做吸附实验去除微囊藻毒素,水样要用什么样的滤膜过滤啊?用水系滤膜吗?滤膜有没有具体要求,求指导
有谁做过水中微囊藻毒素的测定,能否在前处理方面贡献一点经验,本人初做,感觉GB/T5750-2006中的方法不够严密且过于繁琐,谢了!
[font='times new roman'][size=13px]前言[/size][/font]微囊藻毒素(Microcystin,MC)是一类具有生物活性的环状七肽化合物,为分布最广泛的肝毒素。其具有相当的稳定性,它能够强烈抑制蛋白磷酸酶的活性,还是强烈的肝脏肿瘤促进剂。中国生活饮用水卫生标准(GB 5749-2006)的颁布实施对水源水的质量提出了更高的要求。本文参照“GB/T 20466-2006水中微囊藻毒素的测定”利用 Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统对水中的微囊藻毒素-LR进行固相富集萃取,采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]进行检测,建立了一套水中微囊藻毒素-LR的检测方法,且方法的回收率及平行性良好,适合水中微囊藻毒素-LR的检测。[font='times new roman'][size=13px]关键词[/size][/font]Sepaths UP全自动固相萃取系统,水,微囊藻毒素-LR, GB/T 20466-2006[font='times new roman'][size=13px]1、设备及试剂[/size][/font] Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统; 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]:LC600 二元高压梯度高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url];标样:微囊藻毒素-LR标准物质(农业部环境保护科研监测所,20μg/mL,溶剂:甲醇);标样工作液:将20μg/mL标样用甲醇稀释至浓度为2μg/mL;甲醇(色谱纯, Fisher Chemical)三氟乙酸(分析纯)磷酸二氢钾(分析纯)磷酸(分析纯)超纯水固相萃取柱(Labtech C18 500mg/6mL)磷酸二氢钾溶液(0.05mol/L):称取6.8g磷酸二氢钾,用水溶解,定容至1000.0mL磷酸盐缓冲液:用20%(体积分数)磷酸溶液将磷酸二氢钾溶液调至pH到3洗脱液:用甲醇将0.1mL三氟乙酸定容至100.0mL[font='times new roman'][size=13px]2、测试过程[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2.1 样品准备[/size][/font] 1000.0mL 纯净水中加入200μL的 2μg/mL 微囊藻毒素-LR标准工作液。[font='times new roman'][size=13px]2.2 SPE富集及浓缩[/size][/font] 按照图1所示的方法进行Sepaths UP方法编辑,并加载方法到相应通道。Sepaths UP进行2.1中样品的SPE富集过程。 收集样品到收集瓶中,然后进行氮吹浓缩,当收集液浓缩到近干时,加入流动相定容到1.0mL,取出样品待检测。[align=center][/align][align=center][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210091029061085_5576_5237388_3.png[/img][/align][align=center][size=12px]图1 微囊藻毒素-LR[/size][size=12px] [/size][size=12px]SPE富集方法[/size][/align][align=center][/align][align=center][/align][font='times new roman'][size=13px]2.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=13px]HPLC[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]检测方法[/size][/font]色谱柱:Promosil C18反相柱,5μm,4.6*250mm;波长:238nm;流速:1mL/min;柱温:35[font='宋体']℃[/font];进样量:20μL;流动相:甲醇:磷酸盐缓冲溶液= 65:35[font='times new roman'][size=13px]3、测试结果[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]3.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=13px]0.4[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]ppm微囊藻毒素-LR混标色谱图[/size][/font]图2为浓度为0.4ppm的微囊藻毒素-LR混标色谱图。[align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]图2 0.4ppm微囊藻毒素-LR混标色谱图[/size][/font][/align]3.2 加标样品色谱图图3为加标样品的色谱图。[align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]图 3 加标样品色谱图[/size][/font][/align]3.3 加标回收率 表1为加标回收率结果,微囊藻毒素-LR类化合物的回收率在92.21~98.61%。[align=center][/align][align=center][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]表1 加标回收率结果[/size][/font][/align][table][tr][td=1,2][align=center][size=12px]标样[/size][/align][/td][td=4,1][align=center][size=12px]4 组平行样回收率,%[/size][/align][/td][td=1,2][align=center][size=12px]RSD,%[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=12px]1[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]3[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]4[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=12px]微囊藻毒素-LR[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]93.75[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]92.21[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]98.61[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]93.82[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]2.93[/size][/align][/td][/tr][/table][font='times new roman'][size=13px]4、结果与讨论[/size][/font]本方法参考GB/T 20466-2006方法,使用Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统对水中微囊藻毒素-LR进行了富集固相萃取,利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]进行检测,得到方法回收率为92.21~98.61%。且通道间的平行性良好,适合水中微囊藻毒素-LR的检测。[font='times new roman'][size=13px]参考标准[/size][/font]GB/T 20466-2006 水中微囊藻毒素的测定
又一标准:http://www.instrument.com.cn/news/2007/014680.shtml 由水生所制订的国家标准“水中微囊藻毒素的测定” (GB/T 20466-2006)于2006年8月24日颁布,2007年1月1日实施。新近由卫生部颁布的《生活饮用水卫生标准》和建设部颁布的《城市供水水质标准》中均增加了“存于水中藻类植物微囊藻毒素等的检测”的指标。本次国标的颁布,规范了水体中微囊藻毒素的监测方法,为保障我国饮用水和水产品的质量管理提供了重要的技术支持。 近五年来,在国家863计划、国家攻关项目、自然基金项目、武汉市攻关项等项目的资助下,水生所宋立荣研究员领导的藻种资源与藻类毒理学科组重点攻克微囊藻毒素的分析技术体系,先后发展了产毒藻类全细胞鉴别、酶联免疫法、时间分辨荧光免疫法,开发出毒素纯品高效制备流程和酶联免疫试剂盒,上述产品已经在国内外得到广泛应用,在一定程度上推动了我国微囊藻毒素理论研究和检测技术的发展。2006年,该学科组还建立了底泥和土壤中微囊藻毒素的快速分析测试技术,解决了国际上长期无法开展微囊藻毒素在土壤-水-底泥界面迁移的分析技术难题,并在此基础上开展了蓝藻毒素在土壤中迁移的动力学研究。相关研究结果已经在Environmental Pollution杂志上先后报道。
扩项水中微囊藻毒素,看国标上面的峰出的不怎么好,极线都没走直。看到改进方法用三氟乙酸跟乙腈做流动相,又不能改变流动相。大家是有么好的方案。ths
不知道大家有没有做微囊藻毒素的,我们这里是用酶标仪做,大家都是怎么做的呢,大家用酶标仪又是怎么做的呢?质控怎么做?刚接手不是很懂
液相做生活饮用水中的微囊藻毒素 怎么感觉找不到峰 或者说峰面积太小了 不能成曲线 这是什么原因啊 是按照标准来设置的条件
请问有经验的同仁,你们用来装微囊藻毒素的瓶子一般都怎么处理啊?有没有相关的标准说明处理方法?最近实验室要申请认证,担心专家会问到。另外,想问下,专家指定某个项目用指定标准来做,指定标准为液液萃取,这对我们来说有点难度,如果用固相萃取小柱萃取会允许吗?考的是现场加标项目。恳请各位有经验的同仁踊跃只招,本人将感激不尽。。。。。
想测定水中的微囊藻毒素,正在寻找合适的实验室要求:1. 按国标《GB/T20466-2006水中微囊藻毒素的测定》进行2. 实验室有中国实验室认证3. 测试精度高于0.0001mg/KG(0.1ug/KG)请推荐,自荐亦可,谢谢啊
一、概述随着社会工业化进程的加快,人类在工农业生产及日常生活中,向水体排入大量含氮、磷的污染物,加速了湖泊的富营养化(Eutrophication),藻类(Algae)由此而获取丰富的营养而大量繁殖。最近的调查表明,亚太地区54%的湖泊富营养化,欧洲、非洲、北美洲和南美洲的比例分别是53%,28%,48%和41%,我国则是60%。在富营养化的淡水水体中,当有适宜的化学物理条件时,水体中的藻类短时间内大量繁殖并聚集的生态异常现象称为水华(Water Blooms, 也称湖靛);这一现象若发生在海洋里则通常称为赤潮(Red Tide)。淡水水体富营养化危害最大的一个表征是水华的出现,每年夏、秋季节,在一些淡水湖泊均会形成大量水华,致使水质日趋恶化。当水华出现时,水面被厚厚的蓝绿色湖靛所覆盖,甚至在岸边大量堆积。在藻体大量死亡分解的过程中,不但散发恶臭,破坏景观;同时大量消耗水中溶解氧,使鱼类窒息死亡;尤其是藻类能释放生物毒素——藻毒素(Algae Toxins),这些类次级代谢产物严重危害人类和其他生物的安全。随着富营养化的加剧,藻类水华发生的频率和幅度也增加,有毒水华对水环境的危害和生物安全更日益引起广泛的关注。淡水中蓝绿藻属(Cyanobacteria,Blue-green Algae)分泌产生的蓝藻毒素是目前已经发现的污染范围最广,研究最多的一类藻毒素。其中的微囊藻毒素LR (Microcystin-LR)是目前已知的毒性最强的、急性危害最大的一种淡水蓝藻毒素。由于未及时地检测水质情况的污染变化及采取相应的控制措施,致使这些毒素富集于鱼类或贝类中并通过食物链传递,直接存在于饮用水或娱乐用水中,严重威胁人类的健康,全球已经发生了多起有关藻毒素中毒并引起死亡的事故。近年来淡水藻类污染已成为一个全球性的环境问题。
实验室做微囊藻毒素,结果标准样品无法分辨哪个是样品峰,感觉峰的响应值有点低
求助水中微囊藻毒素国家标准检测。谁能给发一份,谢谢了!
微囊藻毒素膜样处理中冻融操作如何操作?需要什么设备的器具,多少温度?望老师不吝赐教
我用酶标仪测微囊藻毒素,曲线相关性一般只有0.97,0.98,很少做到两个9,大家使用情况呢?
微囊藻毒素lr寻不到峰?有没有做过的老师,说说这个实验的要点?望老师不吝赐教
GB5750.8-2006 微囊藻毒素测定前处理过程中先过一根ODS柱,再过一根C18柱问题1:ODS与C18柱有区别吗? 我了解的信息ODS柱就是C18小柱。请求各位大侠来解答
请教各位大侠,有没有用gbt20466-2006方法做微囊藻毒素的,想上此方法,有些问题请教下,1.标准上检出限0.1ug/l,标准最低点0.1ug/ml,按他的方法1000水样,最后定容至100ul,10000倍,检出限应该是0.01ug/l。2.大家都完全按照方法做的吗?有没有简化,有好的经验分享下,避免少走弯路。3.定容时,用1ml甲醇溶解至干的物质,在吹干,再用50%甲醇定容,是否可以简化直接用1ml甲醇溶解就可以了。谢谢
液相色谱做水中薇囊藻毒素,没有目标峰,求解
5750.8-2006中,微囊藻毒素用液相色谱测定时,用到的流动相是乙腈+水+三氟乙酸=38+62+0.04,我暂时没有三氟乙酸,所以想问一下三氟乙酸在这里的意义是什么。如果是需要创造酸性环境,那么用别的酸是不是可以起到同样的效果?新手小白上路没多久就开始扩项,真的好难[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em58.gif[/img]
各位前辈,你们好: 我现在要分析仪有机指标:微囊藻毒素,根据国标GBT5750_8,有些技术专用词不懂,请各位大侠指教:1、请问什么是GF/C过滤啊?2、请问藻细胞冻融是什么意思啊?具体操作是什么?此外,请问有没有市面上有没有用索氏提取器上用石油醚提取4h的玻璃棉或是脱脂棉啊?盼各位大侠的指导!谢谢!
我们单位新进了一台waters的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]质,领导想用它开发微囊藻毒素的新方法,不知道有没有那位仁兄做过这个东东的方法,请赐教,谢谢
现在需要开发水中甲萘威、溴氰菊酯、微囊藻毒素的测定这个项目。单个项目做应该没有太大问题,现在主要是想把这三种物质放在一起做。因为《饮用水卫生规范》上对于这三种物质是不同的前处理方法,所以一起分析的话不知道前处理方法怎样,回收率如何。查了些国内外的资料,没有找到相关的文献(EPA中好像也没有,不知道是不是我漏掉了)。各位有做过的给小弟我提点建议吧,谢谢!
测定微囊藻毒素流动相一定要加三氟乙酸吗?
生活饮用水5750.8微囊藻毒素[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]保留时间规律性前移,如图,请老师们给建议,谢谢。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/04/202304231616320528_5667_5888749_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/04/202304231616319653_6977_5888749_3.png[/img]
各位前辈,你们好: 我现在要分析仪有机指标:微囊藻毒素,根据国标5-69 GBT5750_8,有些技术专用词不懂,请各位大侠指教:1、请问什么是GF/C过滤啊?2、请问藻细胞冻融是什么意思啊?具体操作是什么?此外,请问有没有市面上有没有用索氏提取器上用石油醚提取4h的玻璃棉或是脱脂棉啊?盼各位大侠的指导!谢谢!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105091711_293299_1638724_3.jpg
单位刚买回岛津液相LC-20A,主要测水中微囊藻毒素,因为从未接触过,不知标准物质在什么时候出的峰,看不懂,出来有很多峰,怀疑是甲醇峰,请各位高手指教一二
要做上面几个品种方法验证, 微囊藻毒素-LR,甲萘威 参照标准为高效液相色谱法《生活饮用水卫生规范》,但都搜不到,
用微囊藻毒素方法制得的制备液可以用其进行呋喃丹的检测吗?望老师不吝赐教
1 引言1.1 概述 微囊藻毒素(Microcystin)是一种篮绿藻毒素,由蓝绿藻水华所引起。由于它能产生环状七肽肝毒素,可致家畜死亡和人类肝中毒。WHO规定它在水环境中的指标值为1ug/L,中国在2002年发布的《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)中的特定项目标准限值亦规定为1ug/L Microcystin-LR。Microcystin-LR是微囊藻毒素中的一种。由于它分子量大、极性强,非常适合LC/MS检测。1.2 测定方法 水样冻融1-3次,破碎藻细胞,解冻后用0.2um滤膜(或双层0.45um滤膜)过滤,进样5.00mL用On-line SPE-UPLC-MSMS测定Microcystin-LR总量。以C18 UPLC专用色谱柱,0.5%甲酸/1%甲醇溶液和0.5%甲酸/90:10乙腈甲醇为流动相,用在线固相萃取-超高校液相色谱-质谱检测器(On-line SPE-UPLC-MSMS)测定microcystin-LR的色谱峰。用外标法计算含量。 1.3 干扰 在水样中凡能被固相萃取柱萃取的化合物都有可能造成干扰。水样在储存和萃取过程中,蓝藻的细胞破裂可释放毒素,会造成水中溶解的毒素含量增高。另外,要防止高浓度到低浓度的交叉污染。 1.4 水样的储存 微囊藻毒素在常温下容易生物降解,在有余氯时容易被氧化降解,所以水样采集后应尽快萃取,有余氯的水样需要用硫代硫酸衲脱氯。水样采集在1L的棕色玻璃瓶中。若水样采集后确实不能马上处理,则把水样用玻璃滤纸过滤,处理水加80mg的脱氯剂,储存于4oC的冰箱中。 1.5 测定范围 原水和处理水中可溶解的和总的微囊藻毒素Microcystin-LR。2 仪器2.1 Waters ACQUITY UPLC
我现在要用ELISA来测定MC微囊藻毒素标毒的浓度,可以吗?ELISA自己能分出异构体吗??