高效构建

随着科学技术的飞速发展，实验室作为科研创新的核心阵地，其建设水平直接关系到科研成果的质量与效率。一个高效、安全、可持续发展的现代实验室，不仅能够为科研人员提供优越的工作环境，还能有效促进学科交叉融合，加速科技成果的转化与应用。本文将从规划布局、设备配置、安全管理、人才培养及可持续发展等几个方面，探讨现代实验室建设的策略与实践。[img=,690,582]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/08/202408221524327020_1519_6646612_3.png!w690x582.jpg[/img] [b]一、科学规划与合理布局[/b] 1.1 需求分析：实验室建设之初，需深入调研学科特点、研究方向及未来发展趋势，明确实验室的功能定位与需求规模，确保资源的高效配置。 1.2 空间规划：采用模块化设计理念，根据实验流程合理划分区域，如准备区、实验区、分析区、存储区及办公区等，确保各区域功能明确，流线顺畅，减少交叉污染风险。 1.3 环境控制：根据实验需求，配置适宜的温湿度控制系统、通风排风系统及洁净室等，为精密仪器和生物实验提供稳定、安全的环境条件。 [b]二、先进设备与智能化管理[/b] 2.1 设备选型：优先选用高精度、自动化程度高的仪器设备，同时考虑设备的兼容性、可扩展性和维护成本，确保实验室技术水平的先进性。 2.2 智能化集成：利用物联网、大数据、云计算等技术，实现实验室设备的远程监控、智能调度与数据分析，提高实验效率与管理水平。 2.3 资源共享：建立实验室资源共享平台，促进设备、数据、技术等资源的开放共享，提升资源利用效率，促进学术交流与合作。 [b]三、严格的安全管理体系[/b] 3.1 安全制度建设：建立健全实验室安全管理制度是确保实验室安全运行的基石。这包括制定详尽的安全操作规程、化学品管理制度、生物安全准则、辐射防护规定以及紧急救援预案等。每一项制度都应明确责任主体、操作流程、风险防控措施及应急处理流程，确保实验活动的每一步都在安全可控的范围内进行。 3.2 安全教育培训：定期对实验人员进行全方位的安全教育与技能培训是提升安全意识与应急处理能力的关键。培训内容应涵盖实验室安全基础知识、个人防护装备的正确使用、实验设备的安全操作、应急逃生与自救技能等。同时，应设立安全考试或实操考核，确保每位实验人员都能熟练掌握并遵守安全规范。 3.3 风险评估与隐患排查：建立实验室风险评估机制，对实验过程中可能存在的危险源进行识别、分析与评估，制定相应的风险防控措施。同时，实施定期的安全检查与隐患排查，及时发现并消除潜在的安全隐患，确保实验室环境的安全稳定。 3.4 应急响应与救援准备：制定完善的应急响应预案，明确各类突发事件的应急处置流程、责任分工与资源调配方案。建立应急救援队伍，定期组织应急演练，提升应急处置的实战能力与协同作战能力。同时，确保应急物资与设备的充足与完好，以应对突发事件的需要。 3.5 实验室文化与安全氛围：构建积极向上的实验室文化，将安全理念融入日常科研活动中。通过举办安全知识竞赛、安全月活动等形式多样的安全文化活动，增强实验人员的安全意识与责任感。同时，建立安全举报与奖励机制，鼓励实验人员积极参与安全管理工作，共同营造安全、和谐的实验室环境。 [b]四、人才培养与团队建设[/b] 4.1 人才引进：制定具有吸引力的人才引进政策，吸引国内外优秀科研人才加入，提升实验室的整体科研实力。 4.2 团队建设：注重团队协作与跨学科融合，鼓励团队成员间的交流与合作，形成优势互补、协同创新的良好氛围。 4.3 人才培养：建立多层次、多渠道的人才培养体系，为青年科研人员提供成长机会，培养具有国际视野和创新能力的科研领军人才。 [b]五、可持续发展策略[/b] 5.1 绿色环保：在实验室建设中融入绿色环保理念，采用节能降耗的建筑材料与设备，实施垃圾分类与资源回收利用，减少对环境的影响。 5.2 科技创新：持续跟踪国际科技前沿，鼓励原创性研究与技术创新，推动实验室科研成果的产业化应用，为经济社会发展贡献力量。 5.3 社会责任：积极参与科普教育、公益活动等，提升公众科学素养，履行科研机构的社会责任，促进科技与社会的和谐共生。 综上所述，构建高效、安全、可持续发展的现代实验室，需要科学规划、先进设备、严格管理、人才培养及可持续发展策略的综合运用。只有这样，才能为科研创新提供坚实的支撑，推动科技进步与社会发展。

[align=center][b][size=18px]担当作为，高效构建疫情防控的计量支撑[b]——天津计量奋战于我市新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控工作最前沿[/b][/size][/b][/align][align=center][size=18px][b][font=微软雅黑, Helvetica, Arial, sans-serif][color=#808080]发布时间：2020-01-24[/color][/font][/b][/size][/align][align=center][b][size=18px][/size][/b][/align][align=left][font=微软雅黑, Helvetica, Arial, sans-serif][size=16px] 自湖北省武汉市发生新型冠状病毒感染的肺炎疫情后，天津计量院一直保持密切关注，特别是自1月19日天津市首例确诊病例报道和市委领导同志两次重点强调天津市相关疫情防控工作后，天津计量院主动担当，勇于作为，在院党委的正确领导下，实施积极主动举措为我市疫情防控提供计量支撑服务。[/size][/font][/align][align=left][font=微软雅黑, Helvetica, Arial, sans-serif][/font][/align][align=left][font=微软雅黑, Helvetica, Arial, sans-serif][size=16px][img=,600,450]http://www.chinajl.com.cn/Uploads/image/20200124/20200124100437_85495.jpg[/img][/size][/font][/align][align=left][font=微软雅黑, Helvetica, Arial, sans-serif][img=,600,800]http://www.chinajl.com.cn/Uploads/image/20200124/20200124100501_69331.jpg[/img][/font][/align][align=left][font=&][font=微软雅黑, Helvetica, Arial, sans-serif]　　 在疫情防控工作中，体温检测仪器设备是重要的计量器具，因此必须确保体温检测仪器设备的计量性能稳定，量值的准确、可靠、有效，以保障疫情防控工作的有效性。天津市新型冠状病毒感染的肺炎疫情发现较晚，同时正值春节传统假期。面对春运高峰带来的人流物流挑战，确保公共卫生部门和交通运输部门使用的初筛仪器设备的准确可靠是我市疫情防控工作的重要支撑点。为此，天津计量院立即成立以党委书记和院长为组长，相关技术、职能部门组成的新型冠状病毒感染肺炎疫情防控工作领导小组，并制定疫情防控工作方案，主动放弃春节假期，排班备勤，同时针对我市公共卫生防疫部门、应急管理部门、教育部门和交通运输部门使用的体温计、耳温计、额温计等检测设备提供免费检测服务。春节期间，由院业务管理部部长刘勇同志组成业务受理小组，开通检测业务绿色通道，根据检测需求全时段受理相关仪器的检测业务；由热工实验室主任田昀同志组织本实验室党员和先进分子组成专业技术小组承接检测业务并实施检测，保障检测业务随叫随到、随到随检。[/font][/font][/align][align=left][img=,600,800]http://www.chinajl.com.cn/Uploads/image/20200124/20200124100532_71264.jpg[/img][/align][align=left]　　 天津计量院热工实验室主任田昀同志还根据我市交通运输部门实际情况，主动联系天津机场、天津海关、天津铁路局等交通枢纽部门，组织精干队伍亲赴一线，为上述单位使用的固定式（门式）人体温度测试设备提供计量检定服务，做到了上述部门下辖场站的全覆盖。同时，应天津铁路局要求，承接了该局下辖的沧州机务段相关设备的检测工作，摒弃地域桎梏，有力地为河北省地区疫情防控工作进行了支援。[/align][align=left][img=,600,600]http://www.chinajl.com.cn/Uploads/image/20200124/20200124100611_97105.jpg[/img][/align][align=left]（上图为天津计量院热工实验专业技术人员在天津西站积极克服时间紧、任务重、设备少等困难，全力奋战八个多小时，终于赶在从武汉始发至天津西的高铁到达前，完成相关设备检测任务）[/align][align=left]　　 天津计量院将认真贯彻落实习近平总书记对新型冠状病毒感染的肺炎疫情作出的重要指示和市委常委会会议精神，充分发挥“不忘初心，牢记使命”主题教育成果，牢记使命担当，忠诚履职尽责，勇立新型冠状病毒防控战斗的第一线，为我市疫情防控工作取得决定性胜利贡献出计量人的力量。[/align]

为临床标本病原微生物直接检测开拓新方法 中国科技网讯 近日，记者从第三军医大学大坪医院野战外科研究所获悉，该院所检验科主任陈鸣教授带领科研团队通过8年攻关，成功构建了用于大分子检测的漏声表面波生物传感器检测系统。该检测技术具有高度特异性、敏感性和低成本的特点，并已应用于单核苷酸多态性的检测，对临床诊断和指导疾病治疗有重要意义。日前，相关论文发表在国际传感器领域权威期刊《生物传感器与生物电子学》杂志上。 单核苷酸多态性（SNP）作为第三代遗传标记，目前广泛应用于病原微生物分型、临床耐药分析等领域。用于检测SNP的DNA测序、单链构象多态性等传统非均相分析方法，操作复杂且通量不高，导致数据可靠性降低。虽然基因芯片、变性高效液相色谱仪等技术能快速、高效、大批量检测基因组中的SNP，但设备价格昂贵，且技术上需要放射性或荧光标记等，还存在重复性差、结果难以标准化判定等缺陷。 生物传感器这种方法可以解决检测中存在的不足。随着声光、微电子技术的发展，一种新型传感器——漏声表面波传感器逐渐发展起来。与其他类型的生物传感器相比，漏声表面波传感器的检测基频更高，同时更适用于液相分析。 在长达8年的实验研究中，课题组与其他单位合作，共同设计制作了双通道LSAW传感器和数据分析采集软件，成功地构建了漏声表面波传感器检测系统。该系统建立了基于“DNA酶连接反应和生物酶放大”的新型漏声表面波生物传感器SNP检测技术。实验证明，该检测方法具有较高的灵敏度。 据介绍，该课题组构建的新型漏声表面波生物传感器SNP检测技术，与传统的SNP检测方法完全不同，将为临床标本病原微生物的直接检测开拓全新的方法。（邹争春 记者陈磊） 《科技日报》（2012-04-27 一版）

中药是中华民族的宝贵财富，它的疗效已为世人所瞩目。然而众所周知在我国中药材的质量极不稳定，市场也较为混乱。中药的质量问题已成为中药现代化、国际化的一大障碍。 多年以来中药材质量控制基本上是以传统的性状鉴别和显微鉴别确定真伪，以理化鉴别评价优劣。前者属于定性分析且需要鉴定者具有丰富的实践经验，人为影响因素较大，后者只考虑众多复杂成分中的个别“活性成分”，而忽略了中药材诸多成分间的协同作用。随着现代分析技术的发展，把已知的主要或有药效作用的成分，作为指标予以检测控制，比过去有了很大进步．但是从传统中医药理论的观点来看，指标成分的控制难以真正控制中药的质量。国际上已认可用中药指纹图谱来作为控制中药质量的质控模式。用中药指纹图谱监控中药质量，并不要求指纹图谱中的每一个组分都清楚，也不要求对每一个组分都精确测定，但要求图谱具有指纹特征，即要求专属、稳定、实用。中药指纹图谱研究包括中药材或中成药指纹图谱的获得和指纹图谱的分析、应用两方面。本文以近年来国内外在指纹图谱的构建和解析方面的研究为材料，综述了构建和解析指纹图谱的各种方法，并比较了它们的适用范围。 1指纹图谱的构建 目前获得指纹图谱的主要手段是色谱法和光谱法，其中比较常用的有以下几种 1．1 薄层色谱法 薄层色谱法常用于中药中各种成分的鉴定。薄层扫描图谱比目测的层析图谱更为客观准确，具有更好的指纹鉴别意义。运用薄层扫描法已获得了黄连、黄芩等中药的指纹图谱，还获得了高良姜中黄酮类成分的指纹图谱，同时薄层扫描法还可用于成药的分析，如六味地黄丸中各味药的鉴定。但由于薄层板的质量和开放式层析系统等外界因素的影响，会引起一定的实验误差。 1．2 高效液相色谱法 高效液相色谱法是构建指纹图谱的主要方法之一。由于中药成分的复杂性，构建指纹图谱一般采用梯度洗脱，因为逐步提高流动相洗脱能力可获得较多色谱峰，提供更多指纹信息。 配置紫外检测器的高效液相色谱在指纹图谱构建中较为常用，如贾晓斌等采用梯度洗脱制定了复方人参注射液的指纹图谱；赵燕燕等进行白茅根氯仿提取液的指纹图谱研究，由指纹图谱可判定其正伪，但对目前所知的白茅根药材中保肝利尿的主要有效成分葡萄糖和钾盐则无法检测，因此其指纹图谱只能用于定性鉴定其正伪，而不能确定其质量的优劣。应用光电二极管阵列检测器(DAD)构建指纹图谱的研究也较多，如黄芩中黄酮类成分指纹图谱的确定；侯艳鹏等在不同来源旋覆花药材指纹图谱研究中还发现仅比较色谱峰的保留时间是不够的，还需校对峰的紫外光谱是否一致。对于无紫外吸收的中药或其制剂可改用其它检测器，如蒸发光检测器(ELSD)等。如注射用七叶皂甙钠用HPLC分离，用ELSD检测，得到的指纹图谱直观准确地反映了产品质量，但ELSD的使用受样品组分和流动相挥发性的影响。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]技术可提供大量信息，符合解决中药复杂体系的要求，已用于指纹图谱的构建中，如桂枝汤A部分指纹图谱的确定及比较；张尊建等采用HPLC-UV-MS法对丹参药材、丹参注射液中间体及丹参注射液进行指纹图谱研究，得到了分离度好的指纹图谱。但由于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]价格昂贵，推广应用有一定的困难。 液相色谱具有重现性好、稳定性好的优点，适宜于构建指纹图谱。由于药材和成药不能直接进样，需经提取纯化，在考察条件时要避免只对“指标成分”予以考虑，而忽视“非指标成分”，对于中药注射剂应尽量采用直接进样、梯度洗脱，以避免上述偏差。又由于药材中各种成分的吸收波长及对不同检测器的响应不同，在构建指纹图谱也需要加以考察。 1．3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法适合于挥发性药材及制剂的指纹图谱研究。构建指纹图谱时一般使用质量型检测器—氢火焰离子化检测器(FID)。苏薇薇等对中成药乌鸡白凤丸石油醚提取物进行了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析，获得的指纹图谱可作为乌鸡白凤丸质量评价的标准。钱浩泉等用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法建立了高良姜及其近缘植物挥发油成分的指纹图谱。赵陆华等用挥发油提取器对降香进行提取，用十四醇为内标，建立了降香药材的指纹图谱。在中药复方制剂上，冯毅凡等对华佗再造丸及其主要药味的石油醚提取液进行了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析，获取其[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]指纹特征，可作为成药及其原料药真伪鉴别的依据。而GC-MS联用，不仅具有GC的高分离效能，而且兼备了MS鉴定的高灵敏性和准确性。苏薇薇等对45个细辛样品进行了GC-MS分析，经PRIMA法处理，实现了计算机对多种细辛的分类鉴别；魏刚等采用GC-MS法对不同产地广藿香、组织培养广藿香以及超临界提取广藿香、广藿香对照品共21个样品进行主成分分析，并建立了指纹图谱。 1．4毛细管电泳技术 毛细管电泳已用于中草药中生物碱、黄酮／黄酮苷、酚酸、香豆素、醌类、强心苷、葡萄糖异硫氰酸盐等物质的分析。龙虹等报道了金银花、银黄口服液和双黄连的毛细管电泳图谱，均含较多未知峰，指纹特征好；赵霞等以毛细管区带电泳模式，用内标法分析了9种贝母药材中生物碱的含量；王刚力等采用HPCE的MECC分离模式对18个卷柏属植物样品的乙酸乙酯提取物进行测定，建立了18个样品的指纹图谱。由于指纹图谱构建中样品的预处理以获得尽量多的指纹特征为前提，而毛细管电泳可以对大小分子、解离非解离分子同时分析，故适宜中药指纹图谱构建。 1．5红外光谱法 红外光谱法研究指纹图谱可用于药材鉴定，如甘草、延胡索与全叶延胡索、苍耳子与东北苍耳子、粉葛与野葛等药材的鉴别。红外光谱法还用于成药的鉴别，如田进国等对同仁乌鸡白凤丸与消栓再造丸红外指纹图谱的研究，结果两样品都具有独特而稳定的红外指纹图谱，可作为质量控制和真伪鉴别的依据。矿物类中药可直接压片测定其红外光谱，禹余粮有褐铁矿结核和普通褐铁矿两种，两者的化学成分相同，光学性质相似，而其红外光谱有很大区别。红外光谱是由分子的振动—转动跃迁引起的，确定其专属性和特征性有较大困难。 1．6紫外光谱法 紫外光谱是电子光谱，形状变化不大，有时不同的化合物有相似的图谱，专属性差。故紫外光谱法较少应用于指纹图谱的构建中。 1．7分子生物学方法 不同生物体有各自相对稳定的DNA序列，因而可以利用现代分子生物学技术构建DNA指纹图谱。限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)技术和随机扩增多态DNA(RAPD)是目前最常用的构建DNA指纹图谱的方法。但RFLP技术繁琐，要求的DNA量大，实验材料必须新鲜，因此其应用受到限制；而RAPD法可以在特异DNA序列尚不清楚的情况下检测DNA的多态性，具有灵敏度高、多态性强的优点，同时分析的是基因型而非表现型，结果不受材料来源、环境因素、样品形态等影响，为干燥药材鉴定提供了更加准确的手段。罗志勇等E361采用RFLP技术，分析了人参、西洋参基因DNA指纹图谱。刘塔斯等采用RAPD方法对3个产地玉竹及其2种混淆品进行分析，准确区分了正品与混淆品。但RAPD法的重复性差等问题引起了许多争议。而且，色谱法与DNA指纹图谱相比其优点在于：不但有特征的体现(各种化学成分的个数和相对位置一保留时间)可作定性鉴别使用，还可体现量的概念。 2指纹图谱的解析 对两张色谱指纹图谱仅靠人们的主观比较很难客观、公正、科学地判断它的相同、相似或不同，往往由于人为的主观误差可能做出不同判断，缺乏科学的评判标准。

[font=宋体]慢病毒构建稳转细胞系的原理主要是利用慢病毒载体将外源基因导入宿主细胞，并实现外源基因的稳定表达。具体来说，构建稳转细胞系的核心是将慢病毒矢量载体导入宿主细胞中，慢病毒载体通常包含病毒的复制和包装组件，以及外源基因的表达调控序列。当慢病毒载体被导入宿主细胞后，它可以利用细胞的复制和转录机制将外源基因插入宿主细胞的染色体中，从而实现外源基因的稳定表达。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]构建稳定的慢病毒转染细胞系是在细胞中稳定表达外源基因的一种有效方法。下面是一般慢病毒构建稳定转染细胞系的步骤：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、选择慢病毒载体： 选择适当的慢病毒载体，通常是一个包含[/font][font=Calibri]LTR[/font][font=宋体]、包装信号、引导[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]序列和多功能质粒载体的质粒。这个载体应该包含要表达的外源基因。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、转染慢病毒包装细胞： 使用慢病毒包装细胞系，例如[/font][font=Calibri]293T[/font][font=宋体]或其他适合的细胞系。这些细胞通常被选择因为它们能够支持慢病毒复制和包装。将慢病毒载体与包装蛋白的表达质粒一同转染进这些细胞中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、病毒产生和收集： 慢病毒包装细胞会开始产生慢病毒颗粒，这些颗粒包含了慢病毒载体和外源基因。培养一定时间后，收集细胞培养上清液，这是富含病毒的液体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、测定病毒滴度： 对采集的上清液进行病毒滴度的测定，通常可以通过转染一定数量的目标细胞，然后测定这些细胞的感染率来确定病毒的滴度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、转染目标细胞： 将上一步获得的病毒用于转染目标细胞。这些目标细胞可以是要建立稳定转染细胞系的细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、筛选稳定细胞系： 添加适当的筛选物质，例如抗生素，以选择表达了外源基因的细胞。这可以通过在培养基中添加抗生素，使得只有表达了外源基因的细胞能够存活下来。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7[/font][font=宋体]、单克隆分离： 对稳定表达细胞群进行单克隆分离，以确保每个克隆都来自单一细胞。这有助于保持表达的一致性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8[/font][font=宋体]、验证表达： 对所得的单克隆细胞系进行验证，确认外源基因的表达水平和稳定性。这可以通过[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Western blotting[/font][font=宋体]等分子生物学技术来实现。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]通过这些步骤，可以建立一个稳定表达外源基因的慢病毒转染细胞系，为后续的实验和研究提供了有力的工具。这种方法常用于基因功能研究、药物筛选和基因治疗等领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]慢病毒构建稳转细胞系的优点：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]与常用的转染方法相比，慢病毒构建稳转细胞系有以下几个优点：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①高效性：慢病毒能够将外源基因整合到宿主细胞基因组中，实现稳定的外源基因表达。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②特异性：由于慢病毒的感染和复制比较特异，只会影响一定类型的细胞，因此可以实现对具体细胞的选择性转染。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③安全性：慢病毒的基因转移速度较缓慢，对宿主细胞和人体的损伤较小，因此具有较高的安全性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][b]稳转细胞株构建服务[/b][/url]，包含过表达细胞系构建服务和[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]稳定细胞株开发服务，详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service[/font][/font]

我打算构建一株厌氧真菌的BAC文库，现在正在收集菌体，问题是我的真菌培养液中混有一定量的甲烷菌，我想知道甲烷菌的存在会不会对文库的构建有影响。求助高手。

[size=4][font=楷体_GB2312]不知道有没有人涉及到土壤等信息系统的构建与应用。关于地理信息系统，本人略知一二，但是怎么构建土壤信息系统，还没有这方面的经验。如果有专家懂这方面的知识，不妨展示出来让大家学习一下！（有奖讨论）[em09511][/font][/size]

[em09512]各位老手，你们好： 现有个紧急的问题询问询问你们的宝贵经验：我们公司是一家生产生物食品添加剂新公司，现在老总要我拿出一套关于厂子实验室的构建方案，由于还没做过实验室构建这等大事，所以来请教大家请大家务必帮帮忙啊。 实验室主要包括了天平室、搅拌室、色谱室、化验室、试剂室及研发中心这几个实验室，请问各位大侠，这些个实验室里都需要哪些实验仪器设备啊！！！

个人载体构建心得这两年在美帝净做克隆实验了，以前读PHD时候还觉得自己分子克隆挺牛X的，来这边之后做了各种各样的构建才知道以前是坐井观天，刚才粗粗统计了一下，在美帝一年零八个月，我构建的质粒超过四百个，其中有很简单从PCR构建到拿WB结果的一共不到一周，也有巨难的花了四个月时间换了几次strategy才弄好激动得我半夜給老板发信的品种；有单片段酶切插入这种不用脑型的，也有九个片段逐一插入正反向还不同的。专家不敢说，但是熟能生巧，确实积累了不少经验，现在系里从POSTDOC到PHD学生到TECH构建前很多人都跟我商量（做博后结果成了技术员的人生真悲哀啊）。我老板甚至开玩笑说，我们将来开个公司，我专门负责构建（这话听得我想揍他大家同意不？）想了想还是把经验写下来，一来做个记录，二来博同行一笑，能让大家少绕点弯路则更好。1. 准备工作俗话说用欲善其事，必先利其器。我强烈建议大家在做构建之前先找好工具，这样起的效果事半功倍。这里说个笑话，我们系有个新PHD学生，是个印度女孩，很聪明很刻苦，她所在的实验室也很好，不过除了她之外包括老板在内都是生物物理背景的，以前一个生物POSTDOC在的时候还好，这个POSTDOC一走，整个实验室对分生就只有一个粗浅的概念，这个女孩就想把一个质粒上的基因插到另一个质粒上去，要是我就先查查有没有合适的酶切位点，要没有就改造一下质粒一切搞定，这女孩她不懂啊（要命的是她老板固然牛，对这方面也不懂），自己辛辛苦苦设计了PCR引物去做PCR，P了将近5K的产物去测序，结果测的结果中间有个MUTATION，要懂行的就找找酶切位点，从原来的替换上去，然后测下这段就行。她呢，又送去了若干了质粒一个接一个的测，一个测序反应这边是8刀，一个质粒测下来就是40刀，她光测序就要花好几百刀（你得佩服老美实验室真有钱呀）。这件事教育我们准备工作是多么重要！这里推荐大家两个工具，一个都知道，PRIMER5.0。另一个工具极强大，也不知道国内流行不，叫lasergene，也就是DNAStar包括设计引物到构建图谱一应俱全，图谱非常漂亮，而且分析酶切位点等等就超NB，如果感兴趣的话我可以給大家传一个图谱看看。2. PCR如果没有现成的质粒可供酶切，PCR是最理想也是最方便的策略。关于PCR具体技术坛子内帖很多，我不多说了，这里仅在构建方面谈一谈。如何设计引物？首先，看懂质粒图谱！拿大家比较熟悉的PEGFP-C1和PEGFP-N1做例子。想用N1质粒，设计引物就得把下游引物上的中止密码子去掉，不要辛辛苦苦的一路做下来结果根本不表达融合蛋白，你就死了；C1质粒，注意frame，要是移码了，你也死了。而且PEGFP系列有1、2、3，要弄清楚别弄窜了。一句话，要看懂你的图谱！再多一句，PEGFP的XBA1和Bcl1位点不能用。注意在设计酶切位点的时候要加保护碱基（大家要用T载体就当我没说）。酶切位点设计也有一定的讲究，我的原则是，能用粘端就用粘端，实在不能用的就用只好用一些常用的平端酶，如ECORV和SNAB1之类，要是以后还有别的用处就多加点酶切位点，我曾一口气在引物上加了五个酶切位点以防以后要用到，注意计算TM的时候要减去这些不match的序列，或者选用touch-up策略。除了酶切位点，还要注意KOZAK序列的问题，很多质粒没有提供KOZAK序列，这要在设计的时候直接在引物上加好。GENE OVERLAP也比较有用，比方说加个FLAG片段，HIS片段，2A

本课题以沈阳大莘填埋场垃圾渗滤液作为研究对象，研究并构建渗滤液的高效复合降解菌株；并研究该复合菌对渗滤液的处理性能及高效处理的最佳工艺参数。本课题得到渗滤液的高效降解菌细菌10株、放线菌4株、霉菌10株，处理CODCr为2240mg/L的渗滤液，CODCr去除率可达73%，NH3-N去除率可达93%，具有高效性。[img]http://bbs.instrument.com.cn/images/affix.gif[/img][url=http://bbs.instrument.com.cn/download.asp?ID=199228]垃圾渗滤液高效复合降解菌的研究.zip[/url]

我是做生物实验室仪器销售的，正在做各个实验室构建的方案，附件里面是基因表达平台的构建方案。里面分了基因表达的各个步骤，每个步骤所用的不同方法，每种方法所需要的仪器，每种仪器国内及国外的品牌，当然品牌是我比较熟悉的一些。希望相关人士能够提供一些建议，包括缺少的步骤，其他的方法，方法还需要的仪器，还有您觉得用的比较好的仪器的品牌，或者对附件中某些品牌评价，这些对我都有很大的帮助。欢迎批评指正。

DG/TJ08-2059-2009 轻型木结构建筑技术规程

请问各位，实验室培训体系构建如何规范化，系统化？有什么国家标准或规则参考么？还是都是自建体系？

21世纪以来，随着技术的发展，植物人工染色体技术迅速崛起，而目前最常用的两种构建人工染色体的方法就是“组装法”和“截短法”。“组装法”的研究起步较早，但是由于技术的限制，利用“组装法”构建植物人工染色体的进展一直不理想，到目前为止，也只有在玉米细胞中获得成功1]。然而这种人工构建的环状染色体与真核生物中正常存在的线形染色体相差甚远，因为不具有端粒结构，这种环状的人工染色体能否成为稳定的载体系统还有待进一步证实。与之相比，利用“截短法”构建植物人工染色体的的研究起步较晚，直至2006年才有关于利用“截短法”在玉米中构建植物人工染色体的报道[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487#_ENREF_2]2]。尽管如此，这种方法还是获得了很大成功，随后，科研人员相继在拟南芥[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487#_ENREF_3]3]，大麦[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487#_ENREF_4]4]，水稻[[url=http://bbs.instrument.com.cn/post.asp?forumid=487#_ENREF_5]5]中利用“截短法”构建了植物人工染色体，利用“截短法”构建植物人工染色体的研究获得了蓬勃的发展。然而，无论是“组装法”还是“截短法”都各自有其优缺点，笔者认为，“组装法”如果获得成功转化，并且能像常染色体一样稳定遗传，那么利用这种方法构建植物人工染色体周期短，后续应用方便。然而这一方法目前由于受到着丝粒在不同物种中的高度特异性，着丝粒区域的复杂性和难扩增性，以及遗传转化技术等多方面因素制约，使得其在植物中的研究和应用成功率极低，对于其相关的遗传稳定性也难以预料。“截短法”从目前的研究进展看，其可行性是毋庸置疑的，然而从众多的转基因事件中，筛选出转化受体生长发育等各方面性状不发生改变，同时在非常染色体上形成一对可稳定遗传的小染色体的过程也并非易事。不过笔者相信随着转化技术的进步，检测手段的简化和完善，利用“截短法”构建植物人工染色体用以改良作物必将获得长足进步和最终成功。[size=16px] [size=16px]

检验场所能够用于安检机构建设的自我声明 这个怎么写？

有谁知道构建团簇应遵循什么样的规律[em40] [em40] 很急！谢谢！

[align=center][b][color=#333333]合理存放化学试剂，构建绿色实验室[/color][/b][/align][color=#333333]西班牙克鲁玛的净气型储药柜，采用受专利保护的新一代过滤器系统，专利号（patent no .2397598）[/color][color=#333333]为实验室提供安全的环境，无需通风管道，内置高效分子过滤器，直接过滤掉空气中的有毒有害气体，出来的是干净的空气，保障工作人员的人身[/color][color=#333333]安全，有利于人类环境保护。大胆的呼吸吧！[/color][img=,554,384]file:///C:\Users\mayn\AppData\Local\Temp\ksohtml\wps3A20.tmp.jpg[/img][color=#333333]气体经过前操作口进入储药柜，然后把化学气体经过风屏栅带走，再经过活性炭过滤器过滤，活性炭去除气体含有的化学烟气，过滤后的洁净空气通过通风柜的顶部直接排到室内，给储药室一个安全的环境，保护现场的工作人员。进口的过滤器里面的碳粉颗粒更小，更细，这样就孔数就更多，同样质量的碳粉能吸附得更多。[/color]实验室最常用的化学试剂在配置时的注意事项：1、溶液要用带塞的试剂瓶盛装，见光易分解的溶液要装于棕色瓶中，挥发性试剂例如用有机溶剂配制的溶液，瓶塞要严密，见空气易变质及放出腐蚀性气体的溶液也要盖紧，长期存放时要用蜡封住。浓碱液应用塑料瓶装，如装在玻璃瓶中，要用橡皮塞塞紧，不能用玻璃磨口塞，并存放在无管道净气型储药柜中。2、每瓶试剂溶液必须有标明名称。3、配制硫酸、磷酸、硝酸、盐酸等溶液时，都应把酸倒入水中。对于溶解时放热较多的试剂，不可在试剂瓶中配制，以免炸裂。配制硫酸溶液时，应将浓硫酸分为小份慢慢倒入水中，边加边搅拌，必要时以冷水冷却烧杯外壁。4、用有机溶剂配制溶液时(如配制指示剂溶液)，有时有机物溶解较慢，应不时搅拌，可以在热水浴中温热溶液，不可直接加热。易燃溶剂使用时要远离明火。几乎所有的有机溶剂都有毒，应在通风柜内操作。应避免有机溶剂不必要的蒸发，烧杯应加盖。5、要熟悉一些常用溶液的配制方法。如碘溶液应将碘溶于较浓的碘化钾水溶液中，才可稀释。配制易水解的盐类的水溶液应先加酸溶解后，再以一定浓度的稀酸稀释。如配制SnCl2溶液时，如果操作不当已发生水解，加相当多的酸仍很难溶解沉淀。6、不能用手接触腐蚀性及有剧毒的溶液。剧毒废液应作解毒处理。不可直接倒人下水道。7、浓硝酸、浓盐酸具有挥发性，使用时要在通风柜内或佩戴防护口罩。实验室安全防范责任重大，每一位实验工作人员都要行动起来，加强安全意识，完善责任到人机制，严格遵守安全规范进行各项实验操作，实验本身要求严谨、精确，操作过程中的每个小细节都需要慎重对待，惨痛的教训告诫每一位实验人员，实验无小事，把危险系数降至最低，可防可控，珍视生命，远离危险！

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需要构建一个全新的饲料厂实验室，需要配置哪些仪器，详细一点的，符合国家检验标准的。望知道的人才不腻赐教。

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略非常详细地说明了表达载体的构建，转录调控，中止子以及翻译过程中的一些选择。理论性很强，也很详细。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=111861]在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略[/url]

[em09504]论文“空调与制冷用高效节能内螺纹铜管高频焊工艺及应用研究”论文 工业技术 金属学与金属工艺 焊接、金属切割及金属粘接 焊接工艺 各种金属材料和构件的焊接论文

[font=宋体, 微软雅黑, Arial, Helvetica, sans-serif][size=16px][color=#333333]近日，甘肃省发改委发布《关于加快构建废弃物循环利用体系的实施意见》的通知，实施意见要求，到2025年，初步建成覆盖全省各领域、各环节的废弃物循环利用体系，主要废弃物循环利用取得显著进展。尾矿、粉煤灰、煤矸石、冶炼渣、工业副产石膏、建筑垃圾、秸秆等大宗固体废弃物年利用量达到4000万吨，新增大宗固体废弃物综合利用率达到60%。废钢铁、废铜、废铝、废铅、废锌、废纸、废塑料、废橡胶、废玻璃等主要再生资源年利用量达到600万吨。资源循环利用产业年产值达到250亿元。兰州市建成国家废旧物资循环利用体系示范创建城市。[/color][/size][/font][align=center][b]关于加快构建废弃物循环利用体系的实施意见[/b][/align]为积极贯彻落实《国务院办公厅关于加快构建废弃物循环利用体系的意见》（国办发〔2024〕7号）有关要求，加快我省废弃物循环利用体系建设，提高资源循环利用水平，提升资源安全保障能力，促进绿色低碳循环发展，助力实现碳达峰碳中和，加快美丽甘肃建设步伐，提出如下意见。[b]一、总体要求[/b]（一）指导思想。以习近平新时代中国特色社会主义思想为指导，深入贯彻党的二十大精神，全面贯彻习近平生态文明思想，坚持“三新一高”总要求，坚持“减量化、再利用、资源化”原则，以提高资源利用效率为目标，以废弃物精细管理、有效回收、高效利用为路径，覆盖生产生活各领域，发展资源循环利用产业，健全激励约束机制，加快构建覆盖全面、运转高效、规范有序的废弃物循环利用体系，为高质量发展厚植绿色低碳根基，构建美丽甘肃建设新格局，奋力谱写中国式现代化甘肃实践新篇章。（二）主要目标。到2025年，初步建成覆盖全省各领域、各环节的废弃物循环利用体系，主要废弃物循环利用取得显著进展。尾矿、粉煤灰、煤矸石、冶炼渣、工业副产石膏、建筑垃圾、秸秆等大宗固体废弃物年利用量达到4000万吨，新增大宗固体废弃物综合利用率达到60%。废钢铁、废铜、废铝、废铅、废锌、废纸、废塑料、废橡胶、废玻璃等主要再生资源年利用量达到600万吨。资源循环利用产业年产值达到250亿元。兰州市建成国家废旧物资循环利用体系示范创建城市。到2030年，全省建成覆盖全面、运转高效、规范有序的废弃物循环利用体系，各类废弃物资源价值得到充分挖掘，再生材料在原材料供给中的占比进一步提升，废弃物循环利用产业规模显著提升，废弃物循环利用水平总体居于全国前列。[b]二、大力推进生产领域废弃物循环利用[/b]（三）提升工业废弃物精细管理水平。依托省内资源型企业，以煤矸石、粉煤灰、尾矿（共伴生矿）、冶炼渣、工业副产石膏为重点，全面落实生产者责任延伸制度，压实废弃物产生单位主体责任。充分发挥一般工业固体废弃物管理台账制度作用，倒逼企业落实废弃物利用责任。指导企业做好固体废弃物分类收集、分类贮存，防范混堆混排，为资源循环利用预留条件。全面摸底排查省内历史遗留固体废弃物堆存场，实施分级分类整改。加大工业废水回用力度，完善工业废水收集处理设施。加大复杂难用工业固体废弃物规模化利用技术装备研发力度，鼓励废弃物产生单位与利用单位开展点对点定向合作。（四）加强农业废弃物收集利用。加快实施畜禽粪污资源化利用整县推进项目，支持养殖场（户）建设畜禽粪污集中收集处理、沼渣沼液贮存利用等配套设施，推进畜禽标准化规模养殖。坚持农用优先，积极推进秸秆饲料化、燃料化、肥料化、基料化利用，鼓励发展以秸秆为主要原料的新型建材、板材、包装材料、工艺品等产品，逐步建立多元化的秸秆利用格局。加快健全秸秆收储运体系，引导秸秆产出大户就地收贮，培育收储运第三方服务主体。积极发挥供销合作系统回收网络作用，指导市州加强农膜、农药与肥料包装、农产品包装、农机具、渔网等废旧农用物资回收。（五）稳步推进废旧装备再制造。加快推进汽车零部件、工程机械、机床、文化办公设备等领域再制造产业发展。充分发挥兰州西北中心区域优势，探索在盾构机、航空发动机、工业机器人、智能集成等新领域有序开展高端装备再制造。结合工业智能化改造和数字化转型，大力推广工业装备再制造，推广应用无损检测、激光熔覆、增材制造、柔性加工等再制造共性关键技术。在售后维修、保险、租赁等领域推广再制造汽车零部件、再制造文办设备等。[b]三、加快完善生活服务领域废弃物循环利用体系[/b]（六）强化建筑垃圾综合利用。进一步规范建筑垃圾分类处理和回收利用，加强建筑垃圾堆存、中转和资源化利用场所建设和运营管理。鼓励建筑垃圾在建筑工程和道路工程应用，支持将建筑垃圾用于土方平衡、环境治理、烧结制品及回填等领域。培育支持一批龙头企业，推动建筑垃圾回收利用企业规范化建设，把建筑垃圾资源化利用与推广绿色建材、模块化构件相结合，加快建筑垃圾再生利用项目建设。（七）加强废旧动力电池循环利用。建立健全新能源汽车动力电池溯源管理体系，落实生产者回收目标责任制。推动新能源汽车生产企业和废旧动力电池梯次利用企业建设规范化的回收服务网点。加强废旧动力电池再生利用与梯次利用成套化先进技术装备推广应用。严格落实动力电池回收利用国家和行业标准，开展质量认证。培育废旧动力电池综合利用骨干企业，促进废旧动力电池循环利用产业发展。开展清理废旧动力电池“作坊式回收”联合专项检查行动。（八）推动废旧物资回收专业化。鼓励各市州采取特许经营等方式，授权专业化企业开展废旧物资回收业务，实行规模化、规范化运营。引导回收企业按照下游再生原料、再生产品相关标准要求，提升废旧物资回收环节预处理能力。培育多元化回收主体，鼓励各类市场主体积极参与废旧物资回收体系建设。鼓励回收企业与物业企业、环卫单位、利用企业等单位建立长效合作机制，畅通回收利用渠道，形成规范有序的回收利用产业链条。推行“互联网+回收”模式，利用手机APP、微信小程序等移动互联网媒介，实现网上预约、上门回收。支持回收企业构建全链条业务信息平台和回收追溯系统。（九）加强再生资源高效利用。依托兰州红古“城市矿产”示范基地、兰州市和平凉市崆峒区资源循环利用基地、酒泉市、白银市工业资源综合利用基地，积极打造区域性再生资源加工利用基地和交易中心。鼓励废钢铁、废有色金属、废纸、废塑料等再生资源精深加工产业链合理延伸。推动兰州红古“城市矿产”示范基地等现有再生资源加工利用项目提质改造，开展技术升级和设备更新，提高机械化、信息化和智能化水平。加快推进污水资源化利用，因地制宜实施区域再生水循环利用工程。（十）加强低值可回收物循环利用。指导市州完善低值可回收物目录，在生活垃圾分类中不断提高废玻璃、低值废塑料等低值可回收物分类准确率。支持各地将低值可回收物回收利用工作纳入政府购买服务范围。鼓励各地探索采取特许经营等方式推进低值可回收物回收利用。鼓励有条件的市州实行低值可回收物再生利用补贴政策。（十一）丰富二手商品交易渠道。鼓励“互联网+二手”模式发展，鼓励建设集中规范的“跳蚤市场”，提高二手商品交易效率。鼓励人口大于50万的县（区市）建设集中规范的车辆、家电、手机、家具、服装等二手商品交易市场和交易专区。积极落实国家和省上二手商品交易规则，推动二手商品交易诚信体系建设，加强交易平台、销售者、消费者、从业人员信用信息共享。积极落实二手商品鉴定、评估、分级等相关标准，完善二手商品评估鉴定行业人才培养和管理机制，培育权威的第三方鉴定评估机构。落实计算机类、通讯类和消费类电子产品信息清除标准规范。全面落实取消二手车限迁政策，依法保护知识产权，规范二手商品转售、翻新等涉及规程标准、知识产权的相关服务。[b]四、全面拓展废弃物循环利用产业规模[/b]（十二）推进废弃物能源化利用。加快城镇生活垃圾处理设施建设，补齐县级地区生活垃圾焚烧处理能力短板。持续推进厨余垃圾处理设施建设，提升废弃油脂等厨余垃圾能源化、资源化利用水平。因地制宜推进农林生物质能源化开发利用，稳步推进生物质能多元化开发利用。在符合相关法律法规、环境和安全标准，且技术可行、环境风险可控的前提下，有序推进生活垃圾焚烧处理设施协同处置部分固体废弃物。（十三）推广资源循环型生产模式。积极推进生态工业园区建设，加快既有产业园区和产业集群循环化改造，促进企业、园区、行业间链接共生、原料互供、资源共享。加强重点行业企业清洁生产审核和结果应用。深入推进绿色矿山建设。推进重点行业生产过程中废气回收和资源化利用。支持二氧化碳资源化利用及固碳技术模式探索应用。推广种养结合、农牧结合等循环型农业生产模式。（十四）推动新能源等新型固废综合利用。加快推进废旧光伏组件、风电叶片等新兴固废综合利用技术研发及产业化应用，加大综合利用成套技术设备研发推广力度，探索新兴固废综合利用技术路线。推行风光发电行业生产者责任延伸制度，明确设计、生产、销售、使用、报废、回收、利用等产业链上下游各环节企业责任，构建闭环管理体系。推进数据中心、通信基站等新型基础设施领域废弃物循环利用。按照国家相关管理规范和回收利用处置规定，严格执行收集、贮存、运输和利用处置过程技术和污染控制国家标准，有效降低非法收集处置的环境污染风险。（十五）培育行业骨干企业。支持国有资本积极布局废弃物循环利用领域，发展壮大资源综合利用产业，打造全省绿色低碳领域龙头企业。引导中小企业聚焦主业提升专业化能力，培育一批技术装备先进、管理运营规范、创新能力突出、引领带动力强的行业骨干企业。鼓励兰白城市群、酒嘉地区、金武地区、平庆地区、关中平原等城市群建立健全区域废弃物协同利用机制，支持布局建设一批区域性废弃物循环利用重点项目。支持省内资源循环利用企业“走出去”。[b]五、完善政策机制[/b]（十六）加强要素保障。各地区要将交投点、中转站、分拣中心等废旧物资回收网络相关建设用地纳入相关规划，并将其作为城市配套的基础设施用地，保障合理用地需求。加大对再生资源加工利用产业基地、二手交易市场的用地支持。结合农村实际，在人口较多的乡镇规划布局农村废旧物资回收利用设施。保障废旧物资回收车辆合理路权，对车辆配备、通行区域、上路时段等予以支持和规范。（十七）加大投资财税金融价格政策支持。积极争取中央资金或统筹现有资金渠道，加强对废弃物循环利用重点项目建设的支持。鼓励有条件的地方政府制定低附加值可回收物回收利用支持政策。对符合条件的市场主体，依法落实节能节水、资源综合利用等相关税费优惠政策。鼓励金融机构加大对废弃物循环利用企业和重点项目的投融资力度，鼓励各类社会资本参与废弃物循环利用。落实产融合作推动工业绿色发展专项政策，发挥国家产融合作平台作用。加大政府绿色采购力度，积极采购再生资源产品。有序推行生活垃圾分类计价、计量收费。（十八）完善科技创新机制。开展资源循环利用先进技术示范工程，全面执行国家工业资源综合利用先进适用工艺技术设备目录。鼓励各地组织废弃物循环利用技术推广对接、交流培训，推动技术成果产业化应用。将废弃物循环利用关键工艺技术装备研发纳入省级重点研发计划相关重点专项支持范围。支持企业与高校、科研院所开展产学研合作。（十九）完善再生材料推广应用机制。严格执行再生材料标准体系。组织开展重点再生材料碳足迹核算标准与方法研究。落实国家政府绿色采购需求标准，将更多符合条件的再生材料和产品纳入政府绿色采购范围。开展再生材料应用升级行动，引导汽车、电器电子产品等生产企业提高再生材料使用比例。鼓励企业将再生材料应用情况纳入企业履行社会责任范围。（二十）加强行业监督管理。加强对废钢铁、废有色金属、废塑料、废纸、废旧轮胎、废旧纺织品、废旧手机、废旧动力电池等废旧物资回收加工利用行业的规范管理。加强对再生资源回收加工利用行业的环境监管，推行清洁生产，加强废水、废气等污染物源头管控和规范处理，确保达标排放。严厉打击再生资源回收、二手商品交易中的非法交易、假冒伪劣、诈骗等违法违规行为。加强计算机类、通讯类和消费类电子产品二手交易的信息安全监管，防范用户信息恢复泄露及恶意散播。[b]六、加强组织实施[/b]（二十一）加强组织领导。坚持把加强党的全面领导作为全面推动绿色低碳发展的根本保证，切实加快构建废弃物循环利用体系。省发展改革委要强化统筹协调，加强支持引导，及时评估本意见实施情况，会同省商务厅、省工信厅、省生态环境厅、省住建厅等有关部门以废旧物资循环利用体系建设重点城市、已开展生活垃圾分类工作的城市、“无废城市”为主体，适时探索开展城市资源循环利用成效评价，重大事项及时请示报告。各市州各有关部门要结合实际情况，完善工作机制，采取有力措施，确保各项政策举措、重点任务落地见效。（二十二）强化宣传引导。将循环经济知识理念纳入有关教育培训体系。在全国生态日、全国节能宣传周、全国低碳日、全国环境日等重要时间节点，积极组织省内新闻媒体挖掘我省废弃物循环利用典型案例，大力宣传废弃物循环利用的重要意义、相关政策措施，及时总结推广先进经验和典型做法。（二十三）深入交流合作。加强与国内外在废弃物循环利用领域的政策沟通、技术交流、项目合作、人才培训等，切实提高我省推动废弃物循环利用产业发展的能力和水平。

芯片的构建和阅读 Vivian G. Cheung, Michael Morley, Francisco Aguilar, Aldo Massimi, Raju Kucherlapati & Geoffrey Childs 联合基因科技有限公司 吴凌凌 译　　摘要 　　制作芯片和获得芯片的数据有许多不同的方法。这里我们介绍了在学术领域中两种芯片的构建和使用。除了详细说明了技术细节外，我们还对组成和方法的优缺点进行了评论，同时还介绍了杂交的方法。用我们所建立和使用芯片的方法来回答生物领域问题的事实证明了这种技术在大学的环境下是可行的。 　　一种获得基因功能信息的高通量的方法是cDNA芯片。在一块显微镜载玻片上包含了几百至几千个固定的DNA样本，以类似于Northern blot 和 Southern blot的方法进行杂交。了解了这个方法后，我们决定在我们各自的实验室Pennsylvania大学（Penn）和Albert Einstein学院医学部（AECOM）制作了高速，高精度的芯片。这个设备是由Stanford医学院Pat Brown制造的，第一次论证了这个方法的可行性。我们的目标是（1）最终以合理的价格，用一块或几块芯片来检测哺乳动物细胞中每个基因的表达，（2）发展以芯片为基础的绘图方法，（3）兼顾硬件和超作方法，尽可能地提高灵敏度。 　　玻片的优势 　　一个理想化的支持物允许探针有效地固定在其表面，探针与目标分子能牢固地杂交结合。与另一种用于制作芯片的标准支持物尼龙一样，玻璃有许多的优点。它也有其特长。首先，DNA样品以共价键的形式结合在处理过的玻片上。第二，玻璃是一种耐用的材料，能够耐高温和高离子强度溶液的洗涤。第三，玻璃不是多孔材料，使杂交的容量能保持在最小，因此能提高探针与目标分子的退火效率。第四，由于材料的低荧光性，不会有背景的影响。最后，两种不同的探针能够标上两种不同的荧光标记，在一片芯片上同一个反应中同时孵育；尼龙就受到连续或平行杂交的限制。 　　芯片需要大量的探针固定（或排列）在玻片上，这里我们描述了AECOM芯片，扫描仪以及进行了关于设计和操作的讨论。如果想得到关于Penn芯片的信息，请到http://w95vcl.neuro.chop.edu/vcheung查找。 　　自动化装置性质 　　AECOM点样仪，Albert，产生高密度的分隔的矩阵，矩阵包括cDNA、基因组DNA或其他类似的生物物质。机械的基本组成有计算机控制的三轴向的机械手和独特笔尖装置。 　　设计特点 　　机械手被设计成能自动从96或384孔的微量滴定板中选取样本，12支点样笔同时升起，每个点样笔收集了250-500nl溶液，在每块玻片上放置0.25-1nl，产生的点的大小范围直径为100-150μm。机械手是由设置好的程序控制的，能进行连续的点样，每一点避免与相邻的点接触，每点的中心距离大约为200-250μm。检测的精密度大约是10μm。机械手放置在可视工作平台上（Newport公司），允许放置大量的显微镜玻片，微量滴定板，三个洗涤装置和一个干燥装置。 　　洗涤装置是个固定的容器，装有蒸馏水，两次微量滴定板使用后需要更换。当笔尖浸过液体后，机械手要来回摇动点样笔（大约5Hz）来增加清洁程度。虽然我们认为没必要，但电脑控制的洗涤液可用超声波或流动的水来替代。干燥装置实际上是干/湿真空吸尘器（Sear公司，美国），接头与插入笔尖的限制插口相匹配。干燥器要做到在笔尖有快速流动的空气围绕，保持局部真空。 　　所设计的机械手的重要目的是要达到在最小的震动范围内的高速和高精确性。我们使用了保湿的可视工作平台，精密螺旋驱动地机械滑动，高分辨率的解码器的随动系统和沿着x轴方向的两侧支杆，避免了在一些系统中所见的悬臂结构。利用第二x轴的滑面来增加系统的固定性，能依次产生更快的定位以及通过工作平台的准确一致性。这些特点允许在精确率下的快速运动，使机械手能在一秒内对两块显微镜载玻片操作。 　　带有笔尖的点样笔支持物装置是一个重要的部分。我们的设计结合了线形运动，控制点样笔的方向，允许在最小的阻力下精确地纵轴运动，以防止在其他方向上的错位。我们设计的另一个独特之处是可调整的末端丝，允许在10μm的范围内校直每个点样笔的轴，以保证所有12支笔尖能在同一时间内接触显微镜玻片。而另一个没有这特点的设计需要与点样笔的精确长度一致以适应多点样笔的操作。每个点样笔由低强度的弹簧作为支持，保证在未接触表面时能回到伸展的位置。笔尖是由直径大约为1.6mm的不锈钢材料逐渐处理变细直至每点直径为100μm。再沿着中心垂直切割，在尖端分成两部分，每部部分5μm。 　　这个系统由可视基础程序控制的，在Microsoft Windous NT环境下运行，软件提供：印刷程序具体化；完成系统校正；显示真正地时间位置、速度和产生的错误；与其他功能参数一样重要的随动系统；动态地显示打印过程中的重要参数。随动系统控制的计算机中的插件能够动态地控制高速、复杂的机械手的动力，并设计成以它的运动来控制程序的语言。可视原理和随动插件运动控制程序相互作用，交换了参数、图象和所需的命令。微量滴定板的同一性是由扫描它的阅读器所决定的。由于有笔尖易被灰尘和纤维阻碍的问题，打印机现在被附上了软保护壁允许三个方向的随意进入并且合并了高效率效式空气过滤与吹风机以达到湿气的再流通。

【序号】：1【作者】：苏洋【题名】：基于多孔淀粉构建止血材料【期刊】：北京化工大学【年、卷、期、起止页码】：2020【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=IkZuKgafC3WQ8rzTC8nTKZQTWBZi-KoKlRVMQyih-G_iBSOcyQdBacYs1_Q4e8aeLxAGOW55kF3UtOKLU4F4k79L2JIk0L69_aYmt1APY7OT5cmHP2-4QARztkXaRcZnfpjuH2QxjSUsaQA2GXHcpQ==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

一、总体要求加快构建废弃物循环利用体系，要以习近平新时代中国特色社会主义思想为指导，深入贯彻党的二十大精神，全面贯彻习近平生态文明思想，完整、准确、全面贯彻新发展理念，加快构建新发展格局，着力推动高质量发展，遵循减量化、再利用、资源化的循环经济理念，以提高资源利用效率为目标，以废弃物精细管理、有效回收、高效利用为路径，覆盖生产生活各领域，发展资源循环利用产业，健全激励约束机制，加快构建覆盖全面、运转高效、规范有序的废弃物循环利用体系，为高质量发展厚植绿色低碳根基，助力全面建设美丽中国。——系统谋划、协同推进。立足我国新型工业化和城镇化进程，系统推进各领域废弃物循环利用工作，着力提升废弃物循环利用各环节能力水平。加强废弃物循环利用政策协同、部门协同、区域协同、产业协同，强化政策机制配套衔接。——分类施策、精准发力。根据各类废弃物来源、规模、资源价值、利用方式、生态环境影响等特性，分类明确废弃物循环利用主体责任和技术路径，因地制宜布局资源循环利用产业，提高废弃物循环利用体系运转效率。——创新驱动、提质增效。发挥创新引领作用，加强废弃物循环利用科技创新、模式创新和机制创新，不断开辟新领域、塑造新动能，拓展废弃物循环利用方式，丰富废弃物循环利用品类，提升废弃物循环利用价值。——政府引导、市场主导。充分发挥市场在资源配置中的决定性作用，更好发挥政府作用，建立有利于废弃物循环利用的政策体系和激励约束机制，激发各类经营主体活力，引导全民参与，增强废弃物循环利用的内生动力。到2025年，初步建成覆盖各领域、各环节的废弃物循环利用体系，主要废弃物循环利用取得积极进展。尾矿、粉煤灰、煤矸石、冶炼渣、工业副产石膏、建筑垃圾、秸秆等大宗固体废弃物年利用量达到40亿吨，新增大宗固体废弃物综合利用率达到60%。废钢铁、废铜、废铝、废铅、废锌、废纸、废塑料、废橡胶、废玻璃等主要再生资源年利用量达到4.5亿吨。资源循环利用产业年产值达到5万亿元。到2030年，建成覆盖全面、运转高效、规范有序的废弃物循环利用体系，各类废弃物资源价值得到充分挖掘，再生材料在原材料供给中的占比进一步提升，资源循环利用产业规模、质量显著提高，废弃物循环利用水平总体居于世界前列。二、推进废弃物精细管理和有效回收(一)加强工业废弃物精细管理。压实废弃物产生单位主体责任，完善一般工业固体废弃物管理台账制度。推进工业固体废弃物分类收集、分类贮存，防范混堆混排，为资源循环利用预留条件。全面摸底排查历史遗留固体废弃物堆存场，实施分级分类整改，督促贮存量大的企业加强资源循环利用。完善工业废水收集处理设施。鼓励废弃物产生单位与利用单位开展点对点定向合作。(二)完善农业废弃物收集体系。建立健全畜禽粪污收集处理利用体系，因地制宜建设畜禽粪污集中收集处理、沼渣沼液贮存利用等配套设施。健全秸秆收储运体系，引导秸秆产出大户就地收贮，培育收储运第三方服务主体。指导地方加强农膜、农药与化肥包装、农机具、渔网等废旧农用物资回收。积极发挥供销合作系统回收网络作用。(三)推进社会源废弃物分类回收。持续推进生活垃圾分类工作。完善废旧家电、电子产品等各类废旧物资回收网络。进一步提升废旧物资回收环节预处理能力。推动生活垃圾分类网点与废旧物资回收网点“两网融合”。因地制宜健全农村废旧物资回收网络。修订建筑垃圾管理规定，完善建筑垃圾管理体系。鼓励公共机构在废旧物资分类回收中发挥示范带头作用。支持“互联网+回收”模式发展。推动有条件的生产、销售企业开展废旧产品逆向物流回收。深入实施家电、电子产品等领域生产者回收目标责任制行动。加强城市园林绿化垃圾回收利用。加快城镇生活污水收集管网建设。三、提高废弃物资源化和再利用水平(四)强化大宗固体废弃物综合利用。进一步拓宽大宗固体废弃物综合利用渠道，在符合环境质量标准和要求前提下，加强综合利用产品在建筑领域推广应用，畅通井下充填、生态修复、路基材料等利用消纳渠道，促进尾矿、冶炼渣中有价组分高效提取和清洁利用。加大复杂难用工业固体废弃物规模化利用技术装备研发力度。持续推进秸秆综合利用工作。(五)加强再生资源高效利用。鼓励废钢铁、废有色金属、废纸、废塑料等再生资源精深加工产业链合理延伸。支持现有再生资源加工利用项目绿色化、机械化、智能化提质改造。鼓励企业和科研机构加强技术装备研发，支持先进技术推广应用。加快推进污水资源化利用，结合现有污水处理设施提标升级、扩能改造，系统规划建设污水再生利用设施，因地制宜实施区域再生水循环利用工程。(六)引导二手商品交易便利化、规范化。鼓励“互联网+二手”模式发展。支持有条件的地区建设集中规范的二手商品交易市场。完善旧货交易管理制度，研究制定网络旧货交易管理办法，健全旧货评估鉴定行业人才培养和管理机制。出台二手商品交易企业交易平板电脑、手机等电子产品时信息清除方法相关规范，保障旧货交易时出售者信息安全。研究解决旧货转售、翻新等服务或相关商品涉及的知识产权问题。支持符合质量等相关要求的二手车出口。(七)促进废旧装备再制造。推进汽车零部件、工程机械、机床、文化办公设备等传统领域再制造产业发展，探索在盾构机、航空发动机、工业机器人等新领域有序开展高端装备再制造。推广应用无损检测、增材制造、柔性加工等再制造共性关键技术。在履行告知消费者义务并征得消费者同意的前提下，鼓励汽车零部件再制造产品在售后维修等领域应用。(八)推进废弃物能源化利用。加快城镇生活垃圾处理设施建设，补齐县级地区生活垃圾焚烧处理能力短板。有序推进厨余垃圾处理设施建设，提升废弃油脂等厨余垃圾能源化、资源化利用水平。因地制宜推进农林生物质能源化开发利用，稳步推进生物质能多元化开发利用。在符合相关法律法规、环境和安全标准，且技术可行、环境风险可控的前提下，有序推进生活垃圾焚烧处理设施协同处置部分固体废弃物。(九)推广资源循环型生产模式。推进企业内、园区内、产业间能源梯级利用、水资源循环利用、固体废弃物综合利用，加强工业余压余热和废气废液资源化利用。研究制定制造业循环经济发展指南。加强重点行业企业清洁生产审核和结果应用。深入推进绿色矿山建设。推进重点行业生产过程中废气回收和资源化利用。支持二氧化碳资源化利用及固碳技术模式探索应用。深入实施园区循环化改造。积极推进生态工业园区建设。推广种养结合、农牧结合等循环型农业生产模式。四、加强重点废弃物循环利用(十)加强废旧动力电池循环利用。加强新能源汽车动力电池溯源管理。组织开展生产者回收目标责任制行动。建立健全动力电池生态设计、碳足迹核算等标准体系，积极参与制定动力电池循环利用国际标准，推动标准规范国际合作互认。大力推动动力电池梯次利用产品质量认证，研究制定废旧动力电池回收拆解企业技术规范。开展清理废旧动力电池“作坊式回收”联合专项检查行动。研究旧动力电池进口管理政策。(十一)加强低值可回收物循环利用。指导地方完善低值可回收物目录，在生活垃圾分类中不断提高废玻璃、低值废塑料等低值可回收物分类准确率。支持各地将低值可回收物回收利用工作纳入政府购买服务范围。鼓励各地探索采取特许经营等方式推进低值可回收物回收利用。鼓励有条件的地方实行低值可回收物再生利用补贴政策。(十二)探索新型废弃物循环利用路径。促进退役风电、光伏设备循环利用，建立健全风电和光伏发电企业退役设备处理责任机制。推进数据中心、通信基站等新型基础设施领域废弃物循环利用。研究修订《废弃电器电子产品处理目录》，加强新型电器电子废弃物管理，完善废弃电器电子产品处理资格许可等环境管理配套政策。五、培育壮大资源循环利用产业(十三)推动产业集聚化发展。开展“城市矿产”示范基地升级行动，支持大宗固体废弃物综合利用示范基地、工业资源综合利用基地等产业集聚区发展，深入推进废旧物资循环利用体系重点城市建设。落实主体功能区战略，结合生态环境分区管控要求，引导各地根据本地区资源禀赋、产业结构、废弃物特点等情况，优化资源循环利用产业布局。(十四)培育行业骨干企业。分领域、分区域培育一批技术装备先进、管理运营规范、创新能力突出、引领带动力强的行业骨干企业。鼓励重点城市群、都市圈建立健全区域废弃物协同利用机制，支持布局建设一批区域性废弃物循环利用重点项目。支持国内资源循环利用企业“走出去”，为建设绿色丝绸之路作出积极贡献。引导国有企业在废弃物循环利用工作中发挥骨干和表率作用。(十五)引导行业规范发展。对废弃电器电子产品、报废机动车、废塑料、废钢铁、废有色金属等再生资源加工利用企业实施规范管理。强化固体废弃物污染环境防治信息化监管，推进固体废弃物全过程监控和信息化追溯。强化废弃物循环利用企业监督管理，确保稳定达标排放。依法查处非法回收拆解报废机动车、废弃电器电子产品等行为。加强再生资源回收行业管理。依法打击再生资源回收、二手商品交易中的违法违规行为。六、完善政策机制(十六)完善支持政策。充分利用现有资金渠道加强对废弃物循环利用重点项目建设的支持。落实落细资源综合利用增值税和企业所得税优惠政策。细化贮存或处置固体废弃物的环境保护有关标准要求，综合考虑固体废弃物的环境危害程度、环境保护标准、税收征管工作基础等因素，完善固体废物环境保护税的政策执行口径，加大征管力度，引导工业固体废弃物优先循环利用。有序推行生活垃圾分类计价、计量收费。推广应用绿色信贷、绿色债券、绿色信托等绿色金融工具，引导金融机构按照市场化法治化原则加大对废弃物循环利用项目的支持力度。(十七)完善用地保障机制。各地要统筹区域内社会源废弃物分类收集、中转贮存等回收设施建设，将其纳入公共基础设施用地范围，保障合理用地需求。鼓励城市人民政府完善资源循环利用项目用地保障机制，在规划中留出一定空间用于保障资源循环利用项目。(十八)完善科技创新机制。开展资源循环利用先进技术示范工程，动态更新国家工业资源综合利用先进适用工艺技术设备目录。鼓励各地组织废弃物循环利用技术推广对接、交流培训，推动技术成果产业化应用。将废弃物循环利用关键工艺技术装备研发纳入国家重点研发计划相关重点专项支持范围。支持企业与高校、科研院所开展产学研合作。(十九)完善再生材料推广应用机制。完善再生材料标准体系。研究建立再生材料认证制度，推动国际合作互认。开展重点再生材料碳足迹核算标准与方法研究。建立政府绿色采购需求标准，将更多符合条件的再生材料和产品纳入政府绿色采购范围。结合落实生产者责任延伸制度，开展再生材料应用升级行动，引导汽车、电器电子产品等生产企业提高再生材料使用比例。鼓励企业将再生材料应用情况纳入企业履行社会责任范围。七、加强组织实施(二十)加强组织领导。坚持加强党的全面领导和党中央集中统一领导，把党的领导贯彻到加快发展方式绿色转型的各领域全过程，切实加快构建废弃物循环利用体系。各地区各有关部门要完善工作机制，细化目标任务，确保各项政策举措、重点任务落地见效。国家发展改革委要强化统筹协调，及时评估本意见实施情况，会同有关部门以废旧物资循环利用体系建设重点城市、已开展生活垃圾分类工作的城市、“无废城市”为主体，探索开展城市资源循环利用成效评价，加强支持引导。重大事项及时请示报告。(二十一)抓好宣传引导。将循环经济知识理念纳入有关教育培训体系。在全国生态日、全国节能宣传周、全国低碳日、环境日等重要时间节点，开展形式多样的宣传教育活动，大力宣传废弃物循环利用的重要意义、相关政策措施。及时总结推广先进经验和典型做法。(二十二)强化国际合作。积极参与国际循环经济领域议题设置，加强在联合国、世界贸易组织等框架和多边机制中的国际合作。与更多重点国家和地区建立循环经济领域双边合作机制，以政策对话、经贸合作、经验分享、能力建设等形式深化双边合作。

这两年在美帝净做克隆实验了，以前读PHD时候还觉得自己分子克隆挺牛X的，来这边之后做了各种各样的构建才知道以前是坐井观天，刚才粗粗统计了一下，在美帝一年零八个月，我构建的质粒的超过四百个，其中有很简单从PCR构建到拿WB结果的一共不到一周，也有巨难的花了四个月时间换了几次strategy才弄好激动得我半夜給老板发信的品种;有单片段酶切插入这种不用脑型的，也有九个片段逐一插入正反向还不同的。专家不敢说，但是熟能生巧，确实积累了不少经验，现在系里从POSTDOC到PHD学生到TECH构建前很多人都跟我商量(做博后结果成了技术员的人生真悲哀啊)。我老板甚至开玩笑说，我们将来开个公司，我专门负责构建(这话听得我想揍他大家同意不?)想了想还是把经验写下来，一来做个记录，二来博同行一笑，能让大家少绕点弯路则更好。1. 准备工作俗话说用欲善其事，必先利其器。我强烈建议大家在做构建之前先找好工具，这样起的效果事半功倍。这里说个笑话，我们系有个新PHD学生，是个印度女孩，很聪明很刻苦，她所在的实验室也很好，不过除了她之外包括老板在内都是生物物理背景的，以前一个生物POSTDOC在的时候还好，这个POSTDOC一走，整个实验室对分生就只有一个粗浅的概念，这个女孩就想把一个质粒上的基因插到另一个质粒上去，要是我就先查查有没有合适的酶切位点，要没有就改造一下质粒一切搞定，这女孩她不懂啊(要命的是她老板固然牛，对这方面也不懂)，自己辛辛苦苦设计了PCR引物去做PCR，P了将近5K的产物去测序，结果测的结果中间有个MUTATION，要懂行的就找找酶切位点，从原来的替换上去，然后测这下这段就行。她呢，又送去了若干了质粒一个接一个的测，一个测序反应这边是8刀,一个质粒测下来就是40刀，她光测序就要花好几百刀(你得佩服老美实验室真有钱呀)。这件事教育我们准备工作是多么重要。这里推荐大家两个工具，一个都知道，PRIMER5.0。另一个工具极强大，也不知道国内流行不，叫lasergene，包括设计引物到构建图谱一应俱全，图谱非常漂亮，而且分析酶切位点等等就超NB，如果感兴趣的话我可以給大家传一个图谱看看。2. PCR如果没有现成的质粒可供酶切，PCR是最理想也是最方便的策略。关于PCR具体技术坛子内帖很多，我不多说了，这里仅在构建方面谈一谈。（1）如何设计引物?首先，看懂质粒图谱!拿大家比较熟悉的PEGFP-C1和PEGFP-N1做例子。想用N1质粒，设计引物就得把下游引物上的中止密码子去掉，不要辛辛苦苦的一路做下来结果根本不表达融合蛋白，你就死了;C1质粒，注意frame，要是移码了，你也死了。而且PEGFP系列有1.2.3，要弄清楚别弄窜了。一句话，要看懂你的图谱!再多一句，PEGFP的XBA1和Bcl1位点不能用。注意在设计酶切位点的时候要加保护碱基(大家要用T载体就当我没说)。酶切位点设计也有一定的讲究，我的原则是，能用粘端就用粘端，实在不能用的就用只好用一些常用的平端酶，如ECORV和SNAB1之类，要是以后还有别的用处就多加点酶切位点，我曾一口气在引物上加了五个酶切位点以防以后要用到，注意计算TM的时候要减去这些不match的序列，或者选用touch-up策略。除了酶切位点，还要注意KOZAK序列的问题，很多质粒没有提供KOZAK序列，这要在设计的时候直接在引物上加好。GENE OVERLAP也比较有用，比方说加个FLAG片段，HIS片段，2A序列之类的，直接设计三引物OVERLAP一下就可以，省得还要再多构建一步，这些都是设计引物时候就要考虑好的。引物长一点不要紧(我最喜欢两步法了)，尤其是对GC比高的序列，有时候引物不长PCR根本不出结果，注意如果GC比较高，这个时候GENE OVERLAP就不要做了，很麻烦，克隆很难挑。（2）没有合适的酶切位点?很简单，用同尾酶策略，比方说Bgl2和BamH1,Nhe1和spe1，Xho1和Sal1(注意连上了切不下来)，实在不行就平端吧，只要不超过4KB，平端酶连接也不那么难。（3）如何选择Taq酶?选择Taq酶也很关键，首先，高保真(High fidelity)这是必须的，我在国内常用LA KIT，可这边***忑贵，只好用(美)国货。常用的PFU，PHUSION和PFX。PFX50是invitrogen公司的，一度曾卖到脱销，保真性应该是目前最高的，是普通Taq的50倍，对一般基因绝无问题(我同事4.5K PCR产物,居然一个突变都没有)，但是对比较难PCR的高GC或者位点比较难做PCR的基因(基因组为模板)就明显不行了;PFU(安捷伦)保真性没有PFX50高，但是能力很强，略贵点;phusion是NEB公司的，不贵，但是这个酶很怪异，每次用都要把annealing温度调高好几度，否则就出杂带，个人觉得NEB内切酶绝对是NO.1，但是Taq就不如Invitrogen了，如果实验室有钱，直接买invitrogen的spuermix，什么都混好了，连ddH 2O 都搞定，只要直接向里加模版和引物就OK，每次我要拿漂亮的结果都用supermix。还是那句话，读说明书。同是高保真Taq酶，iproof 要求98度起始1min，pfx就要求95起始2min ，延伸有的是72，有的是68，有的要加1uL,有的加0.5，有的TM要低五度，有的高三度，这些必须要读说明书，读且仔细读，这是拿到任何试剂都要做的第一步。（4）如果基因太难PCR，怎么办?首先，DMSO是好物，好到甚至FISHER的Phusion就直接写上了DMSO这项，注意3%-6%，太高Taq酶活性就不行了。如果GC太高而且片段过长的话，DMSO也不行，GC低的不推荐。我做个过一个2.8 k,GC比高达92%的基因PCR，一共做了两周，从保真性最强的PFX50到普通的promega 2xGO Taq都试过，什么DMSO，甘油，Biorad的iproof with high GC Buffer, NEB one Taq 2x Taq High GC(还带Enhancer的)，TAKARA 的LA都试过，都不行，要么不出带，要么就是乱七八糟的带一起来，头晕脑涨的我都打算抹平策略了，后来从别的实验室弄来一个clontech的2 GC rich kit，一次搞定!强烈推荐这个KIT，太牛了，在别家都缴械的时候，它一锤定音，不过价格也比别家都牛，10次反应就130刀，其实实验室大可以备一个，就是防备超高GC又长的片段。不过这个KIT非高保真，送了三个克隆测序，各在不同部位有突变，于是我就从A克隆切一段接到B克隆上，又从C克隆切一段接B克隆上。注意的问题是GC比太高测序也很困难，正常GC能测1K左右，到了High GC就能测个五六百，这时要多准备些引物。（5）PCR产物的纯化如果带很单一，又强，直接PCR产物纯化就可以，如果有杂带，但目的带也很强，跑胶，目的带切胶回收。回收这里也有个瓶颈，就是回收率的问题，我试过很多家的KIT，promega的GEL回收试剂盒效率和价格都很合适，推荐这个。关于T载体，我在国内的时候是必用的，到了美帝反倒一次没用过，这边比较流行直接用PCR产物切，就是回收完了直接切上，回收后然后连接，这又回到了最开始设计，要加保护碱基。这个策略好处就是免除了T载体这步，直接插入目的载体，存在的问题就是处于盲做状态，还要加保护碱基。

分子生物学作为基因工程的上游技术，其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的，以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。 1.冰箱:根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。 2.培养箱：37℃恒温箱用于细菌的平板培养及分子生物学实验。 3.恒温培养摇床：用于大肠杆菌等生物工程菌种的扩增。 4.水浴锅：用于保温并进行各类实验。25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。含低温的水浴槽可以用于分子生物学的质粒与基因片段的连接等实验及用于42度的大肠杆菌感受态的热激。 5.烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。 6.超纯水机：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高，用自来水、蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。 7.蒸汽消毒锅：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒。 8.滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。 9.各种天平：台秤、精密电子分析天平，用于精确称量各类试剂。 10.液体体积的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等。

一个国际研究小组利用来自两名男性捐献的全部大脑和来自第三名男性的单个脑半球构建出高分辨率的人类大脑三维基因表达图谱。相关研究结果于2012年9月19日在线刊登在《自然》期刊上。在美国西雅图市艾伦脑科学研究所(Allen Institute for Brain Science)研究员Michael Hawrylycz的领导下，研究人员将来自大约900个精确切割的大脑切片的转录数据---利用基因芯片技术收集到的---组装在一起，然后将转录数据与在切片之前对捐献的大脑的核磁共振成像扫描结果进行叠加，从而构建出人大脑三维基因表达图谱。这些图谱是免费向公众提供的，详情可参见网址：http://www.brain-map.org/，而且能够有助于科学家们测试关于大脑功能、疾病和进化方面的假设。艾伦脑科学研究所神经科学家Ed Lein说，“这些数据本身并不提供理解大脑如何工作方面的所有答案。然而，我们希望它们促进人类大脑研究以便理解大脑的复杂化学性质和细胞组成。”比如，研究特定疾病的科学家们能够利用成像技术，如功能性核磁共振成像，来评估相关的大脑区域，然后查询这些新的图谱来鉴定在这些区域表达的基因，而这可以通过一种简单的颜色编码的手册来显示基因表达的相对水平来实现。当前，研究人员还是依赖于对小鼠大脑的零碎研究。

【序号】：2【作者】： 黄林【题名】：甲壳素基水凝胶的构建及其在组织工程中应用【期刊】：武汉大学【年、卷、期、起止页码】：2021【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CDFD&dbname=CDFDLAST2022&filename=1021657090.nh&uniplatform=NZKPT&v=Q4JPOjmDekUF_k67kixouQ5u-CZjsqn5-kQUSjL_3s1rYwEkY4SZZO-FvUZrVLJK

[font=&]【题名】：无机磷酸盐传感器构建及对饮用水源检测[/font][font=&]【全文链接】：https://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10403-1021796460.htm[/font]