人红细胞生成素受体

抗体或激素等重组蛋白在生物制药市场具有良好的发展前景。目前，重组蛋白主要在中国仓鼠卵巢细胞中生产，这种类型的生产非常昂贵的。因此，人们需要开发新的、更便宜的和有效的表达系统。微藻便成为了一种很好的替代品，因为，微藻作为光合单细胞生物，它们的生长不需要昂贵和复杂的培养基，同时也能够在培养基中分泌蛋白质并进行蛋白质N-糖基化。近日，Plant Biotechnology Journal在线发表了题为“Fine-tuning the N-glycosylation of recombinant human erythropoietin using Chlamydomonas reinhardtii mutants”的研究论文。作者主要研究莱茵衣藻N-聚糖免疫原性表位缺失而开发的敲除策略是否适用于治疗蛋白的糖工程，这对于进一步开发微藻生产人类相容性生物制品至关重要。该研究进行了与人促红细胞生成素(hEPO)相关的聚糖的结构研究，以及这些聚糖在野生型莱因哈特氏C.菌株和关键高尔基糖基转移酶受损的突变体中表达。通过在野生型菌株中表达的重组hEPO (rhEPO)的糖蛋白组学分析表明，3个n -糖基化位点与含有4 ~ 5个甘露糖残基、携带核心木糖、核心焦点和o -甲基的成熟n -聚糖100%糖基化。此外，在C. reinhardtii插入突变体中，木糖基转移酶A、B和聚焦转移酶缺陷的表达导致与rhEPOs相关的n -聚糖的核心木糖基化和核心聚焦化急剧减少，从而表明该策略为衣原体制备的生物制品的n -糖基化人源化提供了前景。文献链接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/pbi.14424

随着体育商业化的兴起，兴奋剂的社会影响也不断增大。信息化技术的普及，使得各种各样的新型兴奋剂药物和方法层出不穷，因而开发新的兴奋剂检测方法以促进正当的体育运动的发展是极为必要的。日前，我们参观了日本化学分析中心反兴奋剂研究实验室，了解到有关兴奋剂检测的现状以及采用多级质谱分析法进行兴奋剂检测的新理念。 受访客户Makoto Ueki博士， 日本化学分析中心反兴奋剂研究实验室主任 采访 岛津：您一直在关注开发新的兴奋剂检测方法。您能首先向我们介绍一下传统的兴奋剂检测方法吗？ 客户：到目前为止，能够按照指定的分析条件自动识别目标化合物的靶标分析（Targeted analysis）成为了主流。在奥运会等大型国际竞赛中，这种方法对许多兴奋剂药物进行高灵敏度和高通量的多成分分析非常有用。然而，由于每年都会有新的药物添加进世界反兴奋剂组织禁用物质和禁用方法的清单中，我们必须对按照禁用药物的性质对其分类，将被测目标药物进行分类，采用50台仪器进行人海战术检测。这种类型的分析约占传统药物分析的60－70%，例如兴奋剂和麻醉性镇痛药。 岛津：您们采用什么样的设备进行上述分析? 客户：是气相色谱质谱联用仪（GC-MS）。虽然我们在实验室中使用不同厂商生产的不同类型的气相色谱-质谱联用仪，但我们经常使用的是岛津公司开发的气相色谱-质谱联用仪GCMS-QP2010 Ultra。高效的目标化合物一分析功能体现在可根据目标化合物自动改变仪器的条件和目标离子，并根据保留指数将他们识别出来。基于这一目的，仪器的稳定性以及与工程师讨论激发仪器的潜能变得至关重要。此外，我们对岛津公司生产的产品在高通量性能、稳定性以及售后支持方面充满信任。此外，我们还对突破靶标分析局限性的技术创新一直保持关注。 岛津：您能具体地告诉我们是什么样的局限性吗? 客户：目标化合物的分析存在局限性是因为我们必须提前对目标物质进行设定和优化测试条件。举例来说，那些不允许使用的药物，也就是我们所谓的&ldquo 非常规药物&rdquo 和&ldquo 仿制药物&rdquo ，它们是在现有药物的结构基础上稍加修饰，这些药物的使用已经成为一个社会问题。这些化合物通常保留着某种药理活性，在地下市场销售，没有合格的安全评估措施。此外，由于这些化合物的分子量和化学特性与现有药物有所不同，在高目标性目标化合物检测过程中，它们作为非目标物质无法被检测到。因此，这就是这些药物成为漏网之鱼的原因。对这些非法行为助纣为虐的不法分子，只是复制或者制作药物类似物并将其在互联网的虚拟药房中出售。然而，一旦发现了未经批准的未知药物，实验室专家必须采取一系列的步骤来建立一种测试方法：首先，确定药物的安全性；第二，搜索用于测试的代谢物标记，开展应用研究或人体研究；第三，因为建立药物检测方法是一项很耗时的工作，一种药物进入反兴奋剂检测目录的时间取决于其检测方法建立的时间&rdquo 。正如人们常说的&ldquo 我们在玩一场猫鼠游戏&rdquo 。 岛津：有什么对策吗? 客户：对策就是制定一种符合各种药物检测而不仅局限于目标化合物的分析方法。 岛津：您能说得具体一点吗？ 客户：目标分析可以表示为&ldquo 使用高灵敏度的分析方法在废物中检测痕量目标物质的过程&rdquo 。这意味着我们要进行样品前处理，以减少其他非目标化合物，并努力通过特定的仅用于发现目标离子的测试条件。换句话说，不受监管药物和仿制药物被作为干扰在前处理时已经排除在外。因此，我们要在同一检测条件下，尽可能多的同时检测更多的化合物，使得被测物不会在检测过程中丢失，采集最广泛和最多的质谱信息，并将其作为数据库存放。这里我们及时地发现了已知化合物的信号，而未知化合物的信号也被记录了下来。如果这个未知化合物没有在健康的、未服用违禁药物的人体内发现过，那么这个化合物的出现就非常可疑，这个未知物就可能是一个外源物或者其代谢产物。接下来，我们使用质谱仪对这个未知的组分进行结构分析，发现潜在的兴奋剂药物。 岛津：您们需要什么样的质谱仪进行这种分析? 客户：许多化合物都需要被这种类型的分析所涵盖。因此，我们使用可以产生质谱裂解碎片的液质联用仪（LC-MS），这种仪器可以提供高分辨的多级质谱离子。在我们拥有的仪器中，岛津LMCS-IT-TOF质谱仪可以满足这一要求。在靶标分析中使用气相色谱-质谱联用仪，通过酸性、中性和碱性溶液提取、净化和分离靶标化合物，并按照它们的化学特性进行衍生化。换句话说，相当多的靶标分子在这一阶段可以得到确定。另一方面，使用液相色谱仪，不需要上述复杂的准备工作就可以加载样品， 液相色谱柱比气相色谱的毛细管色谱柱有更好的柱容量，并且相对于气质联用中的低分辨质谱，液质联用能够提供高分辨多级质谱信息。大约在10年前人们就提出了这一概念，即非靶标分析。在那时，我们和许多厂商一样，对于使用飞行时间质谱仪（TOFMS）进行药物筛选的做法一无所知，因为飞行时间质谱仪在过去主要用于生物聚合物分析。近来，LCMS-IT-TOF质谱仪被认为是用于对包含多个未知化合物的小分子进行多组分同步分析的一种有力工具。现在，人人都可以使用飞行时间质谱仪进行这类分析。 岛津：IT-TOFMS是我们公司独有的一种技术。公司的工程师历经万难，在保持高分辨率和高精确度的同时将离子肼中捕获的离子转移到飞行管中。得知这一技术对于您们的研究非常有用我们很高兴。还有其他您们正在处理的问题吗？ 客户：有，是生物聚合物，尤其是糖蛋白激素。促红细胞生成素（EPO）&mdash &mdash 一种最为有名的促进造血干细胞分类成红细胞的激素&mdash &mdash 最为有名。促红细胞生成素的重组蛋白药物被用作治疗肾原性贫血药物。有时重组蛋白药物也被用作兴奋剂药物，主要是通过增加血红蛋白提高人体的耐受力。然而，很难将人体本身分泌的天然蛋白与重组蛋白药物区分开来。 岛津：如何进行区分？ 客户：一般来说，采用免疫分析法或蛋白免疫印迹法。准备一个与某一特定糖蛋白激素相结合的抗体，在产生荧光或化学发光时粘合标记试剂，同时将抗体绑定在靶标激素上，这样我们就可以从数量上测试丰富的糖蛋白激素。由于我们预先决定了将要观测的糖蛋白激素，因而这也是一种类型的靶标分析。一种免疫学方法只能检测一种靶标物。我们使用尿液样本进行EPO筛查，需要48－72小时的时间。 我们对所有的运动员或注册的运动员在竞赛前进行血液筛选测试， 掌握血红蛋白和红细胞的数量以及母红细胞的比率。基于这一结果，那些显示出不利分析结果的运动员进一步接受蛋白免疫印迹法测试。然而，我们发现在一些不明案例中，尽管尿液中包含的EPO电泳不同于参考标准中规定的EPO电泳，但血液测试结果似乎显然是可疑的。 岛津：为什么会这样？ 客户：促红细胞生成素是医药界最重要的重组蛋白药物之一。第一代重组蛋白药物在世界上投入实际使用并获得专利，但这些专利将在2000年中期到期。与此同时，许多类似药物（仿制药物），即具有不同结构的生物仿制药在世界各地问世。在未作说明的情况下，重组促红细胞生成素被认为是天然促红细胞生成素的类似物，但具有不同的免疫电泳特征。重组蛋白质药物是在用转基因的CHO细胞培养出来的，转基因CHO细胞是由靶标蛋白质编码基因转录。这一方法可合成糖蛋白，其核心蛋白质的氨基酸序列与靶标蛋白质相同。然而，糖链结构是无法控制的，因为糖链结构不直接受基因的控制。重组糖蛋白的糖链结构取决于可用的糖基转移酶和在培养条件下单糖的存在比例。因此，我们可以容易地推断出第一代促红细胞生成素与其生物仿制药的区别在于他们的糖类。实际上，我们在过去几年的研究验证如下：1）第一代促红细胞生成素与其生物仿制药具有同样的核心蛋白质氨基酸序列和聚糖结合位点；2）天线结构、末端结构和单糖比例在聚糖总体上存在着很大差别；3）第一代促红细胞生成素与其生物仿制药在如上所述的糖类上存在的差异与根据等电聚焦电泳的结果推断出它们在等电点上的差异是一致的。 岛津：您们使用质谱仪进行这种研究吗？ 客户：是的，我们采用前面解释过的岛津LCMS-IT-TOF质谱仪和飞行时间质谱仪AXIMA Resonance进行这种研究。质谱仪采用基质辅助激光解吸电离（MALDI）作为离子源，通过IT-TOFMS进行检测。许多制药公司对其生产的促红细胞生成素产品进行研究并作了报道。我们的目标是基于市场上分销的重组糖蛋白药物，分析世界反兴奋剂组织（WADA）禁止的糖蛋白药物及其生物仿制药。所以，我们需要研究每个目标糖蛋白的特征。为了做到这一点，事实上我们并不只是识别和区分几何异构体， 我们需要直接用碰撞诱导解离多级质谱（MSn CID）确证糖链的结构。我们采取的是一种传统的做法，而不是特殊的方法。首先，糖蛋白被胰蛋白酶消化；其次，N-端聚糖被N-糖酰胺酶从核心蛋白上分离，因此，我们得到的酶切共由三部分构成：结合到短O-端聚糖上的糖肽、胰蛋白酶解肽和N-端聚糖。最后，我们对这些样品进行MS分析。在N-端聚糖被转化为腙提取后，LCMS-IT-TOF 和AXIMA Resonance可以分析整个糖结合的核心蛋白结构、聚糖结合位点和所有结合糖的单糖比例。大量报道显示，糖蛋白激素的生物活性取决于天线结构、末端结构和唾液酸含量，因而需要通过各种限制性内切酶进行分析，并且提取过程通常非常复杂。然而，由于结合位点能够通过多级MSn (n3) CID测试加以识别，因此，我们可以通过在胰蛋白酶消化的O-接连聚糖结合位点中包含多种丝氨酸残基进行验证。 岛津：是的，数据量非常庞大。根据这些大量的结果，我认识到这是一种您和贵公司的员工用辛勤汗水浇灌出来的产品。根据您的解释，如果检测系统是IT-TOFMS，那ESI 或MALDI都可以做这样的分析，对吗？ 客户：不对。我们实验室使用的MS仪器大约有10台。然而，没有一台仪器是相同的。每一台仪器都有不同的离子透镜、离子源和接口。目的不同，使用的仪器也不同，通过几种仪器来验证一种方法。与基础研究不同，测试方法开发是一种技术转化手段，也就是说，其意图在于与世界上的其他机构共享该方法。然而，我们的同行并非总是与我们拥有相同的ESI或MALDI。你很难意识到，即使我们测试相同的样本，一些肽或聚糖的相对信号强度在LC- 和 MALDI-IT-TOFMS串接的质谱上是不同的。当然，质谱模式也会变得不同。我们在此基础上努力寻求一种能够在不同平台进行检测的可重复的条件，因为我们不能将仅在世界上某一特定仪器上实现检测的方法称之为&ldquo 标准&rdquo 。 岛津：完全赞成。 客户：我们知道在一些情况下，在液质联用法原始糖蛋白测试中信号强度较高的胰蛋白酶消化肽，不能通过MALDI-MS试验检测，反之亦然。当肽包含多种碱性氨基酸或者胰蛋白酶消化的检测敏感度取决于离子化特性时，这种情况经常发生。因此，分析一个高信号强度的峰并不意味着我们总能获得一个稳定而灵敏的结果。但是提供这种负面信息对于改进兴奋剂检测方法以及标准化至关重要。 岛津：我明白了。考虑到国外其他机构会使用这一方法，就验证而言，需要两种离子化的质谱仪。我非常清楚这一点。如果分析是由不同的机构做出的，操作人员的技能水平会对测试有影响吗？ 客户：我们对质谱分析法的预计包括这一点，但我们认为这不太可能发生。直观地认识到测试结果的准确性对我们来说很重要。如果测试结果不理想，我们将通过检查谱图找出出错的部分。还有一个优点是，我们能够在同一时间及时地进行多组分分析。液质联用（LC-MS）和气质联用（GC-MS）都可以进行这种分析。例如，近年来代谢物组学分析越来越流行，与前面提到的ESI 和 MALDI一样，代谢物组学分析离子化方法是不同的，因此对于很难通过LC-MS检测的碳氢化合物（烃类）和类固醇分析非常有用。以前，为了使多组分同步分析自动化，我们自己动手编写了数据处理宏程序和报告。感谢你们为满足我们的要求而付出的努力。尽管要花很长一段时间，但在某种程度上我们可以按照客户具体要求制造，现在我们对客户更加友好了（笑）。在未来，如果你们支持能够存储和更新重要数据的改进的软件，这些数据来自没有标准样品的新的化合物，使用起来就会更加得以应手。这将有助于质谱分析仪作为通用设备而扩大使用用途。 岛津：完全正确，现在我们正在按照目的积极提供分析条件，我们称之为分析方法包，并且我们正在建立识别数据库。 客户：复合（质谱）仪也非常必要。我们承受不了靶标化合物发生改变就更改设备的做法。就这一点而言，允许我们只要改变条件就能进行多种分析的质谱仪颇具吸引力。 岛津：感谢您们对质谱仪寄予了极高的期望。您们对质谱仪还有什么不满意的地方吗？ 客户：嗯&hellip &hellip 首先是质谱仪的灵敏度。在目前的兴奋剂检测中提取的尿样数量最多为70mL至90mL。也就是说，质谱仪的灵敏度应提高100倍。第二是价格问题。在一场国际比赛中，应在短期内处理分析大量的尿样，所以引入质谱仪可能需要巨额投资。 岛津：最后，我们想请问您对未来兴奋剂检测的看法？ 客户：正如我所提到的，许多药物相继被生产出来，并有许多使用者在服用。自互联网消除信息阻碍后，新药物发展的速度大大加快。我们实验室的科学家已经远远落后于这一发展进程，因为我们首先要保证检测结果的可靠性和安全性。所以我认为我们的目标是缩短在多个领域积极引入其他可用技术的研究时间。正如我先前提到的，在正在进行的糖蛋白研究中，日本的研究处于非常高的水平，并且在这一领域这些技术独一无二。不幸的是，许多西方兴奋剂控制实验室还未能引入这些技术。尽管糖蛋白测试目前停滞不前，但我们认为在未来研究人员会取得突破性的进展。即使我们能做的事情将受到限制，我们仍愿意让整个世界知道日本开发出的这一现有技术，以及该技术通过将兴奋剂问题最小化而对合法体育运动的发展做出的贡献。 岛津：非常感谢您抽出的宝贵的时间接受这次采访。这对我们很有帮助。 对这次采访的评论 在日本化学分析中心反兴奋剂研究实验室，我们的核心产品，例如气相色谱-质谱联用仪GCMS-QP2010 Ultra , 高效液相-离子阱-飞行时间质谱联用仪LCMS-IT-TOF质谱仪和基质辅助激光质谱仪AXIMA Resonance支持着实验室研究人员的日常研究活动。通过这次采访，我了解到即使是由于电离差异和检测系统引起的问题也反映在他们的研究之中，而这些问题通常被仪器工程师所忽略。这给我留下的印象相当深刻，实验室研究人员的严谨工作态度源于他们坚持发展合法体育运动和向社会贡献研究成果的强烈信念。为了最大化发挥一系列多种分析仪器的优势，我们愿意向我们的顾客继续提供更优的解决方案，以回应我在今天听到他们提出的要求。 使用的仪器：气相色谱-质谱联用仪（GCMS-QP2010 Ultra）、高效液相-离子阱-飞行时间质谱联用仪（LCMS-IT-TOF）、基质辅助激光解吸附电离-离子阱-飞行时间质谱仪（AXIMA Resonance） 关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所为扩大中国事业的规模，于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司。 目前，岛津企业管理（中国）有限公司在中国全境拥有13个分公司，事业规模正在不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心；覆盖全国30个省的销售代理商网络；60多个技术服务站，构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。 岛津作为全球化的生产基地，已构筑起了不仅面向中国客户，同时也面向全世界的产品生产、供应体系，并力图构建起一个符合中国市场要求的产品生产体制。 以&ldquo 为了人类和地球的健康&rdquo 为目标，岛津人将始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn。

在杀死癌细胞的同时，也杀死了正常细胞。”这个困惑着全世界医生和癌症病人的难题，终于可望破解。笔者13日从中山大学获悉，中山大学中山医学院教授颜光美课题组于7日在国际期刊《美国科学院院报》发表了天然甲病毒M1具有选择性抗肿瘤作用的最新研究，该研究表明，一种叫做M1的天然病毒能特异性杀死癌细胞而不伤害正常细胞，这种新型溶瘤病毒有望成为新一代抗癌利器全球癌症发病率呈现快速增长态势，现有的治疗手段远远未能满足临床需求。颜光美课题组历经多年研究，从海南岛分离得到一种M1的天然病毒。颜光美团队使用细胞培养方法发现，M1病毒能选择性地感染并杀死包括肝癌、结直肠癌、膀胱癌、黑色素瘤在内的多种癌细胞，而对正常细胞无毒副作用。整体动物模型证明，M1病毒“像长了眼睛一样准确找到肿瘤组织并将其杀灭”，正常细胞则不受影响。XY-EL-Ch1509c 鸡间隙连接蛋白26(CX26)ELISA试剂盒 Chicken CX26 (Connexin 26) ELISA Kit XY-EL-Ch1510c 鸡金属硫蛋白2 (MT2)ELISA试剂盒 Chicken MT2 (Metallothionein 2) ELISA Kit XY-EL-Ch1511c 鸡神经激肽A(NKA)ELISA试剂盒 Chicken NKA (Neurokinin A) ELISA KitXY-EL-Ch1512c 鸡细胞粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)ELISA试剂盒 Chicken CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA KitXY-EL-Ch1513c 鸡磷酸二酯酶4D(PDE4D)ELISA试剂盒 Chicken PDE4D (Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA KitXY-EL-Ch1514c 鸡5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒 Chicken 5-NT (5-Nucleotidase) ELISA KitXY-EL-Ch1515c 鸡γ1肌动蛋白(ACTG1)ELISA试剂盒 Chicken ACTg1 (Actin Gamma 1) ELISA KitXY-EL-Ch1516c 鸡细胞分裂周期蛋白23(CDC23)ELISA试剂盒 Chicken CDC23 (Cell Division Cycle Protein 23) ELISA KitXY-EL-Ch1517c 鸡谷胱甘肽S转移酶κ1(GSTκ1)ELISA试剂盒 Chicken GSTκ1 (Glutathione S Transferase Kappa 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1518c 鸡血管紧张素II受体1(ANG II R1)ELISA试剂盒 Chicken ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1520c 鸡染色质区解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3)ELISA试剂盒 Chicken CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) ELISA Kit XY-EL-Ch1521c 鸡脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 Chicken LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA KitXY-EL-Ch1523c 鸡唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素8(SIGLEC8)ELISA试剂盒 Chicken SIGLEC8 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 8) ELISA KitXY-EL-Ch1524c 鸡肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 Chicken HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit XY-EL-Ch1525c 鸡脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 Chicken LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA KitXY-EL-Ch1526c 鸡胸腺五肽(TP5)ELISA试剂盒 Chicken TP5 (Thymopentin) ELISA KitXY-EL-Ch1527c 鸡可溶性CD14分子(sCD14)ELISA试剂盒Chicken sCD14 (Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA KitXY-EL-Ch1528c 鸡胰岛素(INS)ELISA试剂盒 Chicken INS (Insulin) ELISA KitXY-EL-Ch1530c 鸡甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 Chicken T4 (Thyroxine) ELISA KitXY-EL-Ch1532c 鸡促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 Chicken EPO (Erythropoietin) ELISA Kit XY-EL-Ch1533c 鸡甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒 Chicken MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 ) ELISA KitXY-EL-Ch1535c 鸡胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)ELISA试剂盒 Chicken IGF2BP3 (Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit XY-EL-Ch1536c 鸡T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒 Chicken LAT (Linker For Activation of T-cell) ELISA KitXY-EL-Ch1538c 鸡激酶锚定蛋白1(AKAP1)ELISA试剂盒 Chicken AKAP1 (A Kinase Anchor Protein 1) ELISA Kit XY-EL-Ch1539c 鸡肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA试剂盒 Chicken TSGF (Tumor Specific Growth Facter/Tumor Supplied Group of Factor) ELISA KitXY-EL-Ch1540c 鸡胃动蛋白2(GKN2)ELISA试剂盒 Chicken GKN2 (Gastrokine 2) ELISA Kit XY-EL-Ch1542c 鸡丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1)ELISA试剂盒 Chicken PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA KitXY-EL-Ch1543c 鸡抗丙氨酰tRNA合成酶抗体(Anti-AlaRS/Anti-PL12)ELISA试剂盒 Chicken Anti-AlaRS (Anti-Alanyl-tRNA Synthetase/Anti-PL12-Antibody) ELISA KitXY-EL-Ch1544c 鸡脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 Chicken DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit XY-EL-Ch1545c 鸡胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒 Chicken FSA (Fetal Sulfoslycoprotein Antigen) ELISA KitXY-EL-Ch1546c 鸡酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒 Chicken TH (Tyrosine Hydroxylase) ELISA KitXY-EL-Ch1547c 鸡α-胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒 Chicken SPTAN1 (Alpha-Fodrin) ELISA Kit 除细胞水平及动物实验之外，课题组还使用临床标本离体活组织培养模型进一步证实了上述新型溶瘤病毒的有效性和特异性。据介绍，更为重要的是，研究工作还证明了M1病毒作用的分子遗传学机制，这个发现为精准的临床用药和实施个体化疗法提供了可靠的科学依据，也极大地增加未来临床试验取得成功的机会。据专家介绍，新型天然溶瘤病毒M1将会安全而有效地治疗癌症，有望成为攻克人类癌症的新一代利器

北京时间7月26日消息，英国广播公司报道，伦敦奥林匹克运动会即将开幕，其中一个需要强调的重要问题便是防止化学药物欺诈。随着医疗成本的上升，究竟什么是服用禁药从而提升运动表现，需要重新再界定。不少运动员愿意支付昂贵医疗费，服用禁药提升身体机能以获得一时的荣耀。 　　爱尔兰中长跑运动员托马斯钱普尼强烈的反对与动员服用兴奋剂，他认为全球反兴奋剂活动有一定的影响力，如果运动员想要欺骗，他必须精心安排。“为了赶在测试之前，运动员必须有非常完备的医疗支持—你需要内分泌系统非常专业的医药，最新的红细胞生成素合成药(EPO)，如果盲目在网上买很快就会被发现，如果没有特别的途径获得这些资源，你体能可能下降的很快。”钱普尼参加了2008年北京奥运会，现在他因有伤在身无法参加2012伦敦奥运会。 　　运动蟑螂 　　专家认为系统性的服用兴奋剂是运动竞技中最大的威胁。不过专家认为伦敦现存的大数量的药物测试，以及医疗巨头Glaxo SmithKline 支付的展品实验室可能并不是处理这类威胁最有效地方式。美国反兴奋剂志愿协会VADA的成立者玛格丽特古德曼博士说道：“可能被发现服禁药的运动员只有一个，但这就类似于蟑螂，当你发现公寓里出现了一个蟑螂，那么你的橱柜里可能已经有上千只了。因为服用的兴奋剂不同，以及被测试的方式不同，很多运动员并没有被发现服用兴奋剂。” 　　世界反兴奋剂组织(WADA)的总干事大卫豪曼对此表示同意，“我很怀疑药物测试的有效性。我知道有很多经验丰富的运动员能够避开药物测试。我们需要将重心放在科学上，以超过技术检验方法。”通过对比运动员长期一段时间的各项指标，护照记录了血液和尿液的细微变化，这可能会提供是否服用兴奋剂的证据。 　　生物检测 　　有的专家认为生物护照是更好的方式，因为可以长期检测体内类固醇和荷尔蒙的含量。但这个项目的巨大成本花费也是值得注意的问题。创意未来研究中心总监、西苏格兰大学的安迪米亚赫教授说道：“我认为很快就会有公共的基因数据库和整套基因排列，将基因进行匹配只需要1000美元。世界范围内，每个人从出生就要开心进行生物监测，无论在任何领域一旦身体有任何生物化学变化，这个人就没有参赛资格。” 　　米亚赫教授还说道，目前物理性的表现上的提升，无论是化学上的还是技术上的，现在已经广泛的被社会所接受，所以我们应该重新定义在体育竞技中什么是允许的什么是禁止的。“如果(兴奋剂)没有健康威胁，或者风险很小，我们应该允许运动员服用药物，事实上，现在运动员必须依赖科技才能更好地超越前人。” 　　回到未来 　　未来将会有什么样的兴奋剂呢?很可能未来有一天重心将会转移到基因药物上。科学家已经鉴定出与建造肌肉和增加红细胞产量有关的基因。通过病原体进入细胞“篡改”DNA密码，这些至关重要的基因会开启，运动员可以在忍耐力和持久力上获得极大的提高。 　　当然这又存在重大的缺陷，那便是健康和安全问题，包括面临获癌症的风险。克里斯库伯教授称，未来各种兴奋剂可能用于医疗治疗病人，例如红细胞生成素合成药(EPO)和合成代谢类固醇。“每一种用于提高体育竞技表现的药物最初都是作为麻醉用药，用于帮助重病病人恢复。未来的兴奋剂可能多用于医疗，而非体育竞技场。”

前言 随着人类对生物学领域深入探索和科技创新的不断发展，目前越来越多的研究院所和生物制药公司将细胞水平的功能性研究、模型建立及药物筛选做为一个重要的研究/研发手段。而高内涵成像分析系统就为这种细胞水平的研究提供了集高分辨率、自动化、智能化及海量信息为一体的新的检测平台。干细胞（stem cells）是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体干细胞。正是干细胞的这种特性，为细胞生物学的研究提供了更有力的永生化的稳定细胞株。干细胞水平的研究比在普通的细胞株提供了更接近临床相关性的生理学信息；并且比原代细胞相比更容易获得，且具有更好的实验重复性。 干细胞的研究与其他细胞水平的研究有一些相似之处，但其关键的不同点在于在干细胞的研究过程中干细胞的分化。干细胞水平的实验比传统的单线性/单参数的实验具有更多的检测目标，包括其分化能力、分化过程、分化类型及不同类型的量化分析统计等。高内涵成像分析系统以其自身的高分辨率、多参数及智能化分析的特性，恰如其分的满足了干细胞研究的以上需求，而高内涵成像系统的自动化和高通量的特点又以海量的有效数据加速了该研究的过程。 利用高内涵成像分析系统可完成干细胞研究的自动化图像获取及多参数分析，目前常用的全能性干细胞分化研究主要有三类：造血细胞、神经细胞和诱导型多能干细胞（induced pluripotent stem cell, iPS）来源的心肌细胞（图1）。图1：全能干细胞分化层次图应用实例1． 神经祖细胞向神经球分化研究冷藏保存的神经祖细胞（StemCell Technologies, mouse Cells）培养在6孔板内，在培养基中加入不同的生长因子，培养6天后通过ImageXpress Micro对每孔内神经球进行无标记相差成像，并对的神经球的面积进行自动化定量分析。结果如下（图2）： 图2：神经球无标记检测及分析（ImageXpress Micro 20X 相差物镜）2． 神经干细胞向神经元及胶质细胞分化研究神经干细胞在加有EGF（表皮生长因子）和bFGF（成纤维细胞生长因子）的培养基中培养1-2天，然后在分化培养基中培养12-14天。加入EPO（促红细胞生成素）后，检测为神经球向神经元及胶质细胞的分化情况。ImageXpress Micro进行自动化图像获取，运用细胞分类（Cell Scoring）模块进行神经元/胶质细胞阳性率分析，运用神经生长（Neurite Outgrowth）模块进行神经元突触长度及数量分析。结果如下（图3）：图3：神经干细胞分化检测及分析。图（上）表示加入（左）及不加（右）神经细胞的分化图片；图（下）表示不同条件下神经元细胞的阳性率（左）及神经元突出的长度（右）。（ImageXpress Micro 20X物镜）3． 造血祖细胞向骨髓细胞及血细胞分化研究人源CD34+造血祖细胞培养在96孔板中，加入多种不同的造血细胞因子组合（SCF+Flk3+TPO/SCF+IL-3+GM-SCF）后，通过检测CD45和CD15两种标记物在细胞内的表达量，统计分析不同造血细胞因子组合对造血祖细胞的自我更新能力及骨髓细胞分化能力的变化。结果如下（图4）：图4：检测细胞内CD45和CD15的阳性率，评价造血祖细胞在不同条件下的自我更新能力及定向分化能力4． 诱导型多能干细胞（induced pluripotent stem cell, iPS）向心肌细胞分化研究iPS细胞（Celprogen）在专用培养基中培养3-7天，同时检测7种不同标志物的表达量，以判断心肌细胞分化及成熟的状态。下图（图5）中显示Oct4（干细胞标记物）和a-Actinin（心肌细胞标志物）在细胞内的表达情况：图5：iPS细胞分化情况（ImageXpress Micro 20X 物镜）5． iPS细胞来源的心肌细胞跳动实验临床前安全性评价是药物研发过程中非常重要的环节，早期的心脏毒理学研究将会大大降低在进入临床研究阶段后因药物毒性带来的投入风险。iPS细胞来源的心肌细胞跳动实验为药物心脏毒性评价提供了一个高效的体外细胞水平的检测方法。心脏跳动可通过传统电生理的方法来检测，用高内涵成像分析系统来进行检测及分析是一个全新的挑战。Molecular Devices公司最近一代的高内涵成像分析系统ImageXpress Micro XL以其最新一代的检测器sCMOS（采样频率可达100pfs）和自定义模块分析功能，完全可出色完成心肌细胞跳动实验的快速检测及分析要求。iPS细胞来源的心肌细胞单层培养在96或384孔板中，心肌细胞会自发跳动同步收缩。加入Calcein-AM染料孵育10min后，撤掉培养基，再加入不同浓度的化合物，置于ImageXpress Micro XL活细胞培养装置中，检测心肌细胞跳动频率的变化。结果如下（图6）：图6：iPS细胞来源的心肌细胞跳动实验（ImageXpress Micro XL 20X 物镜）总结 干细胞研究作为一种复杂的细胞水平检测模型，需对干细胞的生长、增殖、分化能力、分化类型及状态等多种参数进行检测及定量分析，为疾病治疗研究及药物研发提供了更有效的研究手段。Molecular Devices公司的ImageXpress高内涵系统提供了集高分辨率、自动化、智能化及海量信息为一体高内涵成像分析系统完全解决方案，可满足以上研究需求（图7）。图7：Molecular Devices公司针对干细胞研究的高内涵成像系统完全解决方案

细胞检测的全球领先者依赖创新技术，简化疾病研究；推出&ldquo 一孔全部完成&rdquo 检测模式 圣弗朗西斯科 &ndash 在美国细胞生物学会 (ASCB) 第 48 届年会上，专注于提高人类及其生存环境的健康和安全的全球领先公司 PerkinElmer, Inc.，今天宣布扩展了其领先的 AlphaLISA® &ldquo 无需洗涤&rdquo 检测产品线。 此产品系列发展迅速，目前拥有 27 种试剂盒，包括能够检测炎症、癌症、神经退行性疾病、代谢病和血管生成的关键生物标记物的试剂盒。现在可以达到&ldquo 一孔全部完成&rdquo ，即培养细胞和检测在一个孔中完成。这些试剂盒可以在各种复杂生物体液中使用，不需要费时费力的分离和洗涤步骤。 AlphaLISA 技术可以节省时间，消除因难于通过自动化完成而需要大量人力的流程，人力的参与会降低精度并且干扰较弱的生物分子相互作用。 &ldquo 全新的&ldquo 一孔全部完成&rdquo 功能极大地增强了 AlphaLISA 产品线的性能，并且在简化细胞检测方面向前迈进了一大步，&rdquo PerkinElmer 生物研发业务总裁 Richard Eglen 博士说。&ldquo AlphaLISA 是一项能够改进实验室工作流程的可靠技术，不需要昂贵的洗涤仪器和费时的 ELISA 技术，同时也简化了高通量自动化系统。&rdquo 除了炎症、癌症和代谢病检测，&ldquo 一孔全部完成&rdquo 试剂盒目前还包括能够推动多种重要疾病领域药物开发的一系列检测。此外，许多试剂盒还允许研究人员检测用于治疗的生物制剂中的宿主细胞污染物。 不断扩展的 AlphaLISA 免疫测定试剂盒*包括： Amyloid beta 40 老年性痴呆症 Amyloid beta 42 老年性痴呆症 CHO 宿主细胞蛋白 生物制剂 人类 IgG 生物制剂 NS/0 宿主细胞蛋白 生物制剂 表皮生长因子受体 癌症 红细胞生成素 癌症 前列腺特异抗原 癌症 血管内皮生长因子 癌症 软骨寡聚基质蛋白 炎症 粒细胞集落刺激因子 炎症 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 炎症 干扰素 &gamma 炎症 白细胞介素 10 炎症 白细胞介素 17 炎症 白细胞介素 1b 炎症 白细胞介素 2 炎症 白细胞介素 3 炎症 白细胞介素 6 炎症 白细胞介素 8 炎症 脂联素 代谢 生长激素 代谢 胰高血糖素样肽 1 代谢 胰岛素 代谢 瘦素 代谢 催乳激素 代谢 P24 病毒 AlphaLISA 是专利的均相微珠检测技术，并经过 PerkinElmer 的 EnVision® 多标记检测仪验证。该检测仪是高度灵活的模块化系统，能够检测包括 TR-FRET、发光和荧光在内的几种检测模式。 关于 PerkinElmer, Inc. PerkinElmer, Inc. 是一家专注于提高人类及其生存环境的健康和安全的全球领先公司。据报道，该公司 2007 年收入为 18 亿美元，拥有约 9,100 名员工，为超过 150 个国家/地区的客户提供服务，同时该公司也是标准普尔 500 指数的成员。有关其它信息，请访问 www.perkinelmer.com 或致电 1-877-PKI-NYSE。 * 仅供研究使用。不适用于诊断过程。 ### 媒体联系人： Mario Fante PerkinElmer, Inc. 电子邮件：mario.fante@perkinelmer.com 电话：781-663-5602

尿检的原理十分简单，人体服用或注射药物后，这些药物及其代谢产物在一定的时间内或多或少地会出现在尿液中。检测人员通过对运动员的尿液作定量及定性的检测工作，就能检查出这些运动员是否使用过兴奋剂。　　而最新的高分辩率质谱仪的出现，使检测技术上有了极大的飞跃和发展。过去停止服用兴奋剂两周后查不出来的，现在即使间隔 50～60 天，也难逃高科技的法网。　　但是，有的违禁药物目前难以在尿检中查出，如缩氨酸、荷尔蒙及其同类产品像促红细胞生长素(EPO)、人体生长激素(hGH)等，而血检则能弥补这方面的不足。　　「查禁」永远落后于兴奋剂的更新　　在某个意义上，药检措施越严格，越会逼迫兴奋剂更新换代。欺骗者总能寻找到一些新的药物和方法战胜检查系统。合成类固醇药物被查禁，生长激素和红细胞生长素又被广泛运用。　　容易被检查出的苯丙胺、麻黄素等兴奋剂逐渐减少，取而代之的是更不容易被查出的各种能够增强运动员个人能力的方式。　　比如，在上世纪 70 年代，血液回输(运动员先从自己身上抽出一部分血液保存起来，临近比赛前再注射回体内，以便增加血红细胞的数量，把更多的氧气输送到肌肉，从而提高运动能力)就开始在奥运赛场上风行。　　这种方法同样是医生熟悉的，它也是手术中减少输血量的常用预备方法之一。但直到 1994 年冬奥会，国际奥委会才开始进行相关的检测。　　促红细胞生成素 (EPO) 是近年得宠的新型兴奋剂。它最早是一种治疗贫血等血液疾病的药物，由于它能促进红细胞生成，提高身体的耐力，被很多耐力项目选手用作兴奋剂。早在上世纪 90 年代，EPO 就被列入禁药名单，但在 2000 年悉尼奥运会之前，人们始终无法检测出这种兴奋剂。　　无怪有人说，奥运赛场不但是体育赛事的赛场，还是生物医药技术的赛场——从目前来看，情势非常严峻。　　而医生们和医学科学家们，也就这样悄悄地参与到了这样的盛会中，开展了一出猫捉老鼠的竞技。

导 语 　　迄今为止，在兴奋剂和兴奋剂检测的竞赛中，检测全面落于下风。而在可预期的将来，随着更多的技术应用，面对新型兴奋剂，检测的劣势还会进一步扩大。 　　兴奋剂是现代奥运会的一大污点，也是每届奥运会都要严加防范的。本届奥运会也一样，这次伦敦奥运坏被称为对兴奋剂检测最严的奥运会。共有150名专家和1000名专业人员参与到检测当中，可以检测出240多种违禁物质。虽然武装到了牙齿，但不得不为世界反兴奋剂组织泼上一喷冷水，因为伦敦看似严不透风的兴奋剂检测其实也只是马后炮。 　　兴奋剂有超过2500年历史，期间一度被当做提高运动成绩的良方 　　和只有几十年历史的兴奋剂检测不一样，兴奋剂并不是新鲜的东西：人类在运动中使用兴奋剂的历史超过了2500年，最开始，药物甚至被当做了运动员提高成绩的标准配备。 　　根据《德国时代周报》整理的资料，在公元前668年，当时的古代奥运会的跑步冠军Charmis就使用一种包含无花果干和湿奶酪等材料混合制成的特殊食物增强体力，而那之后，古代的运动员们更是大肆使用牛鞭，即最早的睾丸酮类兴奋剂。 　　现代奥林匹克运动会开始后，兴奋剂同样“大放异彩”。1904年，美国圣路易斯第三届现代奥林匹克运动会。马拉松比赛中第一个冲过终点的是美国人Fred Lorz，他在比赛中靠机械“兴奋剂”——汽车完成了多半程比赛，因而被取消成绩。在他之后抵达终点的是美籍英国人Thomas J. Hicks。在Hicks比赛全程，他的教练Charles Lucas一直跟在他身后。当Hicks精疲力竭之时，卢卡斯就会给他注射一针士的宁(Strychnine)，并给他喝下一大杯烈酒威士忌，在终点前6公里处，Hicks又被打了一针士的宁。而在那个年代，奥运官方甚至鼓励这种行为，官方在赛后的报道里称道：“马拉松比赛的冠军获得者，从医学角度充分证明了药物对于长跑选手的重要性。” 　　1924年的环法自行车赛中，一名环法选手甚至把兴奋剂当做了一种值得骄傲的装备向记者炫耀：“这是可卡因，有益眼睛有好处。氯仿，可以保护牙齿。这个，是搽剂，能让我们的膝盖保持状态。说实话，我们是靠着炸药(硝酸甘油)骑车的。”而环法组织者依然默许了这些行为，在1930年，环法比赛的参赛手册上明确指出，组织方不负责各支车队的“药物”费用，言下之意就是参赛者只要自己付钱买“兴奋剂”即符合规则。 　　在冷战期间，研发兴奋剂甚至成为了一些国家的国家项目。最大规模的兴奋剂事件就是于近年曝光的前东德运动员大规模使用禁药事件，在上世纪70-80年代，有上万名运动员参与了Komplex 08的计划，他们都服用了据称是维生素的合成类固醇类药物。而且在东德科学家的帮助下，苏联也一度把兴奋剂作为一种大型的国家项目来发展。 　　兴奋剂检测历史却仅有50年，兴奋剂的开发一直领先于检测技术 　　1968年，国际奥委会开始在第十九届东京奥运会中开展兴奋剂检测，当时的检测技术对惯用的合成类固醇毫无办法。整个东京奥运会期间，仅检出一例违禁药物事件：瑞典现代五项选手利延沃尔Hans-Gunnar Liljenwall因服用过量的酒精被查，就此成为奥运史上兴奋剂检测出的第一人。 　　虽然在那之后，兴奋剂检测检测技术有了长足的进步，但兴奋剂的研发的进步要更快。EPO(Erythropoietin)促红细胞生成素是一种治疗贫血等血液疾病的药物，由于能促进红细胞生成，提高身体的耐力，被很多耐力项目选手用作兴奋剂。在上世纪90年代，EPO就被列入禁药名单，但在2000年悉尼奥运会之前，人们都无法检测这种兴奋剂。 　　2003年10月美国反兴奋剂局在接到了一名田径教练交来的残留着ZMA的注射器后，发现了一种新型的合成类固醇THG，它的全名为四氢孕三烯酮Tetrahydrogestrinone，这种精心设计的兴奋剂可以躲过此前所有的检测手段。由美国BALCO实验室研发出的THG，甚至一直被这家机构作为一种叫做ZMA的营养品出售，包括女子百米飞人琼斯、欧洲百米冠军钱伯斯、奥运百米冠军科林斯都曾使用过这种兴奋剂。在1984年的奥运会上，科林斯甚至在夺冠后还对着摄像机镜头说：“谢谢你，ZMA!” 　　2008的北京奥运会也没能免俗，08年10月，德国自行车选手斯特凡舒马赫被检测出了在环法赛中使用了名叫CERA的新型的兴奋剂。随后，国际奥委会在48小时之内就宣布重新检测北京奥运会样品。CERA，是促红细胞生成素EPO的新一代产品。经过对北京奥运会运动员的1000份血样和4000份尿样的检查，最终共发现了9名违规者。 　　不过，即便是可以检测出的兴奋剂，通过奥运会兴奋剂检查也不代表运动员就没有服用过。南非开普敦大学的运动生理学家Tucker在最近接受《自然》杂志的采访时说道：“过了奥运会药检，也不能代表运动员就没有服用兴奋剂，更多的运动员喜欢在训练时用兴奋剂，因为训练时的药检很松。而比赛时的药检很严，运动员就不会使用。” 　　新型兴奋剂向自体化发展：干细胞甚至基因疗法都在被应用，检测变得越发不可能 　　到了今天，除了使用自体输血，使用新型的尚未有检测方法的药物外，一些更加科幻的作弊方式也加入兴奋剂的队伍，这些技术直接取材与人体，根本无法检测。2006年，德国田径教练Thomas Springstein被警方逮捕，在此之前，他试图用基因药物Repoxygen提高运动员的成绩。Repoxygen能够提高体内携带氧气的红细胞的“产量”。虽然美国加州大学圣地亚哥分校人类基因疗法计划负责人、世界反兴奋剂机构顾问西奥多弗里德曼(Theodore Friedmann)认为：“研发真正有效的技术所遭遇的难度要比人们认为的高得多。”但他也承认，假以时日，研发出基因兴奋剂(gene dop-ing)也并非不可能。 　　而另一项科学进展干细胞疗法的潜力也很大，运动员可以通过干细胞疗法增强体能或者修复因比赛疲惫不堪的身体。哈佛医学院整形外科教授Chris Evans甚至信心满满的表示：“我们早已经能够让成熟的干细胞发育成肌肉。虽然如何将干细胞注入合适的肌肉，以及如何让肌肉与这些‘外来客’融为一体并获得额外机能，至今仍是一个谜。但科学家有望在几年内扫清这些障碍。”，“由于在这一过程中，你使用的实际上是自己的干细胞，因此很难进行检测。”Evans补充道。 　　可见，面对新型兴奋剂时，检测方法会越发难以奏效，另一方面，世界反兴奋组织也越发不堪重负。迄今为止，世界反兴奋剂机构花费超过5400万美元专门用于研究可能被用于提高运动成绩的新药。而在这次伦敦奥运会上，组织者计划实施5000次兴奋剂检测———这一数量是史无前例的。参加比赛的1.4万名运动员中有近一半会被抽查，其中包括全部奖牌获得者，检测将排查超过240种违禁药物，其中包括人体生长激素、哮喘药物和尚未正式开始销售的实验药物。就算通过了这些，运动员的血检和尿检样本还要被保存8年，方便以后在发现新型兴奋剂时可以重复查验。 　　但即便有这些措施，迄今为止，在兴奋剂和检测的竞赛中。检测仍然全面落于下风，而且在可预期的将来，这种劣势会进一步扩大。

在奥运会这样大大小小的体育盛事中，兴奋剂检测始终是备受关注的焦点。截止到目前，巴黎奥运会出现的三例兴奋剂检测阳性事件，分别是对美雄酮和宝丹酮（属促蛋白合成类固醇）、呋塞米（属利尿剂和掩蔽剂）、类固醇司坦唑醇检测呈现阳性。本届巴黎奥运会兴奋剂检测由世界反兴奋剂机构（WADA）负责组织和监督检测工作，负责检测的实验室均需获得世界反兴奋剂机构的认可。反兴奋剂本身其实是一项专业性极强、有着复杂体系的工作。那么兴奋剂检测包括什么？兴奋剂违规的行为有哪些？反兴奋剂工作人员是如何完成整个流程的？其兴奋剂检测技术手段又有哪些？兴奋剂检测（Doping Control）的范围广泛，包括赛前、赛后及日常检测，以确保运动员未使用任何违禁物质或违禁方法。食源性兴奋剂检测是奥运赛事中最关注的部分，其主要指来自于食品的兴奋剂，包括两大类，一类是天然存在的，即内源性兴奋剂；一类是人为添加而残留在食品中的，即外源性兴奋剂。禁用方法及禁用物质：按照联合国教科文组织《反对在体育运动中使用兴奋剂国际公约》和国务院《反兴奋剂条例》的有关规定，在2023年12月29日国家体育总局发布了2024年兴奋剂目录。（目录清单见链接：https://www.sport.gov.cn/kjs/n5084/c27260605/part/27262172.pdf）1. 禁用方法：篡改血液/血液成分：包括血液回输或增加红细胞；人为提高氧气摄入输送或释放的方法等；化学/物理方法：包括置换/变更样本；12小时内静脉输液和/或静脉注射剂量不得超过100mL等；基因/细胞兴奋剂：包括使用核酸或核酸类似物（基因编辑、基因沉默和基因转移技术）；使用常规或经基因修饰的细胞。2. 禁用物质：蛋白同化制剂品种、肽类激素品种、麻醉药品品种、刺激剂（含精神药品）品种、药品类易制毒化学品品种、医疗用毒性药品品种以及其他品种共391种兴奋剂。在公布的兴奋剂目录中还有其他多种特殊品类的补充说明，比如有常见的：合成类固醇等：具有促进蛋白质合成的作用，可以使肌肉增大和力量增强，同时严重干扰体内激素平衡；玉米赤霉醇类：可促进蛋白质合成，有助于运动员提高肌肉力量；β激动剂类：可减少脂肪囤积，增加肌肉含量，短期效应会使得心率变快、血压升高、发热。运动员可借助此类药物获得热量和抗代谢效应，提高肌肉练力量；刺激剂：刺激中枢神经；生长激素：促进红细胞生成；利尿、遮掩剂：稀释、降体重等。并且在目录最后，提到该目录中尚未涉及的、且未经任何政府健康管理部门批准用于人体治疗的药物（例如尚在临床前或正在临床试验阶段或已经终止临床试验的药物、策划药物、仅批准作兽药的物质），在所有情况下禁用。检测手段：自国际奥委会在1964年奥运会上首次试行兴奋剂检测以来，国际上一直采用的是尿检。直到1989年，国际滑雪联合会才在世界化学锦标赛上首次进行血检。血检只是作为尿检的一种辅助手段，用来检测一些尿检中难于检测的违禁物质和违禁方法，主要针对异体输血等。尿样通过A、B瓶检查获取，两只瓶子上只有一串6位数的编码用于识别运动员身份，整个检测过程中，无人得知瓶子主人的真正身份。兴奋剂检测中心保存b瓶，a瓶送到兴奋剂检测实验室检查，兴奋剂检测实验室收到尿样后应尽快完成检测分析，样品分析严格采用经国际奥委会医学委员会批准的技术方法。检测技术：兴奋剂的检测难度在于检测品种广、项目多、时效性强。尤其是对于食源性兴奋剂，其在食物中含量很低属于ppb级甚至ppt级，比药物中的兴奋剂更难甄别。要准确检测这些痕量物质，需要低检测限的高端精密分析设备和先进的检验方法。通常的食源性兴奋剂检测的常用方法有酶联免疫法、高效液相色谱（HPLC）法、LC-MS法、GC-MS法等。奥运赛事对食源性兴奋剂检测的要求更加严格，《大型赛事食源性兴奋剂防控工作指南》推荐使用LC-MS、LC-MS/MS法，测定不同食品基质中的低浓度药物和兴奋剂及代谢物的残留，主要是因其灵敏度、选择性和特异性较好，同时部分样品前处理及净化工作较为简便，多被应用于尿液、血浆、肝脏以及动物肌肉等样品中β2-受体激动剂的检测。（*以下列出的仪器厂商及检测仪器设备等为仪器信息网收录行业应用方案以及发布在仪器信息网资讯栏目的部分产品，不具全面性，如有遗漏，欢迎大家留言补充。联系邮箱:wugq@instrument.com.cn）方法兴奋剂类型检测技术/仪器仪器厂商色谱＋质谱外源性类固醇稳定同位素技术德国元素AnthrovisION曲马多 (tramadol) 及其代谢物 O-去甲基曲马多干血斑 (点) 技术+LC-MS/MS（DBS-MS 500 HCT系统）瑞士 CAMAG公司 蜕皮甾酮、各类禁用物质及方法类兴奋剂检测Agilent 7000D 三重四极杆气质联用系统安捷伦（Agilent)Agilent 6470 三重四极杆液质联用系统动物源性食品中克伦特罗等48种兴奋剂QSight220三重四极杆液质联用系统珀金埃尔默类固醇LC-FAIMS-MS/MS赛默飞尿检中微量代谢物DFS高分辨质谱检测分辨内源性和外源性激素DELTA同位素质谱仪各类禁用物质及方法类兴奋剂检测超高效液相色谱-四极杆串联质谱联用系统沃特世动物性食品中糖皮质类激素兴奋剂Oasis® HLB 固相提取技术和ACQUITY UPLC® 超高效液相色谱/TQD 串联四极杆质谱系统多种高极性兴奋剂（包括米屈肼和如辛弗林、去甲苯福林、依替福林、奥洛福林及奥克巴胺等肾上腺素能药物）二维液相三重四极杆质谱联用法岛津麻醉类：海洛因、吗啡、美沙酮等；刺激类：咖啡因、可卡因、麻黄碱GCMS-QP2020麻醉类：海洛因、吗啡、美沙酮、、氯胺酮等；刺激类：安非他明、肾上腺素等；类固醇：β-激动剂、睾丸激素等；利尿剂：甘露醇、Dexa-trim等；其他：β-阻断剂、局部麻醉药等LCMS-8045LCMS-8050LCMS-8060肽类激素：人类生长激素（HGH）、促红细胞生长素（EPO）等LCMS-IT-TOF其他促红细胞生成素(EPOs)蛋白印迹杂交（Western Blotting）美国Precision Biosystems公司的Blotcycler肽类兴奋剂检测多功能水平电泳仪Multiphor II北京德泉尿检自动比重、酸碱度计鲁道夫（RUDOLPH）血检自动血液分析仪希森美康（SYSMEX）\（辅助设备）干血点检测专用摇床（THERMOMIER F1.5）艾本德（EPPENDORF）真空干燥离心机总之，兴奋剂检测不仅是科技与体育的结合，更是维护体育公平与正义的最后一道防线。虽然兴奋剂的使用手段在不断翻新，但反兴奋剂工作依然面临着巨大的挑战。需要各方共同努力，加强反兴奋剂宣传教育，完善反兴奋剂法规制度，提升检测技术水平，才能有效遏制兴奋剂的使用，维护体育竞赛的公平公正，保障运动员的健康权益。

现代体育竞技也是与兴奋剂的较量。奥运会作为最高水平的体育盛会，反兴奋剂自然是首当其冲的要务。 　　奥运反兴奋剂的工作由国际奥委会负责。国际奥委会证实，将在2012年伦敦奥运会上启用“生物护照”来阻止欺诈行为。 　　考虑到首次使用该检测方式，加之成本高昂，首批受“生物护照”监控的是自行车、划艇、田径和铁人三项赛项目。 　　生物护照 　　什么是“生物护照”检测呢?其基本原理是根据对运动员长期的血液指标进行跟踪，通过对某些指标的变量来判断运动员是否受到兴奋剂的影响。 　　因此，区别于传统的直接检测服用兴奋剂方式，“生物护照”则是以间接的方式来证明。对运动员长期运动生涯的血液和生物指标进行监控，让运动员难有可乘之机。 　　“生物护照”最早是在2008年的环法自行车赛上使用，很多评论人士说， 近几年的环法车赛竞争越来越激烈，难以预测， 或多或少与启用“生物护照”检测有关。 　　英国反兴奋剂中心(UK Anti-Doping)的科研和药物主任迈克尔斯托(Michael Stow)说，目前只对血色素、红血球和血细胞比容三项指标进行检测。 　　“这些都是试图改变供氧能力的显示，如果某人试图使用红细胞生成素或其它药剂，我们就能通过血液指标的变化察觉出来。” 　　斯托说，有效地进行反兴奋剂，需要将各种信息整合分析，“生物护照”只是各种信息当中的一部分，如果结合英国边境当局、海关和警察收集的信息，反兴奋剂就会更加有效。 　　不过批评者说，对决心要进行欺诈的运动员来说，“生物护照”也难以凑效，而且成本昂贵，只会使检测过程更加复杂。 　　今年年初，澳大利亚的科学家发表学术报告说，如果服用极微量的兴奋剂，血液指标不会出现明显变化，因此难以被检测出来。 　　伦敦奥运会希望成为最“干净”的奥运会，因此将进行最全面和充分的反兴奋剂检查，“生物护照”势必会发挥某些作用。

作为2012年伦敦奥运会官方赞助商， GE医疗在这个夏天向2012年伦敦奥运会和残奥会提供先进的医疗产品技术，在反兴奋剂斗争中发挥重要作用。 　　GE医疗集团下属的生命科学部门年销售收入达18亿美元，该部门所提供的技术和产品用于细胞和蛋白质、药物研发等基础研究，以及大规模生物制药。 ImageQuant™ LAS 4000数字成像系统是参加2012年伦敦奥运会的首批GE系列产品之一。此产品已被选择用于对奥运会运动员进行严格的重组促红细胞生成素(EPO)检测程序。这种提高成绩的药物可增加红血球数量，从而极大地改善氧气流并提高运动员的耐力。埃塞克斯郡哈洛市新建的反兴奋剂科学中心是奥运会有史以来最先进的药物检测实验室。EPO检测是将在反兴奋剂实验室执行的一组分析之一。该实验室是以葛兰素史克公司(GSK)的英国研发场所之一为基础的科学中心的一部分。GSK是2012年伦敦奥运会和残奥会的官方实验室服务提供商，该公司将提供设施设备，帮助来自伦敦大学国王学院的分析专家独立运营管理一个由世界反兴奋剂机构(WADA)认证的实验室。 　　新实验室的科学家团队领导人是伦敦大学国王学院药物控制中心主任David Cowan教授。协同该实验室工作的一名认证分析员Christiaan Bartlett评论说：“通常我们每年要检测大约7000个样本，但在奥运会期间，我们将在短短17天内检测5,000个样本，并且将在残奥会期间检测约1250个样本。过去10年中数字成像技术的进步意味着LAS4000可在短暂的曝光时间内以高灵敏度捕获高质量图像。配合GE 医疗电泳和蛋白质印迹设备使用时，ImageQuant™ LAS 4000可为我们提供极为详细的信息。这将帮助我们准确地识别重组EPO兴奋剂的使用，并保护清白运动员在公平竞争的赛场上进行比赛的权利。” 　　GE医疗集团生命科学部全球科研部产品主管Johan von Heijne先生表示：“我们的ImageQuant™ LAS4000已经被奥运会反兴奋剂实验室的Cowan教授及其团队选择为他们在该实验室的工作的一个重要部分，对此我们非常高兴。” 　　ImageQuant除作为2012年伦敦奥运会反兴奋剂检测过程不可或缺的部分之外，还用于其他一些由世界反兴奋剂机构认证的实验室，并被全球各地的科学家用于支持下一代药物治疗的研究。

澳门大学基于糖分析的中药质量评价获中国药学会一等奖　　从中国药学会获悉，近日，澳门大学中华医药研究院暨中药质量研究国家重点实验室(澳门大学)的赵静助理教授正式收到中国药学会通知，其论文“基于糖分析的中药质量评价”荣获“2016年中国药学大会暨第十六届中国药师周”优秀论文一等奖。　　“中国药学大会”作为全国药学领域最高及最大规模的年度学术盛会，于2016年12月在北京会议中心举行。本届会议主题为“服务创新驱动发展、推进健康中国建设”，出席会议的有国家食品药品监督管理总局、中国科协、两院院士、高等院校及相关领域专家学者等2000余人。中国药学会理事长桑国卫院士做开幕报告，药学会副理事长陈凯先院士、陈志南院士主持大会学术报告。从入选中国药学会下设的药剂学，生物医药，药物分析等9个专业委员会分会场637篇论文中，根据现场论文报告、交流答疑情况，通过专家评审、学会批准与公示，最终确定本次大会获奖优秀论文54 篇，其中一等奖5 篇，二等奖17 篇，三等奖32篇。　　评奖专家认为：“糖分析是分析化学领域的国际难题，论文作者建立的系统糖分析方法，既有效解决了具有中药特点的中药质量评价，也给生物制品、药物载体等多个药学领域研究拓展了思路与方法，具有重要意义。”　　现代研究表明，糖的功能不单是提供能量或保护，糖类化合物又与疾病的发生和发展密切相关。目前，糖类药物主要分为四大类，第一类是多糖药物及其衍生物类，如香菇多糖等 第二类是糖或含糖的小分子药物，如阿卡波糖等 第三类是糖蛋白药物，如红细胞生成素等 第四类是糖疫苗，如肿瘤疫苗等。糖类药物开发具有巨大前景，因此，在世界各地的糖类药物公司如雨后春笋般诞生，大的药物公司也纷纷加入这一竞争，但这些糖类药物的质量均一性及质量稳定性缺乏检测手段，一直严重困扰着糖类药物产品开发与生产，因此，赵静博士参与开发的一系列快速定性定量的糖分析测定方法显得极为重要，是打开糖类药物黄金市场的金钥匙。　　实际上，赵静博士还曾于2016年11月在国际药物分析界规模最大、演讲水平最高、最具国际影响力的PBA 2016(27th International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis, PBA 2016)大会上因枸杞多糖分析参选青年科学奖，并与李绍平教授共同指导的博士生邓勇以“药食用真菌糖类成分分析”的报告，从600多份海报中脱颖而出，获得优秀海报二等奖

近日，卫生部相关负责人透露，生物产业“十二五”规划基本上已经获批，有望于本月公布。生物医药尤其是生物仿制药是其中的重点领域，目前国家相关的拨款在70亿元以上。 　　上月月底在上海举行的第二届生物仿制药高峰论坛上，卫生部医药卫生科技发展中心主任李青透露，由发改委牵头制定的《生物产业“十二五”规划》在数月前已经送审国务院，基本上已经获批，“最近补充过一些名词解释的资料，其他没任何问题。如果没什么意外，11月就将公布。”此外，发改委、科技部、财政部和卫生部等多部门都制定了配套扶持政策。 　　生物药连续多年保持15%增速 　　在目前的经济形势下，生物医药产业已经成为不多的还维持热度的经济引擎之一，根据年初发布的《医药工业“十二五”发展规划》所提供的数据，目前全球已有100多个生物技术药物上市销售，另有400多个品种可能完成临床研究投放市场，在2010年世界前20位的畅销药物中，生物技术药物占到7种。生物技术药物收入已连续多年保持了15%以上的增速，是全部药品销售收入增速的2倍以上。 　　预计到2020年，全球生物技术药物将占全部药品销售收入比重的三分之一以上。 　　前美国驻华大使洪博培10月24日在“第二届BIO中国生物产业大会”上表示，当前全球经济不容乐观，“负债”、“转型”、“担忧”等字眼时常出现，生物医药作为一项有助于改善人类生命的产业，无疑将成为未来重点发展的领域。在中国老龄化带动医疗服务需求日益提升的大背景下，中美双方共同研究与合作的前景无限。 　　从国内发展情况看，政策面持续推动生物医药产业发展，包括重大新药创制科技专项、生物医药863计划、《国家中长期科技发展规划纲要(2006-2020年)》、《医药工业“十二五”规划》以及《“十二五”生物技术发展规划》等，无一例外地都将生物医药纳入重要发展领域。 　　未来十年生物药或仍由外资主导 　　目前我国的生物制药行业与化学药一样还是以仿制药为主。据相关人士透露，我国生物制药产业结构呈金字塔形，顶部包括中国生物技术股份公司在内的大型企业4家，中部由100多家中型企业组成，底部大多数为小型企业，主要生产普通疫苗、提取类产品或重组类的早期生物制品仿制药，包括人血蛋白、重组干扰素、促红细胞生成素(EPO)等。 　　中国已批准上市的13类25种382个不同规格的基因工程药物和基因工程疫苗产品中，只有6类9种21个规格的产品属于原创，其余都属于仿制。 　　生物仿制药的市场潜力巨大。据EvaluatePharm预测，2015年全球生物仿制药市场规模将增长到100亿美元，2020年更是增长到200亿美元。然而某外资药企研发部门主管对南都记者表示，中国的企业在生物仿制药的研发速度与精度上即使与同为发展中国家的巴西、印度比，也稍显落后。主要是因为目前中国的企业习惯于化学药的模式，而且目前整个制度层面主要还是沿用化学药的思路，再加上生物仿制药要比化学药仿制药的投入成本高，生物仿制药的开发和商业化平均需要投入1000万～4000万美元，传统的小分子仿制药仅需要100万～200万美元。预计至少在未来十年，生物仿制药市场可能还是维持外资唱主角的局面。

让激烈的比赛开始吧——GE LAS4000成为伦敦奥运会首批GE产品之一 GE医疗生命科学部出品的ImageQuant™ LAS 4000数字成像系统是参加2012年伦敦奥运会的首批GE系列产品之一。此产品已被选择用于对奥运会运动员进行严格的重组促红细胞生成素（EPO）检测程序。这种提高成绩的药物可增加红血球数量，从而极大地改善氧气流并提高运动员的耐力。 全球科研部产品主管Johan von Heijne先生表示：“我们的ImageQuant™ LAS4000已经被奥运会反兴奋剂实验室的Cowan教授及其团队选择为他们在该实验室的工作的一个重要部分，对此我们非常高兴。” EPO检测是将在反兴奋剂实验室执行的一组分析之一，该实验室在奥运会期间将每天24小时运转。该实验室是以葛兰素史克公司（GSK）的英国研发场所之一为基础的科学中心的一部分。GSK是2012年伦敦奥运会和残奥会的官方实验室服务提供商。 协同该实验室工作的一名认证分析员Christiaan Bartlett评论说：“通常我们每年要检测大约7000个样本，但在奥运会期间，我们将在短短17天内检测5,000个样本，并且将在残奥会期间检测约1250个样本。过去10年中数字成像技术的进步意味着LAS4000可在短暂的曝光时间内以高灵敏度捕获高质量图像。配合GE 医疗电泳和蛋白质印迹设备使用时，ImageQuant™ LAS 4000可为我们提供极为详细的信息。这将帮助我们准确地识别重组EPO兴奋剂的使用，并保护清白运动员在公平竞争的赛场上进行比赛的权利。”【关于ImageQuant™ LAS 4000】产品优势： 匹敌胶片的灵敏度 优于胶片的线性定量范围 免除冲洗胶片的繁琐和污染 无需估计曝光时间，快速得到“浓淡相宜”的结果 仪器特点： 超级CCD第四代super CCD，凭借独特的蜂窝状CCD和专利的电路改良，使芯片上有效感光面积最大化。在灵敏度、动态范围和信噪比三方面都有极大的性能提升。超大光圈镜头 采用F0.85的FUJINON镜头，是目前市面上最大光圈的镜头。其单位时间进光量大，非常适合弱信号的成像。该镜头专为超级CCD所设计，可以灵敏地捕获近至几十厘米的样品信号。曝光选项 可以在1/100秒到30小时之间进行设置。增量模式，循环模式和程序模式增加了曝光条件的多样性。以前设定的相关参数可以保存起来用于下一次成像直接调 用。性能参数： CCD芯片 富士超级CCD Areo Type芯片 15.6×23.4 mm 芯片分辨率 320万像素，2048×1472 像素尺寸 约11 μm 冷却方式 空气循环二级热电模块 冷却温度 -30℃(当室温低于28℃) 对焦方式 自动聚焦：远程控制 曝光时间 1/100秒-30小时(自动或手动输入) 动态范围 5个数量级 像素校正 暗场校正。平场校正和扭曲校正等 镜头高灵敏 F0.85 FUJINON镜头 VRD43LMD 3 最大样品尺寸 18×12cm(富士龙 VRF43LMD透镜) 像素融合 1×2，2×4，4×8和8×16像素

2017年6月20-22日，高压制备填料的领导品牌kromasil盛装出席了在上海新国际博览中心举行的“第十七届世界制药原料中国展(cphi china 2017)”及“第十二届世界制药机械、包装设备与材料中国展(p-mec 2017)”。 在本届展会上，kromasil首次与全球同步发布了其eternityxt c8 uhplc/hplc色谱柱产品，eternityxt c8 uhplc/hplc是目前世界上首款ph适用范围最宽（1-12）的c8分析色谱柱。从此以后，广大分析工作者可以在ph 1-12的范围内自由选择多种粒径(1.8 - 5μm)的分析、半制备色谱柱，以满足各种化合物、尤其是碱性化合物的分析分离纯化工作。本次推出的eternity c8 uhplc/hplc是kromasil eternityxt家族中的一员，其宽泛的ph适用性一直受到广大客户的好评。其不仅可以在ph 1-12的范围内正常使用进行分离纯化工作，甚至在进行cip时候可以使用1 mol/l的naoh进行清洗。 与此同时， kromasil还根据客户的应用不同，展出了其在高压制备填料市场的领先技术。凭借在上样量、使用寿命等方面的优异特性，kromasil高压制备填料被广泛应用于在胰岛素及其类似物的精纯步骤，以获得99%乃至更高纯度的原料药物；近些年来，其填料更被推广使用在比伐卢定、利拉鲁肽、奥利司他、达托霉素、 卡波酚净、 纽莫康定b0、促红细胞生成素、 氯吡格雷、他克莫斯、 高纯鱼油、甜菊提取物等高价值药物原料的纯化步骤中，应用范围的拓展使得kromasil填料近年的业绩获得突破性增长，并在本次展会上受到与会医药企业的广泛关注。 本次展会kromasil联合国内南北两大代理上海鲲霆生物科技有限公司、深圳爱湾生物科技有限公司共同展出。上海鲲霆生物科技有限公司是kromasil国内色谱填料的总代理商，也是色谱柱的华东、华北区域代理商。他们可以从分析到制备领域提供色谱条件的摸索、放大、工艺开发等服务。深圳爱湾生物科技有限公司是深圳爱湾医学的全资子公司。根植于其在医学检验、药物分析等方面的多年的经验，其可以在手性药物分析、生物样本分析、医学样本分析等多个方面提供分析方法的开发和支持服务。我们相信，随着上海鲲霆和深圳爱湾加入kromasil代理体系，不仅可以大大提高传统kromasil用户的技术支持和服务，而且可以在全球热门的医学方法开发、生物样本分析、色谱工艺开发等方面拓展kromasil的业务范围，提高kromasil在中国的市场地位和售后服务。 kromasil品牌 kromasil是akzonobel集团旗下高效化学品的著名品牌，是全球领先的高性能硅胶基质液相色谱柱填料品牌。kromasi高性能多孔型硅胶填料可广泛应用于胰岛素及其类似物、比伐卢定、利拉鲁肽、达托霉素、epo等多肽、小分子、蛋白药物等的高纯度纯化。28年来，kromasil的经营理念是为制药行业提供以硅胶为基体的性价比高的，用于医药分离纯化的色谱填料和用于分析的色谱柱。

安捷伦科技公司推出 AdvanceBio 肽图分析色谱柱 新的 HPLC 和 HILIC 解决方案在生物药物开发中实现更快更稳定的分析 2013 年 5 月 13 日，加利福尼亚州圣克拉拉市 &mdash 安捷伦科技公司（纽约证交所：A) 今日推出 AdvanceBio 色谱柱系列的最新成员。新型 AdvanceBio 肽图分析 BioHPLC 和 ZORBAX RRHD 300-HILIC 色谱柱旨在为各种蛋白质、单克隆抗体、多肽和其他生物制剂的分离、表征和分析提供卓越性能。 两根色谱柱都能让用户体验前所未有的分析速度和高分离度结果。 安捷伦化学品业务部副总裁兼总经理 Anne Jones 说：&ldquo 我们非常高兴能够为我们的制药客户和其他生命科学研究人员推出这些潜力无限的新型色谱柱，成就他们对极致分析灵敏度和速度的追求。我们始终致力于提高生物色谱法的准确度和效率，可以从这些产品身上得到印证。&rdquo 新型 AdvanceBio 肽图分析色谱柱能够快速测定蛋白质的一级结构，还能以无与伦比的速度和灵敏度鉴定变异。事实上，与使用全多孔 HPLC 色谱柱进行常规肽图分析相比，使用该色谱柱得出准确结果的速度要快二至三倍，而常规肽图分析耗时长达 60 分钟。 每批 AdvanceBio 图谱分析柱均采用多肽混合物标样进行严格测试，确保适用性和高重现性，使其能鉴定复杂多肽图谱中的重要多肽。所有可用色谱柱可耐压 600 bar，使 UHPLC 仪器发挥出最佳性能。同时，用于 400 bar 的旧型号仪器时也有卓越表现。 应用 AdvanceBio 肽图分析色谱柱非常适合分析高度复杂的肽谱，能为许多蛋白消化物，包括 rhEPO 提供 100% 序列覆盖率，有 45 糖肽匹配。应用简报使用 Agilent AdvanceBio 肽图分析色谱柱进行 EPO 的高分辨率糖肽谱分析中对这些功能进行了一一探索。 ZORBAX RRHD 300-HILIC 色谱柱是目前市面上仅有的亚 2 &mu m、300Å HILIC 色谱柱。专门为寻求更快、更高分离度分离多肽、极性糖肽、蛋白质、抗体、偶合物、新生物体和生物制药的用户而设计。 亲水相互作用液相色谱 (HILIC) 专门针对亲水性糖肽变异体分析。使用该色谱分析极性糖肽可得到出色的峰形，而如果采用反相色谱柱分析则只能得到有限的保留率和分离度。1.8 &mu m 填料的 ZORBAX RRHD 300-HILIC 色谱柱能够实现耐压 1200 bar、快速分析以及卓越的准确度。它们为反相 HPLC 提供了正交和互补分离。应用简报利用 HILIC 和反相色谱分析促红细胞生成素的糖肽和糖型中深入探讨了这些功能。 关于安捷伦科技 安捷伦科技（纽约证交所：A) 是全球领先的测试测量公司，同时也是化学分析、生命科学、诊断、电子和通信领域的技术领导者。公司拥有 20,500 名员工，遍及全球 100 多个国家，为客户提供卓越服务。在 2012 财年，安捷伦的净收入达到 69 亿美元。如欲了解关于安捷伦的详细信息，请访问：www.agilent.com.cn。

随着中国复星医药引进德国BioNtech mRNA新冠疫苗脚步加快，特别是近期国家药监局已完成专家评审，正在进行行政审批阶段，上市已经指日可待。鉴于中国大陆目前广泛接种了灭活病毒疫苗和腺病毒疫苗，此mRNA疫苗一旦获批，面对多款不同技术路径疫苗，如何施打? 是需要进一步研究和探讨的课题，是否可作为加强针与中国现有的疫苗混打？这些课题需要参考国际上相关研究成果和经验。本文重点综述mRNA疫苗研究中Ella全自动微流控ELISA技术应用案例，包括疫苗混打研究中相关指标检测。Ella全自动微流控ELISA技术是ProteinSimple研发和生产，作为创新型循环系统蛋白质标志物检测平台，已被广泛用于新冠病毒研究和mRNA疫苗开发中。01柳叶刀：BioNtech和阿斯利康疫苗混打研究本研究（CombiVacS）旨在评估第一针接种ChAdOx1-S疫苗(Vaxzevria, AstraZeneca, Oxford, UK)人群，第二针接种BNT162b2 (Comirnaty, BioNTech, Mainz, Germany)作为加强针的免疫原性和反应原性。本研究是西班牙五所大学附属医学院进行的一项多中心、开放标签、随机对照的临床II期实验研究。采用假病毒中和试验来评估抗体功能，并采用干扰素-γ（IFN- γ） 免疫试验来评估细胞免疫反应。血浆中细胞因子IFN- γ浓度采用Ella全自动微流控ELISA定量评估。作为新一代免疫学检测技术Ella以全自动化、标准化和高精度等技术优点受到了专家们认可，适合进行多中心临床实验数据检测和对比统计分析。本研究结果发现，对照组在第0天和14天IFN- γ浓度值无明显变化，而混打疫苗干预组，14天IFN- γ浓度（521.22 pg/mL）比第0天IFN- γ浓度（129.63 pg/mL）有显著增加。采用Ella检测IFN- γ水平，已成为评价疫苗细胞免疫效果的重要和快速技术手段。图1. 干预组与对照组在混合接种疫苗D0和D14天 IFN-γ释放值对比02bioRxiv：感染过新冠病人可能无需注射第二针疫苗针对COVID-19 mRNA疫苗开发和部署加速了全球疫苗接种计划，目前德国BioNtech疫苗BNT162b2已被证明在未感染个体可提供95%的效力，但第二针疫苗对先前感染新冠康复个体的影响一直受到质疑。该研究是西班牙La Paz医院、美国纽约西奈山伊坎医学院和杜克-新加坡国立大学医学院等多个单位合作，作者通过比较未感染和先前感染个体接种BNT162b2疫苗的体液免疫和细胞免疫指标，发现对第二剂可提高未感染个体的体液免疫和细胞免疫，而与之相反，第二剂疫苗导致COVID-19康复个体细胞免疫力降低。图2结果表明，注射第一剂疫苗10天后，与未感染个体相比（110.4 pg/mL, N=20），先前感染COVID-19康复个体（520 pg/mL，N=21）具有更强的IFN-γ反应。20天时，新冠康复个体维持T细胞免疫反应，而未感染个体IFN-γ反应迅速下降。令人预想不到的是，接种第二针后10天，COVID-19康复个体的IFN-γ产生浓度显著下降，这些发现表明，康复个体似乎没有从第二针接种中受益。图2. 不同时间截点，采用Ella平台检测和评估IFN-γ浓度03bioRxiv：快速检测新冠T细胞免疫应答宽动态范围方法2021年6月，杜克-新加坡国立大学Antonio Bertoletti教授团队，发表题为“Rapid determination of the wide dynamic range of SARS‐CoV‐2 Spike 1 T cell responses in whole blood of vaccinated and naturally infected”文章。该研究详细描述一种简单快速实验方案，可高效评估接种新冠疫苗和自然感染者全血中T细胞免疫应答。目前，主要采用ELISPOT和基于流式细胞技术活化诱导细胞标志物方法，这些传统方法的复杂性限制了病毒特异性细胞毒性T细胞应答检测能力。作者开发了一种基于Ella微流控ELISA技术的全血细胞因子释放测定 (CRA) 实验，可快速、简单和准确的对大量人群中的新冠T 细胞进行常规测量。现有研究表明，血清中和抗体的数量无法预测个体中相应的Spike特异性T细胞反应，基于Ella平台全血细胞因子释放实验可更精确地评估T细胞在感染或疫苗接种后的保护能力，可与抗体检测互补，有助于确定当前疫苗策略。图3. 工作流程对比示意图04Moderna：mRNA化学和制造工艺对先天免疫激活的影响先天免疫是人体免疫系统的第一道防线，可通过模式识别受体（PPR）识别入侵抗原的病原体相关模式分子（PAMP），启动级联反应进行免疫应答。mRNA作为外源核酸物质，进入体内可激活先天免疫应答，可阻止mRNA表达并降解mRNA。在体外RNA合成过程中会产生双链RNA（dsRNA），也会通过I型干扰素介导的免疫反应阻止mRNA翻译和降解mRNA。从这些方面看，mRNA本身和制造过程中杂质都可诱导先天免疫激活反应，导致对产品本身影响，需要尿嘧啶化学修饰和生产工艺调整，防止细胞先天免疫激活和随之而来的蛋白质表达减少。Moderna公司科学家通过设计多种细胞和体内模型，比较了编码人类促红细胞生成素（hEPO）mRNA经过经典尿嘧啶或N1-甲基假尿嘧啶（1mΨ）修饰，还有合成过程杂质dsRNA对免疫激活的影响。研究发现，尿嘧啶修饰和减少dsRNA杂质对于控制治疗性mRNA的免疫激活是必要和充分的。本研究采用Ella微流控ELISA检测细胞培养上清液和小鼠血清中hEPO和INF-β。图4. hEPO和INF-β检测结果Ella全自动微流控ELISA系统已成为国际领先的mRNA疫苗研发生物技术手段，并被众多临床机构所采用。同时，Ella平台也被用于新冠病毒病人细胞因子风暴CRS临床监测。Ella，以技术先进性、高灵敏度、高精度和高度自动化标准化，成为欧美细胞因子等蛋白标志物检测主流技术平台。参考文献：1. Immunogenicity and reactogenicity of BNT162b2 booster in ChAdOx1-S-primed participants (CombiVacS): a multicentre, open-label, randomised, controlled, phase 2 trial. Lancet. Published Online June 25, 2021. S0140-6736(21)01420-32. Camara C, Lozano-Ojalvo D, Lopez-Granados E, Paz-Artal E, Pion M, Correa-Rocha R, et al. Differential effects of the second SARS-CoV-2 mRNA vaccine dose on T cell immunity in naïve and COVID-19 recovered individuals. bioRxiv. 2021:2021.03.22.436441. 3. Le Bert N, Clapham HE, Tan AT, Chia WN, Tham CYL, Lim JM, et al. Highly functional virus-specific cellular immune response in asymptomatic SARS-CoV-2 infection. J Exp Med. 2021 218(5). 4. Anthony Tan, Joey Ming Er Lim, et.al. Rapid determination of the wide dynamic range of SARS‐CoV‐2 Spike 1 T cell responses in whole blood of vaccinated and naturally infected. bioRxiv preprint, this version posted June 29, 2021. 5. Impact ofmRNA chemistry and manufacturing process on innate immune activation. Nelson et al., Sci. Adv. 2020

毛细管电泳技术在蛋白药物研发和质量控制中的发展 随着蛋白药物的开发热潮在全球兴起，毛细管电泳技术（Capillary Electrophoresis, CE）作为一种新兴的研发和质控的分析技术也越来越受到各大生物制药公司的青睐和法规机构的重视。全球大部分生物制药公司均已使用毛细管电泳系统用于蛋白药物的研发及质量控制分析。从培养基优化、克隆筛选、配方稳定性研究和纯化过程监测，到蛋白表征、相关杂质检测、蛋白结构鉴定和蛋白质药物产品的质量控制，蛋白药物的各个环节都需要使用到毛细管电泳。例如蛋白的纯度测定，已经从SDS-PAGE转变为十二烷基硫酸钠-毛细管凝胶电泳（CE-SDS）方法；蛋白质的等电点测定，毛细管等电聚焦(CIEF)比传统胶条方法更为准确；糖蛋白药物的糖基异质性表征，毛细管电泳是高分辨率分析方法之一。在各国药典中，毛细管电泳技术用于蛋白药物的检测方法也不断丰富与发展。药典中最早出现其对蛋白药物检测方法是促红细胞生成素(EPO)的糖异构体测定。糖蛋白的异构体差异小，普通的分析方法很难将EPO中的多种异构体分离定量。欧洲药典和美国药典将毛细管电泳方法确定为EPO异构体分析的标准，解决EPO产品中各种糖基化异构体的分离和定量问题。此外，生长激素的相关杂质检测标准也采用了毛细管电泳的方法。对于单克隆抗体药物的分析，在2006年，由惠氏、安进、基因技术、礼来、辉瑞、强生及加拿大卫生署等十几个实验室对“CE-SDS方法对单抗药物纯度分析”进行了联合验证。他们对方法的稳定性、可靠性、准确性等多方面进行了研究和考察。研究结果表明CE-SDS方法比传统的SDS-PAGE更适合单抗药物的表征与质量控制，其结果的稳定可靠性要远远超过SDS-PAGE，建议各生物制药公司使用CE-SDS代替原有的SDS-PAGE作为研发与质量分析的平台。随后，上述生物制药公司及机构又针对“CIEF方法进行单抗药的等电点测定及电荷异质性分析”、“CZE方法快速分析单抗药的电荷异质性”，“毛细管电泳技术进行单抗药中的糖基分析”进行了多实验室联合验证，结果展现了CE技术用于单抗药质量控制的优势及可行性。美国药典于2013年发布了利妥昔和曲拓珠等单克隆抗体药物的纯度检测、等电点/电荷异质性分析和糖基分析采用毛细管电泳方法。在中国，中国食品药品检定研究院于2012年联合国内外生物制药机构对“CE-SDS方法对单抗药物纯度分析”进行了验证，确认了CE-SDS方法在分辨率、定量准确性及自动化程度等方面的优势，并指出CE可以对单抗非糖基化重链进行准确定量。基于以上工作以及毛细管电泳技术在单抗药分析中的强大优势，中国药典2015版的第三部中增加了CE技术，明确了CE是单克隆抗体药物大小变异体、电荷变异体、鉴别与一致性和糖基化修饰分析中的重要方法。随着CE技术在生物制药领域的快速发展，以及新的蛋白质药物的不断上市，将会有更多的CE方法出现在各国药典中。毛细管电泳技术在单克隆抗体药物分析中的应用（1）单克隆抗体药物的纯度及大小异质性分析SDS-PAGE方法对单抗药物进行纯度分析，在分辨率、定量准确性和自动化程度上，已经不能满足生物制药研发和质量控制的要求。CE-SDS方法基于蛋白分子量的差异分离，用于还原和非还原单抗药物的纯度分析，免去了复杂的人工操作、定量更加准确，具有更高的分辨率，在还原模式中可对非糖基化重链进行分离和准确定量。图1. CE-SDS对还原单克隆抗体药物的纯度分析[1]选用不同的毛细管长度，可以实现高分辨率模式和快速模式的纯度分析。高分辨模式的CE-SDS方法提供最高的分辨率，快速模式的CE-SDS方法提供更短的冲洗和分离时间，提高了分析的通量。CE-SDS结合激光诱导荧光检测器（CE-SDS-LIF），通过5-Tarma或FQ染料对蛋白进行标记，可以获得更高的灵敏度，可以检测到含量在0.01%的杂质碎片。此外，LIF检测器的使用，可以最小化基线波动，使积分和定量更加准确。（2）单克隆抗体药物等电点的测定和电荷异质性的分析单抗药物在结构上会发生糖基化、脱酰胺化、异构化、氧化等翻译后修饰，造成蛋白表面电荷的改变，引起单抗的电荷异质性。每个变异体具有不同的等电点。基于等电点分离的毛细管等电聚焦技术(cIEF)，可以对单抗药物的变异体进行高分辨率的分离和定量，可分离0.03个pI差异的变异体。方法使用等电点Marker制作校准曲线，对变异体的等电点进行准确的测定。是单抗药物等电点测定和电荷异质性分析的重要方法。图2. CIEF方法对单克隆抗体药物的等电点和电荷异质性分析[5]针对不同pI范围的蛋白样品，可以通过选用适当的两性电解质来实现高分辨率的分析。如对于大部分单抗，其pI值位于7-10之间，可使用pH 3-10范围的两性电解质；对于pI 在5-7范围内的蛋白样品，可使用pH 5-8的窄范围两性电解质；而对于pI 小于5的酸性蛋白，则可以使用反向聚焦和迁移模式，实现更好的分析。 （3）CZE方法对单克隆抗体药物电荷异质性的快速分析毛细管区带电泳（CZE）基于分析物电荷/体积的比进行分离，是毛细管电泳技术中最简单、快速的模式。由于单抗药物的各个变异体分子体积近乎相同，因此在CZE分离模式中，电荷变异体的分离取决于表面电荷的差异，与CIEF模式的变异体分离相一致。因此，CZE成为快速电荷异质性分析的平台方法被生物制药行业所使用。此外，由于CZE方法简单快速的特点，它也被用于单抗药的鉴别分析中。图3. 同一种CZE方法对23种单抗药物的电荷异质性分析[3]（4）单克隆抗体药物的糖基异质性分析单克隆抗体等糖蛋白药物中，糖基的种类和排列顺序会导致糖基异质性。单抗药物的糖基化修饰对其安全性和药效有着很大的影响。因此对糖基异质性的质量控制十分重要。毛细管电泳方法对糖基异质性分析的流程包括糖蛋白中糖基的释放、糖基的标记和毛细管电泳分离。磁珠辅助的糖基释放和标记，使得前处理可在1小时内完成，加快了前处理的时间。采用APTS作为荧光标记物，不仅可以通过增加电荷提高分离效率， 还通过LIF检测实现了高灵敏的糖基分析。毛细管电泳技术对糖基分析的优势在于分辨率高，速度快。不但可以区分出一个糖基的差别，相同分子量的糖基异构体也可以得到分离，整个分离过程可在5-20分钟内完成。图4. CE-LIF方法对单抗药糖基分析的电泳图毛细管电泳技术在重组蛋白类药物分析中的应用重组人促红细胞生成素（rhEPO）是高度糖基化的蛋白药物。糖基化的异质性导致了多种变异体的存在。采用CZE方法可对EPO的变异体进行分离和定量，该方法已经成为欧洲药典中EPO变异体分析的标准方法。此外，CIEF方法也可以实现对EPO中各个变异体的高分辨分离，不但可以获得与CZE方法相同的变异体数目和定量信息，还可以提供每个变异体的精确的等电点数值。在对不同来源的EPO产品与参考品的比较中，可使用等电点对变异体进行鉴定。图5. CZE方法对EPO变异体的分析重组人生长激素（rhGH）的纯度及异质性分析中，CZE方法分离度高、定量准确，也已为欧洲药典所采用。图6 CZE方法对rhGH的电荷异质性分析总结在蛋白药蓬勃发展的今天，毛细管电泳技术以其分辨率高、模式多等优势，在蛋白药研发和质控的过程中起到了不可或缺的作用，被越来越多的企业和监管机构所认可，用于蛋白药的纯度、等电点及电荷异质性、糖基等分析中。随着蛋白药物、细胞/基因治疗以及新型疫苗等生物制品的不断发展，毛细管电泳技术将会具有更大的应用空间，在蛋白、核酸及病毒颗粒等分析中，发挥它的优势，提高生物制品的质量控制标准。

目前全球所有的顶级化工www.ccin.com.cn企业都在投资生物技术研究，生物产业将成为增长最快的经济领域。在中国，以分子生物学、细胞生物学、发酵工程和酶工程为代表的生物技术在医疗、农业、能源、环保、食品、材料、纺织、建筑等领域起到重大促进作用。发展生物产业既依赖化工科技的突破，同时也将推进传统化工产业升级。 　　工业生物技术： 　　掀起绿色制造革命 　　生物能源、生物环保、生物制造等工业生物技术产业将是生物产业中的快速发展领域，也是我国应加强技术开发力度、及时跟进的新兴行业。提升现代发酵、生物催化等技术，打造工业生物技术产业，对于促进传统化工产业的升级改造、推进绿色制造业发展意义重大，是缓解化石能源紧张、保障国家能源安全、实施循环经济的迫切要求。到2020年，生物质能源占世界能源消费的比重将达到5%左右，生物基材料将替代10%～20%的化学材料，精细化学品的生物法制造将替代化学法的30%～60%。 　　发展生物产业，需要加强重大技术的基础研究和产业化应用，提高酶工程、发酵工程等生物技术水平，加快传统化学制造业的改造。重点包括开发生物燃料、溶剂、氨基酸与有机酸、功能性食品添加剂、生物材料、生化产品等，利用可再生的生物质原料生产乙醇、乳酸、1,3-丙二醇、1,4-丁二醇、琥珀酸等平台化合物，扩大乙烯、聚乳酸、纤维素等大宗原料化工品和生物材料生产规模，支持生物可降解溶剂、润滑剂、绿色表面活性剂、环氧树脂固化剂、聚酯(醚)多元醇等绿色精细化学品的产业化技术开发，注重赖氨酸、谷氨酸、苹果酸、木糖醇、柠檬酸等功能性食品与保健品生物合成开发规模。在生物环保领域，应加快推广应用发展生物漂白、生物制浆、生物制革和生物脱硫等绿色生产工艺新工艺、新设备，重点发展高性能的水处理絮凝剂、混凝剂等生物技术产品，鼓励废水处理、垃圾处理、生态修复生物技术产品的研究和产业化。 　　农用生物制品： 　　变革传统农化产业 　　农业是国计民生的基础，也是生物技术大展身手的舞台，特别是农药和化肥领域，发展以生物农药、生物化肥等农用生物制品，对于农业发展关系重大。 　　利用生物技术开发生物农药，具有资源来源广、低污染、低残留等优点。推广生物农药是实现现代农林业可持续发展、保护生态环境安全、发展绿色农业的重要途径。目前我国生物农药在诊断、制剂工艺、环境监测等环节上还缺乏配套技术，产业体系不健全，应重点利用生物技术进行病理、药理、代谢研发，制订生物农药标准规程等，加强生物农药企业创新能力和产业竞争力，提升微生物农药、植物源农药、生物化学农药、转基因生物农药和天敌生物农药开发技术，开展病毒制剂、真菌制剂、蛋白制剂、壳寡糖制剂等新型生物农药的产业化。 　　在化肥领域，针对传统化肥肥效快、利用率低的现状，利用生物技术可以有效提升化肥产品的使用效果，推进节能减排，实现产业更新升级。采用生物酶活化剂加入磷肥生成生物酶活化磷肥，可以减少土壤对磷的固定和氮的损失，提高磷的利用率和延长肥效，而将金属蛋白酶加入尿素中开发的多肽尿素，也可以有效提高氮肥利用率。 　　生物原药： 　　扩大规模问鼎高端 　　作为生物产业的重点和高端领域的生物原料药产业，我国暴露出产业规模小、自主创新能力弱、成果转化率低的问题。目前生化类原料药主要产品为抗生素、维生素、氨基酸、有机酸类等，很多产品科技含量低、附加值低、能耗高、污染高。特别是在生物技术原料药等高端领域，由于产业研发投入高、成果转化难度大，国内产品还主要以仿制为主。我国生物医药的技术专利明显偏少，上市的专利产品更是少之又少。目前全球生物技术专利中，美、欧、日分别占59%、19%和17%，包括中国在内的发展中国家仅占5%。 　　我国生物原药行业必须着力发展以现代前沿科技为依托的高新技术产品，转变现有生物原药企业产业生产方式，进一步加强自主创新能力，构建比较完善的产业链，尽快培育有核心竞争力的龙头企业和大批成长性良好的中小企业 形成一批有自主技术的大型生物企业，重点突破以促红细胞生成素、重组人胰岛素和粒细胞集落刺激因子为主要产品的重组白蛋白，以及单克隆抗体和疫苗等生物技术原料药产业。

孙杨、霍顿事件，在各大网络媒体传的沸沸扬扬，一道“墙”挡不住霍顿的ins被群殴。各方要求霍顿对其言行做出道歉。中国在反兴奋剂工作上作出的巨大努力有目共睹，“干干净净去参赛”是一贯的严格要求。而在世界范围内，对兴奋剂零容忍当然是应该的，但尊重事实和规则、拒绝歧视和双重标准也是必须的。今天，来跟大家聊聊伴随奥运出现的——兴奋剂。　　里约大冒险之兴奋剂检测　　奥运开赛，在关场馆建设和安全保障等种种问题暴露出来后，让人惊讶的还不仅仅是城市的混乱。就在里约奥运会开幕前夕，一条消息让奥粉们都惊呆了——　　担负奥运赛场兴奋剂检测任务的实验室竟然被世界反兴奋剂机构(WADA)叫停了!原因竟然是认证! 担负奥运赛场兴奋剂检测任务的实验室竟然被世界反兴奋剂机构(WADA)叫停了!原因竟然是认证! 据悉，技术失误导致误报是本次暂停的原因。　　7月20日，世界反兴奋剂机构宣布，位于里约热内卢的巴西兴奋剂检测实验室在被暂停资格近一个月后重新获得认证，实验室将在里约奥运会和残奥会期间完成所有兴奋剂检测样品的鉴定。　　早在2014年巴西世界杯期间，里约兴奋剂检测实验室就被暂停过资格。世界杯期间的兴奋剂检测全部在瑞士洛桑的实验室完成。　　　另外，据外媒称：里约奥运会将首次使用基因检测技术，以检测运动员是否为了提高成绩而非法注射“兴奋剂”。这种基因检测技术可以检测出运动员是否有红细胞生成素(EPO)激素人造基因，该基因可模仿人体内含氧红细胞的生成。里约奥运会首次使用基因检测技术检测兴奋剂　　目前，全世界只有少数几家实验室有能力提供基因兴奋剂，能够检测这种作弊手段的实验室更是凤毛麟角。　　　兴奋剂检测实施的开始　　1960年罗马奥运会，丹麦自行车运动员克努德.詹森在比赛中猝死，尸检发现其死因是服用酒精和苯内胺的混合物。服用苯内胺在当时体育界颇为流行，到1964年东京奥运会，这种情况已愈演愈烈，在奥运村的洗手间里，到处可见运动员随手丢弃的注射器。　　迫于形势，国际奥委会决定从1968年墨西哥城奥运会正式开始实施兴奋剂检测。至2008年北京奥运会，40年间共有90名运动员因兴奋剂事件被取消成绩。　　据悉，伦敦奥运会开始之前，世界各地的反兴奋剂机构已经查出了超过100例服用兴奋剂的运动员。国际奥委会要求确保本届奥运会出现兴奋剂丑闻，并采取了”零容忍”的对策，并称不能让比赛因兴奋剂问题而蒙上阴影。　　历史上的兴奋剂丑闻盘点　　A 最早的丑闻：希克斯　　1904年第三届奥运会在美国圣路易斯举行。本届马拉松冠军由美国人希克斯获得。事后，他的教练揭露在那次比赛中弄虚作假：”离终点还有7英里时，希克斯已经精疲力尽跑不动了，很想退出比赛，我劝住了他，给他注射了两针，喝了杯法国白兰地，药力和酒精使他处于高度兴奋状态，他跑到了终点。”希克斯成了奥运史上第一个服用兴奋剂的人。　　B 最早被收回金牌的丑闻：德蒙特　　1972年慕尼黑奥运会，当时年仅16岁的美国选手德蒙特夺得了400米自由泳冠军，但是因服用麻黄碱没有通过其后的药检，金牌授予了第二名库勃。29年后，美国奥委会宣布，德蒙特并不是故意服药的，他当时服用的治疗哮喘的药物中含有违禁药物，在随后队医的声明中也澄清了此事，但是这份声明因为某些原因并没有送到国际奥委会的手中。2001年，国际奥委会终于为德蒙特恢复了名誉。　　C 最震惊世界的丑闻：本约翰逊　　牙买加出生的本约翰逊在1988年汉城奥运会百米比赛中创造了9.79秒的世界记录。代表加拿大出赛的约翰逊绰号”人弹”，这个绰号的意思是说他的速度超过飞驰的子弹。然而，药检证明约翰逊使用了违禁药物康力龙，约翰逊的”人弹”速度原来是依靠”药弹”创造出来的，约翰逊也因此被誉为体育史上空前绝后的一代”药王”，至今都是人们谈论不绝的话题。　　D 最让人失望的丑闻：琼斯　　2007年10月6日，美国女飞人琼斯承认，她在2000年悉尼奥运会前使用了违禁药物类固醇类的兴奋剂，并就此宣布退役，交出7年前获得的3金2铜共5枚奖牌。消息一经披露，举世震惊，很多人无法相信，国际田联主席迪亚克发表声明，称琼斯事件为体育史上最大的欺骗事件之一，并对琼斯服药”深感失望”。　　E 最另类的丑闻：奥康纳　　这个丑闻的另类是因为：它不是人服药，而是动物，这是奥运会历史上第一次因动物服用兴奋剂而被追缴金牌。2004年雅典奥运会上，爱尔兰骑手奥康纳夺得个人障碍赛项目的金牌，不过在他的赛马“沃特福德水晶”体内发现了禁药。国际马术联合会剥夺了他的金牌，他并被处以三个月的禁赛，罚款2220英镑。巴西人佩索阿接过了这枚金牌。　　F 最戏剧性的丑闻：霍伊　　2004年雅典奥运会上，德国女骑手霍伊的金牌出现戏剧性变化。霍伊是马术个人三日赛和团体三日赛的双料冠军，她随德国队夺得团体三日赛金牌后，裁判认定霍伊两次越过起跑线，属于违规，应该扣除其分数，冠军改为法国队。不过，短短几小时后，金牌又回到了德国人手中，裁判监督委员会认为当值裁判未将时间因素考虑在内。次日，其他国家再次向体育仲裁法庭抗议，金牌重被剥夺。她的个人项目金牌，也因同样问题被判给英国选手莱斯莉。就在霍伊还在为其金牌被剥夺感到冤枉时，她的坐骑“美冠鹦鹉”又被查出服用兴奋剂。　　G 最啼笑皆非的丑闻：肯特里斯、塔努　　肯特里斯和塔努是希腊的民族英雄，前者曾摘得悉尼奥运会男子200米冠军，后者也是悉尼奥运会女子100米的银牌得主。他们在距雅典奥运会开幕仅有24小时之时缺席了例行药检，并在缺席药检后几小时的一次莫名其妙的摩托车车祸中受伤，再次缺席听证会。最终，希腊的这两位“丑闻双星”双双被取消参赛资格，并被禁赛两年，给希腊抹黑!中国兴奋剂事件　　而不得不说的是6月国际田径界最大的新闻：　　俄罗斯田径队将确定无缘今年8月的里约奥运会。由于涉嫌"系统性"使用兴奋剂，国际田联于6月17日做出了维持去年11月原判的决定，将俄罗斯田径队拒于今年的奥运会门外。更严重的是，随着事件的进一步发酵，国际奥委会险些将“战斗民族”从今年的奥运会彻底消失。　　　　检测兴奋剂的方法和程序　　自从1968年开始尿检、血检以及尿检和血检相结合的兴奋剂检测以来，分析化学尤其是药物分析成为兴奋剂检测的生力军，气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术被认为是较为理想的检测手段。　　随着分析化学中的分离技术发展和新的分析仪器的出现，更多的兴奋剂可以被检测出来：　　但是兴奋剂的检测仍然是比较困难的，因为违禁药物在体内的含量很低 　　时需要检测其代谢产物 在药物代谢过程中，不同的使用者存在个体差异 　　而且用药时间长短不同，药物在体内的浓度不同 　　有的兴奋剂在代谢后，可能转化为其它类的兴奋剂。图为便携式尿比重检测仪　　检测兴奋剂的方法主要有两种:尿液检测和血液检测。　　血液检测是一种损伤性检测，而且由于一些宗教性因素，现在还没有实施。现行的兴奋剂检测主要是进行运动员的尿液检测，中国在1999年的田径比赛中已经开始进行血液检测的试验。　　因此，反兴奋剂的斗争是一项长期而艰巨的任务，尤其需要分析化学能够提供更新的、更为有效的分析检测手段，以维护、弘扬神圣的奥林匹克精神。

p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201910/uepic/989e775b-7990-4242-b4da-dbc9cae4427a.jpg" title=" WeChat Screenshot_20191007180339.png" alt=" WeChat Screenshot_20191007180339.png" / /p p style=" text-align: center " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 483px height: 370px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201910/uepic/701107bc-4a9e-4e91-a80b-e3f2ef725475.jpg" title=" 1111.jpg" alt=" 1111.jpg" width=" 483" height=" 370" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 北京时间10月7日下午，三位科学家获得2019年诺贝尔生理学或医学奖。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 三位获奖者分别是哈佛医学院达纳-法伯癌症研究所的威廉· 凯林（ William G. Kaelin, Jr.），牛津大学和弗朗西斯· 克里克研究所的彼得· 拉特克利夫（ Peter J. Ratcliffe） 以及美国约翰霍普金斯大学医学院的格雷格· 塞门扎（Gregg L. Semenza）。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong 获奖理由：表彰他们在理解细胞感知和适应氧气变化机制中的贡献。 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong “生物体感受氧气浓度的信号识别系统是生命最基本的功能，然而学界对此却所知甚少。三位科学家阐明了人类和大多数动物细胞在分子水平上感受氧气含量的基本原理，揭示了其中重要的信号机制，为贫血、心血管疾病、黄斑退行性病变以及肿瘤等多种疾病开辟了新的临床治疗途径。& nbsp /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 氧气是众多生化代谢途径的电子受体，科学界对氧感应和氧稳态调控的研究开始于促红细胞生成素（erythropoietin, EPO）。当氧气缺乏时，肾脏分泌 EPO刺激骨髓生成新的红细胞。比如当我们在高海拔地区活动时，由于缺氧，人体的新陈代谢发生变化，开始生长出新的血管，制造新的红细胞。这几位科学家们做的正是找出这种身体反应背后的基因表达。他们发现这个反应的“开关”是一种蛋白质，叫做缺氧诱导因子 (Hypoxia-inducible factors, HIF)，但其功能远不止开关那么简单。” /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong HIF 控制着人体和大多数动物细胞对氧气变化的复杂又精确的反应，上述三位诺奖科学家揭示了通过调控 HIF 通路从而达到治疗目的存在巨大的潜力， /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 说起诺贝尔生理学或医学奖，笔者不得不提我国青蒿素提取发明人屠呦呦，她于2015年12月10日，被授予诺贝尔生理学或医学奖。在我国70周年国庆前夕，屠呦呦刚刚被习近平主席授予了“共和国勋章”。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " 笔者带大家回顾一下近年来诺贝尔生理学或医学奖获奖情况： /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " 2018年，美国免疫学家詹姆斯?艾利森与日本生物学家本庶佑，凭借他们发现负性免疫调节治疗癌症的疗法方面的贡献”。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " 2017年，三名美国科学家杰弗里?霍尔、迈克尔?罗斯巴什和迈克尔?扬，凭借他们在研究生物钟运行的分子机制方面的成就获奖。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " 2016年，日本科学家大隅良典凭借在细胞自噬机制研究中取得的成就获奖。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " 2015年，中国女药学家屠呦呦，以及爱尔兰科学家威廉?坎贝尔和日本科学家大村智，凭借他们在寄生虫疾病治疗研究方面取得的成就获奖。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " 2014年，拥有美国和英国国籍的科学家约翰?奥基夫以及两位挪威科学家梅－布里特?莫泽和爱德华?莫泽，凭借他们发现大脑定位系统细胞的研究获奖。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 其他奖项也将在当地时间10月8日-14日相继公布。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201910/uepic/836e9d90-f0eb-4c31-ab63-d263c84edaee.jpg" title=" WeChat Screenshot_20191007180054.png" alt=" WeChat Screenshot_20191007180054.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201910/uepic/4270ab83-b440-4f87-bb69-208923149274.jpg" title=" 69751-hero-tablet-2x.jpg" alt=" 69751-hero-tablet-2x.jpg" / /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201910/uepic/a698ba4e-9411-413b-840f-82ba0857ed1b.jpg" title=" 企业微信截图_20190914192607.png" alt=" 企业微信截图_20190914192607.png" / /p p style=" text-align: center " img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201910/uepic/b649e7e3-097e-4097-a981-9b0a52004929.jpg" title=" 2e25b9b6-d0c8-4dda-8b8d-af6ff29795e8.jpg" alt=" 2e25b9b6-d0c8-4dda-8b8d-af6ff29795e8.jpg" / /p

在北京冬奥会的精彩的比赛之外，也有一些不和谐的消息传来：作为围观群众，你可能经常在与兴奋剂有关的新闻中听到“血检”“尿检”等字眼，但是，兴奋剂到底是怎么被检测出来的？在2022冬奥会中，北京冬奥组委会又使用了什么检测兴奋剂的新手段呢？兴奋剂检测：色谱+质谱经过与兴奋剂数十年的斗争，目前国际上对兴奋剂分子的检测、甄别技术已经越发健全了。虽然北京冬奥组委会尚没有公布本次奥运会检测兴奋剂的具体方法，但我们可以从历次大型体育赛事的常规检测方法中知晓兴奋剂检测的原理。常规来讲，体育赛事中兴奋剂的检测大多是先将运动员生物样本中的各种分子萃取、分离，然后再依次确定这些分子“身份”。虽然从运动员身上取来的样品一般都是液体样品，如血液，尿液，汗液等，但在检测的过程中，实际上是分了气体、液体两条赛道的。尿液是最常用到的检测标本，而血液样品主要用于检测那些一般不容易进入尿液里的分子，如生长激素、红细胞生成素等蛋白/糖蛋白类激素，以及外源性红细胞等可以提高在赛事中表现力的活性生物制品。尿液中一部分较容易挥发的分子（如一部分小分子类固醇类兴奋剂）会参加气体赛道的检测，而血液以及尿液中剩下的那些分子量比较大且表现较为“老实”的分子则会出现在液体检测的赛道中。目前兴奋剂分析的大致流程检测step 1——色谱分离不同分子虽然赛道不尽相同，但在气体与液体赛道中不同分子的检测过程却殊途同归。这两种检测方式的第一步都是先将复杂样品中所含有的各种分子分隔开，让它们乖乖排队站好。液相色谱/气相色谱技术（A）典型的液相色谱结构示意图，其中横向柱状者为LC分离柱。（B）气相色谱结构简图，其中状如线圈者为GC分离柱。（C）一种以芯片式集成于硅片表面的微型GC分离柱。通过样品中不同分子的分子质量、所带电荷、亲疏水性等物理特征的区别，可以将不同的分子以一定的规律分开，这种方法被称为“色谱”（Chromatography）。这就好比让这些分子跑一个漫长的马拉松，然后通过漫长的路程区分出它们“耐力”的区别。色谱的名字其实是源于百年前用碳酸钙从树叶提取物中分离不同植物色素的俄国植物学家米哈伊尔茨维特（Михаил Семёнович Цвет）。相信这个实验，不少朋友在初高中生物课上就已经学习并体验过了（用滤纸从树叶汁中分离出叶绿素A，叶绿素B，叶黄素和β胡萝卜素）。但在今天，运用色谱技术来分离分子的物理特征中倒是很少包括分子颜色等光学特征了。在现代色谱仪中用来分离分子的原件，叫做分离柱，现在一般被“生化环材实验狗”们称为柱子。一般来讲就是一根细长管道中填满了能与分子发生作用的填料。液相色谱(Liquid Chromatography, LC)中使用的柱子看起来较为短粗（长度一般不超过一米），而在气相色谱(Gas Chromatography, GC)中，由于气体分子与填料的相互作用较弱，分离不同分子所需的填料距离往往需要5-10米甚至更长。因为这个原因，气相色谱的分离柱看起来其实更像一团线圈。一台比较典型的质谱分析仪检测step 2——质谱仪验明正身不管是样品中的液体分子还是气体分子，它们在通过色谱仪实现不同分子的分离之后，面临的下一道关卡都是能够给它们“验明正身”的质谱仪(MS)。质谱仪可以将色谱分离纯化后的分子进行电离，然后分析它们的“特征指纹”——质谱，从而确定这个分子的真实身份。值得注意的是，目前在兴奋剂检测领域里有多种不同且常见的质谱技术，它们都有自己的独门绝技。例如主要用于检测痕量兴奋剂的DFS 高分辨双聚焦磁质谱和主要用于区分内源性和外源性睾丸酮的DELTA V 同位素质谱等（人工合成的睾丸酮往往具有更高的碳同位素一致性，而人体自己产生的睾丸酮分子内的碳原子会含有一部分C13或C14）。说到睾丸酮，其实还有一段很惊险的旧事，就发生在我们非常熟悉的“不懂球的胖子”——刘国梁身上。1999年世乒赛上，刘国梁被查出血清表睾酮（一种睾丸酮变体）偏高，被怀疑是服用了外源性的兴奋剂，险些被禁赛。但实际上，他的血清睾丸酮水平异常是他自己的生理情况导致的（也许天生骨骼清奇？），并非服用兴奋剂。当时正是靠同位素质谱这一新技术以及国际乒联的多次飞行抽检，才让刘国梁洗清了冤屈。虽然目前色谱+质谱(LC-MS/GC-MS)联用法仍然是兴奋剂检测的黄金标准，但其它一些技术也在这些年逐渐崭露头角。如基于微流控免疫分析的汗液中特殊分子（毒品、兴奋剂等）快检技术（可在20-30分子内完成测试），针对一些常见兴奋剂（如麻黄碱类）的ELISA免疫分析试剂盒，走电化学、毛细管电泳等技术路线的兴奋剂检测技术等等。北京冬奥会：干血点技术首次正式使用不光是检测技术，运动员样品的运输保存技术、样品提取技术对非法兴奋剂的有效检出也有很大的影响。正如前文所说，传统意义上运动员的生物检材一般包括血液/血清以及尿液。为了防止尿样/血样中的兴奋剂分子被水解或在酶的影响下失活，样本的储存运输条件相当苛刻，比如，样本需要在冷藏（4︒C）的环境下尽快送检，而需要长期储存的样品则必须被维持在-20︒C之下。2020年，国际兴奋剂检测机ITA还专门设立了一个用以长期储存样品的保存设施，可将运动员身上采集的各类标本保存十年以上。此外，样品运输到实验室之后，还需要经过比较复杂的萃取流程，在排除掉细胞与蛋白的干扰后，才能进入色谱/质谱检测的流程。在三种不同滤纸上的干血点。血液滴在试纸上后会在30分钟左右的时间内逐渐干燥。但一般为保险起见，风干时间至少为2小时在经过东京奥运会的试验之后，北京冬奥会的兴奋剂检测流程中正式纳入了一种新的样本采集/运输技术——干血点（Dry Blood Spot, DBS）技术。其实这个技术说起来非常容易理解。就是将运动员的一滴血液（可为静脉血/指尖血）滴在滤纸（或硝酸纤维素膜）上，待其自然风干两三个小时即可制成。干血点技术并不是什么新技术，它曾在人类与艾滋病、乙型/丙型肝炎、疟疾等传染病的斗争中起到了很大的作用，尤其是在欠发达地区病人的样本采集活动中被广泛应用。单纯针对兴奋剂检测而言，在干血点风干的过程中，不仅样品中兴奋剂小分子的浓度可以得到浓缩，同时血液中所含的细胞也会失水而死。由于没有了水和酶的干扰，干血点样品便非常稳定，可以在室温条件下保存数日乃至数周。也就是说，在未来的奥运会中，甚至可以不用携带保温设备，仅通过信封这种简单的封装方式就能运输样品。与此同时，由于干血点样品中几乎不含水份，因此在使用甲醇等特殊有机溶剂时更有利于一些疏水性有机物的萃取。这些技术优点都有助于提高兴奋剂在后续气相色谱/液相色谱/质谱等测试中的检出能力。结语俗话说，道高一尺魔高一丈，即便是拥有了这么多反兴奋剂的先进技术和设备，还是有少数运动员会铤而走险服用兴奋剂。要想保证竞赛完全公平，仍然是一项非常难做到的任务，反兴奋剂还需要各方共同努力。

重组人红细胞生成素（rhEPO）是全球最重要的生物制品之一，可用于治疗由慢性肾脏病、肿瘤化放疗或骨髓增生症导致的贫血。rhEPO是一种高度糖基化的糖蛋白药物，几乎rhEPO分子量的一半是由翻译后修饰的多糖组成。这些多糖包括N端链接寡糖链，其末端为唾液酸残基。唾液酸残基在控制rhEPO在体内半衰期起重要作用，并且影响其稳定性和电荷异质性。 电荷异质性（电荷变异体），即蛋白质表面电荷的改变。改变可以是由于电荷数量增减的直接改变，也可以是由于蛋白构象改变而间接引起的改变。产生电荷异质性的原因有很多，例如异构化、氧化、聚合、末端改变、脱酰胺化和糖基化等。 rhEPO电荷变异体产生最主要的原因是其高度糖基化，尤其是高度唾液酸化。电荷异质性是反应糖基化水平的重要表征之一，属于关键质量属性（Critical Quality Attributes, CQA），监管机构要求必须在整个生产和贮存中对rhEPO的电荷异质性进行检测和表征。使用CZE方法表征rhEPO存在如下难点制剂中rhEPO含量相对较低，μg级别，需要浓缩样品提高检测灵敏度；制剂中含多种辅料组分，可能会对分析结果造成干扰。例如，促红素制剂中含有mg级别的人血白蛋白（HSA），使用CZE方法会对结果造成干扰；CEZ方法需对样品进行复杂前处理，去除辅料干扰。NIFDC解决方案 2021年，中国食品药品鉴定研究院（NIFDC）依据ICH（国际人用药品注册技术协调会）指导原则，利用全柱成像毛细管等电聚焦电泳技术（iCIEF）自发荧光通道表征8种商品化rhEPO电荷异质性，并评估该方法的精密度、准确性、线性、范围和耐用性。 紫外吸收UV280nm是经典icIEF等电聚焦电泳检测通道。而自发荧光（NIF：Native Fluorescence）是指利用芳香族氨基酸（色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸）的自发荧光来实现检测，无需添加染料，提高检测灵敏度。 结果表明，对比CZE-UV（毛细管区带电泳-紫外）方法，iCIEF方法自发荧光通道检测具有更高的分辨率和灵敏度，同时具有快速检测、无需样品前处理、消除辅料干扰等优势。结果展示图1. A：紫外通道检测 B：自发荧光通道检测 图1结果显示，紫外通道检测（A）的信号很低；自发荧光通道检测（B），可以明显看到信号增强，且各个变异体分离效果较好。表1. 紫外通道检测和自发荧光通道检测对比 研究结果表明，两种通道检测下各变异体峰面积比例含量完全一致（表1）。图2. 自发荧光通道检测不同浓度样品表2. 文献报道其它方法定量限 研究人员考察了利用自发荧光通道检测1.25μg/m至20μg/ml浓度范围内样品（图2），各变异体面积比例含量和浓度线性关系良好，R方均不低于0.99。该方法定量限（LOQ）为0.1ug/ml（表2），根据文献报道显示，本方法灵敏度为最高。图3. 不同稀释度下的回收率 研究人员配制了7个不同浓度的样品对该方法准确性进行验证（图3），通过实际测定总峰面积和理论总峰面积来计算回收率，回收率在80-105%之间。图4. 耐用性评估 研究人员对方法耐用性进行评估（图4），比较不同两性电解质浓度、尿素浓度、不同毛细管以及不同样品放置时间情况下的各变异体等电点和峰面积百分比的差异。结果表明，变异体等电点差异不超过0.1，峰面积百分比RSD%不超过5%，方法耐用性良好。图5. 自发荧光检测模式表征8种商品化rhEPO电荷变异体 为了证明该方法对商品化rhEPO表征的适用性，研究人员利用所建立方法，对不同企业的8种商品化rhEPO电荷变异体进行表征（图5）。DP1-6有相似峰型，在DP3和DP6中，有一额外明显的小峰。DP7峰形独特，可能由于与其他DP相比糖基化不同所造成。结论 NIFDC利用ProteinSimple全柱成像毛细管等电聚焦电泳技术自发荧光检测通道建立并证明了用于rhEPO电荷异质性表征的方法平台。该平台有如下特点：无需样品预处理，可直接表征rhEPO；自发荧光通道检测的rhEPO峰型与紫外吸收通道检测得到的峰型相同；与CZE-UV或icIEF紫外吸收通道检测相比，自发荧光检测灵敏度更高；不受高浓度辅料干扰（如人血清白蛋白和聚山梨酯，会干扰CZE分析，CZE 分析前，须通过多步分离步骤去除这些辅料）；该平台方法快速且操作简易。扫描下方二维码，获取ProteinSimplerhEPO表征解决方案参考文献：1. Li, Xiang et al. “Capillary isoelectric focusing with UV fluorescence imaging detection enables direct charge heterogeneity characterization of erythropoietin drug products.” Journal of chromatography. A vol. 1643 (2021): 462043.关于我们ProteinSimple是美国纳斯达克上市公司Bio-Techne集团（NASDAQ:TECH）旗下行业领先的蛋白质分析品牌。我们致力于研发和生产更精准、更快速、更灵敏的创新性蛋白质分析工具，包括蛋白质电荷表征、蛋白质纯度分析、蛋白质翻译后修饰定量检测、蛋白质免疫实验如Western和ELISA定量检测蛋白质表达等技术，帮助疫苗研发、生物制药、细胞治疗、基因治疗、生物医学和生命科学等领域科学家解决蛋白质分析问题，深度解析蛋白质和疾病相互关系。联系我们地址：上海市长宁路1193号来福士广场3幢1901室 电话：021-60276091热线：4000-863-973邮箱：PS-Marketing.CN@bio-techne.com网址：www.bio-techne.com

白细胞介素- 1（interlenkin 1，1L-1）的间接作用，可使内毒素引起机体发热。本篇文章介绍IL-1的受体分泌及调节介绍。IL-1的受体有两种：IL-1RⅠ和IL-1R Ⅱ。三种IL-1都能与受体结合，IL-1Ra与受体结合后不引发信号转导效应，但可抑制IL-1α和IL-1β同受体结合。上述两种受体常常表达在同一细胞中，但不同的细胞仅优势表达某一种受体。IL-1RⅠ是相对分子质量为80000的糖蛋白，人的基因位于2号染色体长臂上。主要表达在内皮细胞、平滑肌细胞、T细胞，肝细胞、成纤维细胞、角质细胞和表皮树突状细胞等。IL-1RⅠ高度糖基化，阻止糖基化会降低其生物学活性。IL-1R Ⅰ的胞质内肽链较长，并参与信号转导，与Toll受体的胞质区显著同源，故称为Toll/白细胞介素同源区域（Toll /in-terleukin-1 homologous region，TIR），缺乏酪氨酸激酶的活性。人IL-1R Ⅰ mRNA约5kb，编码569个氨基酸残基，细胞外320个氨基酸残基构成3个免疫球蛋白样功能域，跨膜区有19个氨基酸残基，其余230个氨基酸残基在胞质内。IL-1受体辅助蛋白（interleukin-1 receptor accessory protein，IL-1RAcP）其胞外和胞质结构域与IL-1RⅠ具有同源性，IL-1与IL-1RⅠ结合亲和力较低，可使构象发生改变，并被IL-1RAcP识别，参与受体复合物的形成，能够增强其亲和力，使之发挥生物学效应。IL-1RⅡ主要表达在B细胞、单核细胞和中性粒细胞中。IL-1R Ⅱ的 mRNA约1803bp，编码386个氨基酸残基，是相对分子质量为68000的糖蛋白。该蛋白质含有5个糖基化位点，经过N-糖苷酶处理使糖链分解后，相对分子质量为55000。IL-1RⅡ细胞外的332个氨基酸残基构成3个免疫球蛋白样功能域，其胞内只有很短的29个氨基酸残基，没有信号转导功能。用抗IL-1RⅡ抗体不能阻止IL-1的信号转导，用抗IL-1RⅡ抗体能够有效地阻止IL-1的信号转导。IL-1RⅡ是一个诱骗分子，可为IL-1的自身负反馈。将IL-1RⅡ的细胞外部分与IL-1RⅠ的胞质内部分嵌合构建的嵌合受体能够与IL-1结合并能转导信、号效应。可溶性IL-1受体：健康人和某些病理组织液中可检查到IL-1R Ⅰ和 IL-1RⅡ的胞外结构部分为可溶的IL-1受体，但其具体的生物学作用不是很清楚。IL-1的信号转导途径用图9-1表示。

应用红细胞B族维生素精准质谱检测技术，备孕阶段的女性只需到医院抽一管血，即可得到一份可信赖的叶酸水平检测报告，再由医生据此提供个性化的用药指导。记者从西湖大学获悉，该校生命科学学院独立实验室负责人施红军带领团队研发的红细胞B族维生素精准质谱检测技术，近日完成数千万元的Pre-A轮融资。　　B族维生素是人体不可或缺的水溶性营养元素，叶酸是B族维生素的一种。相关科学研究表明，怀孕前增补叶酸能降低神经管缺陷、先天性心脏病等出生缺陷的风险。应用该技术,备孕阶段的女性只需到医院抽一管血，即可得到一份可信赖的叶酸水平检测报告，再由医生据此提供个性化的用药指导。　　增补叶酸可预防出生缺陷　　已有研究表明，B族维生素的缺乏与出生缺陷、妊娠期高血压、子痫前期等问题相关。如今，增补叶酸作为预防出生缺陷的重要方法，已被多国专业组织写入医学指南。　　日常生活中，叶酸广泛存在于动植物类食品中，尤其在绿叶蔬菜中含量较多。但天然叶酸极不稳定，人体真正能从食物中获得的叶酸并不多，并且人体不能自行合成叶酸，只能依赖摄入补充。　　“根据大样本数据统计，目前建议孕前女性的叶酸摄入量是0.4—0.8毫克/天。但摄入相同剂量的叶酸，是否会让有些人用药过量，有些人却补充不足？” 施红军介绍，遗传因素不同、饮食习惯不同、生活方式不同，都会影响个人体内的叶酸水平。　　叶酸的快速精准检测，是临床上的一个难题。叶酸临床检测主要分为血清检测和红细胞检测两种。尽管血清检测技术比较成熟，但它主要反映的是人近期的叶酸摄入量，因此检测结果很容易受到饮食的影响，波动性较大。　　“相对于血清叶酸，红细胞叶酸反映了人体内叶酸的长期存储水平，被公认为是更好的叶酸指标。”施红军表示，与检测游离态的血清叶酸不同，检测细胞内的叶酸需要经过细胞纯化和裂解，叶酸多谷氨酸态的水解，以及抗氧化保护等多个步骤，技术难度较大。　　此外，B2、烟酸、B6等B族维生素辅酶的不足也可能会影响叶酸的代谢效率，因此想要完整评价叶酸水平及其代谢功能，得同时检测这些B族维生素在人体内的含量。　　抽血检测让剂量补充更精确　　“每一个小分子都有一个特定的质荷比（质量和电荷的比重），知道了质荷比就可以知道这是什么物质。”施红军说，团队创新性地将质谱检测技术运用到红细胞叶酸检测中。B族维生素在人体内有着不同的形态，而质谱设备可以清晰地分辨出不同形态的B族维生素的质荷比，从而精准地测量出其在人体内的含量。　　红细胞内很多B族维生素以辅酶小分子的形式存在，极不稳定。检测前需要用特殊的保护剂和提取剂，将细胞裂解，同时立即保护好释放出来的所有辅酶小分子，去除蛋白质和细胞碎片后再上机检测。施红军团队成功开发出一种全新的红细胞B族维生素的稳定提取方法，实现在30分钟内将红细胞中B2、烟酸、B6和叶酸同步提取、同步检测。　　“团队在国际上首次实现了红细胞B族维生素综合代谢能力的精准质谱检测。”施红军说，团队目前已经完成了来自全国各地的上万例样本的完全叶酸功能检测（CFT），检测结果可溯源至世界卫生组织（WHO）全血叶酸国际质控标准95/528，进一步证实了该方法的准确性。　　通过样本分析，研究团队发现，我国孕妇的叶酸平均水平与美国在强制添加叶酸之前的650纳摩尔/升的孕妇叶酸平均水平相当，但与他们目前1150纳摩尔/升的水平相去甚远。　　2017年，国务院办公厅出台的《国民营养计划（2017—2030）》中写道，要把育龄女性的叶酸缺乏率下降到5%以下。施红军介绍，根据团队的检测结果显示，现在我国10%—30%的孕妇叶酸缺乏，并且叶酸缺乏率从南方到北方再到西部地区呈现逐渐递增趋势。　　“团队之前在一项研究中发现，烟酸的缺乏也会导致包括先天性心脏病等在内的多器官出生缺陷。因此，烟酸已被我们列入了检测开发的研究计划。”施红军表示，这项研究的实验目前还停留在小鼠模型上，他们将尝试与更多医院合作，探明烟酸的缺乏与相关出生疾病的内在关联。

从中国科学技术大学获悉，该校生命科学与医学部程临钊教授课题组及合作团队在体外生产红细胞方向取得重要进展，为解决红细胞紧缺这一世界性难题提供了新的思路。据介绍，科研人员首次建立了人外周血来源的红系祖细胞体外大量扩增和高效脱核的培养体系，并利用小鼠输血模型验证了该体系所产生红细胞的功能。这一研究成果近日发表在《分子治疗》(MolecularTherapy)上。目前红细胞和其他血液制品主要来源于志愿者外周血捐献，供者不足、感染风险、稀有血型缺乏等仍是世界性的难题。早期研究者通过优化体外诱导方法和培养体系分化成熟红细胞，但由于造血干细胞及红系祖细胞体外扩增能力非常有限，无法满足临床需求。体外诱导多能干细胞定向分化为红细胞是解决上述问题的另一条重要途径。近年来，研究发现如何通过体外培养获得大量功能性的红细胞，是该领域面临的重要挑战。为解决红系祖细胞体外扩增能力有限这一问题，中国科大课题组通过实验，推测出在红系祖细胞体外扩增与自我更新中扮演重要角色的基因BMI1，并通过基因敲降和回补两方面对BMI1的功能进行探索，结果证实BMI1对红系祖细胞的体外扩增和脱核成熟至关重要。据介绍，该研究成功建立了从人外周血单个核细胞大量扩增红系祖细胞并高效诱导分化为成熟红细胞的实验体系。这一成果首次发现BMI1可以促使红系祖细胞体外扩增高达一万亿倍，并拥有分化成熟生成功能性红细胞的潜力。国际知名血液专家、美国纽约血液中心教授安秀丽认为，该工作是输血领域的突破性进展，解决了血源紧缺的瓶颈性问题。

Rzdeb / Istockphoto.红细胞（RBCS）是世界上输血服务所需的重要血液产品。遗憾的是，初始捐赠的血液，由于储存和输血袋限制了红细胞的寿命和降解，因此，其质量只能通过采样来确定。加拿大不列颠哥伦比亚大学的达纳迪瓦恩（Dana Devine）和同事推出了一种光学方法，采用拉曼光谱仪作为最佳的作业工具，可以对红细胞进行非侵入性检查。自20世纪80年代以来，在艾滋病毒/艾滋病发生严重问题之后，输血产品的安全标准有了很大的改进，但质量仍然可能是一个问题。因此，需要一种适当的分析工具，可以快速且容易地对红细胞和其他输血产品进行质量控制分析。主要问题是存储空间的劣化，称为“存储病变”的问题。这可能导致转发患者中的严重健康问题，如果他们首先需要输血，那么将面临多次问题。红细胞浓缩物通常可以在加拿大、英国和美国的血库中储存长达42天。在这些区域外，存储限制可能不同。来自一批单位的随机样品，通常在到期日期前检测溶血、血细胞比容、血红蛋白和残留白细胞（WBC）。然而，由于样品之间的个体和性别差异，某些单位的血液样品可能会在到期日之前长期退化。随着装置老化，造成葡萄糖浓度下降和乳酸浓度升高。因此，对这两种成分的分析可充当退化的代理。通过专注于三个特定的拉曼带 - 对于乳酸（857cm-1），葡萄糖（787 cm-1），溶血（1003 cm-1），团队发现，他们可以将这些分析结果与红细胞在储存和退化水平达到的时间匹配。该团队指出，允许空间偏移拉曼光谱（SORS）通过输血袋深入进入样品进行检测。虽然此前已经展示了这样的分析，但该团队现在再次验证了具有并行生物扫描所获取的光谱，允许它们揭示关注的适当频段。该团队写道，拉曼技术可有效地用于集中使用红细胞的单位、患者安全和库存管理的血液质量控制。他们专注的因素可能不会广泛代表需要输血的一般患者的问题，但对于需要输血的婴儿等一些非常关键的患者来说，它们却具有更为重要的意义。团队认为，“这种方法可以为更可靠地确定储存的血质保质期，为溶血和代谢物浓度的计算提供数据，并将为血液供应商提供质量控制和库存管理的互补手段，”。原始出版物：Vardaki, MZ, Schulze, HG, Serrano, K, Blades, MW, Devine, DV, Turner, RFB. Non-invasive monitoring of red blood cells during cold storage using handheld Raman spectroscopy. Transfusion. 2021 61: 2159– 2168. https://doi.org/10.1111/trf.16417符斌 供稿

p 　　仪器信息网讯：由中国化学会色谱专业委员会和北京色谱学会主办，东华理工大学、南昌大学第二附属医院承办的“第十一届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会”于2016年4月27日在江西省井冈山市中信井冈山会议中心胜利召开。 /p p 　　开幕式由东华理工大学教授，江西省质谱科学与仪器重点实验室主任陈焕文主持，参会专家代表有：中国科学院大连化学物理研究所张玉奎院士、中国科学院生态环境研究中心江桂斌院士、北京大学刘虎威教授、国家自然科学基金委梁文平研究员、江西省科协孙卫民副主席、东华理工大学柳和生校长、中国分析测试协会副理事长兼秘书长张渝英研究员、中国分析测试协会副理事长吴波尔女士、东华理工大学乐长高教授、南昌大学二附院科教科易应萍科长等。来自全国各科研院所、高校、医院及相关企事业单位的400余名代表参加了会议。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 陈焕文.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/a238eba7-972c-453c-baf1-a31706a11214.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 陈焕文 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 会议现场.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/ec9381d7-d73b-4248-9dad-21c7efc8366b.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 会议现场 /span /strong /p p 　　首先由中国色谱学会常务理事、中国化学会色谱专业委员会副主任、北京理化分析测试技术学会理事长刘虎威教授致开幕辞。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp img title=" 刘虎威.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/4413ab23-79f1-4408-868d-0f174579024a.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 刘虎威 /span /strong /p p 　　中国科学院院士、分析化学家张玉奎教授代表中国化学会致辞。& nbsp & nbsp & nbsp /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 张玉奎.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/fb2d36cf-6863-4fc4-97d7-59dec261b527.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 张玉奎 /span /strong /p p 　　国家自然科学基金委化学科学部梁文平主任代表国家自然科学基金委致辞。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 梁文平.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/44fe6edb-ac32-4f2c-b060-34013ec104b1.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 梁文平 /span /strong & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp /p p 　　中国分析测试协会副理事长兼秘书长张渝英研究员代表中国分析测试协会致辞。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 张渝英.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/13008870-9c25-423d-bf8e-59a13db2b14b.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 张渝英 /span /strong & nbsp /p p 　　江西省科协孙卫民副主席致辞。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 孙为民.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/6b44e6cf-9906-488a-842a-7f1a87469280.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 孙卫民 /span /strong & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp /p p 　　东华理工大学柳和生校长致辞。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 柳和生.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/c7fd5c0a-c741-4722-874d-8c8fedda5fd6.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 柳和生 /span /strong & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp /p p 　　开幕式最后，由陈焕文教授介绍了会议筹备情况。开幕式后，全体与会人员为已故邹汉法研究员默哀，随后大会将正式进入报告环节。 /p p 　　上午，会议由中国分析测试协会研究员汪正范、北京理化分析测试技术学会副理事长、北京理工大学生物技术系副主任屈锋和北京师范大学化学学院教授欧阳津主持。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 上午主持人.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/74f63728-1eb0-440a-b644-7b2f7c3a60c9.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 从左至右分别为：汪正范、屈峰、欧阳津 /span /strong /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 以下为部分报告精彩内容： /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 张玉奎报告.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/eeb811cd-a095-4a4a-8b81-14366de95a4c.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 张玉奎 /span /strong /p p 　　报告人：中国科学院大连化学物理研究所研究员、分析化学家张玉奎院士 /p p 　　报告题目：蛋白质组定性定量分析新方法 /p p 　　张玉奎院士首先用大量篇幅介绍了已故邹汉法研究员在生物分离分析新材料、微纳生物分离分析化学、修饰蛋白质组学新技术方法等方向的研究工作，并对邹汉法研究员近五年的工作进行了总结。 /p p 　　张玉奎院士还介绍了基于离子液体—氯化-1-十二烷基-3-甲基咪唑(C12Im-Cl)的膜样品预处理新技术，这种技术不仅可鉴定更多数量的膜蛋白质，且样品预处理时间也显著缩短 课题组设计完成的准等重标记蛋白质组定量方法体系，实现了蛋白质组样品的化学标记和代谢标记，可保证蛋白质组的高准确度、高精密度和宽动态范围的定量分析 同时， “一站式”的在线蛋白质样品预处理系统可显著提高定性、定量分析的通量及自动化程度。 /p p 　 img title=" 江桂斌.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/ae2f1849-7f8e-49f3-ba68-e7542aa9e0a1.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 江桂斌 /span /strong /p p 　　报告人：中国科学院生态环境研究中心研究员、分析化学、环境化学家江桂斌院士 /p p 　　报告题目：当前细颗粒分析毒理研究中的问题与进展 /p p 　　细颗粒在大气污染和纳米材料行为研究中存在着若干技术难点，欲弄清楚大气细颗粒物上存在的病毒、细菌、微生物，特别是新型化学污染物，特异性的分析方法是推进这一领域研究的关键，同时病理学研究所面临的问题是如何准确的解释细颗粒的暴露所造成的毒理与健康影响，亦需要分析方法与暴露技术方面的进步。江院士介绍了色谱质谱联用技术在细颗粒表征中的应用，介绍同位素分馏技术在纳米细颗粒和大气污染物溯源中的应用以及细颗粒暴露与毒理研究方面的进展。& nbsp /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 梁文平报告.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/a3f445bb-3726-4e71-9fe7-6a050cbd05ee.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 梁文平 /span /strong /p p 　　报告人：国家自然科学基金委化学科学部常务副主任梁文平教授 /p p 　　报告题目：全面推进中国化学走向国际前沿--兼谈化学科学十三五发展战略 /p p 　　中国化学正处于从大国向强国的转型期。今天的中国化学基础研究逐渐与国际接轨，已经做出了许多在国际上具有重要影响的工作。我国化学发展的挑战是如何将中国化学研究逐渐发展成为国际化学科学研究的引领者和拓荒者，真正实现从量的扩张到质的提升的转变与跃升。要突破中国化学创新引领乏力的瓶颈，抓住国际化学格局变化中的战略发展机遇，做好十三五学科发展战略布局，实现中国化学从化学大国走向化学强国的跨越发展。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 岛津报告.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/0b57ea74-b4a7-4bc2-9ceb-153d1d3334f7.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 刘麟 /span /strong & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp /p p 　　报告人：岛津企业管理(中国)有限公司刘麟 /p p 　　报告题目：使用LC/MS/MS三重四级杆质谱仪快速分析细胞培养上清液 /p p 　　开发合适的培养基配方与优化细胞培养条件是生物技术药物生产工艺的核心内容之一。尤其是抗体药物偶联物、双靶点/特异抗体类药物、抗体片段融合蛋白等相对分子量大、结构复杂的抗体类药物，对其重要性不言而喻。目前生物过程工艺开发与优化缺乏对细胞培养上清液组分直接、全面且快速的客观动态数据分析，因此无法精准的优化调整细胞培养工艺条件与培养基配比，甚至影响抗体类药物等的产品品质。岛津开发的“细胞培养上清液分析方法包”，技术平台采用超快速三重四级杆液质联用仪，仅需17分钟即可同时检测分析95种细胞培养上清液营养成分和代谢物的相对丰度变化。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 张祥民.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/c68ee829-f258-4136-a89b-832281be3fc0.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 张祥民 /span /strong 　　 /p p 　　报告人：复旦大学化学系张祥民教授 /p p 　　报告题目：蛋白质组样品的高效富集、酶解和色谱质谱分析新技术 /p p 　　系统研究蛋白质组学分离富集与酶解鉴定新技术，实现人类蛋白质组样品的高覆盖鉴定，是蛋白质组学技术和健康医学研究发展的迫切要求，具有重要的学术意义和应用价值。报告围绕蛋白质组的鉴定，介绍了相关新技术和新方法，重点探讨蛋白质的高效富集、酶解与鉴定等相关技术。课题组提出并发展的蛋白质共价固定的新方法，可有效分离富集蛋白质、提高酶解覆盖度，并能够有效除去高浓度的SDS、盐等干扰物质，以此来提高蛋白质的鉴定效果。另外，“一步法酶解活细胞”的新技术，可用于100个细胞蛋白质组的分析，所发展的超高灵敏度分析新方法，可分离鉴定出800多个蛋白质，能够鉴定的含量低至200zmol。 /p p img title=" 陈义.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/82dfaef3-a556-4d95-a739-36fe1e92dc77.jpg" / br/ /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 陈义 /span /strong /p p 　　报告人：中国科学院化学研究所陈义研究员 /p p 　　报告题目：超痕量植物激素的快速提取与高灵敏测定 /p p 　　植物激素在植物体内由特定的组织或细胞合成，并被送往植物的其他部位，在微、痕量的水平上调控植物的生长或生理过程。目前的植物激素分析方法主要有光学分析法和分离分析法两大类，前者多利用荧光，可结合免疫原理以及基因技术等，但一般只能做间接测定 后者以色谱分离为主，便于多组分之定量测定。近年来，毛细管电泳、超高压液相色谱(UPLC)等微量、高效方法得到开发，但检测限仅能达到nmol/L水平。陈义课题组攻关检测灵敏度，研究以UPLC-串联质谱联用(UPLC-MS/MS)为主要工具展开，结合多反应离子检测(MRM)来发展超痕量植物激素的精准测定方法。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 安捷伦报告.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/c1ac0729-ab70-4c55-8619-d7c17f21c1f9.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 杨新磊 /span /strong /p p 　　报告人：安捷伦科技(中国)有限公司杨新磊 /p p 　　报告题目：多中心切割二维液相色谱系统分析促红细胞生成素中的N端糖 /p p 　　促红细胞生成素(EPO)主要用于治疗肾性贫血以及肿瘤等各种慢性疾患所伴发的贫血。由于EPO的天然来源非常有限，目前临床上使用的基本都是采用基因重组技术获得的重组人促红细胞生成素(rhEPO)，然而对于这类治疗性蛋白的表征有很大挑战。就糖基化分析而言，由于EPO多糖基化位点的存在以及每个位点糖型高支链化带来结构复杂性造成很难采用一种分析方法完成糖链的分析。安捷伦开发的在线多次收集分析的二维分析模式，可以在70min内完成一个样品分析周期，相比于离线方式，该方法可明显提高分析速度。 /p p 　　下午，大会组织了主题为“色谱基础研究”、“药物与临床分析”、“食品与环境分析”及“材料分析与其他”的四个分会场。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 分会场二_副本.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/41d30706-e0fb-4fb5-95f9-105c17516332.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" & nbsp strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 分会场 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 分会场三_副本.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/fadbd41a-0952-4c8e-8476-5b7055b62822.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 分会场 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 分会场四.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/d1b735fc-30a7-419b-822a-c73523508d3f.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" strong 分会场 /strong /span /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 分会场一_副本.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/ae9bbc2d-09a7-4bbf-896a-94c83d84bdd0.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 分会场 /span /strong /p p 　　除了精彩的报告之外，大会主办方还安排了内容丰富的墙报展，墙报数量达156个，作者分别来自高校、科研院所、医院及相关企事业单位，静待与会者参观讨论。 /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 墙报_副本.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/0a1875fb-f5b7-42b2-a2bf-9ef6314424df.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 墙报 /span /strong /p p 　　仪器厂商展位也是大会一道靓丽的风景，来自安捷伦、岛津、赛默飞、沃特世、东曹、海光、迪马、日立高新、Sciex、北京历元、北京科普生等多家企业的展位为与会者带来了最新产品和解决方案，为行业人员提供强有力的支持。 br/ /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" sciex.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/2a698a13-0863-40f9-b041-1c94f6719a5f.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 上海爱博才思分析仪器贸易有限公司 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" waters.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/5f92cc58-a93b-467a-90ff-13b389c88b5b.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 沃特世科技(上海)有限公司 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong img title=" 安捷伦.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/e9021557-39b5-4589-97e1-84d70315750c.jpg" / /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 　　安捷伦科技(中国)有限公司 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 北京liyuan.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/ea50a347-5d00-4cbf-b181-b765eed1e342.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" strong 北京历元仪器设备有限公司 /strong /span /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 北京科普生.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/c98c5a41-b8dc-4ba8-8ad3-9be3a854bbea.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" strong 北京科普生分析科技有限公司 /strong /span /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 岛津.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/dec3178a-a225-4f71-bc4e-a965df64a0c2.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 岛津企业管理(中国)有限公司 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 迪马展位.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/d8b41a10-63bb-4eb8-aec2-aa53ccb5bb99.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" strong 迪马科技 /strong /span /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 东曹.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/5dc46000-4bdb-46e5-8e89-35dda6a9bad4.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 东曹(上海)生物科技有限公司 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 日立高新展位.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/b38d239f-e1b5-4e96-9867-f3579fae9584.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 日立高新技术公司 /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 上海科哲.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/5560c29f-f3ea-42c1-8b6c-dc83b3c76620.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" strong 上海科哲生化科技有限公司展台 /strong /span /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 上海泰坦.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/70087a90-9b19-4abd-8508-1affcf5b9c38.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　　 span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" strong 上海泰坦科技股份有限公司& nbsp /strong /span /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" LL150882_副本.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/6517dd9c-a449-4b8d-9f26-46044c07e8d0.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" 　 strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 　北京海光仪器公司& nbsp /span /strong /p p strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" /span /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" LL150924_副本.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201604/insimg/5d6c6d71-3966-479f-a849-4d37677f0b97.jpg" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong span style=" COLOR: rgb(0,112,192)" 晚宴 /span /strong /p p 　　当晚，主办方还举办了“日立之夜”盛大欢迎晚宴。与会者沟通交流，气氛融洽，共话我国色谱行业的现状与未来。 /p

据教育部科技发展中心消息，2012年度高等学校博士学科点专项科研基金课题评审工作结束，获批项目于12月18日公布，其中博导类项目有1497个，新教师类项目有1773个，优先发展领域项目有196个。批准项目公布如下： 　　附件： 　　2012年博士点基金资助课题名单-博导类 　　2012年博士点基金资助课题名单-新教师类 　　2012年博士点基金资助课题名单-优先发展领域 2012年度高等学校博士学科点专项科研基金资助课题名单（优先发展领域） 序号 课题编号 课题名称 申请学校 申请人 所属领域 课题类型 资助额度（万元） 1 20120032130004 小型化GDI汽油机的预燃现象生成机理研究 天津大学 舒歌群 节能环保 优先发展领域 40 2 20120091130005 基于球形纳米复合材料的生化尾水深度除磷新技术及原理研究 南京大学 潘丙才 节能环保 优先发展领域 40 3 20120094130003 水能高效开发利用的重大水工程服役健康的关键技术 河海大学 顾冲时 节能环保 优先发展领域 40 4 20120095130001 低品质煤振动流态化干法分选的基础理论研究 中国矿业大学 赵跃民 节能环保 优先发展领域 40 5 20120097130003 秸秆热裂解生物质炭资源和能源利用的技术途径及潜力分析评价 南京农业大学 潘根兴 节能环保 优先发展领域 40 6 20120101130001 共溶剂存在下离子液体-分子溶剂液液两相体系的界面结构与性质 浙江大学 任其龙 节能环保 优先发展领域 40 7 20120143130002 基于通航环境动态响应的船舶动力系统能效提升方法研究 武汉理工大学 严新平 节能环保 优先发展领域 40 8 20120201130007 制冷剂在水平管束外降膜传热的研究 西安交通大学 陶文铨 节能环保 优先发展领域 40 9 20122102130001 一种基于纳米两相材料磁状态可控的新型电力变压器 沈阳工业大学 白保东 节能环保 优先发展领域 40 10 20123218130002 基于脉振高频电流注入的永磁同步电机低速无位置传感器技术 南京航空航天大学 周波 节能环保 优先发展领域 40 11 20123219130003 基于石墨烯的多功能异质结 南京理工大学 汪信 节能环保 优先发展领域 40 12 20124116130001 煤矿回风流低浓度瓦斯多级提纯基础研究 河南理工大学 李化敏 节能环保 优先发展领域 40 13 20126118130002 非均匀入流条件下离心泵内部流动机理及压力脉动特性研究 西安理工大学 罗兴锜 节能环保 优先发展领域 40 14 20126125130001 基于聚集态结构的纤维素定向酸水解机理及技术研究 陕西科技大学 张美云 节能环保 优先发展领域 40 15 20120002130003 面向QoE的计算通信理论基础 清华大学 陆建华 新一代信息技术 优先发展领域 40 16 20120002130007 面向智能交通的元胞自动机交通流模型及其复杂动态行为的研究 清华大学 覃征 新一代信息技术 优先发展领域 40 17 20120005130001 基于网络编码的光组播路由机制与数据高效传送方法 北京邮电大学 纪越峰 新一代信息技术 优先发展领域 40 18 20120005130002 物联网环境中视频动态传输与海量数据处理方法 北京邮电大学 马华东 新一代信息技术 优先发展领域 40 19 20120009130002 高速铁路环境下新一代移动通信系统架构和关键技术研究 北京交通大学 谈振辉 新一代信息技术 优先发展领域 40 20 20120032130010 基于全网波长同步的新型大容量接入网关键技术研究 天津大学 于晋龙 新一代信息技术 优先发展领域 40 21 20120042130003 基于信任推荐和招标模型的社交云资源管理机制研究及原型实现 东北大学 王兴伟 新一代信息技术 优先发展领域 40 22 20120061130008 聚合物超宽波段电光路由/开关阵列及可扩拓扑机制研究 吉林大学 王一丁 新一代信息技术 优先发展领域 40 23 20120073130003 基片集成波导高速电互连技术 上海交通大学 毛军发 新一代信息技术 优先发展领域 40 24 20120076130003 可信信息物理融合系统的基础理论研究 华东师范大学 何积丰 新一代信息技术 优先发展领域 40 25 20120093130001 纤维集束体的可重构检测模型及实时响应研究 江南大学 高卫东 新一代信息技术 优先发展领域 4026 20120101130006 基于表面波远场宽场超分辨光学显微方法的研究 浙江大学 刘旭 新一代信息技术 优先发展领域 40 27 20120142130004 基于受激布里渊散射的微波信号全光处理技术研究 华中科技大学 孙军强 新一代信息技术 优先发展领域 40 28 20120142130008 基于分子计算的非传统信息处理技术 华中科技大学 潘林强 新一代信息技术 优先发展领域 40 29 20120162130008 基于协同的机会网络传输技术研究 中南大学 陈志刚 新一代信息技术 优先发展领域 40 30 20120181130007 交互式人体肝脏数字虚拟模型研究 四川大学 章毅 新一代信息技术 优先发展领域 40 31 20120184130002 序列奇周期相关特性与非周期相关特性及其应用研究 西南交通大学 唐小虎 新一代信息技术 优先发展领域 40 32 20120185130001 基于时间反演电磁学的超分辨率目标成像研究 电子科技大学 王秉中 新一代信息技术 优先发展领域 40 33 20121101130001 复杂电磁环境下多域自适应抗干扰通信技术 北京理工大学 陶然 新一代信息技术 优先发展领域 40 34 20121102130001 基于面部信息分离的表情分析与理解研究 北京航空航天大学 毛峡 新一代信息技术 优先发展领域 40 35 20121102130004 共享虚拟环境中的三维变形表示与传输 北京航空航天大学 吴威 新一代信息技术 优先发展领域 40 36 20122304130002 面向未来网络的自律网络模型及适变机理研究 哈尔滨工程大学 王慧强 新一代信息技术 优先发展领域 40 37 20123120130001 高分辨率光场成像理论及其在3-D信息获取与显示中的应用研究 上海理工大学 庄松林 新一代信息技术 优先发展领域 40 38 20124307130004 面向大规模异构可重构系统的对等操作系统关键技术研究 国防科学技术大学 张春元 新一代信息技术 优先发展领域 40 39 20124420130001 面向强随机业务流的家庭物联网服务质量控制机理研究 广东工业大学 章云 新一代信息技术 优先发展领域 40 40 20120002130004 翻译后修饰蛋白的化学合成新方法 清华大学 刘磊 生物 优先发展领域 40 41 20120002130005 植物Rubisco小亚基在植物病毒侵染中的作用 清华大学 刘玉乐 生物 优先发展领域 40 42 20120003130003 入侵植物刺耳龙葵种群扩散规律的研究 北京师范大学 娄安如 生物 优先发展领域 40 43 20120008130006 植物源农药辣根素防治棉花黄萎病研究 中国农业大学 李健强 生物优先发展领域 40 44 20120043130001 人参果胶调节免疫活性的构效关系及其机制研究 东北师范大学 周义发 生物 优先发展领域 40 45 20120043130002 果蝠对热带亚热带经济作物的生态作用及种群生态学研究 东北师范大学 冯江 生物 优先发展领域 40 46 20120061130001 羊传染性脓疱病毒感染宿主细胞的差异表达基因鉴定与功能分析 吉林大学 高丰 生物 优先发展领域 40 47 20120073130011 OsMADS34在控制水稻花序发育中作用机制研究 上海交通大学 张大兵 生物 优先发展领域 40 48 20120093130002 脂肪氧合酶高效生产菌种构建和发酵优化 江南大学 堵国成 生物 优先发展领域 40 49 20120096130002 山楝属植物新颖结构变形三萜的发现和抗肿瘤活性研究 中国药科大学 孔令义 生物 优先发展领域 40 50 20120097130002 高产甘油酿酒酵母工程菌构建及其防控奶牛能量代谢病机制 南京农业大学 黄克和 生物 优先发展领域 40 51 20120097130004 重金属胁迫下植物过氧化氢积累与金属结合蛋白表达间的关系 南京农业大学 沈振国 生物 优先发展领域 40 52 20120097130006 水稻水通道蛋白PIP1与水稻黄单胞菌Hpa1蛋白互作及信号转导机制 南京农业大学 董汉松 生物 优先发展领域40 53 20120101130004 蝶蛹金小蜂毒液源寄主免疫抑制因子的筛选及其利用 浙江大学 叶恭银 生物 优先发展领域 40 54 20120101130009 基于适配体的转基因蛋白检测用微流控阻抗生物传感方法研究 浙江大学 应义斌 生物 优先发展领域 40 55 20120101130011 基于DNA杂交编码技术构建嗅觉受体和细胞阵列的仿生嗅觉传感机理研究 浙江大学 王平 生物 优先发展领域 40 56 20120101130014 携带流行毒株E2基因重组猪瘟病毒标记弱毒疫苗构建及其免疫原性研究 浙江大学 方维焕 生物 优先发展领域 40 57 20120121130001 一株新分离的特殊、高效溶藻微生物的作用机理与生态过程研究 厦门大学 郑天凌 生物 优先发展领域 40 58 20120131130008 结构脑网络组的生前发育 山东大学 刘树伟 生物 优先发展领域 40 59 20120131130010 骨髓间充质干细胞在新型工程支架材料上血管化的分子机制研究 山东大学 苗俊英 生物 优先发展领域 40 60 20120132130001 海州湾及邻近海域小黄鱼早期补充机制的研究 中国海洋大学 万荣 生物 优先发展领域 40 61 20120132130002 栉孔扇贝生长抗逆性状的精细遗传解析 中国海洋大学 包振民 生物 优先发展领域 4062 20120141130008 基于冠状病毒复制酶功能的药物靶标鉴定与抑制剂筛选 武汉大学 郭德银 生物 优先发展领域 40 63 20120142130009 紫杉醇母核有效羟化途径的合成生物学研究 华中科技大学 余龙江 生物 优先发展领域 40 64 20120146130003 GnIH基因疫苗构建及其与INH基因疫苗联合应用的效果与作用机制研究 华中农业大学 杨利国 生物 优先发展领域 40 65 20120146130004 柑橘体细胞杂种的基因组倍性效应及果实品质特征 华中农业大学 郭文武 生物 优先发展领域 40 66 20120171130003 miR397在水稻谷粒大小决定中的作用及调控机制 中山大学 陈月琴 生物 优先发展领域 40 67 20120181130006 纳米金负载多胺或大环多胺基因转染载体的研究 四川大学 余孝其 生物 优先发展领域 40 68 20120181130008 细胞自噬在植物衰老以及天然免疫反应中的作用研究 四川大学 林宏辉 生物 优先发展领域 40 69 20120201130011 与Sertoli细胞共培养的血管化胰岛种植于小肠粘膜下层构建人工胰岛 西安交通大学 薛武军 生物 优先发展领域 40 70 20121108130001 水稻渗透刺激快速应答分子（OsEROS1）的筛选、特性和调控机理研究 首都师范大学 李乐攻 生物 优先发展领域 40 71 20121208130001 大肠杆菌中蒜氨酸生物合成途径的构建及其代谢流研究 天津科技大学 路福平 生物 优先发展领域 40 72 20121420130001 牛羊群布鲁氏菌病的数学建模与研究 中北大学 靳祯 生物 优先发展领域 40 73 20121515130001 德氏乳杆菌保加利亚亚种后酸化功能基因及其调控机制的研究 内蒙古农业大学 张和平 生物 优先发展领域 40 74 20122307130001 TRX与PEDF在砷致肝脏和中枢神经系统损伤过程中的作用研究 哈尔滨医科大学 孙殿军 生物 优先发展领域 40 75 20122307130003 亚砷酸治疗APL时砷代谢产物浓度与疗效、副作用关系研究 哈尔滨医科大学 周晋 生物 优先发展领域 40 76 20123221130001 基于高效催化红景天苷合成的糖苷酶解析及其底物识别机制研究 南京工业大学 何冰芳 生物 优先发展领域 40 77 20123402130004 非整倍体细胞命运决定的分子基础及机制 中国科学技术大学 史庆华 生物 优先发展领域 40 78 20123402130006 p53家族蛋白及其相关microRNA调控细胞代谢的机制研究 中国科学技术大学 吴缅 生物 优先发展领域 40 79 20123603130001 不同繁殖力猪种的基因组重测序分析与产仔数基因的鉴别 江西农业大学 黄路生 生物 优先发展领域 40 80 20123702130001 抗凋亡基因对平邑甜茶根系死亡与分化的调控 山东农业大学 杨洪强 生物 优先发展领域 40 81 20123704130001 耐盐甜高粱种质筛选及拒Na+机理研究 山东师范大学 王宝山 生物 优先发展领域 40 82 20124404130001 脂肪代谢关键酶SCD1和DGAT2对猪肌肉脂肪酸组成的调控作用 华南农业大学 江青艳 生物 优先发展领域 40 83 20120001130008 利用小鼠模型及人卵母细胞体外成熟体系评价磷酸二酯酶（PDE）3抑制剂作为潜在避孕药物的可行性与安全性 北京大学 乔杰 医学 优先发展领域 40 84 20120001130013 多靶点药物递送与多靶点抗肿瘤研究 北京大学 张强 医学 优先发展领域 40 85 20120013130002 中药菊苣颗粒治疗高尿酸血症作用特点与机制的实验研究 北京中医药大学 张冰 医学 优先发展领域 40 86 20120061130010 EphrinB2/EphB4双向信号介导的促红细胞生成素对骨重塑的作用及机理研究 吉林大学 孙宏晨 医学 优先发展领域 40 87 20120071130011 瑞香狼毒及其近缘植物的抗艾滋病毒活性二萜药物资源 复旦大学 陈道峰 医学 优先发展领域 40 88 20120096130001 维卡格雷的分子机制及新药研究 中国药科大学 孙宏斌 医学 优先发展领域 40 89 20120121130003 新型超快速高分辨磁共振定域谱方法及其在生物医学中的应用 厦门大学 陈忠 医学 优先发展领域 40 90 20120141130009 程序缓释定向纤维支架和静态微应力在种植体类牙周膜形成中的作用 武汉大学 王贻宁 医学 优先发展领域 40 91 20120141130010 POT1/TPP1复合体介导的端粒稳态维持机制在放射性DNA损伤形成及转归中的作用 武汉大学 周云峰 医学 优先发展领域 40 92 20120142130002 阻断NKG2D/Ligand减轻心脏移植物血管病变的作用及机制 华中科技大学 夏家红 医学 优先发展领域 40 93 20120162130001 新一代抗肾纤维化新药ZHC116抗炎机制研究 中南大学 陶立坚 医学 优先发展领域 40 94 20120162130003 DNA羟甲基化调控CD4+T细胞活化与分化及其在系统性红斑狼疮发病中的作用 中南大学 陆前进 医学 优先发展领域 40 95 20120171130013 吡非尼酮防治常见眼科术后增殖性病变的研究及眼用缓释系统研制 中山大学 余敏斌 医学 优先发展领域 40 96 20120181130002 透明质酸对软骨细胞骨架的影响及其对关节软骨保护的分子机制研究 四川大学 裴福兴 医学 优先发展领域 40 97 20120181130004 法医学三等位基因SNPs遗传标记的探索研究 四川大学 侯一平 医学 优先发展领域 40 98 20120181130015 TCF7L2促少突胶质细胞髓鞘形成及损伤修复的分子遗传学机制 四川大学 毛萌 医学 优先发展领域 40 99 20120201130009 人工寰齿关节的研制与应用基础研究 西安交通大学 贺西京 医学 优先发展领域 40 100 20121106130001 以α-突触核蛋白为靶点的抗帕金森病创新药物的基础研究 北京协和医学院 陈乃宏 医学 优先发展领域 40 101 20121106130002 应用活体动物光学成像及超声微血管显像动态监测HIF-1α对乳腺癌新生血管的调控 北京协和医学院 姜玉新 医学 优先发展领域 40 102 20121106130005 骨髓增生异常综合征剪切体复合物蛋白编码基因突变的研究 北京协和医学院 肖志坚 医学 优先发展领域 40 103 20122134130001 氨基糖苷类抗生素结构中各种氨基葡萄糖生成机制及相关组合生物合成的研究 沈阳药科大学 夏焕章 医学 优先发展领域 40 104 20123107130002 黄芪甲苷在自身免疫神经退行性疾病中的神经保护作用研究 上海中医药大学 王峥涛 医学 优先发展领域 40 105 20124323130001 冠心病血瘀证心肌细胞能量代谢网络模型的研究 湖南中医药大学 袁肇凯 医学 优先发展领域 40 106 20120032130002 基于光频梳的大长度精密测量技术研究 天津大学 曲兴华 高端装备制造 优先发展领域 40 107 20120073130010 微通道管材分流挤压成形机理与界面焊合模型 上海交通大学 彭颖红 高端装备制造 优先发展领域 40 108 20120101130003 复杂薄壁曲面件复合型精密旋压关键技术研究 浙江大学 陆国栋 高端装备制造 优先发展领域 40 109 20120131130009 高速GMAW焊接熔池后向液体流的动量调控机制研究 山东大学 武传松 高端装备制造 优先发展领域 40 110 20120142130011 模板式有机气相喷印沉积成膜机理与装备研究 华中科技大学 张鸿海 高端装备制造 优先发展领域 40 111 20120161130001 基于超级计算平台的大型航天装备整机结构优化设计关键技术研究 湖南大学 文桂林 高端装备制造, 优先发展领域 40 112 20120181130012 高可靠精密滤波传动与智能装备集成系统关键技术研究 四川大学 王家序 高端装备制造 优先发展领域 40 113 20120185130002 无缝采集与数据处理方法研究 电子科技大学 王厚军 高端装备制造 优先发展领域 40 114 20122216130001 不规则复杂曲面、型孔磨粒流研抛智能高端数控精密装备及其工艺技术研究 长春理工大学 刘薇娜 高端装备制造 优先发展领域 40 115 20123227130002 基于挠曲电效应的航空结构早期损伤监测应变梯度传感器 江苏大学 骆英 高端装备制造 优先发展领域 40 116 20123318130001折叠翼展开机构工作可靠性建模与仿真评价方法研究 浙江理工大学 陈文华 高端装备制造 优先发展领域 40 117 20126102130003 飞行器薄壁曲面开孔结构的先进优化设计方法研究 西北工业大学 张卫红 高端装备制造 优先发展领域 40 118 20126102130004 基于非线性映射和证据理论的飞行器结构损伤位置振动检测方法研究 西北工业大学 闫云聚 高端装备制造 优先发展领域 40 119 20120014130001 非粮生物质燃料乙醇原料资源高效培育技术研究 北京林业大学 马履一 新能源 优先发展领域 40 120 20120032130008 具有大规模分布式可再生能源接纳能力的智能配电系统规划及分析 天津大学 王成山 新能源 优先发展领域 40 121 20120036130001 永磁电机式机械弹性储能机组若干基础问题研究 华北电力大学 米增强 新能源 优先发展领域 40 122 20120073130006 分布式光伏系统发电/储能协同控制与能量优化 上海交通大学 李少远 新能源 优先发展领域 40 123 20120073130009 大体积非均匀放射性废物三维活度探测技术研究 上海交通大学 王德忠 新能源 优先发展领域 40 124 20120092130008 新型双定子无刷双馈风力发电机及控制系统研究 东南大学 程明 新能源 优先发展领域 40 125 20120101130010 燃料电池应急电源系统电力电子功率变换构架及控制 浙江大学 徐德鸿 新能源 优先发展领域 40 126 20120101130016 核电站反应堆一回路冷却剂泄漏故障的监测、诊断、预警关键技术研究 浙江大学 梁军 新能源 优先发展领域 40 127 20120131130003 离子液体参与构筑的新型燃料电池质子交换膜的研究 山东大学 郑利强 新能源 优先发展领域 40 128 20120161130002 基于生物表面活性剂的柴油逆胶束体系的构建及其对生物质衍生生物油的乳化方法与机理 湖南大学 袁兴中 新能源 优先发展领域 40 129 20120181130014 由若干生物质基原料制备高附加值化学品研究 四川大学 胡常伟 新能源 优先发展领域 40 130 20120191130003 微型风振压电能量转换装置中流致振动机理及能量转换关键影响因素研究 重庆大学 张力 新能源 优先发展领域 40 131 20120201130004 高效可调控纳米异质结构阵列基纳米复合材料太阳能电池的基础研究 西安交通大学 阙文修 新能源 优先发展领域 40 132 20120201130006 太阳能吸热器的高效光捕获机制与光热转换机理及优化设计的基础研究 西安交通大学 何雅玲 新能源 优先发展领域 40 133 20123402130008 生物质基液体含氧燃料的基础研究 中国科学技术大学 郭庆祥 新能源 优先发展领域 40 134 20126501130001 独立变桨技术对兆瓦级风力发电机组电能质量影响的研究 新疆大学 王维庆 新能源 优先发展领域 40 135 20120031130002 锂离子动力电池用高容量正极材料 南开大学 高学平 新能源汽车 优先发展领域 40 136 20120032130009 醇-烃二元燃料燃烧反应动力学及其在柴油机缸内燃烧中的应用 天津大学 姚春德 新能源汽车 优先发展领域 40 137 20120131130007 车电互联模式下插电式混合动力汽车动力系统关键控制问题研究 山东大学 张承慧 新能源汽车 优先发展领域 40 138 20120211130005 高功率密度锂离子电池负极硅基材料研究 兰州大学 贺德衍 新能源汽车 优先发展领域

近日，美国加州大学旧金山分校与纪念斯隆凯特琳癌症中心等单位的研究人团队合作Cell期刊发表了题为“Mapping information-rich genotype-phenotype landscapes with genome-scale Perturb-seq”的研究性文章。研究团队利用一种紧凑的、多路CRISPR干扰文库（CRISPRi），结合单细胞转录组测序、Perturb-seq技术等分析了数千个功能缺失的基因扰动在不同细胞类型中的作用，揭示了细胞表型、基因功能和调控网络的多维信息，绘制了第一个全面的人类细胞基因型-表型综合图谱。文章发表在Cell研究概要图，来源：Cell新基因功能数据可供其他科学家使用。图片来源：Jen Cook-Chrysos/Whitehead Institute建立遗传变化和表型之间的关联对于理解基因和细胞功能至关重要。经典的研究方式主要包括以表型为中心的“正向遗传”，即揭示驱动表型的基因变化；以及以基因为中心的“反向遗传”，即对确定的遗传变化引起的不同表型进行解析。近年来，基因技术的革新也推动了表观遗传遗传研究的进展。其中，CRISPR-Cas9基因编辑技术可以轻松地对基因进行编辑，进而抑制或激活基因，在揭示基本细胞机制、分化因子和遗传疾病相关基因以及识别癌症驱动基因等层面提供了有力工具。单细胞技术的发展也使在单细胞层面读取表观遗传学、转录组学、蛋白质组学和成像信息等成为可能，同时单细胞维度的研究也可以深入分析选择性遗传扰动影响的具体细胞类型和细胞状态。因此，单细胞CRISPR筛选可以同时分析单细胞的遗传干扰和高维表型，从而将正向遗传学的基因与反向遗传学丰富的表型相结合。虽然单细胞CRISPR筛选技术前景广阔，但其应用仅限于最多几百个基因扰动研究，并且这些基因扰动研究也通常被用来解决预先确定的生物学问题。目前，高通量、无偏颇的单细胞CRISPR筛选研究仍然缺失。主要研究内容全基因组Perturb-seq的多路CRISPRi策略Perturb-seq是指利用CRISPR-Cas9技术将基因变化引入细胞内，然后使用单细胞转录组测序捕获特定基因变化导致的转录组信息变化，能够研究给定细胞类型的全面遗传扰动影响，可以以前所未有的深度跟踪打开或关闭基因的影响。基于Perturb-seq，研究团队探究了可以提高可扩展性和数据质量的关键参数，例如遗传扰动模式和sgRNA库，并最终设计了一种包含多个时间点和细胞类型的Perturb-seq筛选方法，并可利用10x Genomics的液滴法单细胞转录组测序技术对所有筛选策略下的细胞状态进行解析。图1. 基因组尺度Perturb-seq的多路CRISPRi策略示意图，来源：Cell为了揭示基因扰动的功能后果和基因型-表型关系，研究团队使用人类血癌细胞系以及来自视网膜的非癌细胞，对超过250万个细胞进行了Perturb-seq，并使用这些数据构建了一个基因型-表型综合图谱。研究团队根据基因的共同调控将其聚类到特定表达程序中，并计算每个扰动簇中每个基因表达程序的平均活性。分析结果包含多个与基因干扰相关的已知表达程序，包括蛋白酶体功能障碍导致的蛋白酶体亚基上调、 ESCRT蛋白缺失时NF-kB信号通路的激活，以及胆固醇生物合成上调对囊泡运输缺陷的反应等。有趣的是，聚类分析发现了许多驱动红系或髓系分化的基因扰动，与K562细胞的多系潜能也是一致的。正如预期的那样，红细胞生成的关键调控因子（GATA1、LDB1、LMO2和KDM1A）的缺失导致了髓系分化增强，BCR-ABL及其适配体GAB2的抑制则促进了红细胞的分化。接下来，研究团队分析了选择性必需基因的分化作用，因为这些基因可能是颇具前景的治疗靶点。研究发现，在K562细胞中必需的酪氨酸磷酸酶PTPN1的缺失驱动了髓细胞分化。此外，在靶向实验中，联合敲除PTPN1和KDM1与单独敲除任意一个基因相比，导致分化和生长缺陷的表型会显著增加，表明这些靶点是通过不同的细胞机制发挥作用。以上结果强调了表型在了解细胞分化和治疗靶点方面的效用。图2. 基于Perturb-seq的基因型与表型关系汇总，来源：Cell单细胞中非整倍体的基因驱动和影响探索单细胞异质性可以揭示在整体或平均检测中被遗漏的机制。为了评估基因扰动诱导表型的外显率，研究团队采用SVD评分作为单细胞表型大小的衡量标准，通过单细胞SVD分数的变化对基因扰动进行表型影响评估。SVD评分是量化每个受扰动细胞的转录组相对于对照细胞的离群程度。分析结果表明，许多与染色体分离有关的基因都是细胞异质性的主要驱动因素，包括TTK、SPC25、DSN1，这些遗传干扰导致的极端转录变化可能是由于有丝分裂错误分离导致的染色体拷贝数的急性变化。为了探究这一点，研究人员使用inferCNV估算了基因组中单细胞DNA拷贝数变异。与预期一致，干扰纺锤体装配检查点的核心组成部分TTK，可以导致非整倍体和近整倍体细胞的染色体拷贝数发生显著变化。此外，干扰TTK的细胞中有76%发生了核型改变，未受干扰的细胞中只有2%发生了核型改变。值得注意的是，由于染色体的随机增加或减少，TTK敲除细胞具有高度可变的核型，这也是其表型异质性的原因。同时，该分析还揭示了单细胞CRISPR筛选可以用来解析表型，而不是预先定义的实验终点。图3. 单细胞中非整倍体的基因驱动和后果，来源：Cell发现线粒体基因组的应激特异性调控因子当前，领域内一个关键的科学问题是如何理解细胞核和线粒体基因组的表达来应对线粒体压力。该最新研究的实验设计为探究这一问题提供了可能。为了确定基因扰动引起的差异表达模式，研究团队检测了单细胞转录组测序数据在线粒体基因组中的分布。为了验证这种基于位置的分析的有效性，首先证实了已知线粒体转录调控因子（TEFM）和RNA降解（PNPT1） 的敲除会导致线粒体基因组位置发生重大变化。相比之下，研究发现许多基因扰动似乎导致了mRNA相对丰度的变化，而不是位置排列的总体变化。鉴于观察到的反应的复杂性，研究人员提出可能有多种机制影响不同线粒体编码转录本的水平，以应对不同的压力。图4. 解析压力应激下线粒体基因组的调控机制，来源：Cell结 语 单细胞CRISPR筛选代表了一种新兴的工具，可用于生成丰富的基因型-表现型图谱。但目前单细胞CRISPR筛选研究仅限于预先选择的基因，研究重点也是预先确定的生物学问题。在该最新研究中，研究团队进行了全基因组规模的单细胞CRISPR筛选，并展示了这些筛选策略是如何使用数据驱动的分析来解剖广泛的生物学现象，强调了关键的基因功能和衍生原则，同时绘制了丰富的基因型-表型图谱以指导未来的研究。该研究为系统探索遗传和细胞功能提供了源动力，同时也为领域提供了宝贵的数据资源。在未来，研究人员希望将Perturb-seq用于癌细胞系之外的不同类型细胞研究，也希望继续探索基因功能图谱。文章共同通讯作者Thomas M. Norman博士表示：“该研究是多个科研团队多年合作工作的结晶，很高兴看到它继续取得成功和扩展，我认为这个数据集甚至将使来自生物医学以外领域的研究团队进行各种分析成为可能。”参考文献：1. Replogle et al., Mapping information-rich genotype-phenotype landscapes with genome-scale Perturb-seq, Cell （2022）.2. Fianu, I., et al., （2021）. Structural basis of Integrator-mediated transcription regulation. Science 374, 883–887.3. Kummer, E., and Ban, N. （2021）. Mechanisms and regulation of protein synthesis in mitochondria. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 22, 307–325.