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批次间纯化分析
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批次间纯化分析相关的方案
应用 Agilent MassHunter Easy Access 软件对模式治疗性蛋白进行批次间纯化分析
本应用简报介绍了如何像生物分析科学家在典型生物药理学环境下进行纯度分析那样,使用 Agilent Easy Access 软件来分析模式治疗性蛋白的批次间纯度。分析模式治疗性蛋白的批次间纯度时,将 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统与 Agilent 6530 精确质量Q-TOF LC/MS 联用,并通过 Agilent Easy Access 软件进行数据分析。LC/MS 平台拥有卓越的色谱分离度和质量精度,结合强大的数据处理能力,可简便、快速地分析批次间的蛋白纯度。本应用简化了工作流程,使用者可以快速做出决策,以作进一步的下游处理。该软件可用于比较蛋白谱图,从而确保监管机构要求的批次一致性。此外,该软件还有助于了解工艺放大或生产过程中纯化后蛋白的杂质谱图。该数据可帮助开发生物仿制药的公司在产品上市前评估其产品与原始药物的相似度,重要性不言而喻。
如何使卤料盐度控制管理批次的检测方法
用盐度计、电导率仪和硝酸银滴定三种盐度测定方法,监测传统禽肉卤制工艺下,不用批次卤料中盐度变化规律。分析三种盐度测定方法间相关性,探讨在工业生产中实施卤料盐度快速检测的可行性。结果表明,盐度计,电导率仪法均具有简便、快速、准备等优势,可作为生产中卤料盐度监测方法应用。
RephiLe乐枫:纯水质量对全自动生化分析仪及检测结果的影响
水是实验室内一个非常重要但又容易被忽视的试剂。在全自动生化分析仪检测过程中,纯水作为生化反应的载体或介质、样品或试剂的稀释液和溶剂、仪器的清洗液以及反应的参与试剂等贯穿检测的全过程,其纯化质量的高低直接关系到检测结果的可信度。目前国内大部分检验科实验室都使用反渗透中央纯水系统。瑞枫通过对该系统工作流程的分析以及遇到的实际情况,发现并总结了导致水纯度不够的几种原因及其对全自动生化分析仪检测的影响
Multiwave 5000转子20SVT50单批次对不同的石墨样品 进行2步酸消解
为了验证20SVT50转子的适用性,对不同石墨材料进行了同一批次消解。然后分别用ICP-OES和ICP-MS测定目标元素浓度。
中压玻璃柱在深海鱼油DHA/EPA分离纯化中的应用
中压制备液相色谱法具有高的选择性和分离效率,对于EPA和DHA以及其他杂质有很好的分离作用,高重现性,批次稳定性适合于制备EPA 、DHA等不饱脂肪酸产品。 采用我们的鱼油纯化专用填料的中压玻璃柱,配套苏州汇通色谱自主的制备液相系统,能一步得到纯度90%以上的EPA和DHA,收率均在达70%以上。
分析仪器在引物探针的纯化制备分离
分析级制备纯化 行业特点:大多数单次制备纯化量较少,可采用分析级纯化方案 半制备级纯化平台 适合大制备量核苷酸纯化,单次制备量可达200~2000 OD QC质检 HTCS核酸质谱检测系统(基于LTQ系列质谱) DEL-核酸质谱检测系统(基于LTQ质谱) 基因扩增 Realtime PCR----荧光定量PCR仪 核酸药物高端研究 Thermo LTQ-Orbitrap XL高分辨质谱系统
松花粉中柚皮素HPLC含量测定方法研究(Diamonsil C18 Cat.No.: 99901)
摘要 目的:建立松花粉中柚皮素 HPLC 法测定方法,提高松花粉质量标准。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定柚皮素含量,以甲醇 -0.05% 磷酸溶液(45 ∶ 55)为流动相,检测波长为 288 nm 测定柚皮素的含量。结果 :柚皮素质量浓度在 10.0 ~ 216.0 µg/ml 范围内线性关系良好(r=1.000 0),平均回收率 99.26% ,RSD 为 1.04%(n=9)。运用该方法测得 12 批次不同产地的松花粉中柚皮素含量在 0.13% ~ 0.27% 之间。结论 :建立的 HPLC 分析方法操作简便、快速、专属性强、重复性好,可作为该松花粉的质量控制方法。
纯水水质对全自动生化分析仪钙离子测定的影响
大型全自动生化分析仪对水质要求很高ll1.水质达不到要求将会对部分检验项目造成较大影响.为了探讨纯水水质对全自动生化分析仪偶氮胂Ⅲ 法钙离子测定的影响.我们使用两种不同水质的纯水在oLYMPUS—AU640全自动生化分析仪上做了对比.现报道如下。
Opentrons 磁珠蛋白纯化工作站
Opentrons OT-2 磁珠蛋白质纯化工作站基于磁珠提取原理,可以自动化完成小规模蛋白质纯化和蛋白质组学样品处理。磁珠蛋白质纯化工作站可以支持多种工作流程。
在清洁验证和水纯化应用中TOC分析仪所用分析检测器的比较
确定用于清洗验证和纯化水应用的最佳TOC分析仪,通常会有两种常用检测技术的比较:,NDIR检测和膜电导率。本研究中,在药物的应用上,通过使用几种不同的基质和分析物,分析比较这两种分析检测技术。
天然产物的纯化
这是一个用Agilent 1100系列纯化系统AS和PS对红三叶中刺芒柄花素和其它植物性雌激素进行分析型和制备型分离的例子。分析型放大方法可用于在Agilent 1100系列纯化系统AS上分离复杂植物粗提物中的化合物。在这个方法的基础上,进行了按色谱峰收集馏分的制备型分离。• 为了获得更多的植物雌激素物质,使用了Agilent 1100系列纯化系统的馏分合并功能• 通过对馏分的再分析测定了所得化合物的纯度• 根据分析结果将方法放大• 为了在一次运行中得到更大量的目标化合物,在Agilent 1100系列纯化系统PS上用两种不同的色谱柱重复了纯化方法制备规模的结果与在分析型系统上得到的结果相当。
全自动、非接触式、无吸头的基于磁珠的DNA 纯化
磁珠是用于生物分子简单有效分离和纯化的必不可少的实验室工具。有多种不同表面涂层和化学成分的磁珠可供选择,它们只需最少量的处理,便能用于DNA、RNA和蛋白质的磁性净化。我们提出的自动化解决方案包括创新的正排量配药技术,结合离心式液体抽空,以增压磁珠净化工作流程。
在无麸质面包中添加生咖啡内果皮的效果-油脂氧化分析
本篇文章使用了velp oxitest油脂氧化分析仪来评估在无麸质面包中添加不同比例的生咖啡内果皮的影响,以在保质期内改善结构、质量和化学性质。
使用超离进行外泌体的分离纯化方法
外泌体是细胞衍生的膜泡,呈现于生物体液, 唾液, 血液, 尿, 羊水, 等体液内. 外泌体是由脂质双层形成,从细胞分泌出来,大小在20 - 200 纳米之间. 外泌体在细胞内的信号传导中起到了重要的作用, 故很多研究人员认为外泌体可以用于预诊断, 治疗, 及作为生物标记物.本文将介绍使用日立超速离心机对外泌体进行纯化分离。
无需手动纯化直接分析合成的寡核苷酸
由亚磷酰胺化学法合成的寡核苷酸通常使用离子对反相液相色谱 (IP-RPLC) 和阴离子交换色谱进行分析和纯化。在 IP-RPLC 分析中,阴离子交换纯化馏分的高含盐量会削弱寡核苷酸参与离子配对的能力。这就需要在 IP-RPLC 分析之前对样品进行脱盐,这一步骤通常使用离心过滤器手动完成。本应用简报展示了高盐浓度溶液中寡核苷酸的直接二维液相色谱分析:在第一维(1D) 中进行在线脱盐,随后在第二维 (2D) 中进行 IP-RPLC 分析。在该设置中,二维液相色谱的使用提高了工作流程速度,同时避免了手动的样品前处理过程。
药物代谢物的纯化和鉴定——安捷伦分析型纯化系统、安捷伦自动纯化软件和 Agilent 6540 精确质量四极杆飞行时间 (Q-TOF) 液质联用系统
药物代谢和药代动力学 (DMPK) 研究通常需要通过质谱 (MS) 鉴定药物代谢物,并在药物开发的后期阶段,通过 NMR 确认代谢物结构。为此,可能需要对代谢物进行纯化。在本应用简报中,将安捷伦自动纯化软件与 Agilent 1260 分析型纯化系统相结合对安非他酮药物代谢物进行纯化。使用通过 Agilent 6540 精确质量四极杆飞行时间 (Q-TOF) 液质联用系统和 Mass-MetaSite 软件采集到的高分辨率精确质量 MS 和 MS/MS 数据对代谢物进行鉴定。
可提高制备纯化工作效率的分析制备LC-MS系统
制备LC广泛应用于制药、食品和化工等领域,用于从混合物中纯化目标化合物、寻找天然产品中的活性成分,以及对杂质或未知化合物进行结构分析等。确立与其他组分或杂质组分分离的条件对高纯度回收目标化合物尤其重要,但在制备LC条件下,所使用的样品数量以及流动相消耗量较多,因此,因此分离条件的优化通常在分析规模上进行,以最大限度地降低这些消耗。在优化过程中,在优化过程中,需要调整各种 HPLC 条件(包括梯度曲线),以找到最佳分离条件,对于创建每个分析方法编辑而言都是一个耗时的过程。另外,在完成分析尺度的条件研究后,需要规模放大和制备目标化合物,而随后的纯度/回收率确认中,需要将制备的馏分从馏分收集器转移到自动进样器,这也是一项费时费力的工作。本文为您介绍使用NexeraPrep系列的分析制备LC-MS系统,完成分析尺度的分离条件研究、扩大分馏规模、纯度/回收率确认等一系列制备纯化工作流程(图1)的案例。
米格列醇的分析
米格列醇为强极性化合物,我们尝试使用CAPCELL PAK CR和CAPCELL PAK NH2色谱柱对其进行保留。使用CAPCELL PAK CR色谱柱分析,并调整流动相均未得到较好结果。而使用CAPCELL PAK NH2色谱柱在HILIC模式下对其进行保留,在水-乙腈流动相体系下,得到了如上图1、图2所示结果:色谱峰峰形良好,客户所提供2个批次原料药和1个批次成品样品主峰后均无杂质峰,原料药1主峰前发现2个杂质峰,与主峰分离良好。
基于UV/MS触发的LC-MS高纯度的制备纯化系统
制备LC广泛应用于制药、食品和化工等领域,用于从混合物中纯化目标化合物、寻找天然产品中的活性成分,以及对杂质或未知化合物进行结构分析等。在应用文章“01-00650-JP”中,介绍了一种分析/制备转换LC-MS系统,其制备纯化工作流程如图1所示。该系统包括:在分析模式下的分离条件研究、规模放大、馏分纯度/回收率确认等。具体来说,使用分析方法开发软件Lab Solutions MD进行分析方法的高效的分离条件优化,确保目标化合物(氢化皮质酮)及其附近共洗脱的峰之间有充分的分离。然后,进行负载量研究,规模放大,使用UV信号作为触发信号进行制备。本文为您介绍通过使用比UV更具定性能力的MS触发收集信号,可最大限度地排除杂质的混入,提高氢化皮质酮纯度的制备案例。
通过中空纤维洗滤纯化纳米颗粒
相较于传统的纳米颗粒纯化方法,如超速离心、搅拌室过滤、透析或者色谱方法,中空纤维洗滤(中空纤维切向流过滤)是一种更加高效、快速的替代方法。中空纤维洗滤可以用于纯化多种纳米颗粒,包括脂质体、胶乳颗粒、磁珠以及纳米管。中空纤维洗滤是一种基于膜分离的技术,膜孔径的大小决定了大分子或颗粒是被截留还是通过。这是一种流动的过程,样品温和循环通过管状膜。通过缓冲液的置换,可以获得纯化的纳米颗粒。中空纤维膜洗滤可以从研发体积直接线性放大到生产规模。通过增加膜纤维数量并维持关键操作参数,大体积样品可在和小规模研发体积一致的条件下完成。
风干武昌鱼中鲜味肽的分离纯化及二级结构分析
本实验采用电子舌测定鲜味,以及超纳滤、RP-HPLC从风干武昌鱼中分离纯化出纯度均一的鲜味肽,MALDI-TOF-MS、 氨基酸自动分析仪、 FTIR测定鲜味肽的分子质量、 氨基酸组成和二级结构, 探讨鲜味肽结构与风味的关系, 以为风干武昌鱼的标准化生产提供科学指导。
提高药物组分纯化工作的效率、缩短纯化时间、干燥时间、降低溶媒成本
本文介绍了使用超临界流体色谱分析仪,进行药物制备纯化和干燥的案例。使用常规HPLC制备纯化药物化合物具有如下问题:处理时间长,劳力成本高、有机溶剂消耗大等。与此相比,SFC制备纯化法具有多种优点,不仅适用于新化合物的分析,还可应用于常规化合物的纯化,提高其工作效率。
FLASH色谱纯化实验小讲堂--纯化时样品溶解度问题的解决方案
在样品纯化过程中你是否遇到过五花八门的难点,这个问题对于做制备纯化的小孙来说有太多值得吐槽的地方,如样品极性太小正相模式不保留、样品极性太大硅胶固定相洗脱不下来、样品溶解度太差纯化过程析出或拖尾严重及洗脱不下来等情况。在分离纯化的过程中,难免会碰到溶解性比较差的物质,这类物质有时会对分离纯化造成一些负面的影响,如由于拖尾而影响分离度,甚至是直接析出导致管路堵塞,或者少量试剂不能完全溶解至澄清,而样品纯化之前一定要有解决溶解度的办法,否则带着问题上样纯化效果一定不会很理想。解决样品溶解度的问题没有固定答案,具体样品需要具体分析,本文主要和大家分享小孙在纯化过程中如何处理溶解度较差的样品。
Opentrons 核酸提取纯化工作站
Opentrons 核酸提取纯化工作站基于全自动磁珠提取原理,能够自动化进行核酸分离和纯化工作流程,单次最多可处理24 个样本。核酸提取工作站包括 OT-2 自动化移液平台、高精度移液器、磁珠纯化模块、热振荡仪(选配)、温控模块、 Opentrons 核酸提取应用协议和 Opentrons 专用吸头耗材。
使用Biotage 快速纯化制备液相色谱进行哈茨木霉菌发酵液中Peptaib抗菌肽的分离纯化
从哈恣木酶发酵液分离鉴定出Alamethicin F50等各种天然产物,利用Biotage液相色谱,对各类产物进行了纯化制备。耐士科技作为Biotage中国区总代理,以最优质的服务提供Biotage全系产品。Biotage Isolera 系列是世界上最智能的快速纯化系统,它拥有自己独创的智能参数设置,共有3个系统,多种配置可选。可以让化学家们轻松地完成对从mg级到150g以上样品 的更好的分离。创新的TLC-to-gradient专利技术可以根据薄层层析色谱的数据自动产生适合样品的溶剂洗脱梯度,并建议适合该样品量的色谱柱。
苯甲酸类化合物的分离纯化
羧酸类化合物尤其是苯甲酸类化合物是许多活性药物成分(Active Pharmaceutical Ingredients, API)的关键中间体,例如解热镇痛药物阿司匹林等,具有广泛的应用价值。使用传统硅胶作为固定相的色谱柱来分离纯化这类化合物是一类难题。常州三泰科技有限公司的SepaFlash C18反相柱结合快速液相制备色谱系统SepaBean machine具有良好的分离性能。本文利用SepaFlash C18反相柱分离并纯化了两种强极性的苯甲酸类化合物(结构式如图 1所示),结果表明混合物样品得到了很好的分离,为此类具有一定极性与亲水能力的化合物的快速分离纯化提供了一种经济实用的解决方案。
等度纯化实验中的多次进样
制备液相色谱是目前药物开发中纯化化合物所选择的方法。大量粗品用通用方法得到纯化,采用短和快速梯度在约10分钟之内完成。虽然大部分化合物可以通过这些方法得到分离,但分离和纯化立体异构体或非对映异构体需要更长的运行时间,采用等度条件或非常平缓的梯度。在本应用报告中,我们报道了如何在一次运行中多次进样以提高样品产量,节省了宝贵的时间和流动相。
测定血清纯化所得的抗体药物偶联物的药物/抗体比率——应用自动亲和纯化、LC/MS 分析和新型 DAR 计算软件
抗体药物偶联物 (ADC) 是一类新兴生物治疗药物,旨在通过将药物与单克隆抗体相连实现靶向给药。与小分子药物不同,ADC 不是单分子实体,而是一类异质性的抗体,每种抗体所携带的药物数量以及经历的翻译后修饰都各不相同。药物/抗体比率 (DAR) 是指 ADC 偶联的药物的平均数量。DAR 是 ADC 开发过程中需要优化和密切监测的关键质量属性,因为它将影响疗效和毒性。由于药物的释放,在血液循环中 ADC 的 DAR 将随时间发生变化。因此,制定一套测定药代动力学 (PK) 研究样品中 ADC DAR 的稳定解决方案非常关键。要确定 ADC DAR,首先必须纯化血清中的 ADC,然后使用 LC/MS 对其进行分析。通常该工作流程中的样品前处理和数据分析环节需耗费大量人力,因此易受变异性和人为误差影响。本应用简报介绍了一种用于测定血清样品中 ADC DAR 的解决方案,该方案采用 Agilent AssayMAP Bravo 平台对 ADC 进行自动亲和纯化;将 Agilent 1290 Infinity UHPLC 与Agilent 6550 Q-TOF 质谱仪联用,用于采集准确的完整蛋白分子量数据;并利用 Agilent MassHunter BioConfirm 和 DAR 计算器软件确定 ADC 质量和 DAR。该工作流程可节省人力、降低变异性以及减少产生与 ADC DAR 测定相关的人为误差的可能性,而且仅需很少的工作量即可扩展样品处理量。
薄层色谱-质谱-Flash 纯化联用,实现合成过程中反应监控和智能快速纯化化
本应用指南中,我们演示了Advion和Interchim技术的结合是如何加快化合物的合成、纯化和鉴定的。应用中配备了Advion expression?质谱仪(CMS),Plate Express TLC薄层色谱质谱接口,ASAP大气压固体分析探头,以及Interchim puriFlash?XS520plus纯化系统。
抗体的纯化实验
抗体在亲和层析试剂中所占地位日趋重要,所以纯化抗体的方法也倍受关注。抗体通常是从血清、杂交瘤上清或腹水中获得的。尽管直接使用未纯化的抗体溶液可进行一些免疫学实验,但是要获得满意的结果最hao使用纯化的抗体,特别是用于亲和层析的抗体。实际上,纯化的抗体也适用于免疫检测、免疫印迹、酶联试验(ELISA)或细胞染色等。
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