多肽物质用流动相

柱后 TFA-Fix 技术和抑制器离子交换的方法，经过实验验证，表明两种方法都具有降低流动相中 TFA 对多肽的质谱抑制作用，提高样品在 MS 上的灵敏度。采用双三元液相色谱系统，充分利用双泵的功能，同时进行样品分析和柱后自动试剂添加，大大提高多肽样品在 MS 上的灵敏度。

本文采用双三元液相色谱系统(DGLC)，充分利用双泵的优势，将两个泵分别作为流动相的输液泵和柱后溶液的传输泵，实现与质谱的全自动连接。采用TFA-Fix 技术或者抑制器技术降低流动相中TFA 对MS 的离子产生的抑制作用，尤其是柱后抑制器技术大大提高了多肽样品在质谱上的灵敏度。

本文采用双三元液相色谱系统(DGLC)，充分利用双泵的优势，将两个泵分别作为流动相的输液泵和柱后溶液的传输泵，实现与质谱的全自动连接。采用TFA-Fix 技术或者抑制器技术降低流动相中TFA 对MS 的离子产生的抑制作用，尤其是柱后抑制器技术大大提高了多肽样品在质谱上的灵敏度。

固定相和流动相　　在色谱分析中，如何选择最佳的色谱条件以实现最理想分离，是色谱工作者的重要工作，也是用计算机实现HPLC分析方法建立和优化的任务之一。本章着重讨论填料基质、化学键合固定相和流动相的性质及其选择。

本技术概述展示了如何使用 Agilent 1290 Infinity II 方法开发解决方案自动筛选固定相和流动相。该解决方案配备 Agilent 1290 Infinity II 高容量柱温箱，可在最多八根色谱柱之间进行自动切换。Agilent 1290 Infinity II 全能泵配有两个溶剂选择阀，最多可连接 26 种不同的溶剂。Agilent OpenLAB CDS ChemStation 版软件的安捷伦方法筛选向导有利于轻松设置方法，在一个序列中采用色谱柱、流动相和温度的不同组合。

本文介绍了使用TSKgel Super-Octyl色谱柱，并用2-丙醇作为流动相溶剂，同时检测尿液代谢物和肌酐的分析实例。

本文介绍了使用TSKgel Super-Octyl色谱柱，并用2-丙醇作为流动相溶剂，同时检测尿液中马尿酸的分析实例。

在使用磷酸盐等不挥发盐做流动相时，能有效解决杂质鉴定的难题。一维和二维同时使用亚2 μm的色谱柱，提高分析效率。借助软件快速对药品中所有杂质进行鉴定及解析。

通常，使用 UV 检测的多肽色谱分离是通过 C18 柱以及三氟乙酸 (TFA) 改性的流动相完成，这种方法可以改善分离度，但同时会抑制质谱 (MS) 信号。甲酸 (FA) 是用于 MS 检测的首选流动相改性剂，但它可能会导致传统 C18 柱无法达到最佳分离效果。本应用简报介绍了通过单一液相色谱方法，采用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱分离合成多肽杂质，并使用 UV 或 MS 进行检测。本方法使用 FA 作为流动相改性剂，可以提供足够的分离度以鉴定并定量多肽杂质。

摘要单克隆抗体 (mAb) 产品的聚集会影响其作为治疗药物的疗效。体积排阻色谱 (SEC)是一种高效检测治疗性蛋白质和多肽中的聚集体的方法。本应用简报介绍了使用Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱表征标准蛋白质混合物中的单体、二聚体和聚集体过程中的方法优化。

摘要单克隆抗体 (mAb) 产品的聚集会影响其作为治疗药物的疗效。体积排阻色谱 (SEC)是一种高效检测治疗性蛋白质和多肽中的聚集体的方法。本应用简报介绍了使用Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱表征标准蛋白质混合物中的单体、二聚体和聚集体过程中的方法优化。

本文使用配备了示差折光、四毛细管桥粘度及双角度激光光散射三个检测器的 Agilent1260 Infinity 多检测器 GPC/SEC 系统，配合 PL Aquagel-OH 系列色谱柱，分别以两种不同盐浓度的缓冲液作为流动相，对羧甲基淀粉钠的分子量、分子量分布和分子构造进行了表征，并研究了流动相盐浓度对分子构象的影响。通过与仅配单一示差检测器的PC/SEC 系统对比得到，1260 多检测器 GPC/SEC 系统，无需建立标准曲线，即可得到更加准确的样品分子量及分子量分布检测结果，同时还可得到样品分子构造和分子构象信息。

本文使用配备了示差折光、四毛细管桥粘度及双角度激光光散射三个检测器的 Agilent 1260 Infinity 多检测器 GPC/SEC 系统，配合 PL Aquagel-OH 系列色谱柱，分别以两种不同盐浓度的缓冲液作为流动相，对羧甲基淀粉钠的分子量、分子量分布和分子构造进行了表征，并研究了流动相盐浓度对分子构象的影响。通过与仅配单一示差检测器的GPC/SEC 系统对比得到，1260 多检测器 GPC/SEC 系统，无需建立标准曲线，即可得到更加准确的样品分子量及分子量分布检测结果，同时还可得到样品分子构造和分子构象信息

本文建立了一种使用离子交换色谱法结合生物惰性液相色谱分离不同序列长度寡核苷酸的分析方法，假定较短序列的寡核苷酸组分为合成过程中可能产生的短序列杂质，并考察了流动相pH变化对分析结果的影响。 岛津生物惰性超高效液相色谱仪“Nexera XS inert”可以出色地抑制含磷酸基团化合物的金属表面吸附，获得优异的峰型、良好的重现性和出色的灵敏度。

本文介绍了使用TSKgel Super-Octyl色谱柱，并用2-丙醇作为流动相溶剂，同时检测尿液代谢物中扁桃酸的分析实例。

本文介绍了使用TSKgel Super-Octyl色谱柱，并用2-丙醇作为流动相溶剂，同时检测尿液代谢物甲基马尿酸的分析实例。

本文介绍了使用TSKgel Super-Octyl色谱柱，并用2-丙醇作为流动相溶剂，同时检测尿液代谢物和肌酐的分析实例。

头孢唑肟钠（Ceftizoxime sodium）属第三代头孢菌素，具广谱抗菌作用。中国药典中使用磷酸盐缓冲液作为流动相。在本方案中采用二维ACQUITY UPLC系统，一维使用药典中规定的磷酸盐缓冲液，并采用亚2 μm小粒径的色谱柱进行分离，以提高分离效率、增加分离度、缩短分析时间。二维采用质谱兼容的甲酸体系，连接飞行时间质谱仪（Xevo G2-S QTof）进行检测鉴定。

本文使用配备了示差折光、四毛细管桥粘度及双角度激光光散射三个检测器的 Agilent1260 Infinity 多检测器 GPC/SEC 系统，配合PL Aquagel-OH 系列色谱柱，分别以两种不同盐浓度的缓冲液作为流动相，对羧甲基淀粉钠的分子量、分子量分布和分子构造进行了表征，并研究了流动相盐浓度对分子构象的影响。通过与仅配单一示差检测器的GPC/SEC 系统对比得到，1260 多检测器GPC/SEC 系统，无需建立标准曲线，即可得到更加准确的样品分子量及分子量分布检测果，同时还可得到样品分子构造和分子构象信息。

治疗性多肽和蛋白质的表征及杂质分析需要联合使用色谱分离和质量选择检测。然而，多肽和蛋白质的色谱分离方法通常使用 MS 不兼容的流动相。本应用简报采用多中心切割 (MHC) 二维液相色谱 (2D-LC) 作为质量选择检测的自动脱盐工具。在第一维中，使用 MS 不兼容的流动相根据 USP 39 分析多肽胰高血糖素。然后在第二维中进行自动脱盐和质量选择检测。

治疗性多肽和蛋白质的表征及杂质分析需要联合使用色谱分离和质量选择检测。然而，多肽和蛋白质的色谱分离方法通常使用 MS 不兼容的流动相。本应用简报采用多中心切割 (MHC) 二维液相色谱 (2D-LC) 作为质量选择检测的自动脱盐工具。在第一维中，使用 MS 不兼容的流动相根据 USP 39 分析多肽胰高血糖素。然后在第二维中进行自动脱盐和质量选择检测。

固定相和流动相筛选是分析型超临界流体色谱(SFC) 方法开发的一个重要方面。本文将介绍使用Agilent 1260 Infinity 分析型SFC 系统色谱柱筛选套件自动筛选色谱柱和改性剂。通过筛选六种固定相和两种改性剂来确定最佳组合。对于所选的样品，使用Agilent ZORBAX Rx-SIL 色谱柱并以甲醇作为改性剂得到了最佳的分析结果，所有化合物均实现基线分离。

本文采用胰蛋白酶酶解蛋白的方法，得到各种蛋白的肽谱，比较几款不同的反相色谱柱在分离蛋白酶解片断时的差异，同时借助质谱，评价蛋白酶解产物- 多肽在酸性或者碱性流动相条件下表现出分离性能的差异。

本文采用胰蛋白酶酶解蛋白的方法，得到各种蛋白的肽谱，比较几款不同的反相色谱柱在分离蛋白酶解片断时的差异，同时借助质谱，评价蛋白酶解产物- 多肽在酸性或者碱性流动相条件下表现出分离性能的差异。

多肽分离是生物药物表征过程中至关重要的一步。肽谱分析在药品开发中作为主要的质量控制 (QC) 步骤，其中包括通过酶解生成多肽片段，然后进行反相分离和质谱鉴定。由于蛋白质混合物的蛋白水解消化物固有的复杂性，高效、高分离度的多肽分离显得尤为重要。保留时间和峰面积/峰 高等肽谱分析的质量属性是获得可靠肽谱分析结果的关键。因此，需要采用稳定可重现的 LC/MS 方法严格表征多肽片段，从而可靠地评估分析结果。本研究证明，使用可兼容质谱的 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱以及 含甲酸改性剂的流动相可实现高效的多肽分离。本研究筛选了多种类型的样品用于评估多肽分离的色谱柱性能。结果表现出优异的保留时间、峰面积、峰高和半峰宽 (FWHM) 重现性。

Fmoc保护氨基酸是多肽药物化学合成常用的起始物料，分子量是药物合成物料质控的关键指标。本文应用台式MALDI-TOF质谱仪MALDI-8030检测了6种Fmoc保护氨基酸的分子量，本方法无需液相分离、操作简便，还能够直接分析酸性条件下不稳定的含Boc基团的氨基酸衍生物的分子量，避免了传统液相分离流动相中酸对Boc基团的影响，可作为多肽药物化学合成起始物料快速质量控制的参考。

体积排阻色谱(SEC) 是监测生物治疗蛋白质样品（包括单克隆抗体及其衍生物）中单体、二聚体、聚集体和潜在降解物的重要工具。由于聚集体被视为一项关键质量属性，因此需要对其进行定量分析。本应用简报介绍了一种利用Agilent AdvanceBio SEC 300Å , 7.8 × 300 mm, 2.7 μ m 色谱柱和Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱对生物治疗mAb 和抗体药物偶联物 (ADC) 中的聚集体进行定量分析的简单而灵敏的方法。该方法采用相同的水相流动相，无需添加有机改性剂即可对mAb 和疏水性更强的ADC 进行分析。优化方法还可监测经 pH/温度处理形成的聚集体和降解物。该方法操作简单且具有良好重现性，与仪器的抗腐蚀性相结合后极其适用于生物制药行业中mAb 和ADC 的常规QA/QC 分析。

加压毛细管电色谱（pCEC）是综合了高效液相色谱（HPLC）与毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的一种高效微型分离技术，在继承了液相色谱的高选择性以及毛细管电泳的高效率特性的基础上，克服了毛细管电泳难以分离中性物质的缺陷，同时解决了微小颗粒固定相由于输液泵的耐压能力在常规HPLC中的应用限制。 本文是加压毛细管电色谱－质谱联用技术在多肽和蛋白质领域的应用技术文章。

【有关物质】检测波长：UV 254 nm流动相A：0.05 mol/L磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液，用2 mol/L氢氧化钠溶液调p H至5.0）-乙腈（99:1）流动相B：0.05 mol/L磷酸盐缓冲液（p H 5.0）-乙腈（80:20）洗脱方式：先以流动相A-流动相B（92:8）等度洗脱，待阿莫西林峰洗脱完毕再线性梯度洗脱。进样量：20 ul【含量测定】检测波长：UV 254 nm流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（用2 mol/L氢氧化钠溶液调p H至5.0）-乙腈（97.5:2.5）洗脱方式：等度进样量：20 ul

人组织多肽抗原(TPA)检测试剂盒人组织多肽抗原(TPA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人组织多肽抗原(TPA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人组织多肽抗原(TPA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人组织多肽抗原(TPA)抗原、生物素化的人组织多肽抗原(TPA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人组织多肽抗原(TPA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度