片段大小

请教一下：谁能告诉我，有什么型号的色谱柱可用于分离大小在100bp到500bp的DNA 片段？我有30多个组分要分离。有公司向我推荐 Amersham公司凝胶过滤预装柱 ，但是价格都近两万，有朋友向我推荐岛津，等公司的c18柱子（ODS柱），便宜，不知道效果会不会差一些呢？如果可以，有没有国产的也能解决问题呢？有那些型号的可有用？请高手指点，谢谢！

一、实验目的 本实验目的了解PCR反应用来扩增DNA 特异性片段实验的的基本原理、实验方法和操作步骤，熟练掌握PCR反应基本体系配制和实验条件的设定。 二、实验原理 PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领域，它不仅可用于基因分离克隆和核酸序列分析，还可用于突变体和重组体的构建，基因表达调控的研究，基因多态性的分析，遗传病和传染病诊断，肿瘤机制探查，法医鉴定等方面。PCR技术已成为方法学上的一次革命，它必将大大推动分子生物学各学科的研究发展。PCR是一种利用两种与相反链杂交并附着于靶DNA两侧的寡核苷酸引物经酶促合成特异的DNA 片段的体外方法，由高温变性，低温退火和适温延伸等几步反应组成一个循环，然后反复进行，使目的的DNA 得以迅速扩增，主要过程如图6。置待扩增DNA 于高温下解链成为单链DNA 模板;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温条件下分别与目的片段两侧的两条链互补结合;DNA聚合酶在72 ℃将单核苷酸从引物3"端开始掺入，沿模板5"—3"方向延伸，合成DNA 新链。由于每一循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板，所以PCR 产物以指数方式增加，经25—30次周期之后，理论上可增加109倍，实际上可增加107倍。PCR技术具有操作简便、省时、灵敏度高特异性强和对原始材料质量要求低等优点，但由于所用的TaqDNA 聚合酶缺乏5"—3"核酶外切酶活性，不能纠正反应中发生的错误核苷酸掺入，估计每9000个核苷酸会导致一个掺入错误，不过Innis M·A 发现，错误掺入的碱基有终止链延伸的作用倾向，使得错误不会扩大。PCR技术应用广泛，不可能有这样一套条件满足所有的实验，但本实验所介绍的方法可适应于大多数DNA 扩增反应，即使有的不适应，至少也确定了一个共同的起点，在此基础上可以作多种变化。不过下列因素在实验应用时应予以特别注意，以求取得满意结果。1. 模板：单、双链DNA 和RNA都可以作为PCR样品，若起始材料是RNA，须先通过逆转录得取第一条cDNA。虽然PCR 可以仅用极微量的样品，但为了保证反应的特异性，一般宜用ng 量级的克隆DNA，ug 级的染色体DNA，待扩增样品质量要求较低，但不能混合有任何蛋白酶、核酸酶，Taq DNA聚合酶的抑制剂以及能结合DNA 的蛋白质。2. 引物：引物是决定PCR 结果的关键，下列原则有助于引物的合理设计。(1)尽可能选择碱基随机分布，GC 含量类似于被扩增片段的引物，尽量避免具有多聚嘌呤、多聚嘧啶或其它异常序列的引物。(2)避免具有明显二级结构(尤其是在引物3"—末端)的序列。(3)防止引物间的互补，特别要注意避免具有3"末端重叠的序列。(4)引物的长度约为20个碱基，较长引物较好，但成本增加，短引物则特异性降低。(5)引物浓度不宜偏高，过高易形成二聚体，而且扩增微量靶目标或起始材料是粗制品，容易产生非特异产物。3. 缓冲液：PCR缓冲液的变化通常会影响扩增结果，特别是MgCl2，其浓度对专一性和扩增量有重大影响，通常最适浓度为1.5 mM左右(每种dNTP 的浓度为0.2 mM时)，浓度过高，使反应特异性降低;浓度过低，使产物产量降低。四种dNTP 浓度通常每种都是0.05 mM—0.2 mM。过高的浓度会导致错误掺入，浓度过低，则影响反应产物的产量。四种dNTP浓度应大体相同，其中一种若偏高，会诱发错误掺入，降低合成速度，过早终止延伸反应。另外dNTP 能与Mg2+结合，使游离Mg2+浓度降低，所以如果dNTP 的浓度有很大改变，MgCl2浓度也要改变。Taq聚合酶是一种耐高温聚合酶，用量通常是1—4 单位/100 ul，浓度过高，产生过多的非特异片段。4. 循环参数：PCR 循环是把起始材料加热到90—95 ℃，保持短时间使双链DNA 解链;然后冷却至37—55 ℃，使引物与模板退火;再升温至70—75 ℃，在TaqDNA聚合酶的作用下掺入单核苷酸，使引物沿模板延伸。解链不完全是导致PCR 失败的最主要原因。用DNA扩增仪时，94 ℃保持1 分钟可使模板的起始物完全变性。若用低于94 ℃的条件，则应适当延长时间。引物与模板退火温度由引物的长度及G+C含量决定。适时间退火(1—2)分钟有利于产物的特异性。引物延伸在70—75 ℃保温的时间可根据扩增DNA片段的长短来调节。正常情况下，每分钟可延伸1 Kb 的长度，常规PCR 一般为25—40个循环，若循环加长，则由于酶活性降低，聚合时间延长，引物及单核苷酸减少等原因，反应后期容易产生错误掺入，所以在满足产物得率前提下，应尽量减少周期次数。三、材料(一)仪器与器皿PRC 扩增仪(PE2400)，琼脂糖凝胶电泳设备，微量取样器，一次性指形管，凝胶成像仪 玻片(二)试剂与材料1. 琼脂糖凝胶电泳试剂1)电泳缓冲液：Tris—乙酸0.04 mol/L PH8.0 0.002 mol/L EDTA2)加样缓冲液：0.25%溴酚兰40% w/v蔗糖3)溴化乙锭溶液：0.05 mg/ml溴化乙锭/水4)琼脂糖2. TaqDNA 多聚酶3. 5′反应缓冲液：125 mmol/L Tris-HCl pH8.2;10 mmol/L MgCl2;0.5 mg/ml gelatin;125 mmol/L(NH4)2SO4; Formamide 25%4. 混合dNTP 液(dATP dGTP dTTP dCTP各2 mmol/L)5. DNA 模板(每2 ml 中含有10 fg 待扩增DNA)6. 引物 1 (25 pmol/L)，5’加入EcoRI 粘性末端碱基7. 引物 2 (25 pmol/L)，5’加入HindIII 粘性末端碱基8. 无菌水四、实验步骤1. 按顺序在200 ml 指形管中加入以下试剂与样品：(因购入的试剂批次不同，加样时有 所差别，以预实验结果为准。)1) ddH2O 74 ml2) 10′Buffer 10 ml3) MgCl2 6 ml(10′Buffer 如已加入MgCl2，则不必加)4) dNTP 2 ml5) 引物1 2 ml6) 引物2 2 ml7) 模板 2 ml8) Taq DNA聚合酶2 ml总体积共100 ml(也可以配成40 ml 的反应体系)2. 在PCR 扩增仪上按以下反应条件编入程序：(以下为参考值，因扩增的DNA片段不同，各类PCR 扩增仪程序设定各不相同，编程过程视扩增的DNA 片段的要求及仪器而定参数，见示范。)预变性 94 ℃ 2 分种循环条件(30 次)变性 94 ℃ 40 秒复性 55 ℃ 35 秒延伸 72 ℃ 2 分10 秒延长延伸 72 ℃ 7 分钟编完反应程序，置反应管于PCR扩增仪的反应孔中，开动机器，扩增循环反应开始。3. PCR 扩增完毕，配2%琼脂糖凝胶，取15 ml 反应液及相适应的PCR mark 分别点样， 加样缓冲液应为40%W/V 蔗糖，电泳观察结果。4. 凝胶成像仪或紫外灯下观察实验结果，是否已扩增到实验设计的DNA 片段。注意事项： 要想得到预期的实验结果，PCR的反应条件和很多参数有着密切的关系，都应引起注意。在实验设计中我们要考虑到模板浓度的大小，设计引物时也要主要引物长度适当以及恰当的GC含量，在PCR体系中引物浓度，dNTPs浓度相对要均衡，选取的taq enzyme，缓冲液的离子含量也是影响产物的结果，另外就是要根据产物大小设定适当的变性时间，退火温度及时间，延伸的时间。

我的一个朋友学生物的，最近正发愁如何对DNA片段进行液相分析。问了下，DNA片段是人工合成的，所以基体并不复杂，目的是通过对目标物的测定，表征之前的生物过程效果（内切什么的），分子量3000左右。由于自己对生物学方面知识薄弱（早已忘记了DNA分子化学结构为何、有何基团），没有提出意见。回来查了一下。首先看到的是Transgenomic公司wave商品名的DNA分离分析系统。看了下介绍，原来所谓的“分子桥”就是离子对色谱法。对于阴离子（磷酸基团PKA1为1-2）的核酸片段，通过加入三乙基胺醋酸盐，与之形成离子对，通过三乙基胺的疏水性与C18作用，形成保留，然后用乙腈洗脱，似乎没什么专利的内容。后来发现，关键在于那根特别的C18链的DNA分析柱，“无孔多苯乙烯-二乙烯基苯 (PS-DVB)共聚物微球(3微米)与C18形成稳定的固相”。疑问1：这种非硅胶基质的C18柱有何神奇之处？硅胶基质的C18为能不能做（估计不能，要不就不是专利了）？（硅胶表面的硅羟基会不会和DNA有什么反应）疑问2：有孔与无孔，对于这种大分子有何不同？孔径方面要选多大的，120A的会堵柱子么？疑问3：wave仪器的柱温为50-80度之间，分别应对非变性，部分和全部变性。这里的变性为何？一般柱温箱和C18的柱子柱温上限为多少？文献方面，看到一些用强阴离子交换（SAX）做的。tris-HCl缓冲系统，pH控制在9。此时DNA片段挂在SAX柱上。然后通过NaCl梯度淋洗（Cl-竞争?），洗脱下DNA分子片断。自己并不懂离子色谱。疑问1：SAX柱怎么使用和维护？需要注意什么？硅胶基质的和聚合物基质相比除了pH耐受性外有何不同？疑问2：为何选用NaCl淋洗？淋洗完后，挂在柱上的季胺上的Cl-怎么办？疑问3：此方法与那个wave相比，优点和缺点为何？其实疑问有很多，就不一一列出了，希望有经验的前辈多多发言，不吝赐教，小生感激涕零。

我的一个朋友学生物的，最近正发愁如何对DNA片段进行液相分析。问了下，DNA片段是人工合成的，所以基体并不复杂，目的是通过对目标物的测定，表征之前的生物过程效果（内切什么的），分子量3000左右。我问了下他现在怎么做的，回答流动相是三乙胺醋酸盐、乙腈。由于自己对生物学方面知识薄弱（早已忘记了DNA分子化学结构为何、有何基团），没有提出意见。回来查了一下。首先看到的是Transgenomic公司wave商品名的DNA分离分析系统。看了下介绍，原来所谓的“分子桥”就是离子对色谱法。对于阴离子（磷酸基团PKA1为1-2）的核酸片段，通过加入三乙基胺醋酸盐，与之形成离子对，通过三乙基胺的疏水性与C18作用，形成保留，然后用乙腈洗脱，似乎没什么专利的内容。后来发现，关键在于那根特别的C18链的DNA分析柱，“无孔多苯乙烯-二乙烯基苯 (PS-DVB)共聚物微球(3微米)与C18形成稳定的固相”。疑问1：这种非硅胶基质的C18柱有何神奇之处？硅胶基质的C18为能不能做（估计不能，要不就不是专利了）？（硅胶表面的硅羟基会不会和DNA有什么反应）疑问2：有孔与无孔，对于这种大分子有何不同？孔径方面要选多大的，120A的会堵柱子么？疑问3：wave仪器的柱温为50-80度之间，分别应对非变性，部分和全部变性。这里的变性为何？一般柱温箱和C18的柱子柱温上限为多少？（我印象中柱温箱好像就是50度）文献方面，看到一些用强阴离子交换（SAX）做的。tris-HCl缓冲系统，pH控制在9。此时DNA片段挂在SAX柱上。然后通过NaCl梯度淋洗（Cl-竞争阴离子？），洗脱下DNA分子片断。疑问1：SAX柱怎么使用和维护？需要注意什么？硅胶基质的和聚合物基质相比除了pH耐受性外有何不同？疑问2：为何选用NaCl淋洗？淋洗完后，挂在柱上的季胺上的Cl-怎么办？疑问3：此方法与那个wave相比，优点和缺点为何？其实疑问有很多，就不一一列出了，希望有经验的前辈多多发言，不吝赐教，小生感激涕零。

纱条不均种类和产生原因，不同片段长度的不匀对面的影响是怎样的？ 种类：长片段不匀，短片段不匀 长片段不匀，主要由清棉和前纺工序造成，若长片段周期性不匀率高，在织物上会出现明显的横条竖纹，对布面影响较大。 短片段不匀，主要由细纱的牵伸机构所造成，短片段不匀周期性不匀率严重时，几个粗节或细节在布面在布面上并列汇聚的概率较多，容易形成阴影或云斑，对布面影响很大。

用高效液相色谱法分离DNA片段用什么柱子

最近做了两个液体样品的GC/MS数据，得到了一些片段，但帮忙分析的老师只是给了两组样品的处理结果，我们想要获得更多的信息，在网上下载的AMDIS没有数据库可以查看，无从下手，不知道有没有朋友可以帮忙看看我的数据，非常感谢

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]教学视频片段，不是很清但也能看，是在学校里拍的。

搞到一个[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分离过程视频教学片段给大家分享，不知道有重复没？[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=159836][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分离过程视频教学片段[/url]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?sel=admin_name&keywords=zjzxwwl2a][b]《实验室录像片段-1.rar》[/b][/url]

资料中心的《ROHS检测现场演示》的很多片段怎么都没有了？？

[font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段，又叫做抗原结合片段，是指抗体的抗原结合区域，包含一条完整的轻链和一条重链的可变区和恒定区的[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]结构域。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段可进一步分为两部分：由轻链可变区和重链可变区组成的[/font][font=Calibri]Fv[/font][font=宋体]片段、由轻链恒定区[/font][font=Calibri]CL[/font][font=宋体]和重链恒定区[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]组成的[/font][font=Calibri]Fb[/font][font=宋体]片段。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段含有[/font][font=Calibri]440~450[/font][font=宋体]个氨基酸，其分子量约为[/font][font=Calibri]55kDa[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]与完整的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]相比，[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体片段缺乏糖基化的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]恒定区，具有组织渗透强、半衰期短、免疫原性较低和生产成本低等优势，在诊断、临床治疗等领域展现出广阔的应用前景。目前，至少有[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]款治疗性[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体药物获得美国[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]的批准并上市，另外，还有众多[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体处于临床开发和临床前研究阶段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]作为一家专注于抗体开发领域的公司，义翘神州可提供从免疫原合成、动物免疫、[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体库构建与筛选、鉴定等的一站式抗体服务。另外，我们也提供高效的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体表达纯化服务，以[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞为表达宿主，最终交付高质量的重组[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体片段。更多详情，请咨询我们的技术团队。[/font][/font][font=宋体][b][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体的区别[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段之间的差别是什么？[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]片段由抗体的重链和轻链可变区通过一条短肽（[/font][font=Calibri]15-20[/font][font=宋体]个氨基酸）连接而成。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段由完整的轻链以及部分重链结构（可变区和第一个恒定区）组成。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体具有[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CL[/font][font=宋体]区域，两者通过一个二硫键连接，不需要短肽。而[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]片段缺乏该区域，需要通过短肽将重链可变区（[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]）和轻链可变区（[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]）连接在一起。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][/font][font=宋体][font=宋体]构成：[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CL[/font][/font][font=宋体][font=宋体]分子量（[/font][font=Calibri]kDa[/font][font=宋体]）：[/font][font=Calibri]55[/font][/font][font=宋体]肿瘤渗透性：良好[/font][font=宋体]稳定性：长期储存时稳定性高[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]scFv[/font][/font][font=宋体][font=宋体]构成：[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VL[/font][/font][font=宋体][font=宋体]分子量（[/font][font=Calibri]kDa[/font][font=宋体]）：[/font][font=Calibri]28[/font][/font][font=宋体]肿瘤渗透性：较强[/font][font=宋体]稳定性：存储时间较长时不稳定[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production][b][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体片段制备[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体片段可通过构建噬菌体展示抗体文库筛选获得。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体库具有多项优势。首先，它可以快速有效地筛选出难以用杂交瘤技术获得的理想抗体。其次，和[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体一样，它可以轻松制备出高亲和力的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]利用自主开发的[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]细胞瞬时转染技术，义翘神州成功完成多个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段抗体的表达和制备项目。并且这些高质量的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段，可用于抗原[/font][font=Calibri]-Fab[/font][font=宋体]共结晶等应用。与酶解法制备抗体片段相比，利用哺乳动物细胞瞬时转染技术制备的重组[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体的质量更优。如果客户要求，我们也可以在大肠杆菌表达系统进行[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体的表达。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由于很多抗体[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段不能很好地结合蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]、蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]或蛋白[/font][font=Calibri]L[/font][font=宋体]亲和树脂，我们通常在抗体重链的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端添加[/font][font=Calibri]poly-histidine[/font][font=宋体]标签，以便于纯化。在设计构建载体时，可在[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]标签和[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]之间加上蛋白酶识别位点，这样抗体纯化后可通过蛋白酶切去除标签，得到无标签的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]如果您之前已在义翘神州订购过[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/custom-services-cro][b]CRO[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/custom-services-cro][b]服务[/b][/url]项目，一般情况下，您不需要为抗体制备订单支付预付款。义翘神州会根据抗体制备项目的具体费用进行报价，您在收到纯化抗体和发票后付款即可。但是，对于风险性较大的抗体制备项目，例如，制备恒定区有修饰的抗体，义翘神州需要收取少量的成本费用，用于可行性试验和工艺开发（如需）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注：抗体[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段表达与纯化[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production[/font][/font]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?sel=admin_name&keywords=zjzxwwl2a][b]《实验室录像片段-2.rar》[/b][/url]

[color=#444444]请问有一化合物 分子量大约2500， 分子极性比较小，脂肪链较长，含有（OCH2CH2）n个片段，这样的化合物怎么测定分子量？[/color]

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=18px]山东日照一医生疑似在网上直播妇科手术片段。警方通报，涉事医生厉某已被抓获。[/size][/font]

虽然最近非常忙，但还是要赶在今天写这个帖子，怕等到过了8月就记不起来了。这是我参加的第一个年会，前两届没有去成，甚憾！在大巴里坐在月版的旁边，小于让每个斑竹做介绍，我摆手势说自己不说话了。满眼的未谋面的斑竹，北没见到老虎老米老皮，南没见到老谢happy红狐王子，心里真是有说不出的滋味。好象热闹都是人家的，我在坐满人的大巴里还是感到刻骨的孤独。（跑题了）好在有几个精彩片段让我难忘，不虚此行。1 calfstone 小于让他用话筒，他就是不用，说：“我不习惯用话筒，我喜欢用真实的声音面对大家！”是个有个性的老师。2 怪侠一枝梅 他笑的时候让我想到老谢了，感到眉眼之间有那么几分神似。他居然成为仪器网的官方人员之一了，打个不恰当的比喻，4077好象是agilent，怪侠只能是varian了！我非常满意他对我的几句评价，他说，看我的帖子以为我是个男的，因为很大气，但是有时候又觉得是个女的写的，因为很细腻，得意啊！我自以为确实是个粗中有细的人，而且性格里有男儿的豪爽大气，心胸宽广，谁叫我出生在海边呢？3 李小侠？李小霞？ 在大巴上小于让大家做游戏，他报一个斑竹名字，让大家辨别是男是女，结果，李小侠两次被认为是女的，看来取名不光要看文字，也要讲究读音，未来的父母们要注意！其实想到的还有很多，但一向是个喜欢精简的人。明天要考试，搁笔了！祝仪器论坛官方民方一派和谐，其乐融融！又及：看到环保的儿子康复状况很好，甚慰！

2012年12月22日 来源： 中国科技网 作者： 华凌 中国科技网讯（记者华凌）据物理学家组织网12月21日（北京时间）报道，美国休斯敦卫理教会医院研究所和安德森癌症中心共同研发出如一张名片大小的V-芯片检测仪，可用一滴血同时测出胰岛素、蛋白质、胆固醇水平，甚至病毒或细菌感染迹象。该研究结果发表在最新一期《自然·通讯》杂志上。 现有的类似检测需要使用大型而复杂的设备，如质谱仪或X光透 视仪等。该项目的主要研究者、纳米医学会委员秦立冬（音译）教授介绍说，V-芯片能够带给床边、偏远地区和其他类型即时护理需求的测试。V-芯片测试准确、价格便宜、便于携带，仅需要一滴血的样本，就能做50种不同测试。 V-芯片如同一张名片大小，可以携带在口袋里。它由两个约3×2英寸的薄玻璃片构成，两者间的井孔中放置了4类物质：过氧化氢；多达50种不同的特定蛋白质抗体、DNA或RNA片段、血脂以及过氧化氢酶的酶；血清或其他样品；染料。最初，各孔保持彼此分开。当玻璃板上的启动转换时，孔之间会发生接触，从V-芯片的一端到另一端建立起一个连续的锯齿形转角空间。 对于要预测的物质，如胰岛素，结合抗体绑定到载玻片上后，过氧化氢酶使附近的过氧化氢分裂为水和氧气，这种方法称为酶联免疫吸附测定。氧推动染料向上形成柱列。胰岛素含量越多，产生的氧气会越多，染料柱就会越高。最终的测试结果是一个可视化的条形图，准确而易于阅读。 秦立冬说：“V-芯片仍有待完善，假如其中井孔通道能够更长更窄，灵敏度还可以提高。下一步是使这种设备更加人性化，几乎不需要指令，使用起来更为便捷。” 总编辑圈点： 工具的进步，其重要意义从不输于原理上的突破。当人类第一次在血液样本中测出胰岛素和胆固醇水平时，无疑是在医学原理上的伟大成就；但当如今的技术水平升级到了能以一滴血样本做50种不同的检测时，我们仍然对此致以最大的敬意。即将可能为临床医学带来的巨大便利，以及为病患者们减少的不必要痛苦，都将使该技术并不只是“缩小”和“加快”这么简单。 《科技日报》 2012-12-22（一版）

如题，每次P出来都是拖带，偶尔有单一条带，大小还不对，而且很不稳定

中国科技网讯 据物理学家组织网8月29日（北京时间）报道，美国能源部劳伦斯·利弗莫尔国家实验室（LLNL）研究人员最近开发出一种核酸（DNA和RNA）快速扩增技术，使聚合酶链式反应（PCR）的速度大大加快，可在3分钟内将基因组片段扩增10亿倍，迅速识别出病原菌。疾病快速诊断有望很快成为现实。相关论文发表在最近出版的《分析师》杂志上。 PCR技术能让研究人员把一段DNA或RNA复制上百万副本，然后用于基因组测序、基因分析、遗传病诊断、亲子鉴定、法庭鉴定、确定疾病感染等。该过程一般需要1小时到几天时间。然而，快速诊断、应急反应或传染病监控往往要求PCR技术缩短到几分钟。 领导这项研究的工程师雷金纳德·比尔和同事克服酶动力学和热动力学方面的限制，用多孔材料和绝热薄膜制造出一种设备，实现了极速热循环，能每秒钟加热或制冷45℃，一次热循环不超过2.5秒。比尔特别指出：“这种设备的独特之处还在于，它制冷的速度和加热一样快。” 开发出这种设备后，比尔和同事从10种商用酶中选出了2种，这2种酶的链式反应速度非常快，将一些参数略作调整，就能使反应更快。 他们用一种肠杆菌属的细菌测试了新的PCR设备迅速扩增DNA片段的能力，然后用一段严重急性呼吸道综合征（SARS）DNA片段演示了设备处理威胁公共健康病毒方面的效果。该设备完成对目标DNA30个周期（10亿倍）的PCR扩增，用时仅为2分18秒。 目前，研究小组正在开发一种实时探测设备。按照他们的设想，将来一台PCR仪器就能完成整个测试，从样本到结果只需10分钟。市场对这种设备的需求将是巨大的，除传统的公共卫生和医疗研究领域，一台简单实用的实时PCR设备在养殖、农业以及食品加工行业都非常有用，可用来保障食品安全。（记者 常丽君） 总编辑圈点 随着人类基因组逐渐被破译，一张生命之图将被绘就，我们对人类自身的了解也会迈上新的台阶，很多疾病的病因将被揭开，药物就会设计得更好，治疗方案也能“对因下药”，生活起居、饮食习惯有可能根据基因情况进行调整，人类的整体健康状况将会提高。然而，病来如山倒，为了尽快找到病因，疾病的快速诊断就显得异常重要。而文中提到的技术，可在三分钟内识别病原菌，无疑为很多急症患者的生存争取了宝贵的时间。 《科技日报》（2012-8-30 一版）

Hitachi S-4800冷场扫描电镜使用扫描电镜进行拍照的时候，参数设置为：加速电压10kv，发射电流10uA根据工程师给的图表，可以估计，探针电流大小在1~2 X 10-11 A那么，此时，束流大小大概多少？因为想计算电子束在样品表面的剂量（dose）非常感谢~！

XRD谱经过全谱拟合后然后应用谢乐公式可以计算得到晶粒大小，通常在10～1000nm左右。但是在SEM电镜中观察的颗粒大小往往右10μm甚至数百μm。很疑惑，为什么这两个结果差别这么大.翻阅了一些书，说颗粒是由很多的晶粒堆积的，在SEM中看到的颗粒是二次粒子。既然如此，XRD给出的晶粒大小还有什么用呢？还有就是在材料的性能中，晶粒大小和颗粒大小的影响有什么区别呢？请朋友们各抒己见！

对于不同的流动相，我们能根据流动相中各组分的极性大小、以及各组分的比例组成，可以计算出流动相的极性大小吗？这个流动相的极性大小，对于我们的分析工作，有如何的意义？

请教大家，我想知道EDS点打的时候能打多大的面积？应该是束斑大小吧，那这个束斑大小的数据我在哪里可以看到数值呢？谢谢！

对于分子荧光来说狭缝的大小会影响谱图测试的分辨率。对于定量模块中固定激发/发射波长，测试的数据与狭缝大小有必然的关系么？或是这个测试结果对实验有没有影响呢？请大家帮忙分析一下！多谢！

样品冲洗过程中，泵速大小为多少，仪器读数过程中，泵速的大小是多少呢？仪器读数过程中，泵速过大，读数的稳定性是否要差些。

气相色谱的分流比的大小会影响测定数据的大小吗？

有这么几个问题想和大家讨论，1，质谱对DNA测定的浓度范围是多少？低于多少的浓度是不可测的。pg/ul ng/ul或者单分子是不是就没有可能了？2，对DNA长度的限制？ 多数文献都是测定小片断，100base以上都很少。3，据说maldi-tof对大分子比esi好，不知道是不是老皇历了。4，我这里试过一次maldi，设备旧了些ABI的Voyager-4379, 337纳米的激光激发。测很低浓度的138b的没有测出来，1ug/ul的10 bp ladder只有10 bp的峰在，后续的峰都很弱。怀疑matrix和样品准备有问题。 用HPA : 醋酸氨 ：样品= 1:1:1 样品1ug/ul的10 bp ladder （10， 20 -330） 其他条件在文件里。实际想测的比这个浓度低百万倍吧。对质谱不了解，不知道有没有可能测了。欢迎介绍好的文献过来。