槲寄生

作者：牛红军（山西医科大学）摘要： 目的：初步研究光合细菌生物转化槲寄生的转化机理,并且对光合细菌生物转化槲寄生培养液中具有细胞毒活性的蛋白质和总三萜类物质进行研究。 方法： 实验一：(1)采用pH计测定光合细菌转化槲寄生过程中培养液pH的变化趋势；(2)聚丙烯酰胺凝胶电泳法获得光合细菌(PSB)蛋白质、酯酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶的电泳图谱；(3)槲寄生提取液中添加吲哚,以PSB进行生物转化,通过HPLC法测定靛蓝的生成量来反映PSB加氧酶活性。 实验二：将光合细菌转化槲寄生培养液(PSBT)离心,得到PSBT上清液和菌体沉淀。菌体沉淀用超声波辅助冻融法破碎,离心,上清液即为PSBT菌体沉淀提取液。取PSBT上清液及PSBT菌体沉淀提取液,进行硫酸铵沉淀和透析,分别得PSBT上清液总蛋白提取液和菌体沉淀总蛋白提取液。取不同浓度的总蛋白质提取液,用MTT法测定细胞毒活性。 利用AKTA purifier 10层析系统,Hitrap Desalting和CM Fast Flow等层析柱,采用不同缓冲液体系对PSBT上清液总蛋白提取液进行蛋白质纯化。 实验三：采用紫外分光光度法对槲寄生提取物和PSBT中三萜类化合物进行比较研究；分别采用薄层色谱法和高效液相色谱法(HPLC)对齐墩果酸进行定性分析和含量测定,HPLC色谱条件：色谱柱为Diamonsil C18 (200mm×4.6mm, i.d.5μm),流动相为甲醇-0.18%的磷酸水(86：14),检测波长210nm,柱温25℃,流速1ml/min。结果： 实验一：(1)接种PSB后,纯PSB培养液pH缓慢上升,PSBT的pH迅速下降；(2)PSBT中菌体蛋白质、酯酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶的电泳图谱与纯PSB培养液中菌体的电泳图谱不同；(3)未得到PSBT和纯PSB培养液中菌体的超氧化物歧化酶(SOD)电泳图谱；(4)加入吲哚后,PSBT中有靛蓝类物质生成,而纯PSB培养液中无靛蓝产生。 实验二：各蛋白质样品的细胞毒活性： (1)上清液总蛋白对HO-8910细胞的半数抑制浓度(IC50,mg/mL,按照槲寄生提取液中原药材含量计算,下同)：①IC50200mg/mL:沼泽红假单胞菌转化槲寄生水浸提培养液(浸沼,JZ)是0.18,槲寄生水浸提培养基(浸对,JD)是20,球形红细菌转化槲寄生水浸提培养液(浸球,JQ)是60：②200mg/mLIC502000mg/mL:槲寄生水提培养基(水对,SD)、沼泽红假单胞菌转化槲寄生水提培养液(水沼,SZ)和球形红细菌转化槲寄生水提培养液(水球,SQ);③IC502000mg/mL:球形红细菌转化槲寄生醇提培养液(醇球,CQ)、沼泽红假单胞菌转化槲寄生醇提培养液(醇沼,CZ)和槲寄生醇提培养基(醇对,CD)。 (2)上清液总蛋白对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:JD是8,JZ是20,JQ是78,CQ是150；②200mg/mLIC502000mg/mL:SQ。 (3)菌体沉淀总蛋白对HO-8910细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:SZ是84,CZ是122；②200mg/mLIC502000mg/mL:JQ和JZ；③IC502000mg/mL:纯球形红细菌培养液(球,Q)、纯沼泽红假单胞菌培养液(沼,Z)、SQ和CQ。 (4)菌体沉淀总蛋白对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:JZ是14,JQ是18；②200mg/mLIC502000mg/mL:CZ、CQ和SZ。 (5)其它蛋白样品对肿瘤细胞几乎没有抑制作用。 SZ上清液总蛋白、SQ上清液总蛋白和SD总蛋白在CM Fast Flow层析柱的各种层析条件下都至少得到一个穿透峰和一个洗脱峰,另外,SQ上清液总蛋白在pH5.0的缓冲液体系中还额外分离得到的一个洗脱峰；SZ上清液总蛋白和SQ上清液总蛋白都在pH6.5的缓冲液体系中多分离得到一个小穿透峰。 实验三：CQ和CZ的总三萜含量与CD相比分别增加36%、14.7%；CQ和CZ的齐墩果酸含量与CD相比分别增加925%、281%；SQ、SZ及SD的总三萜和齐墩果酸含量均很低。 结论： (1)培养液中加入槲寄生后,光合细菌参与槲寄生的生物转化反应的某些酶被抑制或激活；(2)各种蛋白质提取液中,PSB转化槲寄生水浸提培养液上清液总蛋白的抑瘤活性最大。各种浓度JZ上清液总蛋白、JQ上清液总蛋白和JD总蛋白的细胞毒活性随作用时间变化的规律不同,但都具有时间-剂量依赖性。由此可知：PSB生物转化后,蛋白质的抑瘤活性规律发生了变化,抑瘤活性的蛋白质组分发生了改变。(3)PSBT中有新的蛋白质组分生成,说明光合细菌可以转化槲寄生成分生成新的蛋白质；(4)槲寄生醇提培养基经过光合细菌生物转化后,总三萜和齐墩果酸含量均增加,球形红细菌转化生成总三萜和齐墩果酸的能力比沼泽红假单胞菌强。三萜类化合物含量的增加可能是PSBT抗肿瘤作用增强的部分物质基础。

今天和大家分享一下 寄生虫的图片 ！分别在4倍、40倍等显微镜下观察寄生虫的形态！

细胞内寄生微生物有哪些？有哪些致病作用啊

1 正确选择抗寄生虫药 抗寄生虫药物可分为抗蠕虫药(又称驱虫药，包括驱线虫药、驱绦虫药、驱吸虫药)、抗原虫药(抗球虫药、抗滴虫药)、体外杀虫药(又称杀昆虫和杀蜱螨药)。由于动物的寄生虫病多为混合感染，因此应选用高效、广谱、低毒、投药方便、价格低廉、无残留和不易产生耐药性等的抗寄生虫药。 外观辨别药品包装内外标签说明文字是否一致。标签或说明书应当注明该药的通用名称、成分及含量、规格、生产企业信息、产品批准文号(或进口兽药注册证号)、产品批号、生产日期、有效期、适应症(或功能与主治)、用法、用量、休药期、禁忌、不良反应、注意事项、运输储存保管条件及其他应当说明的内容。 仔细观察药物的外观形状，片剂应有良好的硬度，表面无斑点，在水中15分钟和水接触后成为糊状，粉剂应无杂物、无结块，液体看水溶性、乳化性和是否能迅速溶于水中。 高效： 高效的抗寄生虫药其虫卵减少率应达96％以上，小于70％则属疗效较差。广谱： 指驱虫范围广。在实际应用中，要根据实际情况，联合用药以达到扩大驱虫的目的。 低毒： 治疗寄生虫感染的大多数化学药物尽管有驱虫作用，但也有一定的毒性，对动物体有害。好的抗寄生虫药物应对寄生虫虫体有强大的杀灭作用，而对动物体无毒或毒性很小。此条件对杀灭体外寄生虫药物尤其重要。 投药方便： 通过饮水、混饲、皮肤浇泼(透皮剂)等方式给药比较方便。

随着天气渐热，不少人为图省事喝生水解渴。医学专家提醒，喝生水、生吃水生植物易得寄生虫病。　　前不久，家住贵州山区的儿童小涛出现反复发热、腹痛的症状，身上长出包块和条蛇状的红印。有一次小涛突然觉得右腹部皮肤痛痒，一旁的父亲惊讶地发现，竟是一条小虫正从小涛的皮肤里爬出。　　经过重庆市儿童医院诊断后发现，小涛身上的寄生虫名为肝片形吸虫，它对人体的脏器尤其是肝胆组织有很大的损害，严重时可能危及患者生命。医生表示，寄生虫是穿过小涛的肝、胆、肠道等组织，进入皮下，然后穿出体外的。　　重庆市儿童医院皮肤科医生肖异珠表示，肝片形吸虫通常寄生在牛、羊身上，人们患这种病多是因为生食水生植物、喝生水造成的。小涛家正是喂养有牛、羊，而小涛又经常喝生水、吃生菜，结果被寄生虫找到了寄生的场所。对此肖异珠医生提醒，要注意饮食卫生，不要喝生水、生食水生植物。

目 录 一、抗震救灾期间涉及的主要寄生虫病防控知识... 2血吸虫病... 2疟疾... 4黑热病... 6蓝氏贾第鞭毛虫病... 7阿米巴痢疾... 9旋毛虫病... 10二、蚊媒控制方法... 11

[size=4][b]【寄生虫检验】[/b][/size][size=4]1. 宿主分：终，中间，储存或保虫，转续。2. 寄生虫对宿主：夺取营养，机械损伤，化学毒，变应原作用。3. 流行特点：地方性，季节性，自然疫源性。4. 土源性蠕虫不用中间宿主生物源性要，蛔虫感染期2～3个月，成虫在小肠以空肠多。5. 鞭虫寄生于盲肠生活史约一个月，人是唯一传染源，蛲虫寄生于回盲部，钩虫的丝状蚴为感染期成虫在小肠部可致大粪毒，黄肿病，异嗜症，桑叶黄。6. 丝虫丝状蚴寄生于大淋巴管或淋巴结内可致流火，象皮肿，乳糜尿。7. 吸虫除血吸虫外都是雌雄同体。8. 旋毛虫：成虫和幼虫在同一宿主，不用在外发育，但要转换宿主，被寄生的宿主又是中间宿主，致病分：侵入期，幼虫移行期，囊包形成期。检验心活组织最可靠，免疫学检验是临床最常用的方法。9. 吸虫除血吸虫（圆柱状，雌雄异体，虫卵致病最重）外都是两侧对称10. 华枝睾吸虫卵最小，姜片虫虫卵最大11. 肺吸虫第一中间宿主为川卷螺，第二为淡水石蟹，囊蚴是感染期，致病分：脓肿期，包囊期，纤维瘢痕期。12. 人是猪带绦虫唯一终宿主，猪或人是中间宿主。13. 人是牛带绦虫唯一终宿主，只被成虫寄生。14. 痢疾阿米巴：包囊→小滋养体→包囊。15. 杜氏利什曼虫：黑热病，分人源型（平原型），犬源型（山丘型），野生动物型（荒漠型），主要是防治白蛉。16. 阴道滴虫有4根前鞭毛和1根后鞭毛。17. 隐孢子虫以空肠上端感染最重，是艾滋病主要死因之一。[/size]

中医儿科常见寄生虫病的辩证论治——执业药师继续教育资料

[center]人类首次拍摄寄生虫感染细胞图像 有利研发疫苗[/center]美国新出版的《公共科学图书馆• 病原体》杂志报告说，澳大利亚悉尼世纪研究所的科学家利用独创的技术，首次成功地拍摄记录下了细胞被寄生虫感染以及寄生虫随后开始向全身传播的图像。 悉尼世纪研究所免疫成像项目主任沃夫冈• 温宁格教授介绍说，他们的研究借助了能够实时观察活细胞的大功率多光子显微镜。他表示，皮肤中的树状细胞是他们研究的对象。他们发现，在正常条件下，表皮内的细胞处于静止状态，而真皮内的细胞却极其活跃，不停地移动，似乎是在搜寻病原体。在人为地将利什曼虫（Leishmania）引入细胞中后，他们观察到了寄生虫被细胞“拾起”以及开始向整个身体蔓延的过程。 利什曼病是一种经由沙蝇叮咬所传播的原虫疾病。据估计，在非洲、中东和南美某些地区，利什曼病的感染患者近1200万人，每年新增病例大概200万宗。利什曼病导致患者皮肤溃疡，并能影响病人的内脏，如脾、肝和骨髓。如果不采取治疗措施，那么病人或许会有生命危险。 直观跟踪病原体在细胞中的活动状况，为人们设计和研发防病疫苗提供了重要条件。温宁格表示，通过研究，他和同事对病原体如何被免疫系统识别以及参与的细胞有了基本了解。这意味着人们能分析那些可以识别帮助利什曼虫病原体感染患者的分子，并将这些分子作为疫苗针对的目标。此外，他们还能了解其他感染的免疫反应，以便开发出更好的疫苗。 世纪研究所执行理事马修• 瓦达斯教授认为，帮助研究人员拍摄免疫过程的多光子显微镜如同医学研究中的哈勃望远镜。哈勃让人们清晰地观察宇宙万物，而多光子显微镜则提供了独特的细胞观察方法，帮助人们全新地了解免疫系统是如何工作的。信息来源:科技日报

美国佛罗里达州一名12岁男孩24日去世于一种有数寄生虫疾病。这种寄生虫会引发原发性阿米巴脑膜脑炎，从而使熏染者丧命。　　男孩名为扎沙里耶·雷纳，家住拉贝尔市。按家人的说法，雷纳本月3日在自家相近一处沟渠与小搭档玩水上滑板，不料熏染福氏耐格里阿米巴（一种线性变形虫）。他的家人24日经由交际网站“脸谱”证实，雷纳已于当天下战书去世。家人筹划募捐他的器官。　　雷纳的家人报告美国有线电视消息网记者，雷纳入院后继承了脑部手术，经诊断为原发性阿米巴脑膜脑炎。大夫随后让他继承一种实行药物治疗，但最终没有告成。这种药物不久前对一名阿肯色州12岁女孩收效。　　天下各地的水、氛围和土壤中都存在自由生存阿米巴原虫。福氏耐格里阿米巴为嗜热性虫株，紧张存活在温暖的湖水或河水中，会在非常偶然偶尔的环境下进入人的鼻腔，增殖后穿过鼻黏膜和筛状板，沿嗅神经上行入侵脑部，吞食神经细胞，引发原发性阿米巴脑膜脑炎。　　得知雷纳熏染福氏耐格里阿米巴的消息后，佛州卫生部颁布告诫，提示游泳的人，温度高和水位低都是这种阿米巴原虫繁殖的温床。　　原发性阿米巴脑膜脑炎是一种中枢神经体系熏染，起病急骤，生长敏捷，可在1天至12天内致去世。它的早期症状包罗头痛、发烧、恶心呕吐、脖子发僵，之后患者会出现癫痫、举动失常和幻觉。要是无法及时治疗，这种病的殒命率高达95%。不外，它不在人与人之间流传。

新华社温哥华11月22日电（记者马晓澄）加拿大一项研究显示，常用作杀虫、杀螨剂的一类大环内酯双糖化合物——阿维菌素在实验中能有效地杀死结核杆菌，这预示着阿维菌素或可用于研发新的抗肺结核药物或药物组合。 来自不列颠哥伦比亚大学的研究人员本周在美国学术刊物《抗微生物制剂与化学疗法》网络版发表文章说，他们在实验室进行的体外测试中发现，阿维菌素能杀死结核杆菌，包括耐药结核杆菌。这表明，阿维菌素可能具有宝贵价值，因为耐多药肺结核没有特效药，很难治愈。 阿维菌素在发展中国家被广泛用于消灭可引起盘尾丝虫病、象皮病的寄生虫，但传统上被认为对细菌无效。研究人员表示，阿维菌素的临床应用价值还需要更多验证，目前正在使用动物模型来探索用药剂量。他们也将试验阿维菌素是否可与其他药物结合使用，以形成新的有效疗法。 目前，结核病是造成成年人死亡的第二大传染病，每年在世界各地造成约170万人死亡。据世界卫生组织估计，全球约有三分之一人口携带结核杆菌，但带菌者未必患病。

[b][color=#444444]在做槲寄生高效液相的时候出峰过早，求助怎么解决！[/color][/b]

气相点火后扑扑几声即熄灭了，会有哪些原因啊？

[font=宋体]急性肝损伤（[/font]acute liver injury[font=宋体]，[/font]ALI[font=宋体]）是由无肝病或患有肝病但处于稳定状态的人员在受到长期熬夜、大量酗酒、肝脏缺血缺氧及药物中毒等因素所致[/font][sup][color=black][1-2][/color][/sup][font=宋体]。随着医学技术的发展，越来越多的研究者发现[/font]ALI[font=宋体]的发生发展与炎症反应、氧化与抵御氧化系统失衡及铁死亡等密切相关[/font][sup][color=black][3-5][/color][/sup][font=宋体]。肝脏损伤进一步恶化，会发展为更为严重的衰竭[/font][sup][color=black][6-7][/color][/sup][font=宋体]，诱发机体免疫能力下降、血糖含量异常、脂质代谢紊乱等异常现象累及其他器官损伤。目前，[/font]ALI[font=宋体]的临床防治主要采用保肝药物进行治疗，严重者会选择肝脏替代治疗[/font][sup][color=black][8-10][/color][/sup][font=宋体]。 现代研究发现很多中药及有效成分在防治肝病领域表现出较好的前景[/font][sup][color=black][11-14][/color][/sup][font=宋体]。灯盏花素可以降低[/font][font=宋体]丙氨酸氨基转移酶[i][/i][/font][font=宋体]（[/font]alanine aminotransferase[font=宋体]，[/font]ALT[font=宋体]）、[/font][font=宋体]天冬氨酸[/font][font=宋体]氨基转移酶[/font][font=宋体]（[/font]aspartate aminotransferase[font=宋体]，[/font]AST[font=宋体]）和丙二醛（[/font]malondialdehyde[font=宋体]，[/font]MDA[font=宋体]）水平，提高[color=var(--weui-LINK)]抗氧化剂[i][/i][/color]超氧化物歧化酶（[/font]superoxide dismutase[font=宋体]，[/font]SOD[font=宋体]）的活性，有效调节核因子[/font]E2[font=宋体]相关因子[/font]2[font=宋体]（[/font]nuclear factor-erythroid 2-related factor 2[font=宋体]，[/font]Nrf2[font=宋体]）信号通路，减轻酒精引起的肝损伤[/font][sup][color=black][15][/color][/sup][font=宋体]。[/font][font=宋体]秦皮甲素能够降低四氯化碳（[/font]carbon tetrachloride[font=宋体]，[/font]CCl[sub][color=black]4[/color][/sub][font=宋体][color=black]）[/color][/font][font=宋体]引起的小鼠肝脏中纤维沉积现象，减少[/font]AST[font=宋体]、[/font]ALT[font=宋体]及胆红素（[/font]total bilirubin[font=宋体]，[/font]TBil[font=宋体]）的含量，下调透明质酸酶（[/font]hyaluronidase[font=宋体]，[/font]HAase[font=宋体]）、[/font]III[font=宋体]型前胶原（[/font]procollagen type III[font=宋体]，[/font]PCIII[font=宋体]）和层黏连蛋白（[/font]laminin[font=宋体]，[/font]LN[font=宋体]）的水平，并改善肝组织炎症与脂质空泡[/font][sup][color=black][16][/color][/sup][font=宋体]。因此，从天然药用植物探索抗[/font]ALI[font=宋体]活性物质仍然是目前临床防治[/font]ALI[font=宋体]的有效途径。[/font] [font=宋体]北桑寄生[/font][i]Loranthus tanakae[/i] Franch. et Sav.[font=宋体]是桑寄生科桑寄生属落叶灌木[/font][sup][color=black][17][/color][/sup][font=宋体]，寄生对象为栎属、桦属、李属等树木，在中国、日本、韩国、朝鲜等均有分布[/font][sup][color=black][18][/color][/sup][font=宋体]。现代研究表明北桑寄生中含有糖类、甾体皂苷类、黄酮类等次生代谢物[/font][sup][color=black][19][/color][/sup][font=宋体]。其中黄酮类化合物在北桑寄生药材中含量丰富（约[/font]10.58%[sup][color=black][20][/color][/sup][font=宋体]）。目前，北桑寄生的药理活性研究较少，还尚未见北桑寄生在治疗[/font]ALI[font=宋体]方面的研究报道。课题组前期研究显示，北桑寄生总黄酮（[/font]total flavonoids of [i]L. tanakae[/i][font=宋体]，[/font]LTF[font=宋体]）具有良好的抗氧化作用，可以促进脂多糖诱导的[/font]RAW264.7[font=宋体]细胞中[/font]Nrf2[font=宋体]转录活性，抑制炎症反应的发生[/font][sup][color=black][21][/color][/sup][font=宋体]。因此，本研究利用硫代乙酰胺（[/font]thioacetamide[font=宋体]，[/font]TAA[font=宋体]）建立斑马鱼[/font]ALI[font=宋体]模型，对北桑寄生中黄酮类化合物的保肝活性进行研究，以期为北桑寄生的药理研究提供科学依据。[/font] [b][color=#ffffff][back=#7a4442]1 [font=黑体]材料[/font][/back][/color][/b]1.1 [font=黑体]动物[/font]AB[font=宋体]野生型斑马鱼品系、[/font]CZ320[font=宋体]肝脏荧光标记斑马鱼[/font]Tg[font=宋体]（[/font][i]-1.7apoa2:GFP[/i][font=宋体]）和[/font]CZ59[font=宋体]中性粒细胞荧光标记斑马鱼[/font]Tg[font=宋体]（[/font][i]lyz:DsRED2[/i][font=宋体]）由山东第一医科大学斑马鱼中心提供。斑马鱼养殖在昼夜交替周期为[/font]14 h/10 h[font=宋体]的循环系统中，水温控制在（[/font]28[font=宋体]±[/font]1[font=宋体]）℃，[/font]pH[font=宋体]值与盐浓度分别维持在[/font]7.4[font=宋体]、[/font]0.004%[font=宋体]左右，每日饲喂[/font]2[font=宋体]次丰年虾，[/font]1[font=宋体]次普通饲料。[/font][b][/b]1.2 [font=黑体]药品与试剂[/font]LTF[font=宋体]为本实验室自制[/font][sup][color=black][22][/color][/sup][font=宋体]；芦丁对照品（质量分数≥[/font]98%[font=宋体]，批号[/font]153-18-4[font=宋体]）购自西安瑞林生物科技有限公司；[/font][i]N[/i]-[font=宋体]乙酰半胱氨酸（[/font][i]N[/i]-acetylcysteine[font=宋体]，[/font]NAC[font=宋体]，质量分数≥[/font]98%[font=宋体]，批号[/font]616-91-1[font=宋体]）、油红[/font]O[font=宋体]粉末（批号[/font]1320-06-5[font=宋体]）购自上海源叶生物有限公司；[/font]TAA[font=宋体]（批号[/font]62-55-5[font=宋体]）购自美国[/font]Sigma-Aldrich[font=宋体]公司；[/font]ALT[font=宋体]试剂盒（批号[/font]C009-2-1[font=宋体]）、[/font]AST[font=宋体]试剂盒（批号[/font]C010-2-1[font=宋体]）、[/font]MDA[font=宋体]试剂盒（批号[/font]A003-1-1[font=宋体]）、[/font]SOD[font=宋体][color=var(--weui-LINK)]试剂盒[i][/i][/color]（批号[/font]A001-3-2[font=宋体]）、过氧化氢酶（[/font]catalase[font=宋体]，[/font]CAT[font=宋体]）试剂盒（批号[/font]A007-2-1[font=宋体]）购自南京建成生物工程研究所；还原型谷胱甘肽（[/font]reduced glutathione[font=宋体]，[/font]GSH[font=宋体]）试剂盒（批号[/font]BC1175[font=宋体]）、活性氧（[/font]reactive oxygen species[font=宋体]，[/font]ROS[font=宋体]）试剂盒（批号[/font]CA1410[font=宋体]）购自北京索莱宝科技有限公司；[/font]BCA[font=宋体]蛋白定量试剂盒（批号[/font]P0012[font=宋体]）购自碧云天生物技术有限公司；苏木素[/font]-[font=宋体]伊红（[/font]hematoxylin-eosin[font=宋体]，[/font]HE[font=宋体]）染液套装（批号[/font]G1003[font=宋体]）购自武汉赛维尔生物科技有限公司；其他试剂均为分析级别。[/font]1.3 [font=黑体]仪器[/font]BO-IR[font=宋体]型组织研磨破碎仪（山东百欧医疗科技有限公司）；[/font]HC-2518R[font=宋体]型高速冷冻离心机（中佳有限公司）；[/font]DK-98-II[font=宋体]型电热恒温水锅（天津市泰斯特仪器有限公司）；[/font]SpectraMaxABS[font=宋体]型酶标仪（[/font]CMax Plus Molecular Devices[font=宋体]公司）；[/font]HPG-280BX[font=宋体]型恒温培养箱（东联电子技术开发有限公司）；[/font]IX83[font=宋体]型倒置荧光显微镜（日本[/font]Olympus[i][/i][font=宋体]公司）；[/font]GL224I-ISCN[font=宋体]型万分之一天平（德国[/font]Sartorius[font=宋体]公司）；斑马鱼养殖设备（上海海圣生物实验设备有限公司）；[/font]JB-P5[font=宋体]型包埋机（武汉俊杰电子有限公司）；[/font]CRYOSTAR NX50[font=宋体]型冰冻切片机（赛默飞世尔科技有限公司）。 [/font][b][color=#ffffff][back=#7a4442]2 [font=黑体]方法[/font][/back][/color][/b]2.1 [b]LTF[/b][font=黑体]含量检测[/font][font=宋体]配制芦丁对照品溶液，绘制回归方程。称取实验室自制的[/font]LTF[font=宋体]，配制成质量浓度为[/font]1 mg/mL[font=宋体]的溶液，使用三氯化铝[/font]-[font=宋体]醋酸钠溶液显色，利用回归方程计算[/font]LTF[font=宋体]的含量[/font][sup][color=black][22-23][/color][/sup][font=宋体]。[/font]2.2 [b]LTF[/b][font=黑体]耐受浓度筛选[/font][font=宋体]将成熟健康的[/font]6[font=宋体]月龄斑马鱼以[/font]1[font=宋体]∶[/font]2[font=宋体]或[/font]2[font=宋体]∶[/font]2[font=宋体]的雌雄比放入产卵缸中，待自然产卵后，收集透明胚胎，用循环系统中的养鱼水清洗[/font]2[font=宋体]次，洗去粪便与杂质，转移至干净的培养皿，添加含有少量亚甲基蓝溶液的养鱼水，放置于[/font]28 [font=宋体]℃恒温培养箱内孵育[/font]3 d[font=宋体]。将受精后[/font]3 d[font=宋体]（[/font]3 d post fertilization[font=宋体]，[/font]3 dpf[font=宋体]）健康[/font]AB[font=宋体]幼鱼转移到[/font]12[font=宋体]孔板中，每孔放入[/font]30[font=宋体]尾幼鱼，设置对照组和[/font]LTF[font=宋体]（[/font]25[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]200[font=宋体]、[/font]400[font=宋体]、[/font]800 μg/mL[font=宋体]）组，各孔为[/font]4 mL[font=宋体]体系，对照组加入含[/font]0.1%[font=宋体]二甲基亚砜（[/font]dimethyl sulfoxide[font=宋体]，[/font]DMSO[font=宋体]）的养鱼水，给药组加入不同质量浓度的[/font]LTF[font=宋体]药液，记录各组幼鱼生存情况，绘制生存曲线。[/font]2.3[b]LTF[/b][font=黑体]对[/font][b]TAA[/b][font=黑体]诱导的斑马鱼肝损伤的影响[/font]2.3.1 [font=宋体]斑马鱼荧光肝脏分析[/font] [font=宋体]选取具有荧光标记的[/font]3 dpf Tg[font=宋体]（[/font][i]-1.7apoa2:GFP[/i][font=宋体]）转基因斑马鱼幼鱼于[/font]6[font=宋体]孔板内，设置对照组、模型组、阳性药[/font]NAC[font=宋体]（[/font]10 μmol/L[font=宋体]）组和[/font]LTF[font=宋体]（[/font]12.5[font=宋体]、[/font]25.0[font=宋体]、[/font]50.0 μg/mL[font=宋体]）组，每孔[/font]15[font=宋体]尾。对照组给予斑马鱼养殖水，模型组加入[/font]7 mmol/L TAA[font=宋体]溶液，各给药组给予[/font]7 mmol/L TAA[font=宋体]和相应药物，给药处理[/font]72 h[font=宋体]。给药结束后，斑马鱼用三卡因麻醉，置于载玻片上，使幼鱼两眼重叠，用荧光显微镜采集同一体位图像，使用[/font]Image J[font=宋体]软件统计幼鱼的荧光肝脏面积。[/font]2.3.2 [font=宋体]斑马鱼体长与卵黄囊吸收延迟的面积统计[/font] [font=宋体]按“[/font]2.3.1[font=宋体]”项下方法分组和给药，给药结束后，使用[/font]Image J[font=宋体]软件测量幼鱼的体长与卵黄囊吸收面积。[/font]2.3.3 HE[font=宋体]染色[/font] [font=宋体]按“[/font]2.3.1[font=宋体]”项下方法分组和给药，给药结束后，将幼鱼固定后用石蜡包埋，制作切片，进行[/font]HE[font=宋体]染色，最后用中性树胶封片。在光学显微镜下采集图像，分析各组斑马鱼幼鱼肝脏组织病理状况。[/font]2.3.4 [font=宋体]油红[/font]O[font=宋体]染色[/font] [font=宋体]按“[/font]2.3.1[font=宋体]”项下方法分组和给药，给药结束后，各组随机选取[/font]10[font=宋体]尾幼鱼，三卡因麻醉后，用[/font]4%[font=宋体]组织固定液于[/font]4 [font=宋体]℃[/font][font=宋体]固定[/font]12 h[font=宋体]。用[/font]PBS[font=宋体]洗净固定液，在摇床上分别以[/font]20%[font=宋体]、[/font]40%[font=宋体]、[/font]80%[font=宋体]、[/font]100%[font=宋体]的[/font]1,2-[font=宋体]丙二醇梯度脱水[/font]10 min[font=宋体]。然后，用[/font]0.5%[font=宋体]油红[/font]O[font=宋体]染液在水浴中避光染色[/font]1 h[font=宋体]，再用[/font]100%[font=宋体]、[/font]80%[font=宋体]、[/font]40%[font=宋体]、[/font]20%[font=宋体]的[/font]1,2-[font=宋体]丙二醇依次脱水[/font]15 min[font=宋体]，最后用[/font]PBS[font=宋体]清洗，在显微镜下采集肝脏区域图像，利用[/font]Image J[font=宋体]软件测定肝脏处的平均光密度。[/font]2.3.5 [font=宋体]斑马鱼匀浆蛋白浓度测定[/font] [font=宋体]按“[/font]2.3.1[font=宋体]”项下方法分组和给药，给药结束后，各选取[/font]45[font=宋体]尾幼鱼，吸净水分，准确称定质量，按质量与体积[/font]1[font=宋体]∶[/font]9[font=宋体]的比例加入[/font]0.9% [color=var(--weui-LINK)]NaCl[i][/i][/color][font=宋体]水溶液，利用冷冻匀浆机进行研磨，离心后吸取上清，用[/font]BCA[font=宋体]试剂盒测定蛋白浓度。[/font]2.3.6 [font=宋体]斑马鱼肝功能指标测定[/font] [font=宋体]按“[/font]2.3.1[font=宋体]”项下方法分组和给药，给药结束后，按“[/font]2.3.5[font=宋体]”项下方法制备[/font]10%[font=宋体]斑马鱼匀浆上清液，按试剂盒说明书测定[/font]AST[font=宋体]和[/font]ALT[font=宋体]活力。[/font]2.3.7 [font=宋体]斑马鱼体内[/font]ROS[font=宋体]水平检测[/font] [font=宋体]按“[/font]2.3.1[font=宋体]”项下方法分组和给药，给药结束后，每组收集[/font]15[font=宋体]尾幼鱼，采用终浓度为[/font]10 μmol/L DCFH-DA[font=宋体]荧光探针，室温避光染色[/font]20 min[font=宋体]，在荧光显微镜下观察并进行拍照，用[/font]Image J[font=宋体]软件统计平均荧光强度以指示[/font]ROS[font=宋体]水平。[/font]2.3.8 [font=宋体]斑马鱼体内氧化应激相关酶的测定[/font] [font=宋体]按“[/font]2.3.1[font=宋体]”项下方法分组和给药，给药结束后，按“[/font]2.3.5[font=宋体]”项下方法制备[/font]10%[font=宋体]斑马鱼匀浆上清液，用上清液的蛋白质浓度进行归一化处理，测定[/font]CAT[font=宋体]、[/font]SOD[font=宋体]、[/font]MDA[font=宋体]、[/font]GSH[font=宋体]的含量。[/font]2.3.9 [font=宋体]中性粒细胞迁移数目统计[/font] [font=宋体]按“[/font]2.3.1[font=宋体]”项下方法分组和给药，给药[/font]72 h[font=宋体]后，观察斑马鱼幼鱼中性粒细胞迁移情况，统计卵黄囊附近的中性粒细胞迁移数目。[/font]2.4 [font=黑体]数据学分析[/font][font=宋体]使用[/font]SPSS[font=宋体]数据编辑器与[/font]Graphpad Prism 8.0.1[font=宋体]软件进行数据分析及制图，多组数据之间比较采用单因素方差分析（[/font]One way-ANOVA[font=宋体]）和[/font]Duncan[font=宋体]法，各组数据用[/font][font=宋体]表示。 [/font][color=#ffffff][b][back=#7a4442]3 [font=黑体]结果[/font][/back][/b][/color]3.1 [b]LTF[/b][font=黑体]含量测定[/font][font=宋体]根据吸光度（[/font][i]A[/i][font=宋体]）值，计算得芦丁的回归方程为[/font][i]y[/i][font=宋体]＝[/font]10.676 [i]x[/i][font=宋体]＋[/font]0.039 5[font=宋体]，[/font][i]R[/i][sup][color=black]2[/color][/sup][font=宋体]＝[/font]0.999 2[font=宋体]；线性范围为[/font]0.000 8[font=宋体]～[/font]0.056 0 mg/mL[font=宋体]。以芦丁为对照品，测得[/font]LTF[font=宋体]质量分数为[/font]98.06%[font=宋体]。[/font]3.2 [b]LTF[/b][font=黑体]对斑马鱼的耐受性考察[/font][font=宋体]将[/font]3 dpf AB[font=宋体]斑马鱼暴露在不同质量浓度的[/font]LTF[font=宋体]溶液中，每[/font]24[font=宋体]小时观察记录幼鱼的存活情况。如图[/font]1[font=宋体]所示，当[/font]LTF[font=宋体]质量浓度为[/font]50 μg/mL[font=宋体]及以下时，幼鱼未出现出明显的发育、形态、行为异常。随着[/font]LTF[font=宋体]质量浓度增大至[/font]100 μg/mL[font=宋体]，有[/font]3.3%[font=宋体]幼鱼开始死亡。[/font]LTF[font=宋体]质量浓度大于[/font]200 μg/mL[font=宋体]，少量幼鱼出现脊背弯曲与游泳转圈等异常行为，死亡现象较为明显。斑马鱼给予[/font]200[font=宋体]、[/font]400[font=宋体]、[/font]800 μg/mL LTF[font=宋体]处理[/font]24 h[font=宋体]的生存率分别达到[/font]83.3%[font=宋体]、[/font]20.0%[font=宋体]、[/font]0[font=宋体]。[/font]400[font=宋体]、[/font]800 μ

我们用的是Jem-2010，以前关闭或打开Lens时，只有一声关机或开机的响声。最近关闭或打开Lens时，老有几声气阀的响声。不知是什么原因？是否属于正常？大家是否遇到过这种情况？请有经验的人谈一谈。

省、地、县级疾病预防控制中心实验室建设指导意见第一章 总 则第一条 为加强和规范省、地、县级疾病预防控制中心（以下简称“疾病预防控制中心”）实验室的建设，保证有效实施疾病预防与控制、突发公共卫生事件应急处置、疫情及健康相关因素信息管理、健康危害因素监测与控制、实验室检测与评价、健康教育与健康促进和技术指导与应用研究等职能，制定本意见。第二条 疾病预防控制中心实验室建设必须遵守国家有关法律、法规，从本地区疾病预防控制工作实际出发，正确处理好现状与发展、需要与可能的关系。必须坚持科学、合理、实用、节约的原则，根据服务人口数量、服务内容与需求量等因素，结合区域经济发展水平和卫生规划，在满足基本功能的同时，体现标准化、智能化、人性化的特点，适当考虑未来发展的需要，确定实验室建设规模。第三条 本意见是疾病预防控制中心实验室建设的基本指导原则，是编制、评估、审批疾病预防控制中心新建、改建、扩建项目的重要依据，各地应结合本地区疾病预防控制技术水平和工作实际需要参照执行。第二章 功能与建设规模第四条 疾病预防控制中心工作用房包括业务、实验、行政及保障用房，其中实验用房面积占总建筑面积的比例为：省级不少于41％、地级不少于40％、县级不少于35％。第五条 省、地、县级疾病预防控制中心根据职能分工应建立下列功能实验室省级：P3实验室，分子生物学实验室，肠道细菌检测实验室，食源性病原菌分离鉴定实验室，呼吸道病毒实验室，肠道病毒实验室（含脊灰实验室），HIV确认实验室，结核病参比实验室，地方病实验室，寄生虫病实验室，消毒实验室，杀虫实验室，食品、化妆品、水质、涉水产品等健康相关产品微生物实验室，霉菌分离及鉴定实验室，虫媒病毒实验室，毒理室及感染动物房，放射防护检测实验室，职业卫生检测室，化学毒物及毒素检测实验室，普通理化实验室，生化实验室。地级：分子生物学实验室，血清学实验室，肠道菌实验室，食源性病原菌分离鉴定实验室，HIV初筛实验室，结核病参比实验室，地方病实验室，寄生虫病实验室，消毒实验室，杀虫实验室，食品、化妆品、水质、涉水产品等健康相关产品微生物实验室，霉菌分离及鉴定实验室，放射防护检测实验室，职业卫生检测室，常见化学毒物检测实验室，普通理化实验室。县级：血清学检测实验室，食源性病原菌及肠道菌分离鉴定实验室，HIV初筛实验室，结核病实验室，地方病实验室，寄生虫病实验室，食品、化妆品、水质、涉水产品等健康相关产品微生物实验室，职业卫生和放射防护检测室，理化实验室，生化实验室。除有特殊要求的实验室外，各级疾病预防控制中心开展相关病原微生物工作的实验室应达到P2实验室的建设标准。可针对本地区疾病预防控制工作的实际，充分考虑需要和可能以及利用率，设置相应功能的实验室。第六条 疾病预防控制中心实验室应具备以下基本功能：省级：开展免疫学、生物化学、分子生物学实验，细菌、病毒、霉菌及其他微生物培养分离鉴定，生物恐怖、中毒事件微生物培养分离鉴定，食品、水、空气、涉水产品、化妆品等的微生物检测，消毒灭菌效果检测，健康相关物品微生物检测，寄生虫病中间宿主的种群鉴定和密度测定，寄生虫病中间宿主和虫媒的抗药性测定，作业场所、公共场所、生活居住环境有毒有害因素的相关实验，食品、化妆品、涉水产品的安全性检测，消杀产品和卫生产品卫生质量分析，健康相关物品材料的安全性和卫生质量分析，大型医用设备应用质量检测，食物中毒、职业中毒、农药中毒事件毒物分析，化学污染事件因素检测分析，核恐怖、放射污染事件因素检测分析，急性、亚急性、亚慢性与慢性毒性试验，刺激性与过敏性试验、致癌与致畸毒性试验，营养与保健食品功能评价，化妆品功能评价，其他健康相关物品有关功能评价。地级：开展免疫学、生物化学、分子生物学实验，常见细菌、病毒、霉菌培养分离鉴定，生物恐怖、中毒事件微生物培养初步分离鉴定，食品、水、空气、涉水产品、化妆品等的卫生质量检测，消毒灭菌效果检测，健康相关物品微生物检测，寄生虫病病原学检测，寄生虫病中间宿主的种群鉴定和密度测定，寄生虫病中间宿主和虫媒的抗药性测定，作业场所、公共场所、生活居住环境有毒有害因素的相关实验，饮用水和水源水质分析，食物中毒、职业中毒、农药中毒事件毒物及化学污染事件因素检测初步分析。县级：开展免疫学、生物化学实验，细菌培养分离鉴定，常见中毒事件微生物培养初步分离，食品、水、空气、涉水产品、化妆品等的微生物检测，寄生虫病病原学检测，寄生虫病中间宿主的种群鉴定和密度测定，作业场所、公共场所、生活居住环境有毒有害因素的相关实验，饮用水和水源水质分析，常见毒物和化学污染因素的初步分析。第七条 疾病预防控制中心开展各项检验工作所需的仪器设备配置参照表1配置；疾病预防控制中心的检验能力应达到表2要求。附表看一下的附件：[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96115]省、地、县级疾病预防控制中心实验室建设指导意见[/url]

特种设备生产许可证（TS认证）是衡量生产厂家是否具备特种设备制造资质和能力的标准。在选择流量计生产厂家时，除了要看厂家是否已取得特种设备生产许可证，还要了解其产品型号、技术实力、售后服务等方面。选择带特种设备生产许可证（TS认证）的流量计生产厂家，来看以下四点：[list=1][*]特种设备生产许可证是否已取得；[/list]√ 青岛和晟测控已取得，具备特种设备生产资质。[img=带TS证书的流量计生产厂家如何选择？来看这四点]https://p5.toutiaoimg.com/origin/tos-cn-i-qvj2lq49k0/fdc17835676a41e4a3237d7ccf0fb0b3?from=pc[/img]2.产品型号是否齐全；√ 青岛和晟测控LUB系列涡街流量计就有就地显示型、法兰卡装型、法兰连接型、压力补偿型、高温型、一体化温压补偿型等多种类型，且精度等级达1.0，产品稳定可靠。[img=带TS证书的流量计生产厂家如何选择？来看这四点]https://p5.toutiaoimg.com/origin/tos-cn-i-qvj2lq49k0/67453d7e66954d7a9a18f354cf5207b9?from=pc[/img]3.厂家技术实力是否可靠；√ 青岛和晟测控设有专业研发技术团队，其自主研发的LUB系列涡街流量计、蒸汽预付费管理系统、智慧热网管理系统等多款产品性能均居于行业前列，并得到了广泛应用。4.厂家售后服务是否完善；√ 青岛和晟测控配备专业的售后服务团队，产品实行“三包”政策，产品出厂后均由专业技术人员指导安装、调试。同时保证接收用户来信后，在24小时内作出答复或处理意见，使用户满意。蒸汽预付费管理系统、智慧热网管理系统、涡街流量计、电磁流量计、超声波流量计、平衡流量计、智能流量积算仪、预付费计量监控终端等相关技术欢迎交流咨询~【青岛和晟智远仪表】

如题，有积分奖励

国家卫生计生委办公厅关于黄花菜中镉限量问题的复函(国卫办食品函〔2014〕377号)湖南省卫生厅： 　　你厅《关于将黄花菜比照叶菜蔬菜执行镉限量标准的请示》（湘卫报〔2013〕36号）收悉。经研究，现答复如下： 　　根据《食品中污染物限量》（GB2762-2012）及污染物限量标准制定原则，经组织专家研究，我委同意黄花菜中镉限量参照叶菜蔬菜及芹菜中镉限量执行，即黄花菜中镉含量应小于等于0.2毫克/千克。 　　专此函复。 　　国家卫生计生委办公厅　　2014年5月4日 来源：国家卫生计生委办公厅

蒜苔被称为“天然抗生素”，它含有丰富的大蒜素，对病原菌和寄生虫有良好的杀灭作用，常吃有助于抵抗细菌，预防感冒。

国卫办食品函〔2015〕28号 各省、自治区、直辖市卫生计生委，新疆生产建设兵团卫生局，农业部、质检总局、食品药品监管总局（国务院食品安全办）办公厅，国家中医药管理局办公室，各有关单位：根据《食品安全法》和《食品添加剂新品种管理办法》，经审核，拟批准金箔为食品添加剂新品种。现征求你单位意见并公开向社会征求意见，请于2015年2月20日前将书面意见反馈我委食品司，同时提供电子版。传真：010-52165424邮箱：zqyj@cfsa.net.cn 国家卫生计生委办公厅 2015年1月14日

国家卫生计生委办公厅关于征求《食品添加剂标准的清理建议（征求意见稿）》意见的函 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会2013-09-27 国卫办食品函〔2013〕240号号工业和信息化部、农业部、商务部、工商总局、质检总局、食品药品监管总局（国务院食品安全办）办公厅，粮食局、标准委、认监委办公室，各有关单位：根据《食品安全法》及其实施条例规定和《食品安全国家标准“十二五”规划》要求，我委制定公布了《食品标准清理工作方案》，成立食品标准清理领导小组和专家组，对现行食用农产品质量安全标准、食品卫生标准、食品质量标准和有关食品的行业标准中强制执行的标准进行清理。目前，专家组已经完成食品添加剂标准清理，形成了清理建议（征求意见稿）。现征求你单位意见并同时向社会公开征求意见，请于2013年11月10日前将意见以传真或电子邮件形式反馈国家食品安全风险评估中心。传 真：010-52165424电子信箱：zqyj@cfsa.net.cn 附件：1.食品添加剂标准的清理建议(征求意见稿).doc 2.关于食品添加剂标准清理情况.doc 3.食品标准清理工作征求意见反馈表.doc国家卫生计生委办公厅2013年9月17日

国卫食品函〔2013〕83号 河北省卫生厅：你厅《关于牛蒡能否作为普通食品原料使用的请示》（冀卫办监督函〔2013〕20号）收悉。经研究, 现批复如下：一、同意牛蒡根作为普通食品管理。生产经营和使用牛蒡根应当符合有关法律、法规、标准规定。二、牛蒡子仍按照《卫生部关于进一步规范保健食品原料管理的通知》（卫法监发〔2002〕51号）的规定执行。此复。国家卫生计生委 2013年8月28日

葱。污垢：研究发现，葱里含有寄生物隐孢子虫、至贺菌和沙门氏菌。超市避免方式：购买冰冻的葱，因为室内的环境很容易滋生细菌。家用避免方式：将水龙头开到最大来清洗污垢，清洗的时候剥去葱的外皮。总有洗不干净的时候，那还怎么放心食用？