人参皂苷的 UHPLC 新方法的开发
目的:使用带有自动方法开发/色谱柱筛选功能的超高效液相色谱(UHPLC) 系统对于人参皂苷类成分的适宜分离条件进行快速筛选及探索,并在此基础上优化得到快速高效重现性良好的定性定量分析方法。方法:使用自动方法开发系统对分离条件进行筛选和优化后,得到两种基于不同选择性条件的最终方法,方法1,色谱柱:Agilent Zorbax Bonus RP (3.0 x 50 mm,1.8 μ m),柱温25 ° C,流动相为超纯水(A)-乙腈(B),梯度分析,流速1.0 mL/min,检测波长203 nm;方法2,色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18(3.0 x 150 mm,1.8 μ m),柱温50 ° C,流动相为超纯水(A)-乙腈(B),梯度分析,流速0.6 mL/min,检测波长203 nm。结果:使用上述两个方法对标准品和样品进行了分析,所需分析时间均小于10 分钟,重现性良好,保留时间RSD 0.2%,峰面积RSD 1.0%,样品中的干扰成分与被测成分均可以得到良好分离。结论:两种方法分析快速切分离度良好,能够充分发挥UHPLC 的分离能力,适合于含有人参皂苷类成分的药材及制剂的分析。Agilent 的方法筛选软件可以快速、无人照管地选择最佳的色谱柱、色谱条件;使方法开发的步骤更趋系统化,更为合理。