分离能力

各位老师好，本人刚接触生物医药检测行业，想了解一下C18和C30的柱子分离能力怎样，也就是C18和C30能分离分子量相差多大的物质？谢谢指教~

请问色相色谱柱内径和膜厚对样品分离能力的影响？为什么香精香料分析常用0.25mm ID*0.25um的柱子？

[color=#444444]既然MRM模式能选择特定的离子对来代表某种化合物，那么色谱分离能力影响应该不大吧。[/color][color=#444444]有没有必要选择分离能力强的色谱柱？[/color][color=#444444]如果色谱柱的分离能力更强，对物质分析有哪些好处？[/color]

我做偶氮试验，第一个梯度是10%甲醇、5%乙腈、85%磷酸盐，最后一个梯度是75%甲醇、25%磷酸盐。我发现做第一个标准时没问题，做后面的就不行了。后来我在做后面的每一个标准之前都用第一个梯度冲柱子半个小时，做后面的就好了，请问是柱子分离能力不好还是因为有磷酸盐啊？

我最近实验发现甲醇乙腈混合的话（不含水），不论什么比例貌似都比纯乙腈洗脱能力强。即洗脱能力：纯甲醇纯乙腈甲醇乙腈混合溶剂 不知大伙对乙醇丙酮的洗脱力有没有研究 还有通常情况下乙腈分离度比甲醇要好（甲醇分不开的情况乙腈可以分开若对此有不同观点我也不反对毕竟甲醇也有其特殊性），我想知道有没有比甲醇乙腈让样品间得到更好分离度的流动相啊？

【序号】：3【作者】：周年1,2,3刘波1,4徐彭【题名】：大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和分化能力鉴定【期刊】：江西中医药. 【年、卷、期、起止页码】：2018,49(05)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7i0-kJR0HYBJ80QN9L51zrP3ylMAV4CgQ9wpp7ZMmE5O8NBqbZq4aly75LaltU8u1l&uniplatform=NZKPT

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液相色谱中死时间几种测定方法1：有响应的溶剂出峰时间为死时间。2：进样后的阀切换峰，对应的时间为死时间。3：工作站中输入色谱柱的空余体积或孔隙率，自动计算。（对于C18柱，也可以用硝酸钠或硫脲等在色谱柱上完全不保留组分的出峰时间来测定死时间。）影响分离度的因素有三个因素控制两个色谱峰之间的分离度——容量因子，选择性，柱效容量因子反映样品分子和固定相及流动相之间的作用力，选择性是说明色谱系统区分两个或多个色谱峰的能力，柱效与色谱峰的宽度有关，很明显要达到一定的分离度，宽色谱峰要比窄色谱峰需要更大的分离度选择性。理论塔板数越高柱效越高，柱效的高低受柱内效应和柱外效应的影响。选择性是固定相区分两个被分离样品组分的能力，用容量因子之比进行计算，它是两个被分离色谱峰顶点距离的量度，如果选择性是Ⅰ，则两个组分完全不能分离。选择性数值越高，分离越好。由于选择性取决于被分离物的物理和化学结构，流动相和固定相，流动相组成，PH，色谱柱温度，流动相添加剂，因此，尽量优化实验条件提高选择性以降低成本。容量因子为物质的特性，当分析条件一定时，容量因子为固定值。溶剂的洗脱强度与其极性有关：反相色谱：溶剂的极性越强，洗脱强度越弱。正相色谱：溶剂的极性越强，洗脱能力越强。（注意：不可以使用纯水作为正想色谱的流动相）一般样品分析要求：容量因子大于2小于5

离心分离机是利用离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械，又称离心机。 离心分离机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开；或将乳浊液中两种密度不同，又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油)；它也可用于排除湿固体中的液体，例如用洗衣机甩干湿衣服；特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物，例如浓缩、分离气态六氟化铀；利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点，有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。离心分离机大量应用于化工、石油、食品、制药、选矿、煤炭、水处理和船舶等部门。工业用离心分离机按结构和分离要求，可分为过滤离心机、沉降离心机和分离机三类。分离机仅适用于分离低浓度悬浮液和乳浊液，包括碟式分离机、管式分离机和室式分离机。 离心分离机有一个绕本身轴线高速旋转的圆筒，称为转鼓，通常由电动机驱动。悬浮液(或乳浊液)加入转鼓后，被迅速带动与转鼓同速旋转，在离心力作用下各组分分离，并分别排出。通常，转鼓转速越高，分离效果也越好。 离心分离机的作用原理有离心过滤和离心沉降两种。离心过滤是使悬浮液在离心力场下产生的离心压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现液-固分离；离心沉降是利用悬浮液(或乳浊液)密度不同的各组分在离心力场中迅速沉降分层的原理，实现液-固(或液-液)分离。 还有一类实验分析用的分离机，可进行液体澄清和固体颗粒富集，或液-液分离，分离粒度达0.1～0.5微米。比如常用的试管分离机，其转速为3000～20000转/分，装等量料液的玻璃试管对称插入摆架或角形转子的凹穴中，在离心力作用下料液在试管内沉降分层。超高速分析用分离机采用小直径沉降转鼓。这类分离机有常压、真空、冷冻条件下操作的不同结构型式。 衡量离心分离机分离性能的重要指标是分离因数。它表示被分离物料在转鼓内所受的离心力与其重力的比值，分离因数越大，通常分离也越迅速，分离效果越好。工业用离心分离机的分离印数一般为100～20000，超速管式分离机的分离印数可高达62000，分析用超速分离机的分离印数最高达610000。决定离心分离机处理能力的另一因素是转鼓的工作面积，工作面积大处理能力也大。过滤离心机和沉降离心机，主要依靠加大转鼓直径来扩大转鼓圆周上的工作面；分离机除转鼓圆周壁外，还有附加工作面，如碟式分离机的碟片和室式分离机的内筒，显著增大了沉降工作面。 此外，悬浮液中固体颗粒越细则分离越困难，滤液或分离液中带走的细颗粒会增加，在这种情况下，离心分离机需要有较高的分离因数才能有效地分离；悬浮液中液体粘度大时，分离速度减慢；悬浮液或乳浊液各组分的密度差大，对离心沉降有利，而悬浮液离心过滤则不要求各组分有密度差。 选择离心分离机须根据悬浮液(或乳浊液)中固体颗粒的大小和浓度、固体与液体(或两种液体)的密度差、液体粘度、滤渣(或沉渣)的特性，以及分离的要求等进行综合分析，满足对滤渣(沉渣)含湿量和滤液(分离液)澄清度的要求，初步选择采用哪一类离心分离机。然后按处理量和对操作的自动化要求，确定离心机的类型和规格，最后经实际试验验证。 通常，对于含有粒度大于0.01毫米颗粒的悬浮液，可选用过滤离心机；对于悬浮液中颗粒细小或可压缩变形的，则宜选用沉降离心机；对于悬浮液含固体量低、颗粒微小和对液体澄清度要求高时，应选用分离机。 离心分离机未来的发展趋势将是强化分离性能、发展大型的离心分离机、改进卸渣机构、增加专用和组合转鼓离心机、加强分离理论研究和研究离心分离过程最佳化控制技术等。 强化分离性能包括提高转鼓转速；在离心分离过程中增加新的推动力；加快推渣速度；增大转鼓长度使离心沉降分离的时间延长等。发展大型的离心分离机，主要是加大转鼓直径和采用双面转鼓提高处理能力使处理单位体积物料的设备投资、能耗和维修费降低。理论研究方面，主要研究转鼓内流体流动状况和滤渣形成机理，研究最小分离度和处理能力的计算方法。一、离心力及其作用　　当悬浮液绕轴旋转时，悬浮中的微粒就同时受到背向转轴方向的离心力和正向转轴方向的介质浮力的双向作用，微粒的运动轨迹取决于所受合力的方向。根据物理学原理推导可知：F合=F离-F介=Vr×4p2N2r/3600-Vs×4p2N2r/3600= V4p2N2r/3600×（r-s），式中V表示微粒的体积，N表示每分钟的转数，r表示微粒至转轴的距离，r与s分别表示微粒与其介质的密度。显然，当r=s时，F合=0，微粒受力平衡，故将维持距转轴恒定的距离转动，也就不可能被分离开；当rs时，F合，微粒主要受向心力作用，故而将向转轴方向移动，直至浮到介质表面；而当当rs时，F合0，微粒主要受离心力作用而向远离转轴方向移动，直至沉淀到容器底部。因此，rs是微粒从悬浮液中进行离心分离的基本条件。使用普通离心机的根本目的就在于使这样的微粒从悬浮液中分离出来。从理论上讲，凡是能通过离心分离的微粒在悬浮液静置时，受重力与浮力的共同作用也能自动沉降而得以分离，只是分离所需时间较长，效果较差，沉降本领较弱。一般常用相对离心力（RCF）的大小来表示离心分离的本领强弱。相对离心力是指微粒在离心分离时所受的合力（F合）与在静置分离时所受合力（F’合）的比值，而F’合= Vr×g- Vs×g= Vg×（r-s），式中g为重力加速度，故RCF= F合/F’合=4p2N2r/3600g，由于4p2N2r/3600就是微粒处的角加速度，所以相对离心力又是微粒在离心时的角加速度与在静置时的重力加速度之比。很明显，只要调节N或/和r就可影响RCF的值，从而改变其离心分离本领。实验中RCF的值常用多少倍于重力加速度表示，如1000×g。二、离心力与作用时间的积累效应微粒在悬浮液中被分离的速度快慢除与转动的转数大小有关外，还与离心时间长短有关，即离心力作用于微粒上具有时间积累效应。衡量时间积累效应高低的物理量常用冲量矩的大小来表示，冲量矩（Lt）的值等于离心力的力矩（L）与离心时间(t)的乘积，依物理学原理可推导出：Lt=（2pRn/60）2×t，即冲量矩的大小与转速（N）的平方和时间的乘积成正比。由此可见，在同一离心转头的条件下（N，r一定），转动时间越长，冲量矩越大，分离效果越好。对同一悬浮液，因转动的时间不同而有不同的冲量矩，若调节影响冲量矩的两个可变因子即转速(N)和时间（t），可以在较低转、速较长时间得到较高转速、较短时间同样的冲量矩，从而得到相同的分离效果。但是，若转速相差太大，则会受扩散作用影响而使较低转速离心的分离效果下降三、普通离心机的组成普通离心机分水平式和斜角式两种，其构造简单、功能单一，只适用于一般物质的离心分离。实验室常用的水平式离心机主要由驱动电机、变速箱与调速手柄、旋转盘(包括转轴及其支架)、离心筒、带盖的离心腔以及机座等部分组成。[em0815] 中国心

反相色谱中， 流动相极性↑，洗脱能力↓，k↑，组分tR↑，分离度R↑？ 对吗？

吸附分离技术一、吸附分离技术概论1．吸附：是指物质从气体或液体浓缩到固体表面从而达到分离的过程。 2.吸附的机理3.吸附的分类物理吸附l 分子间力(范德华力)引起l 没有选择性l 吸附速度快、解吸容易 化学吸附l 化学反应，形成牢固的化学键l 有选择性l 吸附慢、不易解吸 4.吸附分离技术的特点n 操作简便、设备简单、价廉、安全；n 常用于从大体积料液（稀溶液）中提取含量较少的目的物；n 不用或少用有机溶剂，吸附和洗脱过程中pH变化小，较少引起生物活性物质的变性失活； n 选择性较差，收率低（人工合成的大孔网状聚合物吸附剂性能有很大改进）。5.吸附分离技术的应用方式n 如果需要的组分较易（或较牢固地）被吸附，可在吸附后除去不吸附或较不易吸附的杂质，然后再将样品洗脱； 二、吸附剂1．传统吸附剂（1）活性炭n 活化：使用前应加热烘干，以除去大部分气体。对于一般的活性炭可在160℃加热干燥4～5小时；锦纶活性炭受热易变形，可于100℃干燥4～5小时。（2）硅胶n 适用对象： 可用于萜类、固醇类、生物碱、酸性化合物、磷脂类、脂肪类、氨基酸类等的吸附分离。n 活化： 硅胶一般于105～110℃加热干燥1～2小时后使用。活化后的硅胶应马上使用，如当时不用，则要贮存在干燥器或密闭的瓶中，但时间不宜过长。（3）氧化铝n 适用对象：特别适用于亲脂性成分的分离，广泛应用在醇、酚、生物碱、染料、苷类、氨基酸、蛋白质以及维生素、抗生素等物质的分离。 n 种类：n 活化：在使用前150℃下加热干燥2小时，除去水分以使其活化。 2.大孔吸附树脂 大孔吸附树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸附剂，是在离子交换剂和其它吸附剂应用基础上发展起来的一类新型吸附剂，是依靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作的。在实际应用中对一些与其骨架结构相近的分子具很强的吸附能力。 （1）大孔吸附树脂的特点n 选择性好，解吸容易，机械强度好，可反复使用和流体阻力小；n 其孔隙大小、骨架结构和极性，可按照需要，选择不同的原料和合成条件而改变，因此可适用于各种有机化合物；n 使用时无需考虑盐类的存在。 （2）大孔吸附树脂的类型n 非极性大孔吸附树脂 XAD-1?? XAD-5n 中等极性大孔吸附树脂 XAD-6?? XAD-7n 极性大孔吸附树脂 XAD-9～ XAD-12和XE（3）大孔吸附树脂的选择n 吸附物的极性 非极性吸附剂易吸附非极性物质（从极性溶剂如水中）；极性吸附剂易吸附极性物质（从非极性溶剂中）；中等极性的吸附剂则对上述两种情况都具有吸附能力 三、影响吸附的因素1.吸附剂的性质 （1）比表面积：与吸附容量有关（2）孔径：与吸附速度有关（3）极性大小：与吸附力的强弱有关 表面具含氧官能团如－COOH、－OH等，有助于对极性分子的吸附。 2.吸附质的性质（1）溶质从较易溶解的溶剂中被吸附时，吸附量较少。所以极性物质适宜在非极性溶剂中被吸附，非极性物质适宜在极性溶剂中被吸附。 3.操作条件的影响作业1.常用的吸附剂有哪些？使用前如何活化？2.如何选用活性炭？3.大孔吸附树脂和传统的吸附剂比有何优越性？4.选择大孔吸附树脂应考虑哪些因素？

在生物大分子纯化分析特别是蛋白质纯化分析中，色谱是非常重要而且常用的一种技术。 一、凝胶过滤　　凝胶过滤又叫分子筛色谱，其原因是凝胶具有网状结构，小分子物质能进入其内部，而大分子物质却被排除在外部。当一混合溶液通过凝胶过滤色谱柱时，溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。 二、离子交换色谱　　离子交换色谱是在以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的。离子交换剂是由基质、电荷基团和反离子构成的。离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。 三、吸附色谱　　1、 吸附柱色谱　　吸附柱色谱是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种色谱方法。 2、 薄层色谱　　薄层色谱是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种色谱方法。这种色谱方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸色谱操作进行展层。 3、 聚酰胺薄膜色谱　　聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。色谱时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。　　四、 亲和色谱 　　亲和色谱是根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力，将某种配体连接在载体上作为固定相，而对能与配体特异性结合的生物大分子进行分离的一种色谱技术。亲和色谱是分离生物大分子最为有效的色谱技术，分辨率很高。 亲和色谱的原理与众所周知的抗原一抗体、激素一受体和酶一底物等特异性反应的机理相类似，每对反应物之间都有一定的亲和力。正如在酶与底物的反应中，特异的废物（S''）才能和一定的酶（E）结合，产生复合物（E－S''）一样。在亲和色谱中是特异的配体才能和一定的生命大分子之间具有亲和力，并产生复合物。而亲和色谱与酶一底物反应不同的是，前者进行反应时，配体（类似底物）是固相存在；后者进行反应时，底物呈液相存在。实质上亲和色谱是把具有识别能力的配体L（对酶的配体可以是类似底物、抑制剂或辅基等）以共价键的方式固化到含有活化基团的基质M（如活化琼脂糖等）上，制成亲和吸附剂M－L，或者叫做固相载体。而固化后的配体仍保持束缚特异物质的能力。 因此，当把围相载体装人小色谱柱（几毫升到几十毫升床体积）后，让欲分离的样品液通过该柱。这时样品中对配体有亲和力的物质S就可借助静电引力、范德瓦尔力，以及结构互补效应等作用吸附到固相载体上，而无亲和力或非特异吸附的物质则被起始缓冲液洗涤出来，并形成了第一个色谱峰。然后，恰当地改变起始缓冲 液的PH值、或增加离子强度、或加人抑③剂等因子，即可把物质S从固相载体上解离下来，并形成了第M个色谱峰（见图6－2）。显然，通过这一操作程序就可把有效成分与杂质满意地分离开。如果样品液中存在两个以上的物质与固相载体具有亲和力（其大小有差异）时，采用选择性缓冲液进行洗脱，也可以将它们分离开。用过的固相载体经再生处理后，可以重复使用。　　上面介绍的亲和色谱法也是特异性配体亲和色谱法。另外还有通用性配体亲和色谱法。这两种亲和色谱法相比，前者的配体一般为复杂的生命大分子物质（如抗体、受体和酶的类似底物等），它具有较强的吸附选择性和较大的结合力。而后者的配体则一般为简单的小分子物质（如金属、染料，以及氨基酸等），它成本低廉、具有较高的吸附容量，通过改善吸附和脱附条件可提高色谱的分辨率。　　五、聚焦色谱　　聚焦色谱也是一种柱色谱。因此，它和另外的色谱一样，照例具有流动相，其流动相为　多缓冲剂，固定相为多缓冲交换剂。　　聚焦色谱原理可以尝试从PH梯度溶液的形成、蛋白质的行为和聚焦效应三方面来阐述。 1、PH梯度溶液的形成　　在离子交换色谱中，PH梯度溶液的形成是靠梯度混合仪实现的。例如，当使用阴离子 剂进行色谱时，制备PH由高到低呈线性变化的梯度溶液的方法是，在梯度仪的混合室（这色谱柱者）中装高PH溶液，而在另一室装低PH极限溶液，然后打开色谱柱的下端出口，让洗脱液连续不断地流过柱体。这时从柱的上部到下部溶液的PH值是由高到低变化的。而在聚焦色谱中，当洗脱液流进多缓冲交换剂时，由于交换剂带具有缓冲能力的电荷基团，故PH梯度溶液可以自动形成。 　　2．蛋白质的行为　　蛋白质所带电荷取决于它的等电点（PI）和色谱柱中的PH值。当柱中的PH低于蛋白质的PI时，蛋白质带正电荷，且不与阴离于交换剂结合。而随着洗脱剂向前移动，固定相中的PH值是随着淋洗时间延长而变化的。当蛋白质移动至环境PH高于其PI时，蛋白质由带正电行变为带负电荷，并与阴离子交换剂结合。由于洗脱剂的通过，蛋白质周围的环境PH 再次低于PI时，它又带正电荷，并从交换剂解吸下来。随着洗脱液向柱底的迁移，上述过程将反复进行，于是各种蛋白质就在各自的等电点被洗下来，从而达到了分离的目的。 　　不同蛋白质具有不同的等电点，它们在被离子交换剂结合以前，移动之距离是不同的，洗脱出来的先后次序是按等电点排列的。

新买的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]和柱子，FPD检测器，TM-1柱子。哪几种有机磷农药不易分离？想打些混标看看柱子分离能力怎么样。求教！！

看[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]理论知识的时候看到有一条是进一步增加HPLC的分离能力，请问各位这句话如何理解？非常感谢！

‘有奖问答’选择题：在气-液色谱中，试样中各组分的分离是基于：（ ）A. 载气的性质不同 B. 组分溶解度的不同C. 组分在固定相上吸附能力的不同 D. 组分在固定相上脱附能力的不同

[size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆分离蛋白有什么特性呢？[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]一、乳化性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆分离蛋白是表面活性剂，它既能降低水和油的表面张力，又能降低水和空气的表面张力。易于形成稳定的乳状液。在烤制食品、冷冻食品及汤类食品的制作中，加入大豆分离蛋白作乳化剂可使制品状态稳定。[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆分离蛋白沿着它的肽链骨架，含有很多极性基，所以具有吸水性、保水性和膨胀性，分离蛋白的吸水力比浓缩蛋白要强许多，而且几乎不受温度的影响，分离蛋白在加工时还有保持水份的能力，最高水分保持能力为14g水/g蛋白质。[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]二、吸油性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]分离蛋白加入肉制品中，能形成乳状液和凝胶基质防止脂肪向表面移动，因而起着促进脂肪吸收或脂肪结合的作用，可以减少肉制品加工过程中脂肪和汁液的损失，有助于维持外形的稳定，分离蛋白的吸油率为154%。[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]三、凝胶性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]它使分离蛋白具有较高的粘度、可塑性和弹性,既可做水的载体，也可做风味剂、糖及其它配合物的载体，这对食品加工极为有利。[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]四、发泡性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆蛋白中，分离蛋白的发泡性能最好，利用大豆蛋白质的发泡性，可以赋予食品以疏松的结构和良好的口感。[/font][/size][size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]五、结膜性[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]当肉切碎后，用分离蛋白与鸡蛋蛋白的混合物涂在其纤维表面，形成薄膜，易于干燥，可以防止气味散失，有利于再水化过程，并对再水化产品提供合理的结构。[/font][/size]

2011年10月，上海安谱公司协同美国REGIS科技公司拜访了上海诸多知名手性应用实验室，如睿智化学和药明康德等手性分析领域的领军企业，并和用户进行了深入交流。美国REGIS 科技公司成立于1956年，在化合物的手性分离上一直处于世界的领先地位，其公司的主要手性柱类型包括： 美国REGIS 科技公司成立于1956年，在化合物的手性分离上一直处于世界的领先地位，其公司的主要手性柱类型包括： 1. Pirkle类型固定相（Whelk-O 1，Whelk-O 2，Leucine，DACH-DNB，ULMO等） 2. 多糖类固定相（RegisPack，RegisCell，RegisPack CLA-1） 3. 冠醚类固定相（ChiroSil (RCA)(+) 和 (SCA)(-)，专用于氨基酸分析） 其中只需Whelk-O，RegisPack，RegisCell三款类型就可以分离95%的手性化合物。 Whelk-O固定相是REGIS非常独特的，具有不可替代性，其优点包括： ● 适用于多种化合物组分的手性分离，应用范围广泛； ● 柱子耐用性强，可耐受多种强溶剂； ● 具有转变洗脱顺序的能力； ● 出色的色谱分离效率； ● 具备从分析级到制备级各种规格手性柱。 是不是就是说手性的分离以后是特别的容易呢？？和极限的相比又如何？都介绍自己的产品好啊，以后要不购买上做个对比？？？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif安谱专家能否做个更详细的介绍呢？？

[B][center]HPLC的主要分离方法-1.液相色谱的分类 [/center][/B] 一、按分离过程的物理化学原理分类吸附色谱(Adsorption Chromatography)：用固体吸附剂作固定相，以不同极性溶剂作流动相，样品中各组分依据它们在吸附剂上吸附力的大小来进行分离的色谱方法。分配色谱（Partition Chromatography） ：用载带在固相基体上的固定液作固定相，以不同极性溶剂作流动相，样品中各组分依据它们在固定液中溶解能力大小，即在固定相和流动相间的分配系数大小来进行分离的色谱方法。离子交换色谱（Ion Exchanger Chromatography）：用离子交换剂作固定相，以具有一定pH值的缓冲溶液作流动相，样品中各离子组分依据它们与离子交换剂上荷电交换基团的交换能力大小来进行分离的色谱方法。空间排阻色谱（Size Exclusion Chromatography）：用化学惰性多孔物质作固定相，样品中各组分依据它们在流动相的分子体积大小来进行分离的色谱方法。以水溶液作流动相的排阻色谱称为凝胶过滤色谱（Gel Fitration Chromatography）；以有机溶剂作流动相的排阻色谱称为凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography）。亲合色谱（Affinity Chromatography）：用固相基体上固载化生物特异性吸附的配位体作固定相，以具有一定pH值的缓冲溶液作流动相，样品中各生物活性分子组分依据它们与固相基体上固载的配位体之间的特异亲合力大小来进行分离的色谱方法。二、按实际应用色谱类型分类正相高效液相色谱反相高效液相色谱离子对色谱离子交换色谱和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]空间排阻色谱疏水作用色谱手性色谱电色谱等 摘自“现代仪器分析网络课程” 作者：厦门大学-阮源萍

操作条件对于色谱分离有很大影响。 柱长，柱内径：一般讲，柱管增长，可改善分离能力，短则组分馏出的快些；柱内径小分离效果好，柱内径大处理量大，但柱内径过大，将导致担体不能均匀地分布在色谱柱中。分析用柱管一般内径为3-6毫米，柱长为1-4米。 柱温：是一个重要的操作变数，直接影响分离效能和分析速度。选择柱温的根据是混合物的沸点范围，固定液的配比和鉴定器的灵敏度。提高柱温可缩短分析时间；降低柱温可使色谱柱选择性增大，有利于组分的分离和色谱柱稳定性提高，柱寿命延长。一般采用等于或高于数十度于样品的平均沸点的柱温为较合适，对易挥发样用低柱温，不易挥发的样品采用高柱温。 载气流速：载气流速是决定色谱分离的重要原因之一。一般讲流速高色谱峰狭，反之则宽些，但流速过高或过低对分离都有不利的影响。流速要求要平稳，常用的流速范围每分钟在10-100亳升之间。 固定相：固定相是由固体吸附剂或涂有固定液的担体构成。（1）固体吸附剂或担体粗细：一般采用40-60目、60-80目、80-100目。当用同等长度的柱子，颗粒细的分离效率就要比粗的好些。（2）固定液含量：固定液含量对分离效率的影响很大，它与担体的重量比一般用15%-25%。比例过大有损于分离，比例过小会使色谱峰拖尾。 进样：一般讲进样快，进样量小，进样温度高其分离效果好。对进液体样，速度要快，汽化温度要高于样品中高沸点组分的沸点值，一次汽化，保证色谱峰形不致展宽、使柱效高。当进样量在一定限度时，色谱峰的半峰宽是不变的。若进样量过多就会造成色谱柱超载。一般讲柱长增加四倍，样品的许可量增加一倍。对于常规分析，液体进样量为1-20微升；气体进样量为0.1-5毫升。

用体外方法对机体各种具有免疫反应的细胞分别作鉴定、计数和功能测定，是观察机体免疫状态的一种重要手段。为此，须将各种参与免疫反应的细胞从血液或脏器中分离出来。参与免疫反应的细胞主要包括淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等。由于检测的目的和方法有同，分离细胞的需求和技术也异。有的仅需分离白细胞，有的则需分离单个核细胞（mononuclearcell），其中含淋巴细胞和单核细胞（monocyte），有的则需分离T细胞和B细胞以及其亚群。分离细胞选用的方法应力求简便可行，并能获得高纯度、高获得率、高活力的细胞。现用分离细胞群的原则，一是根据各类细胞的大小、沉降率、粘附和吞噬能力加以组分，另一则按照各类细胞的表面标志，包括细胞表面的抗原和受体加以选择性分离。 一、白细胞的分离 （一）血液中红细胞与白细胞比例约600～1000:1，两者的比重不同其沉降速度亦异，通常用两种方法加以分离。 本法是利用血细胞自然沉降率的分离法，采集血液后应及时抗凝，通常选用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原转化为凝血酶，从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白而防止血液凝固。操作原则是将含抗凝血的试管直立静置室温30～60min后，血液分成明显三层，上层为淡黄色血浆，底层为红细胞，紧贴红细胞层上面的灰白层为白细胞，轻轻吸取即得富含白细胞的细胞群，离心洗涤后加入少量蒸馏水或含氯化铵的Gey溶液，经短时间的低渗处理，使红细胞裂解，经过反复洗涤可得纯度较高的白细胞悬液。 （二）聚合物加速沉淀法 本法是利用高分子量的聚合物如明胶、右旋糖酐、聚乙烯吡喀烷酮（polyvinylpyrolidone，PVP）等使红细胞凝集成串，加速红细胞沉降，使之与白细胞分离。本法的细胞获得率比自然沉降法高。

[align=center][font=DengXian]分离度下降怎样处理？[/font][/align]1.[font=DengXian]柱温不合适。检查柱温。[/font]2.[font=DengXian]色谱柱和分离的化合物不匹配，更换色谱柱。[/font]3.[font=DengXian]改变载气流速。[/font]4.[font=DengXian]色谱柱受污染，切一段柱头，用溶剂清洗柱子。[/font]5.[font=DengXian]进样器的改变。检查进样器的设置。[/font]6.[font=DengXian]样品的浓度或溶解能力的改变。试用一个不同的浓度。[/font]7.[font=DengXian]色谱柱使用过久，柱效下降。更换色谱柱。[/font]8.[font=DengXian]色谱柱安装不正确，重新安装。[/font]

[font=宋体]链接：[/font]https://bbs.instrument.com.cn/topic/6028886问题描述：[font=宋体]分子印迹膜分离技术[/font]解答：[font=宋体]分子印迹技术是指合成对模板分子或目标分子具有特异性识别能力的分子印迹聚合物（[/font]molecularlyimprinted polymers[font=宋体]，[/font]MIPs[font=宋体]）的新型分离技术。[/font][font=宋体]有特异性识别能力的分子印迹聚合物（[/font]molecularly[font=宋体]当模板分子（印迹分子）与聚合物单体接触时会形成多重作用点，通过聚合过程这种作用就会被记忆下来，当模板分子除去后，聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴，这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。[/font]MIPS[font=宋体]最广泛的应用之一是利用其特异的识别功能去分离混合物，近年来，引人瞩目的立体、特殊识别位选择性分离已经完成。其适用的印迹分子范围广，无论是小分子（如氨基酸、药品和碳氢化合物等）还是大分子（如蛋白质等）已被应用于各种印迹技术中。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》

操作条件对于色谱分离有很大影响。 柱长，柱内径：一般讲，柱管增长，可改善分离能力，短则组分馏出的快些；柱内径小分离效果好，柱内径大处理量大，但柱内径过大，将导致担体不能均匀地分布在色谱柱中。分析用柱管一般内径为3-6毫米，柱长为1-4米。 柱温：是一个重要的操作变数，直接影响分离效能和分析速度。选择柱温的根据是混合物的沸点范围，固定液的配比和鉴定器的灵敏度。提高柱温可缩短分析时间；降低柱温可使色谱柱选择性增大，有利于组分的分离和色谱柱稳定性提高，柱寿命延长。一般采用等于或高于数十度于样品的平均沸点的柱温为较合适，对易挥发样用低柱温，不易挥发的样品采用高柱温。 载气流速：载气流速是决定色谱分离的重要原因之一。一般讲流速高色谱峰狭，反之则宽些，但流速过高或过低对分离都有不利的影响。流速要求要平稳，常用的流速范围每分钟在10-100亳升之间。 固定相：固定相是由固体吸附剂或涂有固定液的担体构成。（1）固体吸附剂或担体粗细：一般采用40-60目、60-80目、80-100目。当用同等长度的柱子，颗粒细的分离效率就要比粗的好些。（2）固定液含量：固定液含量对分离效率的影响很大，它与担体的重量比一般用15%-25%。比例过大有损于分离，比例过小会使色谱峰拖尾。 进样：一般讲进样快，进样量小，进样温度高其分离效果好。对进液体样，速度要快，汽化温度要高于样品中高沸点组分的沸点值，一次汽化，保证色谱峰形不致展宽、使柱效高。当进样量在一定限度时，色谱峰的半峰宽是不变的。若进样量过多就会造成色谱柱超载。一般讲柱长增加四倍，样品的许可量增加一倍。对于常规分析，液体进样量为1-20微升；气体进样量为0.1-5毫升

如题，在液相中为什么乙腈的洗脱能力比甲醇强呢？反相色谱是固定相的极性小于流动相的极性。反相高效液相色谱是以强疏水性的填料为固定相，以可以和水混溶的有机溶剂为流动相的一种液相色谱分离形式。流动相的极性越小洗脱能力就越强但甲醇极性小于乙腈，为什么乙腈的洗脱能力比甲醇强呢？

微生物检测能力验证注意事项有哪些？实验室能力验证和室间比对活动是判定实验室检测能力的重要手段之一，不但可以提高实验室的检测能力和技术水平，发现实验室操作技术和质量管理上存在的问题，还能增加客户以及相关方对实验室的信任。今天和大家一起来看看微生物能力验证注意事项有哪些：一、能力验证样品接收及准备1、操作前仔细阅读参指导书，关键是小的备注要注意，很多特殊情况的处理大都在备注里。2、样品接收前的检查很重要，首先对样品的完整性进行检查，对信息的阅读要全面，如果发现样品有问题及时沟通，这样要比做样品的时候在发现来的要及时，能节省不少的时间；3、作业指导书的阅读要到位，很多能力验证样品寄到后要跟一份作业指导书，作业指导书中往往会对本次能力验证的样品、成分、尺寸、选择方法、样品的结果记录、包括修约或样品的粘贴、样品寄发的注意事项等有明确的规定，熟读这些对试验准备有很好的作用。比如有的会要求将试验后样品一块寄发组织单位，有的实验室如果不仔细阅读的话很容易将测试后样品立即处理掉，如果寄样时在看见可就完了。4、测试前的准备工作一定要做好，包括设备的校准、试运行等，有条件的情况下可以在正式测试前选择一块相仿的样品进行一下预测试，这样会将测试过程中的问题提前发现提前解决。对正式测试的操作有帮助。二、能力验证样品预处理1、样品测试过程中的判断能力很重要，有时候我们在测试中往往会自以为是，为了保证测试过程中的准确操作最好是找一个经验丰富的作督察，发现问题及时解决，如果等操作完毕再发现问题的话可能会因为样品的消耗而无法验证结果；2、定量项目，西林瓶内样品不可分割，应全部用于检测。一般参考书指导的是加40mL稀释液制成40mL样品。3、定量项目样品稀释。指导书标明了稀释范围的，在稀释范围左右各加1个稀释度进行；书上没有稀释范围的，多做稀释倍数，选择合适的稀释倍数计数（一般可稀释至10-8）。4、定量项目，除了要多做稀释倍数外，同时同一稀释度要多倒几皿，从原理上来讲，检测过程属于随机抽样检查，平板越多，数据越接近真值。考虑性价比，又不可能一直疯狂一个稀释度很多平板，所以能力验证时候多倒几皿，求好结果。5、定性项目有一些重要步骤：a、增菌及分离步骤尤其重要。选择合适的增菌液和分离用培养基对目标菌的检出非常关键，选择两种以上的增菌液和分离用培养基对菌株作直接分离和增菌后分离。b、划线分离十分重要，要把增菌液中的目标菌尽量多的表达出来，要分出单个菌落并尽可能多挑取可疑菌落，确保分离到目标菌。c、生化试验和血清学试验以营养琼脂平板上的纯培养细菌为好。三、实验过程一定要做阴阳对照阳性对照，是在试验中，检验培养基和培养条件是否适合，如果在实验中，阳性实验没有生长的话，那这个实验是失败的。阴性对照主要是检测培养基是否污染，在没有加入任何东西培养时，培养基培养后还是会显示阳性结果，这就说明培养基灭菌不彻底，染菌了，这样也会影响实验结果的。四、培养基方面需要注意地方1、培养基配制充分混匀后再灭菌正确做法是用一部分水搅拌均匀后，再加入剩余水量，混匀后灭菌或分装。一定要用震荡器充分混匀水化液，作为检测原液，普通手摇混匀与经震荡器混匀的样品液，计数结果相差较大。混匀后的样品严格按照指导书规定的时间进行检验。2、混菌法倒皿要充分混匀培养基倒完要左5圈右5圈（混匀速度一定要慢，目的是——避免培养基波动到二皿接触的缝隙部分造成后续污染），找较水平位置冷却凝固。3、培养基要不要覆盖问题覆盖的目的是为了阻止活菌在培养基表层通过鞭毛移动，造成片状生长，无法计数这一不利现象的发生。这里可以发挥主观能动性-对于不运动的菌，可以不覆盖，对于运动的菌覆盖。总结一下a.长期检测同一种样品，不覆盖并无蔓延现象，不覆盖；长期检测蔓延选择了覆盖，一直覆盖。b.未知样品，进行覆盖和不覆盖的比对实验，然后决定以后同样的样品是否需要覆盖。养成经验。c.能力验证实验，覆盖和不覆盖的都做，不要吝惜那么一点点培养基或耗材，毕竟能力验证实验做的漂亮才是实验室（是室而不是人！）能力的综合体现。4、 实验培养过程勤观察微生物培养过程一般需要几小时到几十小时，要利用这段时间观察培养箱及菌生长情况，比如温度是否稳定，培养室内湿度如何等等，多思多看，准备预案。方有可能得到与盲样一致的实验结果。原始记录应有条理、思路清晰,完整准确地记录菌株鉴定检验的全过程,原始记录要包含检测时间、检测现象、检测结果三个要素，方便检测出现问题的溯源。五、结果判断结果的判定一般根据设备操作，但是对于人为操作如评级、手工操作等结果可能会因为人员的差别而会有不同的偏差，这样在判定时最好是找有经验的部门负责人或质量专家一块定夺，这样的话会减少很多不必要的错误。

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