黄连上清丸

本方法采用in-cellcleanup ASE提取技术对复方中药黄连上清丸进行提取净化，取得了满意的效果。

采用in-cell cleanup ASE提取中药复方黄连上清丸中 的小檗碱，和2010版药典推荐方法对小檗碱的萃取率接 近，能够去除干扰小檗碱测定的杂质，能够达到萃取净 化一步到位，同时具有操作简单、快速、高效等特点。

采用in-cell cleanup ASE提取中药复方黄连上清丸中的小檗碱，和2010版药典推荐方法对小檗碱的萃取率接近，能够去除干扰小檗碱测定的杂质，能够达到萃取净化一步到位，同时具有操作简单、快速、高效等特点。

在分析基质复杂的样品时，萃取过程中干扰物质容易同目标化合物一起萃取出来，这些共萃取物干扰分析或影响仪器性能。通常需采用额外的净化步骤来对萃取液进行处理，以达到分析检测的目的，如柱层析法、固相萃取法（SPE）、凝胶色谱法（GPC）等。复方中药黄连上清丸基体组成复杂，主要组成药物17种，2010版药典对黄连上清丸中的小檗碱提取采用水浴，超声提取，浓缩提取液后过层析柱去除杂质，该方法操作复杂，耗时耗力。快速溶剂萃取技术（Accelerated Solvent Extraction，ASE）是由美国戴安公司研发的一种新型的样品前处理方法，其原理是通过选择合适的溶剂在高温高压下快速提取固体、半固体样品。ASE具有萃取效率高，速度快、溶剂用量少等优点。同时ASE还具备选择性提取的功能—in-cell cleanup技术，即在萃取池底部填入合适吸附剂（见图1），选择性吸附样品中的杂质，达到萃取净化同步完成的目的，极大的节省了操作时间和步骤。本方法采用in-cell cleanup ASE提取技术对复方中药黄连上清丸进行提取净化，取得了满意的效果。

ChromasterUltra Rs超高效液相色谱仪是日立高新技术公司于2013年11月18日在中国发布了的一款全新超高效液相色谱仪。ChromasterUltra Rs具有目前世界最高的耐压水平：140 MPa，可真正实现超高速分析；新开发的色谱柱理论塔板数高达50,000以上，耐压高达140MPa，实现了真正的超高分辨分析；二极管阵列（DAD）检测器的65 mm流通池、新型光学系统可实现真正的超高灵敏度分析。

流动相： 0.033mol/L 磷酸二氢钾溶液，称取 4.5g 磷酸二氢钾，加 1000ml 水溶液使溶解；取该溶液 650ml,加色谱纯乙腈 350ml,混合均匀，超声脱气。

建立牛黄上清丸中黄芩苷含量测定的方法。采用高效液相色谱法，XB-C18柱（5μm，250mm×4.6mm），流动相：甲醇：水：磷酸=45：55：0.2，进样量：5μL，柱温：30℃，可以满足药典的分析要求。

要：肉桂CinnamomumcassiaPresl为樟科（Lauraceae）植物，是一种常用中药，性大热，味甘辛，具补阳，温肾，祛冷，通脉，止痛功效。临床上常用于补火助阳，散冷止痛，活血通经等。其主要成分为桂皮醛和肉桂酸。 考察黄连配伍肉桂前后化学成分的变化；定量测定黄连配伍肉桂前后桂皮醛含量的变化。方法：气相色谱法。OV-101毛细管柱。柱长25m，内径0.2mm，氢焰检测器，柱温100℃，气化室220℃。检测室220℃，程序升温6℃/min。101℃～180℃。氮气流速50mL/min。，内标物正十一烷。结果：黄连与肉桂配伍后桂皮醛含量下降，且下降程度与黄连比例有关。所测桂皮醛与其它组分具有良好的分离度。本法最低检丈量为0.01μg，线性范围为0.0261～1.5657μg。加样回收率为98.83％，RSD=1.7％。结论：本方法操纵简单，结果正确。

该LC应用表明，使用常规HPLC分离从黄连粉末提取物中获得的黄连素，使用半制备HPLC放大分离。关键词：分析分离，半制备分离，黄连，黄连素，神经科学，天然药物

华谱科仪参照《中国兽药典》对双黄连口服液相关含量测试条件，对双黄连口服液样品进行分析。可以实现双黄连口服液目标峰与杂质峰的分离，绿原酸峰理论塔板数大于6000，连翘苷峰理论塔板数大于6000。

本文参照2020版《中国药典》记载的中药材黄连液相色谱分析方法，进行供试品的制备，从实验结果可知，可以实现黄连样品中盐酸小檗碱与杂质峰的良好分离，目标峰峰形良好，盐酸小檗碱峰理论塔板数大于5000，表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的峰位，其相对保留时间在规定值的± 5%范围之内，满足药典要求。

本文章采用美国SSI原装进口液相色谱仪（由高压Ⅳ型泵、2000型可变波长紫外检测器等几大模块组成）分析了双黄连口服液中黄芩苷的含量，为广大用户提供了高效可靠的方法。

本应用纪要描述了如何使用沃特世（Waters）UNIFI天然产物整体解决方案中二元比较的工作流程快速准确的检定来自两个不同厂家的双黄连口服液化学组分的异同点，从而了解同一产品不同厂家的成分差异，也有助于同一厂家监控不同批次间产品的质量稳定性。为所有类似的不同样品二元比较的工作提出了简单、有效的解决方案。

研究药根碱（Jat）的降血糖作用，并比较Jat、小檗碱（Ber）、黄连煎剂（HLD）及模拟方（Ber+Jat）对小鼠血糖水平的影响。方法 采用薄层扫描法测定HLD中Ber和Jat的质量分数，并根据其比值配置模拟方。小鼠ip四氧嘧啶制备糖尿病模型，模型小鼠和正常小鼠均ig给予不同剂量Jat、Ber、HLD和模拟方，葡萄糖氧化酶法测定血糖。结果 Jat、Ber、HLD和模拟方均有不同程度的降低糖尿病和正常小鼠血糖的作用，HLD作用最强，Jat较同剂量Ber作用弱，模拟方与单用Ber作用相当。结论 黄连中可能还有除Ber和Jat之外的降血糖成分，以天然成分比例配伍Ber和Jat，未见明显协同或拮抗作用。

2015版《中国药典》（一部）推荐使用YMC-Pack ODS-A色谱柱进行注射用双黄连（冻干）指纹图谱测定。

大曹三耀技术中心使用普适性的包被型的CAPCELL PAK C18 MG对双黄连口服液进行分析，绿原酸、黄芩苷、连翘苷均能得到良好分离，满足2020版药典理论塔板数的要求。

采用尺寸排阻色谱柱TSKgel G2000SWXL（7.8 mmI.D.× 30cm,5μ m）,流动相乙腈-水-三氟乙酸（体积比40：60：0.07），在紫外检测波长214nm条件下检测双黄连注射液中的高分子杂质。

采用药典中推荐的有机溶剂甲醇作为 ASE 的萃取溶剂，在萃取温度 100℃，静态萃取5min，单次循环就能达到药典中超声提取的萃取率。其中 ASE 萃取法明显的缩短了萃取时间。对 ASE 萃取条件进行优化，得到最佳的萃取条件为：水为萃取剂，140℃为萃取温度，静态萃取时间 5min，2 次循环。在最佳条件下，ASE 对黄连中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的提取率为 1.40%、2.39%、2.28%和 9.08%，明显优于药典中超声提取的提取率。

黄连解毒汤中的黄芩具有抗菌消炎、降压利尿、解热、镇静、利胆解痉等作用，是此方的主要药物，而黄芩苷是黄芩中的主要有效成分，因此测定其含量已成为黄连解毒药质量控制标准之一。目前医药界检测黄芩苷含量大多采用高效液相色谱法。本文就高效液相色谱法在黄芩苷含量测定上的应用情况及其存在的问题作一简述。

2015版《中国药典》采用高效液相色谱法测定双黄连口服液中的绿原酸和黄芩苷含量作为控制成方制剂的质量指标，结果绿原酸和黄芩苷与杂质无法完全分离，本文通过改变流动相比例、柱箱温度进行了测定。

利用岛津现有的“细胞培养上清液分析方法包“直接分析监测细胞上清液中组分变化，无需方法优化，并可快速实现方法拓展，前处理方便，数据分析结果直观。

抗癌新星——黄连素（Berberine Hydrochloride,BBR），又称小檗碱（又称盐酸小檗碱），最早是从中药黄连、黄柏及十大功劳叶等含有小檗碱的植物中提炼而成的。目前人们使用的多为人工合成品。盐酸小檗碱(Berberine)属异喹啉类生物碱，分子式[C20H18NO4]+，是黄色针状晶体，表现为季胺型、醇型3种互变异构体，其中以季胺碱型最稳定，本次参考中国药典2020年版，采用高效液相色谱(HPLC)检测，选用纳谱分析ChromCore Phenyl-Ether色谱柱对盐酸小檗碱和其异构体杂质进行分离和检测。盐酸小檗碱和其异构体杂质具有良好的分离度和峰形，该方法操作简单，灵敏度高，重复性好，为该药物的质量保证提供检测依据。

目前生物制品公司的生物过程工艺开发与优化偏重干监测常规的温度、搅拌、溶解气体、OD值等理化条件和少数培养基成分与代谢物等的变化，缺乏对于细胞培养上清液组分直接、全面且快速的客观动态数据分析，因此无法精准优化细胞培养工艺条件，甚至影响抗体类药物等的产品品质:而培养基生产商为了开发高效低成本培养基配方，并且要保证批次间一致性，则需要投入大量的人力物力，配备不同检测功能的仪器来实现培养基成分的全方位检测。为满足快速全面分析细胞培养上清液组分和培养基组分，将基础碳源、氮源、核酸、维生素和其他主要代谢物同时检测分析的需求，我们开发出“细胞培养上清液方法包”。该技术平台采用超快速三重四极杆液质联用仪，仅需 17 分钟，即可同时监测 95 种细胞培养上清液营养成份和代谢物等的相对丰度变化 。无需用户自行开发方法，即装即用。所有目标化合物信息与实验方法全内置，且根据需要可增加，可拓展。

近期部分中药检测企业反馈黄连、黄柏含大量色素和生物碱对GCMSMS色谱柱污染较为严重极易造成目标物线性不好、回收率低并且重现性差，常规的固相萃取法一、固相萃取法二、固相萃取法三都不能很好的净化，色谱柱前端污染较为严重，容易导致GCMSMS久效磷和甲基硫环磷丢峰。纳谱分析根据植物色素成分特点，近期又针对以上含色素和生物碱样品分析存在的问题，优化了固相2和固相3产品对于色素的吸附能力。相比常规固相萃取方式，优化后的固相萃取柱可以吸附更多生物碱类成分、鞣质类成分和色素成分，从而降低了样品中色素对色谱柱的污染和基质效应。今天，我们来看看黄连、黄柏项目的前处理效果吧。

绿豆蛋白分级过程对转谷氨酰胺酶交联的影响How fractionation procedure of mung bean protein affects transglutaminase crosslinking使用格哈特全自动杜马斯定氮仪Dumatherm分析分散体和上清液的蛋白质含量，蛋白质转化因子为5.7。

利用细胞培养基上清液分析方法包及超高效液相色谱三重四极杆质谱联用仪LCMS-8060对商品化的5个不同批次的小牛血清进行了组份分析。使用该方法包共检出包含内标在内的54种组份，针对这些组分做了5个批次的柱状对比图，对比结果显示这五个不同批次的小牛血清在葡萄糖，氨基酸及微量元素等方面存在较大差异。

该解决方案利用岛津研发的“细胞培养分析方法包”可在17分钟内同时分析95种细胞培养上清液营养成份和代谢物的相对丰度变化，完成细胞培养上清液所培养细胞的生长状态分析，为判断细胞在生长增殖过程中状态的优劣提供实验依据。利用该方法有助于相关研究人员判断不同条件下细胞的生长状态，为培养基配方优化提供指导意义。

该解决方案利用岛津研发的“细胞培养分析方法包”可在17分钟内同时分析95种细胞培养上清液营养成份和代谢物的相对丰度变化，完成细胞培养上清液所培养细胞的生长状态分析，为判断细胞在生长增殖过程中状态的优劣提供实验依据。利用该方法有助于相关研究人员判断不同条件下细胞的生长状态，为培养基配方优化提供指导意义。

本文建立了一种使用岛津三重四极杆液质联用仪检测脂肪细胞培养上清液中肾上腺素和利多卡因残留量的方法。样品经乙腈沉淀蛋白，高速离心、稀释后上机分析。采用外标法定量，在0.1~100 ng/mL范围内，相关系数大于0.999。三个浓度下保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSD）分别在0.12~0.21 %和0.74~4.44 %之间。该方法灵敏可靠，定量限为0.1 ng/mL；三个浓度样品加标回收率在88.0~110.5 %之间；可为脂肪细胞培养上清液中肾上腺素和利多卡因残留量测定和评估提供参考。

本文以2% HNO3稀释样品，使用电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）对仓鼠卵巢细胞（CHO）培养上清液中无机元素含量进行了测试。该方法操作简单，分析速度快，灵敏度高，可以对多元素进行同时测定。利用该方法，考察了CHO在2种不同培养工艺过程中不同时间点细胞培养上清液无机元素含量变化情况，并绘制出时间变化趋势图，对相关研究人员判断细胞状态、改进培养基组成、优化培养工艺具有一定参考意义。