峰和保留时间漂移等。措施是保证载气的纯度、安装捕集阱和保证进样口密封。氧损伤有可能导致色谱柱彻底破坏，这时只能更换新色谱柱。[/font][font=微软雅黑] [/font][font=微软雅黑]　　污染损伤主要来源于被分析样品。措施是进行样品的前处理，将污染物提前处理掉；再者是更换耗材、隔垫、衬管和分流平板；还有就是进行多次的色谱柱老化或使用保护柱；使用保护柱也可以将样品污染物尽量隔离在色谱柱进口处。[/font][font=微软雅黑] [/font][font=微软雅黑][font=微软雅黑]　　化学损伤是指色谱柱固定相受到化学物的损伤。被分析物中如含[/font][font=微软雅黑]HCl,NH3,KOH等酸碱试剂，会造成色谱柱的损伤。在进行分析时，要尽量避免使用含CF3COOH，CF3CF2COOH，CH3CF2CF2COOH等试剂的样品。[/font][/font][font=微软雅黑] [/font][font=微软雅黑][font=微软雅黑]　　被分析样品尽量选用有机溶剂作为稀释剂，不选用水。水样分析时进样量要控制在[/font][font=微软雅黑]0.5μL以下，进样口温度要高于250度；水样中不能含有酸、碱、盐等不挥发性物质。[/font][/font][font=微软雅黑] [/font][font=微软雅黑]　　物理损伤指保存时毛细管过于紧绕导致折断，或者放置不当导致其它情况折断。毛细管的外部涂有聚酰胺层，可保护毛细管弹性，不易折断。[/font][font=Calibri] [/font]

核磁仪器对身体的损伤主要体现在什么方面？哪些措施手段可以减少或者消除损伤？谢谢

实验室液相一直用的喝的桶装水，对柱子和仪器有损伤吗

流动相里的盐浓度如果高的话，对柱子有损伤吗，如果有，一般是怎么损伤的呢？

什么是无损伤检测设备？无损伤检测设备是工业发展必不可少的有效工具，在一定程度上反映了一个国家的工业发展水平，其重要性已得到公认。我国在1978年11月成立了全国性的无损伤检测学术组织——中国机械工程学会无损伤检测分会。此外，冶金、电力、石油化工、船舶、宇航、核能等行业还成立了各自的无损伤检测学会或协会；部分省、自治区、直辖市和地级市成立了省(市)级、地市级无损伤检测学会或协会；东北、华东、西南等区域还各自成立了区域性的无损伤检测学会或协会。我国目前开设无损伤检测专业课程的高校有大连理工大学、西安工程大学、南昌航空大学等院校。在无损伤检测的基础理论研究和仪器设备开发方面，我国与世界先进国家之间仍有较大的差距，特别是在红外、声发射等高新技术检测设备方面更是如此。无损伤检测设备的应用特点1.不损坏试件材质、结构无损伤检测设备的最大特点就是能在不损坏试件材质、结构的前提下进行检测，所以实施无损伤检测后，产品的检查率可以达到100%。但是，并不是所有需要测试的项目和指标都能进行无损伤检测，无损伤检测技术也有自身的局限性。某些试验只能采用破坏性试验，因此，在目前无损伤检测还不能代替破坏性检测。也就是说，对一个工件、材料、机器设备的评价，必须把无损伤检测的结果与破坏性试验的结果互相对比和配合，才能作出准确的评定。2.正确选用实施无损伤检测的时机无损伤检测系统在无损伤检测时，必须根据无损伤检测的目的，正确选择无损伤检测实施的时机。 　　3.正确选用最适当的无损伤检测方法由于各种检测方法都具有一定的特点，为提高检测结果可靠性，应根据设备材质、制造方法、工作介质、使用条件和失效模式，预计可能产生的缺陷种类、形状、部位和取向，选择合适的无损伤检测方法。4.综合应用各种无损伤检测方法任何一种无损伤检测方法都不是万能的，每种方法都有自己的优点和缺点。应尽可能多用几种检测方法，互相取长补短，以保障承压设备安全运行。此外在无损伤检测的应用中，还应充分认识到，检测的目的不是片面追求过高要求的“高质量”，而是应在充分保证安全性和合适风险率的前提下，着重考虑其经济性。只有这样，无损伤检测在承压设备的应用才能达到预期目的。

大家如果处理一些比较脆弱的样品，比如高分子，有机物晶体，孔材料等物质的时候，或多或少的会让样品受到损伤。无论扫描还是透射，无论低电压还是低真空，都是不可避免的。那么大家能否就自己平日的操作经验来谈谈如何尽量降低这些损伤呢？不要拘束，只要有道理，就有奖励哦[em17]

用高光谱系统检测农产品的损伤位置、损伤程度，应该用什么设备？

砂轮切割砂轮片 切割速率损伤深度（微米）软粘接氧化铝磨料慢 10 快45硬粘接氧化铝磨料慢 20 快 900锯床 正常70+200精密切割切割片 转速 （转/分） 损伤深度（微米） 时间 （分）金属粘接金刚石100 10 20金属粘接CBN100 8 15 1000 50 150树脂粘接碳化硅1000 9 2 2000 7 1

台湾中央研究院物理所纳米核心设施的教程，2006年6月18日，Jin-Sheng Tsai,给出了两张PPT，指出了辐照损伤的来源：第一粒子碰撞，晶体格子原子的直接位移产生了点缺陷，这和电子的能量相关。第二能量辐射，非弹性散射（主要是热）破坏了聚合物或者碱土卤化物等材料的化学键。这是因为电子和电子相互作用会产生声子或热振动，从而破坏化学键。给出了三种方法最小化损伤：第一，在最高的工作电压下操作。第二，液氮冷台冷却第三，透射扫描模式下使用。我感到迷惑的是第一种，这和常识中认为的有差异，毕竟加速电压越高，电子能量越大，粒子碰撞造成的损伤也越大，这在超高压电子束辐照实验中得到了证实，对聚合物确实在80kV下出现类似于受热后的卷曲现象，而在200kV下更稳定的实验证据，但是如何理解，我还没有理论储备，不知道那位高手指点一二，给出几片文献，和相关理论。

我今天在老化柱子的时候用的是恒流模式，然后在老化的过程中进样口压力升不上去了，可能是隔垫密封的问题，然后压力和流量就慢慢的降为零了，因为正在老化温度也很高，我想问一下柱子一端接在进样口也相当于密封，另一端没有接检测器在柱箱，在这种温度较高的情况下柱流量停了对柱子的损伤大吗？非常感谢！

【序号】：4【作者】：任倩冯恒邹卫国【题名】：骨骼损伤修复的研究进展【期刊】：生命的化学. 【年、卷、期、起止页码】：2023,43(07)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=Eo9-C_M6tLm2ZGtg74x1n_J2tyL2FlPwepIbOq1oNAiHRcwWVRVwtuoRN6V8X4cjpU9LQ2cN5RLYS4LzI_mcuiO_IWyEfaNLbSHvdLBgBgUgGRkTRs93gvBo5c-NrQ0AqSOm58voX9yApX7gQE7grA==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

我现在想用TEM作镍钛合金的微观损伤实验（样品的参数：厚度为300µ m的多晶结构、冷扎薄片，其中镍钛合金中Ni占56.4%，Ti占43.6% (质量百分比)），微观损伤其实就是预先在NiTi片上作直径大约5微米的深度大约在600纳米的压痕。请教各位高手，TEM都能观测什么微观和亚微观的结构和损伤？第二个想请教大家的是，关于我这样品、针对可能出现的损伤，TEM的制样方法？我想看一下压痕的抛面。在请教一下老师们我怎么实现“并将20分悬赏积分分配给帮助过自己的VIP用户”，谢谢！非常期待各位的援助！万分感谢！

今天研发那边的同志过来做样，不知道他是怎么弄的，一下子把混样器管线弹出来了（PEEK管线）幸好是这种管线，要是不锈钢的还不知道是那坏呢？他把压力上限设到44MPa，我当时晕倒[em09509]，我的机器啊～～～～～那么对一般的LC ，高压进样（20MPa以上，有时是柱子的原因）对那些部件损伤比较大？[em09508]

[b]活体研究智能传感技术的演进（3）现状与未来作者：许越 [url=https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzA3OTE0NTI3OQ==&mid=2651820382&idx=2&sn=b59711014ab3bac4117cfe0f115a62da&chksm=844cc10eb33b48181a6e3cd18f734ae66f9059d781d54320e045b89677bd8bb7943c8bb0df6c&scene=21#wechat_redirect]点击查看作者自传[/url][b][color=#a5a5a5]许越，男，1967年生于北京。[/color][/b][/b][list][*][color=#a5a5a5][color=#888888]于[/color][color=#888888]1993[/color][color=#888888]年和[/color][color=#888888]2000[/color][color=#888888]年分别获得首都师范大学及美国麻省州立大学，植物生理学双硕士学位。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2001[/color][color=#888888]年在美国创建基于[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]技术的美国扬格公司，次年运用[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]服务于设立在美国北卡州立大学的美国航空航天局[/color]([color=#888888]NASA[/color])[color=#888888]空间植物学研究项目。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2005[/color][color=#888888]年成立旭月（北京）科技有限公司，在匡廷云院士、杨福愉院士和林克椿教授的帮助，以及各级政府的大力支持下，将非损伤微测技术引进中国大陆。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2014[/color][color=#888888]年带领旭月团队提出被誉为“第二个人类基因组计划”的“动态分离子组学（[/color][color=#888888]imOmics[/color][color=#888888]）”创新概念，同年成立旭月生物功能研究院。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888]2015[/color][color=#888888]年推出世界领先的“自动化非损伤微测系统”，并倡导建立中关村[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]产业联盟，开启以水安全、个体化精准医疗、粮食安全等民生应用为代表的[/color][color=#888888]NMT[/color][color=#888888]产业化进程。[/color][/color][*][color=#a5a5a5][color=#888888][color=#a5a5a5]截至2016年，已帮助国内400多个科研单位及实验室，利用NMT实现了科研水平的跨越式发展。[/color][/color][/color][/list]PC膜片钳与NMT非损伤微测技术虽然几乎诞生在同一历史时期，但是它们的发展和普及过程却大相径庭。[b]1） NMT的中国特色[/b]大家知道，各个国家对动物医学研究的投入通常要远远高于对其它研究领域的投入。下图是美国在医疗健康上面的投入是其它领域的5-10倍，在中国动物医学方面的投入大概是植物学研究的6倍左右（来自于个人通讯）。[align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2MvS7dCXdDYBfqrNMk6gpicChvuLDRS1569mM4NaA54xUEhEbZYcSY3w/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center]（来自于网络）[/align]因此，在绝大多数情况下，很多生命科学的新技术，新思路，新突破，都是来自于动物医学领域，然后传导到其它科研领域，正如在本文的第一部分[url=https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzA3OTE0NTI3OQ==&mid=2651820348&idx=1&sn=bd4fb10beab21b0499c233c9c6df16d5&chksm=844cc16cb33b487ae3226d4e2a4782738fe7a4203ab8a52d838ec30831ba79bf9f5d77cd0e81&scene=21#wechat_redirect]（1）愿望与挑战[/url]中所叙述的那样，膜片钳技术诞生于动物神经细胞单通道离子电流（烟碱乙酰胆碱受体）的研究，90年代进入中国后，也被首先应用于动物医学研究。然而，非损伤微测技术在生命研究领域的发展，却划出了一个自己较为独特的发展轨迹。首先，大家去问问用膜片钳搞植物研究的科研人员，他们有多么羡慕用膜片钳进行动物医学研究的同行们，因为植物有细胞壁，研究植物的人必须要先用各种消化酶去除细胞壁后，才可以形成膜片钳技术必须的玻璃电极与细胞膜之间的高阻封接。[align=left]那么，大家可以想象，不用去除细胞壁就可以研究植物与外界环境的离子/分子交换信息，这对于搞植物研究的人该有多么大的吸引力呀！姑且不说，细胞壁作为植物细胞完整结构的一部分，在功能上更是不可或缺的重要环节，将其人为去除后，其结果的理论价值必然大打折扣外，单就技术上给植物学家们带来的简单、便捷和快速，就让大家兴奋不已。[/align] [img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug27IT7uZGkSnBKveX2hqCR3kByLLiaCiciaGpamSXicEKMicmibyic9tTbVLPlg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center]（种康在《Cell》利用NMT发表水稻植物领域文章）[/align]因此，在国际上自从NMT诞生之日起，植物研究学者们对它的追求从来没有逊色于动物医学研究的同行们。而中国自身为农业国，在植物领域的研究底子好，投入又大。可能也加之旭月公司创始人自身的植物研究出身的背景，使得非损伤微测技术在中国的发展一路走来，在植物领域的发展要远远胜于在动物医学的发展，数据显示，在中国科学家至今发表的200多篇NMT应用已发表文献里，80%以上是来自植物领域的研究（数据来自“中关村NMT产业联盟”http：//nmtia.org）。[b]2） 科研应用现状[/b]膜片钳技术在这二十几年的发展使其已经深深地融入了全世界生命科研活动的各个方面。在中国也不例外，这些年我国科研人员利用该技术取得了丰硕的科研成果，尤其是植物研究领域，以武维华、种康、刘春明等为代表的科研人员利用膜片钳技术在植物生理生化方面取得了系列世界级的成果。我国的动物医学研究方面，以周专、徐涛、王世强、王立伟、陈丽新、祁金顺等科学家为代表在诸多领域也已处于世界科技前沿。但就我个人在国外多年的所见所闻来看，我国在动物医学方面没有比现在发展的更快更好一些的一个重要原因是中国这方面的人才流失比较严重。我在哈佛、耶鲁等大学见到很多国内培养的膜片钳高手。即：国内培养出来后，在就要出成果的时候，却来到国外为国外的课题所用了。想必周专老师他们对这点肯定有更深更多的感受吧。非损伤微测技术在中国的普及应用，相比膜片钳技术有两个先天不足。一是进入中国要晚近10年的时间；二是没有膜片钳那样一开始便伴随着诺贝尔奖的耀眼光环。但是，非损伤微测技术也有其自身的优势，其一是进入中国适逢国家对基础科研的投入要远远大于90年代膜片钳进入时期；二是有匡廷云、杨福愉、林克椿、叶鑫生、高荣孚、尹伟伦、赵微平、邱泽生等老一辈科学家的鼎力支持。[align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2wjQ6aFhplNcl23wiarAqicxyxVibbOMIfrP4Y6ftiaDAchOn8awoaOJ9Tg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center]（来源于网络）[/align]所以，尽管非损伤微测技术进入中国时间不长，但是发展十分迅速，不但以印丽萍、陈少良、沈应柏、许卫峰、罗志斌等中青年科学家，利用非损伤微测技术快速将自身科研提升至世界水平，刚才所列的武维华、王立伟等国内膜片钳技术专家也已利用NMT，并结合膜片钳技术做出了世界一流的科研成果。[b]3） 技术现状[/b]全自动膜片钳虽然已于近年面市，但是传统的膜片钳技术仍然在生理、相关基因功能验证等基础研究领域，发挥着不可替代的作用。而全自动膜片钳虽然提高了数据的单位产出量，但似乎更多地被应用于药物研发、药效评价等应用领域，其对科研基础理论的贡献和潜力还有待于观察。[align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2aSo6YYWVabuqzRV3dKticXGNNbib3A4WMZAkVqhMibPWm0tAFjWHPPJ3Q/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center]（来源于旭月公司网站：http://xuyue.net）[/align]智能自动化的NMT传感器制备装置，已经于2016年在中国市场有售，标志着非损伤微测技术开启了追赶膜片钳自动化的步伐。尽管数据的单位时间产出量，即：高通量并不是非损伤微测技术的优势，但是，鉴于该技术的长处之一就在于它的实时测量，即在正常生理时间尺度内，揭示生物的活体生理功能。相反，将非损伤微测技术与膜片钳技术相比，比较容易一叶障目的误区就是把非损伤微测技术的应用限制在了只是生物膜的层面。其所谓‘成也萧何，败也萧何！’，膜片钳的高阻封接成就了它的单通道测量，但同时也制约了它的测量材料的灵活性。而反观非损伤微测技术，因为不接触被测材料，所以在材料的选择上就有了极大的自由度。特别是近年的科学发现表明，如我在里所述，人类的各种疾病的答案，不在基因层面（半个多世纪寻找癌症基因努力的失败就是例证），甚至不在细胞层面，这就给组织层面的研究打开了广阔的新天地。当我们环顾实验室四周，能够帮助我们研究活体组织的技术凤毛麟角，而像非损伤微测技术这样完全近乎无损的技术更是难觅。加之进一步的研究表明，比如癌症的发生发展是和其组织微环境的改变密切相关，那么，还有什么技术比非损伤微测技术，这一能够在活体状况下检测微环境中各种离子分子活性的技术更合适的呢！山西医科大学的祁金顺教授，利用非损伤微测技术建立起的脑切片组织生理检测试验体系，就是这方面的一个很好的例证（具体描述请浏览： http://e.vhall.com/133934064或http://xbi.org/index.php?option=com_content&view=article&id=516&Itemid=907&lang=cn）。[b]4） 未来趋势[/b]每个技术都有它自己的特色，很难完全取代对方。因此，利用各自优势，膜片钳与非损伤微测技术配合使用将是一个趋势。这里已经有一些尝试，大家可以参考一下相关文献（http://xbi.org）。下面我就几个非损伤微测技术可以弥补膜片钳技术局限的地方跟大家分享一下，以便大家更好地结合两者使用。[align=center][img=,397,211]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug2x4Tml1DWpOIDDI3WicJ2o6tvFQYUiaJqfCwnoGdkw1nT5D3wSFghk3Dg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center](来源于美国扬格公司网站：http://youngerusa.com/)[/align]（a）‘零’电流问题如上图所示，当有等电荷的两种离子进出同一片细胞膜的时候，膜片钳技术将检测不到电流。而此刻科研人员可以利用非损伤微测技术的多传感器同时测量优势进行研究。（b）其它离子运输载体和方式的研究我们知道除了离子通道，生物细胞还有其它多种离子转运方式，它们与离子通道一起，共同担负着维持细胞和乃至整个生物体活性的各种生理功能。正如在[url=https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzA3OTE0NTI3OQ==&mid=2651820382&idx=1&sn=156a5c79f5aba52283f147a9d4cb1e7f&chksm=844cc10eb33b48188af3c5762db8b3b21a30d311c3bbae3f85ad8fd71abbd91872704d321d35&scene=21#wechat_redirect]（2）时间与空间[/url]中所说，将PC与NMT这两个跨越不同时间和空间的技术相结合使用，对于我们更加全面的了解生物现象的本质，有着不可替代的作用。（c）分子转运的研究毫无疑问，NMT非损伤微测技术在O2，H2O2，葡萄糖，乙酰胆碱等与生命活动密切相关的小分子，大分子跨膜运输方面，将极大补充PC技术在这方面的不足。（d）物理机械损伤尽管‘高阻封接’成就了PC的单通道测量，但是其巨大的机械损伤，被证明不但是的确存在的，而且的确会产生错误的结果。那么，有另外一个相对独立的技术对PC进行验证，对科学研究的准确性无疑是个巨大利好。[align=left]广州暨南大学的王立伟，陈丽新教授，利用NMT与PC结合，发现并推翻了PC过去错误的结论的故事很好地诠释了这一点。（具体描述请浏览：http://e.vhall.com/133934064[/align][align=left]或 http://xbi.org/index.php?option=com_content&view=article&id=516&Itemid=907&lang=cn）[/align][b]5）结束语[/b] [img=,280,231]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDEbuf6P7NZBiavESu2yf2ug26453BRepj8GYQsp578CpkibGszw4qrzbIkhsyxAH8vJxhAIACpICQjg/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][align=center][img]data:image/gif base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAAEAAAABCAYAAAAfFcSJAAAADUlEQVQImWNgYGBgAAAABQABh6FO1AAAAABJRU5ErkJggg==[/img][/align][align=center]（来源于网络）[/align]在一次社会名流的聚会上，当有人用略带轻蔑的口吻对发现美洲新大陆的哥伦布说到：“你发现美洲没有什么了不起的，只不过是你的运气比别人好些罢了！”。哥伦布没有马上说什么，而是让人拿来一个鸡蛋向在场的所有人发出挑战，看谁能够把这个鸡蛋立在桌子上。读者们中很多人知道这个故事的结局，就是在这些人费了九牛二虎之力失败之后，哥伦布将鸡蛋的一端击碎后立在了桌子上。Neher和Sakmann发明膜片钳“不过”是在前人电生理的基础上，略微地在玻璃电极与细胞膜接触时施加了一点点负压形成‘高阻封接’而已。同样NMT非损伤微测技术的诞生，Jaffe和Newman他们“也无非” 就是让离子/分子传感器动了起来，进行‘两点测量’而已！但就是这一看似细微的‘高阻封接’，这一看似平常的‘两点测量’，让科学家能够检测到pA（10[sup]-12[/sup]）级的微弱单离子通道电流，让科学家能够检测到单个细胞离子（比如Ca[sup]2+[/sup]）分子（比如O[sub]2[/sub]）的10[sup]-15[/sup]级进出流速。他们就是科学界的哥伦布，帮助科学家们发现了科学世界的新大陆！同学们，老师们，朋友们，现在非损伤微测技术已经来到了你的身边，中国人在一些领域已经实现了弯道超车，能否先于他人把这个‘蛋’矗立在你们各自的研究领域，即是摆在你们面前的挑战，大家准备好了吗？！[b]参考文献[/b][list][*]美国对不同研究领域的投入http://www.bu.edu/research/articles/funding-for-scientific-research/[/list][list][*]Verkhratsky, Alexei & Parpura, Vladimir. (2014). History of Electrophysiology and the Patch Clamp. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.). 1183. 1-19. 10.1007/978-1-4939-1096-0_1.[/list][list][*]Uncoupling of K+ and Cl- transport across the cell membrane in the process of regulatory volume decrease. Linjie Yang, Linyan Zhu, Yue Xu, Haifeng Zhang, Wencai Ye, Jianwen Mao, Lixin Chen, Liwei Wang. Biochemical pharmacology 84 (3), 292-302[/list][list][*]非损伤微测技术实时检测海马脑片跨膜钙离子流。《生理学报》2017年 第4期 | 李甜 原丽 张军 焦娟娟 祁金顺[*]文中相关文献可以到旭月研究院网站下载： http://xbi.org/index.php?option=com_rsfiles&view=rsfiles&Itemid=304&lang=cn[/list][align=center][img]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDF6tmTJTMX4uic43l9icahVSUTxSOVWpIzWuU9op0axQeUZlOd197ib0J6kUyJDXf9MJrWibHg0hicvMCw/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align][align=center][/align][align=center][b]旭月版权所有,转载注明出处.[/b][/align][align=center][img=,,130]http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_jpg/iaFShJzBuGDFvv5AgpUstNSuO10Yztkuqee9ozBmgmqkRl5Df8F3bvfhr0YroolbwMI0ScicdJDTJyTPYXIc1qvw/640?wx_fmt=jpeg&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align]

没有配冷台的sem直接观察经液氮冷冻的材料对电镜是否有损伤，损伤有多大？谢谢

好莱坞电影中的终结者，能将坚硬的身体变成液态而迅速修复损伤，而事实上，材料的机械性质由电子结构来决定，要从根本上改变很难。但来自德国和中国一个联合研究小组现已为人们带来了这种材料的雏形。据美国物理学家组织网6月2日报道，德国汉堡大学、赫尔姆霍茨联合会盖斯特赫斯勒中心和中国沈阳的金属研究院共同开发出一种神奇的纳米材料，只需按一下按钮，几秒钟内就能改变自身的强度，从坚硬易碎到柔软而有韧性，整个质变过程由电信号来控制。相关研究发表在最新一期《科学》杂志上。　　煮蛋的软硬可以由加热时间来决定，但某些事情一旦确定就不可改变，比如煮硬的蛋无法变软。在制造金属与合金的时候也要面临相似的问题，材料的属性一经设定，整个生产中就无法改变。因此工程师在设计机械属性时，常常面临着鱼和熊掌不可兼得的困境，硬度越大，脆性也就越大，抗损伤的能力也就越差。

请问各位大侠，电镜放大倍数与辐照损伤有联系吗？放大倍数越大，损伤越大吗？

【求助各位】我做了TEM测试，但是不知道图中有很多白色圆点是什么？测试的老师说是由于电子轰击导致样品脱水所致，这种属于损伤吗？附件里是我的图，请各位给予指导不胜感激！

喝酒多损伤脾胃，要注意化痰湿。可以在喝酒的同时，喝一点米汤水、白粥、小米粥等，也可以放一点生姜、陈皮来煲汤以解酒。

【序号】：2【作者】： 褚万立郝岱峰【题名】：美国国家压疮咨询委员会2016年压力性损伤的定义和分期解读【期刊】：中华损伤与修复杂志(电子版). 【年、卷、期、起止页码】：2018,13(01)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2018&filename=ZHSX201801014&uniplatform=NZKPT&v=zSRu_9E_iFcINR5uR6emDMpcaK5rbJgaLPxBdAAZXdZ_3hD2hp87fNwU9fp3w3Ez

乳腺癌是世界范围内女性最常见的致死性恶性肿瘤，据统计，2020年女性乳腺癌已超越肺癌成为全球癌症发病率最高的癌种[1-2]。其中三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）是雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）和人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2，HER-2）均呈阴性表达的乳腺癌亚型，占所有乳腺癌的15%～20%[3]，具有侵袭力强、转移率高、术后复发率高、预后差的特点[4]。由于TNBC内分泌治疗的不确定性及靶向治疗的不应答性，导致临床上的治疗效果不理想[5-6]。因此，寻找有效抑制TNBC增殖转移的药物、降低患者的病死率一直是乳腺癌基础研究的一个重要方向[7-8]。 石蒜碱是石蒜Lycoris radiata (L'Hér.) Herb.、文殊兰Crinum asiaticum L. var. sinicum (Roxb. et Herb.) Baker、朱顶红Hippeastrum rutilum (Ker.-Gawl.) Herb.等石蒜属植物鳞茎中含量较高的异喹啉类生物碱，具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗炎镇痛、保肝等药理活性[9-10]，近年来石蒜碱的抗肿瘤作用受到众多研究者的关注。有文献报道石蒜碱对人乳腺癌MCF-7细胞[11]、人宫颈癌Hela细胞[12-13]、人肝癌HepG-2细胞[13-16]、人胃癌SGC-7901细胞[17]、人结肠腺癌LoVo细胞[18-19]具有显著的抑制作用，但对其作用机制的研究仍然处于初始阶段。本研究以人乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究对象，主要通过体外实验从细胞水平和分子水平探讨石蒜碱对MDA-MB-231细胞的体外抑制活性及其通过线粒体氧化损伤诱导肿瘤细胞自噬及凋亡的机制，为今后石蒜碱抗肿瘤新药的深入研发和临床实践提供理论基础和实验参考。 1 材料 1.1 细胞株 MDA-MB-231细胞由国家教育部抗肿瘤天然药物工程技术研究中心提供。 1.2 药品与试剂 石蒜碱（批号34296，质量分数98%）购自阿拉丁试剂有限公司；胎牛血清（批号0201021）购自浙江杭天生物科技公司；RPMI 1640细胞培养基（批号AD123707271）购自美国HyClone公司；二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO，批号20200901）购自天津中和盛泰化工有限公司；Hoechst 33258染液（批号C1011）、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（批号P0015）、吉姆萨染液（批号C0131）、CCK-8试剂盒（批号C0043）、活性氧（reactive oxygen species，ROS）检测试剂盒（批号S0033S）、PMSF（批号ST505）、HRP标记的山羊抗大鼠IgG二抗（批号A0192）、Western blotting及IP细胞裂解液（批号072318180723）、30% Acr-Bis（批号093018181017）购自碧云天生物技术研究所；碘化丙啶（propidium iodide，PI）染液（批号R20285）、Rhodamine 123（批号R8004）购自美国Sigma公司；台盼蓝（批号72-52-1）购自美国默克公司；Reagent A染液（批号5000113）购自北京诺博莱德科技有限公司；聚山梨酯20（批号20190207）购自美国Biotopped公司；Tris（批号181127）购自美国Amresco公司；兔抗半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein-asparate protease-3，Caspase-3）抗体（批号WL02512）、兔抗B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）抗体（批号WL01506）、兔抗Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）抗体（批号WL02385）、兔抗细胞色素C（cytochrome-C，Cyt-C）抗体（批号WL04963）、兔抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗体（批号WL01114）购自沈阳万类生物科技有限公司；兔抗线粒体内膜转位酶（translocase of inner membrane，TIM）抗体（批号PSI-RF16109）、兔抗线粒体外膜转位酶（translocase of outer membrane，TOM）抗体（批号PSI57577）、兔抗E3泛素连接酶（E3 ubiquitin protein ligase，PARKIN）抗体（批号PSI50248）、兔抗PTEN诱导的激酶1（PTEN induced putative kinase 1，PINK1）抗体（批号PSI7859）、兔抗微管相关蛋白轻链3（microtubule-associated protein light chain 3，LC3-B）抗体（批号BS79705）、兔抗p62抗体（批号p196-269）购自艾美捷科技有限公司。 1.3 仪器 ECO-170P-230型细胞培养箱、Model 680型酶标仪（美国NBS公司）；Adventurer型万分之一电子天平（美国OHAUS公司）；EPICS-XL型流式细胞仪、AllegraTM 64R型低温高速离心机（美国Beckman-Coulter公司）；CKX-41-32型倒置显微镜（日本Olympus公司）；荧光显微镜、TCS-SP2激光共聚焦扫描显微镜（德国Leica公司）；680型全自动酶标仪（美国Bio-Rad公司）；P型微量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url]（芬兰百得公司）；标准型PB-10 pH计（德国Sartorius公司）；GIS-2019型Tannon凝胶成像系统（天能科技有限公司）；DYY-7C型电泳仪、M344039型垂直电泳转印槽（北京六一仪器厂）。 2 方法 2.1 细胞培养 MDA-MB-231细胞复苏后接种于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中，置于5% CO2、37 ℃恒温培养箱中培养，待细胞长势良好时进行传代，取对数生长期的细胞进行实验。 2.2 CCK-8法检测细胞增殖活性 MDA-MB-231细胞以2×103个/孔接种于96孔板中，细胞培养24 h后，给药组每孔加入不同浓度（2、4、8、16、32 μmol/L）的石蒜碱100 μL，对照组加入100 μL细胞培养基，每组均设置6个平行孔，处理48 h后，每孔加入10 μL CCK-8试剂，继续培养4 h。采用酶标仪检测490 nm处的吸光度（A）值，计算各组细胞的增殖抑制率与石蒜碱对MDA-MB-231细胞的半数抑制浓度（half inhibitory concentration，IC50）。 2.3 倒置显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦扫描显微镜观察细胞形态变化 MDA-MB-231细胞以3×103个/孔分别接种于2块6孔板中，细胞培养24 h后，根据石蒜碱对MDA-MB-231细胞的IC50设定3个给药剂量，分别以3、6、12 μmol/L的给药浓度每孔加入石蒜碱1 mL，对照组加入1 mL细胞培养基，继续处理48 h。取1块板用倒置显微镜观察并拍照后，每孔加入1 mL多聚甲醛固定1 h，冲洗后加入200 μL Hoechst 33258染液，37 ℃孵育30 min后，用荧光显微镜观察并拍照；取另1块板收集各组细胞，用预冷的PBS重悬细胞并弃去上清液，加入Annexin V-FITC于37 ℃避光孵育15 min，冲洗后加入PI染液于4 ℃避光孵育15 min后，用激光共聚焦扫描显微镜观察并拍照。 2.4 集落实验检测细胞克隆能力 MDA-MB-231细胞以1×103个/孔接种于6孔板中，细胞培养24 h后，按“2.3”项下方法对细胞进行分组和给药，连续培养7 d后弃去培养基。PBS洗涤后用甲醇固定10 min，冲洗后加入吉姆萨染液染色后，用倒置显微镜观察细胞集落形成率并拍照。 2.5 划痕实验检测细胞迁移能力 MDA-MB-231细胞以1×105个/孔接种于6孔板中，细胞培养24 h，细胞融合至70%～80%后，用200 μL[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url]倚靠直尺，枪头垂直于每孔底部竖直划痕。PBS冲洗后，按“2.3”项下方法对细胞进行分组和给药，培养48 h后，用倒置显微镜观察细胞的迁移情况并拍照记录，比较各组间的划痕宽度，使用Image J软件测量并计算划痕愈合率。 2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡率 按“2.3”项下方法对细胞进行分组和给药，培养48 h后，收集各组细胞，加入70%冷乙醇2 mL于4 ℃固定24 h后离心。弃去上清液，PBS冲洗后，加入800 μL PI染液，4 ℃避光孵育30 min，经尼龙网滤过后，采用流式细胞仪进行检测，激发波长为488 nm。 2.7 流式细胞仪检测ROS水平 按“2.3”项下方法对细胞进行分组和给药，培养48 h，收集各组细胞，PBS洗涤后加入5 μmol/L DCFH-DA染液0.2 mL，37 ℃避光孵育20 min，经尼龙网滤过后，采用流式细胞仪进行检测。 2.8 流式细胞仪检测线粒体膜电位 按“2.3”项下方法对细胞进行分组和给药，培养48 h后，收集各组细胞，PBS洗涤后，避光加入Rhodamine 123染料，避光孵育30 min后离心弃去上清液，用PBS洗涤并混匀细胞，经尼龙网滤过后，采用流式细胞仪进行检测。 2.9 激光共聚焦扫描显微镜检测线粒体膜通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore，MPTP）活性 按“2.3”项下方法对细胞进行分组和给药，培养48 h后，收集各组细胞，加入37 ℃预热的Reagent A染液500 μL，离心后弃去上清液。37 ℃避光加入染色工作液，混匀后孵育20 min，离心去除上清液，将细胞吹打混匀后，经尼龙网滤过，采用激光扫描共聚焦显微镜检测并进行拍照。 2.10 Western blotting检测线粒体自噬相关蛋白TIM、TOM、PARKIN、PINK1、LC3-B、p62和凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2、Cyt-C表达 按“2.3”项下方法对细胞进行分组和给药，培养48 h后，收集各组细胞，加入含PMSF的细胞裂解液，冰上裂解30 min后将细胞加入EP管中，离心15 min。取上清液，煮沸使蛋白变性，采用BCA试剂盒定量蛋白浓度。采用SDS-PAGE凝胶电泳，转至PVDF膜，5%脱脂奶粉封闭2 h后，加入一抗，4 ℃孵育过夜。TBST洗膜后加入二抗，37 ℃孵化2 h，洗膜后加入化学发光试剂，采用凝胶成像系统拍照并进行分析。 2.11 统计学分析 用SPSS 21.0软件进行统计分析，数据以表示，多样本均数比较采用One-way ANOVA分析，通过Graphpad Prism 8软件绘图。 3 结果 3.1 石蒜碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响 如图1所示，石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有显著的增殖抑制作用（P＜0.01），且呈浓度相关性。石蒜碱对MDA-MB-231细胞的IC50为6.21 μmol/L，并参考IC50值设定后续石蒜碱给药浓度分别为3、6、12 μmol/L。 3.2 石蒜碱对MDA-MB-231细胞形态的影响 采用倒置显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察石蒜碱对MDA-MB-231细胞形态的影响，如图2所示，与对照组比较，石蒜碱给药后，随着给药浓度增加，细胞生长逐渐变稀疏，细胞膜破裂现象更加明显，细胞间轮廓更加模糊，细胞核固缩形成凋亡小体，发出较强荧光。 3.3石蒜碱对MDA-MB-231细胞克隆、迁移的影响 集落实验结果表明，石蒜碱可以抑制MDA-MB-231细胞的克隆能力（图3-A），且随着浓度的增加细胞集落数量逐渐减少，且呈浓度相关性。划痕实验结果显示，石蒜碱可以显著抑制MDA-MB-231细胞的迁移能力（P＜0.01，图3-B、C），呈剂量相关性。 3.4 石蒜碱对MDA-MB-231细胞凋亡率、ROS水平的影响 如图4-A、B所示，经流式细胞仪PI单染法检测出现明显的凋亡峰，表明DNA的合成受到抑制，且随着给药浓度增加，凋亡峰越明显，凋亡率也呈上升趋势，与对照组比较有显著性差异（P＜0.01），且呈浓度相关性。如图4-C、D所示，随着给药浓度增加，细胞内ROS水平逐渐升高，具有显著性差异（P＜0.01），且呈浓度相关性。 3.5 石蒜碱对MDA-MB-231细胞线粒体膜电位和MPTP的影响 如图5-A、B所示，经流式细胞仪检测，随着石蒜碱给药浓度增加，细胞内线粒体膜阳性表达率逐渐降低，具有显著性差异（P＜0.01），且呈浓度相关性。如图5-C、D所示，应用激光扫描共聚焦显微镜结合AM染色技术对不同浓度的石蒜碱作用48 h后的MDA-MB-23细胞进行检测，激光扫描共聚焦显微镜扫描得到的荧光象素强度反映出细胞膜通透性的改变，随着给药浓度增加，细胞内线粒体膜通透性逐渐升高，具有显著性差异（P＜0.01），且呈浓度相关性。 3.6 石蒜碱对MDA-MB-231线粒体自噬和凋亡相关蛋白表达的影响 应用凝胶成像系统分析MDA-MB-231细胞中线粒体自噬和凋亡相关蛋白表达的情况。如图6所示，随着石蒜碱浓度增加，细胞自噬相关蛋白TIM、TOM和p62蛋白表达量逐渐降低，PARKIN、PINK1和LC3-B蛋白表达量逐渐升高，均具有显著性差异（P＜0.01）。如图7所示，随着石蒜碱浓度增加，细胞凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达量逐渐降低，Bax、Caspase-3和Cyt-C蛋白表达量逐渐升高，均具有显著性差异（P＜0.01）。 4 讨论 乳腺癌已成为全球最常见的恶性肿瘤，与乳腺癌的其他分子亚型相比，TNBC最具侵袭性和高度异质性[20-22]，使其在临床上难以得到有效治疗。因此如何有效抑制TNBC侵袭、增殖和转移是目前亟待解决的问题。近年来，有研究表明中药在抗肿瘤方面具有显著的优势[23-25]。石蒜碱是异喹啉类生物碱，广泛分布于石蒜属植物鳞茎中，具有较强的抗肿瘤活性[26-27]。基于石蒜碱的抗肿瘤作用，结合课题组前期研究中TNBC细胞活性筛选，发现石蒜碱对MDA-MB-231细胞较为敏感，故选择MDA-MB-231细胞作为研究对象，本研究结果发现石蒜碱对MDA-MB-231细胞的增殖和迁移具有显著抑制作用，且呈浓度相关性。 ROS水平升高和线粒体功能障碍是诱导肿瘤细胞自噬和凋亡的重要途径[28]。研究发现，过量ROS的产生会诱发肿瘤细胞的损伤、自噬及凋亡并降低细胞的多药耐药性[29]。此外，肿瘤细胞对外源性ROS比正常细胞更敏感且ROS具有一定的细胞毒性。因此，促进ROS水平升高的药物可表现出一定的抗癌活性。有研究表明，线粒体功能障碍与多种恶性肿瘤的发生及ROS的过量产生密切相关[30]。本研究通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测结果表明，石蒜碱可以显著提高MDA-MB-231细胞凋亡率和ROS水平，并使线粒体膜电位下降，MPTP开放。这表明石蒜碱诱导细胞自噬和凋亡作用可能与线粒体的氧化损伤有关。 TOM及TIM是线粒体膜蛋白，当线粒体自噬增强时，其细胞内表达水平下降。研究表明线粒体损伤会使线粒体膜电位降低，导致PINK1在线粒体外膜上表达，从而使PINK1-PARKIN依赖性线粒体自噬反应被激活[31]。LC3-B是自噬体形成的特异性标志物，其含量与自噬泡数量成正比，因此被广泛用于监测细胞自噬。p62作为自噬降解的产物，自噬增强，p62水平会下降。p62还可与自噬体膜上的LC3-B蛋白及泛素化的蛋白形成复合物，在自噬溶酶体内完成降解[32]。ROS的过度累积，会触发MPTP开放，导致线粒体膜电位下降，引起Cyt-C从线粒体释放并进入细胞质中，进而激发Caspase的级联反应并启动细胞线粒体凋亡[33]。Bcl-2为抗凋亡蛋白，Bax为促凋亡蛋白，当接收到凋亡刺激信号后可转位至线粒体膜上，Bcl-2和Bax可形成二聚体或多聚体，从而增加细胞线粒体膜的通透性，进一步激活Caspase级联反应，Caspase-3可通过抑制凋亡抑制物，从而破坏细胞结构使蛋白丧失功能[34]。本研究通过Western blotting检测自噬相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达，结果显示石蒜碱能够上调PARKIN、PINK1、LC3-B、Caspase-3、Bax和Cyt-C蛋白表达，下调TIM、TOM、p62和Bcl-2蛋白表达，表明石蒜碱可通过线粒体的氧化损伤介导MDA-MB-231细胞的自噬及凋亡。 综上，石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用，并可通过调控线粒体氧化损伤介导MDA-MB-231细胞的自噬及凋亡。本研究为石蒜碱抗肿瘤新药的深入研发和临床实践提供理论基础。

今天翻一篇文献，里面提到Hobbs, L.W.对于TEM里面的辐照损伤的两篇文献。Hobbs, L.W., Radiation effects in anylysis by TEM. Quantitative Electron Microscopy (Chapman, J.N. and Craven, A.J.,eds)399-445(Scottish Universities Summer School in Physics, Edinburgh 1984)Hobbs, L.W., Electron-beam sensitivity in inorganic specimens,Ultramicroscopy 23(1987)339-344没办法看这两篇文献，不过我记起以前ustb曾经说过辐照损伤分为两种，对有机物的辐照损伤和对沸石分子筛的那种是不同的，前者可以采用低电压即可有效避免，而后者则反而需要采取高加速电压，这其中的分别究竟何在呢？

超声波仪清洗器皿时会不会损伤器皿？