定量验证

很多资料介绍说通过稀释标准溶液至S/N=10来界定定量限，最近做验证才想到一个问题，比如做到S/N=10时标准浓度为2ug/ml,假设样品浓度为0.1g/ml，折算为样品中定量限应为20ppm。那么如果样品浓度为1g/ml，是不是样品中定量限为2ppm了呢？这么说定量限的值受样品浓度影响，样品浓度越高定量限越低。我觉得定量限应是某种特定方法能够定量测定目标物含量的一种灵敏度的表示方式，受方法的限制而不随样品浓度变化的影响。不知道这样理解对不对。请高手赐教！

[color=#00008B][size=4]方法学验证中，检测限与定量限的确定，你们通常采取什么方法获得？要做梯度浓度吗？对陌生的产品该如何选择浓度？验证方法中该如何描述这个限值，做数值比对还是图谱比对，使验证方法更有说服力？[/size][/color]

校准能力验证与检测能力验证是否都必须评定不确定度？定量给出结果的

我们这边现在要做一个黄曲霉的方法验证，其中有一个验证项目是定量限，具体这边要怎么做我一头雾水，求解答，（前处理，上机需要什么操作）[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif[/img]

不管你用什么应用方法或软件对衍射图谱进行定量后，其结果的准确性总让人莫衷一是，定量结果让测定者也无法信心百倍，同一衍射图谱用软件测定时参数的设定略有变动，其定量结果就发生了较大的变化，定量后的数据怎样确认其准确程度挺让人伤脑劲的，大家有没有什么好的办法或验证手段？========版主模式========前缀修改: →

最近我在学习液相色谱方法学验证方面的知识，看了别人做了定量限和检测限的验证方面的资料，但是还有一部分看不懂。比如，在配置了3个不同浓度的样品溶液，分别进样后，通过LOD=3.3*delta/slope和LOD=10*delta/slope的公式可以估算出定量限和检测限。接着，那套资料中，又验证了在定量限和检测限处的精确度，是通过6次进样得到的。我不太懂，在做这个精确度验证的时候，是需要根据上面计算得到的LOD和LOQ配置溶液吗？这样的话，会不会有一定的误差呢？

楼主目前在写一份燃烧特性的方法验证，心里大概明白需要从人、机、环、测等几大要素去考虑，但是以前一直做化学方面的方法验证比较多（这类的准确度，精密度，检出限啥的都是由数据说法，算算RSD，回收率就完事了），对于这种半定量/定性的，我没啥招了，想来想去纺织检测貌似很多这种物理性能检测，所以想来求助坛友~~先谢谢了~~~

准备对GB/T 5009.19-2008的方法二进行方法验证，需要验证检出限和定量限的问题，但是这个方法中只标出了检出限，定量限没有写，怎么对定量限进行方法验证，此外，方法二的检出限给出的是，取样量2g,最终体积是5ml,进样体积是10ul时 a-HCL的检出限是0.038ug/kg ,如果是20g,最终体积是5ml,进样体积是10ul时 a-HCL的检出限是是不是应该是0.038ug/kg *5=0.19ug/kg 如果是0.5g,最终体积是10ml,进样体积是10ul时 a-HCL的检出限是是不是应该是0.038ug/kg *0.125=0.00475ug/kg 希望大家看到了能帮帮忙!!!!！万分感谢！！！

分析方法验证中杂质检查包括定量试验和限度试验，定量试验和限度试验有什么不同？分别主要做哪些实验？

如题，如果是面积归一化法定量的话，方法学验证应该怎么做？还是不需要做？

现在做色谱仪的验证，需要测定定量限和检测限，用的是s/n=10和s/n=3。但这样就来了一个问题，就是峰太小，系统无法判定为峰，修改阈值改到最小也依然无法自动积分，只能手动积分。这种情况下还有没有别的办法来让想要的峰能自动积分呢？如果无法自动积分，手动积分结果是否有效啊？

知道了检出限0.02，定量限0.04，我如何做相应的方法验证数据

突然想到这个问题，假如方法的线性范围很宽，用一条很宽线性范围来定量低浓度的受截距影响比较大，低浓度数据可能不会很理想。这时候缩小标准曲线范围来验证低浓度的是否可以？职业卫生[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url] 就可能遇到这个问题，比方线性1-1000 验证低浓度的时候必须用1-1000的曲线还是可以用1-10的曲线？

请教各位大神！ 我们在进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]方法验证时，遇到问题：1.检测限和定量限有没有必要做？ 2.线性如何做，有必要从定量限开始做吗？ 2个问题参考以下方法 具体方法介绍如下：内标法 待测物质是A物质 内标物是B物质 产品A物质的规格限为3.5~5.4(备注：检测结果低于3.5为不合格，高于5.4也不合格) 线性我们做的是规格限的60%~150%(做线性时（只用A物质标液，没有用到内标物，单独考察A物质峰面积和浓度关系)，是否合理。

定量分析方法的方法学验证 定量分析方法验证的目的是证明采用的含量测定方法适合于相应分析要求，在进行定量分析方法学研究或起草药品质量标准时，分析方法需经验证。验证内容有：线性、范围、准确度、精密度（包括重复性和重现性）、检测限、定量限和耐用性等。 一，线性线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物质浓度直接呈正比关系的程度。 　　应在规定的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，制备一系列供试品的方法进行测定，至少制备五份供试样品；以测得的响应信号对被测物浓度作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。回归方程的相关系数 ( r ) 越接近于 1 ，表明线性关系越好。 　　用 UV 法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，吸光度 A 一般在 0.3 ～ 0.7 ，浓度点 n ＝ 5 ，用浓度 C 对 A 作线性回归，得一直线方程，方程的截距应接近于零，相关系数 r 应大于 0.9999 。 　　用 HPLC 法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液 ， 浓度点 n ＝ 5 ～ 7 ，用浓度 C 对峰高 h 或峰面积 A 或被测物与内标物的响应值之比进行线性回归或非线性拟合（如 HPLC-ELSD ），建立方程，方程的截距应趋于零，相关系数 r 应大于 0.999 。 　　线性关系的数据包括相关系数、回归方程和线性图。 二，范围　　范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 　　范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定。对于有毒的、具特殊功效或药理作用的成分，其范围应大于被限定含量的区间。三，精确度　　准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率 ( ％ ) 表示。准确度应在规定的范围内测试。用于定量测定的分析方法均需做准确度验证。 1. 测定方法的准确度 　　可用已知纯度的对照品做加样回收率测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。 在加样回率收试验中须注意对照品的加入量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；加入的对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。 回收率 % = [(C-A)/B]*100% 式中， A 为供试品所含被测成分量； B 为加入对照品量； C 为实测值。 2. 数据要求 　　在规定范围内，取同一浓度的供试品，用 6 个测定结果进行评价；或设计 3 个不同浓度，每个浓度各分别制备 3 份供试品溶液进行测定，用 9 个测定结果进行评价，一般中间浓度加入量与所取供试品含量之比控制在 l ∶ 1 左右，其他两个浓度分别约为供试品含量的 80% 和 120% 。应报告供试品取样量、供试品中含有量、对照品加入量、测定结果和回收率 ( ％ ) 计算值，以及回收率 ( ％ ) 的相对标准偏差 (RSD) 或可信限。 四，精密度　　精密度是指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间接近的程度。 1. 精密度的表示方法 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法和高效液相色谱法是对同一供试液进行至少五次以上的测定；精密度一般用相对标准偏差 (relative standard deviation, RSD) 表示： RSD= 标准偏差 / 平均值 ′ 100 ％ 　　精密度报告的数据应包括平均值、可信限及相对标准偏差。 　　一般在一天之内进行的精密度考察称为日内精密度 (inter-day variability) ；在三天之内进行的精密度考察称为日间精密度 (intra-day variability) 。 　　有时为了考察随机变动因素对精密度的影响，还需设计进行中间精密度试验，变动因素包括不同日期、不同分析人员和不同设备。 2. 重复性（ repeatability ） 　　是指在同一条件下对同一批样品，从样品供试品液制备开始，制备至少六份以上供试品溶液 ( 即 n6), 或设计 3 个不同浓度，每个浓度各分别制备 3 份供试溶液，进行测定，计算其含量的平均值和相对标准偏差 (RSD) 。 RSD 一般应根据样品含量高低、含量测定方法和繁简进行制订，如含量很低一般不大于 5 ％；如含量较高，则应从严要求。 3. 重现性（ reproducibility ） 　　是指在不同的实验室由不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时，通过协同检验得出重现性结果，协同检验及重现性结果均应记载在起草说明中。应注意重现性试验样品本身的质量均匀性和储存运输中的环境影响因素，以免影响重现性结果。 五，检测限　　检测限是指试样中被测物质能被检测出的最低浓度或量。检测限是一种限度检验效能指标，即反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白 ( 本底 ) 值的高低。它无需定量测定，只要指出高于或低于该规定的浓度或量即可。根据所采用的分析方法来确定检测限。 　　当用 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url] 和 HPLC 法时，可用已知低浓度样品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以 S / N ＝ 2 或 S / N ＝ 3 时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。 　　检测限的报告数据应附图谱，说明测试过程和检测限结果。 六，定量限定量限是指样品中被测物质能被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定准确度和精密度。 　　常用信噪比法测定定量限。一般以 S / N ＝ 10 时相应的浓度或注入仪器的量进行确定。 七，耐用性　　耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为使方法用于常规检验提供依据。开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。如果测试条件要求苛刻，则应在方法中写明。典型的变动因素有：被测溶液的稳定性，样品提取次数、时间等。液相色谱法中典型的变动因素有：流动相的组成比例或 pH 值，不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱，柱温，流速及检测波长等。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法变动因素有：不同厂牌或批号的色谱柱、固定相，不同类型的担体，柱温，进样口和检测器温度等。薄层色谱的变动因素有：不同厂牌的薄层板，点样方式及薄层展开时温度及相对湿度的变化等。 　　经试验，应说明小的变动能否通过设计的系统适用性试验，以确保方法有效。

[font=微软雅黑][size=16px][color=#373737]关于能力验证活动中，定性的检测结果和定量的检测结果，区别是什么？[/color][/size][/font]

如题，我最近在用石墨管法做空心胶囊铬测定方法的方法学验证，可是做的方法定量限不合格啊，指导原则要求不低于0.5mg/kg，可我做的定量限才0.2mg/kg。做定量的方法是，标准曲线加样品空白溶液。请教各位前辈有做过类似的吗，碰到这种情况该怎么处理啊？谢谢！！

定量分析方法的方法学验证定量分析方法验证的目的是证明采用的含量测定方法适合于相应分析要求，在进行定量分析方法学研究或起草药品质量标准时，分析方法需经验证。 验证内容有：线性、范围、准确度、精密度（包括重复性和重现性）、检测限、定量限和耐用性等。 一，线性 线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物质浓度直接呈正比关系的程度。 　　应在规定的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，制备一系列供试品的方法进行测定，至少制备五份供试样品；以测得的响应信号对被测物浓度作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。回归方程的相关系数 ( r ) 越接近于 1 ，表明线性关系越好。 　　用 UV 法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，吸光度 A 一般在 0.3 ～ 0.7 ，浓度点 n ＝ 5 ，用浓度 C 对 A 作线性回归，得一直线方程，方程的截距应接近于零，相关系数 r 应大于 0.9999 。 　　用 HPLC 法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液 ， 浓度点 n ＝ 5 ～ 7 ，用浓度 C 对峰高 h 或峰面积 A 或被测物与内标物的响应值之比进行线性回归或非线性拟合（如 HPLC-ELSD ），建立方程，方程的截距应趋于零，相关系数 r 应大于 0.999 。 　　线性关系的数据包括相关系数、回归方程和线性图。 二，范围　　范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 　　范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定。对于有毒的、具特殊功效或药理作用的成分，其范围应大于被限定含量的区间。三，精确度　　准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率 ( ％ ) 表示。准确度应在规定的范围内测试。用于定量测定的分析方法均需做准确度验证。 1. 测定方法的准确度 　　可用已知纯度的对照品做加样回收率测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。 在加样回率收试验中须注意对照品的加入量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；加入的对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。 回收率 % = [(C-A)/B]*100% 式中， A 为供试品所含被测成分量； B 为加入对照品量； C 为实测值。 2. 数据要求 　　在规定范围内，取同一浓度的供试品，用 6 个测定结果进行评价；或设计 3 个不同浓度，每个浓度各分别制备 3 份供试品溶液进行测定，用 9 个测定结果进行评价，一般中间浓度加入量与所取供试品含量之比控制在 l ∶ 1 左右，其他两个浓度分别约为供试品含量的 80% 和 120% 。应报告供试品取样量、供试品中含有量、对照品加入量、测定结果和回收率 ( ％ ) 计算值，以及回收率 ( ％ ) 的相对标准偏差 (RSD) 或可信限。 四，精密度　　精密度是指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间接近的程度。 1. 精密度的表示方法 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法和高效液相色谱法是对同一供试液进行至少五次以上的测定；精密度一般用相对标准偏差 (relative standard deviation, RSD) 表示： RSD= 标准偏差 / 平均值 ′ 100 ％ 　　精密度报告的数据应包括平均值、可信限及相对标准偏差。 　　一般在一天之内进行的精密度考察称为日内精密度 (inter-day variability) ；在三天之内进行的精密度考察称为日间精密度 (intra-day variability) 。 　　有时为了考察随机变动因素对精密度的影响，还需设计进行中间精密度试验，变动因素包括不同日期、不同分析人员和不同设备。 2. 重复性（ repeatability ） 　　是指在同一条件下对同一批样品，从样品供试品液制备开始，制备至少六份以上供试品溶液 ( 即 n6), 或设计 3 个不同浓度，每个浓度各分别制备 3 份供试溶液，进行测定，计算其含量的平均值和相对标准偏差 (RSD) 。 RSD 一般应根据样品含量高低、含量测定方法和繁简进行制订，如含量很低一般不大于 5 ％；如含量较高，则应从严要求。 3. 重现性（ reproducibility ） 　　是指在不同的实验室由不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时，通过协同检验得出重现性结果，协同检验及重现性结果均应记载在起草说明中。应注意重现性试验样品本身的质量均匀性和储存运输中的环境影响因素，以免影响重现性结果。 五，检测限　　检测限是指试样中被测物质能被检测出的最低浓度或量。检测限是一种限度检验效能指标，即反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白 ( 本底 ) 值的高低。它无需定量测定，只要指出高于或低于该规定的浓度或量即可。根据所采用的分析方法来确定检测限。 　　当用 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url] 和 HPLC 法时，可用已知低浓度样品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以 S / N ＝ 2 或 S / N ＝ 3 时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。 　　检测限的报告数据应附图谱，说明测试过程和检测限结果。 六，定量限定量限是指样品中被测物质能被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定准确度和精密度。 　　常用信噪比法测定定量限。一般以 S / N ＝ 10 时相应的浓度或注入仪器的量进行确定。 七，耐用性　　耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为使方法用于常规检验提供依据。开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。如果测试条件要求苛刻，则应在方法中写明。典型的变动因素有：被测溶液的稳定性，样品提取次数、时间等。液相色谱法中典型的变动因素有：流动相的组成比例或 pH 值，不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱，柱温，流速及检测波长等。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法变动因素有：不同厂牌或批号的色谱柱、固定相，不同类型的担体，柱温，进样口和检测器温度等。薄层色谱的变动因素有：不同厂牌的薄层板，点样方式及薄层展开时温度及相对湿度的变化等。 　　经试验，应说明小的变动能否通过设计的系统适用性试验，以确保方法有效。

首先对炔草酯（一种除草剂）用HPCL外标法进行定量分析，并做了方法验证。但是由于炔草酯是由R和S两个同分异构体构成，所以又用HPLC面积归一法对其R和S异构体的比例进行了测定，就是对炔草酯两个异构体用HPLC面积归一法进行手性分析时，其的方法验证该怎样进行呢？我的理解是线性肯定没有必要做的，那就只做下准确度和精密度么？我是刚接触这个领域，实际操作经验很少，可能我提的问题比较简单，望高手给指点一下。先谢了。

[color=#444444]各位同仁，有没有参加中国检科院组织的ACAS-PT535(2018)食品中副溶血性弧菌定量检测能力验证？一共两个样品，黄色的是18-N，白色的是18-J[/color]

各位老师，我现在做5009.168-2016脂肪酸的方法验证，定量限要求是0.0013g/100g，那做油类的时候，做试剂空白，默认样品量是0.06g，那么按照定量限需添加脂肪酸甲酯0.78ug，最后定容体积4ml异辛烷，，也就是上机液体浓度是0.195ppm，这个浓度FID检测器我做的没有峰，是我的计算有问题吗还是理解有问题？

请教一下方法验证有顺序的要求吗？比如检测限和定量限一定要在线性之前验证吗？还有，做方法验证的时候中间能插别的样吗？比如我做线性的时候走了两针线性的样，然后在中间插了一针别的样，方法是一样的，这样可以吗？

[align=left]相关机构及人员：[/align][align=left]　　为进一步指导医学实验室进行检验程序性能验证并为医学实验室认可提供参考，中国合格评定国家认可委员会（CNAS）组织制定了CNAS-GLXX《临床化学定量检验程序性能验证指南》、CNAS-GLXX《临床免疫学定性检验程序性能验证指南》、CNAS-GLXX《分子诊断检验程序性能验证指南》。目前已完成文件征求意见稿，现于网上公示征求意见。相关单位和人员对该文件有修改建议或意见，请填写附件中的意见征询表，并于2018年11月8日前反馈CNAS秘书处。[/align][align=left]　　联系人：胡冬梅[/align][align=left]　　电话：010-67105278[/align][align=left]　　Email：[email]hudm@cnas.org.cn[/email][/align][align=left]　　附件1：[/align][align=left] [color=#313131][url=https://www.cnas.org.cn/zxtz/images/2018/10/09/802CD8BFF81ECEF8333F84D9F23E10AC.docx]CNAS-GLXX《临床化学定量检验程序性能验证指南》（征求意见稿）[/url][/color][/align][align=left] [color=#313131][url=https://www.cnas.org.cn/zxtz/images/2018/10/09/AAB397F5BAC73C3D837E0B3DA20E5504.docx]CNAS-GLXX《临床免疫学定性检验程序性能验证指南》（征求意见稿）[/url][/color][/align][align=left] [color=#313131][url=https://www.cnas.org.cn/zxtz/images/2018/10/09/BF1592CB68B5A911E9B2E854DE74EF85.docx]CNAS-GLXX《分子诊断检验程序性能验证指南》（征求意见稿）[/url][/color][/align][align=left]　　附件2：[/align][align=left] [color=#313131][url=https://www.cnas.org.cn/zxtz/images/2018/10/09/96D7E125BA6E18F63130BB11C1EB28BE.rar]征求意见稿文件修订说明[/url][/color][/align][align=left]　　附件3：[/align][align=left] [color=#313131][url=https://www.cnas.org.cn/zxtz/images/2018/10/09/580991CF6E34136E5D1917045871C290.doc]CNAS文件意见征询表[/url][/color][/align]

方法验证总体原则在化学分析实验室引入标准方法时，实验室应根据定量分析和定性分析所述，验证操作该方法是否满足标准的要求，即证实（注意讲的是证实）该方法能在该实验室现有的设施设备、人员、环境等条件下获得令人满意的结果，必要时可参加能力验证或进行实验室间比对。 如果只是对标准方法稍加修改（只要改了就要做），如使用不同制造商的同类设备或试剂等，必要时也应进行验证，以证明能够获得满意的结果，并将其修改内容制订成作业指导文件。 ▼定量分析方法验证方法验证过程中关键的参数应取决于方法的特性和可能测到的样品基质的检测范围，至少应测定正确度和精密度。对于痕量化学分析实验室，实验室还应确保获得适当的LOD和LOQ。 ▼定性分析定性方法验证分析的精密度通常表示为假阳性或假阴性率，其可以用不同的浓度水平来确定。实验室进行方法验证可分析一组阴性或阳性加强样品。如对每个不同的样品基质，两个重复样品在三个含量水平上加以分析。建议的含量水平为空白(无分析物)、低浓度(接近方法的最低适用浓度)和高浓度(接近方法的最高适用浓度)，可用标准加入法得到适当的浓度，即:按照同一个方法实施检测时，将测试样品分成两个或更多部分。一部分进行常规分析，其他部分在分析前加入已知量的标准分析物。加入的标准分析物的量应是样品中分析物估计含量的2倍一5倍，也可以是按照方法定量限、容许限等推算的标准分析物的量。标准添加法可用于衡量方法回收率，其可能受测定样品中分析物的含量和基质等因素影响，也可用于评估在定量限、容许限等水平上的正确度。假阳性或假阴性率应与方法确认的数据相当，才能证明实验室有能力使用该方法。

方法验证中一直纠结于一个问题：在运用色谱定量之前需要对这个方法进行验证，那么这个验证的方法作用的范围有多大？譬如说对样品精密度的一个验证，重复称六个同样的样品，计算六个样品的RSD，那么这个RSD是不是仅仅说明在这个称样量范围内样品的精密度是过关的，还是它代表了所有线性范围内的称样量？样品精密度验证的是什么，考察仪器分析样品的重复性？还是仅仅验证了在一个浓度下的重复性？

在用液相进行定量分析优化完条件后要进行最小检出限，定量限，精密度，稳定性，重复性等方面的验证，这些验证是用标样来做还是样品来做，还是无所谓。

各有关单位：受国家认监委的委托，我单位承担了“流感病毒分型及亚型实时荧光定量RT-PCR检测能力验证”（计划编号CNCA-14-B01）能力验证项目的实施和协调工作。根据国家认监委通知(国认实函13号)的要求，为使此次能力验证工作有序、顺利的开展，现将有关事项通知如下：一、开展本次实验室检测能力验证工作的目的是了解该检测领域的整体水平，本次实验室检测能力验证的结果是实验室在相关领域检测能力的客观反映。取得满意结果的实验室，国家认监委将建议有关部门在相应领域指定、授权、委托检验任务时，优先选用；并计入实验室参加能力验证活动的记录。二、凡具备流感病毒分型及亚型检测能力的各级疾病预防控制中心、医院传染病检测实验室，各出入境检验检疫局技术中心或国际旅行卫生保健中心以及其他具备条件的实验室可根据需要自愿报名参加本次能力验证活动。三、报名参加此次能力验证的实验室，按照国家认监委通知（国认实〔2014〕13号）需向承担单位缴纳能力验证成本费用。按照实际成本，需向项目承担单位支付能力验证费用1000 元。四、为保证此次能力验证计划的顺利进行，请各实验室于2014年5月31日前，通过http:///www.acas.com.cn 网站注册报名，同时在相关专栏下载报名表，传真或电子邮件至联系人 (注：纸质报名与网络报名需同时进行)。根据国家认监委的要求，对于测定结果不满意或结果可疑的实验室应进行补测，并另交纳补测费用。各单位在参加能力验证过程中如遇到问题，请及时与我联系。承担单位地址：北京朝阳区高碑店北路甲3号中国检验检疫科学研究院邮编：100123联系人：马老师 张老师电话：010-85773355转2093传真：010-85750771电子邮件： maxz@caiq.gov.cn中国检验检疫科学研究院二O一四年四月二十九日

新人刚接触方法验证，请问各位前辈们，验证GB23200.121.2021可否用单标定量，还是必须得用标曲

为了保证分析检测结果准确、可靠，必须对所采用的分析方法的准确性、科学性和可行性进行验证，以证明分析方法符合检测的目的和要求，这就是分析方法验证。从本质上讲，方法验证就是根据检测项目的要求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理的试验来验证所采用的分析方法符合检测项目的要求。方法验证在质量控制上有重要的作用和意义，只有经过验证的分析方法才能用于药品生产的分析检测，方法验证是制订质量标准的基础。方法验证内容包括方法的专属性、线性、范围、准确度、精密度、检出限、定量限、耐用性和系统适用性等，检测目的不同验证要求也不尽相同。1.专属性 专属性是指分析方法能够将产品和杂质分开的特性，也称为选择性。对于纯度检测，可在标准品中加入产品中的已知杂质，或者直接用粗品，考察产品峰是否受到杂质的干扰，对于过程跟踪，可用反应体系样品来考察有没有其它的杂质干扰。必要时使用二极管阵列检测器或者质谱检测器进行色谱峰纯度检查。一般要求产品和杂质之间的分离度大于2.0。2.线性 线性是在设定的范围内，检测结果与样品中原料或产品的浓度呈线性关系的程度。线性是定量检测的基础，需要定量检测的项目都需要验证线性。一般用贮备液经过精密稀释，或分别精密称样，制备得到一系列被测物质的浓度（5个以上），按浓度从小到大运行序列，以峰面积和浓度的函数作图，用最小二乘法进行线性回归计算，考察分析方法的线性。3.范围 范围指在能够达到一定的准确度、精密度和线性时，样品中被分析物的浓度区间。简单的说，范围就是分析方法适用的样品中待测物的浓度最大值和最小值。需要定量检测的分析方法都需要对范围进行验证，纯度检测时，范围应为测试浓度的80％～120％。4.准确度 准确度是指测定的结果与真实值之间接近的程度，所以也叫做真实度，需要定量得分析方法均需要验证准确度。准确度应在规定的范围内建立，对于原料药可用已知纯度的标准品或符合要求的原料药进行测定，必要时可与另一个已建立准确度的方法比较结果。5.精密度 精密度是指在规定条件下，同一均匀样品经多次取样进行一系列检测所得结果之间的接近程度。精密度一般用相对标准偏差表示，取样检测次数应至少6次。精密度可以从三个层次考察：重复性、中间精密度、重现性。a、重复性是在相同的操作条件下、较短时间间隔内，由同一分析人员测定所得结果的精密度。一般是用100％浓度水平的样品测定6次的结果进行评价。b、中间精密度：同一实验室，在日期、分析人员、仪器等内部条件改变时，测定结果的精密度。 c、重现性：指不同实验室之间不同分析人员测定结果的精密度。6.检出限 检出限是指样品中的被分析物能够被检测到的最低量，不需要准确定量。检出限体现了分析方法的灵敏度。检出限的测定可以通过对一系列已知浓度被测物的试样进行检测，以能准确、可靠检出被测物的最小浓度来确定，也可把已知浓度样品的信号与噪声信号进行比较，以信噪比为3：1时的浓度确定检出限，一般要求能够达到进样浓度的0.05%。7.定量限 定量限是指样品中的被分析物能够被定量检测的最低量，其测定结果需要一定的准确度和精密度，定量限体现了分析方法灵敏定量检测的能力。检测需要严格控制含量的杂质，必须考察方法的定量限，以保证杂质能够被准确定量。一般以信噪比为10：1时相应的浓度或进样量来确定定量限。8.耐用性 耐用性是指测定条件发生小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，耐用性主要表明方法的抗干扰能力，主要的变动因素包括：流动相的组成、流速和pH值、色谱柱、柱温等。经试验，应说明小的变动能否符合系统适用性试验要求，以确保方法有效。9.系统适用性试验 液相色谱分析方法主要依赖高效液相色谱仪和色谱柱，在做方法验证时，有必要将高效液相色谱仪、色谱柱、流动相与实验操作、待测样品等一起当作完整的系统进行评估，并将系统适用性作为分析方法的组成部分，系统适用性便是对整个系统进行评估的指标。一般系统适应性的要求为：分析方法能够达到0.05%的检出限，主峰的拖尾因子0.52.5，主峰与杂质的分离度大于2.0，空白干净，主峰处无系统峰干扰。 分析方法开发与验证是一个整体，在实际工作中，一般是先开发分析方法，经过适当的优化以后再做方法验证，验证的部分内容在分析方法开发时就要做，比如说分析方法的专属性验证。分析方法验证并非必须验证所有的内容，只要注意验证内容充分，足以证明分析方法的合理性就可以了，如杂质限度检测一般只需要验证专属性和检出限，而精密度、线性、定量限等涉及定量测定的项目，则不需要验证。有时需要对分析方法进行全面或部分的再验证。当原料药合成工艺发生改变时，可能引入新的杂质，杂质检查方法和含量测定方法的专属性就需要再进行验证，以证明有关物质检查方法能够检测新引入的杂质，且新引入的杂质对主成份的含量测定应无干扰。当分析方法发生部分改变时，如检测波长发生改变，则需要重新

“能力验证”具有极为广泛的含义，包括但不限于以下类型：1.定量计划该类计划是确定能力验证物品的一个或多个被测量的量。2.定性计划该类计划是对能力验证物品的一个或多个特性进行鉴别或描述。3. 顺序计划该类计划是将检测或测量的一个或多个能力验证物品按顺序分发，并按期返回能力验证提供者。4.同步计划该类计划中，分发能力验证物品，在规定期限内同时进行检测或测量。5.单次计划该类计划中，为单个需求提供能力验证物品。6.连续计划该类计划中，按规定间隔持续提供能力验证物品。7.抽样该类计划中，为后续的分析抽取样品。8.数据转换和解释该类计划中，提供成组的数据或其他提供者，利用术语“外部质量评价（EQA）”表示其能力验证计划和/或更广义的计划。