复方氨基酸片

复方氨基酸注射液 含量测定 是用液相色谱吗？哪位大侠知道怎么弄的，指导我呀。谢啦！ 我13914681818 wcj.yc@163.com

复方氨基酸注射液采用丁基胶塞密封，胶塞中的硫磺可能会浸出到注射液中，需要对药液中的硫磺含量进行测定。但是，方法学建立过程中，进行药液的加标回收率测定，发现其不合格，并且随氨基酸浓度升高，硫磺回收率降低。求助可能的原因，有哪位大神做过相关的实验吗？请不吝赐教，大谢

跪求！ 复方氨基酸注射液（9AA）中的L-半胱氨酸盐酸盐的含量测定方法！ 请高手赐教！ 我用过了ACCQ-TAG法测了不行，有没有好点的方法

我用的是waters1525-2707-2489色谱仪，现在做复方氨基酸注射液时发现精氨酸和苏氨酸分不开，请高手指点我用的柱温为40度，PH为4.95。

单位进了一台全自动氨基酸分析仪,刚安装好,练练手,同事拿了一瓶复合氨基酸(瓶上标注made in USA, 据说市面上很畅销),我们测了氨基酸含量,竞然主要成分是谷氨酸,占氨基酸总量的85%,我戏说以后烧菜不用放味精,放一片复合氨基酸就行,可这玩艺要几百元一瓶,一瓶(谷氨酸)要顶一大箱味精!

用沃特世e2695做游离氨基酸，用沃特世氨基酸衍生包进行衍生，样品结果偏大，什么原因

大家好，我一直用安捷伦1120LC做17种氨基酸的含量测定，但是在检测过程发现因检测氨基酸的量很低，买的安捷伦的标准有时会偏低，使测定结果波动很大，想请问各位，买哪里的氨基酸标准比较稳定准确？再者，在检测氨基酸怎样才能提高准确度？

谁是做小麦氨基酸方面的　能不能提供几篇关于小麦氨基酸方面的英文文章～谢谢了～[em61] [em61] 谢谢大家

最近忙氨基酸分析，用柱前衍生。发现样品有一个峰很高，尤其是水解之后更高。它不是17中氨基酸标准品中的一个，不知道是什么。。。。。。。。这样的话我怎么得知它是什么氨基酸呢？我算总量的时候可不可以用峰面积估算出这个峰代表的氨基酸的含量? 可不可以用质谱做？但是样品比较复杂。。。。。。。。。。。。。要怎么办呢？大侠们出手试试

复方对乙酰氨基酚片含测中咖啡因的含量，滴定时，老是偏高，怎么回事哦

首先，我要开门见山的承认，我是某氨基酸分析仪代理公司的员工。此帖若与各位大虾的见解不同，还请指正。对论坛中有关氨基酸分析的帖子粗略浏览了一边，发现两个特点：一是到论坛中来发帖子的主要还是使用HPLC来做氨基酸分析，二是提到的专用氨基酸分析仪似乎只有“日立”。氨基酸分析无疑具有极高的价值（极端一些的说，大部分蛋白分析都是应该被氨基酸分析所取代的），同时也有相当的难度。正因为如此，国内的氨基酸分析发展才表现出一方面发展势头很好，另一方面真正把氨基酸分析工作做好的又不多。较HPLC而言，专用的氨基酸分析仪方法简单、单样成本低、干扰少、稳定性好，尽管仪器本身比HPLC要贵得多，也势必成为今后氨基酸分析的主力。有一篇帖子提到，“日立的氨基酸分析仪是世界上最好的”，真不知他/她是如何得来这个结论。没有调查就没有发言权，没有比较，如何能得出结论？做氨基酸分析的人基本都是知道日立的，因为日立做氨基酸分析仪已有几十年；然而，除了日立，他们还知道哪些氨基酸分析仪厂家呢？诸多原因导致欧美的氨基酸分析仪迟迟未能进入中国市场，而凭借日元贷款项目和援助项目的独有优势，日立在中国用户心目中已经悄然建立起“氨基酸分析仪＝日立”的心里暗示。但日立的氨基酸分析仪真的这么好吗？在北京一家同时拥有四种氨基酸分析仪（现在为3种）的单位，他们对日立L－8800的看法是“一般”，“分离效果和长期稳定性不如××仪器”……我不能说以偏概全，但对比总是难能可贵。我并非要写些东西来宣传我们的产品，因为好的东西总是需要经历一段必不可少的市场认可周期，但对于从事氨基酸分析工作的广大用户，他们需要中国的氨基酸分析仪市场是一个充满竞争的市场，而不是一家独“show”的市场，只有充分的竞争才能为他们带来技术更高、性价比更优的仪器。

我们每次测，氨基酸的结果对比别人的结果都偏高，跪问大家是什么原因[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif[/img]

氨基酸分析技术的特点与内涵文章来源：国家产品质量安全与法信息中心网 添加时间：2009-7-19 3:13:19 点击：1510摘要：在传统蛋白质分析技术基础上，结合现代分析仪器技术发展优势，针对氨基酸分析技术难点及存在问题，概括比较分析评价当前氨基酸分析技术特点。关键词：蛋白质 氨基酸 分析技术 研究进展1 前言迄今为止，自然界中已发现180多种氨基酸，其中参与蛋白质合成的氨基酸只有20多种，称为基本氨基酸。氨基酸主要有两种存在形式，一种是以游离态存在于生理体液(血浆、尿)、食品(酒、饮料)中；另一种是以结合态存在于肽和蛋白质中。蛋白质在乳中含量为3.0%~3.5%，是乳的主要成分，对乳品的理化特性和营养价值有重要的影响。由于国标法对蛋白的检测是通过检测样品含氮量而得到的，实际上是将样品消化分解，经蒸馏碱吸收后，测定的挥发性“氨基氮”，因而部分不法商贩用添加外源动植物蛋白粉或脲等含氮化合物（虚“氮”）来增加原料乳的氮含量，钻传统检测方法表征“虚氮”的漏洞，以蒙混过关。这些掺入水解动物蛋白或者含氮化合物的乳粉因其氨基酸的组成不合理，根本不能代表动、植物蛋白，不易消化，所以营养价值低下，导致人体吸收利用率降低，严重地影响到婴幼儿的生长发育和智力水平。因此，对氨基酸分析方法的研究与改进逐渐得到各国家、全社会的高度重视。在一般情况下，质量监督检验单位在市场上抽到产品进行检验所得的数据中，蛋白质含量实际上是用总氮含量表示的，所以在加工企业常规检验时、含氮化合物、水解动物蛋白等杂蛋白是测不出来的，因此需要建立快速分析、测定乳制品中蛋白质、氨基酸的检测方法，保障乳制品的质量与安全。,1958年，Spackman等首先提出了用阳离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质中的氨基酸，实现了氨基酸分析的自动化。其后，人们不断地发展新的氨基酸分析方法，柱前衍生反相高效液相色谱法、高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法、毛细管电泳法、蛋白质芯片技术等相继应用于氨基酸分析。现已是多种氨基酸分析方法并存、互补。本文就目前应用于氨基酸分析的主要方法作一比较分析。,,2 氨基酸分析技术的光谱分析优势及特点利用光谱探针方法定量分析蛋白质的研究在国际上十分活跃，其中，对有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法和金属离子-有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法的研究倍受重视。 2.1 有机染料结合分光光度技术因为有机染料结合分光光度法测定蛋白质操作简便，比较灵敏，又不需特别的仪器，方法应用比较广泛。现在研究较多的可作为探针的染料分子中，大部分都含有带正电荷的亲水性基团如羟基、磺酸基、酚羟基及不带电荷的疏水性基团，如苯环。这类方法的基础是在溶液pH小于等电点时，蛋白质的肽键亚胺和N端氨基质子化成阳离子，若有阴离子染料存在时，由于电荷作用，蛋白质便与染料结合沉淀或改变结合染料的光吸收特性，借染料颜色的减褪或变化的程度测定蛋白质的含量。已经应用的染料有酸性橙红、考马斯亮蓝G-250、溴甲酚绿、溴甲酚紫、埃铬青R和溴酚蓝。2.2金属离子-有机染料结合分光光度技术近几年发展了利用金属离子和有机染料特别是荧光染料形成配合物体系结合光光度法来测定蛋白质含量。金属离子与含有-OH或C=O的有机染料相遇时，氧原子中的孤对电子可顺利进人杂化轨道，形成稳定的配合体系，在酸性条件下，该体系遇到结构不对称的蛋白质分子时，互相极化产生静电作用而结合成新的大分子团，改变了原体系的光谱性能，从而能定量测定蛋白质的含量。该方法具有灵敏度高、线性范围广、干扰离子少、操作简单、快速及适用于常规应用等特点。2.3 荧光光度分析技术荧光法是定量测定蛋白质的另一种常用方法通常比分光光度法更灵敏。常用的方法有内源荧光法、荧光探针法、荧光偏振、时间分辨荧光法及激光诱导时间分辨免疫分析法。2.3.1 内源荧光分析技术蛋白质中存在着Tyr、Trp、phe残基，能够吸收270~300 nm的紫外光而发出紫外荧光。当测定体系中加入小分子配体（SM）时，SM与蛋白质发生相互作用，会导致蛋白质荧光的猝灭，利用SM对蛋白质内源荧光的猝灭这一现象可以确定蛋白质与SM的作用类型及其结合部位等。2.3.2 外源荧光分析技术对于蛋白质的研究仅利用其内源荧光是不够的，需要通过外源荧光性质的研究才能获得更多关于蛋白质分子的各种信息，这就使得荧光探针对蛋白质分析有着极其重要的意义，这已成为蛋白质微量检测及溶液的构相分析中不可缺少的手段之一。在外源荧光法中，又可分为有机荧光探针法和稀土荧光探针法。作为一个好的荧光探针应满足以下条件：探针分子与蛋白质分子的某一微区必需有特异性的结合，并且结合比较牢固；探针的荧光必须对环境条件敏感；蛋白质分子与探针结合后不影响其原来的结构和特性。在满足这些条件的基础上可进行蛋白质的测定和与金属离子结合的计量化学等。与光度法类似，蛋白质在和某些具有荧光特性的染料结合后，能引起荧光强度的变化，并且在一定浓度范围内与蛋白质浓度成正比，因此可用于蛋白质的测定。利用这些化合物在不同蛋白质分子中量子产率、峰位及谱带的变化，就可探测蛋白质分子结合区的极性、疏水性的大小，从而推论构象的稳定情况及变化等。2.3.3 荧光偏振分析技术利用荧光体在转动扩散速度上的差异而导致偏振荧光的差别，建立了荧光偏振测定法。利用荧光偏振还可以研究：酶与荧光底物的结合程度；蛋白质聚合与解离；蛋白质从螺旋到无规卷曲的研究。,3 氨基酸分析技术的色谱分析优势及特点3.1 柱后衍生高效阳离子交换色谱分析技术高效阳离子交换色谱（HPCEC）-柱后茚三酮衍生光度检测分离测定氨基酸是一种经典的氨基酸分析方法。此方法是利用氨基酸在酸性条件下形成阳离子而在阳离子交换柱中分离，分离后的氨基酸用茚三酮衍生、紫外可见光检测器检测。该方法以阳离子交换树脂为固定相、酸性缓冲液流动相，在柱后流出液中加入茚三酮使氨基酸生成具有可见光吸收的衍生物进行检测，具有重现性好、仪器稳定、结果可靠、适合于大量常规样品分析等优点。另外，由于衍生化反应发生在氨基酸与其物质分离之后，因而避免了其他物质的干扰，适合复杂样品中氨基酸的分析。其缺点是仪器复杂、体积大、费用高。此外，由于脯氨酸的测定波长在440nm，而其他氨基酸的测定波长为570nm，因脯氨酸不能和其他氨基酸同时测定。氨基酸分析自动仪就是基于阳离子交换色谱分离、柱后茚三酮衍生光度检测技术设计的。商品化的自动氨基酸分析仪是在20世纪60年代初问世，目前的自动氨基酸分析仪已实现了程控自动化和数据处理电脑化，分析时间已缩短至1 h以内。氨基酸自动分析仪实际上属专门用来分析氨基酸的高效液相色谱仪，其优点是高压、快速、灵敏，试剂和样品用量少、重现性好、分析结果稳定。广泛用于食品、医学、农业以及微生物等领域。3.2 柱前衍生反相高效液相色谱分析技术近20年来，柱前衍生反相高效液相色谱法（RP-HPLC）分析氨基酸得到了迅速发展，逐渐取代柱后衍生高效阳离子交换色谱（HPCEC）在许多领域中的应用。RP-HPLC分析方法更加快速灵敏。与专业氨基酸分析的自动分析仪不同，HPLC仪适用性更广、更灵活。RP-HPLC要求将氨基酸在柱前转化为适于反相色谱分离并能被灵敏检测的衍生物，柱前衍生的关键在于衍生试剂的选择。选择衍生试剂的标准是能与各氨基酸定量反应，每种氨基酸只生成一种化合物且产物有一定的稳定性，不产生或易于排除干扰物，操作简单，色谱分离分辨率高、检测灵敏度高，分析时间短，便于实现自动化和使产物能在不同型号的高效液相色谱仪上测定。目前比较常用的柱前衍生试剂有邻苯二甲醛（OPA）、异硫氰酸苯酯（PITC）、氯甲酸芴甲酯（FMOC-Cl）及丹酰氯（Dansyl-Cl）。衍生后的氨基酸一般键合在C18柱上，利用液液分配原理进行分离。流动相多以乙酸盐或磷酸盐缓冲液为主，以乙腈、甲醇或四氢氟喃为调节剂。由于氨基酸衍生物仍保留着两性化合物的特点，除改变调节剂之外，还可通过调节缓冲液pH值、离子强度、柱温等使之达到理想的分离。当然，不同衍生物所选用的柱型、流动相以及氨基酸的洗脱时间和顺序不尽相同。柱前衍生反相高效液相色谱法可用于分析蛋白质水解液、生理体液和食品等样品中的氨基酸。当与质谱技术结合时，采用电离喷雾质谱（ESI-MS）或电离喷雾串联质谱（ESI-MS/MS）联用技术方式，借助计算机的联机检索，可以实现高通量筛选和鉴定蛋白质混合体系。目前，，蛋白质组研究的高效液相色谱-质谱联用的方式有一维色谱-质谱联用技术、多维色谱-质谱联用技术以及亲和色谱-质谱联用技术等。一维色谱-质谱技术仅能分析一些不太复杂的蛋白质体系，而对复杂的多肽混合物常不能满足分离的要求。多维色谱分离的方法在某种程度上满足了对复杂蛋白质混合分离鉴定的要求。,,,3.3 两种氨基酸直接分析技术大多数氨基酸不具备生色团，因此无法利用分光光度法直接检测，故需采用化学衍生技术，使之生成可在紫外或可见光区有吸收的化合物，或者采用荧光法检测。但对于分析工作者来讲，尤其是在新化合物研制的过程中，面对多种未知的降解物，如采

用离子色谱测氨基酸一直测得挺好，中间有事停过一天的机，没开机，于是第二天继续测时，发现标准品中少了几个峰，而且乙酸钠的峰也没了。打电话咨询工程师，工程师说我的氢氧化钠浓度有问题，偏高，经过调试之前少了的那几个氨基酸又出来了，但是峰很小；另外，乙酸钠的峰也出来了，可是，又出现了问题，我同一个样品重复进样后乙酸钠的峰又没了。咨询工程师后，说色谱柱可能有问题，于是我又换了一个色谱柱，但是还是出现同样的问题，请高手帮个忙。

1.1概述1.1.1氨基酸基本的理化性质 一、基本物理学性质 包括基本组成和结构、溶解性、酸碱性质、立体化学、熔点、沸点、光学行为、旋光性、疏水性等。 (一）溶解性质根据氨基酸侧链与水相互作用的程度可将氨基酸分作几类。含有脂肪族和芳香族侧链的氨基酸，如Ala、Ile、Leu、Met、Pro、Val及Phe、Tyr，由于侧链的疏水性，这些氨基酸在水中的溶解度均较小；侧链带有电荷或极性集团的氨基酸，如Arg、Asp、Glu、His、Lys和Ser、Thr、Asn在水中均有比较大的溶解度；但根据电荷及极性分析也有一些例外，如脯氨酸属于带疏水基团的氨基酸，但在水中却有异常高的溶解度。 （二）氨基酸的疏水性 氨基酸的疏水性，是影响氨基酸溶解行为的重要因素，也是影响蛋白质和肽的物理化学性质（如结构、溶解度、结合脂肪的能力等）的重要因素。 按照物理化学的原理，疏水性可被定义为：在相同的条件下，一种溶于水中的溶质的自由能与溶于有机溶剂的相同溶质的自由能相比所超过的数值。估计氨基酸侧链的相对疏水性的最直接、最简单的方法就是实验测定氨基酸溶于水和溶于一种有机溶剂的自由能变化。 一般用水和乙醇之间自由能变化表示氨基酸侧链的疏水性，将此变化值标作△G′。 不同氨基酸的△G′值如下表所示。当氨基酸的△G′值为正时，其侧链具有疏水性，倾向于处在蛋白分子的内部； △G′为负时，其侧链是亲水的，倾向于处在蛋白分子的表面。需要注意的是，赖氨酸通常是蛋白质分子中亲水性的氨基酸残基，但它的△G′是正值，这是由于它的侧链含有优先选择有机环境的4个-CH2-基。 （三）氨基酸的光学性质 氨基酸中的苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸分子中由于有共轭体系，因此可以吸收近紫外光。它们的最大吸收波长（λmax)分别为260nm、275nm、278nm；在吸收最大波长光线的时候还会发出荧光。

首先，我要开门见山的承认，我是某氨基酸分析仪代理公司的员工。此帖若与各位大虾的见解不同，还请指正。 对论坛中有关氨基酸分析的帖子粗略浏览了一遍，发现两个特点：一是到论坛中来发帖子的主要还是使用HPLC来做氨基酸分析，二是提到的专用氨基酸分析仪似乎只有“日立”。 氨基酸分析无疑具有极高的价值（极端一些的说，大部分蛋白分析都是应该被氨基酸分析所取代的），同时也有相当的难度。正因为如此，国内的氨基酸分析发展才表现出一方面发展势头很好，另一方面真正把氨基酸分析工作做好的又不多。较HPLC而言，专用的氨基酸分析仪方法简单、单样成本低、干扰少、稳定性好，尽管仪器本身比HPLC要贵得多，也势必成为今后氨基酸分析的主力。 有一篇帖子提到，“日立的氨基酸分析仪是世界上最好的”，真不知他/她是如何得来这个结论。没有调查就没有发言权，没有比较，如何能得出结论？做氨基酸分析的人基本都是知道日立的，因为日立做氨基酸分析仪已有几十年；然而，除了日立，他们还知道哪些氨基酸分析仪厂家呢？诸多原因导致欧美的氨基酸分析仪迟迟未能进入中国市场，而凭借日元贷款项目和援助项目的独有优势，日立在中国用户心目中已经悄然建立起“氨基酸分析仪＝日立”的心里暗示。但日立的氨基酸分析仪真的这么好吗？在北京一家同时拥有四种氨基酸分析仪（现在为3种）的单位，他们对日立L－8800的看法是“一般”，“分离效果和长期稳定性不如××仪器”……我不能说以偏概全，但对比总是难能可贵。 我并非要写些东西来宣传我们的产品，因为好的东西总是需要经历一段必不可少的市场认可周期，但对于从事氨基酸分析工作的广大用户，他们需要中国的氨基酸分析仪市场是一个充满竞争的市场，而不是一家独“show”的市场，只有充分的竞争才能为他们带来技术更高、性价比更优的仪器。

那位老师愿意为我解答：我什么我做氨基酸含量总是偏低，请教：用此方法作氨基酸应注意的事项？ 可能使结果偏低的原因？

我们想用高效液相色谱仪分析饲料中的氨基酸（呵呵，我们也只有一台waters的e2695型液相色谱仪，没有氨基酸分析仪），请问大家都用什么方法啊，我们买了郑州牧专的氨基酸分析包，可是作出来结果老是不准，就是结果偏低。另外之前负责氨基酸分析的女孩突然辞职了，可我只见过她前处理的大致步骤，不知道里面有啥关键点要必须掌握，所以我想问问大家你们有用氨基酸分析包的没啊，请指教一下吧，谢谢了

有没有兄弟伙用安捷伦的氨基酸试剂包测定氨基酸的？没有氨基酸分析仪，自由安捷伦1200二元泵要测定氨基酸，具了解氨基酸有专门的分析包，不知怎么样！

请问醋中的氨基酸态氮与氨基酸怎样换算?

用离子色谱测氨基酸一直测得挺好，中间有事停过一天的机，没开机，于是第二天继续测时，发现标准品中少了几个峰，而且乙酸钠的峰也没了。打电话咨询工程师，工程师说我的氢氧化钠浓度有问题，偏高，经过调试之前少了的那几个氨基酸又出来了，但是峰很小；另外，乙酸钠的峰也出来了，可是，又出现了问题，我同一个样品重复进样后乙酸钠的峰又没了。咨询工程师后，说色谱柱可能有问题，于是我又换了一个色谱柱，但是还是出现同样的问题，请高手帮个忙。

求助各位大佬，本人在做植物中硒代氨基酸的提取，但由于样品基质严重，采用固相萃取法进行氨基酸的净化，但实验发现硒代氨基酸标样经固相萃取后无法有效回收，之前用pax进行净化，用的4%氨水过样，5%甲酸洗脱，回收率偏低，用甲酸溶液洗涤后硒代氨基酸回收率提高到90%左右，但过样还是不行，又加了一个pcx柱进行联用，先用5%甲酸过样，4%氨水洗脱，再过pax发现回收率降低到了50%，pcx同样也用甲酸洗涤后回收率会提高，但回收率就是在50%左右，实验发现问题出在pcx上，5%的甲酸可以让目标物完全挂在柱子上，并且pax的流程验证过没有问题，所以问题出在pcx上，现在的问题是，无论我减少目标物浓度，还是加大洗脱体积或者氨水浓度都没有改善，求个位大佬给点建议，非常感谢

问题如题，天然氨基酸和人工氨基酸结构不同，近红外能够鉴别出来么，还是需要中红外技术？有没有相关的资料可以查询？坐等大家帮忙

请教各位老师一个问题。我们有一个混合氨基酸，想用氨基酸分析仪检测。但有的检测实验室讲，高纯度的氨基酸用氨基酸分析仪检测误差会比较大，这种说法有道理吗？谢谢！

液相测氨基酸的时候能够测出来氨基酸的单标，但是混合后总有两三个氨基酸峰出不来。单标脯氨酸检测不到，侧混合标样的时候并没有看到有未分开的重叠峰啊。

近几年来由于饲料工业迅猛发展，对饲料产品的品质控制已经从常规的营养分析转到了微量分析，对饲料品质的评价已经从粗蛋白含量的高低，改为观测各种氨基酸含量是否符合要求，所以准确测定氨基酸含量就成了关键一环。本实验验证不同品牌的氨基酸分析仪在不同的实验室测定氨基酸含量是否有差别。

氨基酸分析仪分析的柱子为阳离子交换柱，要求分析之前要去除核酸，为什么呢？核酸对柱子有什么影响吗？还是说核酸的存在会影响氨基酸的测定？

有一系列的氨基酸需要得到纯度数据，紫外检测响应很低很低，尝试用ELSD得到的纯度结果又偏高很多，不知道可不可以用LCMS来测氨基酸的纯度？