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口蹄疫病毒

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  • 【原创大赛】口蹄疫病毒荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践

    【原创大赛】口蹄疫病毒荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践

    [color=black]口蹄疫病毒荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践[/color][color=black]1 前言[/color][color=black]口蹄疫俗名“口疮”、“辟癀”,是由口蹄疫病毒所引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。主要侵害偶蹄兽,偶见于人和其他动物,易感动物达70多种。临床特征是在口腔黏膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱性疹。该病传播途径多、速度快,曾多次在世界范围内暴发流行,造成巨大政治、经济损失。鉴于此,世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类传染病之首,我国原农业部将其列为一类动物疫病。目前,有三分之二的 OIE 成员国流行 FMD,时刻威胁着无 FMD 国家和地区的家畜安全和畜产品贸易。[/color][color=black]口蹄疫病毒属于小RNA病毒科口疮病毒属,其最大颗粒直径为23纳米,最小颗粒直径为7~8纳米。目前已知口蹄疫病毒在全世界有七个血清型(A、O、C、南非1、南非2、南非3和亚洲1型),并可细分为65个以上亚型。[/color][color=black]该病毒对外界环境的抵抗力很强,在冷冻情况下,血液及粪便中的病毒可存活120~170天。阳光直射下60分钟即可杀死;加温85℃15分钟、煮沸3分钟即可死亡。对酸碱之作用敏感,故1%~2%氢氧化钠、30%热草木灰、1%~2%甲醛等都是良好的消毒液。[/color][color=black]牛尤其是犊牛对口蹄疫病毒最易感,骆驼、绵羊、山羊次之,猪也可感染发病。本病具有流行快、传播广、发病急、危害大等流行病学特点,疫区发病率可达50%~100%,犊牛死亡率较高,其他则较低。病畜和潜伏期动物是最危险的传染源。病畜的水疱液、乳汁、尿液、口涎、泪液和粪便中均含有病毒。该病入侵途径主要是消化道,也可经呼吸道传染。本病传播虽无明显的季节性,且春秋两季较多,尤其是春季。风和鸟类也是远距离传播的因素之一。[/color][color=black]口蹄疫病毒属于RNA病毒,非常容易发生变异,原因是由于病毒RNA是单链结构,容易断裂而发生重新组合,自身稳定性差,加之在复制过程中修复错误机制的酶活性较低,因而导致RNA病毒变异很快。[/color][color=black]为确保公共卫生安全,以及畜牧业健康发展,有必要实施口蹄疫病毒核酸监测,尽早发现疫情隐患并予以及时处置,避免重大动物疫情及公共卫生安全事件发生。[/color][color=black]2 模块化检测方法思路[/color][color=black]总体思路是:将动物疫病荧光定量PCR检测分为三个模块,核酸提取采用DNA/RNA共提试剂,核酸扩增采用预混液+引物探针方式,质控品利用抗原或商品化疫苗自制。具体思路如下:[/color][color=black]——核酸提取采用DNA/RNA共提试剂;[/color][color=black]——引物探针严格按照标准方法,委托生物工程公司合成;[/color][color=black]——反应体系中其他成分,采购商品化RT-qPCR预混液(含逆转录酶);[/color][color=black]——质控品:阳性对照采用病毒抗原、商品化疫苗等,测定结果后按一定比例稀释,保存备用。[/color][color=black]——反应体系:设为20μL,其中包含:预混液(2×)10μL、逆转录酶1μL、ROX 0.4μL为固定量,引物探针加入量根据检测标准中的终浓度予以换算,加灭菌水补足18μL,RNA模板为2μL;[/color][color=black]——反应条件首先按照标准中的条件开展摸索,如达到预期效果则予以固定;如效果不佳则参照预混液及引物探针推荐条件进行适当调整。[/color][color=black]3 材料和方法[/color][color=black]3.1 病毒[/color][color=black]口蹄疫抗体液相阻断ELISA试剂盒附带的抗原,包括O型、亚洲I型和A型。[/color][color=black]3.2 试剂[/color][color=black]DNA/RNA共提试剂盒:FastPure Viral DNA/RNA Mini Kit试剂盒,南京诺维赞生产;[/color][color=black]RT-qPCR预混液:2× One Step Q Probe Mix,南京诺维赞生产;[/color][color=black]逆转录酶:One Step Q Probe Enzyme Mix,南京诺维赞生产。[/color][color=black]3.3 引物探针[/color][color=black]按照GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》提供的序列,委托上海生工合成,引物稀释成10μmol/L、探针稀释成5μmol/L,分装成小包装冷冻保存备用。具体序列如下:[/color][color=black]正向引物:5’-ACTGGGTTTTACAAACCTGTGA-3’[/color][color=black]反向引物:5’-GCGAGTCCTGCCACGGA-3’[/color][color=black]探 针:5’-FAM-TCCTTTGCACGCCGTGGGAC-BHQ1-3’[/color][color=black]3.4 反应体系[/color][color=black]根据GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》所载反应体系,按照终浓度一致原则予以转化。具体转换方法:[/color][color=black]——反应体系总体积设定为20μL;[/color][color=black]——将标准中反应体系的10×PCR Buffer、MgCl2、dNTPs、Taq酶、反转录酶等成分转换为RT-qPCR预混液10μL、逆转录酶1μL(推荐量);[/color][color=black]——因使用ABI7500荧光PCR仪,故在体系中加入ROX 0.4μL;[/color][color=black]——标准中正向引物、反向引物、探针的终浓度分别为0.2μmol/L、0.2μmol/L和0.2μmol/L,故在修改后的体系中加入量为0.4μL、0.4μL和0.4μL;[/color][color=black]——总RNA加入量修改为2μL(根据经验该加入量已经足够);[/color][color=black]——根据上述各成分用量,补充体积的无核酸酶水修改为5.4μL。[/color][table][tr][td=2,1][align=center][color=black]GB/T18935-2018[/color][/align][/td][td][/td][td=2,1][align=center][color=black]修改方法[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]2Χ一步RT-PCR缓冲液[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]2Χ RT-qPCR预混液[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]TAKARA EX Taq HS(5U/μL)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]酶混合液[/color][/td][td][align=center][color=black]1[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]PrimeScript RT Enzyme Mix II[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]ROX[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]探针(5μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.8[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]探针(5μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]6[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]5.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]总RNA[/color][/td][td][align=center][color=black]1.6[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总RNA[/color][/td][td][align=center][color=black]2[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]20[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]20[/color][/align][/td][/tr][/table][color=black]3.5 反应条件[/color][color=black]参照GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》推荐的扩增程序,结合ABI7500荧光采集时间不能少于34s的要求,进行预试验。扩增程序如下:[/color][color=black]42℃15min→(95℃10s→55℃30s→72℃34s)*40[/color][color=black]如扩增结果理想,则不做修改直接采纳,否则进行适当调整。[/color][color=black]4 试验结果[/color][color=black]对口蹄疫病毒包括O型、亚洲I型和A型等毒株进行核酸检测,结果均较理想。部分扩增曲线如下:[/color][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009171106327467_6759_1627156_3.jpg[/img]口蹄疫O型抗原扩增曲线[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009171106329879_7658_1627156_3.jpg[/img]口蹄疫亚洲I型抗原扩增曲线[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009171106330953_5975_1627156_3.jpg[/img]口蹄疫A型抗原扩增曲线[color=black]5 阳性质控的制备[/color][color=black]根据GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》规定,阳性对照应Ct25。对O型、亚洲I型和A型3种抗原适当稀释后进行再次检测,结果如下:[/color][table][tr][td][align=center][color=black]稀释倍数[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^1[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^2[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^3[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]H5Re-8抗原[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]17.53[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]21.35[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]25.81[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]30.43[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]H5Re-11抗原[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]12.45[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]15.96[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]19.70[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]24.65[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]H5Re-12抗原[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]13.57[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]16.98[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]20.85[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]25.41[/color][/align][/td][/tr][/table][color=black]经综合判定,最后采用口蹄疫亚洲I型抗原作1: 10^3稀释,分装为200μL/管作为阳性质控,Ct值约20,-70℃冻存备用。[/color][color=black]6 讨论[/color][color=black]6.1 检测工作更加方便高效[/color][color=black]一是在核酸提取环节采用了DNA/RNA共提试剂,待检样品经一次提取核酸,除可应用于口蹄疫、蓝耳病等RNA病毒项目检测外,还可应用于非洲猪瘟、圆环病毒等DNA病毒项目检测;[/color][color=black]二是由于实验室储备了足够量的qRT-PCR预混液及逆转录酶,在开展检测时,不必担心部分检测量较少的项目由于试剂组分不足而罢工事件的发生;[/color][color=black]三是由于qRT-PCR预混液及逆转录酶适用于多数RNA病毒项目的检测,在检测任务发生重大变化时,可以方便地调整检测项目,不必担心试剂不足或浪费情况的发生;[/color][color=black]6.2 阳性质控品制备方便[/color][color=black]动物疫病监测实验室常备口蹄疫液相阻断ELISA抗原,只需对贮存的抗原进行含量测定,取合适的抗原进行一定比例的稀释即可作为实验室内部的阳性质控品。[/color][color=black]6.3 适用性有待进一步验证[/color][color=black]尽管在构建新方法时,对适用性进行了尽可能多的验证,但对于其他毒株,尤其是较新型的变异株是否有效,尚有待进一步观察和验证。[/color][color=black]6.4 严格依法依规操作[/color][color=black]如果有关法律法规或上级有关部门出台政策,要求采用获批准的成品试剂盒用于检测,则实验室必须及时停止自建方法的使用。[/color]

  • 【其食无关】中国发明纳米级酸性干燥消毒粉能防治口蹄疫

    中国农业大学3月26日发明成功一种能够有效防治猪口蹄疫的纳米级酸性干燥消毒粉。  试验检测显示,这种干粉消毒剂对口蹄疫病毒有非常显著的杀灭作用。研究者之一的中国农业大学生物学院教授赵兴波说,干粉呈弱酸性,而口蹄疫病毒对酸碱均十分敏感,故而酸性的环境能够明显抑制和杀灭病毒。但由于液体酸的时效短,过氧乙酸等喷洒后酸性仅能持续几小时,而固体酸则具有持续时间长、不受环境因素影响的特点。  经现场微生物检测显示,喷撒干粉一小时后,空气中大肠杆菌菌落数略高于液体消毒组,平皿培养大肠杆菌菌落数为13个左右,但随后的检测显示,使用干粉消毒的畜舍内,空气中大肠杆菌数和杂菌数一直维持在较低水平,12小时后达到最低,和液体消毒剂12小时后细菌数不可计数形成鲜明对比。赵兴波说,传统的方法是通过在畜舍内外喷洒消毒液达到消毒环境,它的缺点是消毒时效短,易受环境潮湿、酸碱度、粪便、饲料污染等因素影响,会增大致病微生物繁殖的几率。这种新技术克服了液体消毒剂潮湿、消毒时效短、受环境因素干扰大的缺点。采用无毒、无污染的纳米新材料,对人和动物没有任何危害,动物接触到干粉颗粒也没有任何副作用。  赵兴波说,由于纳米级颗粒分散好,通过鼓风机扬撒,干粉颗粒弥漫舍内长达30分钟,可以触及每一个空隙,故而消毒无死角,环境干爽,能够有效杀灭环境中的细菌、病毒等病原体。  试验表明,这种干粉还能吸附环境中的水和病毒,有很好的收敛性,能够促进猪外伤创口愈合。在对广东、江西、湖南、山东等省市数十家猪场几十万头猪试验证明,对口蹄疫的防治有明显效果。山东某猪场场长表示,在使用该技术干粉消毒剂后,猪场环境明显改善,场内刺鼻的氨气没有了,小猪生活在干爽舒适的环境中,不再是以前那种潮湿、肮脏的环境,猪的发病率明显降低,仔猪成活率95%%以上。

  • 【讨论】广州白云区发生生猪口蹄疫情 逾八千头猪被扑杀

    近日,广州白云区石井街黄金围发生生猪疫情,经国家口蹄疫参考实验室检测,确诊该起疫情为生猪○型口蹄疫疫情,发病生猪共1474头。广东省畜牧兽医局副局长余业东昨日通报,目前1474头发病生猪和同群猪共计8382头已全部扑杀并作无害化处理,全省未接到新的动物疫情报告。农业部门在2月22日接到疫情报告。到2月26日,1474头发病生猪和同群猪共计8382头已全部扑杀并作无害化处理,对扑杀猪的补偿工作已按有关政策、规定全部落实到位。口蹄疫是偶蹄类动物的疫病,虽然是人畜共患病,人类只偶有感染,发病率比禽流感还要低。“口蹄疫病毒在太阳光下照1个小时就死掉了,对一般消毒药物也很敏感,特别对酸性药物,在PH值为5的药物下,1秒钟就会死掉。”[b]口蹄疫[/b]属一类传染病,俗名“口疮”、“辟癀”,是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。主要侵害偶蹄兽,偶见于人和其他动物。其临诊特征为口腔黏膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱。

  • 动物疫病诊断仪主要检测什么

    动物疫病诊断仪主要检测什么

    [size=16px]动物疫病诊断仪主要检测什么动物疫病诊断仪主要检测以下几种:猪弓形体IgG抗体检测:用于检测弓形虫抗体。猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒:用于检测猪蓝耳病病毒抗体。猪伪狂犬病ELISA抗体检测诊断试剂盒:用于伪狂犬病毒抗体检测。猪瘟ELISA诊断试剂盒:用于检测猪瘟抗体。猪细小病毒ELISA诊断试剂盒:用于检测细小病毒抗体。此外,动物疫病诊断仪还可以检测黄曲霉毒素B1、猪伪狂犬病毒、猪口蹄疫3ABC蛋白、猪口蹄疫病毒IgG、猪布鲁氏杆菌病、猪传染性胃肠炎等。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/11/202311290939024874_272_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 动物疫病快速诊断仪检测项目分别有什么

    动物疫病快速诊断仪检测项目分别有什么

    [size=16px]  动物疫病快速诊断仪检测项目分别有什么  动物疫病快速诊断仪可检测的项目非常广泛,主要包括以下几类:  病毒类检测:如猪蓝耳病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪口蹄疫病毒、鸡禽流感病毒等。  细菌类检测:如猪布鲁氏杆菌病等。  毒素类检测:如黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2等。  药物残留检测:如盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、恩诺沙星、氯霉素、链霉素、三聚氰胺、庆大霉素、磺胺类、喹诺酮类、呋喃类、四环素类、阿莫西林、孔雀石绿等。  此外,动物疫病快速诊断仪还可以进行其他项目的检测,如猪细小病毒、猪喘气病、猪传染性胃肠炎等。这些检测项目涵盖了动物疫病的多个方面,为动物疫病的快速诊断提供了有力的支持。  云唐动物疫病快速诊断仪具有样品处理简单、操作迅速、安全可靠、方便快捷等特点,可广泛应用于畜牧、兽医、农业等领域,为动物疫病的防控和治疗提供了重要的技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402080958562096_7296_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 反应器细胞悬浮培养和微载体培养技术在动物疫苗生产中的应用

    张韧,王建超,陈文庆,刘华杰,高飞,徐舸辰,林龙飞(北京清大天一科技有限公司,北京102200) 反应器悬浮培养技术是目前国内外疫苗生产的热点之一,它可以极大提高疫苗的质量和生产率。介绍了该技术在国内外疫苗生产中的研发和应用现状,表明国内该技术目前已经在口蹄疫疫苗生产中获得成功应用,利用MDCK、Vero等细胞培养生产禽流感疫苗的技术也正在积极研发中,并将逐步替代传统的鸡胚生产工艺。积极推广和应用这一新型疫苗生产技术将是我国兽用生物制品行业升级换代的必然趋势。 生物反应器;悬浮培养;微载体培养;口蹄疫;禽流感 在我国,细胞反应器悬浮培养和微载体培养技术在动物疫苗生产领域的研发和应用正成为行业技术革新、产业升级的重要内容。农业部公告第1708号中明确规定,自2012年2月1日起,各省级兽医行政管理部门停止转瓶培养生产方式的兽用细胞苗生产线项目兽药GMP验收申请。该公告对动物疫苗生产技术升级做出了强制性规定。本文就反应器细胞悬浮培养和微载体培养技术在口蹄疫疫苗和禽流感疫苗生产中的国内外应用和发展进行了综述,分析了动物疫苗产业发展趋势和我国疫苗产业技术升级所面临的机遇和挑战。1 反应器悬浮培养技术在口蹄疫疫苗生产中的应用口蹄疫被认为家畜传染性疾病中传染性最强的一种疾病,国际兽医局(OIE)将之列为A类传染病。2010和2011年,在亚洲、非洲都有口蹄疫局部的爆发。接种安全、高效的疫苗是预防口蹄疫疫情发生的最有效策略之一。通常主要通过浓缩技术提高口蹄疫疫苗的有效抗原量来实现其高效性;通过病毒纯化工艺、有效的病毒灭活工艺来保证疫苗的安全性。反应器悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒能显著提高口蹄疫病毒抗原浓度。国际上先进的口蹄疫疫苗的生产工艺都采用反应器悬浮培养BHK21细胞技术、有效的病毒纯化工艺及二次病毒灭活工艺。当前,面对国内外严峻的口蹄疫防控形势,高质量的口蹄疫疫苗必将在口蹄疫防控中发挥关键作用。1.1 国外应用现状和发展趋势 BHK21细胞是繁殖口蹄疫病毒的理想宿主。20世纪60年代,许多国家实验室建立起了转瓶培养BHK21细胞繁殖口蹄疫病毒的生产系统。1962年BHK21细胞悬浮培养成功,细胞增殖迅速,并成功应用于口蹄疫病毒的生产。反应器悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒也就成为最普遍的口蹄疫疫苗生产方式,主要集中在印度、土耳其、巴西、阿根廷等国家(表1)。印度口蹄疫生产企业使用8000L反应器生产口蹄疫疫苗,南美口蹄疫疫苗生产企业一般采用3000~5000 L反应器生产口蹄疫疫苗,口蹄疫病毒抗原146S浓度大约在2 μg/mL。因为口蹄疫疫苗保护力与146S有正相关性,这些企业根据口蹄疫病毒146S来配制疫苗有效地保证了疫苗的质量。表1 国外部分悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗企业及其生产工艺http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/08/A1375859824_small.jpg*来自作者所属公司的客户信息调查但是,这种20世纪60年代开发的口蹄疫疫苗生产工艺延续至今,存在许多技术上的缺陷。国外口蹄疫疫苗生产使用的BHK21细胞培养液是添加磷酸肉汤(Tryptosephosphate broth, TPB)或水解乳蛋白(Lactalbumin hydrolysate, LAH)的GMEM及EMEM,再补加5%~10%牛血清(表1)。不同批次间血清质量差异引起细胞培养效果不稳定,导致影响疫苗生产工艺的稳定性和疫苗质量。疫苗中残留的血清蛋白使接种动物过敏反应升高,一定程度上影响疫苗的安全性。在口蹄疫强制免疫的国家,牛血清中存在含有抗口蹄疫病毒抗体的可能性,不仅影响病毒繁殖,而且可能导致口蹄疫病毒在抗体压力下选择性变异。牛血清中潜在污染朊病毒或疯牛病病毒可给动物疫苗带来潜在的生物危害,TPB或LAH等动物来源成份也存在安全隐患。为提升产品质量及安全性,目前国外多数口蹄疫疫苗生产厂家急于将现使用的含血清生产工艺升级为不含血清生产工艺。自从20世纪的80年代起,细胞培养基(液)发展迅速,低血清细胞培养基、无血清细胞培养基、无血清无动物来源成分细胞培养基已商品化,为疫苗生产中少使用或不使用血清奠定了物质基础。1.2 国内应用现状 默克密理博北京清大天一科技有限公司(以下简称“清大天一”)在国内较早开发了BHK21低血清细胞培养基和BHK21无血清无动物来源成分细胞培养基。2008年,清大天一开发了BHK21低血清细胞培养基及反应器悬浮培养BHK21技术,并于2009年成功应用到国内一家口蹄疫疫苗生产企业中。使用该工艺生产的口蹄疫抗原146S浓度可以达到3 μg/mL左右,工艺全过程管道化操作,产品内毒素含量低,口蹄疫疫苗生产和质量显著提高,同时生产成本下降30%。2009年,清大天一成功开发了BHK21无血清无动物来源成分培养基和反应器无血清悬浮培养BHK21细胞技术,并 2010年成功应用到国内某口蹄疫生产企业。相比于含血清悬浮培养工艺,无血清悬浮培养工艺具有巨大的技术优势。从种子库复苏BHK21细胞开始,到口蹄疫病毒繁殖、直至收获的全过程,不添加任何的血清和动物来源成分,消除了血清抗体对病毒繁殖的干扰,同时减轻了纯化压力。无血清悬浮培养BHK21细胞的细胞密度可以达到5×106~6×106/mL以上,为生产高浓度口蹄疫疫苗奠定了技术基础。图1是反应器无血清培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒的工艺流程图,相比于含血清口蹄疫病毒生产工艺,因实现细胞无血清培养,工艺过程无需沉降换液。 http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/08/A1375859832_small.jpg 图1 4000L反应器无血清悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒工艺流程目前国内某企业使用该工艺生产的口蹄疫疫苗正处于报批阶段,其他多家口蹄疫疫苗生产企业及研究单位也在研发或寻求无血清悬浮培养生产口蹄疫疫苗的工艺。

  • 【简讯】我国动植物检疫性疫病的分子检测技术取得显著进展

    国家“863计划”现代农业技术领域在动植物检疫性疫病的分子检测技术取得突破,开发出一批适用于口岸检疫和野外诊断的快速、特异、灵敏检测技术产品,研究成果获得2007年教育部科技进步一等奖. 研制出动物水泡性疾病分子鉴别检测试剂盒,并进行了验证应用。该试剂盒适合于水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、猪水泡病病毒的鉴别检测,适用于动物肌肉和内脏组织、淋巴结、扁桃体、肉品、血液、水泡皮、水泡液及OP液等样品的检测,具有特异性高、敏感性强和简便的特点。建立了基于反转录等温扩增技术的BTV、VSV、EHDV、AKV四种病毒快速检测方法。通过试验证明RT-LAMP 扩增技术是一种检测程序简单、灵敏度和特异性较高的基因检测手段,在BTV、VSV、EHDV、AKV病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力。目前正在进行LAMP快速检测试剂盒组装的研究工作。 采用AFLP、RFLP、RT-PCR、 PCR等分子生物学技术,分别以功能基因、核糖体 ITS等区域为靶标,筛选获得了大豆疫霉病、小麦矮腥黑穗病菌、水稻细菌性条斑病菌、瓜类果斑病菌和亚洲梨火疫病菌等10多种植物检疫性疫病检测的特异性分子靶标,并开发出PCR检测试剂盒。

  • 293万!浙江省动物疫病预防控制中心动物疫病监测试剂采购项目(第一批)

    一、项目基本情况 项目编号:CTZB-2024080188 项目名称:浙江省动物疫病预防控制中心动物疫病监测试剂采购项目(第一批) 预算金额(元):2932900 最高限价(元):182500,293400,165900,331200,179200,321900,236600,253800,211100,185000,115600,156700,180000,120000 采购需求: 标项一 标项名称:非洲猪瘟病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):182500 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:非洲猪瘟病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、非洲猪瘟病毒比对核酸样品,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:182500元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项二 标项名称:布鲁氏菌检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):293400 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:布鲁氏菌病竞争ELISA检测试剂盒、布鲁氏菌病虎红平板凝集试验抗原、布鲁氏菌病试管凝集试验抗原、布鲁氏菌比对血清样品,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:293400元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项三 标项名称:非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):165900 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、禽白血病病毒抗原ELISA 检测试剂盒、狂犬病毒抗体ELISA检测试剂盒、布鲁氏菌病抗体检测试纸条、猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病毒gB 蛋白ELISA 抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病毒gE 蛋白ELISA 抗体检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:165900元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项四 标项名称:禽流感病毒通用型荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):331200 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:禽流感病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、新城疫病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:331200元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项五 标项名称:禽流感病毒H5亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):179200 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:禽流感病毒H5亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒H9亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒H7N9亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒N6亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒N8亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原、新城疫病毒血凝抑制试验抗原,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:179200元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项六 标项名称:口蹄疫病毒抗体检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):321900 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:口蹄疫A型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA抗体检测试剂盒、口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC阻断ELISA抗体检测试剂盒、口蹄疫A型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA抗体检测用盲样、口蹄疫病毒竞争ELISA抗体检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:321900元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项七 标项名称:口蹄疫病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):236600 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:口蹄疫病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、口蹄疫病毒(O/A/Asia 1)荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、口蹄疫病毒塞内卡病毒双重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪伪狂犬病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪圆环病毒2型荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪腹泻病毒(PEDV/TGEV/轮状病毒)三重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪delta冠状病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征NADC-30毒株荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征NADC-34毒株荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、布鲁氏菌荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:236600元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项八 标项名称:小反刍兽疫病毒检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):253800 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:小反刍兽疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(阻断法)、小反刍兽疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(竞争法)、小反刍兽疫病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 检测试剂盒、小反刍兽疫病毒野毒株与疫苗株双重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、小反刍兽疫病毒核酸比对样品,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:253800元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项九 标项名称:复核比对用检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):211100 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:禽白血病AB亚群抗体检测试剂盒、禽白血病J亚群抗体检测试剂盒、非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、非洲猪瘟病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒 布鲁氏菌病竞争ELISA抗体检测试剂盒、布鲁氏菌病间接ELISA抗体检测试剂盒、禽流感病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽白血病病毒J/AB亚群通用荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽白血病病毒JAB/K亚群通用荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽白血病荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、牛A型流感病毒H5N1亚型抗体检测试剂盒、禽流感病毒通用型抗原检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号; 最高限价:211100元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项十 标项名称:禽流感病毒H10亚型荧光检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):185000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:禽流感病毒H10亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、禽流感病毒H6亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒禽流感病毒N1-N9亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒、禽流感病毒H3N8亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒、禽流感病毒其他亚型(H1、H2、H4、H8、H11、H12、 H13、H14、 H15、H16)荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47794号、[2024]47795号; 最高限价:185000元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项十一 标项名称:流感病毒快速分型检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):115600 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:甲型流感病毒HxNy快速分型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47795号; 最高限价:115600元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项十二 标项名称:核酸提取试剂盒 数量:1 预算金额(元):156700 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:预分装核酸提取及纯化试剂,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]49975号; 最高限价:156700元; 项目属性:货物项目(非进口产品)。 标项十三 标项名称:猪瘟病毒ELISA抗体检测等试剂盒 数量:1 预算金额(元):180000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病毒gE抗体检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47935号; 最高限价:180000元; 项目属性:货物项目(接受进口产品)。 标项十四 标项名称:猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒 数量:1 预算金额(元):120000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途:猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒,具体内容详见招标文件。 备注:采购依据:[2024]47935号; 最高限价:120000元; 项目属性:货物项目(接受进口产品)。 合同履约期限:标项 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14,按招标文件规定 本项目(是)接受联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;未被“信用中国”(www.creditchina.gov.cn)、中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)列入失信被执行人、重大税收违法失信主体、政府采购严重违法失信行为记录名单。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求:标项1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11:(1)本标项为货物项目,本标项标的属于【工业】行业,要求全部采购由中小企业制造的货物,即货物由中小企业生产且使用该中小企业商号或者注册商标。中小企业是指满足《政府采购促进中小企业发展管理办法》(财库〔2020〕46号)第二条规定的企业,监狱企业、残疾人福利性单位视为小型、微型企业。 标项12、13、14:无。 3.本项目的特定资格要求: 【标项1、2、3、4、5、6、7、8、9】 (1)单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人,不得参加本标项的政府采购活动; (2)根据《关于规范政府采购供应商资格设定及资格审查的通知》(浙财采监〔2013〕24号)第6条规定接受金融、保险、通讯等特定行业的全国性企业所设立的区域性分支机构(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,获得总公司(总机构)授权或能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力)、以及个体工商户、个人独资企业、合伙企业(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力); (3)为本标项提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商不得参加本标项的政府采购活动; (4)电子交易平台运营机构,以及与该机构有直接控股或者管理关系可能影响采购公正性的任何单位和个人,不得在该平台进行的政府采购项目电子交易中投标、响应和代理政府采购项目; (5)投标人为采购人提供货物须满足《兽用生物制品经营管理办法》的要求; (6)接受联合体,联合体参加本标项的政府采购活动应满足以下条件: ◇两个以上的自然人、法人或者其他组织可以组成一个联合体,以一个投标人的身份共同参加本标项的政府采购活动,联合体在投标文件中提供联合体协议并明确分工; ◇联合体主办单位和成员单位均应具备资格要求1、2及特定资格要求第(1)(2)(3)(4)(5)项; ◇联合体中有同类资质的供应商按照联合体分工承担相同工作,按资质等级较低的供应商确定资质等级; ◇联合体各方不得再单独参加或与其他供应商另外组成联合体参加本标项的政府采购活动。 【标项10、11、12】 (1)单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人,不得参加本标项的政府采购活动; (2)根据《关于规范政府采购供应商资格设定及资格审查的通知》(浙财采监〔2013〕24号)第6条规定接受金融、保险、通讯等特定行业的全国性企业所设立的区域性分支机构(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,获得总公司(总机构)授权或能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力)、以及个体工商户、个人独资企业、合伙企业(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力); (3)为本标项提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商不得参加本标项的政府采购活动; (4)电子交易平台运营机构,以及与该机构有直接控股或者管理关系可能影响采购公正性的任何单位和个人,不得在该平台进行的政府采购项目电子交易中投标、响应和代理政府采购项目; (5)接受联合体,联合体参加本标项的政府采购活动应满足以下条件: ◇两个以上的自然人、法人或者其他组织可以组成一个联合体,以一个投标人的身份共同参加本标项的政府采购活动,联合体在投标文件中提供联合体协议并明确分工; ◇联合体主办单位和成员单位均应具备资格要求1、2及特定资格要求第(1)(2)(3)(4)项; ◇联合体中有同类资质的供应商按照联合体分工承担相同工作,按资质等级较低的供应商确定资质等级; ◇联合体各方不得再单独参加或与其他供应商另外组成联合体参加本标项的政府采购活动。 【标项13、14】 (1)单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人,不得参加本标项的政府采购活动; (2)根据《关于规范政府采购供应商资格设定及资格审查的通知》(浙财采监〔2013〕24号)第6条规定接受金融、保险、通讯等特定行业的全国性企业所设立的区域性分支机构(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,获得总公司(总机构)授权或能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力)、以及个体工商户、个人独资企业、合伙企业(应依法办理了工商、税务和社保登记手续,能够提供房产权证或其他有效财产证明材料,能证明其具备实际承担责任的能力和法定的缔结合同能力); (3)为本标项提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商不得参加本标项的政府采购活动; (4)电子交易平台运营机构,以及与该机构有直接控股或者管理关系可能影响采购公正性的任何单位和个人,不得在该平台进行的政府采购项目电子交易中投标、响应和代理政府采购项目; (5)投标人须具有有效的兽药经营许可证; (6)接受联合体,联合体参加本标项的政府采购活动应满足以下条件: ◇两个以上的自然人、法人或者其他组织可以组成一个联合体,以一个投标人的身份共同参加本标项的政府采购活动,联合体在投标文件中提供联合体协议并明确分工; ◇联合体主办单位和成员单位均应具备资格要求1、2及特定资格要求第(1)(2)(3)(4)(5)项; ◇联合体中有同类资质的供应商按照联合体分工承担相同工作,按资质等级较低的供应商确定资质等级; ◇联合体各方不得再单独参加或与其他供应商另外组成联合体参加本标项的政府采购活动。 三、获取招标文件 时间:/至2024年09月02日 ,每天上午00:00至12:00 ,下午12:00至23:59(北京时间,线上获取法定节假日均可,线下获取文件法定节假日除外) 地点(网址):浙江政府采购网(http://zfcg.czt.zj.gov.cn/); 方式:投标人通过“浙江政府采购网”在线获取(招标公告下方选取“潜在供应商”处“获取采购文件”),不提供纸制版招标文件;投标人只有在“浙江政府采购网”完成获取招标文件申请并下载了招标文件后才视作依法获取招标文件; 售价(元):0 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间:2024年09月02日 09:30(北京时间) 投标地点(网址):政府采购云平台(https://www.zcygov.cn)。 开标时间:2024年09月02日 09:30 开标地点(网址):在政府采购云平台(https://www.zcygov.cn)上开启投标文件; 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.《浙江省财政厅关于进一步发挥政府采购政策功能全力推动经济稳进提质的通知》(浙财采监(2022)3号)、《浙江省财政厅关于进一步促进政府采购公平竞争打造最优营商环境的通知》(浙财采监(2021)22号))、《浙江省财政厅关于进一步加大政府采购支持中小企业力度助力扎实稳住经济的通知》(浙财采监(2022)8号)已分别于2022年1月29日、2022年2月1日和2022年7月1日开始实施,此前有关规定与上述文件内容不一致的,按上述文件要求执行。 2.根据《浙江省财政厅关于进一步促进政府采购公平竞争打造最优营商环境的通知》(浙财采监(2021)22号)文件关于“健全行政裁决机制”要求,鼓励供应商在线提起询问,路径为:政采云-项目采购-询问质疑投诉-询问列表:鼓励供应商在线提起质疑,路径为:政采云-项目采购-询问质疑投诉-质疑列表。质疑供应商对在线质疑答复不满意的,可在线提起投诉,路径为:浙江政府服务网-政府采购投诉处理-在线办理00-888-4636;天谷CA 400-087-8198。

  • 悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的比较分析

    作者: 陈文庆 王建超 刘华杰 高飞 张韧 (北京清大天一科技有限公司 102200 ) (《中国兽药杂志》 2010.44 ( 10 ): 37-41 )【摘要】 采用反应器全悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒与微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病毒分别与相应的转瓶培养工艺生产案例对比分析,比较悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的生产效益。分析显示,与转瓶培养工艺相比,反应器悬浮培养工艺获得的细胞密度、病毒效价、产品的产量和质量明显提高,生产时的能耗和劳动力需求明显降低。结果表明悬浮培养工艺的生产效益明显高于转瓶培养工艺,适宜于国内生物制品工业化生产的升级换代。【关键词 】 细胞培养;生物反应器;悬浮培养;微载体细胞悬浮培养技术是指细胞在生物反应器中自由悬浮于培养液内生长增殖的一种培养方法。根据细胞是否贴壁,又分为全悬浮细胞培养和贴壁细胞微载体培养。国际上该项技术发展较快,已趋向成熟,是疫苗、抗体等生物制品生产的普遍生产工艺模式。与转瓶培养技术相比,该工艺具有操作简单、产率高、容易放大等优点,本文结合口蹄疫病毒和狂犬病毒的生产,分别对细胞悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的经济效益等进行了分析和分析。1. 全悬浮培养口蹄疫病毒与转瓶培养案例对比高效、安全的病毒性疫苗是防止口蹄疫情发生的最有效方法。BHK21细胞是繁殖FMDV的理想宿主,早在1962年Capstick PB等就实现FMDV的悬浮培养。1965年Telling, R.C.等实现在不锈钢发酵罐中悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗。目前国外(Intervet公司、Merial公司)普遍已经采用2000~5000L反应器悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫苗。本文就本公司自主研发的650L生物反应器和无血清培养基进行悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗与转瓶培养工艺进行比较和分析。1.1主要材料细胞株:BHK21贴壁细胞株(中国兽医药品监察所)毒 株:FMDV-O型(某兽用疫苗企业)培养基:低血清MEM培养基(产品代号MD611)、BHK21细胞无血清培养基(北京清大天一科技有限公司)血 清:特级新生牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)仪 器:5 L反应器(德国贝朗),120L和650LCLAVORUS ® 生物反应器(北京清大天一科技有限公司)1.2实验方法1.2.1转瓶培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒将复苏的BHK21细胞在T75培养瓶中使用低血清培养基(含5%牛血清)培养,连续传代扩增接种15L转瓶,37 ℃培养48小时,传代比例为1:8-1:10,按常规方法接种病毒及维持液,细胞病变90%左右收获病毒液。1.2.2反应器全悬浮无血清培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒(1)贴壁细胞悬浮驯化培养:用BHK21细胞无血清培养基在恒温摇床或者方瓶中无血清驯化贴壁BHK21细胞,可采用直接驯化或者逐级降低血清驯化等方法,每代观察细胞数量和细胞活率,直至BHK21细胞在无血清培养基中的生长增殖速率正常,细胞活率达95%以上,并可连续稳定传代,说明细胞已适应无血清悬浮培养。(2)反应器用种子细胞扩增:采用反应器罐倒罐逐级放大技术,细胞从摇瓶→5 L反应器→120 L反应器→650 L反应器进行逐级放大培养。细胞培养方式为批培养,控制反应器各参数在正常范围:温度37.0 ℃、pH7.2~7.4、溶氧(DO)20~70%、搅拌转速50~150 r/min。(3)反应器培养口蹄疫病毒:待650 L反应器中细胞达到一定密度,提高培养pH至7.5左右,按一定比例直接接种口蹄疫病毒进行病毒维持培养,控制温度、pH、DO、搅拌转速等参数在合适范围,在线无菌间隔取样判断细胞病变情况并检测病毒毒价(LD50,TCID50),确定收获的最佳时间。1.3 细胞培养结果对比分别对低血清培养基15 L转瓶培养的贴壁BHK21细胞进行观察和细胞计数,反应器全悬浮培养的BHK21细胞取样进行数量和活率检测。培养条件和结果对比见表1。表1 转瓶培养和反应器全悬浮培养BHK21细胞对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442105_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442106_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442107_small.jpg 图1 转瓶BHK21细胞低血清培养48 hr,100X 图2 反应器全悬浮无血清培养48 hr,100X 结果显示,转瓶培养的BHK21细胞,培养48小时显微镜观察成致密单层,见图1,96小时细胞开始出现脱落死亡;反应器无血清全悬浮培养BHK21细胞48小时的细胞显微镜观察状态如图2,生长至96小时细胞密度可达5.4x106 cells/ml,活率维持在94%左右。从细胞数量比较,650L反应器培养一批的细胞数量相当于500~700个15 L转瓶培养的细胞总量。1.4 病毒培养效果对比两种不同培养工艺,细胞在满足活力要求的基础上,以同等条件分别接种FMDV病毒,取样测定病毒毒价,结果见表2。 表2 转瓶和反应器全悬浮培养BHK21细胞病毒毒价对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442112_small.jpg结果表明,无血清悬浮培养的口蹄疫病毒毒价(TCID50和LD50)检测不低于转瓶培养工艺。根据反应器低血清悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫完整病毒粒子(146S)检测较转瓶高10倍左右的情况,应用无血清悬浮培养工艺,杂蛋白含量更少,口蹄疫完整病毒粒子和口蹄疫疫苗质量均提高。1.5 反应器和转瓶经济效益估算对比依据培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒工艺过程要求,从细胞密度、病毒毒价、产品效力、资源环境、劳动力等方面进行简单对比,借以一窥二者的经济效益差别(见表3)。 表3 反应器无血清悬浮培养与转瓶培养BHK21细胞经济效益对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442114_small.jpg*按照反应器无血清悬浮培养一条生产线(5L-120L-650L)、转瓶体积15 L进行对比按照目前培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒质量要求,对悬浮无血清培养工艺的产能进行预估,一条5L-120L-650L的反应器生产线年生产病毒量约为2.1亿毫升,生产疫苗量约为4.2亿毫升。2. 人狂犬病毒微载体培养与转瓶培养的对比我国是受狂犬病危害最为严重的国家之一,近年报告狂犬病死亡人数均在2400人/年以上,一直位居我国各类传染病报告死亡数的前三位,根据有关国家成功控制狂犬病的经验,世界卫生组织提出倡议,到2020年消除人狂犬病。我国距此倡议目标还有大量工作要做,国内也对人用和兽用狂犬病疫苗的生产做了大量研究工作。下面就120L反应器微载体培养Vero细胞生产狂犬病毒效果与转瓶培养工艺和培养效果比较分析。2.1主要材料细胞株:Vero细胞株毒 株:aG株(细胞株和毒株均来自某人用疫苗企业)培养基:低血清199培养基(产品代号MD504)、 Vero细胞反应器培养用培养基(产品代号MD505), 均来自北京清大天一科技有限公司仪 器:5 L反应器(德国贝朗)、120LCLAVORUS ® 生物反应器(北京清大天一科技有限公司)血 清:特级新生牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)微载体:Cytodex 1 (美国GE

  • 口蹄疫免疫失败或不理想的原因

    奥克斯高老师的总结,给大家分享下。 第一、疫苗运输过程中,因为环节多,有些过程没有做到冷链运输和保存,造成抗原滴度下降。 第二、疫苗中抗原含量不够,杂蛋白含量高。因此按说明免疫,效果不理想。 第三、免疫的时间不合理。口蹄疫流行的时间为每年的12月到第二年的4月,南方流行的时间要早一点,北方流行的稍晚一些。今年情况比较特殊,天气回暖慢,流行的时间稍长一些。那疫苗就不能全年均衡防疫,重点流行时期重点防疫。 第四、管理的问题。口蹄疫A型、O型、亚I疫苗,三种疫苗没有打全,漏打情况很严重,特别是育成牛,有一个管理还相当规范的牛场,疫苗漏打占到10%。 第五、不做抗体检测,就不能判断疫苗效果是否理想,就不了解牛群的抗体水平是否能够达到保护。 第六、思想问题,自认为口蹄疫疫苗打了也不管事,对此项工作应付了事,畜牧局给什么疫苗就打什么疫苗,因此部分牛场漏打疫苗,有些场只注射了O型和I型,没注射A型苗 。 第七、疫病流行时,盲目打疫苗,没有科学的根据。

  • 【讨论】口蹄疫能通过奶粉传播吗?——读《中国暂停进口日本奶粉》有感

    [size=4]读到广州日报的一则新闻[b] 中国暂停进口日本奶粉 邮购或携带均禁止入境[/b][/size][b]目前商场仍有售有中文标识的日本奶粉均为疫情发生前生产,仍可放心购买口蹄疫不传人,且奶粉都已经过高温消毒不会让人感染疫情[/b]本报讯 (记者林晓丽)昨日,记者从广东省检验检疫局了解到,自4月初日本宫崎县口蹄疫蔓延后,我国已暂停日本奶粉等相关产品的进口。但一些市民仍不知此事,广东出入境检验检疫局相关负责人向市民发出提醒:市民应该从国家动物防疫全局出发,同时也为了免遭不必要的损失,切勿携带日本奶粉入境。[b]禁止日本奶粉进口是从动物防疫角度出发,而非食品安全的角度[/b][color=#f10b00]根据《中华人民共和国进出境动植物检疫法》[/color]等有关法律法规的规定,日本发生口蹄疫后,国家质检总局和农业部于4月30日联合发布公告,禁止直接或间接从日本输入[color=#f10b00]偶蹄动物及其产品[/color],停止签发从日本进口偶蹄动物及其产品的《进境动植物检疫许可证》。据介绍,[color=#d40a00]暂停进口的产品包括日本奶粉、牛奶、牛肉等一切相关产品,这些产品都有传播口蹄疫疫情的风险。[/color]这些产品是依据国际动物卫生组织的准则设定的,也是得到国际动物卫生组织认可的。“除了奶粉,从2001年8月日本出现亚洲首例疯牛病以来,国家质检总局就已停止从日本等国进口畜产品,至今未解禁。因此,日本此次疫情对国内牛肉市场的供应未有影响。”广东检验检疫局相关负责人补充道,不过,此次禁止主要是从国家动物防疫角度出发的,并非是食品安全角度。因为口蹄疫不传人,而且奶粉都是经过高温消毒的,人也不会因为喝了奶粉而被感染口蹄疫。[color=#d40a00][size=4]思考:疫区内的动物及其产品存在传播病毒的风险,那么经过高温消毒的奶粉等乳制品,这样的风险大不大,请大家从技术角度参与讨论。[/size][/color]

  • 195万!邢台疫控中心检测试剂采购项目

    [b][font=黑体]一、项目基本情况[/font][/b][font=仿宋]项目编号:[/font][font=仿宋]HBSK2023-028[/font][font=仿宋]项目名称:[/font][font=仿宋]邢台疫控中心检测试剂采购项目[/font][font=仿宋]预算金额:[/font][font=仿宋]1952950[/font][font=仿宋]最高限价(如有):[/font][font=仿宋]1952950元,其中一标段:905450元,二标段1952950元[/font][font=仿宋]采购需求:[/font][font=仿宋]一标段:禽流感血凝抑制抗原H5 RE-13、禽流感血凝抑制抗原H5 RE-14、禽流感血凝抑制抗原H7 RE-4、新城疫血凝抑制试验抗原、布病虎红平板凝集试验抗原、提纯牛型结核菌素、口蹄疫病毒O型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA抗体检测试剂盒、口蹄疫病毒A型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA抗体检测试剂盒、口蹄疫病毒O型竞争ELISA抗体检测试剂盒、口蹄疫病毒A型竞争ELISA抗体检测试剂盒、猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒、伪狂犬病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒、小反刍兽疫病毒间接ELISA抗体检测试剂盒、非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒、口蹄疫病毒O型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、口蹄疫病毒A型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪瘟病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征病毒通用型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、小反刍兽疫病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、牛结节性皮肤病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、布鲁氏杆菌荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、磁珠法核酸提取试剂盒、离心柱法核酸提取试剂盒二标段:非洲猪瘟病毒(P72/ CD2v/MGF)三重荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、非洲猪瘟病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]核酸检测试剂盒、禽流感病毒H5/H7/H9亚型三重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒、新城疫病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒。[/font][font=仿宋]合同履行期限:[/font][font=仿宋]自合同签订之日起60日历天[/font][font=仿宋][font=仿宋]本项目[/font]不接受联合体投标。[/font][b][font=黑体]二、申请人的资格要求:[/font][/b][font=仿宋]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;[/font][font=仿宋]2.落实政府采购政策需满足的资格要求:落实政府采购政策需满足的资格要求:根据《政府采购促进中小企业发展管理办法》中有关规定,本项目专门面对小微企业采购,供应商应为小型企业、微企业、监狱企业、残疾人福利性单位;[/font][font=仿宋]3.本项目的特定资格要求:无[/font][b][font=黑体]三、获取招标文件[/font][/b][font=仿宋]时间:[/font][font=仿宋]2023年11月01日至2023年11月07日,每天上午00:00至12:00,下午12:00至23:59[/font][font=仿宋](北京时间,法定节假日除外)[/font][font=仿宋]地点:[/font][font=仿宋]通过“邢台市公共资源交易网 ”或“惠招标电子招投标交易平台 ”(www.hbidding.com)免费自行下载。[/font][font=仿宋]方式:[/font][font=仿宋]其它[/font][font=仿宋]售价:[/font][font=仿宋]0[/font][b][font=黑体]四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点[/font][/b][font=仿宋]2023年11月21日09点00分[/font][font=仿宋](北京时间)[/font][font=仿宋]地点:网上开标,供应商应及时登录“惠招标 ”平台在线参与开标。[/font][b][font=黑体]五、公告期限[/font][/b][font=仿宋]自本公告发布之日起[/font][font=仿宋]5个工作日。[/font][b][font=黑体]六、其他补充事宜[/font][/b][font=仿宋]1.已在“河北省公共资源交易服务平台 ”注册登记的供应商/投标人,办理河北CA数字证书后,可直接登录惠招标电子招投标交易平台下载招标文件。2.未经资格确认(注册登记)的供应商/投标人,请按照“邢台市公共资源交易中心关于市场主体登记注册的通知 ”的要求办理相关手续,具体事宜可联系 0319-2686133。3.投标文件需使用CA数字证书加盖电子签章并进行加密。办理河北CA可咨询400-707-3355。4.潜在投标人(供应商)如对招标文件有疑问或异议的,可以在规定时间内通过邢台市公共资 源交易平台选择“惠招标电子招投标交易平台 ”提出。若投标人(供应商)在使用“惠招标电子招投标交易平台 ”的过程中遇到任何操作性问题,可咨询客服电话:400-780-9998。5.招标文件等资料发布后,即视为已送达所有潜在供应商/投标人,潜在供应商/投标人须从“邢台市公共资源交易网 ”、“惠招标电子招投标交易平台 ”自行下载,并及时查看有无澄清或修改。潜在供应商/投标人未下载相关资料,或未获取到完整资料,导致投标被否决的, 自行承担责任。6.本公告发布媒体:中国河北政府采购网、邢台市公共资源交易网、惠招标电子招投标交易平台。7.(6)特别说明:依据冀财采﹝2023﹞14 号文,本项目投标文件技术标部分采用暗标方式编制及评审,即供应商在编制投标文件技术标部分时屏蔽供应商名称等信息,评标专家进行“盲抽”,对技术标进行“盲评”。[/font][b][font=黑体]七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。[/font][font=仿宋]1.采购人信息[/font][/b][font=仿宋]名[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]称:[/font][font=仿宋]邢台市农业农村局本级[/font][font=仿宋]地[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]址:[/font][font=仿宋]邢台市襄都区新华南路256号[/font][font=仿宋]联系方式:[/font][font=仿宋]0319-3163209[/font][b][font=仿宋]2.采购代理机构信息(如有)[/font][/b][font=仿宋]名[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]称:[/font][font=仿宋]河北硕柯工程管理有限公司[/font][font=仿宋][font=仿宋]地[/font] [font=仿宋]址:[/font][/font][font=仿宋]河北省邢台市信都区团结路石油巷7号门市[/font][font=仿宋]联系方式:[/font][font=仿宋]0319-7518777[/font][b][font=仿宋]3.项目[/font][font=仿宋]联系方式[/font][/b][font=仿宋]项目联系人:[/font][font=仿宋]陈虎[/font][font=仿宋][font=仿宋]电[/font] [font=仿宋]话:[/font][/font][font=仿宋]0319-7518777[/font]

  • 【技术@创新】病毒功用:并非一无是处 也有对人类有益的一面

    一般人对病毒的理解往往是负面的,因为无论是口蹄疫、疯牛病还是非典、禽流感或是肝炎、艾滋病,病毒给人类带来了巨大的损失和灾难。然而,病毒也并非一无是处,它也有对人类有益的一面。 病毒是一类特殊的微生物,化学组成简单,按宿主不同可分为动物病毒、植物病毒和微生物病毒。病毒形体极其微小,只有在电子显微镜下才能观察到,而且只能利用宿主细胞才能进行增殖。 科学家在努力寻找对付病毒办法的同时,也发现了病毒的用途。 柯萨奇病毒是一类常见的经呼吸道和消化道感染人体的病毒,感染后人会出现发热、打喷嚏、咳嗽等感冒症状。澳大利亚科学家最新实验发现,利用柯萨奇病毒可以精准地杀死乳腺癌的癌细胞,而不伤害人体正常细胞,而用化疗和放疗治疗癌症的过程中,正常的人体细胞也会受到“株连”。

  • 【原创大赛】动物疫病荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践

    动物疫病荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践1 背景近几十年来,动物疫病的发生与发展越来越趋向频繁、复杂,造成的危害也不断加重。究其原因:一是动物数量大幅度增加,集约化程度不断提高。据《中国统计年鉴》:1990年底全国猪、羊存栏分别为5668万头、11362万头,2015年底则分别为45803万头、31174万头,分别增加7.08倍、1.74倍;二是动物调运频繁、距离不断延长。以前动物调运仅限省内或周边省市,现在动辄上千公里甚至数千公里。据报道:“从2013年底到2014年的上半年,我国新疆、甘肃、内蒙古、宁夏等省区接连爆发了较为严重的小反刍兽疫疫情,而后疫情逐渐扩展地全国20余个省份,造成了严重的经济、社会影响”(《中国畜牧业》2014年第21期《小反刍兽疫爆发对我国肉羊产业发展的影响》)。三是人畜共患病种类不断增加。2012年6月加拿大Haroling教授报告,目前人类已发现1000多种动物病原体,其中有600种存在于家畜之中,在这600种病原体中有40%的病原体为人畜共患病。从国内情况看,进入21世纪以来,禽流感(H5亚型、H7N9)、甲型H1N1流感、SARS、猪链球菌病2型、布氏杆菌病、结核、乙脑、狂犬病等人畜共患病不断发生。为确保公共卫生安全,以及畜牧业健康发展,有必要实施动物疫病的核酸监测,尽早发现疫情隐患并予以及时处置,避免重大动物疫情及公共卫生安全事件发生。2 常用试剂盒的缺点目前,动物疫病(主要指病毒病)核酸检测一般采用商品化荧光PCR试剂盒,多由双组分组成且独立保存,使用前按一定比例(一般PCR反应液与酶混合液体积比为9:1)混匀后用于检测。这种试剂盒存在几个缺点:一是只能用于某一特定的动物疫病检测,如果检测任务中途发生大幅度削减,则试剂盒只能作报废处理;二是试剂盒中有的组分容易缺斤少两,尤其是酶混合液更是如此。每个样品约需酶混合液1.2μL,一般10T试剂盒装量为15μL,50T试剂盒酶混合液装量为70[font=宋体-方正超大字符集][size=18px]μL[/size][/font],按理说应该足够使用。但实际检测中会出现10T试剂盒酶混合液只能检测7T,50T试剂盒酶混合液只能检测40T,严重影响检测工作的正常开展。分析其原因,可能与容器密闭不严、酶混合液中的水分在冰冻状态升华等有关;三是试剂盒中的引物探针信息缺失。出于保护商业秘密考虑,几乎所有试剂盒均对引物探针的具体序列进行保密。作为第三方检测机构,在开展检测工作时,应优先使用标准方法,并确保使用标准的有效版本。在使用标准方法前,应进行证实。在使用非标准方法(含自制方法)前,应进行确认。但由于试剂盒厂家不提供引物探针序列,检测机构无法判定使用试剂盒开展的检测是否符合标准方法的要求。另外,商品化试剂盒一般免费附带核酸提取试剂,但提取试剂根据检测项目的不同,一般为DNA专用提取试剂或RNA专用提取试剂。当一批样品要检测多种DNA及RNA病毒项目时,需要同时进行两次核酸提取,不仅费时费力且浪费试剂。由于上述缺点的存在,给动物疫病检测带来了不少麻烦。3 模块化检测方法的构建思路针对商品化试剂盒存在的缺点,进行了模块化检测方法的构建。总体思路是:将动物疫病荧光定量PCR检测分为三个模块,核酸提取采用DNA/RNA共提试剂,核酸扩增采用预混液+引物探针方式,质控品利用抗原或商品化疫苗自制。具体思路如下:——核酸提取采用DNA/RNA共提试剂;——引物探针严格按照标准方法,委托生物工程公司合成;——反应体系中其他成分,采购商品化qPCR预混液或RT-qPCR预混液(含逆转录酶);——质控品:阳性对照采用病毒抗原、商品化疫苗等,测定结果后按一定比例稀释,保存备用。——反应体系:一律固定为20μL,具体如下:[table][tr][td]DNA扩增[/td][td]RNA扩增[/td][/tr][tr][td=1,2]qPCR预混液(2×) 10μL[/td][td]RT-qPCR预混液(2×) 10μL[/td][/tr][tr][td]逆转录酶 1μL[/td][/tr][tr][td]ROX 0.4μL[/td][td]ROX 0.4μL[/td][/tr][tr][td]引物探针 适量[/td][td]引物探针 适量[/td][/tr][tr][td]水 补足18μL[/td][td]水 补足18μL[/td][/tr][tr][td]DNA模板 2μL[/td][td]RNA模板 2μL[/td][/tr][/table]——反应条件首先按照标准中的条件开展摸索,如达到预期效果则予以固定;如效果不佳则参照预混液及引物探针推荐条件进行适当调整。根据上述思路,一个实验室只需配备DNA/RNA共提试剂、qPCR预混液、RT-qPCR预混液共3种试剂,加上特定的引物探针,即可开展多种动物疫病的检测。此配置有以下优点:一是试剂通用性强。实验室只需配备DNA/RNA共提试剂、qPCR预混液(针对DNA病毒)、RT-qPCR预混液(针对RNA病毒)三种主要试剂,以及不同的引物探针,即可开展几种甚至几十种检测项目;二是灵活方便。根据动物疫病的发生发展,实验室可以随时调整检测项目和检测数量。以RT-qPCR预混液为例,不仅可以用于检测禽流感,也可以用于检测口蹄疫、猪瘟、蓝耳病等项目。实验室常备一定数量的预混液,当某个项目检测量突然增加时,可利用预混液的通用特性,迅速完成检测任务,尔后再采购预混液进行补充。当某个项目因故取消时,也可将预混液用于其他项目的检测,不致于造成大量浪费。三是方便开展项目检测。当突发新的重大疫情,上级有关部门公布引物探针序列及扩增程序后,可以委托生物工程公司紧急合成引物探针,利用现有的预混液,在几天内即可具备新方法的检测能力,而这一点是成品试剂盒很难做到的。4 质控品制备对于病毒核酸荧光定量PCR检测,每次实验都必须设立阴性对照和阳性对照。一般情况下,在核酸提取和核酸扩增,需分别设立阴性对照和阴性对照,也就是说每次检测至少需要设立E-(核酸提取阴性对照)、E+(核酸提取阳性对照)、R-(核酸扩增阴性对照)、R+(核酸扩增阳性对照)共4个质控。在开展多次检测,结果稳定后,可以仅使用E-/E+或R-/R+。阴性对照可用DEPC水,阳性对照是否可以利用商品试剂盒附带的质控品?经过部分项目的检测,证明大部分商品试剂盒附带的质控品,均无法作为实验室自制的准标准方法的阳性对照。原因可能是商品试剂盒质控品系根据其专有的引物探针(与检测标准不一致)扩增片段制成质粒,只能使用其特有的引物探针才能检测到。因此,需要自制阳性对照用于质控。对于基层实验室来说,制备质粒或者假病毒非常困难,较可靠的办法是直接利用全病毒来制备阳性对照,具体思路如下:——对于禽流感、新城疫、口蹄疫等项目,由于商品化试剂盒附带有全病毒抗原,可以尝试使用这些抗原来制备阳性对照;——对于蓝耳病、伪狂犬、圆环病毒、小反刍兽疫等项目,由于已经有商品化疫苗上市,可以尝试使用商品化疫苗来制备;——对于部分既无全病毒抗原又无商品化疫苗的检测项目,在不违反法律法规及部门规定的情况下,可以利用已确认阳性的病毒核酸,适当稀释后作为核酸扩增阳性对照(R+);或者将病毒核酸用已灭活的阴性血浆作适当稀释,复原成模拟阳性样品,作为核酸提取阳性对照(E+)。5 应用根据上述思路,进行了相关实验,取得了初步成果。现简要汇报如下:——核酸提取采用FastPure Viral DNA/RNA Mini Kit试剂盒,南京诺维赞生产,可以实现多种样品的DNA/RNA共提;——引物探针按照相应国家标准提供的序列,委托上海生工合成,引物稀释成10μmol/L、探针稀释成5μmol/L,分装成小包装冷冻保存备用;——qPCR预混液采用AceQ Universal U+ Probe Master Mix V2,RT-qPCR预混液采用2× One Step Q Probe Mix,逆转录酶采用One Step Q Probe Enzyme Mix,均为南京诺维赞生产;——质控品:禽流感选用血凝抑制抗原,口蹄疫选用液相阻断ELISA抗原,其他选用商品化疫苗,测定结果后用灭菌水稀释至Ct值约25~30,冷冻保存备用;——反应体系:设置为20μL,预混液(2×)10μL、逆转录酶1μL、ROX 0.4μL为固定量,引物探针加入量根据检测标准中的终浓度予以换算,加灭菌水补足18μL,DNA或RNA模板为2μL;——反应条件:绝大多数项目直接套用检测标准中的反应条件,效果良好不需要调整。6 讨论6.1 检测工作更加简捷高效模块化检测方法,极大地方便了检测工作的开展。目前实验室经常开展的检测项目有10余个,如果采用商品化试剂盒,则每个检测项目需专用的试剂盒,采购、保存和使用等各个环节,均显得很不方便。改用模块化检测方法后,只需要1种核酸提取试剂和2种扩增试剂,加上各检测项目专用的引物探针,即可开展多个项目的检测。6.2 适用性有待进一步验证尽管在构建新方法时,对适用性进行了尽可能多的验证,如对于动物A型流感,就验证了H5亚型Re-4、Re-5、Re-6、Re-7、Re-8、Re-10、Re-11、Re-12,以及H7亚型、H7N9、H7N9Re-1、H7N9Re-2等毒株的抗原,均证实有效。但对于其他毒株,尤其是较新型的变异株是否有效,尚有待进一步观察和验证。6.3 关于质控品质控品在某个检测方法中,起到非常重要的作用。E-出现阳性结果可能是核酸提取过程中受到污染,E+出现阴性结果可能是核酸提取试剂失效或提取过程出现问题,R-出现阳性结果可能是核酸扩增试剂受到污染,R+出现阴性结果可能是核酸扩增试剂失效。根据E-/E+/R-/R+的扩增结果,大致可以判断核酸提取和核酸扩增过程是否出现问题。阴性对照一般可用灭菌水代替,阳性对照可选用扩增效果较好的抗原或疫苗。6.4 规范操作避免污染由于阳性对照使用的是全病毒抗原或疫苗,一旦造成实验室内部环境污染,更换引物探针等方法无法有效消除污染。因此在实验操作各环节均要严格规范,阳性对照要事先经过可靠灭活,并尽可能降低其使用浓度,扩增产物、实验废弃物需进行无害化处理,以避免引起实验室内部环境污染和其他生物安全事故。6.5 严格依法依规操作农业农村部于2020年8月27日发布《关于非洲猪瘟病毒诊断制品生产经营使用有关事宜的通知》(农办牧〔2020〕42号),要求:自2021年1月1日起,各有关部门和单位在动物检疫或疫病监测、诊断中,对生猪及其产品开展非洲猪瘟病毒检测,应当使用已取得我部核发的产品批准文号的非洲猪瘟病毒诊断制品,确保检测结果准确。按照此规定,实验室自行构建的非洲猪瘟检测方法将不能继续使用,必须改用获得兽药批准文号的商品化非洲猪瘟检测试剂盒。

  • 691万!内蒙古自治区动物疫病预防控制中心2023年动物疫病检测试剂耗材仪器设备采购项目

    项目编号:NMGZCS-G-H-230377项目名称:2023年动物疫病检测试剂耗材仪器设备采购采购方式:公开招标预算金额:6,971,720.00元采购需求:合同包1(动物疫病检测试剂采购(一)):合同包预算金额:697,350.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]1-1[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]115(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]287,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-2[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]非洲猪瘟荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测 试剂盒[/td][td]50(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]80,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-3[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]非洲猪瘟病毒三重荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]26(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]65,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-4[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]非洲猪瘟病毒(ASFV B646L)基因质粒标准物质[/td][td]2(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]10,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-5[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒[/td][td]45(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]38,250.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-6[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]猪瘟病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒(通用型)[/td][td]40(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]80,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-7[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]44(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]37,400.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-8[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]高致病性猪蓝耳病病毒变异株荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]40(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]80,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-9[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]猪伪狂犬病gB抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]5(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]8,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]1-10[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]猪伪狂犬病gE抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]7(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]11,200.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包2(动物疫病检测试剂采购(二)):合同包预算金额:680,300.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]2-1[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒(通用型)[/td][td]66(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]118,800.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]2-2[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫三重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]30(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]67,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]2-3[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫-塞内卡双重荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]30(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]60,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]2-4[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫O型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA检测试剂盒[/td][td]66(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]79,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]2-5[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫A型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA检测试剂盒[/td][td]66(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]79,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]2-6[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫AsiaI型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA检测试剂盒[/td][td]20(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]24,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]2-7[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫O型病毒单抗竞争ELISA抗体检测试剂盒[/td][td]85(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]170,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]2-8[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫A型病毒单抗竞争ELISA抗体检测试剂盒[/td][td]10(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]20,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]2-9[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫VP1抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]44(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]61,600.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包3(动物疫病检测试剂采购(三)):合同包预算金额:778,940.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]3-1[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽流感病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒(通用型)[/td][td]55(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]115,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-2[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽流感病毒 H7亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]25(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]52,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-3[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽流感病毒 H5亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]25(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]57,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-4[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽流感H5N8病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]10(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]24,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-5[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽流感H5N6病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]10(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]24,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-6[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽流感病毒H9亚型荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒[/td][td]4(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]9,600.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-7[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]H7亚型禽流感血凝抑制试验试剂(Re-4株)[/td][td]10(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]2,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-8[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]H5亚型禽流感血凝抑制试验试剂(re-13)[/td][td]10(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]2,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-9[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]H5亚型禽流感血凝抑制试验试剂(re-14)[/td][td]10(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]2,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-10[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]鸡新城疫荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]32(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]76,800.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-11[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]新城疫血凝抑制试验试剂[/td][td]5(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]1,100.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-12[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽白血病A/B抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]2(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]10,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-13[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽白血病J抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]2(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]11,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-14[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]禽沙门氏菌病平板凝集抗原(配阴阳性对照)[/td][td]2(套)[/td][td]详见采购文件[/td][td]340.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-15[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]磁珠提取试剂(预封装)[/td][td]340(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]340,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]3-16[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]磁珠提取试剂(手动分装)[/td][td]50(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]50,000.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包4(动物疫病检测试剂采购(四)):合同包预算金额:782,000.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]4-1[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]羊布鲁氏菌LPS和BP26蛋白ELISA抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]115(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]276,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]4-2[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]布鲁氏菌荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]220(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]506,000.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包5(动物疫病检测试剂采购(五)):合同包预算金额:665,000.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]5-1[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]布病荧光偏振检测试剂[/td][td]100(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]380,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]5-2[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]布鲁氏菌病cELISA试剂盒[/td][td]150(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]285,000.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包6(动物疫病检测试剂采购(六)):合同包预算金额:572,130.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]6-1[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]小反刍兽疫抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]47(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]35,720.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-2[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]小反刍兽疫荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]39(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]70,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-3[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]包虫病/棘球蚴病病原ELISA检测试剂盒[/td][td]10(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]33,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-4[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]包虫病/棘球蚴病感染抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]10(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]8,100.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-5[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]牛结节性皮肤病荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]55(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]68,750.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-6[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]牛结节性皮肤病抗体检测试剂盒[/td][td]14(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]41,160.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-7[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]牛结核病γ-干扰素ELISA检测试剂盒[/td][td]20(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]80,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-8[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]副结核抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]4(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]27,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-9[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]牛结核病抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]4(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]14,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-10[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]牛病毒性腹泻抗原ELISA检测试剂盒[/td][td]4(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]50,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-11[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]牛传染性鼻气管炎GE抗体ELISA检测试剂盒[/td][td]4(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]24,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-12[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]狂犬病ELISA检测试剂盒[/td][td]4(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]6,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-13[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]狂犬病荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测试剂盒[/td][td]20(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]34,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]6-14[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]炭疽杆菌荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒[/td][td]40(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]80,000.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包7(动物疫病检测试剂采购(七)):合同包预算金额:766,000.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]7-1[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]非洲猪瘟标准血清样品[/td][td]75(套)[/td][td]详见采购文件[/td][td]150,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]7-2[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]非洲猪瘟病毒核酸样品[/td][td]15(套)[/td][td]详见采购文件[/td][td]30,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]7-3[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]口蹄疫标准血清样品[/td][td]75(套)[/td][td]详见采购文件[/td][td]150,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]7-4[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]牛布鲁氏菌病标准血清样品[/td][td]75(套)[/td][td]详见采购文件[/td][td]150,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]7-5[/td][td]兽用诊断制品[/td][td]磁珠法通用型基因组DNA提取试剂盒(预分装)[/td][td]130(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]286,000.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包8(动物疫病实验室耗材采购(一)):合同包预算金额:525,000.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]8-1[/td][td]塑料制品[/td][td]10μL无酶吸头[/td][td]820(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]45,100.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-2[/td][td]塑料制品[/td][td]200μl无酶吸头[/td][td]300(包)[/td][td]详见采购文件[/td][td]37,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-3[/td][td]塑料制品[/td][td]5mL无酶吸头[/td][td]50(包)[/td][td]详见采购文件[/td][td]11,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-4[/td][td]塑料制品[/td][td]10ml无酶吸头[/td][td]50(包)[/td][td]详见采购文件[/td][td]19,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-5[/td][td]塑料制品[/td][td]螺口50ml离心管[/td][td]76(包)[/td][td]详见采购文件[/td][td]8,360.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-6[/td][td]塑料制品[/td][td]2mL离心管样品盒[/td][td]3,000(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]21,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-7[/td][td]塑料制品[/td][td]10mL离心管样品盒[/td][td]200(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]5,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-8[/td][td]塑料制品[/td][td]50mL离心管样品盒[/td][td]200(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]5,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-9[/td][td]塑料制品[/td][td]20ml组织采样杯[/td][td]16,000(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]32,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-10[/td][td]塑料制品[/td][td]60ml组织采样杯[/td][td]5,000(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]15,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-11[/td][td]塑料制品[/td][td]20ml采样杯样品盒[/td][td]2,000(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]50,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-12[/td][td]塑料制品[/td][td]60ml采样杯样品盒[/td][td]1,000(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]35,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-13[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]采样棉签[/td][td]70,000(支)[/td][td]详见采购文件[/td][td]42,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-14[/td][td]塑料制品[/td][td][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]8连管(带盖)[/td][td]3,000(条)[/td][td]详见采购文件[/td][td]36,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-15[/td][td]塑料制品[/td][td]血凝微量反应板(V型)[/td][td]2,005(块)[/td][td]详见采购文件[/td][td]16,040.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-16[/td][td]塑料制品[/td][td]96孔细胞培养板[/td][td]2,000(块)[/td][td]详见采购文件[/td][td]17,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]8-17[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]布病、结核专用采样箱[/td][td]43(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]129,000.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包9(动物疫病实验室耗材采购(二)):合同包预算金额:505,000.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]9-1[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]记号笔[/td][td]300(支)[/td][td]详见采购文件[/td][td]3,600.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-2[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]无纺布帽子[/td][td]1,800(包)[/td][td]详见采购文件[/td][td]18,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-3[/td][td]塑料制品[/td][td]专用封鞋膜[/td][td]80(卷)[/td][td]详见采购文件[/td][td]16,800.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-4[/td][td]塑料制品[/td][td]一次性医用防护服[/td][td]500(套)[/td][td]详见采购文件[/td][td]32,500.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-5[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]白大褂[/td][td]300(件)[/td][td]详见采购文件[/td][td]27,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-6[/td][td]塑料制品[/td][td]一次性乳胶手套[/td][td]30,000(副)[/td][td]详见采购文件[/td][td]90,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-7[/td][td]塑料制品[/td][td]一次性高筒鞋套[/td][td]800(付)[/td][td]详见采购文件[/td][td]9,600.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-8[/td][td]塑料制品[/td][td]防割手套[/td][td]50(副)[/td][td]详见采购文件[/td][td]750.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-9[/td][td]塑料制品[/td][td]高筒胶手套[/td][td]30(副)[/td][td]详见采购文件[/td][td]630.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-10[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]一次性医用外科口罩[/td][td]30,000(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]21,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-11[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]N95医用防护口罩[/td][td]8,000(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]20,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-12[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]PBS Buffer(瓶装)[/td][td]100(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]5,700.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-13[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]标签纸打印纸[/td][td]87(卷)[/td][td]详见采购文件[/td][td]104,400.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-14[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]标签纸打印机色带[/td][td]45(卷)[/td][td]详见采购文件[/td][td]45,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-15[/td][td]塑料制品[/td][td]自封袋[/td][td]300(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]4,800.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-16[/td][td]塑料制品[/td][td]自封袋[/td][td]500(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]14,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-17[/td][td]塑料制品[/td][td]自封袋[/td][td]400(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]20,800.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-18[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]酒精(75%)[/td][td]1,000(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]11,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-19[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]新洁尔灭[/td][td]400(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]2,400.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-20[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]84消毒液[/td][td]400(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]2,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-21[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]碘伏[/td][td]30(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]270.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-22[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]抗菌洗手液[/td][td]50(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]800.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-23[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]手洗消毒凝胶[/td][td]50(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]1,100.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-24[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]消毒湿巾(含酒精)[/td][td]1,700(盒)[/td][td]详见采购文件[/td][td]20,400.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-25[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]便携式酒精消毒液[/td][td]500(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]5,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-26[/td][td]消毒杀菌用品[/td][td]便携式手消毒凝胶[/td][td]114(瓶)[/td][td]详见采购文件[/td][td]1,140.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-27[/td][td]塑料制品[/td][td]医疗废物专用袋[/td][td]7,500(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]11,250.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-28[/td][td]塑料制品[/td][td]专用喷壶[/td][td]20(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]260.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-29[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]应急医疗箱[/td][td]5(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]2,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-30[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]样品转运推车(小)[/td][td]4(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]3,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-31[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]样品转运推车(大)[/td][td]6(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]7,200.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]9-32[/td][td]防疫、防护卫生装备及器具[/td][td]生物安全运输箱[/td][td]2(个)[/td][td]详见采购文件[/td][td]2,400.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包10(动物疫病实验室设备采购(一)):合同包预算金额:533,600.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]10-1[/td][td]兽医设备[/td][td]多功能荧光酶标仪[/td][td]1(台)[/td][td]详见采购文件[/td][td]533,600.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。合同包11(动物疫病实验室设备采购(二)):合同包预算金额:466,400.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]11-1[/td][td]兽医设备[/td][td][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url](12道)[/td][td]10(台)[/td][td]详见采购文件[/td][td]120,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]11-2[/td][td]兽医设备[/td][td]纯水仪[/td][td]1(台)[/td][td]详见采购文件[/td][td]120,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]11-3[/td][td]兽医设备[/td][td]移液吸头自动装盒系统[/td][td]1(台)[/td][td]详见采购文件[/td][td]80,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]11-4[/td][td]兽医设备[/td][td]医用冷藏箱[/td][td]3(台)[/td][td]详见采购文件[/td][td]63,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]11-5[/td][td]兽医设备[/td][td]低温保存箱[/td][td]6(台)[/td][td]详见采购文件[/td][td]78,000.00[/td][td]-[/td][/tr][tr][td]11-6[/td][td]兽医设备[/td][td]速热热水器[/td][td]9(台)[/td][td]详见采购文件[/td][td]5,400.00[/td][td]-[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:合同签订之日起一年。

  • 动物疫病快速诊断仪的局限性以及应用范围

    动物疫病快速诊断仪的局限性以及应用范围

    [size=16px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b]动物疫病快速诊断仪的局限性以及应用范围[/color][/font]动物疫病快速诊断仪在应用中存在一定的局限性,其检测结果受多种因素影响,如试剂的灵敏度、仪器的准确度、样本的采集和保存等。此外,一些疾病的早期或潜伏期可能无法通过快速诊断仪检测出来,或者存在假阳性和假阴性的情况。尽管存在局限性,动物疫病快速诊断仪的应用范围仍然非常广泛。它可以用于检测多种动物疫病,如猪流感、猪瘟、口蹄疫等。此外,动物疫病快速诊断仪还可以用于检测动物的营养状况和免疫功能,以及兽药残留和有毒有害物质等。这种仪器在畜牧业、水产养殖业、野生动物保护、实验动物监测等领域都有应用。总之,动物疫病快速诊断仪是一种重要的动物疫病防控工具,可以提高动物疫病的诊断水平和防控效果。虽然存在局限性,但在正确使用和解释结果的前提下,可以充分发挥其作用。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402020939153962_5752_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 【讨论】韩国口蹄疫再度蔓延

    据新华社首尔12月2日电(记者 班威)韩国农林水产食品部2日发布公告说,3家养牛场当天确认暴发口蹄疫,这表明一度在韩国销声匿迹的口蹄疫疫情再度蔓延。  公告说,为防止疫情扩散,韩国有关部门正着手宰杀销毁这些农场及其方圆50米内的所有家畜,并关闭全国所有牲畜市场,继续对进出疫区的车辆、人员等采取交通管制等防疫措施。

  • 【转帖】《中国兽药典》2000年版

    《中国兽药典》2000年版 生物制品 牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗气肿疽灭活疫苗仔猪红痢灭活疫苗伪狂犬病灭活疫苗羊埃希氏大肠杆菌病灭活疫苗羊梭菌病多联灭活疫苗肉毒梭菌(C型)灭活疫苗鸡新城疫灭活疫苗破伤风类毒素猪丹毒灭活疫苗猪多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗猪丹毒、猪多杀性巴氏秆菌病二联灭活疫苗II号炭疽芽孢苗山羊痘活疫苗马传染性贫血活疫苗无荚膜炭疽芽孢苗牛传染性胸膜肺炎活疫苗(I)牛传染性胸膜肺炎活疫苗(II)牛环形泰勒虫病活疫苗牛瘟活疫苗布鲁氏菌病活疫苗(I)布鲁氏菌病活疫苗(II)仔猪副伤寒活疫苗鸡马立克氏病火鸡疮疹病毒活疫苗鸡马立克氏病活疫苗鸡传染性支气管炎活疫苗鸡痘活疫苗鸡新城疫活疫苗(低毒力类)鸭瘟活疫苗猪丹毒活疫苗猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗猪瘟活疫苗绵羊痘活疫苗抗气肿疽血清抗炭疽血清抗猪、牛多杀性巴氏杆菌病血清抗猪瘟血清破伤风抗毒素口蹄疫病毒感染相关抗原布鲁氏菌病试管凝集试验抗原布鲁氏菌病补体结合试验抗原与阳性血清

  • 【分享】农业部关于切实做好2008年重大动物疫病免疫工作的通知

    2008年是重大动物疫病防控工作关键一年,为认真贯彻今年中央1号文件精神,全面落实中央农村工作会议、全国农业工作会议和畜牧兽医专业会议部署,切实做好重大动物疫病免疫工作,现将有关要求通知如下:   一、提高认识,增强做好免疫工作的责任感和紧迫感   免疫是防控重大动物疫病的重要措施,是避免和减少动物疫情发生的关键。各地务必高度重视,把免疫工作放在重大动物疫病防控工作的首位,精心组织,周密部署,确保做到“应免尽免,不留空档”。各地要切实增强紧迫感和责任感,进一步明确责任,早准备、早部署,切实将免疫工作落实到位。   二、加大免疫力度,确保免疫效果   2008年免疫工作总体安排是,坚持推行常年按程序免疫,在春秋集中免疫的基础上,6月份集中开展一次免疫效果监测,并根据监测情况,对免疫抗体水平达不到要求的地区开展一次集中免疫,以保证奥运会、残奥会期间不发生重大动物疫情。各地要按照我部《2008年高致病性禽流感和口蹄疫等主要动物疫病免疫方案》要求,结合本地实际,及时制定免疫实施方案,在重点抓好高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪瘟等强制免疫基础上,统筹兼顾,全面落实免疫措施。对新补栏畜禽要及时补免;对饲养周期短的肉鸡、肉鸭、育肥猪等要加强免疫;种猪配种前、仔猪断奶前必须进行高致病性猪蓝耳病强化免疫。同时,要求免疫时应规范操作,按要求更换注射针头,并做好各项消毒工作,防止人为传播疫情。要加强疫苗的运输和保存,按不同疫苗贮存运输要求进行操作,保证免疫效果。

  • 【转帖】上海奉贤区发生A型口蹄疫疫情 41头奶牛发病

    上海奉贤区发生A型口蹄疫疫情 41头奶牛发病中新社北京二月十一日电(记者 王彤)农业部新闻办公室十一日发布消息说,上海市奉贤区发生A型口蹄疫疫情。二月三日,上海市奉贤区五四奶牛场发生口蹄疫疑似疫情,四十一头奶牛发病,未出现死亡病例。十一日,经国家口蹄疫参考实验室确诊为A型口蹄疫。事情发生后,农业部、上海市政府按照有关应急预案要求,组织做好疫情处置的各项工作,主要措施包括封锁、消毒、扑杀病畜和同群畜,并进行无害化处理,上海市兽医部门已在疫点销毁病牛和同群牛四百四十头。目前,疫情已得到控制。

  • 动物疫病检测机构人员要求以及CMA认证

    我们想搞一个动物疫病检测机构,按214进行基本要求准备?还是有其它依据,现在想尽快弄准需要人员的专业是什么?仪器设备?场地布置? 当前政府抽检参数有,禽流感,新城疫抗体检测,口蹄疫抗体检测,猪瘟抗体检测,小反刍兽疫抗体检测,非洲猪瘟病原体检测 奶牛布病检测

  • 浅谈口蹄疫A型抗体水平检测流程

    浅谈口蹄疫A型抗体水平检测流程

    [align=center][font='arial'][size=14px]浅谈[/size][/font][font='arial'][size=14px]口蹄疫A型抗体水平检测[/size][/font][font='arial'][size=14px]流程[/size][/font][/align][table][tr][td][font='arial'][size=14px]目标[/size][/font][/td][td][font='arial'][size=14px]监测口蹄疫A型抗体水平及疫苗的保护效力从而制定合理的免疫程序[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]个人防护装备[/size][/font][/td][td][font='arial'][size=14px]一次性口罩,一次性防护服[/size][/font][font='arial'][size=14px],一次性丁腈手套,一次性鞋套[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]操作时间[/size][/font][/td][td][font='arial'][size=14px]免疫口蹄疫疫苗后[/size][/font][font='arial'][size=14px]21-28[/size][/font][font='arial'][size=14px]天[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]复审[/size][/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]健康安全环境与食品质量安全经理签字[/size][/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]牧场经理签字[/size][/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]总经理签字[/size][/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][/tr][/table][table][tr][td][font='times new roman'][size=16px]请对照图片检查自己是否按要求佩戴了劳动保护用品[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][align=center][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827218554_5523_6216082_3.jpeg[/img][/align][/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px]版本历史[/size][/font][table][tr][td] [/td][td][align=center][font='times new roman']版本[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']生效日期[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']主要变化[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']01[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']02[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']03[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']04[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px]健康安全关键风险点和食品安全关键控制点[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]([/size][/font][font='times new roman']本章节的目的:当员工执行此SOP时,提高员工关于关键风险点和食品安全关键控制点的意识)[/font][table][tr][td] [/td][td][align=center][font='times new roman']序号[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']健康安全关键风险点[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']食品安全关键控制点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']1[/font][/align][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827219009_2558_6216082_3.jpeg[/img][font='times new roman']化学品![/font][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827220750_5451_6216082_3.png[/img][font='times new roman'] 无[/font][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']2[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']3[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px]程序[/size][/font][table][tr][td] [/td][td][align=center][font='arial'][size=14px]步骤[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='arial'][size=14px]行动[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='arial'][size=14px]关键点[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1 [/align][/td][td][font='times new roman']血清准备[/font][font='times new roman']全血样品2000rpm离心5分钟。立即检测或者-20℃(最好-80℃)保存并尽快检测。[/font][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827222491_876_6216082_3.jpeg[/img] [font='times new roman'][color=#ff0000]须避免人员皮肤直接接触血清。[/color][/font] [font='times new roman'][color=#ff0000]严格穿戴好PPE。[/color][/font][/td][/tr][tr][td][align=center]2 [/align][/td][td][font='times new roman']口蹄疫抗体A型检测试剂盒组分[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']8[/font][font='times new roman']℃冷藏保存,实验前取出恢复到室温(18℃-2[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']℃)。[/font]将试剂取出,轻轻涡旋或者震荡混匀。[/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827223643_9215_6216082_3.jpeg[/img][font='times new roman']冬季温度低时,切勿将反应板直接放到冰冷的桌面上,应有泡沫作为缓冲。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]3 [/align][/td][td][font='times new roman']磷酸盐-吐温缓冲液(PBST)[/font][font='times new roman']使用前,将25倍PBST浓缩液用无离子水或蒸馏水稀释成1倍PBST([/font][font='times new roman']浓缩液与水体积比为[/font][font='times new roman']1:24)。[/font][/td][td][font='times new roman']每板约需600ml,即600ml的去离子水中加入25ml的25倍PBST浓缩液。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]4 [/align][/td][td][font='times new roman']仪器准备[/font][font='times new roman']打开酶标仪预热20分钟,打开洗板机选择DailyRaise 程序进行管路清洗。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td=3,1][align=center][font='times new roman']操作步骤[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5 [/align][/td][td][font='times new roman']抗原抗体反应[/font][font='times new roman'](以20份/板为例)[/font][font='times new roman']首先在抗原抗体反应板上加入PBST,以进行抗体稀释。在A1~A10以及E1~E10每孔加入7[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']uL PBST;其余(B1~B10;C1~C10;D1~D10;[/font][font='times new roman']F1~F10[/font][font='times new roman'];G1~G10;H1~H10;第11列全部和第12列A、B孔)加入40 uL PBST。[/font][font='times new roman']加入待检血清和对照血清:[/font][font='times new roman']在[/font][font='times new roman']A1~A10[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']E1~E10[/font][font='times new roman']孔[/font][font='times new roman']加入[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']uL待检血清[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']混匀[/font][font='times new roman']后,[/font][font='times new roman']血清浓度为1:[/font][font='times new roman']16[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']分别[/font][font='times new roman']吸取40uL到B1~B10及F1~F10,血清浓度从1:[/font][font='times new roman']16[/font][font='times new roman']开始做连续2倍稀释至1:[/font][font='times new roman']128[/font][font='times new roman'],最后一[/font][font='times new roman']行[/font][font='times new roman'](D1~10,H1~10)吸取40uL混合液后弃掉。第11 列为阳性对照孔,直接吸取40 uL的阳性血清作2倍稀释至1:2048;第12列A、B孔为阴性对照孔,吸取40 uL的阴性血清对倍稀释到B孔[/font][font='times new roman']。见表1。[/font][font='times new roman']然后每孔加入40 uL用PBST稀释到[/font][font='times new roman']工作[/font][font='times new roman']浓度的口蹄疫病毒抗原;病[/font][font='times new roman']毒[/font][font='times new roman']抗原对照孔[/font][font='times new roman'](E12[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']F12,[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']G12,H12[/font][font='times new roman'])各[/font][font='times new roman']加80 uL。振荡混匀,封板,4[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']湿盒过夜或37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']震荡孵育[/font][font='times new roman']90min[/font][font='times new roman']。[/font][font='times new roman'](见表2)[/font][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827225248_4142_6216082_3.png[/img][font='times new roman']口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型病毒抗原工作浓度 1:[/font][font='times new roman']3为例,具体抗原浓度须按照试剂盒说明书进行配制, 每板需要工作浓度的抗原5ml,通常多配出1-2ml,为6ml,即6mlPBST加入2ml的病毒抗原液;[/font][font='times new roman']阳性对照血清已稀释浓度为1:[/font][font='times new roman']8;[/font][font='times new roman']口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型病毒抗原[/font][font='times new roman']放于-80℃更有利于储存;[/font][font='times new roman']湿盒内的反应板也要有湿纱布覆盖[/font][font='times new roman'];[/font][font='times new roman']U型96孔板为重复利用板,可以刷干净后,用去离子浸泡晾干备用,可以用普通12孔板条代替。[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827228646_6154_6216082_3.jpeg[/img] [font='times new roman'][color=#ff0000]避免人员皮肤直接接触血清溶液。[/color][/font] [font='times new roman'][color=#ff0000]废弃液存放废弃槽内,由专业资质机构回收[/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000] [/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000]处理。[/color][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827227441_929_6216082_3.png[/img][/td][/tr][tr][td][align=center]6 [/align][/td][td][font='times new roman']将抗原抗体混合液从抗原抗体反应板上按次序转移至酶标板上的相应孔,50uL/孔,封板,37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']孵育60min。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center]7 [/align][/td][td][font='times new roman']洗板5次,[/font][font='times new roman']甩干,拍净。[/font][/td][td][align=center][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]8 [/align][/td][td][font='times new roman']按[/font][font='times new roman']50uL/孔[/font][font='times new roman']加入口蹄疫A型豚鼠抗体工作液(红色),[/font][font='times new roman']封板,37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']孵育[/font][font='times new roman']3[/font][font='times new roman']0min[/font][font='times new roman']。[/font][/td][td][font='times new roman']口蹄疫A型豚鼠抗体已稀释为工作浓度。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]9 [/align][/td][td][font='times new roman']洗板5次,方法同[/font][font='times new roman']步骤7[/font][font='times new roman']。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center]10 [/align][/td][td][font='times new roman']按[/font][font='times new roman']50uL/孔[/font][font='times new roman']加入兔抗鼠IgG-HRP抗体工作液(蓝色),[/font][font='times new roman']封板,37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']孵育[/font][font='times new roman']3[/font][font='times new roman']0min。[/font][/td][td][font='times new roman']兔抗豚鼠血清IgG-HRP已稀释为工作浓度。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]11 [/align][/td][td][font='times new roman']洗板5次,方法同[/font][font='times new roman']步骤7[/font][font='times new roman']。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center]12 [/align][/td][td][font='times new roman']将TMB[/font][font='times new roman']底物[/font][font='times new roman']A溶液和B溶液以1:1比例混合均匀,[/font][font='times new roman']加[/font][font='times new roman']入混合后的[/font][font='times new roman']底物溶液50uL/孔,37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']孵育15min;[/font][font='times new roman']显色反应结束后,[/font][font='times new roman']每孔加50uL终止液终止反应,[/font][font='times new roman']在酶标仪上[/font][font='times new roman']读取OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值。[/font][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827228889_5648_6216082_3.jpeg[/img] [font='times new roman'][color=#ff0000]操作者须熟练掌握终止液和双氧水的 [/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000] MSDS,培训合格后方可上岗;[/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000] 严格穿戴好PPE-[/color][/font][color=#ff0000]实验服、一次性丁腈手[/color][color=#ff0000] 套、化学品防护眼镜、一次性口罩和防护面[/color][color=#ff0000] 罩。[/color][/td][/tr][tr][td][align=center]13 [/align][/td][td][font='times new roman']结果判定[/font][font='times new roman']判定标准:[/font][font='times new roman']每块板设置4个[/font][font='times new roman']病毒抗原对照[/font][font='times new roman'],病毒抗原对照的[/font][font='times new roman']OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']或OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman']应[/font][font='times new roman']在[/font][font='times new roman']1.0 以上;[/font][font='times new roman']阳性对照抗体效价在1:1024±1滴度以内,阴性对照血清抗体效价应<1:8[/font][font='times new roman'],试验结果才有效。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center]14 [/align][/td][td][font='times new roman']血清抗体效价的判定:[/font][font='times new roman']被检血清[/font][font='times new roman']OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman']大于临界值的孔为阴性孔,小于或等于临界值的孔为阳性孔。以阳性孔的最高稀释倍数为被检血清的抗体效价。[/font][font='times new roman']若临界值处于2个稀释孔[/font][font='times new roman']OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman']之间,抗体效价取相邻阳性孔和阴性孔稀释倍数的反对数中间值。[/font][/td][td][font='times new roman']临界值:弃去最高值和最低值,计算剩余2孔的平均[/font][font='times new roman']OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman'],再除以2,即50%对照值,该值为临界值。[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827232636_8392_6216082_3.jpeg[/img][/td][/tr][tr][td][align=center]15 [/align][/td][td][font='times new roman']最终结果判定:[/font][font='times new roman']单个血清样品:≥1:128判为阳性,1:64—128时,判为可疑,≤1:64时判为阴性[/font][font='times new roman']群体:70%的被检血清的抗体效价大于1:128即可判为疫苗有保护效力。[/font][/td][td][font='times new roman']抗体效价≥1:128 ,即疫苗保护效力在99%以上;[/font][font='times new roman']可疑血清样品可以复测,复测抗体效价≥1:128,判为阳性,小于1:128判为阴性。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]16 [/align][/td][td][font='times new roman']废弃物回收[/font][font='times new roman']废弃物置于医疗垃圾废弃物桶统一回收。[/font][/td][td] [/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px]附件:[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][table][tr][td=6,1][align=center][font='times new roman'][size=18px]实验室操作规范[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=16px]奶牛口蹄疫[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]A[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]型抗体水平检测[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']样品名称:[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']牧场:[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']样品种类:[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']取样日期:[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']取样人[/font][font='times new roman']:[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']检测时间:[/font][/align][/td][/tr][tr][td=2,1][align=center][font='times new roman']试剂盒种类:[/font][font='times new roman']口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA抗体检测试剂盒[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']试剂盒[/font][font='times new roman']批号:[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']有[/font][font='times new roman']效期:[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']检测人:[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']复核人[/font][/align][/td][/tr][tr][td=6,1][font='times new roman']待检样品说明(或检验目的):[/font][font='times new roman']检测牛只免疫口蹄疫疫苗21-28d后,血清中口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型病毒抗体含量[/font][/td][/tr][tr][td=6,1][font='times new roman']加样顺序:[/font][table][tr][td][/td][td][align=center][font='times new roman']1[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']2[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']3[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']4[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']5[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']6[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']7[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']8[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']9[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']10[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']11[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']12[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']A[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']B[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']C[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']D[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']E[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']F[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']G[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']H[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][/table][/td][/tr][tr][td=6,1][font='times new roman']操作过程记录:[/font][font='宋体']Ⅰ[/font][font='times new roman'] 操作前准备[/font][font='arial'][size=14px]1 [/size][/font][font='arial'][size=14px]所有试剂盒组分是否回温充分(是/否),回温温度( [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px]),回温时间[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px];[/size][/font][font='arial'][size=14px]2 [/size][/font][font='arial'][size=14px]记录实验室温度( [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px]);[/size][/font][font='arial'][size=14px]3 [/size][/font][font='arial'][size=14px]确认孵育反应温度( [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px]和/或 [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px] );如为37[/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px],请提前打开温箱;[/size][/font][font='arial'][size=14px]4 [/size][/font][font='arial'][size=14px]确认仪器(酶标仪、洗板机等)的工作状态[/size][/font][font='arial'][size=14px]。[/size][/font][font='宋体']Ⅱ[/font][font='times new roman'] 试剂准备[/font][font='arial'][size=14px]1 [/size][/font][font='arial'][size=14px]洗涤液的配制:[/size][/font][font='arial'][size=14px]( )毫升浓缩液 + ( )毫升纯净水[/size][/font][font='arial'][size=14px]2 [/size][/font][font='arial'][size=14px]样品的稀释[/size][/font][font='arial'][size=14px]第一步:( )微升血清+( )微升样品稀释液[/size][/font][font='arial'][size=14px]第二步:( )微升血清+( )微升样品稀释液 (或不需要)[/size][/font][font='arial'][size=14px]第三步:( )微升血清+( )微升样品稀释液 (或不需要)[/size][/font][font='arial'][size=14px]3 [/size][/font][font='arial'][size=14px]对照是否需要稀释(是/否),如需稀释,稀释比例( )[/size][/font][font='arial'][size=14px]4 [/size][/font][font='arial'][size=14px]酶标抗体是否需要稀释(是/否),如需稀释,[/size][/font][font='arial'][size=14px]短期孵育模式[/size][/font][font='arial'][size=14px]稀释比例( [/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px] )[/size][/font][font='arial'][size=14px];过夜孵育模式稀释比例( )[/size][/font][font='arial'][size=14px]5 [/size][/font][font='arial'][size=14px]底物溶液配置:[/size][/font][font='arial'][size=14px]使用前将底物A和底物B按1:1体积混合,现用现配。[/size][/font][font='宋体']Ⅲ[/font][font='times new roman'] 操作步骤[/font][font='arial'][size=14px](1)在U型反应班上加入样品稀释液 [/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]微升;(2)[/size][/font][font='arial'][size=14px]加入对照及样品(对照:_微升;样品:_微升)[/size][/font][font='arial'][size=14px],轻弹混匀此时样本稀释度为[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px],并按2倍比例梯度依次稀释至[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px];[/size][/font][font='arial'][size=14px](3)加入病毒抗原 [/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]微升(4)[/size][/font][font='arial'][size=14px]第一次孵育[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px] (时间:_:_至_:_)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(5)取[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]抗原抗体混合液从U型反应板转移至已包被口蹄疫[/size][/font][font='arial'][size=14px]A[/size][/font][font='arial'][size=14px]型兔抗的ELISA(6)第二次孵育[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px] (时间:_[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]:_至_:_)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(4)[/size][/font][font='arial'][size=14px]第一次洗涤(次数:_次;体积:_微升)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(7)加入口蹄疫[/size][/font][font='arial'][size=14px]A[/size][/font][font='arial'][size=14px]型兔抗豚鼠抗体工作溶液[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]微升;(8)第三次孵育[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px] (时间:_:_至_:_)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(9)[/size][/font][font='arial'][size=14px]第二次洗涤(次数:_次;体积:_微升)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(10)[/size][/font][font='arial'][size=14px]加入[/size][/font][font='arial'][size=14px]兔抗豚鼠IgG-HRP[/size][/font][font='arial'][size=14px]酶标[/size][/font][font='arial'][size=14px]二抗工作液[/size][/font][font='arial'][size=14px](_微升)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(11)[/size][/font][font='arial'][size=14px]第[/size][/font][font='arial'][size=14px]四[/size][/font][font='arial'][size=14px]次孵育[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px](时间:[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]:_ 至 _: _)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(12)[/size][/font][font='arial'][size=14px]第[/size][/font][font='arial'][size=14px]三[/size][/font][font='arial'][size=14px]次洗涤(次数:_次;体积:_微升)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(13)[/size][/font][font='arial'][size=14px]加入底物( _ 微升)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(14)[/size][/font][font='arial'][size=14px]显色(时间:_ :_ 至 _: _)[/size][/font][font='arial'][size=14px];(15)[/size][/font][font='arial'][size=14px]加入终止液终止反应( _微升)[/size][/font][font='arial'][size=14px]。[/size][/font][/td][/tr][tr][td=6,1][font='times new roman'] [/font][font='宋体']IV[/font][font='times new roman']酶标仪450nm读数结果:[/font][table][tr][td][/td][td][align=center][font='times new roman']1[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']2[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']3[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']4[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']5[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']6[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']7[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']8[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']9[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']10[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']11[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']12[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']A[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']B[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']C[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']D[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']E[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']F[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']G[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']H[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][/table][font='宋体'] V结果判定:[/font][font='times new roman'] 1.实验认可标准:4个孔病毒抗原对照OD45[/font][font='times new roman']0[/font][font='times new roman']nm均大于1.0( );阳性对照抗体效价( ),是否在1[/font][font='times new roman']:[/font][font='times new roman']512-1:2048之间( );阴性对照血清抗体效价( ),是否临界值;阳性孔为被检样品OD450nm临界值 [/font][font='times new roman'] 若临界值与稀释倍数最高阳性孔的OD450nm值相同,则以被检血清阳性孔的最高稀释倍数作为该份血清的抗体效价;若临界值处于两个稀释孔之间OD450nm之间,抗体效价取相邻阳性孔和阴性孔稀释倍数的反对数中间值。[/font][font='times new roman'] 3.结果判定[/font][font='times new roman'] 抗体效价大于或等于1:128为口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型抗体阳性;1:64-1:128时,判为可疑;1:64时判为阴性。可疑血清样本重新检测。 [/font][/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px][color=#ff0000]1. [/color][/size][/font][font='arial'][size=14px][color=#ff0000]双氧水应急处理[/color][/size][/font][font='宋体'][color=#ff0000]急救措施 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]皮肤接触:[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 脱去污染的衣着,用大量流动清水冲洗。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]眼睛接触:[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 立即提起眼睑,用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟。就医。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]吸入:[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难,给输氧。如呼吸停止,立即进行人工呼吸。就医。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]食入:[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 饮足量温水,催吐。就医。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]消防措施 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]危险特性:[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 爆炸性强氧化剂。过氧化氢本身不燃,但能与可燃物反应放出大量热量和氧气而引起着火爆炸。过氧化氢在pH值为3.5~4.5时最稳定,在碱性溶液中极易分解,在遇强光,特别是短波射线照射时也能发生分解。当加热到 100℃以上时,开始急剧分解。它与许多有机物如糖、淀粉、醇类、石油产品等形成爆炸性混合物,在撞击、受热或电火花作用下能发生爆炸。过氧化氢与许多无机化合物或杂质接触后会迅速分解而导致爆炸,放出大量的热量、氧和水蒸气。大多数重金属(如铁、铜、银、铅、汞、锌、钴、镍、铬、锰等)及其氧化物和盐类都是活性催化剂,尘土、香烟灰、碳粉、铁锈等也能加速分解。浓度超过74%的过氧化氢,在具有适当的点火源或温度的密闭容器中,能产生[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]爆炸。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]有害燃烧产物:[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 氧气、水。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]灭火方法:[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 消防人员必须穿全身防火防毒服,在上风向灭火。尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却,直至灭火结束。处在火场中的容器若已变色或从安全泄压装置中产生声音,必须马上撤离。灭火剂:水、雾状水、干粉、砂土。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]泄漏应急处理 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]应急处理:[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 迅速撤离泄漏污染区人员至安全区,并进行隔离,严格限制出入。建议应急处理人员戴自给正压式呼吸器,穿防毒服。尽可能切断泄漏源。防止流入下水道、排洪沟等限制性空间。小量泄漏:用砂土、蛭石或其它惰性材料吸收。也可以用大量水冲洗,洗水稀释后放入废水系统。大量泄漏:构筑围堤或挖坑收容。喷雾状水冷却和稀释蒸汽、保护现场人员、把泄漏物稀释成不燃物。用泵转移至槽车或专用收集器内,回收或运至废物处理场所处置。[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]2.[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]终止液应急处理[/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000]急救措施[/color][/font][color=#ff0000]食入:[/color][color=#ff0000]请勿催吐。若患者清醒,让其立刻饮用大量或奶以稀释硫酸。若患者不清醒,请勿给予任何口服物品。立即就医。[/color][color=#ff0000]吸入:[/color][color=#ff0000]如果接触量很小,吸入风险不大。但是如果操作者身体有恙,需将其立刻带到空气清新处。若呼吸困难,立刻就医并输氧。如果呼吸停止,做人工呼吸。立刻就医。[/color][color=#ff0000]皮肤接触:[/color][color=#ff0000]立即脱去被污染衣着,用大量流动清水冲洗,至少[/color][color=#ff0000]15 [/color][color=#ff0000]分钟。在下次使用前将污染衣物清洗干净。用[/color][color=#ff0000]2%[/color][color=#ff0000]的小苏打溶液中和皮肤上多余的酸。立刻就医。[/color][color=#ff0000]眼睛接触:[/color][color=#ff0000]提起眼睑,立刻用大量流动清水冲洗至少[/color][color=#ff0000]15 [/color][color=#ff0000]分钟。就医。[/color][font='宋体'][color=#ff0000]消防措施[/color][/font][color=#ff0000]灭火剂:[/color][color=#ff0000]硫酸溶液不易燃。遇水稀释后发生强烈的放热反应(释放氢气),如果量小,不会产生太大影响。须使用泡沫,二氧化碳或干化学品等灭火剂。用水喷洒给着火容器降温。[/color][color=#ff0000]非常规火灾和爆炸:[/color][color=#ff0000]遇火时,可能产生有毒烟雾(硫氧化物)。与常规金属接触后可能产生氢,并与空气接触后生成易燃混合物。[/color][color=#ff0000]特殊消防程序及设备:[/color][color=#ff0000]遇火灾时,穿戴自给式呼吸器和保护眼睛和皮肤的装备。[/color][font='宋体'][color=#ff0000]泄漏应急处理措施[/color][/font][color=#ff0000]产品包装的泄漏概率较低。一旦泄漏,应用碱中和(碳酸钠,石灰粉),然后用惰性材料吸收(蛭石,沙子,土)。操作时按第8步要求穿戴PPE。清洗并确保污染区域通风。[/color][font='arial'][size=14px][color=#ff0000]防止液体流入下水道或水渠。[/color][/size][/font][font='arial'][size=14px][color=#ff0000] [/color][/size][/font]

  • 【分享】“原乳”“液态乳”及“酸乳”有何不同?

    很多消费者误认为原乳与市场上销售的液态乳本质上没有多大的区别。内蒙古农业大学营养与食品卫生学博士郭军接受记者采访时指出,这两者有很大区别。  从乳品科学与工程角度来说,原乳仅仅是“原料”,而市场上销售的液态乳、酸乳等都是“加工品”。液态乳至少要经过两个核心加工工艺,即“加热灭菌”和“无菌包装”。液态乳以灭菌温度和时间可划分为“巴氏杀菌乳”和“超高温瞬时灭菌乳”。“巴氏杀菌乳”杀菌温度低,目标是杀灭致病性细菌和病毒,比如沙门氏杆菌、结核、口蹄疫病毒等等,并保证产品在大约7天的货架期内不变质;“超高温瞬时灭菌乳”处理的目的是杀灭所有的细菌、真菌及其芽孢和孢子,即杀灭所有微生物,保质期通常可达1年。显然,“超高温瞬时灭菌乳”营养素(如蛋白质和必需氨基酸)的变质和损失比“巴氏杀菌乳”大,但生物安全性更高,且货架期长,从而商品化特性高。  此外,原乳和液态乳还有加工方面的差异,如“标准化”工艺,保证液态乳及其他乳制品的营养素指标(如脂肪、蛋白质、干物质等等)达标,恒定。通常原乳营养素会偏低,可用“闪蒸”工艺“浓缩”;另外,一些液态乳产品,尤其是花色乳产品还可能会使用食品添加剂、功能性添加剂等。  酸乳的差异比较明显,不仅是风味特别,价格也明显增高。这里所说的“酸乳”,是指乳酸菌发酵的乳制品,技术含量较高,营养价值和生理活性在液态乳的基础上有所提高,具体因发酵菌种和配方工艺不同而异。常饮益生菌发酵酸乳有益健康,延年益寿。  还有一类酸乳,是添加食用酸,如乳酸、柠檬酸的配方和工艺生产的,通常还调各种果味,业内称为“调酸乳”、“调配酸乳”等。这类“酸乳”通常划归“调味乳”类。 [size=4][color=#DC143C]更多见 [URL=http://www.chembbs.com.cn]http://www.chembbs.com.cn[/URL][/color][/size]

  • 【转帖】2006年中国十大科技新闻

    由科技日报社组织,部分院士、多家中央新闻单位参与评选的“2006年国内十大科技新闻”是: 一、家蚕基因芯片与表达图谱诞生 1月2日,西南大学蚕桑学重点实验室研制成功家蚕基因芯片与表达图谱。这是中国在家蚕基因研究领域取得的又一项重大进展,将为中国家蚕产业的发展以及人类防病找到有效途径。 二、北京正负电子对撞机上发现新粒子 1月6日,北京谱仪国际合作组在北京中国科学院高能物理研究所和美国夏威夷大学同时宣布:在北京正负电子对撞机上进行的北京谱仪实验,观测到一个新粒子。科学家猜测,它有可能是在高能物理实验中寻找了几十年的新型粒子。 三、全国科学技术大会召开,党中央、国务院发布关于增强自主创新能力的决定和政策 全国科学技术大会1月9日上午在人民大会堂隆重开幕。中共中央国务院决定组织实施《国家中长期科学和技术发展规划纲要(2006—2020年)》,作出了增强自主创新能力,建设创新型国家的战略决策。 2月26日,国务院全文发布了《实施国家中长期科学和技术发展规划纲要(2006—2020年)若干配套政策》,第一次非常系统地提出了促进自主创新的政策体系。 四、中国科学家研制成功口蹄疫基因工程疫苗 2月22日,由复旦大学等合作完成的猪口蹄疫O型基因工程疫苗成果通过鉴定。现在研制成功的基因工程疫苗的优点是该疫苗在制造过程中,不需要大量培养高致病口蹄疫病毒,基因工程疫苗产品中不带任何致病因子,是一种安全而高效的疫苗。 五、中国建成世界最大畜禽遗传资源体细胞库 4月13日,中国建成了一个世界最大的“畜禽遗传资源体细胞库”。在全球性抢夺生物资源和保护生物多样性的今天,中国科学家理应构建重要濒危畜禽品种群体细胞库,以保存其基因资源。 六、青藏铁路全线胜利建成通车 7月1日,经过10多万筑路大军历时5年的艰苦奋战,青藏铁路格尔木至拉萨段建成,至此世界上海拔最高、线路最长的高原铁路青藏铁路全线胜利建成通车。 青藏铁路是世界上海拔最高、线路最长的高原铁路,沿线高寒缺氧,地质复杂,冻土广布,工程十分艰巨。修建这样一条铁路,不仅是对中国综合实力和科技实力的检验,也是对人类自身极限的挑战。 七、具有自主知识产权的CPU芯片龙芯2E通过验收 9月13日,由中科院计算所承担的国家863项目“龙芯2号增强型处理器芯片设计”(龙芯2E)通过专家组验收。该项目的成功,标志着中国在信息领域迈出了关键的一步。 八、中国科学家找到自由调控植物发育的“钥匙” 中国农业大学生物学院的一个课题组首次发现了一种参与叶绿素生物合成的蛋白质———植物脱落酸(ABA)受体,从而找到了控制植物气孔运动和种子发育的“钥匙”。10月出版的《自然》杂志,以主题论文的形式发表了这一研究成果。 九、中国加入国际热核聚变实验堆(ITER)计划 ITER计划是目前世界上仅次于国际空间站的又一个国际大科学工程计划,是人类开发洁净新能源的一个大胆尝试,也是一项长期艰巨的工程。ITER计划是中国有史以来参加的规模最大的国际科技合作项目。 十、国产抗艾药物疗效首选方案确定 国家“十五”科技攻关课题“中国艾滋病病人的抗病毒治疗研究”的最新研究成果显示,国产艾滋病抗病毒药物疗效与进口药物一致,不良反应发生率相当,并确定了两组优选配伍方案。 该课题组研究结果表明国产艾滋病抗病毒治疗药物是安全有效的。国产艾滋病抗病毒治疗药物可以有效抑制病毒和提升免疫功能指标。

  • 求教各种疫病实验室大神啊~~~~

    有疫病实验室搞CMA认证的吗?求教啊!!!1、疫病检验项目单位内部用怎么样的办法做能力证明啊?如果是酶标试剂盒的,能用试剂盒里的阴阳对照来做吗?2、试剂盒里的阳性物属于病毒\菌种吗?处理时要怎么做?3、疫病实验室比分析实验室在日常的管理上还要注意些什么?4、有人有农业部农医发【2007】2号文吗?能分享一下吗?初步接触疫病实验室,希望各大神多多指教!谢谢~~~

  • 60万!南京市畜牧兽医站监测试剂耗材采购项目

    [quote]项目概况南京市畜牧兽医站监测试剂耗材采购项目 采购项目的潜在供应商应在南京市雨花台区软件大道21号舜天集团C座110室获取采购文件,并于2023年03月21日 10点00分(北京时间)前提交响应文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号:1214-234103057LDY项目名称:南京市畜牧兽医站监测试剂耗材采购项目采购方式:竞争性磋商预算金额:60.0000000 万元(人民币)最高限价(如有):60.0000000 万元(人民币)采购需求:(1)采购清单:[table=97%][tr][td][align=center]包号[/align][/td][td][align=center]品目号[/align][/td][td][align=center]设备名称[/align][/td][td][align=center]规格[/align][/td][td][align=center]数量[/align][/td][td][align=center]采购预算[/align][align=center](万元人民币)[/align][/td][td][align=center]是否接受进口产品投标[/align][/td][/tr][tr][td=1,34][align=center]01[/align][/td][td][align=center]01-1[/align][/td][td][align=center][back=yellow]●[/back]禽流感病毒H5亚型核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]30盒[/align][/td][td=1,34][align=center]60[/align][/td][td=1,34][align=center]接受[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-2[/align][/td][td][align=center]禽流感病毒H7N9核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]30盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-3[/align][/td][td][align=center]鸡新城疫病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]8盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-4[/align][/td][td][align=center]猪瘟病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]10盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-5[/align][/td][td][align=center]高致病性猪蓝耳病病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]9盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-6[/align][/td][td][align=center][back=yellow]●[/back]口蹄疫病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]16盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-7[/align][/td][td][align=center]口蹄疫病毒O型核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]4盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-8[/align][/td][td][align=center]口蹄疫病毒A型核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]4盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-9[/align][/td][td][align=center]非洲猪瘟病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]24盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-10[/align][/td][td][align=center]猪伪狂犬病病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]4盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-11[/align][/td][td][align=center]牛结节性皮肤病病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]6盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-12[/align][/td][td][align=center]小反刍兽疫病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]16盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-13[/align][/td][td][align=center]非洲马瘟病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-14[/align][/td][td][align=center]禽流感病毒H9亚型核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]2盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-15[/align][/td][td][align=center]鸡滑液囊支原体核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-16[/align][/td][td][align=center]鸡毒支原体核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-17[/align][/td][td][align=center]甲型流感病毒N1亚型核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]2盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-18[/align][/td][td][align=center]甲型流感病毒N2亚型核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]2盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-19[/align][/td][td][align=center]甲型流感病毒N6亚型核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]2盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-20[/align][/td][td][align=center]甲型流感病毒N8亚型核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]2盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-21[/align][/td][td][align=center]大肠杆菌核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]2盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-22[/align][/td][td][align=center]金黄色葡萄球菌核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-23[/align][/td][td][align=center]猪链球菌核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-24[/align][/td][td][align=center]禽戊型肝炎病毒核酸测定试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-25[/align][/td][td][align=center]猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒[/align][/td][td][align=center]480T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-26[/align][/td][td][align=center][back=yellow]●[/back]高致病性猪蓝耳病病毒抗体ELISA试剂盒[/align][/td][td][align=center]480T/盒[/align][/td][td][align=center]2盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-27[/align][/td][td][align=center]非洲猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒[/align][/td][td][align=center]192T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-28[/align][/td][td][align=center]马传染性贫血病毒抗体ELISA试剂盒[/align][/td][td][align=center]96T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-29[/align][/td][td][align=center][back=yellow]●[/back]核酸提取纯化试剂盒[/align][/td][td][align=center]96T/盒[/align][/td][td][align=center]52盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-30[/align][/td][td][align=center]药敏片[/align][/td][td][align=center]20片/盒[/align][/td][td][align=center]2盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-31[/align][/td][td][align=center]沙门氏菌[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒[/align][/td][td][align=center]50T/盒[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-32[/align][/td][td][align=center]核酸染料[/align][/td][td][align=center]500U/支[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-33[/align][/td][td][align=center]DL2000 DNA Marker[/align][/td][td][align=center]500μl/支[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]01-34[/align][/td][td][align=center]50mL离心管[/align][/td][td][align=center]500支/箱[/align][/td][td][align=center]1盒[/align][/td][/tr][/table](2)[font=inherit]投本项目不分包,[back=aqua]供应商[/back]必须对所有产品进行响应[/font]。[back=yellow](3[/back])上述产品加注“●”符号的为核心产品合同履行期限:以签订合同为准本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、申请人的资格要求:[/font]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;2.落实政府采购政策需满足的资格要求:本项目执行价格扣除优惠政策,给予小微型企业、监狱企业或残疾人福利性单位报价10%的扣除,用扣除后的价格参加评审。价格扣除比例对小型企业和微型企业同等对待,不作区分。监狱企业、残疾人福利单位属于小型、微型企业的,不重复享受政策。3.本项目的特定资格要求:(1)供应商须提供法定代表人授权书(原件),如果是法定代表人直接参与磋商响应的可以不提供(但必须在营业执照后附法定代表人身份证复印件)(2)本项目接受产品代理商或经销商响应;响应产品如果为进口产品的,供应商须提供制造商的授权书(复印件);[font=inherit]三、获取采购文件[/font]时间:2023年03月10日 至 2023年03月16日,每天上午9:00至11:30,下午13:30至17:00。(北京时间,法定节假日除外)地点:南京市雨花台区软件大道21号舜天集团C座110室方式:请与采购代理机构联系磋商文件购买事宜售价:¥100.0 元(人民币)[font=inherit]四、响应文件提交[/font]截止时间:2023年03月21日 10点00分(北京时间)地点:南京市雨花台区软件大道21号舜天集团C座103/105[font=inherit]五、开启[/font]时间:2023年03月21日 10点00分(北京时间)地点:南京市雨花台区软件大道21号舜天集团C座103/105[font=inherit]六、公告期限[/font]自本公告发布之日起3个工作日。[font=inherit]七、其他补充事宜[/font]1、从采购代理机构处合法获得磋商文件的供应商方可参与本项目;2、供应商须以公对公形式办理汇款,并备注采购编号,同时将汇款凭证及相关参与项目信息电邮至[font=inherit][u]liqinyuan@sumex.com.cn[/u][/font],以便我司能及时登记领购信息。(我司将根据电邮内容发送采购文件的文本文件和电子文件)3、购买采购文件款汇款地址:[back=lime](1[/back])开户名:江苏舜天高科有限责任公司[back=lime](2[/back])开户行:工商银行南京白下支行[back=lime](3[/back])账 号:43010131191008888954、本次磋商执行《政府采购竞争性磋商采购方式管理暂行办法》、《财库(2011)181号令》、《财库(2017)141号》、《财库(2014)68号》、《财库(2020)46号令》、《苏财购〔2020〕52号》、《财库(2004)185号令》(节能环保)、《苏财购〔2022〕45号》5、供应商须通过“信用南京”或“南京公共采购信息网”进入南京政府采购供应商诚信档案管理系统,完成供应商注册登记,注册登记成功后方可参加政府采购活动;并在磋商文件发布之日起至递交响应文件截止日前打印[font=inherit]《南京市政府采购供应商信用记录表暨信用承诺书》[/font]加盖公章及法人签字,原件随附在响应文件正本中;6、本次采购项目供应商须提供[font=inherit]纸质响应文件[u]正本1份,副本3份[/u][/font],[font=inherit][u]同时提供电子介质文件1份[/u][/font](一般应为PDF格式、U盘形式(单独封装)、随纸质正本文件一并提交。当电子版文件和纸质正本文件不一致时,以纸质正本文件为准。电子版文件用于存档,供应商需承担前述不一致造成的不利后果,[font=inherit]未按要求提供的视为响应无效[/font]。[font=inherit]八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称:南京市畜牧兽医站地址:南京市雨花台区铁心桥街道宁水路199号联系方式:刘老师025-528732642.采购代理机构信息名 称:江苏舜天高科有限责任公司地 址:南京市雨花台区软件大道21号舜天集团C座110室联系方式:丁一(025-52875927)、李沁原(025-52875941)3.项目联系方式项目联系人:丁一电 话:  025-52875927

  • 动物疫病快速检测仪有哪些用途

    动物疫病快速检测仪有哪些用途

    [size=16px]  动物疫病快速检测仪有哪些用途  动物疫病快速检测仪是用于检测动物中潜在疫病病原体的仪器,通常被广泛应用于养殖业、畜牧业和野生动物保护等领域。这些检测仪器具有多种用途,包括但不限于以下几个方面:  早期疫情监测:动物疫病快速检测仪可用于早期监测动物种群中的潜在疫病,有助于快速发现疫情爆发并采取相应的控制措施,从而减少疫情的蔓延。  动物健康管理:这些仪器可用于定期监测养殖动物或野生动物的健康状况。通过检测疫病病原体,可以及早发现动物中的潜在疫情,有助于采取预防措施,减少生产损失。  检疫和出口:在国际动物贸易中,一些国家或地区可能要求进行疫病检测以确保进出口的动物和动物产品是安全的。动物疫病快速检测仪可用于符合检疫和质量标准。  疫苗研发和效力评估:这些仪器还可以用于疫苗研发和效力评估。通过检测疫病病原体,可以评估疫苗的效果以及其在控制疫病方面的潜在用途。  野生动物保护:在野生动物保护领域,这些仪器用于监测野生动物中的传染病,帮助保护生态系统的健康,减少野生动物种群的疫病传播。  紧急反应:在疫情爆发或疫情威胁时,这些仪器可用于紧急反应,帮助快速诊断和控制疫情的扩散。  动物疫病快速检测仪通常使用分子生物学技术、免疫学方法和生化分析等技术,能够检测多种疫病病原体,如病毒、细菌、寄生虫等。这些仪器的使用有助于维护动物健康、确保食品安全、保护野生动植物,同时减少农业和养殖业的经济损失。[/size]

  • 漂浮死猪事件引极大关注 农业部公布最新检测情况

    漂浮死猪事件引极大关注 农业部公布最新检测情况

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/03/201303210910_431509_1641058_3.jpg  黄浦江松江段水域漂浮死猪事件发生后,上海市动物疫病预防控制中心会同松江区动物疫控中心,现场采集了死猪的心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、扁桃体等内脏样品共5套。上海市动物疫病预防控制中心实验室采用荧光PCR方法检测了6种病原,包括猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病等3种重大动物疫病,以及猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪流行性腹泻等3种生猪常见疫病。结果从一份样品中检出猪圆环病毒病原阳性,其余样品所有检测项目均为阴性。 据悉,猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型引起猪的一种传染病,是一种近年来比较多发的猪的传染性疫病,不属于人畜共患病。上海市兽医饲料检测所日前采集了30份从黄浦江及上游水域打捞的漂浮死猪的组织样品进行砷检测,所有样品均未检出砷。

  • 动物疫病诊断仪有哪些行业应用

    动物疫病诊断仪有哪些行业应用

    [font=&][size=16px]动物疫病诊断仪有哪些行业应用动物疫病诊断仪器在农业和兽医领域有广泛的应用,主要用于检测和诊断家畜、家禽和其他养殖动物中的传染性疾病。以下是一些动物疫病诊断仪器的主要行业应用:畜牧业:动物疫病诊断仪器在畜牧业中的应用非常重要。养殖业者可以使用这些仪器来检测家畜(如牛、猪、羊)中的传染性疾病,以及确保养殖场的健康和生产效益。家禽养殖:在家禽养殖业中,动物疫病诊断仪器用于检测家禽(如鸡、鸭、火鸡)中的疫病,包括禽流感、新城疫、传染性支气管炎等,以控制疫情传播。渔业:在养鱼业中,这些仪器可用于检测鱼类中的疫病,如病毒性出血性败血症(VHS)和传染性胰腺坏死病毒(IPN)等,以确保养鱼场的鱼群健康。野生动物保护:动物疫病诊断仪器也可用于监测野生动物中的传染性疾病,有助于野生动物保护和管理机构保护野生动物种群的健康。兽医临床:在兽医诊所和兽医医院中,动物疫病诊断仪器用于确诊和监测个体宠物和家畜的健康状况,以提供及时的治疗和预防措施。动物疫苗研发:在动物疫苗研发领域,这些仪器用于评估候选疫苗的效力,包括检测免疫反应和疫苗对病原体的保护效果。兽医科研:科研机构和大学可以使用这些仪器来开展动物疫病相关的研究,以改进诊断方法和开发新的治疗方法。动物疫病诊断仪器在上述行业中发挥着关键的作用,有助于确保家畜、家禽和其他养殖动物的健康,保护食品安全,维护野生动物种群,以及推动兽医科研和养殖业的发展。这些仪器通常包括分子生物学技术、免疫学技术、细胞培养技术、显微镜技术和生化分析方法等多种技术手段。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310081111049542_7085_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size][/font]

  • 【转帖】北京奥运会参赛马疫病诊断采用中国试剂

    新华社哈尔滨7月4日电(记者范迎春)经国际奥委会批准,北京奥运会马术比赛参赛马匹的传染性贫血病诊断将应用中国农科院哈尔滨兽医研究所研制的试剂。这是中国动物疫病检测试剂首次应用于对奥运会参赛马匹的把关。  据哈兽研所马病专家相文华介绍,马传贫是一种烈性慢病毒传染病,特征是病毒持续感染、反复发热和贫血,一旦发生,可能造成马匹群体感染和死亡。历史上,马传贫曾经给全球的农牧业生产和相关产业带来巨大损失。  哈兽研所从上个世纪六七十年代开始开展马传贫疫病研究,研制成功的“马传染性贫血病诊断试剂”对马传贫疫病诊断准确,在国际上享有良好的声誉。同时,应用于防疫的马传贫疫苗是迄今国际上唯一成功应用于慢病毒免疫的疫苗。  北京奥运会马术比赛将在香港进行。届时,将有来自国内外的大批名贵赛马参赛。相文华说:“对参赛马的疫病检测非常重要,是关系到赛马安全和比赛能否顺利进行的一个关键因素。”  此前,哈兽研两位马病研究专家应香港渔农署邀请前往香港,使用哈兽研诊断试剂与美国的诊断试剂分别对40匹马的血样同时进行马传贫病检测。结果表明,哈兽研自主研发的马传贫诊断试剂准确可靠,因而获准在奥运会上使用。  按照国际奥委会规定,奥运会参赛马匹在入境前将全部提取血样送检,确认无疫病后方可参加比赛。“我们已经做好了检测马传贫疫病的充分准备,”相文华表示。

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