DNA核酸浓度的测定实验应用方案(超微量紫外分光法)
紫外分光光度法基于DNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,DNA/RNA在260nm处有最大的吸收峰,蛋白质在28Onm处有最大的吸收峰,盐和小分子则集中在230nm处。因此,可以用260nm波长进行分光测定核酸浓度,OD值为1相当于大约50ug/ml双链 DNA,单链DNA浓度约为33ug l ml,RNA约为40ug/ml,寡核苷酸约为35ug/ml。如用1cm光径,用 H,O稀释DNA/RNA样品n倍并以H,O为空白对照,根据此时读出的OD260值即可计算出样品稀释前的浓度