单抗聚集体

【讲座主题】应用安捷伦最新AdvanceBio SEC色谱柱解决生物制药聚集体分析中挑战【讲座时间】2016年03月15日 10:00:00【主讲老师】米建秋 毕业于北京大学化学系，有着丰富的色谱、质谱经验！【会议简介】近年来随着生物制药行业在国内蓬勃发展，相应的产品表征方法研究成为行业热点。聚集体是生物药物的关键质量属性，也是表征的难点。聚集体的不稳定性以及与色谱柱之间的次级相互作用往往会带来测试结果偏离真实含量，甚至导致对产品质量和生产工艺的错误判断，影响药物的安全性。安捷伦致力于研发新一代创新的体积排阻硅胶填料，降低次级相互作用，消除聚集体分析中的不确定性。本次网络讲堂将会介绍安捷伦科技基于全新填料技术推出的高分辨、高惰性AdvanceBio SEC色谱柱在真实表征聚集体方面的应用。抗体药物结合物（ADC）由于连接了疏水性的药物，在SEC分析中疏水相互作用更为明显，导致峰拖尾和分离变差，本讲座特别呈现AdvanceBio SEC色谱柱在全面改善ADC聚集体分析峰形和分离的应用实例，为生物药物研究工作者提供性能优越的表征工具。AdvanceBio SEC 色谱柱亮点：• 2.7um小颗粒粒径实现更好的柱效• 优化的孔径实现更高的分离度和现更准确的定量• 良好的惰性可实现高灵敏度和低浓度聚集体的定量分析• 更高的重现性可避免重复工作【会议报名】http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1778

【讲座主题】应用安捷伦最新AdvanceBio SEC色谱柱解决生物制药聚集体分析中挑战【讲座时间】2016年03月15日 10:00:00【主讲老师】米建秋 毕业于北京大学化学系，有着丰富的色谱、质谱经验！【会议简介】近年来随着生物制药行业在国内蓬勃发展，相应的产品表征方法研究成为行业热点。聚集体是生物药物的关键质量属性，也是表征的难点。聚集体的不稳定性以及与色谱柱之间的次级相互作用往往会带来测试结果偏离真实含量，甚至导致对产品质量和生产工艺的错误判断，影响药物的安全性。安捷伦致力于研发新一代创新的体积排阻硅胶填料，降低次级相互作用，消除聚集体分析中的不确定性。本次网络讲堂将会介绍安捷伦科技基于全新填料技术推出的高分辨、高惰性AdvanceBio SEC色谱柱在真实表征聚集体方面的应用。抗体药物结合物（ADC）由于连接了疏水性的药物，在SEC分析中疏水相互作用更为明显，导致峰拖尾和分离变差，本讲座特别呈现AdvanceBio SEC色谱柱在全面改善ADC聚集体分析峰形和分离的应用实例，为生物药物研究工作者提供性能优越的表征工具。AdvanceBio SEC 色谱柱亮点：• 2.7um小颗粒粒径实现更好的柱效• 优化的孔径实现更高的分离度和现更准确的定量• 良好的惰性可实现高灵敏度和低浓度聚集体的定量分析• 更高的重现性可避免重复工作【会议报名】http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1778

高分子溶液中聚集体与单分散的分子氢谱会有区别吗？如果是通过加不良溶剂出现聚集体怎么通过核磁实验证明？谢谢！

请问如果是溶液中有机分子可以形成聚集体，此时从NOE谱上我们得到的H-H的空间上的相关是分子内的相关还是分子间的相关？或者是与浓度有关？

关于动物免疫，在多抗制备一部分里有一些讲解（点击这里查看），这里只简要讲述一下单抗制备中需要注意的几个问题。在概述部份已经讨论过，用来制备单抗的动物主要有小鼠、大鼠和兔，由于小鼠易饲养、小鼠单抗技术成熟、路线简单，因此是制备单抗使用的主流动物，这里主要以小鼠单抗制备展开讲述。免疫途径和周期：单抗制备中，免疫动物的方式一般第一针采用皮下免疫，后面的加强免疫采用腹腔免疫、腘内免疫、皮下免疫或者脾内直接免疫。首次免疫和加强免疫结束后，在融合前三天一般还要进行一次冲击免疫，以增加脾脏内浆细胞的数量。下面这张表列出了常见的免疫途径和周期：http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/11/A1384840870png_small.jpg 说明：FCA，弗氏完全佐剂；FIA，弗氏不完全佐剂；Quickantibody，北京康碧泉公司研制的佐剂。上表中第四种免疫方法产生的抗体大部份都为IgM，存在亲和力弱等缺点，慎用。关于操作的问题，这里只作一下简单的介绍，具体如何进行，需要在有相关经验的实验员指导下进行，也可以在网上找到相关视频进行学习。（1）皮下注射。皮下注射的操作有点像给人接种疫苗，即挑取动物的皮肤，将混好佐剂的抗原直接注射。一般皮下注射每个注射点注射30-50ul左右混有佐剂的抗原，每只小鼠注射6-8个点为宜。（有的资料上称这种方法为皮内免疫，造成这种概念上的混淆可能是由于早期工作者们的翻译过程出了问题），皮下操作一般由两人进行，一个协助固定小鼠，另一个进行免疫操作。（2）腹腔注射。腹腔注射比较简单，只需要一人操作，操作者由左手抓住小鼠尾巴和颈部皮肤，将小鼠翻转过来，腹部向上，将抗原直接注射到腹腔。如果抗原混有弗氏佐剂，建议注射在左侧腹腔，如果采用右侧腹腔注射，则在免疫过程中，很容易导致小鼠脾脏与腹膜粘连的情况，造成后期取出脾脏麻烦。（3）尾静脉注射。个人觉得尾静脉注射是技术要求最高的一种注射方式，操作者需要固定小鼠，然后将抗原注射到小鼠尾部静脉（正中间那根血管）。小鼠尾静脉比较细小，一般新手很难操作成功，需要在其它小鼠身上多次尝试才可以进行免疫操作（站长自己尝试了十多次都未成功）。静脉注射抗原对抗原的要求更高，抗原必须不含去垢剂和其它有毒成份，否则极容易引起动物死亡，而且免疫剂量也不宜过大。（4）脾内注射。脾内注射是效果最好的免疫方式，因为这种方式使得脾细胞直接与抗原接触，所以很容易引起免疫应答反应。但是很多人都认为这种方式操作复杂，而且死亡率高，但是参考了一些文献，加上自已实践操作，站长自己总结出了一套比较好的办法，成功率基本上在百分之百。具体操作方法：先用乙醚或戊巴比妥钠进行麻醉，乙醚麻醉过程比较简单，技术含量低，对于初学者比较适用，推荐。事先准备一块棉花，将少量乙醚倒在棉花上，用一烧杯倒扣住，将小鼠也扣在烧杯下，一般在一分钟内小鼠就可以晕到，此时将小鼠取出，用胶带固定在木板或实验台上（腹部向下，背面向上。无需无菌），用手术剪刀剪开背部左侧皮肤（大至就是脾脏所在的位置，不要剪开内膜），剪开小口后，用手将剪口撕大看到腹膜内脾脏即可将用注射器刺穿腹膜，插入脾脏，直接注射抗原，抽出注射器。然后用胶水（推荐AB胶，五金店有卖的）将剪口周围的毛粘好，胶干后在伤口周围涂上抗生素即可，无需要无菌操作。由于需要用到胶水，所以手术前不要用酒精消毒。（5）小腿肌肉注射。这是康碧泉公司的Quickantibody佐剂独有的免疫方法，具体操作是：先抓紧小鼠，用无名指固定一只后腿，将小腿部分用酒精消毒，将混好佐剂的抗原（根据佐剂说明书抗原与佐剂等体积混合）直接注入到小腿肌肉，稍稍停顿后拔出注射器即可。完成首次免疫和加强免疫后，可以取出少量血清进行效价检测（参见多抗制备中的血清采集与检测），达到足够高的效价后即可进行冲击免疫，冲击免疫完成后，应在96小时内完成细胞融合，否则相应的B细胞数量会下降到未冲击前的水平。在单抗制备过程中，除了通过免疫动物得到可分泌抗体的B细胞外，还可以将未免疫的小鼠脾脏取出，在体外进行免疫，从而大大加快制备周期，其基本方法是：取出未免疫小鼠的脾脏，处理成为单个细胞，然后在完全培养基中培养，同时加入一定浓度的抗原刺激其产生抗体。需要注意的是，这种方法由于不存在完整的免疫应答路径，所以只能产生出亲和力不成熟的IgM型的抗体，大部分实验中基本不能使用这种抗体（除非是专门研究IgM抗体特性）。

[font='Segoe UI'][color=#05073b]当您购买抗体时，需要考虑很多因素。比如，抗体是否能在您的细胞或组织模型中发挥作用？是否在您要使用的应用中经过测试？有时候，由于您的选择有限，很难找到所需的东西，但在其他情况下，可能有几种试剂似乎可以在您的实验中使用。[/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b]如果您正在寻找针对同一靶点的单克隆、多克隆或重组抗体，那么它们之间的区别是什么呢？哪一个更优越呢？还是它们都是为不同目的而设计的？这是一个复杂的问题，但绝对值得一问。[/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][font=Segoe UI]多克隆抗体是由不同[/font]B淋巴细胞群体产生的抗体的异质混合物，这些细胞可以识别同一免疫原内的不同表位。多克隆抗体通常在兔中产生，但也可以在其他动物如绵羊、山羊、马和啮齿类动物中产生。多克隆抗体的产生通常涉及收集被免疫动物的血液，分离免疫球蛋白级分，并进行亲和纯化以去除非特异性抗体群。[/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][font=Segoe UI][url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体[/b][/url]是由单个[/font]B细胞克隆产生的同质抗体，这种抗体可以识别免疫原内的单个表位。所有的单克隆抗体都是从多克隆抗体库中筛选和克隆而来的。单克隆抗体通常由啮齿类动物、兔和骆驼科动物产生，并根据所需抗体的种属和类型通过各种方法进行生产。传统上，单克隆抗体是通过永生化B细胞的稳定克隆产生的，这些细胞是在小鼠中注射和收集腹水或培养表达抗体的B细胞的过程中获得的。[/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b]总的来说，单克隆抗体和[url=https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services][b]多克隆抗体[/b][/url]在产生方式及应用上都有一定的区别。在选择使用哪种抗体时，需要根据具体的实验需求和应用场景进行决定。同时，无论使用哪种类型的抗体，都需要在预期的应用场景中进行正确的验证，以确保实验结果的准确性和可靠性。[/color][/font][table][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333] [/color][/font][/b][/td][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]多克隆抗体[/color][/font][/b][/td][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]单克隆抗体[/color][/font][/b][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]开发和生产成本[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]开发和生产便宜[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]开发昂贵，生产费用不高[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]开发和生产的技术专长[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]低[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]高[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]开发时间[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]短（在四个月内免疫纯化的多克隆抗体）[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333][font=微软雅黑]长（需要多轮克隆[/font][font=微软雅黑]/选择才能分离到同质）[/font][/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]验证时间[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]初步验证后，必须重新验证每个新取血或批次以确保一致性[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]生产方法可确保更高的一致性，但强烈建议在生产运行之间进行重新测试[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]寄主种属[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]兔、绵羊、山羊、马、鸡[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]小鼠、大鼠、兔、豚鼠、羊驼、美洲驼[/color][/font][/td][/tr][tr][td=1,2][b][font=微软雅黑][color=#333333]生产方式[/color][/font][/b][/td][td=1,2][font=微软雅黑][color=#333333]从血清中收集和纯化[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#616161]从腹水或培养的细胞上清液中收集和纯化[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][color=#616161]重链和轻链在哺乳动物细胞系中的重组表达[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]敏感度[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]由于识别多个表位而提高了灵敏度，是低丰度蛋白的理想选择[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]灵敏度取决于抗体对目标表位的亲和力，大多数克隆是根据亲和力和功能性选择的[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]特异性[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]由于多价而可能导致脱靶反应[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]由于单价相互作用，特异度更高[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]一致性[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]由于免疫原性漂移和其他因素而导致批次间差异的风险[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]由于选择和生产方法，批次间高度一致[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]亲和力[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]由于抗体的异质性只能估算[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]由于表位和抗体的单价性质，可测量[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]能够与染料和其他官能团结合？[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]Yes[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]Yes[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]应用[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]WB、IP、IF/IC、IHC、流式、ChIP、ELISA[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]WB、IP、IF/IC、IHC、流式、ChIP、ELISA[/color][/font][/td][/tr][tr][td=1,3][b][font=微软雅黑][color=#333333]稳定性[/color][/font][/b][/td][td=1,3][font=微软雅黑][color=#333333]高[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333] [/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][color=#616161]兔单克隆抗体：高[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][color=#616161]小鼠单克隆抗体：中等[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]用作伴随或临床诊断？[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]很少[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]Yes[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]用作治疗剂？[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]很少[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]Yes[/color][/font][/td][/tr][tr][td][b][font=微软雅黑][color=#333333]能够在遗传水平上工程化抗体（人源化等）？[/color][/font][/b][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]否[/color][/font][/td][td][font=微软雅黑][color=#333333]Yes[/color][/font][/td][/tr][/table][font=Calibri] [/font][font=宋体]义翘神州提供单抗和多抗全方位服务，单抗包含[/font][font=宋体]①快速鼠单抗制备服务[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]从免疫动物到获得阳性克隆，仅需[/font][font=Calibri]60[/font][font=宋体]天。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②标准鼠单抗制备服务[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]提供具有高特异性和高亲和力的小鼠单克隆抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③兔单克隆抗体制备服务[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]能识别人、小鼠和大鼠的新型靶点表位，具有高特异性和高亲和力。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体制备服务[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]多种类型：全长抗体、嵌合、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]和双抗等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]⑤单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体开发服务[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞高通量筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥定制磷酸化抗体服务[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]与非磷酸化多肽的交叉反应[/font][font=Calibri]1:256,000[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri][font=Calibri]②[/font][font=宋体]快速兔多克隆抗体开发服务[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]周期[/font]: 45[font=宋体]天[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri][font=宋体]周期短，使用快速免疫方案，保证[/font]ELISA[font=宋体]效价[/font][font=Calibri]1:256,000[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri][font=Calibri]③WB/IHC[/font][font=宋体]保证型兔多克隆抗体服务[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]周期[/font]: 15-19[font=宋体]周[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri][font=宋体]保证交付满足[/font]WB/IHC[font=宋体]应用的兔多抗。[/font][/font][font=宋体]更多详情可以关注：[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services][u][font=宋体][color=#0000ff][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services[/font][/color][/font][/u][/url][font=Calibri] [/font][font=宋体]单抗：[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][u][font=Calibri][color=#0000ff]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/color][/font][/u][/url][font=Calibri] [/font]

做毛细管电泳的新手，求能够有效分离单抗轻重链并进行回收的实验方法，商品化的试剂盒最好。现在在做的一个单抗异质性很多，希望能将轻重链分离后再检测

大侠们，请问：在做动态光散射的时候，需要过滤溶液。但是，如果是聚集体溶液的话，过滤以后，聚集体不就全留在滤纸上了吗？比方说，我要测量多肽在溶液中的聚集状态，大于500nm，但是文献上都用0.2微米（200nm）的过滤装置，聚集体能通过吗？

大家说说单抗的杂质分析，该分析些什么，该怎么分析呢？[em0806][color=#DC143C][size=4]单抗是什么？请楼主说明，谢谢。[/size][/color]

[font='calibri'][size=13px]融合蛋白[/size][/font][font='calibri'][size=13px]是什么？[/size][/font][font='calibri'][size=13px]融合蛋白和单抗的区别[/size][/font][font='calibri'][size=13px]及优势？[/size][/font]融合蛋白是指将目标蛋白与免疫球蛋白融合而产生的新型重组蛋白，其中，目标蛋白可以是细胞因子、受体、抗原肽或者其他具有生物学活性等功能蛋白质。融合蛋白具有较强的生物活性，还具有一些抗体性质，可以用于疾病治疗，可以通过延长血浆半衰期，加强其治疗能力，同时，降低肾小球清除率，可以提高药物在体内的药物浓度。单抗即单克隆抗体，是由单一的B细胞克隆产生的抗单一表位的抗体，具有多个优点，包括高度的特异性：能够特定的针对单一的抗原表位，选择性的杀伤靶细胞，具有更强的疗效；安全性：由于单抗只针对靶细胞，对机体的其他细胞影响不大，相比其他药物不良反应少；多样性：不同的单抗结合，不同的抗原表位作用机制各不相同，可以针对不同的疾病选择相应的单抗。融合蛋白和单抗具有各自的优点和作用特点，近年来，对这两种相关药物的研究越来越多，对于一些恶性肿瘤等相关性疾病的治疗得到了较大的提高。因此，融合蛋白和单抗具有上述区别，但用于疾病的治疗各自有优势。单克隆抗体定制服务推荐：义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商，目前已成功交付了数以万计的抗体项目，客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。针对定制单克隆抗体，义翘神州提供了一套全面的解决方案。我们将与您通力合作，完成从抗原设计、纯化和抗体验证的完整过程。义翘神州拥有包括杂交瘤、噬菌体抗体库和单B细胞在内的抗体发现平台， 我们可根据您感兴趣的靶点、抗体应用和时间表等，来选择最合适的技术平台。 此外，义翘神州还提供ELISA、WB、流式细胞术、IHC、基于细胞的筛选、亲和力检测等多种表征和筛选技术，确保最终鉴定到最佳的抗体，以满足研究、诊断和治疗领域等应用。单克隆抗体定制服务：https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services

[center]研究称贝伐单抗导致静脉血栓栓塞风险增加[/center]一项新的荟萃分析结果显示，一种目前正在广泛使用的新一代抗癌药物贝伐单抗（商品名Avastin），可能会导致患者腿部或肺部静脉血栓栓塞风险增加。 此项研究由美国纽约Stony Brook大学的Shobha Rani Nalluri博士及其同事完成，其结果发表在11月19日出版的《美国医学会杂志》上（JAMA，2008,300（19）：2277-2285）。 贝伐单抗是一种血管生成抑制剂类抗肿瘤药，它能阻止和延缓新生血管的生成，阻碍肿瘤的生长及转移。由于贝伐单抗具有较好的肿瘤靶向性，以及对许多类型的实体瘤，如结肠直肠癌、肾癌、乳腺癌和非小细胞肺癌（NSCLC）等均有良好的治疗效果，因此这种新一代抗癌药物在临床上得到了广泛的应用。 静脉血栓栓塞是癌症患者的一种常见并发症和致死因素，同时，越来越多的证据表明，多种抗癌药均能够明显增加癌症患者血栓形成的风险。以往的一些临床研究显示，贝伐单抗也有增加癌症患者血栓形成的倾向，但是由于这些研究涉及的病例数较少，所以一直都无法得出具有统计学意义的结论。为此，Stony Brook大学的研究人员对目前已完成的共纳入7956名不同类型晚期实体瘤患者的15项随机对照临床试验数据进行了荟萃分析，以期解开贝伐单抗是否会导致静脉血栓栓塞风险增加这一谜团。 最终，此项研究的结果显示： 1. 接受贝伐单抗治疗的患者中，有11.9%出现不同程度的静脉血栓栓塞，其中有6.3%属于严重的具有临床意义的静脉血栓栓塞。 2. 与未接受贝伐单抗治疗的患者相比，接受贝伐单抗治疗的患者出现静脉血栓栓塞的风险相对增加33%。 3. 与未接受贝伐单抗治疗的患者相比，接受贝伐单抗治疗的患者出现各种类型静脉血栓栓塞的总风险以及出现严重静脉血栓栓塞的风险均有明显增加。 4. 大剂量（5mg/kg/wk）和小剂量（2.5mg/kg/wk）贝伐单抗治疗，均可导致静脉血栓栓塞风险增加。 5. 贝伐单抗导致各类型静脉血栓栓塞的风险高低与癌症种类有关。 6. 各类癌症患者应用贝伐单抗后出现静脉血栓栓塞的风险排序为：结肠直肠癌（19.1%），NSCLC（14.9%），乳腺癌（7.3%）和肾癌（3.0%）。 研究者得出最终结论，认为贝伐单抗可使癌症患者静脉血栓栓塞风险明显增加，这种风险不仅来自于严重程度较低的静脉血栓栓塞，而且还来自于更为严重的具有临床意义的静脉血栓栓塞。研究者同时认为，此项研究将有助于临床医生和患者进一步认清贝伐单抗导致静脉血栓栓塞的危险性。虽然临床医生和患者无须因此而停止使用贝伐单抗，但在今后的使用过程中应对可能出现的血栓形成症状保持更高的警惕性。信息来源:医药经济报

一些分子聚集成组装体后，分子在组装体内的氢会被屏蔽掉有什么办法，在不破坏聚集体的前提下，解决这个问题？

从人类发明这个技术开始，单抗制备已经有37年的历史了，这37年以来，主流单抗制备的基本主线几乎没有什么改变，也就是下面这个流程： 抗原制备 动物免疫 细胞融合 克隆筛选 克隆化（亚克隆） Large-scale生产、纯化以及鉴定 但是不同的研究人员从不同的角度和细节对整个流程有了独到的视角，这里我简单地总结一下近十年以来的发展和前人的经验，基本都是站长自己道听途说，加上参阅一些文献总结出来的， 十年以前的技术革新择重点简要提一提。 抗原制备进展 抗原，基本上分三类： 蛋白、多肽和小分子化合物。 一般的制备过程没什么好说的了， 主要说多肽和小分子连载体的事。 多肽和小分子因为免疫原性弱，所以必须连接载体才能诱发免疫应答。 最常用的基本上就是KLH, BSA,OVA和GST， 但是觉得近几年以来，用多肽复合抗原肽（MAP）的比较多。其原理是把多肽或小分子连在多聚赖氨酸的骨架上，而多聚赖氨酸因为其结构具有高度重复性，所以不会像KLH等载体一样使动物产生抗体，这样就不会浪废有限的免疫系统资源。 毛病是这种形式的抗原在制备成本上贵许多，我记得一个MAP的制备报价大约在1500元人民币左右。 从获取方式来看，对于蛋白质类抗原，不仅可以重组表达（原核和真核）， 还可以直接从天然组织或细胞中分离。早期的时候人们经常干这种事，那是因为当时没有现在这么普及的分子生物学技术，很难得到重组蛋白。 但是最近20年以来，基本上都用重组蛋白了，重组蛋白生产技术非常成熟，而且生产也简单，容易扩大规模，但是慢慢地很多人意识到重组蛋白和天然的蛋白在结构上有时候有着极大的差异，所以不少人认为确实是天然蛋白免疫得到的抗体是最好的，有兴趣可以看看这篇文章：Generation and Characterization of a Panel of Monoclonal Antibodies Against Distinct Epitopes of Human CD146，一个典型的从天然组织中纯化出蛋白作为抗原制备单抗的例子。 在抗原的形式上，也是各式各样，根据自己的需要有不同的喜好，大部份人都推荐接近天然构象的蛋白，即使是重组蛋白，buffer 也尽量gentle， 另一些人则喜欢跑胶然后切胶打动物，还有的转膜后剪膜免疫动物（这一个通常和从天然组织中纯化的方法联用）。 还有人喜欢用过表达的细胞或转化的细菌作为免疫原（当然也有全细胞或者细胞组份裂解液作为免疫原的，此乃后话）。对于做免疫组化用的单抗制备，则还有更特殊的处理手段。 另一些人则认为，用DNA直接免疫也许更好。其方法是把cDNA连到真核表达载体中，然后直接注射动物，在佐剂的作用下载体就带着cDNA进入动物细胞，然后在动物细胞就有目的蛋白表达出来，这些蛋白从细胞释放出来后就可以引起免疫应答（整个理论还没有建立完整，一切都在YY中）， 这种方法免疫中，现在缺少有效的佐剂，所以免疫效果很难保证，不过在比较低的效价下，很多人也可以得到阳性克隆。 说了这么多，还是很沮丧，虽然看起来选择很多，但是能真正用到工作中的选择并不多，有时候是条件问题，有时候则是成本和精力问题。第一个话题就写这么多吧。 动物免疫 动物免疫故事比较多，简单点说。 实验动物的选择： 做单抗的动物最开始是小鼠，后来又有像epitomics这样的公司用兔子的，还有一些人用大鼠神马的，当然其它的动物的也有，据不完全统计，现在能用传统方法制备单抗的动物已经有二三十种了。 但是最主流的还是小鼠和兔子了。兔子不讨论，epitomics对其有特殊的专利，这个基本上和咱们没关系。小鼠，用得最多的还是Balb/C了，因为大多数骨髓瘤细胞（SP2/0, X63, Ag8.653,FO和NSO）都来自于Balb/C小鼠，为了使hybridomas稳定，所以实验小鼠基本上还是Balb/C。 不过有文献提到了用NZB/W小鼠制备高同源性单抗的，原因是NZB/W小鼠是一种容易发生自身免疫疾病的小鼠模型，一般在5个月以下时基本不会发病，但是对自身的蛋白仍然有潜在的排斥反应。 免疫佐剂： 这一个方向在近十几年以来倒是发展得很快。 最开始的时候Sigma的弗氏完全佐剂和不完全佐剂一直是黄金组合（铝盐佐剂也用得比较多），但是后来人们发现CFA/IFA毛病很多，诸如不利于动物健康、刺激免疫应答周期过长等等，于是各种新式佐剂层出不穷，几乎每家试剂公司都有自己独特的佐剂。而且有效成份也多种多样，如脂质体，CpG，细胞因子，分子伴侣，特殊化学药物（如左旋咪唑）， 细菌或病毒的全部组份或部份（如LPS，肽聚糖），甚至还有一些是中草药提取物（如蜂胶、皂甙，当归多糖）…… 在形式上，大部份还是延用了CFA/IFA的油乳性质，但是这两年来免乳化佐剂在国内发展比较快，如我们现在使用的Quickantibody就是，武汉这边还有另一个产品叫赛弗诺的也与其类似，同时这些新型的佐剂对抗原的使用量要求很低，而且免疫周期也短，所以比较受欢迎，毛病是商家对机理保密，用户无法获知其可能潜在缺点。 总之最后就变成了一种根据个人喜好而选择的产品。 当然另外还有人说佐剂不是必须的，不加佐剂也可以免疫得不错，站长自己没尝试过。 免疫部位：这个没什么好说的了，也基本上是根据喜好来的，皮下、腹腔、脾内、肌肉、腋下、脚垫、静脉，各种地方免疫都说得过去，而且大家都能成功，所以这个就没什么好选择的了，不过大部份人还是认为皮下是最有效的，因为皮下含有大量的DC细胞，而DC细胞是重要的APC。 这里需要提出的是有一种叫作RIMMS的免疫方式极少人用到，但是据说效果不错。 RIMMS即多位点重复免疫（repetitive immunizations multiple sites），意思是在相同的地方低剂量短间隔重复免疫，一般是在小鼠背上皮下选择四五个点，每三天左右在这些点进行低剂量免疫，一般十几天就可以完成免疫。 大家可以看这篇文献：Rapid development of affinity matured monoclonal antibodies using RIMMS和这篇：Shorter development of immunoassay for drugs application of the novel RIMMS technique enables rapid production of monoclonal antibodies to ranitidine， 不过成功的实例中，很多人都是取小鼠的淋巴结而非脾脏进行融合的，淋巴结不好取啊。 免疫周期和间隔： 大部份人基本都同意免疫周期和免疫间隔尽量长一点比较好，这样得到的抗体亲和力更高（除了上述的RIMMS外）。 甚至有人打完第一针后，再过九个月才打第二针的，作者说效果很好，这个方法显然不适合大规模免疫，不然动物管理的压力咱们是承受不起的。另外，一些新型的佐剂则强调短周期也可以得到高亲和力的抗体的， 市场上有很多佐剂宣称两周内即可完成免疫并得到高效价的血清的，实在是太快了。另外最近有文献还对白天免疫动物还是晚上免疫动物更好这一问题作出了探讨，比如这篇：The Circadian Clock Controls Toll-like Receptor 9-Mediated Innate and Adaptive Immunity ， 作者认为一些调控免疫的分子也有生物节律性，它们的表达水生是跟随生物钟有规律变化的，在这些调节分子表达水平比较高的时候进行免疫或许可以得到更好的免疫效果。

紫外峰蓝移会H型聚集体，红移有J型聚集体形成，是成对出现的，那增减色性和红蓝移是否有关系，是不是必须红移+减色性才能说明有J型聚集体生成，还是紫外峰红移就说明有J型聚集体形成？并且增减色性是否和能量有关，增色性是指能量增加吗？

[center]近日英国NICE建议应用阿达木单抗治疗银屑病[/center]近日，英国国家卫生与临床评价机构(NICE)公布一份指南草案：对符合一定条件的严重银屑病成人患者，可以用阿达木单抗 (adalimumab )作为一种选择治疗方法。 该指南草案限制对标准全身治疗无应答或对这类治疗不耐受或有禁忌证的患者使用阿达木单抗。标准治疗包括环孢素(ciclosporin)、甲氨蝶呤(methotrexate)及补骨脂素(psoralen)加紫外线照射。NICE的指南草案建议，第16周仍对治疗无应答的患者应停止阿达木单抗的治疗。 在以往的相关指南中，NICE向同类人群推荐依那西普(etanercept)。在最近的评价中，该机构委员们称，不做出依那西普优于阿达木单抗的推荐建议，医生可根据临床情况在这两种产品中进行选择。 阿达木单抗治疗患者应是适用抗肿瘤坏死因子的治疗人群，此类患者病情严重，NICE定义为银屑病区严重指数(PASI)达到10或超过10，皮肤病生活质量指数(DLQI)超过10； 对阿达木单抗有明显应答的银屑病定义为，治疗期间PASI数值降低75%，或PASI值降低50%且DLQI减少5个点。卫生专业人员采用DLQI数值制定治疗方案时要考虑患者的身体残疾情况或者语言或沟通困难程度。 信息来源:中国医药123网

对于未来单抗仿制药市场发展值得期许，主要原因包括：　　首先，仿制药相对于原研药价格较为低廉，市场竞争力强，尤其是在需求潜力巨大的当下，对于很多消费者来说，价格高企是导致单抗不能成为主流抗肿瘤或者抗自身免疫性疾病以及其他一些疾病的主要制约因素，随着专利到期（根据相关统计，2014-2019年，美国有四个、欧洲及其他国家有6个单抗产品专利将到期。），一大批仿制药的上市，单抗将走下神坛，虽然短时间内不能实现平民化，但市场规模的大幅增长已经可以基本确定。　　其次，随着我国医药企业研发能力的不断提升，单抗仿制药在临床应用效果上也将较原研药进一步缩小。价格相对低廉、较好的用药疗效将势必带来单抗用药比率的提升。　　第三，虽然目前国家还没有明确的生物仿制药研发指导原则和相关法规，但根据相关部门透漏，目前药品监管部门已经在加紧完善相关法规了，预计政策年内就会出台。另外，国家已经正式启动了生物类仿制药监管准则的编制，预计年内就将向企业发布技术指南。前瞻产业研究院认为，国产仿制药在专利解禁期来临后尽快上市，将极大提高生物药对普通百姓的可及性，从目前国内单抗仿制药的研发进展来看，更是如此。

最近在做一个中性单抗的cIEF方法，用的是贝克曼PA800plus。在对标准品进行分析的时候发现，不同时间检测的结果，各峰的相对丰度会有变化，最高峰有时候是第二个，有时候是第四个。样品、仪器、人员、缓冲体系等条件都是一样的。各峰的pI值也很稳定。这种情况是正常的吗，这样的结果很不利于对各峰制定标准，不知道大家都是怎么做的？我采用的方法和体系基本都与贝克曼提供的一致，尿素浓度采用6M，聚焦时间是12.5min.对聚焦时间进行过优化，分别考察了10min，12.5min，15min，17.5min和20min，除了10min分离度不好外，其他结果图谱基本一致，考虑到节省时间选了12.5min。最近对结果进行分析的时候，发现各时间的电流图有点差异。聚焦结束时，17.5min电流降到最低大概1.5uA，15min 大概1.6uA，而12.5min大概1.7，1.8uA这样。是不是我选择的聚焦时间不够导致了相对丰度会有变化？如何判断聚焦时间，是电流降到最低表示聚焦充分吗？急等大神回答

如题，我做的一个单抗A用碘乙酰胺封闭二硫键，混合后产生了沉淀；用其他的单抗B样品就没事。而且其他的单抗样品B溶于单抗A的溶剂后再加碘乙酰胺也是澄清的。求问这是什么原因，有没有别的烷化剂或者别的合适的方法来封闭二硫键呢

目前已知的许多氧化还原反应都伴随着微弱的化学发光现象，但是由于其量子产率极低，往往不具有分析应用的价值。为此，必须采取某些办法提高这些氧化还原反应的速率，从而使得发光强度增强到能够用于分析化学测定。近年来，国内外分析科学家模仿生物化学发光的酶反应原理，利用溶液中的表面活性剂等分子自我组合形成胶束、反相胶束、双分子膜等分子聚集体（Organized MolecularAssemblies），或者不形成分子聚集体，但其自身可提供微观非均相反应部位的分子包合化合物、高分子电解质等作为化学发光反应的介质，实现化学发光反应效率的提高。微观非均相体系多指水溶液或其它有机溶液中的小型分子聚集体，如图1-8 所示，包括由表面活性剂和脂质形成的分子聚集体和由无机化合物的重合体形成的反应体系。化学发光常用的微观非均相体系主要包括由表面活性剂等分子聚集体组成的胶束、微乳液、二分子膜和具有独特微观非均相结构的单独分子如环糊精和高分子电解质溶液等。这些溶液外观透明，但是包含可以为化学发光反应提供特异性很高的反应微空间。而无机化合物胶体溶液目前在化学发光研究中应用较少。一般来说，微观非均相体系作为化学发光反应的介质有四种主要的效果：(1)浓缩效应。离子性分子聚集体的表面可以吸附相反电荷的离子，从而使局部反应分子的浓度增大，有利于化学发光反应速度的提高；同时，具有相同电荷的离子被分子聚集体所排斥，使反应具有一定的选择性。(2) 可溶化效应。一些在水中或者有机溶剂中难溶的反应分子、中间体、反应产物等由于其亲水性或疏水性的差异，可以在微观非均相的疏水相、亲水相或者两相的界面上得到溶解。(3) 微观介质的环境效应。介质的极性、粘度、pH 值等受到微观局部环境的作用而产生变化，可能导致化学发光反应的效率和选择性的变化。(4) 激发态分子的稳定作用。由于化学发光的能量弛豫过程往往需要比光致发光更长的时间，因此激发态的稳定性对于化学发光的强度有很大的影响。微观非均相体系的静电相互作用、疏水/亲水作用、氢键结合、电荷移动相互作用等因素的影响，可以促进反应中间体、迁移状态以及激发态分子的稳定性，从而有利于化学发光的产生。林金明等对微观非均相化学发光反应体系作了详细的综述[73]。

CE－MS联用用于单抗药物的表征，不知道有人有兴趣吗？北美做了一些研究工作，单国内没有看到有人研究。也没有人讨论啊……先发资料分享

各位大咖：　　由中国蛋白药物质量联盟主办的“2016中国蛋白药质量与技术创新研讨会” 于2016年3月，在太仓召开。关于生物药前沿进展及发展趋势的报告引发了来自生物药研发、生产、检测及 CRO企业和科研机构等参会人员的热烈讨论。而作为生物药之中的明星，单抗药物更是引来高度关注。 仪器信息网行业应用栏目，对截止到2016年3月底，仪器厂商发布在本栏目的单克隆抗体药物解决方案进行了遴选，并根据厂商解决方案的数量和质量，评选出“单抗药解决方案”排行榜。希望此榜单能够为各位仪器用户在选购相关解决方案和仪器设备时提供一定参考。此项工作会持续进行，榜单每月定期更新一次，欢迎大家持续关注。同时，我们也会在相关合作学会、协会、联盟等举办的各种学术活动上对本活动进行宣传推广。 想知道谁排第一名么？请点击“单抗药解决方案”排行榜链接：http://www.instrument.com.cn/zt/dankangyaophb 欢迎各位大咖吐糟评论！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gif

CE－MS联用用于单抗药物的表征，不知道有人有兴趣吗？北美做了一些研究工作，单国内没有看到有人研究。也没有人讨论啊……先发资料分享

如题，用CE-SDS方法分析单抗，做了一段时间，也有了一些数据，但不知道该怎样准确理解这些数据。首先Becman提供的一个文献里（见附件），作者测了一个已知NG（non-glycosilation)含量为9%的IgG,分别在reduced和Non-reduced条件下测定。结果是，两个条件下测出的NG含量基本一致，接近理论值，并且重链和轻链的比例也是接近2.而我现在做的那个抗体，在reduced条件下和在non-reduced条件下测得的NG含量差异较大，reduced条件下的要明显低于non-reduced的。并且重链和轻链的比值不是接近2，而是2.5。我用PNG酶切过之后，NG出峰位置含量明显增加。另外我还做了几个stressed的样品，比如双氧水氧化的，比较明显的是在Intact-mAb(non-reduced条件）和重链前（reduced)出现很大的峰。下面是几个问题：1. 理论上，reduced条件下测得的NG含量应该是和Non-reduced条件下测得的接近（同文献）还是说其实这是CASE BY CASE的？因为是和UV吸收有关，如果几个有紫外吸收的氨基酸在轻重链上的分布不均衡，比如在轻链上更多，那轻链的响应值就会比较高，这样轻重链的比值就不是简单的1:2了。而NG的含量在两个条件下也就不一定相关了。2、双氧水处理之后产生了Mw不一样的峰，可能是什么东西，是破坏了什么键产生的？3.为什么单抗的CE-SDS分析通常都做还原和非还原的条件，二者所得的数据是怎样互补的？谢谢大家的答疑解惑，欢迎交流！补充一个疑问，是关于还原和非还原条件的。还原条件用的是巯基乙醇，打开二硫键；非还原条件用的是250mM的碘乙酰胺。我经常在文献上看到是这么说的：还原时先用巯基乙醇打开二硫键，然后再加烷化剂碘乙酰胺保护已生成的巯基，避免重新生成二硫键。然后我就很纳闷，那为什么再做CE-SDS的时候，还原时用了巯基乙醇后不再加烷化剂保护巯基，而非还原的时候为什么要加碘乙酰胺，是要保护单抗中的游离巯基么（没理由啊？？）

用广角衍射峰的半高宽可以得出一个晶体的平均尺寸来,这个尺寸到底是一个什么样的概念啊?如果有好几个单晶聚集在一块抱成一团,那么xrd得出的尺寸到底是指这几个单晶的平均尺寸还是聚集体的尺寸呢?我的理解是广角能得到几个单晶的平均尺寸,不管单晶有没有聚集,在广角中体现不出来.但是小角得到的是聚集体的平均尺寸.不知道我的理解正确否?请高手指点!还有一个问题:根据广角半峰宽计算出来的晶粒尺寸是否就是实际对可见光造成散射的粒子尺寸?如果广角结果显示晶粒尺寸小于可见光半波长,是否能说明这些晶粒对可见光不造成散射呢??谢谢!谢谢!

[font='calibri'][size=13px]人源化抗体和全人源抗体区别[/size][/font][font='calibri'][size=13px]？[/size][/font][font='calibri'][size=13px]义翘[/size][/font][font='calibri'][size=13px]抗体人源化[/size][/font][font='calibri'][size=13px]服务内容[/size][/font][font='宋体']人源化抗体和全人源抗体区别:[/font][font='宋体']根据单克隆抗体的来源不同，可分为鼠源抗体、嵌合体抗体、人源化抗体和全人源抗体。[/font][font='宋体']所谓的全人源单抗，就是基因来源100%都是人源的。不过，事实上全人源单抗也是在小鼠身上产生的，通过把产生抗体相关的人类基因转移到小鼠，此后小鼠体内的抗体结构可以跟人类抗体结构一样。所以全人源抗体直接用人体[/font][font='宋体']细胞制作的抗体，只是抗体结构100%按照人类基因编码而成。[/font][font='宋体']人源化单抗则是大部分来源是人源，同时融合了鼠源成分。近年来，科学家通过基因工程特意将鼠抗的关键有利基因结构保留在人源框架上，起到特殊的作用，就像优化再加工(2l。例如，依奇珠单抗(人源化单抗)中保留了1.8%的鼠源成分，这部分整合了优势有利的基因，成就了依奇珠单抗的高亲和力，其起效速度快可能也和其亲和力高有关。[/font][font='宋体'] [/font][font='宋体'] [/font][font='宋体']义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url]：[/font][font='宋体']抗体人源化[/font][font='宋体']非人源性抗体进入人体内会引起严重的机体排异反应，进而影响抗体在临床应用时的安全性和治疗效果。抗体人源化通过基因改造，使鼠源抗体具有与人体内抗体类似的结构，从而逃避免疫系统的识别。抗体人源化经历了从嵌合抗体到CDR移植、SDR移植等技术演变，力求在保持高亲和力、高特异性结合能力的同时克服传统鼠源抗体的免疫原性，在肿瘤治疗等领域具有极为广泛的应用前景。[/font][font='宋体']义翘神州利用CDR置换技术及计算机辅助结构模拟设计可对鼠源单抗等进行人源化改造，保证人源化程度 95%，为客户提供优质的单克隆抗体人源化服务。[/font]

什么是炭黑的体积密度？ 根据炭黑的结构和其物理形态，炭黑的体积密度在各种级别的炭黑中差别很大。 由于存在封闭空气，炭黑的体积密度低于炭黑的真密度（比重）。 什么是炭黑的保质期？ 储存于环境条件下时，炭黑不易受分解的影响，其保质期不受限制。 随着时间推移，炭黑会吸收湿气，直至达到一个均衡值。 如果湿气影响很重要，则应将炭黑储存于干燥环境下，并尽可能密封。 DBPA：什么是邻苯二甲酸二丁酯吸油率 (DBPA)？ 邻苯二甲酸二丁酯吸油率是一种用于定量炭黑等级的结构特性数量的技术。 较高的邻苯二甲酸二丁酯吸油率数值对应较高的炭黑结构。 为什么黑墨在不同表面上表现出不同的性能？ 由于油墨是一种非常薄的膜，炭黑和载色剂往往会渗入多孔表面，从而允许更多的基体突出此薄膜。 与浆状油墨相比，这种效应在液体油墨中更为明显。 高结构炭黑往往比低结构炭黑渗入较少。 什么使炭黑具有导电性？ 炭黑在很大程度上是由类石墨碳层组成。 与石墨类似，炭黑显示出导电能力，并具有相对较低的电阻（即， 它是一种半导体）。 什么是乙炔炭黑？ 乙炔炭黑是通过乙炔的放热分解反应制成。 因此，它是非常纯的炭黑。 它是所有炭黑中最接近石墨的，通常用于提供导电性。 什么是炭黑的热导率？ 关于炭黑热导率的现有数据很少。 关于含炭黑的橡胶化合物与不含炭黑的橡胶化合物的热导率研究表明，炭黑提高了橡胶产品的热导率。 什么是炭黑聚集体的粒径？ 炭黑聚集体的粒径取决于炭黑的等级，每个等级的炭黑具有其自身的平均聚集体粒径。 平均聚集体粒径通常在 0.01 到 1.0 微米的范围内。 什么是着色强度？ 着色强度以油料中的炭黑和氧化锌组成的浆料的反射比测量为依据。 其用于度量炭黑降低反射光数量的能力。 通过减小初次颗粒的粒度可以获得更高的着色强度。 [align=ce

当地时间3月20日有超2万人聚集在德国卡塞尔市进行抗议，反对疫情严格管控，当地警方动用了水炮，胡椒喷雾等器具维持秩序。