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酿酒酵母培养物

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酿酒酵母培养物相关的论坛

  • 光谱学方法分析114种不同酿酒酵母的特性

    光谱学被广泛应用于生物科学,适用于液体、膏、粉末、薄膜、纤维、气体和表面分析。该方法可以用于制药、食品、植物或动物组织中蛋白质、多肽、血脂、膜状物和碳水化合物特性分析。同时,光谱学可提供分子结构的详细信息。海洋光学采用光谱学方法分析114种不同酿酒酵母的特性。在200-1200nm波长范围内,详细分析两大光谱范围:LWUV-VIS和VIS-SWNIR。收集的114个品种中,有用于酿酒、酝酿、烘烤等工业品种;也有从特定环境下获取的品种,如致病株、水果和橡树分泌物。结果表明,光谱学方法是一种用于不同酿酒酵母特性分析的强有力方法,根据不同品种特有的光谱特性,可以实现不同品种酿酒酵母的特性分析与辨别。

  • 向您介绍葡萄酿酒酵母CEC

    向您介绍葡萄酿酒酵母CEC 目前CEC系列酵母酿造的酒,已经多次在国内外各大赛事中获得金奖、大金奖,相信以后会有更多本土酵母酿制的酒在各大赛事中脱颖而出!

  • 毕氏酵母氯化锂转化法

    试剂1M LiCl 50% PEG3350 (氯化锂转化法只能PEG3350,不能用PEG8000,PEG3350在北京莱博生物有售,80元/100克)2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存注:醋酸锂对毕氏酵母无效,对酿酒酵母有效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用。感受态毕氏酵母的制备1. 接种Pachia pastoris到50ml YPD培养基中,30℃摇菌过夜(约24~28h)培养到OD值为0.8~1.0(约108 Cells/ml);培养基里有流沙样的菌体在流动2. 收获细胞,用25ml无菌水洗涤一次,室温下1500g离心10min;3. 重悬细胞于1ml 100mM LiCl溶液中,将悬液转入1.5ml离心管;4. 离心机最大速度离心15秒沉淀菌体,重悬菌体于400ul 100mM LiCl溶液中;5. 按50ul/管分装,立即进行转化;注:不要将感受态酵母菌冰浴;

  • 黑果酿酒方法?

    黑果酿酒方法? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 于江深????秋季,选择成熟的黑果,自己酿制黑果酒,乐趣很多.可按以下步骤:????1、黑果的分选:选择适宜酿酒的成熟黑果,摘除干粒、病害粒和受污染的黑果粒。????2、黑果的破碎:黑果摘粒除梗,并把黑果粒破碎,做到皮破籽不破,装入刷洗干净的容器(自酿可用盆、缸等不锈钢、塑料、陶瓷等容器,铁容器不行)。????3、自酿可利用黑果皮上的酵母,也可加入活性干酵母(按说明使用量和方法加入即可)。????4、加入酵母(或不加入酵母)后,每天要搅拌二次,上面的皮进入汁液中。并控制温度在16—25℃为宜。????5、黑果糖度低,必须在发酵时补加砂糖。(视黑果和成熟度加入糖,一般每10斤黑果加入1.8斤--2斤白砂糖,用黑果汁化开,加入白砂糖后使黑果浆的含糖量达到200-230克/升左右。)????6、发酵在控温16—25℃,每天搅拌二次的条件下,开口发酵6—10天。尝汁黑果基本不甜了,分离汁与皮渣。皮渣挤压出汁混入分离汁中,皮渣扔掉。????7、分离汁装入洗刷干净的小容器中(容器要求同上),盖上盖,留点空隙。放置低温、阴凉处(温度最好在20℃以下)。????8、静止一个月汁与底子(沉淀的酵母泥、果胶等物质分离),底子扔掉。汁即是16—25℃黑果原酒。????9、黑果原酒尽量装满容器,放置低温、阴凉处。自酿最好加一层杂味小的高度白酒压盖,防止黑果原酒变质。????10、黑果原酒最好进行一次冷冻处理,自酿黑果酒可以省略。这时可以根据自己的口味,不加任何物质或加适量冰糖、加白砂糖饮用。????????在自酿黑果酒中也可根据个人爱好加饮料、冰块或白酒调和饮用。美味不可多用呀!

  • 玫瑰果酿酒方法

    玫瑰果酿酒方法1、玫瑰果,保存维生素C的,方法,做果酒。2、发酵日期12天。3、压榨取汁行。温度22—27℃。4、果柄必须除掉。5、 搅拌用搅拌机快速,效率高,每日早晚搅拌10~20分钟。6、贮藏零下15℃果实5年,做果酒,品质无变化。7 、果实冷冻粉碎后,不许加水,加糖水即可。8 、发酵母,严格控制程序,可加果实粉碎方式。9、 酵母用国外的高质量水果发酵酵母。10 、不锈钢桶,罐。铁桶铺塑料,也可以发酵。

  • 酵母类型和连续发酵对经典酒类酵母类型和连续发酵对经典酒类参数的影响

    酵母类型和连续发酵对经典酒类酵母类型和连续发酵对经典酒类参数的影响酒精发酵结束时,所有连续的S的乙醇浓度在9.0到11.5% (v/v)之间,糖浓度低于2.0g.L-1。与不完全酒精发酵的纯培养物相比,接种P的样品完成发酵的时间最长,至少12天。对于其他NS酵母来说,7天就足以完成酒精发酵,而对于S纯培养物来说,则需要5天。与NS纯培养发酵相比,顺序发酵有助于增加乙醇浓度,但也减少了发酵时间。与S纯培养物相比,来自连续发酵的葡萄酒酒精含量的降低证实了NS酵母用于降低乙醇含量的效用。由于所有形式的葡萄汁和发酵条件都是相同的,使用代谢组学在最终葡萄酒成分和亮点中检测到的差异是由酵母的类型、酵母之间的相互作用和添加S的时间引起的。数的影响酒精发酵结束时,所有连续的S的乙醇浓度在9.0到11.5% (v/v)之间,糖浓度低于2.0g.L-1。与不完全酒精发酵的纯培养物相比,接种P的样品完成发酵的时间最长,至少12天。对于其他NS酵母来说,7天就足以完成酒精发酵,而对于S纯培养物来说,则需要5天。与NS纯培养发酵相比,顺序发酵有助于增加乙醇浓度,但也减少了发酵时间。与S纯培养物相比,来自连续发酵的葡萄酒酒精含量的降低证实了NS酵母用于降低乙醇含量的效用。由于所有形式的葡萄汁和发酵条件都是相同的,使用代谢组学在最终葡萄酒成分和亮点中检测到的差异是由酵母的类型、酵母之间的相互作用和添加S的时间引起的。

  • 二氧化碳传感器在酿酒厂中的应用分析

    二氧化碳传感器在酿酒厂中的应用分析

    [align=left]酿酒就是利用酵母菌在无氧条件下,做无氧呼吸,产生酒精。在发酵生产中,酿酒酵母有时处在高浓度的CO2环境下,而高浓度的CO2会影响酵母代谢,抑制酵母生长,造成发酵缓慢或停滞。[/align]另外,二氧化碳是一种无色无味的气体.二氧化碳的重量是空气的两倍,因此它会聚集沉到房间的底部,使得氧气减少,CO2极其危险,能以两种方式致人死亡:通过隔绝O2,导致人快速窒息;或本身作为一种有毒气体,人暴露在少量浓度为0.5%的CO2中,就会出现中毒的危险,而浓度超过10%可能会导致死亡。一般二氧化碳会在角落里或者是通风不好的区域里沉积。工采网了解到在酿酒厂中,酒在发酵的过程中会产生大量的二氧化碳,这些二氧化碳通常会聚集在集水坑和储槽,以及发酵室、桶窖和装瓶室等场所。如果员工长时间暴露在高浓度二氧化碳的环境中,身心健康肯定会受到影响的。[img=,334,296]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907161556437554_1270_3422752_3.png!w334x296.jpg[/img]因此,酿酒装置中安装非常有必要,可以通过二氧化碳传感器监测控制发酵过程,优化发酵工艺,提高酒的品质。 [color=#ffffff] CO2传感器mall.ofweek.com/123.html [/color] 比方说圣约翰,它是一个美丽的酿酒厂,位于北加利福尼亚州索诺玛山谷,自1973年以来一直在酿造优质葡萄酒。圣约翰城堡的安全委员会已经认识到有必要监测他们酿酒厂中的二氧化碳。两年多来,他们一直依靠便携式二氧化碳传感器检测仪来监测酿酒厂的二氧化碳含量。二氧化碳传感器是由他们公司内的另一个站点推荐的。使用便携式二氧化碳传感器测量仪确定不同区域中二氧化碳额浓度,然后在可能有潜在危险的地方安装了固定监控器,每一个监视器都是由他们的维护技术人员组装的。如果CO2浓度超过了设定的标准水平,二氧化碳检测仪将进入声、光报警模式。一般来说,在CO2浓度达到0.5%时,二氧化碳检测仪会预警;达到1-2%时,主报警器会被激活。大部分二氧化碳检测仪都带有报警阈值选择功能,以避免过于频繁的警报声响,并同时确保容器内工作人员的安全。[img=,330,306]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907161556435500_654_3422752_3.png!w330x306.jpg[/img]在便携式二氧化碳检测仪中起主要作用的核心元件其实是二氧化碳传感器,对传感器的要求是要低功耗,在此工采网推荐使用COZIR-LP型号的传感器:[b]GSS 微型[url=https://www.isweek.cn/category_145.html]二氧化碳传感器[/url]/CO2传感器 - COZIR-LP 概述:[/b]COZIR-LP是小体积,低功耗,高性能的 红外CO2传感器。2Hz 的工作频率只消耗 3mW, 由于他的功耗低,它非常适合电池供电和便携式设备。基于 IR LEDF 和检测 技术,创新的光学设计。COZIR-LP是 IR LED CO2 感应的第三代产品。 COZIR LP 的量程:0~2000ppm, 0~5000ppm, 0~1%,适用于HVAC、建筑控制和室内空气 质量监测。[b]二氧化碳传感器/CO2传感器COZIR-LP[/b]特点: 低耗,3mW 量程从0~1% 3.3V 供电 峰值电流只有 33mA 命令控制和与 COZIR 系列产品的接口兼容

  • 【信息】转基因酵母能进行多种糖分混合发酵

    据美国物理学家组织网12月27日报道,美国伊利诺伊大学香槟分校食品科学与人类营养系、加州大学劳伦斯伯克利国家实验室和英国石油公司(BP)的科学家表示,他们对酿酒酵母进行了基因改造,新得到的酵母菌株可以发酵葡萄糖、纤维二糖(葡萄糖的前体物,由两个结合在一起的葡萄糖组成)和木糖,能更好更多地把植物发酵成替代燃料乙醇。相关研究发表在最新一期的美国《国家科学院院刊》上。酵母以糖为生,并在这个过程中能产生很多对人来说是“宝物”的废物——乙醇和二氧化碳,因此生物燃料工业也使用酵母将植物糖转变为生物乙醇。然而,大多数酵母无法将植物中的葡萄糖、纤维二糖和木糖这三种糖全部转化成有用的燃料,比如,酿酒酵母能很好地发酵葡萄糖,但对木糖却有心无力,这使得利用酵母制造生物燃料的成本居高不下。之前,科学家对酵母菌种进行基因改造,让其代谢木糖,但速度很慢,效率过低。研究小组成员之一、伊利诺伊大学食品科学和人类营养学教授金泳恕(音译)表示,经过基因改造的酵母无法发酵木糖的主要问题是,它接触木糖之前会吸收所有葡萄糖,酵母表面的葡萄糖转运蛋白更愿意同葡萄糖依附在一起。在此项新研究中,基因改造后的酿酒酵母可以同时将纤维二糖和木糖转化为乙醇。转化效率和转化得到的乙醇数量都提高了一倍,这主要归结于混合发酵的协同作用。金泳恕表示,新酵母菌种将木糖转化为乙醇的效率至少比目前已知酵母菌高20%,使其成为最好的发酵木糖的细菌。研究团队通过对酿酒酵母做出几个关键的改进而获得了这样的结果。首先,他们给予这种酵母一个纤维二糖转运蛋白,这意味着其能将纤维二糖直接带入细胞中,而只有当纤维二糖进入到细胞内部时,它才会被转化为葡萄糖。这种方法可以战胜酿酒酵母本身对葡萄糖的偏好,从而专注于将木糖吸收进酵母细胞中。接着,研究人员将从一个消耗木糖的酵母中提取的3种蛋白质插入酿酒酵母中,由此提高了新酵母菌种代谢木糖的速度和效率。他们也对一种人造的同功酶进行了基因修改,让木糖代谢的正常中间产物木糖醇积聚的数量最少。最后,该研究团队使用“进化工程”让新菌种利用木糖的能力达到最大。研究人员表示,混合发酵的成本优势也很明显,其乙醇产量也高于工业标准,这种研究很快将被商业化。

  • 酵母培养基的制备

    一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。  学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。二、基本原理 麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。 三、实验材料 (一) 药品 葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、琼脂。   (二) 仪器 天平、高压蒸汽灭菌锅。   (三) 玻璃器皿 移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。   (四) 其他物品 药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。四、实验内容 (一) 麦芽汁培养基的配制 1.培养基成分 新鲜麦芽汁一般为10-15波林。 2.配制方法 (1) 用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。   (2) 取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。   (3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。   (4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。   (5) 如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。   (6) 分装、加塞、包扎。   (7) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 (二) 马铃薯葡萄糖培养基的配制1.培养基成分   马铃薯   20g   葡萄糖   2 g   琼脂    1.5-2g   水     100ml   自然pH  2.配制方法  (1) 配制20%马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml。80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20%马铃薯浸汁,贮存备用。   (2) 配制时,按每100 ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。   (3) 分装、加塞、包扎。   (4) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 (三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制 1.培养基成分   黄豆芽   10g   葡萄糖   5g   琼脂    1.5-2g   水     100ml   自然pH   2.配制方法  (1) 称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成10%豆芽汁。   (2) 配制时,按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继续加热融化,补足失水。   (3) 分装、加塞、包扎。   (4) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。(四)察氏(czapck)培养基的配制1.培养基成分   蔗糖       3g   NaN03     0.3g   K2HP04     0.1g   KCl        0.05g   MgSO4·7H2O  0.05 g   FeS04      0.001 g   琼脂      1.5-2g   蒸馏水     100ml   自然pH   2.配制方法  (1) 称量及溶化 量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培养基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。   (2) 定容 候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。   (3) 加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。   (4) 分装、加塞、包扎。   (5) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。

  • 请你选用酿造高酒精度酵母菌

    CR1酵母,酿造高酒精度葡萄酒,低温发酵启动,在不掩盖水果香气的同时,可提供高酒精度![img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/03/202203141516532630_7047_1642069_3.png[/img]

  • 【资料】酵母菌:发酵之旅

    我们平常所吃的馒头、面包,都是面经过发酵而制成的,它们蓬松有弹性,口感很好,还带有特殊的香味。而用来发酵的无论是从前的酵头,还是现在的发酵粉,其实都是添加剂酵母菌。现在酵母菌的作用已经不仅仅只停留在发酵作用上了,由于其独特的品性,酵母菌的用途也越来越广,成为一种多功能的食品添加剂。 酵母菌功用之一发酵 发酵是酵母菌最主要的功用。人类很早就开始将酵母菌应用于食品生产中,例如酒精饮料、酱油、食醋、馒头和面包的发酵等等。在面包和馒头的生产中,酵母发酵产生大量二氧化碳.使面团膨胀,形成松软的组织。 在食品工业上常见的酵母菌有啤酒酵母,用于生产啤酒、白酒和酒精,以及制做面包;葡萄酒酵母,也称酿酒酵母,用于酿造葡萄酒和果酒,也用于啤酒和白酒的酿造。其中啤酒酵母是食品工业上应用最为广泛的微生物之一,啤酒酵母菌体内维生素、蛋白质含量很高,其药用价值也很高,还可以用于做饲料,提取核酸、麦角醇、谷胱甘肽、凝血质和三磷酸腺苷等。

  • 【原创】瓶装葡萄酒中酵母菌的检查方法

    葡萄酒在瓶装时,必须认真考虑葡萄酒是否已经达到了除菌、灭菌的目的。为了准确达到这个目的,就要对瓶装的葡萄酒进行快速而可靠的检验。这里列举了3个检查方法,仅供同行朋友们在实际生产中,根据企业的实际条件进行参考。  一、格森海姆(Geisenheimer)检定法  将被检验的葡萄酒在无菌的条件下,接入与其等量的葡萄汁,便为酵母提供了良好的繁殖条件,酵母开始快速繁殖和发酵。酵母繁殖的速度和发酵的强度,是衡量被检样品染菌的程度。  具体操作如下:  取标准试管3支,分别注入10mL葡萄汁,并加棉塞封口,置于高压灭菌锅中灭菌;将吸管用纸包好,并在160℃下灭菌。然后小心的拔除葡萄酒瓶的软木塞,立即用火焰将瓶口附着的微生物灭除,再用无菌吸管从瓶底吸出10mL被检葡萄酒,移入已灭菌葡萄汁的试管内,每份样品做平行样3支。  若被检的样品活酵母较多,在3—5天内即可检定其发酵度;若酵母较少,发酵需要两倍于此的时间,由此可断定生产线是否处于受控状态,断定瓶装酒出厂后是否会发生浑浊等质量事故。  这个方法十分简便,不需要特别的仪器,对小型葡萄酒厂十分适用,这是其优点。缺点是只能检定出葡萄酒中是否存在酵母菌,无法进行定量分析。  二、薄膜过滤法  借助于不同孔径的过滤片(孔径一般为2微米以下),在无菌条件下过滤被检葡萄酒,分离出酵母及其它微生物,然后对滤片上的微生物进行生长培养,计算出现的菌落数,并进行其它各项必要的检查。  操作方法如下:  将所有参与过滤的仪器、器皿进行彻底消毒,在无菌的条件下进行过滤等操作。在每次分析之前,将过滤器及过滤片置于高压锅内灭菌,用经火焰烧过的镊子取已灭菌的过滤片放入过滤器中。  被检瓶酒在开启前,必须仔细用75%酒精擦拭瓶口,小心地拔除软木塞,勿使开瓶刀穿通软木塞。  开始时先将软木塞拔出四分之三,然后用手轻轻取下软木塞,瓶口在倒酒前先用火焰烧一下,再将葡萄酒一点一点地倒入过滤漏斗中。  过滤结束后,用火焰烧过的镊子在漏斗内取出滤片,置于培养皿中,并摆放平整,倒入适量的酵母培养基(约3mL),然后标明日期和试样编号,置于生物培养箱内,在25℃下培养3—5天。为避免凝结水影响菌落生长,将培养皿反扣于培养箱内。若过滤片上的酵母菌是活的,酵母即进行繁殖,在培养基上会出现菌落。  如果未发现菌落生长,说明被检的葡萄酒是稳定的,不会出现酵母菌引起的浑浊;如果每瓶样有5个以上的菌落出现,说明葡萄酒的除菌或杀菌操作不彻底,葡萄酒有不稳定的因素,应该严格检查生产过程中的每个环节,直到查出原因为止。  这一方法能对瓶装酒内各种微生物进行定量检定,但需要选择适当孔径的滤片和培养基,并由掌握基本微生物学的熟练人员操作。  三、快速检定法  薄膜过滤法可以用显微镜对滤片做仔细检查,迅速检出活酵母;快速检定法则可将死的和活的微生物区别开来,但要求瓶装酒内必须不含其他悬浮物。  在适宜的温度下,于8—14小时内,具有繁殖能力的菌体生长成为微小的菌落,用显微镜观察,可将死的、没有繁殖能力的菌落区别开来。活菌体在培养时会形成小的菌落,死菌体只有单个的存在。

  • 自酿葡萄酒,风险有几何?

    近日,一则新闻报道称,来自湖南的张先生饮用自家酿造的葡萄酒而导致甲醇中毒入院,由此引发了人们对自酿葡萄酒安全性的关注。葡萄酒中为什么会含有甲醇?自酿葡萄酒的风险又会有多大呢?葡萄酒中为什么有甲醇? 与直觉相反的是,甲醇并不是葡萄汁发酵得到的,甲醇实际上来源于植物组织本身。对于葡萄果实来说,其细胞壁上含有大量的果胶,它与纤维素、半纤维素、木质素等分子交联构成细胞组织的支撑结构。果胶的本质是半乳糖醛酸聚糖,其侧链可被酯化。在果胶酶存在的情况下,酯化的果胶就可以产生甲醇。甲醇的产生主要与葡萄的皮与籽部分有关,因此在连皮发酵的红葡萄酒中,甲醇的含量也会更高一点。 甲醇来源于植物组织,因此在酿造过程中很难完全避免。不过,在工业生产中通过工艺控制可以较好地限制甲醇的产生量。在大规模的葡萄酒生产中,为了提高出汁率以及方便澄清,会添加外源的果胶酶来分解果胶。这些外源的果胶水解酶本身并不导致甲醇的生成,从总体上来说就降低了酒中甲醇的含量。对原料的筛选,以及对发酵条件的严格控制,都可以避免产生过多的甲醇。此外,在红葡萄酒的酿造中,适当减少连皮发酵的时间也可以降低酒中甲醇的含量。工业生产的葡萄酒中甲醇的含量约为60-150毫克/升,根据国际葡萄与葡萄酒组织(OIV)的标准(Oeno 19/2004,葡萄酒中不同物质的最大检出值,国标规定与其相符),红葡萄酒与白/桃红葡萄酒中的甲醇含量上限分别是400毫克/升和250毫克/升,甲醇含量低于此标准的葡萄酒可以认为是安全的。 至于自酿葡萄酒,由于原料和酿造方式千差万别,因此很难断定其中的甲醇含量究竟会有多少。不过,相比工业生产,家庭自制确实存在更多甲醇超标的风险。一般来说,如果采用新鲜、质量好的葡萄酿酒,并且酿造方法得当,葡萄酒中的甲醇含量并不至于超过上述限量标准。然而,当原料出现霉烂,或者在过热的条件下酿造时,就有可能出现甲醇超标的情况。由于家庭酿造缺乏检测条件,酒中的甲醇又不容易通过感官特征来分辨,因此自酿酒中即使甲醇含量过高也难以察觉,由此就有可能带来健康风险。自酿酒,小心杂菌污染 自酿葡萄酒在原料、酿造条件控制不佳时,确实可能带来种种安全风险。与甲醇超标相比,杂菌污染导致的有毒物质积累是更常出现的问题。 我们人类觉得可口美味的东西,微生物也同样喜欢。葡萄果实中大量的葡萄糖为酵母提供了适宜的营养来源,同时也为其他杂菌提供了良好的生存条件。 在工业化生产中,需要通过多种手段来对杂菌进行抑制。通常,我们会通过添加二氧化硫的水溶液来对葡萄汁进行消毒处理。值得一提的是,葡萄表皮上的白霜里面虽然含有天然酵母,但在工业生产中并不使用这些天然酵母来进行发酵。这些天然酵母并不一定符合生产的要求,甚至会产生不良的味道,此外白霜上也会含有其他的杂菌,对酒产生污染。所以,在发酵之前会对葡萄汁进行杀菌处理。这一步由于添加了二氧化硫,其本身也使得葡萄细胞里面的果胶酶失活,进一步减少了甲醇的生成。灭菌后的葡萄汁被装入发酵罐中,并添加上人工培养的酿酒酵母。在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,杂菌的生长也会受到抑制,从而保证葡萄酒的安全。 但是,对于自酿葡萄酒来说,一般很难达到这样的卫生条件。自酿葡萄酒较少对容器或者葡萄汁本身进行消毒,杂菌容易残留。另外,相比工业生产中使用的酿酒酵母,家庭酿酒所使用的酵母品种不一定能耐受较高浓度的酒精,因此最终得到的葡萄酒酒精度也可能不够高,不足以抑制杂菌生长,这也增加了成品酒变质的风险。另外,对于自酿葡萄酒来说,发酵容器的选择也是一个问题。在家制作发酵食品,最有效的预防杂菌污染的方法就是密封,然而葡萄酒在酿造的过程中会产生大量二氧化碳,中途必须要打开容器进行放气处理,这也会导致杂菌进入到葡萄汁里面,增加安全风险。 在酒的品质和安全性方面,自酿葡萄酒其实都没有优势。自酿葡萄酒往往采用的都是鲜食葡萄,与专门的酿酒葡萄相比,它们的表皮多酚类物质比例并不高,酿成酒在风味上也会打折扣。此外,鲜食葡萄的糖分也难以达到酿酒葡萄的水平,为了达到一定的酒精度,就只能依靠额外添加糖。如果是为了追求“保健效果”,选择自制葡萄酒也不值得。葡萄酒本身的保健效果就缺乏足够证据支持,而且在使用鲜食葡萄制成的自酿酒中,可能对健康有益的抗氧化成分也会更少自酿葡萄酒要注意什么? 如果只是为了得到好喝的葡萄酒,自己在家制作并不算值得,还可能要承担更多的健康风险。不过,毕竟还是有不少人希望能享受自己动手的乐趣。如果你确实想自己在家酿制葡萄酒,一定要注意以下几点:●挑选无破损、无霉变的原材料,尽量采用新鲜的葡萄。●操作过程保证卫生干净。尽量对容器和操作工具进行消毒。●发酵环境控温,不要将容器置于过热的地方(红葡萄酒适宜的发酵温度为28-32℃,白葡萄酒发酵温度为20℃左右)。 当然,对健康而言,控制饮酒量也是非常重要的。

  • 酿出优质葡萄酒是酿酒师的责任和使命

    [align=center][font=微软雅黑]“酿酒师这个职业的最大特点是,必须耐得住性子,最忌讳急功近利。没有任何捷径可走。”这是自己的工作,对于职业的尊重与自信自然而然地流露出来。[/font][/align][font=微软雅黑] 成为一名优秀的酿酒师,我认为,对于酿造,理论上学透了,还要在长期的生产实践中不断摸索和总结。该坚持的一定要坚持,不能轻易被外界诱惑。“不忘初心 方得始终”,又要与时俱进,善于学习,培养出敏锐的感知力,最终形成自己的风格特点。 [/font][font=微软雅黑] 现在一提起葡萄酒,有人认为是“小资情调”,可我认为葡萄酒是大众消费。“葡萄酒是一种营养丰富、适合各种场合消费的饮品,但决不是‘奢侈品’,葡萄酒适合大众消费,才是她最终的归属,所以有人会说,喝红酒是一种生活态度,用优雅精致、情趣格调,来应对粗粝的生活。这也是一名酿酒师的责任。”[/font][font=微软雅黑] [/font][font=微软雅黑][font=微软雅黑]  对于目前人们对国产葡萄酒褒贬不一的态度,我认为,从上世纪[/font]90年代中期兴起的红酒热算起,我国葡萄酒产业经历了高速发展的20年。从目前来看,与酿酒师队伍建设,酿造工艺设备和技术水平相比,葡萄的栽培、种植等则是当前我国葡萄酒产业发展的弱项。”我认为,要想做出中国的特色产品、高端产品,首先应该根据各产区特点,加强葡萄园建设,也要多向先进国家学习成功的理念和方法,因地制宜的应用在自己的基地建设中去,力争做出世界级的好酒,是当代酿酒师的责任与使命。[/font]

  • 食品中霉菌酵母菌检测用什么培养基好

    食品中霉菌酵母菌的检测依据国标4789.15有两种培养基,用孟加拉红好还是马铃薯-葡萄糖培养基好?有什么区别?[img]http://img.foodmate.net/bbs/static/image/smiley/default/sweat.gif[/img]

  • 分析自酿葡萄酒

    随着我国生活水平的不断提升,葡萄酒,已经被越来越多的人所喜爱,从逢年过节的奢侈品,已逐渐走进寻常百姓家。一部分人群,甚至已经用葡萄酒取代了白酒和啤酒,可是近年来,各种假酒曝光事件,使消费者对葡萄酒又爱又恨。许多人本着自己动手丰衣足食的信念,开始自酿葡萄酒。自酿葡萄酒有这样一些优点:[b]首先不会像造假者使用大量添加剂,危害身体健康。[/b]其次,自己购买葡萄酿酒价格低廉。[b]而且在酿酒的同时也是一个娱乐的过程。[/b]因为愿意自酿葡萄酒的人,肯定是喜欢这个过程的。但是,随着自酿葡萄酒人群的增加,随之而来的,又出现了各种各样自酿葡萄酒出现的问题。人们发现,[b]原来自酿葡萄酒也会出现质量问题[/b],腹泻、头疼、甚至更严重的食物中毒频频发生。那么,到底是什么原因,居然让我们自己买的新鲜葡萄,在不添加任何添加剂的情况下,出现如此多的质量问题呢?下面我们就来介绍一下自酿葡萄酒容易出现的问题,和对应的解决方法。我身边就有许多亲朋好友曾经自己动手自酿葡萄酒,有时候会问我一些问题,我一般也会简单的问问他们的自酿过程。有些问题说出来简直让我哭笑不得。为了更好的介绍自酿葡萄酒,我们先来简单的了解一下,[b]什么是葡萄酒?[/b]因为是给对葡萄酒完全不了解或了解非常少的朋友们介绍,所以我们暂时不使用特别专业的词汇和用语,只为了能够讲的更简单易懂。[b]葡萄酒是什么?葡萄酒是用新鲜的葡萄或者葡萄汁(葡萄挤出汁后皮渣可以直接扔掉)经过酒精发酵,产生的含有一定酒精度数的饮料。[/b]如果不再采用其他手段再处理的话,一般来说酒精度不会超过20度。[b]为什么不能超过20度呢?[/b]这就要了解什么是酒精发酵,[b]酒精发酵就是酿酒酵母把葡萄或葡萄汁中的糖转化成酒精的过程[/b],说的稍微粗俗一点,就是酵母把糖吃进去,把酒精拉出来,呵呵,这样说来,我们喝的就是酵母的排泄物。我们都知道,酒精是有杀菌作用的,而酵母本身就属于菌类物质,所以酵母在发酵的同时,也制造出了对自身有害的产物——酒精。专业的酿酒酵母都是经过人工培育的,一般会有较强的耐酒精能力,但即便如此,也很难在超过20度酒精的环境中生长存活,所以,这就是为什么发酵酒不会超过20度的原因,如果是野生的天然酵母,未经过人工培育,则15度都很难达到。 通过上面的介绍,我们知道葡萄酒的两个关键点,首先是葡萄,这一点不需要过多解释,顾名思义,[b]葡萄酒自然是葡萄制成的。然后就是发酵,葡萄必须经过酒精发酵才能叫做葡萄酒。[/b]如果是葡萄汁[b]加上酒精[/b]就不能叫做葡萄酒,而只能叫[b]配制酒[/b]。然而现实中一些自酿爱好者是怎样制作葡萄酒的呢?不只一位朋友对我说过他们的自酿过程:从市场买回葡萄——清洗葡萄——除梗或不除梗——放入容器([b]有的用铝锅,有的用铁桶[/b])——加入砂糖或冰糖——[b]封闭容器[/b]——封闭条件下静置一个月甚至更长时间(有一位朋友居然就这样放置了半年问我还能不能喝)——分离皮渣——容器贮存(有用锅的,有用陶瓷坛子的)。

  • 酿酒匠人酿酒师

    培训酿酒技术的学员圆满完成了本期学业,祝福这些酿酒匠人。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306302037208296_7665_1642069_3.png[/img]

  • 【第三届原创参赛】啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究

    【第三届原创参赛】啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究

    维权声明:本文为gl19860312原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。 本实验室主要工作就是:微生物发酵与代谢调控 、蛋白的分离纯化 、生物材料的研发与生产( 化妆品 、面膜、人工血管 、人工骨................)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/12/201012061858_264950_2019107_3.jpg啤酒酵母细胞自溶技术破壁研究摘要:研究了PH、温度、食盐浓度三个因素对啤酒酵母细胞破壁的影响,确定出最佳的自溶法破壁条件 。进而为分离啤酒废酵母中的有效活性成分奠定了基础。关键词:啤酒酵母;破壁;自溶The Research of Autolysis on the Beer Yeast Cells wallAbstract:This paper researched the condition of autolysis on the waste yeast cells wall with three factors (pH 、Temperature 、Salt density) and determined the best condition based on autolysis. And build basis for separating the activity forms from beer waste yeasts.Key words: The beer yeast; Breaking Cells wall; Autolysis引言啤酒酵母(S.csrsviside)属于真菌门酵母属,多数为单细胞微生物,细胞呈圆形或卵圆形,革兰氏染色呈阳性G+。啤酒酵母细胞是由细胞壁、细胞膜、液泡、颗粒和线粒体等部分组成,细胞年幼的时候细胞壁很薄,所以不明显;细胞年老时,细胞壁较厚。啤酒酵母细胞内不但含有丰富的蛋白质、维生素、葡聚糖及甘露聚糖等营养及保健成分,可作为食用单细胞蛋白,此外还含有辅酶I、细胞色素,卵磷脂、RNA,,这些物质或其降解产物及衍生物如氨基酸制剂和核苷酸及核酸制剂等在生物化学、医药及保健食品中最有重要的作用。由于啤酒废酵母价格便宜,因此可利用啤酒废酵母来提取、制备这些物质。啤酒废酵母(waste brewer's yeast)是啤酒生产的副产物,是指啤酒酿造后沉降的酵母泥,主要是由大量的弱细胞和死细胞组成。在啤酒生产过程中,每生产 100吨啤酒大约有1-1.5吨废酵母 (以干重计)产生。传统的处理方法,是弃置不用或作为饲料处理,直接排放到河流湖泊中,将造成环境污染,同时也是对财富的浪费;因其具有坚韧的细胞壁和特有的酵母臭,适口性差,不易消化和吸收,故烘干作为饲料用的经济效益不高。充分利用啤酒废酵母可以有效地减轻污染,实现资源的二次转化,也可产生巨大的经济效益,如开发酵母抽提物。 为了增加酵母抽提物产量国内外同行做出不同努力,开展了有些研究。目前关于啤酒酵母破壁的研究很多,大体可归纳为:化学破壁(酸解、碱解)、物理破壁(液体剪 切、固体剪切等)、生物破壁(酶解、自溶)。其中,化学破壁不仅会造成一些营养成分的破坏,而且为有效成分的提取增加困难;物理破壁虽然方法简单、成本低,能完好保存营养成分,但其破壁效果较差;生物破壁中的酶解法会增加提取成本,故均不能大规模广泛的应用。而采用自溶法进行细胞破壁是一种简便易行的操作过程,通过确定啤酒酵母细胞最适合的自溶条件,可以建立一套利用酵母细胞生产酵母抽提物的工艺和方法,旨在为啤酒酵母的综合利用寻求一种新的方法,为工业化生产提供理论基础和实践指导。1.4实验方法 工艺流程 啤酒废酵母(保藏)—— 活化、两次斜面培养—— 接种、平板划线——摇瓶培养——取对数期的酵母细胞——做稀释梯度——做影响因素(温度、食盐浓度、pH并固定时间60分钟)的实验-——做正交试验——镜检(血球计数法)——计算啤酒酵母细胞的破碎率——得到自溶的最佳工艺参数1.5啤酒废酵母自溶条件的确定酵母自溶的实质是酵母细胞内的蛋白质在自身蛋白酶的作用下,降解为游离的氨基酸,那么,一切影响酶促反应的因素均影响酵母细胞的自溶,如自溶温度、食盐浓度、pH值、自溶时间等。自溶法是以存在酶活性的新鲜活酵母为原料,利用酵母细胞本身的酶系,在一定条件下,将酵母体内的糖类物质、蛋白质和核酸分解为还原糖、氨基酸、肤类、核昔酸等小分子物质并从酵母细胞内抽提出来的一种方法。利用自溶法生产的酵母抽提物,蛋白质分解率高,游离氨基酸含量高,风味好,成本较低,但呈味核昔酸含量低.目前,欧美及我国所生产的酵母抽提物绝大部分都是采用这种方法。[font=仿宋_GB2

  • 北冰红葡萄是酿酒的适宜品种

    北冰红葡萄是国内最新命名并推出的适宜酿酒葡萄新品种,具有抗寒丰产等特点,不仅适于大面积的生产果实,也是良好的观赏植物,发展前景广阔。针对该品种栽培技术进行的研究结果表明,北冰红栽培适宜架式为小棚架,适宜行距 2.5~3.0 m,株距 0.6~0.75 m;树形宜用独龙干形,冬剪以短梢修剪为主,生长季注意培养预备枝,及时进行摘心和 副梢 处理;亩产量 1 700 kg 左右;重点防治霜霉病,以农业防治为主,避免和减少使用有毒农药,以生产无公害果实。

  • 酵母抽提物的应用领域

    目前酵母抽提物应用最多的是食品加工业和生物培养基,在方便面料包、鸡精粉、酱油、肉制品、食用香精等产品中,酵母抽提物已经得到了较好的应用推广;在膨化食品、饼干糕点等产品中的应用也有出现。 我想知道它可以在营养功能食品,如针对特殊人群的低脂,降血糖食品中使用吗?

  • 关于酵母抽提物

    [b][color=#646464][color=#1a1a1a]酵母抽提物,英文Yeast Extract,简称YE。[/color][/color][/b][color=#1a1a1a]酵母抽提物可以说是食物风味诱惑的原动力,让吃货们欲罢不能的味道,很多时候其实是YE在起作用。[/color][color=#1a1a1a][color=#1a1a1a]对于食品工业生产和餐饮门店,是非常熟悉的。家庭厨房中一般不会见到,其实他是隐藏的。[color=#1a1a1a]回家看看家里酱油瓶子的配料表上,不管是老抽、生抽、味极鲜,都能看到他的名字。[/color][/color][/color][color=#1a1a1a]它的神奇之处,在于包含了人体可直接吸收利用的可溶性营养及风味物质的浓缩物,[color=#1a1a1a]如20种氨基酸和多肽、核苷酸、维生素、有机酸和矿物质等等。[color=#1a1a1a]复杂成分带来多种丰富而饱满的味道。[/color][/color][/color][color=#1a1a1a]家用时,假如手抖放多了,除了味道太重,也没别的危害。[color=#1a1a1a]而且素食者也可以用,是难得的同时营养、调味和保健三大功能的食品调味料。[/color][/color][color=#1a1a1a]酵母抽提物的原料是啤酒酵母、葡萄酒酵母和面包酵母为原料。[color=#1a1a1a]主流产品是啤酒酵母,很大一部分产量是啤酒酿造的副产品。[color=#1a1a1a]这个以前是当做废弃物的,后来发现这个宝贝的味道太浓郁,再稍作加工大有可为。[/color][/color][/color]

  • 酸洗玻璃珠法提取酵母总蛋白相关

    请教各位大神,酸洗玻璃珠acid-washed glass beads与 un-washed glass beads 未洗玻璃珠有什么区别???玻璃珠法碎裂酿酒酵母,加入的buffer含有什么?两分别是多少?有没有配料表啊亲们???

  • 进入秋季最佳酿酒发酵季

    8月23日全国各地的天气预报,除部分地区的最高温度达到35°C外,大部分地区的最高温度在30°C左右,最低温度在22-25°C,即将(或已经)进入秋季最佳酿酒发酵季。

  • 高生产率和高密度发酵

    生物技术研究者追求的两个主要目标,一是新型生物产品的开发,另一就是为传统的或新生生物产品,寻求更经济的生产方式。近十年来,利用遗传工程技术来生产一些重要的生物药物,是生物技术领域中迅速发展的一个重要方向。在这一研究领域里,如何创造更经济、更有效的方法,来提高生产过程的经济性和产品的市场竞争力,已经成为生物技术领域的科学家们所关注的焦点问题。利用重组DNA技术生产重要的生物药物,在人类文明史上具有划时代的意义。由于生产成本和生产率的高低直接影响公司的生存,重组生物药物生产过程的优化已经成为一个重要问题。它包括以下六个方面∶(1)适宜宿主的选择;(2)重组蛋白积累位点(如可溶的胞内积累、胞内聚合积累、周质积累或胞外积累)的确定;(3)重组基因最大表达的分子策略;(4)细胞生长和生产环境的优化;(5)发酵条件的优化;后处理过程的优化。只有这六个方面都以实现高生产率为目标,整个生产过程的最优化才能实现。(一)细胞生长环境的优化策略要提高细胞密度和生产率,首先需要对微生物生长的物理和化学环境进行优化,包括生长培养基的组成,培养物理参数(pH、温度和搅拌)及产物诱导条件。优化这些参数的目的在于保证细胞生长处于最适的环境条件之下,避免营养物过量或不足、防止产物降解以及减少有毒产物的形成。1.培养基组成的优化培养基中通常含有碳(能)源、氮源,以及微营养物如维生素和微量元素,这些营养物的浓度与比例,对实现生产重组微生物的高密度发酵是很重要的。例如,过量的Fe2+和CaCO3与相对低浓度的磷酸盐可促进黄曲霉生产L-苹果酸;链霉菌在60~80 mmol/L CO32-存在下,其丝氨酸蛋白酶生产能力可提高10倍之多;在重组微生物达到高细胞密度后,限制磷酸盐浓度可使抗生素和异源白介素b的产率显著提高。此外还发现,限制精氨酸的浓度虽然会抑制细胞的生长,但比起精氨酸充足时细胞生长优良的情况,其重组a-淀粉酶的产量可提高2倍。培养基中复合氮源的种类对重组大肠杆菌的高密度发酵也非常重要。一般地,当流加培养基中含有酵母膏时,重组蛋白不稳定;而当流加培养基中含有蛋白胨时,大肠杆菌不能再利用其所产生的乙酸。将酵母膏和蛋白胨都加入流加培养基中,不但所生产的重组蛋白非常稳定,细胞还能再利用代谢合成的乙酸,这是一种非常有趣的代谢机制。恒化技术可用于优化精氨酸营养缺陷型大肠杆菌X90的生长培养基。使该菌株以0.4 h-1的比生长速率在含精氨酸的基本培养基上生长,待培养达到稳定状态后,在恒化器内分别加入氨基酸、维生素和微量元素来考察这些物质对菌体生长和精氨酸合成的影响。结果表明,由于氨基酸生物合成途径的末端产物抑制作用,加入某些氨基酸后,细胞生长反而受到抑制。加入NH4Cl后细胞量则出现了戏剧性的增长。而添加维生素对菌体生长基本上没有任何影响。通过计算生物量对每种基质的产率,最终可以确定高密度发酵培养基的组成,在此优化培养基上,大肠杆菌X90细胞密度可达到92 g/L,同时形成56 mg/L的胞外重组蛋白酶。2.特殊营养物的添加在某些情况下,向培养基中添加一些营养物质能提高生产率。这些营养物的作用有可能是作为产物的前体,也有可能是阻止产物的降解,例如,在培养重组大肠杆菌生产氯霉素乙酰转移酶(一种由许多芳香族氨基酸组成的蛋白)时添加苯丙氨酸,可将酶的比活力提高大约2倍;在培养重组枯草芽孢杆菌生产b-内酰胺酶的培养基中添加60 g/L的葡萄糖和100 mmol/L的磷酸钾能使重组蛋白的稳定性显著提高。其原因可能是由于宿主细胞产生的多种胞外蛋白酶的活性被抑制,从而防止了重组蛋白的降解。在生长培养基中添加特殊物质有时还能以一种未知的机制提高生产率。例如,在摇瓶培养Micromonospora cbersina时添加碘化钠可使dynemicin A的产量提高35倍,但在小型反应器中却无法重复这一结果。3.限制代谢副产物的积累培养条件的控制对代谢副产物的形成影响甚大。在分批或流加培养中,某些营养物的浓度过高均会导致Crabtree效应的产生。在这种效应下,酿酒酵母会产生乙醇,大肠杆菌则会产生过量乙酸,一旦生成乙酸,细胞生长及重组蛋白的生产均会受到抑制。大肠杆菌形成乙酸的速度依赖于细胞的生长速度和培养基的组成。业已确证,如果在培养基中添加复合营养物(如大豆水解物),则会增加乙酸的积累量。针对如何减轻由于乙酸积累而产生的负面影响,众多研究者进行了大量工作,如利用循环发酵技术来限制乙酸在重组大肠杆菌高密度培养中的积累。近来也有研究表明,添加某些氨基酸能减轻乙酸的抑制作用。如在培养基中添加10 mg/L的甘氨酸能显著促进大肠杆菌合成重组a-淀粉酶和b-内酰胺酶,并能刺激酶从周质向培养基中释放,但此时仍有乙酸伴随生成。(二)培养模式由于许多营养物在高浓度下对细胞有抑制作用,而为了达到高细胞密度,又必须供给大量的营养物质,因此,浓缩营养物必须以与其消耗速率成比例的速度加入反应器中。为此产生了多种形式的补料策略,它可以简单到线性补料,也可以复杂到利用数学模型计算得出的策略来控制补料速率。具体来说,培养模式的选择主要依赖于以下三个因素∶(1)所培养细胞的具体代谢行为;(2)利用抑制性底物合成目的产物的潜力;(3)诱导条件以及测量细胞培养各项参数的能力。1.大肠杆菌流加发酵策略大肠杆菌是迄今为止遗传背景最清楚的菌株,广泛用于基因工程的研究中。大肠杆菌高密度培养时最关键的问题是如何尽量减少乙酸的产生,因为高浓度葡萄糖或高比生长速率带来的高浓度乙酸会严重抑制细胞生长和重组蛋白的生产。研究发现,即使葡萄糖浓度只有0.25~0.5 g/L,大肠杆菌仍会产生乙酸。因此,高细胞密度发酵所采用的流加策略必须按照一定的算法制定,以保持反应器中底物浓度处于较低的水平。营养物最好以它们的消耗速率加入反应器中,这样不仅可以防止底物积累到毒性水平,也不会使细胞处于饥饿状态。近年来已经报道了多种控制大肠杆菌流加培养中流加速率的方法,其中大多数是将流加速率与一种物理参数间接耦合(如溶氧、pH或CO2释放速率)。有学者将溶氧控制在一个预定值上以保证较低的生长速率,结果乙酸产生很少,最终细胞干重达到110 g/L,并发现较低的比生长速率还有利于重组蛋白的高表达。在另一个控制低比生长速率的高细胞密度培养中,研究者采用先指数流加葡萄糖、铵盐和无机盐,后采用广义线性流加的培养策略,有效地防止了乙酸的积累,重组大肠杆菌的细胞密度达到66 g/L,通过温度诱导可在胞内形成19.2 g/L的活性重组蛋白。如果将葡萄糖浓度控制在一个不致于产生毒性的足够低的水平上,也可以使细胞在不存在限制性基质的情况下迅速生长到高细胞密度。这种控制策略对仪器的要求较高。Kleman等采用在线葡萄糖分析仪,以微生物对葡萄糖的需求来决定葡萄糖和其它营养物的流加速率,这一算法能够在产物诱导阶段中根据细胞生长的变化自动调整流加速率。培养携带质粒的大肠杆菌 MV1190,其质粒中带有编码1,5-二磷酸核酮糖羧化酶的基因,最终细胞干重达到39 g/L,产生1.7 g/L可溶的活性蛋白。2.重组酵母的流加发酵酵母中广泛用于遗传工程研究的菌株是酿酒酵母。但采用酿酒酵母作为重组宿主也有以下缺点∶(1)重组蛋白生产的水平较低;(2)质粒不稳定;(3)生成乙醇。其中生成乙醇是研究者最不希望出现的,因为这会抑制重组蛋白的形成。近来研究表明,其它酵母,如巴斯德毕赤氏酵母也具有作为重组宿主的潜力。Clare等比较了重组巴斯德毕赤氏酵母和酿酒酵母在高细胞密度状态下表达和分泌鼠表皮生长因子的能力。培养每基因组含有19个拷贝数的巴斯德毕赤氏酵母,最终可获得447 mg/L胞内重组蛋白;而培养酿酒酵母所获得的最高水平仅6~7 mg/L。通过先指数流加,后采用基于CO2释放和RQ值的线性流加控制方式可使重组巴斯德毕赤氏酵母的细胞干重达到80~90 g/L,并分泌高水平的重组人血清蛋白。而培养酿酒酵母,细胞干重和重组蛋白的产量仅分别为25 g/L和20 mg/L。即使将酿酒酵母的生长速率维持在0.12~0.18 h-1,也将形成10~13 g/L的乙醇,因而导致产率降低。但酿酒酵母产乙醇也并不是不可控制的。Shimizu等采用一个复杂的流加系统,将酵母的生长速率控制在0.3 h-1,可使谷胱甘肽(GSH)的生产最大而乙醇的生成最小。3.流加培养的控制一个好的流加控制系统必须避免两种倾向∶一是流加过量,补料组分在反应器中积累从而对细胞生长和产物形成产生抑制;二是流加不足,这可能会导致细胞必需营养物的缺乏。计算机技术的迅猛发展,为流加培养的控制提供了更有效的手段。近年来,应用计算机技术来监测和控制发酵过程的研究屡见报道。由于现代计算机技术的帮助,人们能够采用多种生长参数和数学模型来控制流加培养中营养物的添加,从而使复杂的控制系统得以实现。在各种人工智能技术中,模糊推理(fuzzy reasoning)是应用最广的一种。模糊逻辑控制(fuzzy logic control)部分依赖于数学生长模型,也采用“语言定义的规则系统”(linguistically defined rules system)来帮助系统响应发酵过程的非线性和动态行为。Alfafara等在流加培养酿酒酵母生产谷胱甘肽的研究中,采用一个模糊逻辑控制系统来控制葡萄糖的流加速度,对系统进行优化后谷胱甘肽的比产生速率达到6.2 h-1。目前,在流加培养中应用模糊逻辑控制技术的最大问题在于如何减少底物和产物浓度振荡所需的调整次数。自适应模糊逻辑控制算法的发展可望对此有所

  • 采用光谱学方法分析酒发酵特性

    光谱学被广泛应用于生物科学,适用于液体、膏、粉末、薄膜、纤维、气体和表面分析。该方法可以用于制药、食品、植物或动物组织中蛋白质、多肽、血脂、膜状物和碳水化合物特性分析。同时,光谱学可提供分子结构的详细信息。我们探索采用光谱学方法分析114种不同酿酒酵母的特性。在200-1200nm波长范围内,详细分析两大光谱范围:LWUV-VIS和VIS-SWNIR。收集的114个品种中,有用于酿酒、酝酿、烘烤等工业品种;也有从特定环境下获取的品种,如致病株、水果和橡树分泌物。结果表明,光谱学方法是一种用于不同酿酒酵母特性分析的强有力方法,根据不同品种特有的光谱特性,可以实现不同品种酿酒酵母的特性分析与辨别。

  • Orbitrap的多组学大数据,提升啤酒酿造技术创新

    Orbitrap的多组学大数据,提升啤酒酿造技术创新

    啤酒,人类三大饮料之一,型式繁多,风格万千,蔚为大观。小麦啤酒,亦称酵母麦啤(Hefe weizen)、白啤酒,是啤酒型式中独具特色魅力的一个品类。一般公认,酵母发酵产生的丰富酯类与酚类物质群直接决定了小麦啤酒独特的浓郁果味果香,不同菌株的使用也因之会影响小麦啤酒最终的气质与风格。宏观上,或迥然,或细微的感官差异背后,究竟蕴含着怎样的微观秘境?http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512141742_577896_3005330_3.jpg 最近,美国斯坦福大学等多家科研机构与赛默飞合作,依托赛默飞成熟的组学测试解决方案,运用Q Exactive质谱同时开展蛋白组学与代谢组学研究,通过组学大数据与科学结论的整合,来揭示California Ale (WLP001)与Hefe Weizen (WLP300)两种啤酒酿造酵母菌株的微观生物差异(图1)。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512141742_577897_3005330_3.jpg 研究分别将两种酵母菌株在麦芽提取物基质中培养100小时,选取7个不同时间点采样以进行生物组分时序变化的动态监控。酵母细胞蛋白提取、酶切后,使用Thermo Scientific EASY nLC系列纳升液相串联Q Exactive高分辨质谱进行蛋白组学数据采集。上清培养液离心后,使用同一质谱进行代谢指纹谱表征。蛋白组学数据处理时,使用Thermo Scientific Proteome Discoverer软件中的Sequest HT算法与Protein Center软件进行蛋白搜库鉴定与生物功能注释。同时,利用Thermo Scientific SIEVE 2.2软件进行代谢组分提取、解卷积与多元数据统计等代谢组学数据处理。进一步地,代谢物组与蛋白组原始峰表数据矩阵经过离群值剔除、缺失值补插、Log变换、分位数归一化等处理后,使用ANOVA与PCA等统计学手段进行分类与差异寻的,并就显著差异表达蛋白质与代谢物的生物功能与代谢通路进行功能注释(图2)。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512141743_577898_3005330_3.jpg 深度的数据挖掘后,研究发现,与这两种酵母菌种在微生物生态学上的相似性迥然有异的是,两者的蛋白表达谱差异显著,包括蛋白水解酶等在内的60余种与啤酒风味口感相关的酶在两种菌株间存在统计学差异,Protein Center对其进行Ontology Enrichment分析后,发现这些差异蛋白具有显著不同的生物功能谱,结果见图3。代谢组学的科学发现恰与蛋白组学结论相互印证,不谋而合。两种菌株的非靶向全组分代谢指纹谱在PCA主成分分析中明显聚集为两类(图4A),在SIEVE软件解析出的数千个代谢组分中有600余种组分的表达水平显著改变,其聚类结果见图4B。例如,乙酸异戊酯(isoamyl acetate)在Hefe Weizen酵母中的表达量显著高于California Ale,这赋予了小麦啤酒独特诱人的混杂着些许丁香味的浓郁香蕉果香(图4C)。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512141743_577899_3005330_3.jpg 作为研究食品与营养学相关科学问题的一种崭新思路,食品组学可以从不同生物组分物质层面上展开对应的组学研究。实践中,利用基于Orbitrap高分辨质谱的系统生物学策略,多头并进,通过整合蛋白组学与代谢组学等多种组学结论,将大大拓展与增进食品组学的研究广度与深度,从而更好地服务于酿酒工业中新菌种设计以改善啤酒感官特性等实际应用。

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