霉菌、酵母菌测试片
霉菌和酵母的测试片检测方法方法编号:5031 1 适用范围:本品可用于各类食品及饮用水中霉菌和酵母菌的计数。2 方法原理:将霉菌营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂加载在纸片上,通过培养,在酶显色剂的放大作用下,使霉菌和酵母菌在纸片上显现出出来,通过计数报告结果。3方法特点:与传统方法相比,省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,即开即用,操作简便。培养时间由一周缩短为48h~72h。4 操作方法4.1样品处理:无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇做成1:10的稀释液,用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹50次做成1:100的稀释液,以此类推,每个稀释度更换一支灭菌吸管。4.2接种: 4.2.1一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5min,每个稀释度接种两片。4.2.2用手指先沿方格区边缘刮一下,防止水外流,然后再在中间轻轻推刮,使水分在纸片方格区内均匀分布,并将气泡赶走。4.3培养:将加了样的检验纸片每12片叠放在一起,放入自封袋中,平放在28℃培养箱内培养48h开始观察计数。4.4结果判断与计数:霉菌和酵母菌在纸片上生长后会显示蓝色斑点,霉菌菌落显示的斑点略大或有点扩散,酵母菌落则较小而圆滑,许多霉菌在培养后期全呈现其本身特有的颜色。选择菌落数适中(10~50个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中霉菌和酵母菌的数目。5 计数原则及报告方式:5.1 通常选择菌落在10~50个之间的纸片进行计数,乘以稀释倍数报告之。5.2具体计数原则可参照细菌(菌落)总数的测定方法进行。6 附加说明:由于霉菌常以孢子的形式于空气中到处传播,而多种样品是要求霉菌酵母菌不得捡出,因此检测霉菌时需特别小心操作,取样用品、稀释用水和吸管吸头等都需仔细消毒,接种时尽量避免空气流动,动作要干净利落,每次最好用灭菌生理盐水接一片空白对照,以免出现假阳性结果。