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内源性荧光

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内源性荧光相关的论坛

  • 如何确定一生物组织体的内源性荧光组分

    想请问大家关于如何确定生物组织体的内源性荧光组分,由于生物组织体有许多的能发光的内源性荧光物质,但是要如何一一区分开来呢,并且,我们对与一个单一组分的荧光物质的荧光光谱的带宽也是比较长宽的,如何说就是一个荧光物质在发光呢,请教大家了,欢迎e-mail to :lls009663@163.com.等待大家的答案!!!

  • 【原创】圣元奶粉与内源性性激素

    [size=4] 在一定程度上,内源性的干扰一直困惑这很食品检测,在食品检测的残留级检测中更为严重,然而最为突出的就是内源性激素的干扰,很多人挠破额头皮也无法解决,回过头来发现自己的努力不过是在向着错误的方向进行,我建立不少激素方面的前处理方法,深受其苦; 原始的定义上讲来,内源性是内部本身就存在的东西,并不是外部干涉和添加,无法避免的; 然而在科学发达的今天,这个定义在部修改,人们可以通过对动物的阉割,使动物体内的雄性激素或雌性激素含量与生物界的本身产生极大的差异,从而获取利益,当然也有人给动物使用激素,例如给奶牛使用激素,使其不间断的产奶;这样的例子原来越多 听闻国家某部门宣称“圣元”奶粉中的内源性激素问题,我想问问,这些内源性真的是“内源性”吗?还是有人在“误解”这个词?大家说呢![/size]

  • 关于内源性物质的测定方法

    想请教各位前辈,刚开始做方法学就 碰到了难题,我是要测一些内源性物质,老板的意思是用同位素标记生物基质标准品配置工作曲线,那么这样的话,基质效应就会特别明显,因为标记的和未标记的是同时出峰,想请教一下各位前辈有没有什么解决办法,不胜感激!

  • 标准加入法测定内源性物质

    高效液相色谱中,利用标准加入法测定内源性物质,方法学验证时,最低检测限如何确定?另外,回收率如何计算?

  • 鸡蛋中内源性黄体酮含量

    今年鸡蛋例行监测中加了激素类参数的检测,结果发现每个鸡蛋样品中都检测出了黄体酮(孕酮),含量10-80ug/kg不等(查了一些相关文献,鸡蛋本身就含有黄体酮,属于内源性物质),而GB 31650中规定黄体酮为禁用药物,那么对于这类样品中本身就存在的物质如何判定是否是外源添加还是内源存在,这个临界值如何确定是很值得研究的,欢迎大家讨论。

  • 液质测生物样品中内源性物质——精密度

    用液质测生物样品中内源性物质,要测多个组织?方法学验证时每个组织都要做一次精密度吗?把高中低浓度对照品加入相应组织?---您好,已转到 LCMS版(如不合适请版主帮忙转移)。下次发帖记得到对应的技术版面,新手版面的浏览量小 ,可能耽误您的问题。

  • 47.7 高效液相色谱法测定人血浆中内源性尿嘧啶二氢尿嘧啶含量

    47.7 高效液相色谱法测定人血浆中内源性尿嘧啶二氢尿嘧啶含量

    作者:肖力 任斌 陈小陆 李瑞明 刘怡 容颖慈 蓝缨(作者单位:中山大学附属第一医院药学部,广东,广州,510080 )摘要:目的:建立准确测定内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶血药浓度的高效液相色谱法.方法:以氟尿嘧啶(5-FU)为内标,醋酸乙酯-异丙醇混合液(85:15)为提取溶剂;色谱柱Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 靘);流动相A-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.5),B-乙腈,梯度洗脱;流速为0.8 mL·min-1;柱温为4 ℃;检测波长为204 nm(0~14.5 min),254 nm(14.5~35 min).结果:尿嘧啶和二氢尿嘧啶线性范围为8~500 靏稬-1,线性回归方程分别为C(UH2)=61.760 8Y+0.506 5,r=0.999 8;C(U)=95.201 1Y-3.064 0,r=0.999 3,(n=7).最低检测质量浓度均为5 靏稬-1.尿嘧啶方法回收率为99.3%~107.0%,二氢尿嘧啶方法回收率为95.0%~98.3%.尿嘧啶日内RSD小于6.5%,日阍RSD小于11.7%,二氢尿嘧啶目内RSD小于9.2%,日间RSD小于12.4%.结论:本方法可用于内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶血药浓度的常规监测.谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208142006_383845_1609970_3.jpg

  • 【原创】同位素比质谱方法检测内源性类固醇雄烯二酮

    [size=4][color=#DC143C][font=黑体]同位素比质谱方法检测内源性类固醇雄烯二酮[/font][/color][/size]=========================================在所使用的禁用物质中,类固醇激素是较为普遍使用的一类药物。人体自身能合成与分泌的类固醇激素称为内源性类固醇激素,如攀酮。由于在检测方法上有一定难度,一些运动员选择使用内源性类固醇制剂以逃避兴奋剂检测。目前,兴奋剂检测实验室应用同位素比质谱分析方法检测内源性类固醇来源。13C和12C是碳元素在自然界中的天然同位素。有机化合物的来源不同,其同位素比(如13C与12C的比值)也不同。人体自身分泌的类固醇与相同化学结构的类固醇制剂的同位素比不同。应用同位素比质谱分析技术可以测定化合物13C与12C的比值,同位素比用δ(‰)值表示。根据仪器的分析流程和组成部分,本文方法称为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/燃烧炉/同位素比质谱([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS)方法。该方法在兴奋剂检测中的应用时间较短,文献方法较为繁琐,本文建立了快速灵敏的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析方法。-------------------------------------------------试验材料与方法1. 试剂和对照品试剂:β-葡萄糖醛酸酶,Sigma;其余均为国产分析纯试剂。对照品:睾酮(缩写T)、雄酮(缩写An)、本胆烷醇酮(缩写Etio)、5α-雄烷-3α,17β-二醇(缩写5α-diol)、5β-雄烷-3α,17β-二醇(缩写5β-diol)、孕二醇(缩写PD)购自Sigma公司。2. 样品两名健康志愿者,一名男性40岁,尿样为sample 1;一名女性38岁,尿样为sample 2,均没有服用任何药物。收集其晨尿为阴性对照尿。阳性尿样为世界反兴奋剂机构水平考试所用尿样来自兴奋剂检测中心。3. 仪器[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/燃烧炉/同位素比值质谱仪(HP6890/DELTA PLUS,Finnigan);高效液相色谱仪(Waters2796,检测器:Waters2996 PAD,自动收集器:Waters Fraction Collector Ⅲ);Anilent 5973i[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用仪。4. 方法4.I [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS操作条件色谱柱:HP5毛细管色谱柱,25m×0.2mm i.d.×0.3μm;柱流速:1mL/min(室温);升温程序:60 ℃(2min)一50 ℃/min→255℃一2.5℃/min→280℃(6.5min);进样口温度:260℃;燃烧炉温度:960℃;质谱离子源:EI;参考气:CO2,1.8V。4.2 高效液相色谱仪操作条件色谱柱:ZQRBAX SB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:水-乙睛,梯度洗脱(0-18min:乙睛从30%→100%);流速1mL/min;柱温:室温。4.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD操作条件色谱柱:HP-1毛细管色谱柱,25 m×0.2mm i.d.×0.11μm;柱流速:1 mL/min (室温);升温程序:150 ℃(1min一5℃/min→200℃一30℃/min→310℃(10min)。4.4 样品预处理取尿样2mL,加人1Ml0.2mol pH=7.0的磷酸盐缓冲液和10μLβ-葡萄糖醛酸酶(5000 IU)混匀,在55℃恒温水浴中培养3h,取出后加pH=8.8的碳酸盐固体缓冲剂约100mg 和5mL叔丁基甲醚,振荡萃取,离心后,取出上层有机溶液,在加热的情况下,用氮气吹干,加人50μL甲醇溶解残渣,备用。将上述甲醇溶液置HPLC仪上,依前述色谱条件分离,分段收集流出液,确定收集时间程序。分别将流出组分用氮气吹干,加人50μL环己烷,备用。4.5 对照品溶液的制备分别配制对照品睾酮、雄酮、本胆烷醇酮、5α-雄烷-3α,17β-二醇、5β-雄烷-3α,17β-二醇,孕二醇的甲醇溶液,浓度为1mg/mL。4.6 样品测定4.6.1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD 分析依上述[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD仪器操作条件,取样品溶液及对照品溶液进行全扫描,扫描范围m/z 20~450,选择待测物的特征离子,获得SIM图。经对样品中与对照品有相同保留时间的峰进行质谱分析,及与标准品质谱图的对比,确定待测样品的组成。4.6.2 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析依上述CC/C/IRMS仪器操作条件,对处理后的样品进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析,测得内源性类固醇激素的δ值。

  • 鱼体内源性类固醇激素物质的检测(HPLC-Q/TOF,ABSciex 5600+)

    各位前辈大家好: 初来乍到请多多关照!我最近想做监测鱼体内血清中类固醇激素的实验,实验室的仪器和设备都是很齐全的,我打算用HPLC-Q/TOF去做,先定性后定量。现在有一个问题难倒我了,就是标准品因为我做内源性的激素物质的监测,雄激素、雌激素和孕激素的标准品大多是哺乳动物和人的,我有3点疑惑,请懂的人帮忙指点一下:1、有卖的雌激素、雄激素和孕激素是从鱼体内提取的吗?谁知道请帮我提供一个公司的名称被 2、如果标准品都是从人或者哺乳动物体内提取的,我在用飞行时间质谱做鱼体内监测的时候能够扫描出来吗,比如说标准品是雌二醇是从人体内提取后制成标准品的,那么我监测鱼体内的内源性雌二醇能扫描出来吗,是同一种物质吗,分子结构是否相同呢?我看一些标准中检测过外源性性激素,他们所用的标准品是怎么合成的呢,我用这种标准品能够检测我鱼体内的呢?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em34.gif(说的有点麻烦,不知道大家看懂没) 3、用过ABSciex家的5600+的仪器的高手们,请问在没有标准品的情况下是否无法进行监测,不用标准品有没有什么软件或者技术能分析出来物质,没有标准品无法进行定量吧!问题很棘手也很多!请大家给予帮助,初来乍到积分很少,努力攒积分吧!谢谢了!

  • 烟草中内源性组分的萃取净化方法

    除了要监控农药等有害物质的残留量,一些影响烟草品质的内源性组分如植物多酚、芳香胺等同时也要检测。植物多酚是烟草中的一类重要物质,其含量对烟草品质有重要影响,因而研究烟草及其制品中的植物多酚具有重要意义。通常的方法是用热甲醇水溶液对烟草中的多酚进行萃取,然后通过C18 SPE柱除去萃取物中弱极性脂类干扰物。①烟草样品中植物多酚的固相萃取方法烟样萃取:将烟样粉碎后过0.18 mm筛。取0.20 g,加入45 mL 80%(体积分数)甲醇水溶液,加热回流30 min。冷却后定容至50 mL。固相萃取净化SPE柱:Sep-Pak C18,Waters公司。柱预处理:30 mL甲醇,30 mL水,10 mL/min。样品过柱:5 mL上述甲水萃取液过柱,10 mL/min,弃去最初3 mL,收集后面2 mL。馏分过滤:0.45μm针头过滤器过滤,HPLC分析。②烟草中苯酚、儿茶酚固相萃取方法烟草中挥发酚在烟草燃烧后会产生不好的气味。苯酚和儿茶酚对呼吸系统有腐蚀和助癌作用。因此,近年人们开始关注并监控烟草中挥发酚的含量。以下是固相萃取方法:烟样萃取:20.00 g烟样,加入150 mL 2.5mol/L硫酸,加热回流l h,自动水气蒸馏仪以50%蒸汽量蒸馏15 min,收集其问的约230 mL馏分,加入1.7g磷酸二氢钾,调节pH至弱酸性,定容至250 mL。固相萃取净化SPE柱:Sep—Pak C18,30 mg,Waters公司。柱预处理:15 mL甲醇,30 mL 0.05 mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液。样品过柱:50 mL上述样品过柱,10 mL/min。柱干燥:离心除水。目标物洗脱:2 mL 60%(体积分数)甲醇溶液。HPLC分析:Nova-pak C18色谱柱,流动相A-甲醇,B-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液。梯度洗脱,0min 80%B,10 min 20%B,15 min 20%B,20 min80%&流速0.5 mL/min。检测器:DAD,进样量10mL。应用该方法对烟样进行萃取分析,回收率:苯酚91.8%~104.5%,儿茶酚89.6%~103.6%。来源:中国标准物质网

  • 【第二届网络原创参赛作品】在尿样中内源性代谢产物GC-tof-MS检测方法建立中遇到一个问题

    【第二届网络原创参赛作品】在尿样中内源性代谢产物GC-tof-MS检测方法建立中遇到一个问题

    平时使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]主要是用来测定各生物样本中各内源性代谢产物,经验不多,想跟大家分享一下尿样检测方法的建立过程遇到的一个很久才得以解决的问题。1、仪器Agilent 6890N gas chromatograph and Waters Micromass [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]T mass spectrometerDB-5 MS capillary column [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911062032_182393_1056682_3.jpg[/img]2、样本预处理使用MSTFA对样本中各物质进行三甲基硅烷化衍生化处理,以提高样本中各物质的挥发性。3、遇到的问题在条件摸索过程中突然出现不出峰的现象。在尿样中含有多种内源性代谢产物,利用这台[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]T仪器,正常情况下至少可以检测到100个以上的谱峰,但在一次条件优化过程中突然无规律的出现出峰数量明显减少的现象,见图1。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911062041_182397_1056682_3.jpg[/img]图1 出峰数量明显减少时得到的总离子流色谱图。分析后,总结造成这种情况可能的原因如下: 样品自身原因 进样问题 仪器自身原因 尿样中某些物质对仪器造成影响针对上述四种假设,一次排查。1)对同一份样本连续多次进样,见图2。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911062041_182398_1056682_3.jpg[/img]图2 同一份样本连续进样四次,所得到的总离子流色谱图。这样可知,出现这种现象并非由样本预处理不好,未衍生化完全造成的。2)进样的考察更换进样人,反复尝试,依然存在此问题。3)仪器自身原因的排查 清洗衬管 更换隔垫 烘烤毛细管柱 清洗离子源完成上述处理后,重新进样考察,但仍然出现与之前类似的问题。其实做到这里是很郁闷的,整个排查过程总共用了很多天,但始终没有方向,感觉每一条路都被堵死,越来越混乱,也考虑了是否是样本中某种物质会干扰仪器,但由于这并不是最初的条件优化,之前很多次并没有出现问题。之后很偶然的想到了,是否是进样针出现了问题,因此特地买了支安捷伦进样针,没想到问题就这样解决了。其实,长时间使用的进样针会出现密闭不好的问题,这样吸取样本的量就受到很大的影响,最终导致了我上面所提到的问题,不知道各位的进样针多长时间更换一个,我是遇到了这个事才真正意识到这个问题。另外[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]进样针有两种,一种是锥形针尖的进样器,一种是锐尖针尖的进样器,但推荐使用锥形针尖的进样器,因为锐尖针头会扎碎进样口隔垫而导致泄漏,同时还因为其从隔垫抽出时被隔垫擦拭,从而引起色谱图上大的溶剂峰拖尾。如图3。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911062042_182399_1056682_3.jpg[/img]图3 进样器针尖4、心得其实这个例子没有特别复杂的技术问题,讲给大家听只是想说其实在平时做实验遇到问题的时候,总是先想到比较复杂的、影响比较大的原因,而往往忽略了最简单的可能性。

  • 【求助】求助:样品检测问题?

    准备用酶促荧光法测粪便样品中的D-乳酸含量, 原理:D-乳酸在D-乳酸脱氢酶(D-LDH)的催化下生成丙酮酸,同时把NAD+转变为NADH,NADH具有荧光特性,通过测定NADH 的浓度达到间接测样品中 D-乳酸盐的浓度。已知未去蛋白的样品易受到内源性的L-LDH和D-LDH的干扰,因为NAD+是这两个酶的共同底物。为了避免非特异的NAD+转化成NADH而导致D-乳酸盐浓度的高估,对粪便样品进行前处理非常必要。查文献说,用高氯酸脱蛋白,用量与样品体积比为1:1。存在疑问:用高氯酸脱蛋白用量应怎么确定?如果用量不足,不足以除去蛋白(内源性酶),如果用量过高,可能对其后加入的酶具有破坏作用,怎样才能确定一个合适的用量,即能保证除去样品中的内源性酶,又不至于影响后来加入用来反应的酶,请各位高手帮忙解决一下这个问题?谢谢!如果不用高氯酸脱蛋白,用其它的试剂也存在同样的问题。

  • 【求助】求助:样品检测问题?

    准备用酶促荧光法测粪便样品中的D-乳酸含量, 原理:D-乳酸在D-乳酸脱氢酶(D-LDH)的催化下生成丙酮酸,同时把NAD+转变为NADH,NADH具有荧光特性,通过测定NADH 的浓度达到间接测样品中 D-乳酸盐的浓度。已知未去蛋白的样品易受到内源性的L-LDH和D-LDH的干扰,因为NAD+是这两个酶的共同底物。为了避免非特异的NAD+转化成NADH而导致D-乳酸盐浓度的高估,对粪便样品进行前处理非常必要。查文献说,用高氯酸脱蛋白,用量与样品体积比为1:1。存在疑问:用高氯酸脱蛋白用量应怎么确定?如果用量不足,不足以除去蛋白(内源性酶),如果用量过高,可能对其后加入的酶具有破坏作用,怎样才能确定一个合适的用量,即能保证除去样品中的内源性酶,又不至于影响后来加入用来反应的酶,请各位高手帮忙解决一下这个问题?谢谢!如果不用高氯酸脱蛋白,用其它的试剂也存在同样的问题。

  • 【转帖】新的基因组研究提示肥胖基因有多样性

    新的遗传学技术揭示了肥胖基因的变异编译 zfyyzz00字数544 《科学日报.》在2010年11月29日报道 - 肥胖是高度遗传的,但到目前为止遗传关联研究只揭示了这种遗传本质一小部分。现在,在生物医学可以公开获取的杂志《Genome Biology》上的一项研究中,研究人员在两个神经系统基因已经证实了DNA的,它们与过高的与体重指数相关。来自美国加州大学圣地亚哥分校和斯克里普斯转化科学机构的Kelly Frazer和同事以及Sanofi - Aventis使用了一种新方法,它可能在寻找隐藏的遗传特性成为普及:在一个大量人群中重新对基因组的候选区域进行测序,然后再与该疾病有关基因区域寻找遗传标志物。Frazer说:“我们测序编码酶FAAH和MGLL的两个区间,它们是调节在大脑和周围组织内源性大麻素水平,参与能量平衡和调节食欲。这些内源性大麻素水平在参与的肥胖患者中具有高水平,这两种酶从而提供了强有力的候选基因,来解释与体重指数相关的遗传特性”。在这两个基因,研究人员能够确定四个区域与BMI相关:FAAH启动子,MGLL启动子子,MGLL内含子2和MGLL增强子。这些区域的另一项测试显示,在血浆中存在内源性大麻素水平升高有关的罕见变异,这与以往的研究结果一致。Frazer说:““这是使用新的测序技术首次研究,把诸如肥胖少见的低频变异与复杂的通路相联系,并将特别关注的是要了解更全面的肥胖遗传性的作用,一这是一个在全球日益严重严重的健康问题。”编者按:本文并非旨在提供医疗咨询,诊断或治疗。出处:http://www.sciencedaily.com/releases/2010/11/101129203332.htm

  • 【求助】体内样品中如何消除内源性物质对药物峰的干扰?

    最近在做药物小鼠体内组织分布,每个空白组织都在8分多和10分多钟的时候出峰,干扰药物峰,药物峰也在10多钟出。摸了很久都没分出来。奇怪的是每个空白组织里都有这两个峰。怎么才能分离呢?[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/01/201001212145_198161_1695099_3.gif[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/01/201001212145_198162_1695099_3.gif[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/01/201001212146_198163_1695099_3.gif[/img]

  • 【分享】梭子蟹贮藏和加工过程中内源性甲醛含量的变化

    为探究梭子蟹甲醛的本底含量和来源,采用高效液相色谱法(HPLC)对梭子蟹不同部位、低温贮藏和不同加工过程的甲醛含量进行检测。结果显示,新鲜梭子蟹甲醛本底含量低于10mg/kg,不同部位甲醛含量差异明显,蟹腿肉甲醛含量最高。梭子蟹冷藏和冷冻过程甲醛含量明显下降,醉蟹和蟹糊中甲醛含量上升,而水煮和蒸煮均使甲醛含量增加明显。可见,梭子蟹中可能不存在氧化三甲胺酶生成途径,但仍有类似于鱿鱼等水产品高温分解生成甲醛的反应;腌料中的Fe2+ 可能促进甲醛的生成。

  • 求助有关唾液中激素类物质的测定!

    大家有做唾液中内源性物质LC-MS/MS测定的么,内源性物质和外源性不同,标准曲线制备就是一大难题。想用外加法扣除空白唾液中量来制备,还有文献中是直接用标准溶液进样制备,请问科学的方法应该是如何啊?

  • 37.1 高效液相色谱-荧光法测定人血浆中文拉法辛及相对生物利用度

    37.1 高效液相色谱-荧光法测定人血浆中文拉法辛及相对生物利用度

    【作者】 张志华; 何周康; 周彦彬; 厉宇红; 田娟; 左英; 丁劲松;【Author】 ZHANG Zhi-hua1,HE Zhou-kang1,ZHOU Yan-bin2,LI Yu-hong2,TIAN Juan2,ZUO Ying2,DING Jin-Song2*(1.Hunan Children’s Hospital,Changsha 410013;2.School of Pharmaceutical Sciences,Central South University,Changsha 410013)【机构】 湖南省儿童医院; 中南大学药学院;【摘要】 目的建立人血浆中文拉法辛的HPLC-荧光测定法,研究2种文拉法辛胶囊的相对生物利用度。方法以拉呋替丁为内标,血浆样品萃取后经Diamonsil C18柱分离,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(磷酸调pH为5.95)25∶75(v/v),荧光检发射波长(EX)为276 nm,检测波长(EM)为598 nm。18名健康志愿者采用随机交叉方式分别单剂量口服文拉法辛胶囊100 mg后研究两者的相对生物利用度。结果血浆中文拉法辛与内源性杂质分离完全,在5.1~490.7μg.L-1浓度与峰面积比线性良好,回归方程为:Y=0.074X+0.028 5(r2=0.999 8),最低定量限为5.1μg.L-1;文拉法辛绝对回收率为98.6%~100.5%(n=20),内标绝对回收率为84.2%~85.7%(n=20),方法回收率为89.3%~108.7%(n=15),日内精密度(RSD)3.6%(n=15),日间精密度(RSD)9.6%(n=15)。单次服用100 mg文拉法辛胶囊T或R后的AUC0~24分别为(1 146.4±339.6)和(1 132.9±311.3)μg.h.L-1;C... 更多还原http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061306_381838_2379123_3.jpg

  • HRP标记的二抗能做免疫荧光吗?

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service][b]免疫组织化学[/b][/url]([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])是一种实验技术,通过使用一抗来检测组织切片中细胞内的蛋白质(抗原)。在间接检测法中,一抗常与辣根过氧化物酶([/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体])偶联的二抗结合。最后,利用如[/font][font=Calibri]DAB[/font][font=宋体]等底物来显现染色,以可视化抗原的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]辣根过氧化物酶标记的二抗通常用于如免疫印迹、酶联免疫吸附试验以及免疫组织化学等应用。然而,对于免疫荧光而言,二抗需要带有在激发光下激发的荧光基团,常用的标记物为异硫氰酸荧光素[/font][font=Calibri](FITC)[/font][font=宋体]和罗明达[/font][font=Calibri]B200(RB200)[/font][font=宋体]标记的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]因此,[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]标记的二抗不能直接用于免疫荧光。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]使用[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗时,优化 [/font][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]实验的简便技巧[/font][font=Calibri]:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]①选择合适的 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗[/font][/font][font=宋体][font=宋体]务必确保[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗与一抗的相容性。举个例子,如果一抗在兔体内制备,则应使用抗兔 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。如需了解更多技巧,请查看我们的二抗选择指南。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②在 [/font][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]染色过程中,如何选择 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗的初始稀释度?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗的最佳稀释度取决于一抗。我们建议在 [/font][font=Calibri]1/1,000 [/font][font=宋体]至 [/font][font=Calibri]1/100,000 [/font][font=宋体]这一范围内进行试滴定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③对于 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]标记的二抗,建议使用哪种缓冲液?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]可使用含[/font] [font=Calibri]TBS [/font][font=宋体]的 [/font][font=Calibri]1% BSA[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]Abcam [/font][font=宋体]建议使用 [/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体],因为 [/font][font=Calibri]TBS [/font][font=宋体]的背景比 [/font][font=Calibri]PBS [/font][font=宋体]更干净。如果仍然遇到高背景染色,您可以增加 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]浓度或使用含 [/font][font=Calibri]5% [/font][font=宋体]牛奶的 [/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]请注意,二抗可能与组织中的内源性免疫球蛋白发生交叉反应。用二抗种属的普通血清预处理组织,可最大限度地减少交叉反应。一抗孵育前,使用普通血清进行封闭还可避免[/font] [font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]受体与一抗和二抗的结合。加入 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]能够减少疏水作用引起的非特异性结合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④是否需要预吸附二抗?[/font][font=宋体][font=宋体]预吸附二抗可减少非特异性背景,因为它们不太可能表现出种属交叉反应性,或与预吸附种属的内源性抗原反应。二抗应针对样本来源种属进行预吸附。例如,对人体组织或细胞进行染色时,建议使用预先吸附了抗人血清的[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤什么是证明二抗特异性染色的良好对照?[/font][font=宋体][font=宋体]为了证明二抗与一抗发生特异性反应,我们建议进行对照试验,即添加不含一抗的[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。如果在对照样本中观察到染色,则结果表明 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗与组织上的内源性免疫球蛋白发生非特异性反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥孵育时间[/font][font=宋体][font=宋体]室温孵育[/font] [font=Calibri]1 [/font][font=宋体]小时即可。如果信号较弱,可于 [/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]孵育过夜。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看优质[url=https://cn.sinobiological.com/category/secondary-antibodies-list][b]二抗[/b][/url]列表页:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/secondary-antibodies-list[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

  • GC-MS检测茶叶挥发性物质

    各位好,我在用GC-MS(7890-5973c)检测茶叶鲜叶内源性挥发物质分析的时候,检测到了六氯乙烷,相对含量大概0.01%。因为样品不是很干,所以用冷冻干燥机干燥了大约4天,再用同样的提取及分析方法做,六氯乙烷的含量大概0.3%,而且还检测到了三氯乙烷和五氯乙烷。不知道这些有机氯化物是不是农药残留呢?另外,我的样品冷冻干燥后,用同样的方法检测,发现水杨酸甲酯及没食子酸变没了,而且邻苯三酚的含量却大幅提高了,不知道是什么原因,希望各位能多多给予知道,谢谢!

  • 急急~~~茶叶是否含有香精的检测判断??

    各位老师好,我想请教一个问题:如何用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]检测出茶叶是否添加香精??我觉得最难点在于添加的香精未知,另外茶叶本身内源性香气组分非常多,那么即使添加香精也不好判断,因为内源性香气和外源性香精在仪器上检测到的组分是一样的。所以使用仪器的话还有什么办法可以检测判断是否添加香精呢?我不需要知道具体组分名称,只要仪器能够判断是否添加香精就可以了

  • 【我们不一YOUNG】+高分辨质谱在药物方面的助力

    一般在生活中肾脏是药物排泄的主要器官。但是药物排泄过程的正常与否关系到药效强度、药效维持时间以及毒副作用。所以,这是我们必须要借助一些科学例如高分辨质谱技术来助力药物。近年来,高分辨质谱成像技术的诞生为定位药物组织分布研究提供了全新的技术和思路。质谱成像是以质谱技术为基础的可视化方法,通过质谱离子源直接扫描生物样本,可以在一张组织切片上同时分析数百种分子的空间分布特征,已成为精确解析药物分子及其代谢产物组织空间分布的关键技术之一,应用于药物ADME的研究。本文将主要介绍TransMIT AP-SMALDI 10高分辨率质谱成像系统如何一步步揭秘伊马替尼在小鼠肾脏组织中的空间分布特征。TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统是目前少有的集高空间分辨率和高质量精度于一体的质谱成像系统。该系统采用常压基质辅助激光解吸电离技术,通过先进的准直光束聚焦实现了5μm的成像分辨率;质谱端搭载Thermo Scientific? Q Exactive?系列质谱仪,保证了离子分析的高质量分辨率和高质量精度。研究首先采用35μm中等空间分辨率分析了内源性物质和伊马替尼在小鼠肾脏组织中的空间分布特征。MALDI质谱成像能够准确的可视化肾脏组织中磷脂分子的组织分布特征:其中PC(32:0)(绿色)、PC(40:6)(蓝色)、PC(38:5)(红色)分别特异性分布于肾皮质、外髓质外带和外髓质内带。由此可见,质谱成像技术突破了传统H&E染色只能提供组织形态和变化特征的局限性。重要的是,在无需荧光探针或放射性同位素标记的情况下,质谱成像实现了伊马替尼的组织空间定位。根据质谱成像的检测结果,常容易判断出伊马替尼主要分布在小鼠肾脏的外髓质外带。为了获得更为精确的空间分布特征,随后采用10μm高空间分辨率对肾外髓质外带的局部组织进行了深度分析。高空间分辨率MALDI质谱成像为我们呈现了更为准确清晰的内源性物质和药物空间分布特征。研究结果发现,伊马替尼的空间分布和直小血管之间存在着紧密联系。此外,如图2D所示,由于原位分析不可避免的引入多种干扰因素,如果质谱成像设备的质量分辨率较低,图2D中两个相邻的质谱峰则无法区分,导致成像结果不准确。因此,高质量精度和分辨率是保证质谱成像结果准确可靠的必要条件。综上所述,研究成功的揭示了伊马替尼在重要排泄器官肾脏中的组织分布特征,同时也获取了组织中各种内源性化合物的空间分布信息,为研究药物分子的累积和排泄机制提供了可靠的科学依据。TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统集高空间分辨率、高质量分辨率和高质量精度于一身,不仅成为了药代动力学研究的利器,也应用于肿瘤标志物研究、植物次生代谢物研究、药用植物药效成分研究、微生物和单细胞研究等。未来,期待TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统为我国药物研发人员和各领域科研工作者带来更多的惊喜,加快研究进程,加速成果转化。

  • 关于诱变剂的种类介绍

    环境诱变剂的种类。一般来说环境诱变剂可以分为3 大类型:物理性环境诱变剂(例如,电离辐射、紫外线、电磁波等)、化学性环境诱变剂(主要是一些人工合成的化学品,包括药品、农药、食品添加剂、调味品、化妆品、洗涤剂、塑料、着色剂、化肥、化纤等)和生物性环境诱变剂(真菌的代谢产物、病毒、寄生虫等)。除了上面所说的外源性环境诱变剂之外,还有一些内源性的环境诱变剂。内源性的环境诱变剂是在人体健康异常的情况下产生的,如遗传因素、内分泌紊乱等。在各种不同的环境诱变剂中,最令人不安的是人工合成的化学物质。

  • 血样前处理

    血清处理中那种方法最好?我做血药浓度药品是硫酸多糖老是去不掉内源性物质也分不开,请教一下哥哥姐姐们

  • 你是否注意到滤膜对样品的吸附作用??

    之前在自己的课题中,曾经发现过样品过滤膜之后会丢峰的现象。不知大家注意过没有?如果有的话,欢迎大家积极反馈,并注明是哪一类样品?我做的是血样,内源性代谢物。

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