复苏

一天，我准备做细胞培养实验， 中午安排个师妹去准备下复苏细胞。晚上她就告诉我复苏好了， 我就奇怪了， 血清4度化冻怎么这么快？就问她怎么操作的。原来她直接把血清从-20度丢到37度的水里化冻的， 结果复苏的细胞一瓶也没活……http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif

九九万物复苏！[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/03/202203032046282144_8060_1642069_3.png[/img]

[color=#DC143C][/color]请大家给我帮个忙，网上、书上所说的关于关于钠阳离子树脂铁中毒，用盐酸复苏，所用盐酸到底是工业盐酸还是化学分析纯盐酸，望给一答案。盐酸复苏后到底能提高多少交换能力，是否对钠阳离子树脂的硬度有损伤。

标准菌株复苏后怎么保存，是要自己用培养基配冻存液，放入冻存管 冷冻保存？

菌株保存的是第三代，-80℃保存, 再取出来活化的话属于第几代？ 答：保存的是第三代复活出来后，如果采用平板或肉汤活化相当于转接了一代，就是第四代，如果还在瓷珠里的话就还是原来的代数。如果是保存在斜面上，这一支斜面一直就是第三代，如果转接到另一支斜面就是第四代。传代原则，菌株活化复苏不论以任何形式繁殖了一次就算是传了一代。但如果仅是物理位置的转移没有繁殖就不是传代。 [b]02[/b] 菌株传代保存到瓷珠里一定要挑单菌落吗？ 答：不一定非挑单菌落，但是一定要挑相同特征的菌落，就是说从同一个菌落纯化出来的，以保证它们的特性完全一致。原则是尽量多挑，宁多勿少。 [b]03[/b] 菌株冷冻保存是-70℃还是-80℃有具体标准规定么？ 答：有标准。《SN/T 2632-2010 微生物菌株常规保藏技术规程》是关于菌株保藏的一个标准，大家可以学习一下，各个保存方式都有介绍，但是瓷珠是比较新兴的保存方式暂时里面还没有收录。GB4789.28-2013建议长期冷冻储存是在不高于-70℃条件下。 [b]04[/b] 怎样延长菌株的保存时间呢？ 答：大量的实验证明菌株在低温、干燥、缺氧、缺营养的条件下保存效果是最好的，越接近这种保存条件，菌株的保存时间越长。例如甘油冻存管，在-80℃保存时间大于在-20℃。冻干菌粉在-20℃保存时间会比2~8℃长。 [b]05[/b] 怎样纯化菌株？ 答：纯化就是从可疑菌落平板上挑取单菌落再划线到合适的非选择性平板（如TSA、NA等）上，分离出单菌落的过程。 [b]06[/b] 我们只保存第一代菌株是不是要重新传代保存呢，认证老师会不会认为这是个错误？ 答：一般情况下认证老师不会提出这种问题。最佳储存方式应该是，制备第一代菌株的甘油冻存管，置于超低温冰箱进行长期保存。第二代菌株作为工作储备菌株，进行斜面保存。使用第二代工作储备菌株进行转接后为第三代工作菌株。 [b]07[/b] 为何要将第三代作为工作菌株？ 答：菌株在多次传代后，菌株的变异概率会大大增加，因此菌株传代需控制在五代以内，而第一代菌株通常相对不稳定，需传至第三代使菌株稳定。因此实际工作中通常选择第三代菌株作为工作菌株。 [b]08[/b] 质控菌株是不是传代超过五代就必须销毁处理？ 答：不一定。传代超过五代只是存在菌种变异可能，但如果传代到第六代、第七代……经过形态、生化特性、DNA特征等验证，性状保持稳定，那么这些五代后的菌还是可以正常使用。 [b]09[/b] 菌种编号意义？ 答：以金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003为例，CMCC为中国医学菌种保藏中心缩写，其它常见菌种保藏中心还包括ATCC（美国标准菌种收藏所）、CICC（工业微生物菌种保藏中心）、FSCC（食品安全菌种保藏中心）；B的意思是细菌，对应还有F（真菌）；26003为CMCC的保藏编号。 [b]10[/b] 同样是金黄色葡萄球菌ATCC6538与ATCC25923有什么不同？ 答：ATCC6538与ATCC25923均为来自美国标准菌种收藏所（ATCC）的菌株，不同的编号表明这两株最初始的分离来源不同。但不同的编号的生化特性是否一样，需要进行具体分析。比如在实际生物学检验中发现金黄色葡萄球菌ATCC6538溶血能力较ATCC25923要强。 [b]11[/b] 使用瓷珠保藏管保存菌株，加入菌液摇匀后为什么要吸干菌液？ 答：瓷珠保存的原理为瓷珠为多孔结构，细菌吸附在瓷珠上，除去液体，则避免反复冻融时，液体冷冻过程中形成的冰晶损伤细菌，从而达到保护细菌的作用。如果不吸干菌液的话，那么瓷珠保存就达不到可以进行反复冻融的效果。 [b]12[/b] TSA斜面一般多少度保存，可以放在冷藏里吗？ 答：一般细菌的TSA斜面，2-8℃保存，即冷藏，但弧菌、绿脓杆菌、嗜水气单胞菌等对低温较敏感菌株，短期置于室温20-25℃保存，长期保存需使用甘油管或者瓷珠冻存。 [b]13[/b] 复苏冻干菌株是否可以采用液体培养基？ 答：可以，但使用液体复苏的话只能观察到培养基混浊，无法确定是否有污染。建议使用平板培养基复苏冻干菌株，有助于简单通过肉眼观察菌落形态以分辨复苏出来菌株是否存在污染，初步鉴定菌株纯度。 [b]14[/b] 复苏冻干菌株是否可以采用显色培养基？ 答：不建议采用显色培养基复苏冻干菌株。冻干菌株在冻干过程中会受到一定的损伤，复苏需要一个最适生长环境，故复苏培养基不能选用含有抑菌成分不利于菌株复苏的这类选择性培养基（显色培养基属于选择性培养基）。[b]15[/b] 产气荚膜梭菌做冻存时是否需要保持厌氧状态？ 答：不需要。产气荚膜梭菌虽属厌氧性细菌，但对厌氧程度要求并不太严格，按照一般菌株冻存方法进行冻存即可。如果是冻存严格厌氧菌，则需特殊的冻存方法。

公司买的是二代大肠埃希菌的冻干粉珠，配有一瓶水剂，没有说明书。用作微生物控制菌检查。请问大家：1.水剂是不是溶菌液？把这个水剂倒入冻干粉里溶解接种，接种至营养琼脂里就是复苏吧？培养出的是二代么还是3代？之前看有些人是要同时接种至营养肉汤和营养琼脂，有什么区别么？那个是不是适用于0代菌种。2.在32.5度培养箱，以前说培养一天，培养2-3天也可以吧。最多可以培养多久？3.培养好怎么保存呢？保存冰箱里？牛皮纸包裹还是甘油混合液？4.培养出的菌种，放冰箱可以放2-3个月么？2-3个月后就灭菌处理了？

目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。二、细胞冻存操作步骤：(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天最好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)。(2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×106～1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装1～1.5mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内；置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入4℃冰箱中2～3小时，再移至冰箱冷冻室内3～4小时(此步可省略)，再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，最好取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

[em01] 哪位同仁可以告诉我菌种从中检所买回来后的复活的详细步骤....谢谢

请教各位大神，现在购买的黑曲霉0代是液体状态的，你们复苏和复壮分别用那些培养基啊？复苏还需要用到SDB吗？

新年新气象万物复苏人更好。

春天真是一个多彩的季节！有各种颜色的花朵，各种颜色的叶子！万物复苏，生机勃勃！

细胞冻存是细胞培养的关键步骤，一般推荐的冻存液比例为：1：3：6（或1：2：7） 配冻存液1份DMSO3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基)。取生长状态良好的细胞进行冻存处理，小编实验室有一个秘密配方，就是10%DMSO和90%的纯血清，这个冻存液有一些奢侈，但是对于一些比较脆弱的细胞，或者是一些冻存条件比较差的实验室（例如没有-80冰箱）有非常良好的效果。除此之外和大家分享六大注意事项1、错误的时机：细胞状态不好（长的太过了，培养液已经很黄；细胞可疑污染；细胞已经开始凋亡或崩解；连续培养超过二个月，细胞性状已有改变改变）。解决：最佳时机：细胞增殖旺盛，情况稳定，试验效果良好，复苏后两周内。2、细胞太少：冻存时细胞浓度低于1-5×1000,000/ml。（复苏很难成功）。解决：离心后调整细胞浓度。（不要重新洗细胞）。3、盖子不紧：冻存管的盖子一定要拧紧，否则复苏水浴时会渗水，造成污染。解决：选择原配的管子和盖子（不同牌子/型号的颜色会有差别）。4、单薄的冻存盒：放在－80度的冻存盒，壁太薄，细胞在被迅速降温。解决：选择厚壁泡沫塑料盒，或塞入大量干棉花。（冻存的原则：缓降！）。5、-80度太久：放在－80度冰箱的时间超过半年。（冰箱的温度难以恒定:开门/关门，电压不稳等）解决：尽快转入液氮。6、液氮不足：液面不能漫过所有细胞。解决：定期测量液氮储备，保证细胞全部浸在液面下。

做药敏试验时用于培养细菌。用的是冷冻干燥保存的金葡菌，复苏的时候安瓶打开后细菌要全部用完吗？

细胞冻存是细胞培养的关键步骤，一般推荐的冻存液比例为：1：3：6（或1：2：7） 配冻存液1份DMSO3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基)。取生长状态良好的细胞进行冻存处理，小编实验室有一个秘密配方，就是10%DMSO和90%的纯血清，这个冻存液有一些奢侈，但是对于一些比较脆弱的细胞，或者是一些冻存条件比较差的实验室（例如没有-80冰箱）有非常良好的效果。除此之外和大家分享六大注意事项1、错误的时机：细胞状态不好（长的太过了，培养液已经很黄；细胞可疑污染；细胞已经开始凋亡或崩解；连续培养超过二个月，细胞性状已有改变改变）。解决：最佳时机：细胞增殖旺盛，情况稳定，试验效果良好，复苏后两周内。2、细胞太少：冻存时细胞浓度低于1-5×1000,000/ml。（复苏很难成功）。解决：离心后调整细胞浓度。（不要重新洗细胞）。3、盖子不紧：冻存管的盖子一定要拧紧，否则复苏水浴时会渗水，造成污染。解决：选择原配的管子和盖子（不同牌子/型号的颜色会有差别）。4、单薄的冻存盒：放在－80度的冻存盒，壁太薄，细胞在被迅速降温。解决：选择厚壁泡沫塑料盒，或塞入大量干棉花。（冻存的原则：缓降！）。5、-80度太久：放在－80度冰箱的时间超过半年。（冰箱的温度难以恒定:开门/关门，电压不稳等）解决：尽快转入液氮。6、液氮不足：液面不能漫过所有细胞。解决：定期测量液氮储备，保证细胞全部浸在液面下。

请教一下冻干菌株复苏后马上就可以用于传代吗？保存于斜面上的菌株一般传几代后不可以再用呢？

病毒（噬菌体）买回来以后，应该怎么操作啊，是跟细菌菌种一样进行复苏，传代吗？我们要买的是MS2病毒，具体操作步骤能否提供一下啊（用什么培养基，怎么操作）以前没有接触过这类测试，谢谢！

买的标准菌株（第0代），复苏后接种到庖肉培养基，我能直接用这管庖肉培养基保存在2-8度冰箱吗？还是说再接种到其他的斜面培养基进行保存？另外对下一次传代时间有没有要求，需要间隔多久？

各位大虾：我单位一直用斜面保存十几种菌种，均很成功。但在用加有琼脂的BHI斜面保存乙型溶血性链球菌时，发现其菌苔面逐渐变得很薄，在一个月后用BHI来接种复苏时，发现其已死亡。请问死亡原因是什么？可有好的保藏方法介绍？谢谢。

【序号】：1【作者】：梁辉 王保国【题名】：清洗式回收血液的成分特点【期刊】：国外医学：输血及血液学分册【年、卷、期、起止页码】：2004, 27(6)【全文链接】：http://d.wanfangdata.com.cn/periodical_gwyx-sxjxyxfc200406014.aspx【序号】：2【作者】：白洁 【题名】：术中自体血回输研究进展【期刊】：国际麻醉与复苏杂志【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：http://d.wanfangdata.com.cn/periodical_gwyx-mzxyfsfc201204011.aspx【序号】：3【作者】：王越 【题名】：刍议自体输血技术在血液保护中的应用【期刊】：中外医疗【年、卷、期、起止页码】：2012, 31(25)【全文链接】：http://d.wanfangdata.com.cn/periodical_hgzy201225040.aspx【序号】：4【作者】：王丽华【题名】：回收式自体输血的研究概况及进展【期刊】：国外医学：麻醉与复苏分册【年、卷、期、起止页码】：2004年 第5期 308-311页【全文链接】：http://www.cqvip.com/QK/92472X/200405/10761825.html

在传统意象中，秋季是一个“收”的季节。其一是指“丰收”，金秋时节，作物成熟，硕果累累，是收获的时节；其二是指“收敛”，秋风萧瑟肃杀，草木逐渐凋敝，虫兽开始蛰伏，众人避寒添衣，是收敛潜藏的时节，准备度过寒冬，静待来年春暖大地，万物复苏。秋季养生，最重要的是顺秋之性，收敛躲避。

2024年7月1日消息，随着葡萄酒进口从2018年的高峰下降40%，香港葡萄酒市场已经能够发现，自己可以从经济衰退中复苏了吗？[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/07/202407041311286154_7315_1642069_3.png[/img]

近日，各大上市仪器公司陆续公布了2014年上半年(2014 HY)的业绩。纵观各跨国仪器公司业绩，2014年上半年各大公司业绩较去年同期有所回升，美国市场的强劲复苏，及制药市场的强劲表现是2014年上半年的突出亮点;但同时一直是跨国仪器公司增长强劲驱动力的中国市场则表现糟糕。详细链接：http://www.instrument.com.cn/news/20140904/140614.shtml

随着光阴的逝去，2009年最后一天的日历已被掀翻过去。回顾这一年的中国奶业，它是在“危机、风险、震惊、激荡、困惑、迷茫、耻辱、救赎、艰辛、振奋和收获”中度过，这是中国奶业2008年“911”大地震灾难后走上的第一个复苏回暖年。业内众多的奶牛养殖者和乳品企业都说，“今年是最困难的一年，最难挨的一年。”所幸的是，在跌跌撞撞中，它还是从三聚氰胺的阴霾中和发展的最低谷中有惊无险地走了出来。 这一年，中国奶业发生过许多事情，有风险危机事件，有杀牛卖牛倒奶，有奶粉积压如山销不出去，有对赌失败者，有倒闭停业者，有市场扩张者，有新资涌入者；有失败，有战绩，有收获，有尴尬，也有精彩，可圈可点的丑闻与亮点同在与无数。我们不妨花费一些篇章将2009年中国奶业复苏中的一些“要事”进行一番盘点，以飨读者。 一、中国奶业灾后浴火重生，复市整体好于预期 2008年的“三聚氰胺”事件，对中国奶业的打击几乎是毁灭性的，消费者对奶业已发生了信用危机，市场销售一落千丈。再加之由美国“次贷危机”所引发的全球性金融危机，其风暴海啸泱及全球经济。这“双难”的重压，给中国奶业灾后复苏带来极大的不利，2009年的市场占2/3的时间都处于低微、消沉状态下运行，奶农人心惶惶，消费者信心难振，乳企经营陷入困境。中国奶业就是在如此这样的国际经济背景和市场环境下，艰辛地走向劫后余生的复兴之路的。一年来的复兴之路可谓是路漫漫，波涛涌起，风云变幻莫测，超过30万吨的奶粉大半年长时间积压，惊动了中央领导人，奶农非正常杀牛超过了200万头，大有摇动中国奶业根基之态势。好在中国奶业经过数十年的磨砺，已造就了很顽强的生命力，加之全国广大奶业同仁的共同努力和不服输的决心，终归化险为夷，扭转了乾坤。当然，中国奶业灾后能获浴火重生，除了整个业界的努力外，这与国家的政策支持和救市措施、手段的灵活运用有很大的关联性。据业内人士观察分析，到目前为止，整个奶业发展和市场状况已恢复到了90%以上，其中巴氏鲜奶市场早已完全恢复甚至赢得了15%以上的市场增长，预计2009年全年的奶类总产量将会达到3650万吨。整个行业的复苏状况，超出了许多人的预料和好于预期。

大家好，我想请教一下关于菌种悬液的制作，我们做饮用水的大肠杆菌加标试验，买的是大肠杆菌的冻干粉，经过复苏后接种在营养琼脂斜面上，等到用的时候怎么制备菌种悬浮液啊，挑取一定量的菌种，是不是要用营养肉汤培养一定时间，然后再稀释啊，那培养多长时间啊，还有就是说是要大肠杆菌的个数在200-2000/100ml,我怎么确定啊？谢谢

我们多少人曾经假装生活在别处，我们闭上眼睛以为不会看见，但在这些图片面前，我们能清楚地听见自己撕裂的心灵与灵魂的对话，曾经麻木的心在疼痛中慢慢复苏。　　这是一组在N年前就有图片，每一张都能给人深深的震撼。不幸的是它的数量一直在不断增加，在这里我只是将那些非常经典的和近来刚看到的发出来，希望能引起大家广泛的关注和更多的深思。

5月26日，由上期所主办的第十八届上海衍生品市场论坛正式开幕，本次论坛在上海期货大厦以“线上+线下”形式举行。在5月26日上午的主题峰会上， 国家金融与发展实验室理事长、中国社会科学院学部委员李扬出席并以“宏观经济形势分析”为主题发表演讲。　　李扬表示，在疫情得到控制、强有力的公共投资、央行持续的流动性支持三个前提支持下，国际货币基金组织预测，2021年全球经济增长将达到6%，较为乐观，但到了2022年仅为4.4%。　　他指出，2021年1月17日是一个关键的历史节点，发达国家疫情得到控制，疫苗得到推广和应用，以美国为首的发达经济体情况出现好转。但对于广大新兴经济体来说却面临新的冲击，除了卫生系统承载等，从经济层面来看，发展中国家对全球供应链波动、需求下降、旅游业停滞的承受力也较弱。虽然在全球经济复苏初期，发展中国家表现突出，但在缓慢复苏进程中，发展中国家也显示出很大的脆弱性。疫情可能拉大发达经济体与发展中国家的距离。

春暖花开，又到了该停暖的日子，好那个啥啥哟！看着满眼的春花，带走了酸酸的惆怅！春天，万物复苏，是个灿烂的、富有生命的季节！我们应该吃点啥呢？来庆祝春的到来春季食物以选则一般性调补食品为宜，如鸡肉、鸡蛋、瘦猪肉、红枣等。不仅可改善慵懒的体质，还可充沛体力。然而，对于身体明显虚弱的人，则需要选择适当的滋补中药来调养，如西洋参、龙眼肉、党参、黄耆等。您有什么好主意呢？