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皮细胞多胺含量

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皮细胞多胺含量相关的论坛

  • 【转帖】薄层扫描法测定黄皮酰胺的含量

    摘要 目的:建立以薄层扫描法测定黄皮酰胺含量的方法。方法:固定相系以硅胶G过240目筛)加0.5%CMC-Na(1:2.5)所制备的薄层板,展开剂为氯仿-甲醇(85:15),检测波长为λ=259 nm;扫描方式为单波长反射法锯齿扫描,光源氘灯,线性参数Sx=3,振幅为l0,背景校正:结果:此法测得黄皮酰胺含量的平均回收率为97.78% ,RSD为0.36% ;其在5.3~53μg/mL范围内浓度与峰面积线性关系良好(r=0.99l9)。结论:用薄层扫描法测定黄皮酰胺的含量,准确度高,重现性好,适合于快速检验。 关键词:黄皮酰胺;薄层扫描法;含量测定 黄皮酰胺(elausenamide,clau)是芸香科黄皮属植物黄皮Clausena Lamium(Lour.)Skeels叶水浸膏分离得到的有效成分,经不对称合成和拆合得到左旋和右旋黄皮酰胺。其中左旋黄皮酰胺为活性成分,具有多方面的药理作用。早期药理实验表明其对四氯化碳引起的小鼠谷丙转氨酶的升高有明显的降低作用。药效学研究提示,左旋黄皮酰胺可促进突触体谷氨酸释放,增加大鼠皮层厚度和海马CA1区数及NMDA受体密度,提高小鼠脑皮层和海马的胆碱乙酰转移酶活性 并对抗樟柳碱引起的乙酰胆碱含量的降低;细胞外生理研究证明,左旋黄皮酰胺可增强大鼠海马齿状回颗粒细胞层有低频刺激所诱发的群峰电位和由强刺激诱发的。这些结果表明,左旋黄皮酰胺有促智作用,有望开发成为抗老年痴呆病的新药。笔者通过文献报道的方法及黄皮酰胺的结构特点,确定了实验条件,建立了薄闵璺?TLCS法)测定黄皮酰胺的含量,为控制黄皮酰胺的质量提供了实验依据。 1 仪器和材料 仪器:CS-9000型双波长薄层扫描仪(日本岛津);939薄层铺板器(重庆南岸贝尔德仪器技术厂);定量毛细管(美国Drummonp公司)。 材料:黄皮酰胺粗品、黄皮酰胺一次甲醇提取物、黄皮酰胺二次甲醇提取物及对照品均由中国医学科学院药理研究所提供。硅胶G(青岛海洋化工厂),所用试剂均为分析纯。

  • 【求助】火焰法法测定细胞钙含量

    偶欲通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]测定细胞钙含量,门外汉,遍寻不到相关的样品前处理方法,望大虾赐教!细胞钙以磷酸钙形式存在。需要灰化么——看资料说灰化是为了分解有机物,可是细胞样实在想象不出来如何进行灰化?酸化的时候,用多大浓度的酸比较合适,酸化时间如何掌握,低浓度的酸需要驱酸么?用什么容器盛装比较合适阿?普通的聚乙烯管子可以么?试验选用什么级别的水?试验室只有三蒸水,玻璃烧出来的。

  • 关于测细胞中硒含量的预处理

    实验室要测细胞内硒含量,老板的要求是预处理之后拿到公司测,但是实验室的人之前都没有做过,文献上也没有查阅到关于细胞的做法,想咨询一下大家。 我们的打算是,培养基里面加硒,然后培养细胞2d,拿出来超声破碎,一个样品加上液体大概有2mL左右,再加硝酸和高氯酸混合酸消化,先过夜,再煮,冷却之后再加HCl。 萌新的问题是 1.硝酸和高氯酸的混合酸比例是多少?查的资料是4:1,但是我怕细胞的不一样; 2.混合酸过夜之后再煮,煮到什么程度呢?查的资料说是剩2mL; 3.混合酸加的体积是多少呢?资料有说10mL,顺便加了玻璃珠;也有说先加10mL,煮期间不时继续加,煮20min。我不知道改=该采用哪种办法; 4.煮的时候需要注意什么呢?通风,需要暗室吗?以上,目前想到的就是这么几个问题,恳请大家施以援手啊,拜谢!

  • 在奶牛场生产出体细胞数及细菌含量低的牛奶

    在奶牛场生产出体细胞  数及细菌含量低的牛奶  奶牛场受到污染的牛奶一直会存在于整个生产链之中,虽然其后的生产程序可能会尽量减低牛奶的腐败程序以满足消费者的质量要求,但是品质却永远也比不上刚刚从奶牛乳房产出的牛奶了。因此,为消费者提供卫生乳制品的第一步开始于牛场。  1. 体细胞数  1.1体细胞的来源  动物体抵御一些入侵细菌的措施之一就是将白细胞渗透到受感染区域。白细胞来自动物血液,被称为体细胞。以示与入侵微生物细胞的区别。正常情况下,少数白细胞可经乳腺而进入乳汁,但在病原菌入侵时,机体会向乳腺内释放大量的白细胞。若乳腺受到损害,也会造成乳腺上皮细胞脱落,成为乳汁内的体细胞的一部分,但不超过体细胞总数的百分之几。与细菌不同,体细胞一旦进入乳汁内,其总数是不会发生变化的。白细胞包括巨噬细胞、淋巴细胞和嗜中性细胞。正常乳中含有巨噬细胞,其作用是清除乳腺中的细菌和细胞碎片。淋巴细胞在抵抗感染的机制中起主要作用,此时要占体细胞总数的90%以上。体细胞数是变化的,在完全健康奶牛的乳汁中低于200000/亳升;乳腺感染严重,会高于5000000/毫升。  1.2 高体细胞含量牛奶的缺点  体细胞数偏高,表明牛奶产于受损或受感染的乳腺。细菌污染会极大降低牛奶的质量,而体细胞本身也对牛奶质量不利,特别是对这些用于生产发酵乳制品的牛奶。牛奶变质表现为:①牛奶味道变坏 ②牛奶的贮存期缩短 ③乳清量增加,酪蛋白的收缩性降低,导致奶酪产量下降。  1.3 体细胞数的估测  体细胞数(SCC,单位为:细胞数/亳升)可经显微镜人工测定,但耗费时间,一位技术员每天仅能测定很少的样品。体细胞数常常是由称为细胞计数器的电子仪器来测定,但该仪器较昂贵,不易搬运,这就得把奶样送到实验室去分析。在牛舍内实际上可采用一项简单的技术,即用化学试剂来测定白细胞的数量,其最初称为加州乳房炎测定(CMT),但现有众多地方测定方法,如兰州乳房炎测定法(LMT)。CMT法可把牛奶评为0、T、1、2和3级,其大致相对应的细胞数为:  CMT测试等级 大致体细胞数/毫升  0 100,000  T(=微量) 300,000  1 900,000  2 2,700,000  3 8,100,000  1.4 引起体细胞增高的因素  1.4.1 乳房受到细菌感染。这大概是导致体细胞数增加的主要因素。  1.4.2乳房受到损伤。奶牛的乳房并非不会受到损伤,比如经常由于地滑而摔伤乳房。有些奶牛,特别是那些乳房过度下垂的奶牛,站起来时容易踩到自己的乳房。乳房受到伤害,牛奶中体细胞数会暂时升高,随着伤口的愈合,体细胞数又会恢复正常。  1.4.3 奶牛的年龄和泌乳阶段。老龄奶牛似乎更易患乳房炎,这样,体细胞数常常较高。美国的研究表明,未患乳房炎奶牛乳中的体细胞数并不随年龄的增加而提高。这样,随着年龄的增长,对于那些一生中某一阶段曾患过乳房炎的奶牛,其体细胞数增加的机率会增大。  1.5 降低体细胞数。体细胞数值高常常是由于乳房受到了细菌所至,因此降低体细胞数值的最好方法就是防止感染。  2. 乳中的细菌  牛奶通常是老、幼、病、残者的食品,他们也最需要健康食品。奶牛场是微生物污染牛奶的理想环境,最危险的途径之一就是通过存在于乳房中并引起乳房炎的细菌而污染。这些细菌都是病原菌,对牛和人类都有害。  一旦受到这样的污染,牛奶就成为劣质产品。加热处理可减缓或停止细菌的作用,但不管如何处理,这种牛奶仍就是含有活的或死的微生物及其所产生的生化物质。这些物质有的会降低乳制品的品质,有的对消费者的健康有害。来自粪便的细菌还会产生酶类和耐毒素。因此,防止乳制品被污染,应从提供优质鲜奶开始。  细菌进入乳房引起乳房炎的许多途径与其污染牛奶的方式密切相关,有些细菌可引起乳房炎,随后进入牛奶。  2.1牛奶中细菌的类型  下表为牛奶中常见的微生物,经分离,也许可见到其它类型的微生物。大概有95%的乳房炎是由表中前三种细菌引起的。  微生物 来 源 所产毒素 致病性  奶牛 人类  金黄色葡萄球菌 乳房炎  人类污染  环境  牛粪 肠毒素 致病 致病  无乳链球菌 乳房炎 致病 致病  大肠埃西氏杆菌 乳房炎  环境  牛粪 耐热和不耐热肠毒素 致病 有些致病  空肠弯曲菌 受感染的乳房  牛粪 肠毒素 致病 致病  小肠结肠炎耶尔森菌 牛粪  沙门氏菌群 环境  牛粪 肠毒素 致病 致病  产单核细胞李斯特菌 环境  牛粪  饲料—特别是劣质青贮  乳房炎(少数) 致病 致病  结核分支杆菌 受感染乳房  人类污染 致病  牛分支杆菌 受感染乳房 致病 致病  布鲁氏菌属 受感染乳房  牛粪  环境 致病 致病  伯内特柯克斯体 牛粪  受感染乳房 致病 致病  普通变形杆菌 水  环境  假单包菌属 水  环境  2.2 乳房对乳房炎的抵御  乳房低御感染的部位有两处, 其中之一就是乳头的通道一乳头管,乳头上有良好的括约肌,可使乳头口封闭,阻止异物进入通道。  2.3 防止乳房暴露于细菌之中  防止乳房炎最理想的方法首先是防止细菌接触乳房,这就涉及到奶牛管理的各个方面。  2.3.1养牛设施。奶牛舍的设计标准与良好的人类住房的设计原则是相近的,其可归纳如下:  ① 尽量减少疾病的传播。  ② 奶牛拥有一个舒适和较干燥的环境。  ③ 应具备有效地消除废物的设施。  ④ 奶牛容易获得饲料以满足产奶的需要。  ⑤ 奶牛的环境条件不得发生急剧变化。  ⑥ 温度、太阳辐谢、湿度应尽量接近奶牛的“舒适区”。  ⑦ 奶牛易于接近饮水。  ⑧ 易于观察成母牛、育成牛的行为变化,特别是发情鉴定,还有牛群健康观测。  ⑨ 便于将奶牛从主要的饲养区域赶至一些特殊的地点,如挤奶台、配种架等。  ⑩ 整体设计应考虑到尽量节省劳动力。  前三点直接涉及到奶牛所处的环境,但饲料也可成为传播微生物的潜在因素(见2.3.1.3)。  2.3.1.1 栓系式牛舍。中国的许多奶农都采用了栓系式牛舍饲养奶牛,这种牛舍的设计对奶牛的环境卫生有很大的影响。设计原则之一就是既简便又能及时地将粪、尿与奶牛分开。再勤快的奶农也不可能整天在那儿清粪以避免奶牛卧下时弄脏牛体。奶牛是站立排粪尿的,因此,设计上就必须让粪尿直接排入粪尿沟内。荷斯坦牛舍牛床的尺寸应设计为:从饲槽后沿至粪尿沟前沿的长度为1.55-1.65米,而中国奶牛舍内的尺寸一般都为1.8—1.9米, 这样牛粪常被排泄于奶牛躺卧之处,常常污染牛腿、肋部和乳房。  如果奶牛可直接将粪便排入粪尿沟内,说明其站立位置正对饲槽,如果奶牛斜向站立,粪尿将会排在牛床上。但可设置分隔栏,分隔出独立的牛床,以使奶牛保持正确的姿势。不一定一牛一隔栏,可两牛一隔。  牛床应有某种铺垫,以保证栓系式牛舍奶牛肢蹄的健康。铺垫物应清洁、干燥。常采用的有秸秆、沙子、锯末,也可使用专用的橡胶垫。目前中国可生产这种橡胶垫,也买得到。使用时最重要的一点是不要太频繁冲洗橡胶垫。以免潮湿。  2.3.1.2运动场。 在讨论牛奶质量时不宜过多叙述运动场设计的各个方面,必须强调的一点就是干燥。也就是说,如果是土地面,排水应通畅。在许多奶牛场之中,这与生产卫生牛奶是完全不相适应的。水泥运动场应铺成2-3的坡度,以便尽快排走雨水。若水泥地表地设计成沟槽状以增加牛蹄阻力,其方向应顺坡向而走。  2.3.1.3饲养。有人奇怪为什么麽将饲养作为病菌传播的因素之一,但在中国它确实是紧密相关的。李斯特菌对动物和人类都是致病菌。在霉菌适宜的类似环境,特别是发酵度不足的青贮饲料,特别适宜李斯物菌增殖  2.3.2 挤奶  农业生产的挤奶过程是十分独特的,因为在充满了潜在有害微生物污染的环境中获得人类食品。正常的卫生标准应依据食品业的,而非农业的标准。在挤奶的过程中,存在着微生物对奶牛和牛奶污染的极大危险,其过程可分为三步:乳房准备、挤奶和乳房的后处理。  2.3.2.1乳房准备。乳房准备基于以下三个原因:  -刺激奶牛的泌乳反射。  -保证泌乳过程中不受微生物的侵袭。  -保证乳房上的污物不会污染牛奶。  就象野生祖先母牛看到犊牛、闻到犊牛的气味、乳房受到犊牛碰撞而产生的反应一样,品种化的奶牛对擦洗和按摩乳房也产生同样的反应。奶牛对热水冲洗和按摩会习惯性地产生泌乳反应。但擦洗乳房的毛巾和挤乳工的手都会将细菌从一头奶牛传染到另一头奶牛,这是对奶牛健康最大的危险。正确操作的要求是:每头牛分别用洁净水冲洗。现代化的挤奶台采用软管和喷嘴冲洗乳房。用一桶水洗多头牛简直就是在奶牛之间传播病菌,这是不可原谅的错误。即使按照乳品厂的标准加入消毒剂,从一头奶牛到另一头奶牛的挤奶间隔时间也保证不了化学药品的消毒作用。如果增加消毒剂的浓度,乳房细薄的皮肤受到损害的程度就会加大,这也就促进了乳房内部微生物感染的机会。如果不具备软管、喷头这些条件,那麽,用一只手提喷水器也就足够冲洗乳房了。用于擦干乳房的毛巾是微生物的主要载体,再也找不到什麽比这更有效的东西在牛群中传播病原菌了。奶业发达国家主要采用一牛一纸擦试方法,也可采用洁净的报纸替代,虽然效果不如纸巾,但便宜,起码比反复使用毛巾要好的多。  有些专家建议

  • 银离子产品的含量特性及细胞毒性检测

    【序号】:1【作者】: 苏雪荣甘俊英薛玉英【题名】:银离子产品的含量特性及细胞毒性检测【期刊】:中华烧伤杂志. 【年、卷、期、起止页码】:2019,35(01)【全文链接】:[url]https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx[/url]?dbcode=CJFD&dbname=CJFDZHYX&filename=ZHSA201901005&uniplatform=NZKPT&v=aRLyjURmU2MI64w1r00bButObYbAUMCiTSpVn4pT9LRcy2c66uKiXTQGY7ZDCQRz

  • 如何在细胞培养过程中准确、实时监控二氧化碳含量?

    如何在细胞培养过程中准确、实时监控二氧化碳含量?

    [b]如何在细胞培养过程中准确、实时监控二氧化碳含量?[/b][align=center][b][color=#333333] [img=,550,412]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808131006587421_6444_271_3.jpg!w617x463.jpg[/img][/color][/b][/align][color=#333333]在体外培养模型中(比如在生物反应器内),[b]CO[/b][/color][b][color=#333333]2[/color][color=#333333]的测量和监控[/color][/b][color=#333333]至关重要。在CHO细胞等哺乳动物细胞培养过程中,溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]浓度的[b]理想操作范围[/b]通常为[b]5 - 30 %[/b],具体数[/color][color=#333333]值由培养过程和所使用的重组细胞系决定。[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]浓度过高[/color][/b][color=#333333]生物反应器中的溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]浓度过高,会对细胞培养产生严重的负面影响:有害的代谢变化、生长抑制以及由此导致的生产效率低下。更确切地来讲,它还会改变重组蛋白质[/color][color=#333333]的糖基化模式,尤其是在采用哺乳动物细胞系表达模型时。溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]含量较高时(200 - 250 mmHg),会成为哺乳动物的细胞毒素。如果没有对其进行快速纠正,会[b]严重影[/b][/color][color=#333333][b]响到批次的生产效率[/b]。[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]浓度过低[/color][/b][color=#333333]人体内的二氧化碳浓度为5%,体外培养动物细胞时,最低浓度也必须维持在该水平。虽然发生的几率不高,但由于三羧酸循环中天然细胞会产出CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333],溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]含量低(低[/color][color=#333333]于5 %)时会对细胞产生机械应力,[b]也会对过程的生产效率造成负面影响[/b]。[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]那如何控制溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]的浓度呢?[/color][/b][align=center][img=,500,383]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808131007255266_8178_271_3.jpg!w690x529.jpg[/img][/align][color=#333333][/color][color=#333333]溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]或乳酸累积过多时,通常可采用[b]添加碱性碳化液的方式[/b],将pH水平降低到目标范围内,或者通过注入空气或N[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]剥离液相中的CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]。根据不同的细胞系、生物反应[/color][color=#333333]器的规格、气体注入方法和工艺技术类型,可以采取不同的控制策略,提高细胞密度。[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]在线测量的优点[/color][/b][color=#333333] [img=,450,250]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808131007499746_2833_271_3.jpg!w690x384.jpg[/img][/color][color=#333333]在任何离线或旁线测量时,都有可能会出现取样和测样之间状态不同和时间延迟的问题。[b]使用[/b][/color][url=https://www.mt.com/cn/zh/home/products/Process-Analytics/DO-CO2-ozone-sensor/dissolved-carbon-dioxide.html][color=#0000ff][b]在线溶解CO2传感器[/b][/color][/url][b][color=#333333]可提供准确、实时的测量[/color][/b][color=#333333]。在线检测的数据可用于确定何[/color][color=#333333]时应该添加或去除CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333],不用考虑生物反应器的规格(H/D比例)、喷头设计、剥离所使用的气体类型或细胞系。有报告显示,精确的溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]控制策略可提高细胞生长[/color][color=#333333]率,最高达到30 % 。[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]METTLER TOLEDO InPro 5000i [/color][color=#333333]溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]传感器[/color][/b][color=#333333] [img=,187,450]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808131008124196_8227_271_3.png!w307x736.jpg[/img][/color][color=#333333][/color][b][color=#333333]梅特勒-托利多[/color][/b][color=#333333]突破技术限制,发明了可[/color][url=https://www.mt.com/cn/zh/home/products/Process-Analytics/DO-CO2-ozone-sensor/dissolved-carbon-dioxide.html][color=#0000ff][b]在线测量溶解CO2的传感器[/b][/color][/url][color=#333333],应用于从实验室到生产线等不同规模的生物培养过程,开创了市场先河。[/color][b][color=#333333]InPro 5000i[/color][color=#333333]溶解CO[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]传感器[/color][/b][color=#333333]所使用的电位二氧化碳Severinghaus电极与BGA所使用的相同,卫生设计符合消毒灭菌和在位清洗的要求。传感器测量精准、可靠,响应时间[/color][color=#333333]短,不会受到pH变化或代谢物(比如葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸和铵)浓度的影响,满足所有生物生产过程工艺的要求。[/color][color=#001000][/color][color=#b01600][/color]

  • 显微镜下西达本胺影响HCT-15细胞形态

    显微镜下西达本胺影响HCT-15细胞形态

    显微镜下西达本胺影响HCT-15细胞形态细胞经不同浓度药物处理后形态发生变化(图),随着药物浓度及作用时间的增加,细胞形态变为长 梭形,触角增多,细胞内颗粒物增多,并且可见空泡 同时相邻细胞之间连接疏松,细胞膜折光度下降,细胞数 量也随之减少[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306302200230901_4314_5389809_3.png[/img]

  • 用岛津AA-6800石墨炉测血细胞锰含量,干燥阶段出现暴沸现象??

    用岛津AA-6800石墨炉测血细胞锰含量,干燥阶段出现暴沸现象??

    如题,谢谢大家! 本人最近用岛津AA-6800石墨炉测血细胞锰含量,血细胞即为空腹抽取10ml全血静置30mim后3000转10mim钟离心后弃血浆后的混匀的血细胞;取40ul血细胞用基体改进剂360ul(0.2mg/l氯化钯+1%硝酸+1%曲拉通)稀释到400ul上样,进样体积20ul,升温程序为 温度 (度) 时间(S)干燥 150 30灰化 250 20灰化 800 10灰化 800 10灰化 800 3原子化 2200 3清洁 2500 21、仪器的操作说明上标明干燥阶段只有1步,个人觉得是不是有问题?!2、现在遇到的问题就是不管是标样还是样本在干燥阶段均出现暴沸及起泡现象,于是做了以下调整:将干燥阶段的150度30秒调整为150度20秒、150度15秒、120度30秒、110度20秒、100度30秒、100度20秒后上样,结果暴沸和起泡现象完全没有改善,此时高密石墨管已经烧了136次,想请教各位大侠,如何改善这种现象??如图所示,有时峰会更高!!有可能是基体改进剂浓度不够的原因么??3、标样:基体改进剂+40ui正常人血细胞+不同体积锰标液配制成的一些列浓度急~~~~~~~~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gifhttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif拜谢大家!附:异常峰形图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511081954_572715_2076515_3.png

  • 流式细胞术详解 9-11章节

    九. 流式细胞术在血液学中的应用 DNA倍体分析及细胞周期分析 在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞含有最大量的DNA(4N)。细胞经固定后用PI(Propidium Iodine 碘化丙啶)等荧光染料染色即可上机测定。但标本需先经RNA酶处理以排除RNA干扰。FCM可在测量大量细胞(数分钟可测定105个细胞)后给出DNA分布直方图,见图12.10.正常人外周血DNA示意图,图中第一个峰(G1)是DNA含量为2N 的细胞峰, 第二个峰是DNA含量为4N 的细胞峰,两峰之间是DNA含量为2N-4N的处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞。用厂家提供的Multicycle[/f

  • 用岛津AA-6800石墨炉测血细胞锰含量,干燥阶段出现暴沸现象??

    用岛津AA-6800石墨炉测血细胞锰含量,干燥阶段出现暴沸现象??

    如题,谢谢大家! 本人最近用岛津AA-6800石墨炉测血细胞锰含量,血细胞即为空腹抽取10ml全血静置30mim后3000转10mim钟离心后弃血浆后的混匀的血细胞;取40ul血细胞用基体改进剂360ul(0.2mg/l氯化钯+1%硝酸+1%曲拉通)稀释到400ul上样,进样体积20ul,升温程序为 温度 (度) 时间(S)干燥 150 30 灰化 250 20灰化 800 10灰化 800 10灰化 800 3 原子化 220 3清洁 2500 21、仪器的操作说明上标明干燥阶段只有1步,个人觉得是不是有问题?!2、现在遇到的问题就是在干燥阶段出现暴沸及起泡现象,于是做了以下调整:将干燥阶段的150度30秒调整为150度20秒、150度15秒、120度30秒、110度20秒、100度30秒、100度20秒后上样,结果暴沸和起泡现象完全没有改善,此时高密石墨管已经烧了136次,想请教各位大侠,如何改善这种现象??如图所示,有时峰会更高!!有可能是基体改进剂浓度不够的原因么?? 急~~~~~~~~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gifhttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif拜谢大家!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511082109_572723_2098843_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511082109_572724_2098843_3.png

  • 西达本胺通过信号通路调节促进癌细胞凋亡

    西达本胺通过信号通路调节促进癌细胞凋亡在我国,西达本胺已获批作为PTCL临床用药。西达本胺属于苯酰胺类化合物,是我国自主研发的首个亚型选择性口服HDACI,国家食品药品监督管理局已批准其用于临床试验,其选择性抑制I类HDAC1、2、3亚型和II类HDAC10亚型,可抑制肿瘤细胞增殖、促进凋亡,阻滞周期、引发DNA损伤,还可以增强抗肿瘤免疫反应。与其他抗肿瘤药物相比,西达本胺疗效好、选择性高、不良反应少。西达本胺可激活死亡受体途径和线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡,其中最为主要的是线粒体凋亡途径,该途径受Bcl-2家族介导的细胞色素C释放通路调控。抗凋亡蛋白Bcl-2表达受到抑制,促凋亡蛋白Bax表达上调,使线粒体膜电位降低,细胞色素C释放到细胞质中,Caspase途径被激活,细胞发生凋亡。例如:西达本胺增强B淋巴瘤细胞组蛋白H3、H4 乙酰化水平,使线粒体膜电位降低随后激活Caspase 3,促进细胞凋亡;在肾癌中,它可以下调Bcl-2表达,上调Bax表达,随着药物浓度增加引起786-O 细胞凋亡。西达本胺可以调控ROS水平。HDACI可以上调ROS水平,导致DNA双链损伤。研究证明,西达本胺作用于白血病细胞后,诱导细胞内ROS产生,细胞凋亡增加[17]。此外,在胰腺癌细胞系中,西达本胺明显增强细胞内ROS的产生,上调γH2AX(DNA双链断裂的标志物)表达水平,诱发细胞DNA损伤。西达本胺通过调控细胞周期蛋白(Cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-dependent kinases,CDKs)以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(Cyclin-dependent kinases inhibition,CDKI)的表达阻滞细胞周期。例如,西达本胺使MM细胞系P21、P27的表达量增高,CDK4、CDK6、Cyclin D2表达量下降,阻滞MM细胞系于G1期[19]。在NK/T细胞淋巴瘤中,西达本胺上调P21表达,下调Cyclin E表达,诱导细胞发生G0/G1期阻滞,从而抑制细胞的增殖。

  • 荧光显微镜及流式表征西达本胺诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期

    荧光显微镜及流式表征西达本胺诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期

    荧光显微镜及流式表征西达本胺诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期流式细胞术检测到明显的细胞凋亡,随着加药浓度的升高,细胞凋亡数量增多,早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞 的 数 量 都 随 之 上 升 (图 a).测 得 实 验 组 凋 亡 率 分 别 为 12.32% ±0.84% (P 0.05),15.63%±0.91%(P0.001),与对照组相比,有统计学意义(图b).与此同时通过 EdU 实验检测(图c)其细胞周期的变化,随着加药浓度的增高,Hoechst蓝色荧光染色细胞数目减少,即活细胞数减少,药物对细胞杀伤作用显著 EdU 绿色荧光染色细胞数减少,即进入 DNA 复制期的细胞数量减少.表明西达本胺可以明显促进 HCT-15细胞凋亡、抑制其增殖且阻滞细胞周期.[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306302205203559_379_5389809_3.png[/img]

  • 咖啡其所咖啡其所含的多酚物质有助于免疫细胞“抗炎”

    咖啡其所咖啡其所含的多酚物质有助于免疫细胞“抗炎”。近日,一项研究发现,在咖啡中加入牛奶,对抗炎症的效果或可翻倍。速溶黑咖啡和纯黑咖啡抗氧化能力更强。含的多酚物质有助于免疫细胞“抗炎”。近日,一项研究发现,在咖啡中加入牛奶,对抗炎症的效果或可翻倍。速溶黑咖啡和纯黑咖啡抗氧化能力更强。

  • 流式细胞仪检测细胞周期及正常范围

    [b][font=宋体][font=宋体]细胞周期[/font][font=Calibri]cell cycle [/font][/font][/b][font=宋体]是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程,它反映了细胞增殖的速度。在临床上,有很多研究证明,细胞周期分析对人肿瘤的诊断预后具有很高的价值。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]一个完整的细胞周期包含间期和分裂期([/font][font=Calibri]M[/font][font=宋体]期)两个阶段,间期又分为[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成前期([/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期)、[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成期([/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期)和[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成后期([/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期),处于不同时期的细胞的[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量存在差异。一般认为,[/font][font=Calibri]G 1 [/font][font=宋体]期细胞具有增殖活性,参与细胞周期循环,是二倍体细胞;[/font][font=Calibri]S [/font][font=宋体]期细胞,[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量逐渐增加,从二倍体变成四倍体,随后进入 [/font][font=Calibri]G 2 [/font][font=宋体]期,最终进入 [/font][font=Calibri]M [/font][font=宋体]期。检测细胞周期常用的方法是检测[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量,可以选择能与[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]结合的荧光染料(如[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]等),再根据细胞各个时期[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量不同从而荧光强度不同的方法,分析各个阶段的细胞比例。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]流式细胞仪[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]染色法检测细胞周期的原理[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由于细胞周期各时相的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]不同[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]通常正常细胞的[/font][font=Calibri]G1/G0[/font][font=宋体]期具有二倍体细胞的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量[/font][font=Calibri](2N),[/font][font=宋体]而[/font][font=Calibri]G2/M[/font][font=宋体]期具有四倍体细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量[/font][font=Calibri](4N),[/font][font=宋体]而[/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期的[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量介于二倍体和四倍体之间。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]PI[/font][font=宋体](碘化丙啶)为插入性核酸荧光染料,能选择性嵌入核酸[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]双螺旋的碱基之间与之结合,结合量与[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的含量成正比关系,其荧光强度直接能反映细胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]因此[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]通过流式细胞仪[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]染色法对细胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量进行检测时[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]可以将细胞周期各时相区分为[/font][font=Calibri]G1/G0 [/font][font=宋体]期[/font][font=Calibri],S [/font][font=宋体]期和[/font][font=Calibri]G2/M [/font][font=宋体]期[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过定量测定[/font] [font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量来分析细胞周期是流式细胞术最早的应用之一。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]流式细胞周期([/font][font=Calibri]cell cycle[/font][font=宋体])检测结果分析常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量(横坐标)来分析的:[/font][font=Calibri]G0[/font][font=宋体]期:静止期,有丝分裂完成后,脱离细胞周期暂时停止分裂的一个阶段,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量保持二倍体;[/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成前期,从有丝分裂到[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]复制前的一段时期,此期主要合成[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]和核糖体,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量保持二倍体;[/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成期,在此期,合成[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及组蛋白,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量介于[/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期与[/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期之间;[/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成后期,是有丝分裂的准备期,合成[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]及蛋白质,[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成终止,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量为四倍体;[/font][font=Calibri]M[/font][font=宋体]期:细胞分裂期,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量为四倍体;[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]流式细胞检测正常范围[/font][/b][font=宋体]流式细胞检测的正常范围通常依赖于被检测细胞或生物粒子的类型以及所测参数的性质。一般而言,正常的细胞数量、细胞大小、细胞形态、细胞内物质的浓度和分布等参数都在一定的范围内。这些正常范围通常是通过对比大量健康个体或样本的流式细胞检测结果而得出的。例如,正常血细胞的计数和比例,各种免疫细胞的分布,以及细胞内的荧光强度等,都有相应的正常范围。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service][b]流式细胞检测技术服务[/b][/url],同时还提供完善的[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]流式单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url],详情关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 首次将人皮肤细胞转变为大脑皮层细胞

    http://www.biomart.cn//upload/userfiles/image/2012/02/1328771705.jpg英国剑桥大学科学家首次从人皮肤样品中构建出大脑皮层细胞(cerebral cortex cell)---这些细胞组成大脑灰质。2012年2月5日,这项研究结果在线发表在《自然-神经科学》期刊上。大脑皮层疾病包括从诸如癫痫和自闭症之类的发育疾病到诸如阿尔茨海默(Alzheimer)疾病之类的神经退化疾病。这些研究发现将使得科学家们能够研究人大脑皮层如何发育和它如何“连接接通”以及这种接通如何出错(一种导致学习障碍的常见原因)。它也将允许科学家在实验室中重建诸如阿尔茨海默疾病之类的大脑疾病。这将给予他们之前不可能获得的启示,允许它们实时观察疾病发展同时也可测试阻止疾病发展的新药物。剑桥大学生物化学部门Rick Livesey 博士是这篇研究论文的主要研究员。他说,“这种方法让我们有能力研究人大脑发育和疾病,而这在5年前是难以想象的。”对他们的研究而言,科学家从病人中获取皮肤活组织,然后将来自皮肤样品中的细胞重编程为干细胞。这些干细胞如同人胚胎干细胞一样就能够被用来产生大脑皮层细胞。Livesey博士补充道,“我们正使用这种体系来重建阿尔茨海默疾病。阿尔茨海默疾病是世界上一种最为常见形式的痴呆症。当前在英国痴呆症影响着800000个人。这种疾病主要影响一种神经细胞类型,而这种神经细胞我们已能够在实验室中制造出来,因此我们在实验室中有一种非常好的工具创建出该疾病的一种完整的人类模型。”英国阿尔茨海默疾病研究中心是英国一家主要的痴呆症研究慈善组织。该中心研究主任Simon Ridley说,“我们为资助了这项研究而感到非常高兴。这项研究向前迈出了积极性的一步。在实验室中将干细胞变成完全功能性的神经细胞网络很有希望能够解密诸如阿尔茨海默疾病之类的复杂大脑疾病。痴呆症是我们时代面临的最大医学挑战,我们迫切需要更多地了解和如何阻止该疾病。我们希望这些发现能有让我们更接近这种目标。”

  • 用皮肤细胞“造”精子初获成功

    美国研究人员说,已经在利用皮肤细胞“制造”精子的研究中取得初步成功,完成关键步骤。受不育问题困扰的男士有望在几年内通过这种新型人工干预手段实现为人父的梦想。相关研究报告由《细胞—报告》月刊发表。 击破关键美国匹兹堡大学医学院詹姆斯·伊斯利博士带领研究小组,用多种化学品混合物“回拨”皮肤细胞的生物钟,把它们变成功能与胚胎干细胞类似的细胞,接着使用营养物质培养成圆形细胞。 伊斯利说,这是用皮肤细胞“制造”精子过程中最困难的一步。先前,已经有研究人员成功地用胚胎干细胞“造”出精子。这些研究结果可以为伊斯利博士团队接下来的研究提供借鉴,也就是说,他们距成功可能只有几步之遥。伊斯利博士团队使用的皮肤细胞全部来自男性。他们也曾经尝试使用女性皮肤细胞,但没有成功。 伦理之争今年早些时候,以色列与德国研究人员在实验室中利用老鼠生殖细胞“造”出精子。与用老鼠生殖细胞或胚胎干细胞相比,用男性皮肤细胞制造精子有无可比拟的优势。 老鼠生殖细胞来自老鼠,胚胎干细胞通常来自胚胎,与之相比,利用皮肤细胞培养精子在伦理上更容易为人接受。因为这种细胞可以从想圆“父亲梦”的成年男性身上采集,由它“制造”的精子里含有这名男性的基因。不过,受到相关法律限制,即使伊斯利博士团队的研究在短时间内获得成功,也不可能随后在欧美等地投入临床。一直以来,关于通过人工手段干预生殖是否符合伦理规范的争论从未停止。 英国《每日邮报》28日援引从事相关医学研究的菲莉帕·泰勒的话报道:“研究人员承认,他们的工作‘充满生物伦理学挑战’。” 带来希望伊斯利博士团队在研究报告中写道,不管存在何种争论,至少在短期内,这一成果可能帮助人们开发新型治疗不孕症的药物和避孕用具。不孕已经成为困扰不少育龄夫妇的难题。统计数字显示,在英国,六分之一的夫妇有生育困难问题,其中,40%的“责任”在男方。三分之一的不孕夫妇经过一系列复杂检查后仍然无法确定不孕的原因。因此,伊斯利博士团队的研究成果对不少不孕夫妇而言意义重大。英国设菲尔德大学男性生殖专家艾伦·佩西谈到这项研究结果时说:“毫无疑问,这是一项好成果。”

  • 【第三届原创参赛】啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究

    【第三届原创参赛】啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究

    维权声明:本文为gl19860312原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。 本实验室主要工作就是:微生物发酵与代谢调控 、蛋白的分离纯化 、生物材料的研发与生产( 化妆品 、面膜、人工血管 、人工骨................)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/12/201012061858_264950_2019107_3.jpg啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究摘要:研究了PH、温度、食盐浓度三个因素对啤酒酵母细胞破壁的影响,确定出最佳的自溶法破壁条件 。进而为分离啤酒废酵母中的有效活性成分奠定了基础。关键词:啤酒酵母;破壁;自溶The Research of Autolysis on the Beer Yeast Cells wallAbstract:This paper researched the condition of autolysis on the waste yeast cells wall with three factors (pH 、Temperature 、Salt density) and determined the best condition based on autolysis. And build basis for separating the activity forms from beer waste yeasts.Key words: The beer yeast; Breaking Cells wall; Autolysis引言啤酒酵母(S.csrsviside)属于真菌门酵母属,多数为单细胞微生物,细胞呈圆形或卵圆形,革兰氏染色呈阳性G+。啤酒酵母细胞是由细胞壁、细胞膜、液泡、颗粒和线粒体等部分组成,细胞年幼的时候细胞壁很薄,所以不明显;细胞年老时,细胞壁较厚。啤酒酵母细胞内不但含有丰富的蛋白质、维生素、葡聚糖及甘露聚糖等营养及保健成分,可作为食用单细胞蛋白,此外还含有辅酶I、细胞色素,卵磷脂、RNA,,这些物质或其降解产物及衍生物如氨基酸制剂和核苷酸及核酸制剂等在生物化学、医药及保健食品中最有重要的作用。由于啤酒废酵母价格便宜,因此可利用啤酒废酵母来提取、制备这些物质。啤酒废酵母(waste brewer's yeast)是啤酒生产的副产物,是指啤酒酿造后沉降的酵母泥,主要是由大量的弱细胞和死细胞组成。在啤酒生产过程中,每生产 100吨啤酒大约有1-1.5吨废酵母 (以干重计)产生。传统的处理方法,是弃置不用或作为饲料处理,直接排放到河流湖泊中,将造成环境污染,同时也是对财富的浪费;因其具有坚韧的细胞壁和特有的酵母臭,适口性差,不易消化和吸收,故烘干作为饲料用的经济效益不高。充分利用啤酒废酵母可以有效地减轻污染,实现资源的二次转化,也可产生巨大的经济效益,如开发酵母抽提物。 为了增加酵母抽提物产量国内外同行做出不同努力,开展了有些研究。目前关于啤酒酵母破壁的研究很多,大体可归纳为:化学破壁(酸解、碱解)、物理破壁(液体剪 切、固体剪切等)、生物破壁(酶解、自溶)。其中,化学破壁不仅会造成一些营养成分的破坏,而且为有效成分的提取增加困难;物理破壁虽然方法简单、成本低,能完好保存营养成分,但其破壁效果较差;生物破壁中的酶解法会增加提取成本,故均不能大规模广泛的应用。而采用自溶法进行细胞破壁是一种简便易行的操作过程,通过确定啤酒酵母细胞最适合的自溶条件,可以建立一套利用酵母细胞生产酵母抽提物的工艺和方法,旨在为啤酒酵母的综合利用寻求一种新的方法,为工业化生产提供理论基础和实践指导。1.4实验方法 工艺流程 啤酒废酵母(保藏)—— 活化、两次斜面培养—— 接种、平板划线——摇瓶培养——取对数期的酵母细胞——做稀释梯度——做影响因素(温度、食盐浓度、pH并固定时间60分钟)的实验-——做正交试验——镜检(血球计数法)——计算啤酒酵母细胞的破碎率——得到自溶的最佳工艺参数1.5啤酒废酵母自溶条件的确定酵母自溶的实质是酵母细胞内的蛋白质在自身蛋白酶的作用下,降解为游离的氨基酸,那么,一切影响酶促反应的因素均影响酵母细胞的自溶,如自溶温度、食盐浓度、pH值、自溶时间等。自溶法是以存在酶活性的新鲜活酵母为原料,利用酵母细胞本身的酶系,在一定条件下,将酵母体内的糖类物质、蛋白质和核酸分解为还原糖、氨基酸、肤类、核昔酸等小分子物质并从酵母细胞内抽提出来的一种方法。利用自溶法生产的酵母抽提物,蛋白质分解率高,游离氨基酸含量高,风味好,成本较低,但呈味核昔酸含量低.目前,欧美及我国所生产的酵母抽提物绝大部分都是采用这种方法。[font=仿宋_GB2

  • 【这是真的吗】皮肤中的免疫细胞可促发癌症

    研究人员报告说,以能检测到皮肤中的外来入侵物而最为出名的一组免疫细胞也能通过代谢环境中的化学物质而促进肿瘤的生长。包括皮肤及那些覆盖许多身体表面的上皮组织形成了一种抵御微生物及可以引起癌症的化学毒素的关键性的屏障。(在人类中,90%的癌症起源于上皮组织。)这些组织常常充满了树突状细胞,其中包括一个叫做朗格汉斯细胞的亚组细胞,这些细胞可识别抗原并将它们“穿戴”在其表面以警示T细胞进行防御反应。这些抗原可以是微生物,或它们也可来自肿瘤。然而,令人感到惊讶的是,缺乏朗格汉斯细胞的小鼠则可不受化学性致癌作用的侵害,而Badri Modi及其同事希望能找出其原因。他们如今用一种鳞状细胞癌的小鼠模型揭示了朗格汉斯细胞可驱使健康的皮肤细胞转变成为癌性细胞。朗格汉斯细胞在对致癌物7,12二甲基苯丙蒽(DMBA)进行回应时会增加其对某种叫做CYP1B1酶的表达,这种酶会将DMBA代谢成为一种可诱导细胞内突变的化合物。文章的作者指出,DMBA是一种聚芳烃,或PAH,而这些烃类化合物一般在工业污染中非常普遍。他们说,含有PAH的颗粒物质可能是人类皮肤癌中的一种未得到正确评价的环境因素。 —————————————————————————————————————————— 令人震惊的比例(人类90%),不过PAHs尤其是苯并芘(BAP)是强致癌物倒是听说过!

  • 【转帖】HPLC法测定羟甲烟胺的含量

    HPLC法测定羟甲烟胺的含量 来源: 作者:武玉敏,李大伟 ,李云霞 摘要:目的:采用高效液相色谱法测定羟甲烟胺的含量。方法:以C18化学键合硅胶柱分离羟甲烟胺, 以甲醇-磷酸二氢钠(pH=6.0)(10:90)为流动相,UV检测波长261nm 进行测定。结果:平均回收率为99.76%,RSD为0.29%(n=5)。羟甲烟胺进样量与吸收峰面积呈良好的线性关系。线性范围0.1~0.6mg/ml。结论:该方法测定羟甲烟胺的含量,结果准确,重现性好。关键词:HPLC;羟甲烟胺;含量测定羟甲烟胺为利胆保肝药,并具有抑菌作用,临床上广泛用于胆囊炎、胆管炎,亦可用于病毒性肝炎的辅助治疗。国家药品标准中用碘量法测定其含量。本文试用高效液相色谱法测定羟甲烟胺的含量,取得满意的效果。1 仪器与试药岛津LC-10AD高效液相色谱仪,岛津SPD-1OAV紫外检测器,色谱工作站:天津奥特赛恩斯。羟甲烟胺对照品(自制,含量为99.8%),羟甲烟胺为山东山大康诺制药有限公司生产(批号040508 040510 040512),甲醇为色谱纯,磷酸二氢钠为分析纯。,2 实验方法2.1色谱条件色谱柱:BDS-C18(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-磷酸二氢钠(pH=6.0)(10:90);流速:1.0ml/min;检测波长:261nm;柱温:30℃。2.2 溶液配制2.2.1对照品溶液:取105℃干燥2h的羟甲烟胺对照品约0.1g,精密称定,置100ml容量瓶中,加甲醇适量,振摇使溶解,加甲醇稀释至刻度,摇匀。超声5min,用甲醇定容,作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液10ml至50ml量瓶中用甲醇稀释至刻度。2.2.2供试品溶液:取研细的本品约1g,精密称定,置25ml量瓶中,加适量甲醇溶解并稀释至刻度,超声处理5min,放冷,用甲醇定容,过滤,弃去初滤液,取续滤液。即得。2.3系统适用性试验分别取对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱仪,记录色谱图。羟甲烟胺峰保留时同约为6.5min,理论塔板数以羟甲烟胺峰计算为4300。3 实验结果 3.1线性关系试验 精密量取对照品贮备液(1mg/ml)1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Om1分别置lOml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。每个浓度点进样两次测定,各进样10μl,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标进行线性回归,得回归方程为:Y=0.08041x一0.01456 r=0.9999,线性范围为0.1~0.6mg/ml。3.2精密度考察 依次取同一对照品溶液(0.2mg/ml)连续进样5次,每次10μl,峰面积积分值得RSD=0.24%。3.3重复性试验 取同一羟甲烟胺样品5份,按供试品液制备方法制备,依法测定。结果羟甲烟胺含量RSD为0.37%,表明本方法重现性好。3.4稳定性试验 取同一样品溶液(批号040508),在0、1、4、12、24、48、72h分别进样10μl,依法测定,结果7次测定羟甲烟胺含量RSD为0.32%,表明样品溶液在3d内稳定。3.5回收率试验 取羟甲烟胺对照品适量,按样品测定方法测定含量,计算回收率。3.6样品测定 取浓度为0.2mg/ml的样品溶液用0.45μm微孔滤膜滤过,各进样lOμl,读取峰面积值,按外标法计算含量。4 讨论羟甲烟胺的流动相溶液置UV-2450分光光度计上,在200~400nm波长范围内扫描,结果在261nm的波长处有最大吸收,故本法的检测波长选用261nm。本实验采用高效液相色谱法测定羟甲烟胺的含量,方法操作简便,结果准确,重现性好,灵敏度高,可作为实际生产中质量控制的方法。

  • 西达本胺抑制SCLC细胞增殖和凋亡

    西达本胺抑制SCLC细胞增殖和凋亡

    [font=黑体]西达本胺抑制[/font]SCLC[font=黑体]细胞增殖和凋亡[/font]CCK-8[font=宋体]药敏实验结果表明,[/font]SCLC[font=宋体]细胞系[/font]H69[font=宋体]、[/font]H446[font=宋体]、[/font]H526[font=宋体]、[/font]DMS114[font=宋体]经不同浓度西达本胺处理[/font] 24[font=宋体]、[/font]48[font=宋体]、[/font]72[font=宋体]、[/font]96[font=宋体]、[/font]120 h[font=宋体]后,细胞产生明显的增殖抑制现象,且随着药物浓度增加及作用时间延长,抑制作用逐渐增强,呈现出时间[/font]-[font=宋体]浓度依赖性,如图[/font]2[font=宋体]所示。同时得到西达本胺对四种细胞系作用[/font]72h[font=宋体]后的[/font]IC10[font=宋体]、[/font]IC20[font=宋体]、[/font]IC50[font=宋体]见表[/font]1-8[font=宋体]。结果显示四种细胞系对西达本胺均较为敏感,其中,与[/font]H69[font=宋体]相比,[/font]DMS114[font=宋体]对西达本胺相对不敏感。[/font][align=center][img]file:///C:/Users/Wang/AppData/Local/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image002.png[/img] [img=,579,366]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212020948338518_7449_3237657_3.png!w579x366.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体]不同浓度西达本胺作用不同时间后对[/font]H69[font=宋体]的增殖抑制情况[/font][/align][align=center] [/align][align=center][font=宋体]表[/font]1-8 [font=宋体]西达本胺作用[/font]72 h[font=宋体]后达到不同抑制效果的药物浓度([/font]μmol/L[font=宋体])[/font][/align] [table=95%][tr][td] [font=宋体]细胞名称[/font] [/td][td] [align=center] IC10[/align] [/td][td] [align=center] IC20[/align] [/td][td] [align=center] IC50[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]H69[/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]0.423[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]0.632[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]2.916[/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]H446[/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]0.404[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]0.571[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]1.033[/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]H526[/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]0.118[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]0.261[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]1.015[/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]DMS114[/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]1.272[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]2.815[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif] 10.943[/font][/align] [/td][/tr][/table][font=黑体]西达本胺改变[/font]SCLC[font=黑体]细胞形态[/font][font=宋体]不同浓度([/font]0[font=宋体]、[/font]IC20[font=宋体]、[/font]IC50[font=宋体])西达本胺作用于[/font]H69[font=宋体]、[/font]H446[font=宋体]、[/font]H526[font=宋体]、[/font]DMS114[font=宋体]细胞[/font]48[font=宋体]及[/font]72 h[font=宋体]后在显微镜下观察细胞形态改变如图[/font]1-3[font=宋体]所示。随着药物浓度及作用时间的增加,[/font]SCLC[font=宋体]细胞系形态发生了变化,细胞增殖率减低。[/font]H69[font=宋体]团状细胞减少,单个凋亡细胞增多;[/font]H446[font=宋体]贴壁细胞减少,凋亡细胞增多,触角伸长,形状变得不规则;[/font]H526[font=宋体]细胞体积缩小,由片状变为球形团块,周围散在大量凋亡细胞;[/font]DMS114[font=宋体]由椭圆形变为长梭形,细胞内颗粒物增多,可见空泡,出现凋亡小体。由此可见,低剂量西达本胺即可影响[/font]SCLC[font=宋体]细胞形态,促进细胞凋亡,四种细胞系对西达本胺均较为敏感。[/font][img]file:///C:/Users/Wang/AppData/Local/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image004.png[/img][align=center][img=,690,437]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212020948563335_146_3237657_3.png!w690x437.jpg[/img][/align][align=center] [/align][font=黑体]西达本胺诱导[/font]SCLC[font=黑体]细胞凋亡[/font][font=宋体]流式结果显示,用不同浓度([/font]0[font=宋体]、[/font]IC20[font=宋体]、[/font]IC50[font=宋体])西达本胺处理[/font]SCLC[font=宋体]细胞系[/font]48 h[font=宋体]后,四种亚型细胞系凋亡率均上升,且与加药浓度成正比,如图[/font]1-4 A[font=宋体]所示。[/font]48 h[font=宋体]检测在[/font]IC20[font=宋体]、[/font]IC50[font=宋体]浓度下[/font]H69[font=宋体]细胞凋亡率为[/font]8.45%[font=宋体]和[/font]14.46%[font=宋体],[/font]H446[font=宋体]细胞凋亡率为[/font]8.88%[font=宋体]和[/font]41.6%[font=宋体],[/font]H526[font=宋体]细胞凋亡率为[/font]11.48%[font=宋体]和[/font]20.77%[font=宋体],[/font]DMS114[font=宋体]细胞凋亡率为[/font]11.83%[font=宋体]和[/font]16.07%[font=宋体],与对照组相比,差异具有统计学意义([/font]P0.05[font=宋体])(图[/font]1-4 B[font=宋体])。为了进一步检测西达本胺在[/font]H69[font=宋体]、[/font]H446[font=宋体]、[/font]H526[font=宋体]、[/font]DMS114[font=宋体]四种细胞系中的作用差异,[/font][font=宋体]我们用[/font]1 μmol/L[font=宋体]的西达本胺分别处理[/font]H69[font=宋体]、[/font]H446[font=宋体]、[/font]H526[font=宋体]、[/font]DMS114[font=宋体]细胞[/font]48h[font=宋体]后进行流式细胞仪检测,结果如图[/font]1-4 C[font=宋体]所示,与[/font]DMS114[font=宋体]比较,[/font]H69[font=宋体]、[/font]H446[font=宋体]、[/font]H526[font=宋体]对西达本胺更敏感。[/font][img]file:///C:/Users/Wang/AppData/Local/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image006.png[/img][align=center][img=,690,711]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212020949136557_2690_3237657_3.png!w690x711.jpg[/img][/align][align=center][font=黑体]图[/font][font=宋体]不同浓度([/font]0[font=宋体]、[/font]IC20[font=宋体]、[/font]IC50[font=宋体])西达本胺作用[/font]48 h[font=宋体]后[/font]H69[font=宋体]、[/font]H446[font=宋体]、[/font]H526[font=宋体]、[/font]DMS114[font=宋体]细胞凋亡率柱状图[/font][/align][align=center]. 1 μmol /L[font=宋体]西达本胺作用[/font]48 h[font=宋体]后对[/font]H69[font=宋体]、[/font]H446[font=宋体]、[/font]H526[font=宋体]、[/font]DMS114[font=宋体]细胞凋亡的影响[/font][/align][align=center] [/align] [font=黑体]西达本胺抑制[/font]SCLC[font=黑体]细胞克隆[/font][font=宋体]用不同浓度([/font]0[font=宋体]、[/font]IC20[font=宋体]、[/font]IC50[font=宋体])西达本胺处理[/font]SCLC[font=宋体]细胞系[/font]48 h[font=宋体]后,[/font][font=宋体]在细胞克隆第[/font]14[font=宋体]天,镜下观察细胞克隆情况并拍照(图[/font]1-5 A[font=宋体]),细胞单克隆数量随加药浓度增加而减少。各组细胞克隆形成率绘制成柱状图,如图[/font]1-5 B[font=宋体]所示,随着加药浓度增加细胞克隆形成率逐渐减小,与对照组相比,差异具有统计学意义([/font]P0.05[font=宋体])。[/font]H446[font=宋体]、[/font]DMS114[font=宋体]细胞[/font][font=宋体]进行了平板克隆实验,随着加药浓度的增加,克隆数明显减少,结果[/font][font=宋体]如图所示。[/font][b][img]file:///C:/Users/Wang/AppData/Local/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image008.png[/img][/b][align=center][b][img=,690,425]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212020949347589_4119_3237657_3.png!w690x425.jpg[/img][/b][/align]

  • 体细胞计数和牛奶质量

    牛奶中的体细胞有两个来源。一是来自乳腺分泌组织中的上皮细胞(也称腺细胞);二是来自与炎症进行搏斗时而死亡的白血细胞。腺细胞是正常的体细胞,是乳腺进行新陈代谢过程的产物,在奶中的含量相对恒定。而白细胞是一种防卫细胞,可以杀灭感染乳腺的病菌,还可以修复损伤的组织。因此白细胞在牛奶中的数量随奶牛的生理状态和健康水平有很大变化。 一、牛奶中体细胞上升的原因 1 、 由于乳腺被细菌感染出现乳房炎而使体细胞数量上升 。 牛奶中正常的体细胞为 20 万 /ml (标准)。但初产母牛和管理良好的牛群可能低于 10 万 /ml 。如果体细胞数超过 25 ~ 30 万个 /ml ,就接近不正常,说明有细菌传染,引起乳房炎。引起乳房炎的细菌有两大类:传染性的细菌和环境中的细菌,详见另文所述。 2 、 牛的年龄及泌乳状态 体细胞数随着牛的胎次(年龄)及泌乳阶段而上升。这是母牛自然免疫系统在分娩之前所表现出的一种免疫反应,其目的是为了提高乳腺的防御机能。到了分娩以后,如果乳腺未遭病菌感染,则牛奶中的体细胞数量会很快下降。 3 、应激和季节 高温和高湿条件下所引起的热应激,一般多出现在 7 、 8 月份,也可能引起牛奶中的体细胞数的上升。母牛表现发情症状时也有伴随体细胞上升的趋势,但报道不太一致。 4 、乳房创伤 在没有传染源的情况下,乳房内部创伤(如挤奶机负压过大,空吸时间过长或乳房被压伤等)也可以导致牛奶中体细胞数量增加。但当创伤愈合后,体细胞又可恢复正常。 5 、其它原因 包括挤奶设备的完好及工作状况,如脉动频率、真空负压大小及稳定性、集乳器的通透性,橡皮奶衬的完好及柔软性等都可以影响牛奶体细胞的数量。 此外,挤奶过程的卫生状况,乳头的护理及乳头的封闭影响着细菌进入乳头的机会,同时也影响着牛奶中体细胞的数量。 二、体细胞数制约着牛奶的产量及质量 1 、对牛奶产量的影响 当牛奶中的体细胞数量超过 30 万 /ml 时,日产奶量开始下降。上升幅度越大,产量下降幅度也越大(详细材料参考另文)。 2 、对牛奶质量的影响:当体细胞增加时,可以伴随乳白蛋白质的上升和酪蛋白质含量的下降,可以使奶酪的产量随之下降;在这种条件下奶牛的货架期和风味也随之受到影响。因此奶业发达国家一般均根据体细胞的数量标注奶价。对体细胞少的生产场家给予特殊奖励。

  • 用PITC衍生化测定甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的含量

    用PITC衍生化测定甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的含量测定步骤:1. 用纯水配制甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的混合液,其浓度都大约为0.05mg/mL,得到甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的混合标准溶液。2. 配制1.2%PITC乙腈溶液和14%TEA乙腈溶液。3. 衍生化过程:取200uL氨基酸混合标准溶液于1.5mL离心管中,然后加入100uL1.2%PITC乙腈溶液和100uL14%TEA乙腈溶液,摇震使其混合均匀,然后于水浴锅中水浴加热1小时,然后加入500uL正己烷萃取两次,最后取下层液200uL于HPLC瓶中,然后再加入400uL水稀释,用HPLC分析。 色谱条件:柱子:Agilent SB-Aq 250mm*4.6mm, 5um流动相A:50mM NaAC (pH=6.5)流动相B:50mM NaAC (pH=6.5):ACN=1:1Time:0-10-25-40minB%:5%-5%-95%-95%进样量10uL 出现问题:1. 甘氨酸和谷氨酰胺衍生化峰会分叉。2. 会出现很多杂峰,尤其是在强洗脱部分。

  • 桂皮、洋葱和茶多酚复配阻断亚硝胺生成

    以 猪肉香肠为研究对象,研究桂皮、洋葱和茶多酚复配对阻断产品中N一亚硝胺生成的效果。实验结果表明:茶多酚对猪肉发酵香肠中亚硝胺残留量的影响最大,茶多酚、洋葱和桂皮三种物质复配能有效地抑制N一亚硝胺的生成,其最佳配比为(加人量以肉重计):茶多酚含量为0.029%,洋葱汁为3.5%, 6%桂皮浸体液含量为5.4%,此时产品中亚硝胺的含量6.5ug/kg

  • 致癌物质丙烯酰胺含量

    致癌物质丙烯酰胺含量最近英国食物标准局对248份食品样品进行检测,发现13种食品中含有的致癌物质丙烯酰胺含量有上升趋势。其中亨氏、雀巢等许多知名食品公司都遭到英国食物标准局的警告,产品涉及薯条、速溶咖啡和谷类食物等。  世卫组织的专家指出,丙烯酰胺已被证实与多种癌症有关联。2002年,科学家便开始催促食品行业降低含量。但是英国食物标准局检测表明,包括薯片、即饮咖啡、面包、饼干、油炸土豆片、早餐麦片、幼儿食品在内的多款食品中的丙烯酰胺含量并未降低。其中被点名的有亨氏的香蕉儿童手指饼干、雀巢的金牌速溶咖啡等。

  • 【转帖】施恩奶粉被曝三聚氰胺含量超标百倍 部分商场已下架

    消费者郭利拿着去年吃剩下的几罐施恩奶粉,到国家食品质量安全监督检验中心进行检验。检验报告显示,这几个批次的奶粉均检测出大量三聚氰胺,其中2008年3月17日生产的“施恩牌幼儿配方奶粉(第三段)”三聚氰胺含量达到132.9mg/kg,超过国家规定的1mg/kg限量值100多倍。“三聚氰胺奶粉事件”再起波澜。这次,让孩子家长目光聚焦的是“施恩奶粉”。5月31日,北京一幼儿家长郭利持国家食品质量安全监督检验中心出具的“检验报告单”来到北京出入境检验检疫局报案。这份报告显示,施恩几个批次的奶粉,三聚氰胺超标达到100倍。看着施恩奶粉包装上“100%全进口奶源”的标识,郭利表示了自己的疑惑:进口检验卫生证书上合格的奶粉,为什么到了消费者手里,三聚氰胺含量会大大超标?截至昨天,负责与郭利沟通的施恩(广州)婴幼儿营养品有限公司(以下简称施恩公司)的北区销售总监段庚惠却仍旧未对奶粉的生产和质量问题向消费者做出说明;施恩公司方面也没有发声。另据《每日经济新闻》了解,国家质监总局已责成有关单位调查此事,但目前尚无结论。问题奶粉 三聚氰胺含量超标100多倍郭利说,他的孩子在2006年9月开始食用“施恩婴幼儿配方奶粉”,直到“三聚氰胺奶粉事件”爆发,施恩有4个批次的奶粉发现含三聚氰胺。联想到孩子烦躁、厌食、尿量少的不正常反应,焦急中,郭利带孩子到北京的几所医院检查,发现两岁多的小孩“双肾有强回声,点状结石”,郭利和家人都慌了。郭利说,施恩公司不承认他的孩子食用了问题奶粉,“他们说,除了国家公布的那4批奶粉以外,其他的都是合格的”。几经周折,郭利的孩子最终没有被列入问题奶粉受害者名单。为了证明奶粉的问题,今年3月,郭利拿着去年吃剩下的几罐施恩奶粉,到国家食品质量安全监督检验中心进行检验。检验报告显示,这几个批次的奶粉均检测出大量三聚氰胺,其中2008年3月17日生产的“施恩牌幼儿配方奶粉(第三段)”三聚氰胺含量达到132.9mg/kg,超过国家规定的1mg/kg限量值100多倍。而这几个批次的奶粉并不在国家公布的含有三聚氰胺的那4个批次当中。昨天,当《每日经济新闻》记者再次查看施恩公司网站时,发现其所公布的2008年4月至今的奶粉检测报告中,三聚氰胺含量均为合格。但对众多家长反映的“问题施恩奶粉”,施恩公司却均未公布相关批次的检测报告。郭利介绍,事发后,施恩公司开始派员与他接触。在4月14日的一次见面时,施恩公司一名为李明的北京办事处主管在谈话纪要上签字。纪要上,叙述了郭利孩子吃奶粉和患病的过程。李明签了字。问题报告 进店检验报告顾客未能看到拿到检测报告,郭利向他当时购买施恩奶粉的物美大卖场北京新街口店反应了情况。5月下旬,物美大卖场对“施恩奶粉”做出下架处理。物美集团的客服经理李颖告诉记者,通常,只有质监、工商、卫生部门查验通知的不合格产品,卖场才会做下架处理,“这次,是我们发现这个商品的一些环节有漏洞”。但李颖拒绝透露具体的“漏洞”是什么。商场下架的消息,让一些消费者茫然。当《每日经济新闻》记者询问下架原因时,物美集团并没有作出解释。“物美超市下架,那是一场误会。最近,我们的产品已经开始陆续上架。”昨天,施恩公司北区销售总监段庚惠告诉本报记者。《每日经济新闻》记者昨日向施恩公司北京办事处工作人员史贵山询问相关情况时,他说,这两天施恩奶粉正在陆续上架。而对物美超市方面,郭利和家人曾多次要求其提供施恩奶粉进店的相关检验报告,但物美公司一直没有提供。按照国家的有关规定,这些奶粉的质检报告,商场应该向顾客提供。5月31日,在双方接触过程中,物美公司的客服经理李颖曾表示,可以在3天之内告知郭利施恩奶粉进入物美店的检验情况。但3天后,李颖却没有提供相关资料,而是表示,希望郭利通过厂家去寻找那些检验报告。然而,施恩公司的人员在多次和郭利接触后,也没有向郭利提供奶粉的检测报告,只是称:“我们交给物美了。”物美公司崇姓副总最后告诉郭利:“我们的商品进店手续都很全,但不会给消费者看,我们只对政府管理部门出示。”商场的说法让郭利很生气,“消费者的知情权在哪?”郭利说,这么长时间了,施恩奶粉都说不出自己的北京办事处地址,所有联系的人最多只是留个电话号码。问题奶源 “进口奶源”为何含有三聚氰胺连日来,《每日经济新闻》记者在北京物美、家乐福等多家超市发现,有的商场施恩奶粉已不见踪影,有的商场还在出售。在施恩奶粉的外包装上,有“100%进口奶源”的字样。在郭利获得的海关进口检验卫生证书上,施恩公司所进口的“新西兰、澳大利亚全脂奶粉”检验合格。海关检验合格的奶源,缘何查出三聚氰胺?针对这个问题,施恩公司北京办事处工作人员史贵山说:“在进口奶源紧张的时候,我们调用了部分国产奶源。”但他拒绝透露国产奶源的来源。昨天,施恩公司工作人员张培喜告诉《每日经济新闻》:“有些进口奶源本身也含有三聚氰胺,去年,一些进口奶粉不是也查出(三聚氰胺)来了吗?”来自施恩公司的不同说法,让施恩奶粉的身世扑朔迷离。施恩公司的《营业执照》显示,这家公司拥有广东雅士利公司、施恩美国公司和施恩新加坡公司三个股东,奶粉的外包装上,商标持有人为“美国施恩有限公司”。常年做“同声翻译”的郭利精通英文,在美国友人众多。他说,他通过美国相关部门和众多朋友调查,没有发现施恩美国公司的注册记录。关于施恩公司相关资料显示,施恩(广州)婴幼儿营养品有限公司于2002年成立,注册资本金为1.55亿元,法人代表为张利钿,股东分别为雅士利集团公司、美国施恩国际有限公司、施恩营养品国际(新加坡)公司。施恩公司网站称,其所生产的婴幼儿系列配方奶粉,系参照世界卫生组织、联合国粮农组织和美国小儿科学会推荐的营养配方标准,在《中国婴幼儿食品卫生标准》的基础上,针对中国宝宝各年龄段发育所需营养精心配制而成。

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