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肝脏组织提取物

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肝脏组织提取物相关的论坛

  • 肝脏组织的的代谢组学

    请问用UPLC-Q-TOF-MS做肝脏组织的的代谢组学可以吗?[b][color=#444444]看了大部分的文献基本都是用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]或者核磁做肝脏组织,用这种方法做的都是血液和尿液,这是这种方法有什么限制吗?[/color][color=#444444]同时请各位大神如有看到类似的文献能分享给我吗[/color][/b]

  • 肝脏组织中多种药物的固相萃取方法

    在动物性食品中,需要检测的不仅有农药残留污染物,还有兽药以及其他添加物。而动物性食品的主要基质干扰来自于蛋白质、多肽、氨基酸和脂肪等。样品萃取净化的主要困难来自于极性药物与强水溶性基质(蛋白质、氨基酸)的分离和弱极性药物与亲脂性基质的分离。由于兽药的化学性质差异很大,使多残留同时检测具有非常大的难度。样品预处理:肝脏组织1 g与3 mL水混合匀浆,取0.4 mL(等于100 mg肝脏组织)中加入1 mL去离子水,并在超声波水浴中振荡5 min后6000 g离心10 min。上清液A供萃取酸性及中性药物。样品离心后得到的沉淀物中加入枯草杆菌蛋白酶的Tris溶液,混合均匀后(pH 10.5),60℃水解1 h。水解完成后,将样品冷却至室温,用10%(体积分数)磷酸将样品的pH调节至6~7,并在6000 g离心10 min。所得到的上清液(B)用于萃取碱性药物。固相萃取柱:Bond E1ut Certify非极性/阳离子交换混合柱,130mg/3 mL,Varian公司。柱预处理:2 mL甲醇,2 mL磷酸缓冲溶液。样品过柱:0.4 mL上清液A过柱。柱洗涤:1 mL水,0.5 mI,磷酸缓冲溶液(pH 4.0)。柱干燥:50μL甲醇,空气。目标物洗脱:4 mL丙酮/氯仿(1:1,体积比),洗脱酸陛和中性药物(馏分A)。柱预处理:2 mL磷酸缓冲溶液(使用上述同一根萃取柱)。样品过柱:上述上清液B过柱。柱洗涤:1 mL 1 mol/L醋酸(pH 2.4),2 mL丙酮/氯仿(1:1,体积比。柱干燥:50μL甲醇,空气。目标物洗脱:2 mL 2%(体积分数)氨化乙酸乙酯,洗脱碱性药物(馏分B)。浓缩/分析:分别将丙酮/氯仿洗脱馏分及氨化乙酸乙酯洗脱馏分在氮气氛40℃浓缩至约100μL,然后进行GC分析。

  • 从动物肝脏中提取DNA

    一、原理 : 在浓氯化钠(1―2mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。 将抽提得的核蛋白用SDS(十二烷基硫酸钠)处理,DNA或(RNA)即与蛋白质分开,可用氯仿―异戊醇将蛋白质沉淀除去,而DNA则溶解于溶液中。向溶液中加入适量乙醇,DNA即析出。为了防止DNA或(RNA)酶解,提取时加入EDTA(乙二胺四乙酸) 二、实验材料与仪器 : 1、小白鼠肝脏 2、匀浆器 3、离心机5000r/min 4、量筒50ml(×1),25 ml(×1),10 ml(×1) 5、 吸管5 ml(×2) 6、水浴锅 7、真空干燥器 三、试剂 : 1.5 mol/L NaCl 溶液:将292.3g NaCl 溶于水,稀释至1000ml。 2.0.14mol/L NaCl―0.15mol/L EDTA―Na 溶液: 溶8.18g NaCL 及37.2g EDTA―Na 于蒸馏水,稀释至1000ml。 3.25% SDS 溶液: 溶25g 十二烷基硫酸钠于100ml 45% 乙醇 4.0.015 mol/L NaCL―0.0015 mol/L 柠檬酸三钠溶液: 氯化钠 0.828 g及柠檬酸三钠0.341g 溶于蒸馏水,稀释至1000ml。 5.氯仿―异戊醇混合液:氯仿:异戊醇=24:1(V/V)。 6.1.5 mol/L NaCL―0.15 mol/L柠檬酸三钠溶液:氯化钠 82.8 g 及柠檬酸三钠34.1 g溶于蒸馏水,稀释至1000ml。 7.3 mol/L乙醇钠―0.001 mol/L EDTA―Na溶液: 称取乙酸钠 408 g,EDTA―Na 0.372g 溶于蒸馏水,稀释至1000ml。 8.70%乙醇,80%乙醇,95%乙醇,无水乙醇。 9.二苯胺试剂 10.1 mol/L过氯酸溶液:将10ml过氯酸(70%)用蒸馏水稀释至110ml。 四、操作 : 1. DNA的分离纯化: (1)将10头小白鼠迅速杀死,取出肝脏,用0.14mol/LNaCl―0.15mol/l EDTA溶液洗去血浆,剪碎,加入50ml0.14mol/L NaCl―0.15mol/lEDTA溶液,置匀浆器中研磨,待磨成糊状后,将糊状物离心10分钟(4000r/min),弃去上清液,沉淀用0.14mol/LNaCl―0.15mol/L EDTA溶液洗二、三次,所得

  • 【转帖】用干细胞在实验室造出小型人类肝脏

    科学家们设法利用干细胞在实验室制造出小型人类肝脏。这一成功增加了制造出可用于移植的新肝脏的希望,尽管专家们说这还需要很多年时间。来自美国韦克福雷斯特大学巴普蒂斯特医疗中心的研究小组在波士顿的一个会议上展示了他们的研究成果。英国专家们说,这是“激动人心的进展”,但目前还不确定是否有可能培养出功能健全的肝脏。对可供移植肝脏的需求远超过所能供应的数量。近年来,研究工作的重点一直放在寻找用细胞技术维持或终有一天替代人体衰退器官的方法上。这些器官的基本构件是干细胞,一种在特定条件下分裂,形成各种人体组织的重要细胞。然而,用干细胞构建一个三维器官是一件困难的工作。韦克福雷斯特大学的研究人员以及世界上其他研究小组所使用的方法是,以现有肝脏结构为平台,生成新的肝脏组织。按照这种方法,研究人员利用一种洗涤剂剥离肝脏细胞,只留下支撑肝脏细胞的胶原框架和毛细血管网络。然后,新的干细胞——发育不完全的肝脏细胞以及用于生成新血管内壁的内皮细胞——被逐渐填入。将这些放入用各种营养物和氧气培养细胞的生物反应器中,一周后,科学家们观察到肝脏结构中出现普遍的细胞发育现象,并且这个小型器官甚至出现一些正常工作的迹象。领导这项研究的谢伊·瑟凯尔教授说:“我们为这项研究展现的可能性感到激动,但必须强调的是,我们还处于初级阶段,还必须克服许多技术障碍才能让病人受益于这项研究。”他说:“我们不仅需要弄清如何一次性培养大量肝细胞,以便为病人制造足够大的肝脏,我们还必须确定使用这些器官是否安全。”英国研究人员认为这项研究成果是可喜的。英国帝国理工学院教授马克·瑟斯说,这些研究成果“鼓舞人心”。他说:“报告显示,这些研究人员攻克了制造人造肝脏的主要障碍之一,即在‘自然生成的’肝脏结构中培养出正常工作的人类肝脏细胞。”他说:“很明显,这些细胞发育良好,但下一步是要证明它们能够像人类正常肝脏组织那样工作。”

  • 【转帖】动物肝脏作“支架” 人类干细胞当填充

    动物肝脏作“支架” 人类干细胞当填充    据英国《每日电讯报》11月1日(北京时间)报道,在波士顿举行的美国肝脏疾病研究大会上,美国维克森林大学浸会医学中心的研究人员表示,他们使用人体干细胞首次在实验室培育出微缩版人体肝脏,新的实验结果有助于在将来制造出全功能的人造肝脏,造福广大肝病患者。  人们对于移植肝脏的需求远远超过了可以获取的数量。最近几年,研究人员一直在想方设法使用细胞技术支撑人体内随着年龄增长不断衰弱的器官正常运转,甚至希望某一天可以用人造器官取而代之。  维克森林大学医学院主管兼教授谢伊·索科尔团队使用人体干细胞制造出该微型肝脏,在一个“支架”上形成新的肝脏组织,而这个“支架”由一个动物肝脏制造而成。  研究人员首先将动物肝脏中的细胞除去,仅仅留下支持细胞生长的胶原蛋白框架以及一个细小的血管网络。接着将新的干细胞,也就是不成熟的人类肝脏细胞和内皮细胞(主要用于形成血管的内壁)逐渐填入“支架”中。随后,再将整个框架移入一个生物反应器中,并使用营养物质和氧气的混合物来培养这些细胞。一周后的观察发现,细胞的生长状况非常好,甚至表现出了很多真正人体肝脏的功能。  索科尔表示,新研究成果令人兴奋,但目前还处于初级阶段,仍有很多技术障碍需要克服。比如,研究人员不仅需要知道如何同时培育出数十亿肝脏细胞,以获得足够大的肝脏供病人使用,同时也必须弄清楚这些器官是否安全。

  • 【金秋计划】丹酚酸提取物通过调节胆汁酸代谢,预防雷公藤多苷所致急性肝损伤

    [b][size=15px][color=#595959]雷公藤多苷片(TWP)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]是治疗[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]类风湿[/color][/size][size=15px][color=#595959]性[/color][/size][size=15px][color=#595959]关节炎[/color][/size][size=15px][color=#595959](RA)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]应用最广泛的中药制剂,但其[b]肝毒性[/b]往往限制了其广泛应用。(TWP治疗RA时,报告了包括肺炎、呕吐、腹泻和上[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]呼吸道感染[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]在内的不良事件。)目前为止,尚无有效的方法来减轻TWP的急性肝毒性。因此,寻找有效的方法预防TWP的肝毒性具有重要意义。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]丹参(SM)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功能,经常用于治疗心[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]血管[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]疾病和作为护肝药物。新的药理学和临床研究还表明,SM具有改善微循环和保护心脏的活性,以及抗肿瘤、保肝、抗氧化、[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]免疫[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]调节、抗炎等生物活性。[b]丹参酚酸提取物(SA)[/b]是丹参的亲水成分,具有显著的[b]抗氧化和保肝[/b]作用。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]采用[b]代谢组学和转录组学[/b]相结合的方法,研究SA对TWP诱导的大鼠[b]急性肝损伤[/b]的保护作用,并探讨其相关机制。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]采用UPLC-Q/TOF-MS对SA和TWP提取物进行鉴定。连续7天给药SA (200 mg/kg)。第7天灌胃TWP (360 mg/kg)诱导大鼠急性肝损伤。血清生化及H&E染色评价肝损害程度。利用肝脏代谢组学和转录组学探索其潜在机制,并利用q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和IHC等分子生物学实验验证相关信号通路。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]SA能预防TWP引起的肝损伤症状,如肝指数升高、ALT和AST升高、肝组织病理改变等。肝脏代谢组学研究表明,TWP可以显著改变肝脏中单个胆汁酸的含量,而SA对[b]胆汁酸生物合成途径[/b]的影响最为显著。肝脏转录组学结果显示,SA + TWP组改变的基因主要涉及[b]胆固醇代谢、脂质调节和胆汁酸稳态途径[/b]。编码farnesoid X受体(FXR)的Nr1h4基因表达显著改变,[b]FXR是胆汁酸稳态的重要调节因子[/b]。进一步研究证实,SA可以阻止TWP诱导的FXR及其下游信号下调,从而调节[b]胆汁酸代谢[/b],最终预防TWP引起的急性肝损伤。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][color=#3573b9]结论[/color][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]SA可通过调节胆汁酸代谢途径对TWP诱导的肝损伤起到保护作用[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]。SA可能为TWP诱导的急性肝损伤提供一种[b]新的保护策略[/b]。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959] [/color][/size]

  • [求助]大鼠肝脏的FTIR红外光谱的几个问题?

    我现在用的是FTIR红外光谱来做大鼠肝脏。肝脏组织没有经任何处理,直接放在Brucher公司全反射FTIR上测,但是结果很不好。我查了好多文献,看见有人用FTIR装上ATR探头,然后把未处理生物组织紧紧贴在ATR探头上,即可做出。不知道可不可以,请高手指教。

  • 【金秋计划】四逆散通过维持肝脏氧化平衡和糖/脂代谢稳态来促进肝脏再生

    [size=15px][color=#595959]各种肝脏疾病的临床治疗效果与[b]肝脏的再生能力[/b]密切相关。肝再生不足或失败是暴发性肝衰竭和广泛肝切除术后死亡的直接原因。[b]肝脏再生[/b]主要依赖于肝细胞的增殖能力,肝细胞的快速增殖会产生大量的活性氧(ROS),如H2O2。生理水平的H2O2有助于[b]细胞增殖[/b]、分化和[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]血管[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]生成,而超生理浓度可导致生长停滞、[b]氧化应激损伤[/b]和其他病理过程。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]四逆散(SNS)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]是一种著名的调和肝脾功能的中药方剂,数千年来一直具有减轻肝损伤的临床疗效,广泛用于治疗肝炎、肝纤维化和非酒精性脂肪性肝病等。然而,其作用的确切分子药理学机制尚不清楚。[/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]探讨SNS对肝脏再生的影响并阐明其潜在机制。 [/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]采用[b]70%肝部分切除(PHx)小鼠模型[/b],分析SNS对肝再生的影响。使用[b]水通道蛋白[/b]9敲除小鼠(AQP9-/-)来证明SNS介导的肝再生增强是针对AQP9的。利用tdTomato标记的AQP9转基因小鼠系(AQP9-RFP)测定了AQP9蛋白在肝细胞中的表达模式。通过[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]免疫印[/color][/size][size=15px][color=#595959]迹[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]、实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]、染色技术和生化分析进一步探讨SNS的潜在机制。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]SNS治疗可显著促进70% PHx后野生型小鼠肝再生和肝细胞AQP9蛋白表达(AQP9+/+),但对AQP9-/-小鼠无显著影响。在70% PHx下,SNS通过增加活性氧清除剂谷胱甘肽和超氧化物歧化酶的水平,降低肝组织中氧化应激分子H2O2和丙二醛的水平,帮助维持肝脏[b]氧化平衡[/b],从而保留了肝细胞增殖的这一关键过程。同时,SNS增加了肝细胞对甘油的摄取,刺激糖异生,维持[b]糖/脂代谢稳态[/b],确保肝脏再生所需的能量供应。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][color=#3573b9]结论[/color][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]该研究首次证实了[b]SNS通过上调肝细胞中AQP9的表达,维持肝脏氧化平衡和糖脂代谢稳态,从而促进肝脏再生[/b]。这些发现为SNS促进肝脏再生的分子药理学机制提供了新的见解,并为其在肝脏疾病治疗中的临床应用和优化提供了指导。[/color][/size]

  • 动植物膜脂和膜蛋白提取方法

    [align=left][font='times new roman'][size=16px]动植物膜脂和膜蛋白提取方法[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=16px]大豆卵磷脂和肺腺癌细胞膜脂提取物的制备[/size][/font][/align]对于大豆卵磷脂样品,首先去除胶囊,将100 mg大豆卵磷脂样品用10 mL正己烷/异丙醇(1:1,v/v)稀释溶解,样品在4℃下超声10 min,样品再经0.45 μm微孔膜过滤,以备后续使用。肺腺癌细胞膜脂的提取方法参照Folch法。首先裂解肺腺癌细胞,向细胞液中加入18 mL已经配好的氯仿-甲醇(2:1,v/v)混合溶剂,摇匀后置于高速低温离心机4℃,3000 r/min离心10 min(摇匀过程中时刻注意溶液的温度,尽量避免温度过高)。然后向该体系中加入约2 mL的超纯水,摇匀后离心。上清液移除后用少量的甲醇-水(1:1,v/v)小心清洗上表面,得到肺腺癌磷脂提取物,过0.45 μm滤膜后,N[font='times new roman'][sub][size=16px]2[/size][/sub][/font]吹干,备用。冰箱-20℃保存,临用时现配溶液。[align=left][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肝脏膜蛋白质的制备[/size][/font][/align]参考试剂盒提取小鼠肝脏膜蛋白质的步骤如下:,试剂准备和组织预处理:取148 mg小鼠肝脏组织,用手术剪刀剪碎,移入4 mL离心管中,加入1 mL的膜蛋白提取剂A,冰浴15 min,之后将离心管中液体移入冰浴预冷玻璃匀浆器中,匀浆70次。去除未破碎的细胞:在4℃下将样品于900 g离心10 min,为了确保上清液的纯度应尽量避免接触沉淀。收集肝脏浆蛋白和细胞膜碎片:将上清液继续在4℃下1400 g离心40 min,获得细胞膜碎片。上清液(肝脏浆蛋白)应置于-70℃下保存备用。提取肝脏膜蛋白质:尽量将上一步骤中上清液吸取干净,避免肝脏浆蛋白的干扰。加入300 μL膜蛋白提取剂B,高速涡旋10 s后立即进行冰浴10 min,重复上述步骤三次。随后立即4℃下14,000 g离心15 min,吸取上清肝脏膜蛋白溶液,-70℃下保存备用。

  • 【求助】肝脏中的氯霉素检测——酶解方法

    请问各位版友,有无使用酶解检测肝脏中的氯霉素的方法?这方面的资料好像很少,在网上基本查不到,依稀记得在某个国标上见过酶解的方法,而今苦苦追寻无果,如果哪位板油有相关资料,还请不吝赐教,不胜感激。

  • 【转帖】吃一包快食面 肝脏需要32天才能解毒

    根据台湾网站《39健康网》上的一篇文章,医学临床实验台湾的快熟面虽然好吃,但却是最“毒”的。吃一包台湾快熟面,肝脏需要解毒32天。   文章提到,因为要有好汤头,台湾快熟面的味精剂量常常是美国营养饼干的20倍之多,也是日本泡面的40倍以上,人体会不胜负荷,常吃的话会患血管瘤、牙齿掉光,甚至胎死腹中。   本地医生:   多吃容易发胖 却没有那么毒   新加坡本地中西医生受询时说,快熟面没有传说中那么“毒”。   刘志华医生受访时表示,快熟面确含有大量碳水化合物,为了保存方便,面都经过油炸,因此脂肪和热量很高,摄取过多会发胖,营养也不够均衡。但他说,没有研究显示它会对人体造成危害。   他说,肝是人体的解毒器官,通常药物和酒这类食品就需要肝脏来解毒,若患上肝硬化、重型肝炎等病,体内有毒物质就会蓄积。   中医师赵戈则表示,快熟面中所含的一些化学成份,可能需要肝脏来分解,但需要多长时间并不确知。   一名食品研究员告诉本报,本地制造的快熟面都受到严格的管制,任何成份都必须清楚列明在包装上,他认为快熟面多少还是包含人体可摄取的营养。  吃快熟面如何 “解毒”?   ①如果面是用泡的,最好自备碗,不要用原有的保丽龙碗。   ②只放三分之一或一半的调味料。   ③可加蛋或蔬菜,以补充蛋白质与维生素。

  • 【极限体验】黄芩提取物-黄芩苷的测定

    【极限体验】黄芩提取物-黄芩苷的测定

    黄芩提取物-黄芩苷的测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212091347_411149_2369266_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212091349_411153_2369266_3.jpg 黄芩茎叶 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212091348_411151_2369266_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212091350_411154_2369266_3.jpg黄芩根部http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212091350_411155_2369266_3.jpg黄芩提取物-黄芩苷黄芩提取物-黄芩苷C21H18O11446.37黄芩苷药理作用:⑴抗炎抗变态反应,黄芩甙、黄芩甙对豚鼠离体气管过敏性收缩及整体动物过敏性气喘,均有缓解作用;⑵抗病毒、抗微生物(菌)作用;⑶镇静、解热、解痉作用;⑷抗癌、降压、利尿作用;⑸对血脂及血糖上升的作用;⑹利胆、保肝作用;⑺可降低乙醇所致的甘油三酸酯水平等。实验室测定方法名称:黄芩提取物-黄芩苷的测定-高效液相色谱法应用范围:本方法采用高效液相色谱法测定黄芩提取物中黄芩苷的含量。本方法适用于黄芩经加工制成的提取物。方法原理:本品加甲醇溶解、稀释,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长280nm处检测黄芩苷的吸收值,计算出其含量。试剂:1.甲醇2.磷酸仪器设备:高效液相色谱仪(配带紫外检测器)色谱条件:1.色谱柱:Xtimate C18柱2.流动相:甲醇 水 磷酸 =47 53 0.23.流速:1.0ml/min4.检测波长:280nm5.柱温:室温样品的制备:1.对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量

  • 低锌饲粮中添加载锌蒙脱石对肉鸡组织微量元素含量、肝脏酶活性及空肠锌转运蛋白基因表达的影响

    【序号】:1【作者】:秦士贞,王海波,武真邑,等.【题名】:低锌饲粮中添加载锌蒙脱石对肉鸡组织微量元素含量、肝脏酶活性及空肠锌转运蛋白基因表达的影响【期刊】:动物营养学报【年、卷、期、起止页码】:秦士贞,王海波,武真邑,等.低锌饲粮中添加载锌蒙脱石对肉鸡组织微量元素含量、肝脏酶活性及空肠锌转运蛋白基因表达的影响[J].动物营养学报,2021,33(10):5895-5907.【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=WfYi3ZLogAb5La9zgvAuJECDO105uIQIpk4xB-Zftstoe8k1kpxrs7qVmF6KiAThsZIOrAhQ3jurlhN8POk-HjTVhteBgmGuw7rV6PPmV_vCO24t-VQGfgNL9ZCbL2DVhfAm3jBM0CumICQJ5Efx6g==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

  • 肝脏 残留检测 酶解

    请问开发肝脏的残留检测方法需要酶解吗?我看有葡萄糖酸酶和磷酸酯酶,请问还有其它的酶解吗?后续可能会做动物实验

  • 知母黄柏药对改善肝脏脂肪变性的机制和生物活性成分

    [font=宋体][size=15px]目前,缺乏针对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的药物干预措施,其特征是肝脏甘油三酯的积累。中医的配方已被广泛用于治疗各种疾病,尤其是慢性内分泌疾病。知母黄柏(Zhimu-Huangbai,ZH)药对,由知母和黄柏组成,是一种调节葡萄糖和脂质代谢紊乱的传统中药,这两种草药都记录在《中国药典》。然而,高脂饮食(HFD)诱导的肝甘油三酯预防作用的确切机制仍不清楚。[/size][/font] [font=宋体][size=15px]2024年9月2日,上海中医药大学中药学院张彤/丁越团队在Phytomedicine上发表了题为“Zhimu-Huangbai herb-pair ameliorates hepatic steatosis in mice byregulating IRE1α/XBP1s pathway to inhibit SREBP-1c”的文章,发现知母黄柏药对(ZH)通过调节IRE1α/XBP1s通路降低SREBP-1c的表达改善肝脏脂肪变性,其中5种活性成分可起到相同作用,通过直接靶向IRE1α降低下游XBP1s的表达抑制脂质合成。[/size][/font] [size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、ZH降低NAFLD小鼠肝脏脂质积累[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][font=宋体][size=15px]作者首先检测了ZH对NAFLD模型的影响,发现ZH显著减轻肝脏脂肪变性,减轻体重、肝重、肝体重比、肝脏TG含量、血清TG、TC、LDL-C水平。同时,ZH改善肝脏炎症、血糖和胰岛素耐受,降低HFD诱导的血清ALT和AST水平升高[/size][/font][font=宋体][size=15px]ZH降低NAFLD小鼠肝脏脂质积累 [/size][/font][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、ZH降低NAFLD小鼠的脂质生成[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][font=宋体][size=15px]为了研究ZH如何抑制肝脏脂质积累,作者检测了基因与脂质代谢有关的表达,ZH干预明显降低了新生脂肪生成基因的表达和TG合成,而没有明显影响与脂肪酸运输或摄取相关的基因。ZH还能降低SREBP-1c和FASN的表达。SREBP-1c的成熟活性形式是由SREBP-1c转移到细胞核(N-SREBP-1)并结合特定的目标基因启动子上的反应元件。作者发现ZH主要降低了N-SREBP-1c的表达[/size][/font][font=宋体][size=15px]ZH降低NAFLD小鼠的脂质生成 [/size][/font][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]3[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、ZH的作用与内质网应激有关[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][font=宋体][size=15px]内质网应激可引发肝细胞内脂质积累。作者发现ZH干预降低了模型小鼠中BIP和CHOP基因及蛋白的表达。在内质网应力存在的情况下,INSIG1-SCAP-SREBP1复合物中的INSIG1降解,促进SCAP-SREBP1复合物进入高尔基体,其中SREBP1被裂解形成N-SREBP-1c并开始合成脂质。作者发现ZH降低ER胁迫下SREBP1与SCAP结合进而降低N-SREBP-1c[/size][/font] [font=宋体][size=15px][/size][/font][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]4[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、ZH改善TM诱导的内质网应激和脂质积累[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][font=宋体][size=15px]作者采用Tunicamycin(TM)诱导的急性内质网应激模型研究了ZH对内质网应激诱导过程中脂质代谢的影响。发现ZH能改善肝功能、脂肪变性和肝脏TG、TC含量,降低Bip和Chop基因的表达,以及新生脂质和甘油三酯合成的基因,但没有明显抑制脂肪酸运输或摄取基因,结果表明内质网应激可能是ZH治疗NAFLD的潜在机 [/size][/font][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、IRE1α/XBP1s通路是ZH的潜在靶点[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][font=宋体][size=15px]作者检测了内质网应激三个主要的信号通路蛋白(ER跨膜受体IRE1α,PERK和ATF6),发现NAFLD小鼠IRE1α、磷酸化IRE1α和磷酸化PERK蛋白表达升高,ZH降低了磷酸化IRE1α和磷酸化PERK的表达,而对ATF6的表达无影响。XBP1u(未剪接的XBP1)在内质网胁迫下被IRE1α剪接产生剪接的XBP1(XBP1s),ZH可降低XBP1s表达,提示ZH通过IRE1α/XBP1途径改善肝脏脂肪变性[/size][/font] [font=宋体][size=15px][/size][/font][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]6[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、ZH通过XBP1抑制肝脏脂质积累[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][font=宋体][size=15px]作者随后检测了ZH干预后XBP1s对无内质网应激肝脂肪变性相关病理后果的潜在影响,通过XBP1过表达发现XBP1s可在无内质网应激的情况下增加SREBP-1c的表达,而给药ZH后则相反[/size][/font] [font=宋体][size=15px][/size][/font][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]7、[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]ZH中潜在的活性化合物抑制IRE1α/XBP1s途径[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][font=宋体][size=15px]为了检测ZH中抑制IRE1α/XBP1s通路的活性物质,作者检测了ZH煎液的潜在活性化合物处理对棕榈酸(PA)诱导的BNL CL.2细胞脂质合成的影响,通过商用生化试剂盒检测各组细胞的甘油三酯水平。结果显示,与空白组相比,PA组甘油三酯水平显著升高,洛伐他汀(脂质合成抑制剂)组甘油三酯水平显著降低,ZH中潜在活性化合物不同程度降低甘油三酯浓度。[/size][/font][font=宋体][size=15px]为了鉴定HZ通过靶向IRE1α抑制脂质合成的潜在活性化合物,作者将ZH中排名前9位的化合物与IRE1α进行分子对接,所有化合物都被认为是潜在活性化合物,对接评分≤- 5kcal/mol。作者选择了5个对接评分≤-9 kcal/mol的化合物进一步分析了IRE1α-五种化合物的结合相互作用模式,并通过CETSA实验进一步证实了这五种化合物与IRE1A的互作。接着作者检测了活性化合物对IRE1α靶点Xbp1s mRNA的表达的影响,发现PA处理后,Xbp1s mRNA表达增加,而五种活性成分(新甘菊素、黄柏碱、芒果苷、麻根碱和小檗碱)处理显著降低xbp1的表达。[/size][/font][font=宋体][size=15px]图7[/size][/font][font=宋体][size=15px] ZH中潜在的活性化合物抑制IRE1α/XBP1s途径[/size][/font][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0] [/color][/font][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][font=宋体][size=15px]知母黄柏药对(ZH)通过IRE1α/XBP1s通路抑制srebp1c的转录和SREBP-1c的成熟活性,以减少从头脂肪生成,改善肝脏脂肪变性。从机制上讲,ZH靶向IRE1α并抑制XBP1s mRNA表达以缓解ER应激并抑制SREBP-1c的产生。此外,研究确定了论知母黄柏药对(ZH)中的5种活性成分,它们可以起到知母黄柏药对(ZH)相同的作用,且它们通过直接靶向IRE1α降低下游xbp1的表达抑制脂质合成。[/size][/font]

  • 肝脏一天能分解转化多少酒精,您知道吗?

    正常情况下,酒经胃肠道吸收后,在肝脏中经乙醇脱氢酶的作用转化为乙醛,而后生成乙酸,最后分解成二氧化碳和水排出体外。每个健康的成年人都具酒精分解消化能力,不过每个人的解酒能力因先天遗传体质、是否常喝酒、年龄及喝酒当时的健康与心理状况会有所不同。一般成年男子体内每天约可快速消化分解由外摄取的26毫升纯酒精(60-80g),相当于一瓶啤酒的酒精量,超过此量就会有害肝脏。当然,每个人对酒精的耐受力不一样,身体内的酒精分解酶多少也不同,因此不能用统一的标准来衡量酒精安全量。但是过量饮酒时,体内的乙醛来不及转变为乙酸,会生成大量的超氧阴离子自由基,出现醉酒或酒精中毒。要想避免酒精中毒,喝酒在晚餐时最好。因为酒精经肝脏分解时需要多种酶与维生素的参与,可以分解乙醇的乙醇脱氢酶的活性有时间节律性, 即在中午时活性降低,而在晚上特别是夜间活性增加,也就是说在中午,乙醇不容易被代谢成二氧化碳和水,此时喝酒往往比晚上容易醉,对身体造成的危害也较大。 一般情况下,酒的酒精度数越高酒量就应相应减少,一天的总量,白酒一般应控制在50毫升左右,药酒控制在100毫升左右,黄酒可以在100毫升左右,红酒控制在150~200毫升,啤酒控制在500毫升左右为宜。

  • 液质法做了30批河豚肝脏,均未检出,回收率可以做到60-70

    小弟萌新,第一次接触河豚毒素,按照5009.206中[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]法做了30批河豚肝脏,均未检出,回收率可以做到60-70,大致查了一下,肝脏属于剧毒器官,有大神做过吗?真的有那么干净的河豚吗?

  • 15种桑叶提取物

    桑叶提取物英文叫:Mulberry teaf桑叶是一种植物,它是长在树上的,它长出来的种子都可以吃呢?桑叶可以降火,一帮在农村才可以看的到,不是桑叶子在市场上都可以看到。那我们就来看看桑叶提取物是怎么一回事呢? 外观:黄绿色或浅黄棕色  成分:含牛膝甾酮、脱皮甾酮、芸香苷、异铜皮苷、伞形花内酯等。   性状:叶片多卷缩破碎,完整者卵形或宽卵形,长8-13cm,宽7-11cm,先端尖,边缘有锯齿,有时作不规则分裂,基部截形、圆形或心脏形:上面花绿色,略有光泽,沿叶脉处有细小毛茸,下面色较浅,叶脉突起,小脉交织成网状,密生细毛。质脆易碎。气味,味淡、微苦涩。以叶片完整、大而厚、色黄绿者为佳   主治功能:疏散风热、清肺润燥,清肝明目。用于风热感冒、肺热咳嗽、头痛头晕、等。主治功能:疏散风热、清肺润燥,清肝明目。用于风热感冒、肺热咳嗽、头痛头晕、目赤晕花等。一种具有医疗保健作用的桑叶提取物、其制备方法和用途。该提取物中含有桑叶黄酮、桑叶多酚、桑叶多糖、多种生理活性物质,用于防治心脑血管病、高脂血症、糖尿病、肥胖症和抗衰老。该提取物以春蚕后期或霜降前桑树枝条上的第1~3位新叶加工的桑叶粉为原料,阴干,粉碎,分别用正丁醇、90%乙醇和水加温浸提,并喷雾干燥而得。桑叶提取物 :1、人造桑叶生产工艺及设备   2、桑叶保健制品脱涩方法   3、桑叶保鲜剂   4、桑叶复合多菌种发酵功能型饮料   5、桑叶食、用品   6、桑叶提取去氧烯胺霉素衍生物及医疗应用   7、桑叶脱水贮藏还鲜的制备方法   8、桑叶洗发浸膏   9、桑叶汁浆的提取方法   10、一种含有桑叶野乌麦的降糖食品及其制备方法   11、一种含有桑叶总碱浸膏的制剂及其制备方法   12、一种桑叶茶的炒制方法   13、一种桑叶除臭脱涩加工工艺及桑凉茶的制造方法   14、一种桑叶多糖产品及其用途   15、一种桑叶洗发乳的制造方法

  • 【求助】多成分中药提取物包合物的包合率的计算方法

    某中药提取物含有多种有效部位,由于水溶性均不理想,小弟打算用HP-β-CD对该提取物进行包合。包合物制备工艺过程中需要以包合率为指标进行工艺筛选,现在问题是怎么计算包合率?由于那些成分的含测都相当的繁琐,如果几个成分都需要测量,实验工作量将会非常巨大,感觉不大可行。我想,可不可以把整个提取物看作是一个整体?具体流程是:用特定洗脱液对包合产物进行少量多次的洗脱,蒸干,称重,即为未包合的提取物B。包合率=(投料量A-未包合的提取物B)/投料量A我目前没有查到相关的文献,最类似的就是挥发油的包合!他们都把挥发油作为一个整体来计算包合率!希望大家给小弟点建议,我的这个方法可行么?如果可行,大家有什么依据?谢谢!

  • 【原创大赛】高效液相色谱法分析苯并芘大鼠肝脏线粒体的代谢产物

    【原创大赛】高效液相色谱法分析苯并芘大鼠肝脏线粒体的代谢产物

    高效液相色谱法分析苯并芘大鼠肝脏线粒体的代谢产物 本实验建立了一种用高效液相色谱法分析苯并芘及其在大鼠肝脏线粒体中的六种代谢产物的分析方法。使用乙腈、水梯度洗脱作为流动相,紫外探测器分析得到苯并芘的羟基化代谢产物以及苯并芘酮,包括3-羟基苯并芘、9-羟基苯并芘、苯并芘4,5-二氢二醇、苯并芘-7,8-二氢二醇、9,10-二羟基-9,10-二氢苯并芘、苯并芘二酮。其中苯并芘二酮含量最低。该实验结果对于推断细胞CYP1A1酶在体内体外模型中对于苯并芘增毒和解毒作用奠定了重要的基础。 前言:苯并芘是苯与芘稠合而成的一类多环芳烃,苯并芘和其他多环芳烃主要是有机物的不完全燃烧或热解生成,并且在环境中普遍存在。除了污染空气的吸入,摄入的主要途径有吸烟和饮食以及一些职业的摄入如煤、焦炭、沥青的燃烧以及煤焦油的使用。苯并芘能够导致细胞毒性、致畸致突变的毒性以及致癌的毒性。动物实验长期暴露于苯并芘中可导致动物的皮肤、胃、肺组织的癌变。苯并芘在作用于DNA之前需要代谢活化,这也是苯并芘发挥毒性很重要的代谢步骤。细胞色素P450(CYP)酶和环氧化物酶是主要的苯并芘的活化酶,首先CYP酶将苯并芘氧化为环氧化物然后在环氧化物水解酶的作用下生成二氢二醇,CYP同工酶将其进一步的活化为活性成分苯并芘-7,8 - 二氢二醇-9,10 - 环氧化物(BPDE),其可作用于DNA,其优先在鸟嘌呤残基上形成加合物,该加合物是BPDE在体内体外试验中于DNA主要的加合物。在CYP酶中,CYP1A1和B1认为是BaP代谢活化中重要的酶,但是CYP1A1在体内排毒的作用较大于其活化BaP的作用。为了解释这些发现,BaP的体内体外代谢与解毒作用应该进一步进行评价,定性和定量分析BaP在CYP同工酶和环氧化物酶下的所有代谢产物,以及这些致癌物与DNA加成物的评价也很有必要。本实验优选色谱条件使得BaP在大鼠肝脏线粒体内的代谢产物能够很好的分离以及通过紫外检测器灵敏的检测。苯并芘在生物体内的代谢步骤:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409291248_516273_2360169_3.jpg材料和方法试剂甲醇(色谱级)乙腈(色谱级),苯并芘 ,NADP+,葡萄糖-6-磷酸,二喹啉甲酸,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶微粒体的制备微粒体来自于10只SD大鼠的肝脏,预先用苏丹I处理。微粒体蛋白质浓度通过二辛可宁酸蛋白质测定法测定,牛血清蛋白作对照。CYP同工酶的含量通过示差光谱测定。孵化体系:用于研究BaP代谢的孵化体系包含有100mM磷酸钠缓冲液(pH7.4),NADPH生成体系(1毫NADP+,10mL D-葡萄糖-6 - 磷酸,1U/mL的D-葡萄糖-6-磷酸脱氢酶),0.5mg的微粒体蛋白质,50μM的BaP(溶于5μl甲醇),总体积为500微升。通过加入50μl的NADPH生成体系来启动反应的发生。孵育体系通过未加入酶体系或无NADPH生成体系或无的BaP来控制。孵化在敞开的试管中进行(37℃),20分钟后,取5μl 1mM的非那西丁乙醇溶液加入作为内标物。BaP的代谢物用乙酸乙酯(2×1毫升)萃取两次,并蒸发至干。将样品溶解在25μl的甲醇,通过HPLC分离。BaP代谢物的HPLC分析:安捷伦液相1200高效液相色谱仪配紫外可见检测器,色谱柱为diamonsil 4.6﹡150﹡5u色谱条件:所用的色谱条件如下表: 时间流动相A(乙腈)流动相B(水)流速00%100%0.6ml/min3530%70%4060%40%4580%20%50100%0%我们还对代谢产物进行了质谱

  • 32.9 HPLC测定柴芩清肝方有效部位群提取物中黄芩苷、甘草苷和芍药苷

    32.9 HPLC测定柴芩清肝方有效部位群提取物中黄芩苷、甘草苷和芍药苷

    【作者】 付克; 张坤; 闫广利; 张春玲; 陈旭;【机构】 黑龙江中医药大学中医药研究院; 黑龙江中医药大学;【摘要】 目的:建立HPLC测定柴芩清肝方有效部位群提取物中黄芩苷、甘草苷、芍药苷的含量测定方法。方法:色谱柱:Diamonsil C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为278nm(黄芩苷,甘草苷),230nm(芍药苷)。结果:黄芩苷、甘草苷、芍药苷分别在0.216~1.080μg(r=0.999 1)、0.020~0.100μg(r=0.999 5)、0.015~0.003μg(r=0.999 3)范围内线性良好,平均回收率分别为黄芩苷96.28%、RSD=0.83%(n=5);甘草苷97.2%、RSD=0.39%(n=5)和芍药苷98.1%、RSD=0.21%(n=5)。结论:该方法简便、快速、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为柴芩清肝方有效部位群提取物的质量控制方法。 更多还原【关键词】 高效液相色谱法; 黄芩苷; 甘草苷; 芍药苷; 【基金】 黑龙江省科技攻关项目资助(GC08C322)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061738_381991_2352694_3.jpg

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