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大鼠尿液

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  • 大咖面对面|高友鹤:尿液蛋白质组学 实现更早期的诊断
    原创 飞飞 赛默飞色谱与质谱中国关注我们,更多干货和惊喜好礼生物标志物是与机体生理及病理状态相关的可监测到变化的生化指标,蛋白质组学是精准医学中生物标志物研究至关重要的一环,其最终目的也是为了指导临床,服务精准医学。尿液可以被连续、大量、重复收集并便捷、稳定地保存,且组分相对简单,易于分析,是理想的标志物研究样本。我们邀请了20余年来一直从事尿液蛋白质组学研究、北京师范大学生命科学学院的高友鹤教授,他分享了课题组应用尿液蛋白质组学技术进行的相关研究及重要成果、尿蛋白质组面临的机遇与挑战。北京师范大学生命科学学院 高友鹤教授尿液生物标志物 实现更早诊断✦ ✦ ✦ ✦ 尿液可以更早期、更敏感地发现生理病理的线索。近年来,高友鹤教授团队不断拓展尿蛋白质组在医学上的应用边界,从最开始的大器官、弥漫的病变,到更小的、更不容易被发现的疾病研究。甚至一些需要越过很多屏障的生理病理研究,如血脑屏障、胎盘屏障等。结果都很令人兴奋。甚至正常人的生理变化都能反映出来,比如说有没有运动,有没有打疫苗等等。假如疾病发现得早,医学工作者就有更多的机会能够阻止疾病的发展,或者让病程发展减慢,或者减少并发症等。在医学上,早期诊断至关重要,甚至比治疗更重要。尿液样本保存新方法✦ ✦ ✦ ✦ 尿液组成简单,细胞较少,尿里蛋白足够多而且都是水溶性的。因此从技术上来说,尿液检测比血液检测更简单。尿液研究的难点在于样本保存。高友鹤教授指出,尿液里占大量体积的其实是无效的水分,所以只需去除水分,富集包含信息量的“干货”即可。//团队使用特殊的膜来吸附有效成分,滤除水分并吹干膜,再用真空袋密封。这种保存方法隔绝了氧气和水分,可使尿液样本保存得更好,成本更低。这项规范化的尿液样本方法为尿液标志物的研究奠定了基础。尿液蛋白质与中药整体化研究✦ ✦ ✦ ✦ 高友鹤教授团队也开展了中药的相关研究,以往大多数中药研究思路都是将单个中药材分离纯化,再寻找其中的有效成分,然后再开展药效研究。这种研究方式对中医的一些理论可能受到影响,无法反映中药成分之间的协同作用和互相抵消作用。利用尿液蛋白质组,可开展研究中药的整体研究效果。团队最近开展了相关探索,用中成药饲喂动物后,观察其尿液蛋白质组的整体变化。这是一个很好的整体化研究中药的方式。与赛默飞的不解之缘✦ ✦ ✦ ✦ 超高分辨液相色谱-质谱联用仪是尿液蛋白质组学研究的主要分析平台。高友鹤教授说:“我从美国回来的时候了解到,赛默飞的质谱仪更适合做蛋白质组,所以我们开始尝试买了最早的版本LCQ。从那时起,我们实验室从最早的LCQ、LTQ、到现在的Orbitrap Fusion Lumos三合一质谱,基本上都是用的赛默飞的系列质谱仪。”赛默飞质谱仪“质谱仪是一类高端的精密分析仪器,因此很多单位都有专人负责,而我们实验室至今从未有过专人负责。”高友鹤教授表示,“这意味着仪器的大部分使用者是我们的研究生,并没有专门的仪器维护经验。在这种情况下,赛默飞的质谱仪能够陪伴我们到现在还能持续工作,这说明赛默飞的仪器非常皮实稳定。”“希望未来的质谱仪器能更好用,像傻瓜相机一样简单易用,最理想的是,仪器公司能够做更多的配套设备,比如在临床检测中,尿液能通过自动化处理得出蛋白质组数据,把分析出的临床相关信息反馈给医生,描述出病人的病理及生理学状态。”尿液检测应得到更多重视✦ ✦ ✦ ✦ 从疾病到健康的转变,实际上就是从相对晚期到相对早期的转变。在这个转变的过程中,尿液能起到的作用,超过了其他的体液,应该受到更多的重视。希望现阶段的研究能够更多更快地应用到临床领域,造福人类。同时,希望能够产学研多方合作,实现低成本、自动化等满足临床的分析需求的标准流程。人物简介1990年,高友鹤获中国协和医科大学医学博士(MD),后赴美获美国康涅狄格大学生物医学博士,并在美国哈佛医学院工作;2001年起获聘中国医学科学院特聘教授,任基础医学研究所病理生理学系教授。2014年12月获聘北京师范大学生命科学学院教授。曾获全国优秀博士论文指导教师,国家杰出青年基金,新世纪百千万人才国家级人选。现任《Urine》杂志创始主编,中国生化分子生物学会蛋白质组学分会理事等。如需合作转载本文,请文末留言。
  • 爱拓-尿液比重折射仪成功被临床医学反兴奋剂中心应用
    摘要:介绍广州市爱宕科学仪器有限公司UG-&alpha 尿液比重测量仪,PAL-10S 数字式手持袖珍尿液比重折射仪两款产品在临床医学应该过程中所展示的功能及便携性。 关键词:尿液比重测量仪 液比重折射仪 优点:通过折光率与尿比重曲线,可以直接读取尿比重值,针对温度变化的自动温度补偿。 选型提示:人类、犬类、猫科等其折射率与尿比重的对应曲线是不同的,可以因检测对象不同对应选择相应的型号。 成功被应用单位举例:北京反兴奋剂中心 前言: 各界奥运会的举行,在兴奋剂检测工作中,由于兴奋剂药物及其代谢物的种类多,变化大,禁用的百余种药物以原体或一个或多个代谢产物的形式存在于人体体液中。而尿液检测的方法具有取样方便,检验快速准确,对人体无损害,在尿液中的残留药物浓度高于血液中的药物浓度以及其他干扰少等原因,使其成为兴奋剂检测中的一个重要手段。pH是尿液样本中的一个重要数值,它和尿液的比重值一起成为判断尿液取样真实性的重要监测指标。但是由于其浓度很低,检测仪器必须有极高的精确度以及良好的数据重复性。ATAGO(爱拓)临床折射仪主要应用于临床尿比重和血清蛋白检测,在临床应用中,尿检通常应用于肾功能评估、肝功能中血清蛋白指标诊断。体育运动员的尿检通常有小弟反应出其身体脱水状况,虽然不同的运动员结果有差别,但是常规数值在1.015-1.020之间。爱拓仪器公司的两款产品UG-&alpha 尿液比重测量仪,PAL-10S 数字式手持袖珍尿液比重折射仪因其良好的精确度和稳定性被世界多家兴奋剂检测实验室采用,更得到肯定好评.并且在临床医学应用领域取得卓越的成效。 尿液比重折射仪临床应用展示图: 猫狗专用尿液折射仪 体育运动员专用尿检测量仪,医院尿临床实验专用尿比重计 尿液比重折射仪参数展示: PAL-10S是迷你型数字式尿比重折射仪。易于操作,将样品滴在菱镜上面按开始键后测量值很快就可以显示。 型号 PAL-10S 货号 4410 测量范围 尿液比重 1.000 至 1.060 溶解值 尿液比重 0.001 测量准确度 尿比重标度± 0.001 测量温度 10 至 35° C (自动温度补偿) 环境温度 10 至 35° C 样本量 0.3毫升 测量时间 3 秒 电源 2 × AAA 电池 国际保护等级 IP65 无尘且对喷射水柱具防护作用 尺寸重量 55(W)× 31(D)× 109(H)毫米, 100公克(不含零件的重量) 选件 &bull PAL保管箱 : RE-39409 &bull PAL携带连 : RE-39410 UG-&alpha 尿液比重测量仪 新产品数字式尿液比重折射仪. UG-&alpha (alpha)这新款是以UG-1为基础制造. 将最小标度改进为0.0001. 型号 UG-&alpha 货号 3464 测量范围 尿液比重标度 1.000 至 1.0600最小显示单位 尿比重标度 0.0001 测量准确度 尿比重标度± 0.0010 测量温度 10 至 35° C (自动温度补偿) 环境温度 10 至 35° C 样本量 0.3毫升 测量时间 3 秒 电源 006P 干电池 ( 9V ) 国际保护等级 IP65 无尘且对喷射水柱具防护作用 尺寸重量 17× 9× 4公分, 300公克 (不含零件的重量) 结束语 尿比重是表示尿中溶解物质浓度的指标。测定尿比重可以粗略估计肾脏浓缩功能,尿比重的测定方法有多种,以往我们使用比重计法测尿比重操作较繁琐,后来由于折射仪法所需标本量少,结果判断方便,使用者很多,近几年,尿干化学分析仪检测法为尿液化学成分的检查提供了快速、可靠、客观。通过以上分析,ATAGO(爱拓)尿液比重折射仪在临床医学的应用得到了医学界广泛的认可。 本文来之:广州市爱宕科学分析仪器有限公司
  • 本土企业贴牌生产尿液分析仪等 产值上亿
    从2010年开始,世界500强企业西门子公司的健康诊断仪器——尿液分析仪,将全部实现“重庆造”。重庆天海医疗设备公司已经与西门子美国健康诊断公司签订全球合作协议,从2010年开始为西门子贴牌制造尿沉渣仪器、尿液分析仪、尿分析试剂等产品,预计年产值达到上亿美元,这也将是重庆制造的第一台符合美国FDA(美国食品药物管理局,是全球医疗审核权威机构)认证的产品。   重庆天海医疗设备公司董事长鲁广洲介绍说,根据双方签订的全球合作协议,今后将由西门子提供经费,双方在同一个开发平台、使用一个开发工具开发产品,全过程严格按美国FDA的标准来进行。   据悉,目前重庆天海在南岸长江工业园投资1.2亿元建设占地142亩的天海医疗工业园,其中3万多平方米的新厂房,预计将在2010年正式投产。
  • Scientific, reports: ,哇!尿液气味改变可,预测老年痴呆?!
    阿尔茨海默病是最常见的一种痴呆病症,在美国,65岁以上的患者大约有五百一十万。目前,在患者生前,并没有任何一种诊断方式可以确诊阿尔茨海默病。尽管现在我们并不能阻止或是逆转这种疾病的进程,然而,一种准确的诊断,可以让患者及他们的家庭为将来做好打算,并寻求减轻症状的治疗。 近日,来自于美国农业部,Monell中心的一项最新研究发现,在小鼠的阿尔茨海默疾病模型上,有一种特异的可识别的气味的特征。这种特异的尿液气味的出现,早于显著性的阿尔茨海默病大脑病理学的发展,这个发现提示,也许我们可以开发出一种非侵入性的工具,来早期诊断阿尔茨海默病。 这项研究结果最近在线发表在Scientific Reports杂志上,研究人员们利用APP小鼠模型,即模拟阿尔茨海默大脑病理特征的小鼠模型,开展了这项研究工作。利用行为学和化学分析,研究人员们发现,每一批APP小鼠所产生的尿液气味谱,都可以与对照组区别开。而且,这种气味的改变,并不是因为新化合物的产生,而是尿液中现有化合物浓度的相对变化。另外,这种气味的改变与年龄无关, 且出现在大脑病理变化改变之前。这些发现表明,尿液的气味特征可能与某种潜在基因的表达有关,而不是由大脑的病理改变发展引起的。这种特征性气味的改变可以来预测阿尔茨海默病。 值得注意的是,目前这项研究是在小鼠模型上开展的,研究人员仍需进行大量的,对人类阿尔茨海默病患者尿液气味改变的研究。希望在不远的将来,这种非侵入性的监测方法可以作为一种气味标识,用来预测阿尔茨海默病。
  • PanGIA生物技术公司融合AI与尿液活检技术,助力癌症早期检测
    随着对癌症相关研究的深入,化学治疗、靶向治疗、免疫治疗等治疗手段不断推陈出新,癌症治疗水平得到了长足的进步。而癌症患者的精准治疗离不开分子生物学及诊断技术的发展,液态活检作为新兴的检测技术在肺癌临床中的应用日趋成熟。而尿液检测是临床最常见的检测项目之一,不仅可以反映肾脏、肝脏、泌尿系统、内分泌系统等疾病状况,也可间接反映全身代谢性及循环等系统的功能。在生物医学研究中,蛋白质组学被广泛应用于生物标志物(Biomarkers)的发现和鉴定。随着技术的发展,尿液蛋白质组学分析成为备受关注的生物标志物发现研究领域之一。一方面,尿液中含有由肾脏滤过的血浆蛋白质以及由泌尿系统分泌的蛋白质,通过分析尿液中的蛋白质组成,可以了解人体健康状况和疾病状态的变化。另一方面,更重要的是,与变化较为稳定的血液蛋白组相比,尿液蛋白组能够更早期、更敏感地反映身体内由于疾病而产生的变化。再加上尿液作为一种无创可得的样本,使得尿液成为疾病诊断,尤其是早期检测的生物标志物的理想样本之一。因此,尿液也被誉为寻找生物标志物的“金矿”,挖掘这个潜在金矿可能会极大地加快精准医疗的发展。图源:PanGIA总部位于美国的生物技术公司PanGIA即将完成一个为期三年的关于前列腺癌液体活检的临床研究。同时,PanGIA公司计划启动额外的临床研究,目标是实现各种癌症类型的早期检测,所有这些研究都将由PanGIA液体活检平台提供支持。PanGIA液体活检平台是什么?PanGIA 是一种基于尿液的非侵入性机器学习驱动的生物分子特征液体活检平台,目前该领域还存在很大的空白。这项创新技术融合了人工智能(AI)和基于尿液的液体活检技术,旨在对癌症进行早期诊断、监测和管理,从而有可能挽救无数生命。通过在全球范围内提高癌症诊断的可用性和可扩展性,PanGIA液体活检平台有望改变癌症检测和治疗方式。这项研究最初在2020年获得IRB(伦理审查委员会)批准并开始,招募了在美国各地进行前列腺活检的泌尿科医生。虽然研究结果尚未公布,但结果的高灵敏度和特异性催生了PanGIA生物技术公司计划进行进一步研究。该公司现在正在准备在另外10种癌症类型上开展后续研究。这些包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、膀胱癌、结肠直肠癌、胃癌、胰腺癌、肝癌和脑癌。该公司目前正在全美范围寻找医学专业人员建立临床研究点,并将在ClinicalTrials.gov网站上列出研究结果。这项扩大的研究预计将在2024年年中启动。PanGIA公司的方法结合了分子生物学、计算生物学和机器学习的细微差别。这种结合有助于检测与疾病相关的模式,重点是对一系列疾病的非侵入性检测,这种方法的主要重点是各种癌症的早期第一阶段检测。【1】 BNN Breaking https://bnnbreaking.com/breaking-news/health/pangia-biotech-to-extend-cancer-detection-studies-with-proprietary-liquid-biopsy-platform/
  • 西湖大学新发现:尿液中的蛋白可作为新冠轻重型的分类标准
    过去两年来,新冠的爆发让全人类措手不及。截至今天,新冠病毒仍然在地球上大部分地区肆虐。凛冬已至,温度骤降,现在已经进入了感冒等流行病毒的高发季节。随着新的突变株奥密克戎(Omicron)的出现,世界上已经有不少国家对此警戒万分,全球人类也需要共同协作,以控制新一轮新冠的爆发。不管是哪一变株流行,其背后的基础研究都是迫切和必要的。尿液分子表型的研究有重大意义。近日,西湖大学西湖实验室郭天南课题组等在 Cell Reports 发表了题为:Proteomic and metabolomic profiling of urine uncovers immune responses in patients with COVID-19 的研究论文。该研究表明新冠肺炎病人的尿液作为一种完全无创的生物样本,从尿液中获取的生物分子可以灵敏地反映机体的病理状态。这项研究从尿液中筛选出 20 个蛋白质标志物并建立模型,成功实现了对新冠患者进行分类预测的目的;该研究同时针对性地提出了新冠患者存在潜在肾损伤的证据。尿液来源于外周循环,无需专业采集手段即可获得(相比较血清、组织等),完全可以满足日常实时健康监测的要求。利用尿液中的生物分子对人体健康状态进行监测,对于未来精准医学、精准抗疫具有重要的实用价值和现实意义。该研究对 COVID-19 患者组以及健康对照组的共计 115 个尿液、血清样本进行了系统研究。运用蛋白组学和代谢组学的分析手段,对各组病人进行了研究对比。从蛋白层面分析,单位体积的尿液蛋白表达量在轻、重型 COVID-19 组中与健康组相比明显升高,这个结果提示尿液可能会更灵敏地反应机体疾病水平的变化。该研究共定量了 1494 个血清蛋白,3854 个尿液蛋白,903 个血清代谢物和 1033 个尿液代谢物。研究发现尿液中的蛋白分子量分布与全人类蛋白组的蛋白分子量分布一致,这说明尿液样本不会漏掉某一类蛋白而导致信息丢失。血清和尿液蛋白质组学和代谢组学数据汇总分析那么尿液蛋白能否体现出新冠肺炎引起的分子变化呢?机器学习结果显示,尿液蛋白对于轻重型新冠肺炎的区分能力与血清蛋白基本一致。该研究在此基础上,建立了基于 20 个尿液蛋白的机器学习模型。在重型 COVID-19 患者的转归过程中,该模型的预测值随着时间的延长逐渐降低;而在轻型的恢复患者中,预测值趋于平缓并无明显变化。这些结果进一步证实了这 20 个尿液蛋白具备对 COVID-19 轻重型进行分类预测的潜力。在蛋白质组学水平上区分轻型和重型 COVID-19 患者该研究接下来探索了 COVID-19 患者血清和尿液之间的相关性。随着疾病进程加重(健康-轻型-重型),有 301 个蛋白的相对丰度在尿液和血清中呈现出相反的表达模式。研究发现两种参与肾小管重吸收的重要调节因子,megalin (LRP2) 和 cubilin (CUBN),在 COVID-19 患者尿液中的含量均呈现下降趋势。COVID-19 患者的肾小管再吸收过程可能出现了紊乱失调,导致尿液中某些蛋白质变化呈现出与血液中不同的表达模式。这种现象可能也存在于其他疾病中,还有待进一步研究。301 个血清和尿液蛋白显示出相反的表达模式不受控制的先天性炎症反应引起的细胞因子风暴,是导致 COVID-19 患者高死亡率的主要原因,因此该研究还着重关注了细胞因子在血清和尿液中的表达情况。该研究在血清中定量到了 124 个细胞因子,在尿液中定量到了 197 个。在尿液中,CXCL14 与 COVID-19 患者的淋巴细胞计数具有显著的相关性,或可能用于指示 COVID-19 病情的严重程度。尿液和血清中的细胞因子特征此外,该研究还在尿液蛋白组中特异性地发现了一些与病毒出芽相关的蛋白,它们在 COVDI-19 患者的尿液中呈现显著的下调趋势,且未在血清中检测到。以上结果表明
  • 检测新途径!27年有望实现尿液宫颈癌HPV筛查
    在近日“第六届西湖对弈”上,诺辉健康(6606.HK)正式公布旗下宫颈癌HPV居家自取样筛查产品宫证清注册临床试验基线数据。宫证清作为首款基于尿液样本无痛无创的宫颈癌HPV筛查产品,有望在2027年实现上市。  据了解,宫颈癌是唯一病因明确的恶性肿瘤,也是最有望实现根除的高发癌症。  当前,宫颈癌HPV筛查获批产品均为专业医务人员在医疗单位以宫颈拭子或宫颈涂片的方式完成检测和筛查。  诺辉健康自2017年启动了宫证清产品开发,该产品有望实现尿液样本自取样的宫颈癌HPV筛查,提供无痛无创居家检测的新体验。  届时,用户居家取样20-30毫升尿液,采样后将样本快递到诺辉健康中心实验室,5个工作日即可线上获取检测报告。  检测结果阳性表示受检者患有宫颈癌及癌前病变风险高,需就诊做进一步检查。检测结果阴性表示受检者患宫颈癌及癌前病变风险低,未来按照常规流程定期筛查即可。  据介绍,宫证清预计于2027年取得宫颈癌筛查注册证书,规划产品开发全周期长达10年。 此前,该产品已获批欧盟CE认证。  2023年3月24日,诺辉健康携手香港最大的非医院医疗服务机构医思健康(2138.HK)在中国香港首发宫证清,官方售价1800港币。根据独家战略合作协议,双方将全面整合优质资源,推动宫证清在香港市场的分销和市场推广。
  • NexION 系列ICP-MS:用于测定尿液中微量元素的理想工具
    在尿液、血液和血清等最常用来监测人体健康状况的待分析体液中,尿液尤为特别,其功能是排出人体代谢物,包含了大量的尿素、尿酸、蛋白质、脂肪、肌酸酐、钠、钾、碳酸盐、碳酸氢盐和氯化物等。不同的尿液样品成分含量会千差万别,并会受到食物、环境和工业接触因素的影响。因此,不同的尿液样品基体和待测元素含量水平相差甚远,给分析造成了较大难度。电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)已经成为测定尿液样品中微量元素的最常用工具,但在实际检测中需要攻克两大难关:1. 基体产生的多原子离子干扰2. 用于评估污染物接触的某些元素如砷(As)、镉(Cd)、汞(Hg)等的含量极低而ICP-MS仪器本身在尿液分析过程中也会遭遇最大挑战:基质中的有机物在锥孔和离子透镜系统的沉积导致信号漂移或减弱,通常情况下清洗锥和离子透镜费时费力,严重影响工作效率珀金埃尔默公司NexION® 系列ICP-MS是测定尿液样品中微量元素的理想工具,它所带来的解决方案会帮助您解决所遇到的一切挑战。• 配合独特的四级真空系统、固态射频发生器、三锥接口和四极杆离子偏转器,使得NexION ICP-MS的基体耐受性非常高,且保障仪器开机快速,运行稳定,四极杆离子偏转器免清洗免维护,三锥接口维护方便简单频次低。• NexION ICP-MS通用池系统具有标准 (Standard)、碰撞(KED)和反应(DRC)三种模式,可选择的碰撞/反应气体种类丰富,真正有效消除各种质谱干扰,实现高基体样品中的高灵敏度检测。• 如果将NexION ICP-MS与相关高通量和快速进样设备相搭配,通过Syngistix软件可以实现无缝集成,可以大大提高检测实验室的工作效率扫描下方二维码,即可下载资料《NexION 1000G 电感耦合等离子体质谱仪》
  • 浙大邬建敏团队成果:糖尿病肾病的尿液多组学诊断
    糖尿病肾病(DKD)作为糖尿病的最常见的微血管并发症,对患者的健康构成了严重威胁,并已成为慢性肾脏疾病及终末期肾脏疾病的主要诱因。然而,仅根据临床信息进行DKD诊断存在高达49.2%的错误率。因此,开发有效的早期诊断方法对于预防糖尿病相关并发症至关重要。  研究表明,在微量蛋白尿出现之前,许多糖尿病患者可能已经经历了肾功能的早期下降。随着肽组学和代谢组学研究的深入,对DKD的病理机制有了更深入的理解,并发现了一些潜在的生物标志物,这些发现为早期诊断DKD提供了新的视角和方法。  浙江大学化学系分析化学研究所邬建敏团队,通过整合代谢组学和肽组学数据,成功构建了一个尿液多组学分析平台,显著提升了DKD早期诊断和病情判评估的准确性。进一步结合机器学习,研究团队构建了一个逐步预测模型。该模型在外部验证队列中展示出卓越的分类性能:健康对照组(HC)的准确率为89.9%、2型糖尿病(T2DM)为75.5%、早期DKD为69.6%、显性DKD为75.7%。此外,该模型还能以87.5%的准确率区分尿微量白蛋白浓度异常的T2DM患者。  基于肽组学和代谢组学的糖尿病肾病诊断研究2023年发表于国际著名期刊Theranostics[THERANOSTICS 2023 13(10):3188-3203.]  原文链接  https://www.thno.org/v13p3188  DKD诊断的三步预测模型
  • 科技禁毒丨固相萃取-衍生化-气相色谱-质谱联用法同时测定尿液中4种阿片类物质
    公安机关用胶体金尿检法对海洛因滥用者的检测常常受到阿片类镇咳药的干扰,使用传统液-液提取法进行实验室检验,操作效率低,灵敏度不高,无法满足公安机关打击涉毒案件的需要。为此,湖北省黄石市公安局、黄石市公安司法鉴定中心、黄石市毒品检验鉴定中心有关研究人员建立了尿液中吗啡、O6-单乙酰吗啡、可待因和乙酰可待因4种阿片类物质的固相萃取和衍生化技术结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)同时检测方法,该研究成果发表于Chinese Journal of Chromatography。尿样用磷酸盐缓冲液调节至pH=6后,经MCX固相萃取柱净化,用N-甲基-N-(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(MSTFA)对吗啡、O6-单乙酰吗啡、可待因进行衍生化,供GC-MS检测。考察了上样和洗脱流速、淋洗液中甲酸体积分数、洗脱液中氨水体积分数、3%(v/v)甲酸甲醇淋洗液体积和固相萃取柱吹干时间对萃取效果的影响。确定上样和洗脱流速1.0mL/min,淋洗液中甲酸体积分数3%,洗脱液中氨水体积分数5%, 3%(v/v)甲酸甲醇淋洗液体积1mL,吹干时间1min为最佳条件。在此条件下,4种阿片类物质在0.02~0.8μg/mL范围内线性关系良好(r2≥0.998),检出限(LOD)为0.0016~0.0039μg/mL,定量限(LOQ)为0.0054~0.0128μg/mL,当标准添加水平为0.02、0.1、0.2μg/mL时,回收率为93.0%~110.3%。该方法结合自动化技术,对固相萃取条件精确控制,操作简便、快速、灵敏、准确,适合尿液中吗啡等4种阿片类物质快速测定,可用于海洛因吸食者的大规模监控,并能准确排除因服用含阿片类镇咳药导致的吗啡胶体金尿检假阳性。此次实验样品前处理过程采用睿科全自动固相萃取仪、睿科氮吹浓缩仪。Fotector Plus 高通量全自动固相萃取仪流速精准,12通阀快速切换溶剂Auto EVA 80 高通量全自动平行浓缩仪大批量样品浓缩,独创变径氮吹针,平行性高
  • SPE应用文集005:尿液样品净化检测硝酸盐及亚硝酸盐
    J.T.Baker做为SPE(固相萃取)技术的发源地,拥有庞大的应用文献库,为了使得广大客户更好的使用SPE这项越来越被广泛应用的样品前处理技术,自2011年5月开始,J.T.Baker将定期翻译这些应用文献,陆续上传,敬请广大客户点击阅读,如有任何疏忽错漏,恳切的希望可以得到您的指正,一经核实,有精美礼品赠送。 《尿液样品净化检测硝酸盐及亚硝酸盐》(Clean-up of Urine samples before Determination of Nitrite and Nitrate) 应用领域:临床医疗 目标分析物:硝酸盐、亚硝酸盐 样品基质:尿液 萃取柱:BAKERBOND spe&trade C18, 100 mg, 1mL 安全防护设备:护目镜和防护面罩,手套,实验服,B型灭火器,通风橱 小柱活化:加入2X1mL甲醇活化,2X1mL水平衡,保持过程中小柱始终处于润湿状态 上样与清洗:缓慢加入2X500uL尿液样品,以1mL/min的速度抽出,收集滤液,用2000uL流动相稀释 分析方法:离子交换色谱法 以上即为固相萃取步骤,相关产品信息如下: B7020-01 BAKERBOND spe&trade C18, 100 mg, 1mL B9093-03 甲醇, ' BAKER ANALYZED' ® HPLC B4218-03 水, ' BAKER ANALYZED' ® HPLC 您也可以点击下载英文原版应用文献:http://jtbaker.instrument.com.cn/down_175681.htm 关于J.T.Baker :   杰帝贝柯化工产品贸易(上海)有限公司(JTBs)于2009年正式成立,是美国Avantor&trade Performance Materials的全资子公司。Avantor&trade Performance Materials拥有的J.T.Baker和Macron&trade 两大品牌有140多年的历史,其化学品领域的高品质产品,最优化的应用方案和功能性检测可以满足客户的高端应用需求,并确保高精度和高重现性的结果。
  • 质谱分析法又立功!新的帕金森病诊断尿液蛋白质标记物被发现
    普渡大学和Tymora Analytical Operations的科学家团队通过对尿液胞外囊泡(EVs)蛋白质和磷酸化蛋白质进行质谱分析识别了一组可用于诊断帕金森病的蛋白质标志物。该项工作于本月发表在Communication Medicine,其中详细介绍了研究工作。该研究的部分资助来源于迈克尔J福克斯帕金森研究基金会,该组织的一部分工作就是探究EVs分析是否能识别新型的帕金森病标志物。EVs是由细胞分泌到各种体液中,被认为能反映来源细胞的分子组成。鉴于检测源自癌细胞的外泌体中的蛋白质或核酸比检测患者血液或尿液中自由循环的癌细胞相关核酸或蛋白质可能更容易的想法,胞外囊泡已成为液体活检研究的一个热门领域。同样的思路也适用于神经退行性疾病,尤其是从血液或尿液样本中寻找这些疾病的标志物,血液或尿液相比于脑脊液易于获取,但含有的相关标志物浓度通常较低。总部位于印第安纳州威斯特拉法叶市的Tymora是普渡大学化学生物学和分析化学教授安迪陶(Andy Tao)实验室的衍生企业。Tymora的首席执行官是Communication Medicine论文的通讯作者之一Anton Iliuk。Tymora专注于EVs的蛋白质组学和磷酸化蛋白组学分析,将其作为研究服务出售给外部合作伙伴以及用于其内部生物标志物和诊断方法的开发工作。2018年,该公司及其合作者在Journal of Proteome Research杂志上发表了一项研究,在该研究中,他们在尿液中收集的EVs中鉴定出约860种磷酸化蛋白质和超过2,000种未修饰的蛋白质。迈克尔J福克斯帕金森研究基金会的研究项目副总裁Shalini Padmanabhan是该论文的作者之一,她表示,基金会的研究人员在阅读该研究时“对结果很有兴趣”,因为鉴定到的蛋白中包括几种与帕金森病有关的蛋白质。Padmanabhan指出,当时基金会已经收集了大量来自帕金森病患者的尿液样本,并由Tymora技术看到一个检验新方法(识别帕金森病患者EVs蛋白质特征相对于健康对照组的变化)的机会。研究人员使用Tymora的EVtrap技术从哥伦比亚大学欧文医学中心收集的82个尿液样本中分离出EVs(21个健康对照组,13个携带与帕金森病相关的LRRK2突变但健康的人,28名没有LRRK2突变的帕金森病患者和20名携带LRRK2突变的帕金森病患者)。EVtrap方法使用包被疏水和亲水基团的磁珠来结合EVs的脂质双层膜。该方法可灵敏且可重复地捕获EVs,同时限制高浓度循环蛋白的捕获,这是相对于其他一些EV富集方法的优势。在分离出外泌体后,研究人员在赛默飞Q-Exactive HF-X仪器上进行LC-MS分析其蛋白质。他们识别4,476个独特的蛋白质和2,680个独特的磷酸化蛋白质,从中筛选出48个潜在的标记物,并最终确定了6个最佳标志物。他们发现,这六个标志物组合可以在曲线下面积为0.94的情况下区分健康人群和帕金森病患者。随后,研究人员用两个实验验证了这些表现最佳的蛋白质和与帕金森有关的其它蛋白质。其中一个实验利用靶向质谱技术测定13名健康对照组和23名帕金森病患者的蛋白质,另一个实验使用免疫方法测定10名健康对照组和10名帕金森病患者的蛋白质。Tao 表示,他的实验室继续与哥伦比亚大学的研究小组合作获取更多的样本,并且正在与普渡大学的同事Jean-Christophe Rochet合作研究蛋白质聚集在帕金森病、阿尔茨海默病和Lewy小体痴呆等神经退行性疾病中的作用。Tao 和 Rochet 正在探讨的一个问题是外泌体是否可能成为突触核蛋白α-synuclein(α-syn)的有用来源。在帕金森病患者中,错误折叠的α-syn聚集形成路易氏小体在大脑中积累,被认为会引起神经元损伤,也被认为是潜在的药物靶标和生物标志物。对于帕金森病的诊断,α突触核蛋白种子扩增检测方法前景光明。该方法通过将来自患者的αSyn与正常αSyn孵育并观察其是否产生帕金森病的特征性聚集物。通常,αSyn突触核蛋白样品从患者脑脊液中收集,需要进行脊髓穿刺。这促使研究人员探索通过血液或尿液样品等微创性的方式收集这种蛋白质,其中外泌体是一种潜在的采样途径。Padmanabhan指出,“虽然α-synuclein的分布范围及与帕金森病生物学相关性的全面了解仍不充分,但已有人提出外泌体可能富集有α-synuclein,包括病理性形式。”她补充说,到目前为止,福克斯基金会将外泌体用作αSyn的样本来源的主要工作侧重于在血液中的外泌体,“血液中α Syn的存在已经有研究支持”。然而,她表示该组织“继续探索所有可能的CSF替代方案,以改进临床使用的检测,作为我们持续开展的突触核蛋白生物学研究项目的一部分”。CEO Iliuk表示Tymora不打算继续开发Communication Medicine论文中确定的标记物,但他指出,神经退行性疾病,特别是阿尔茨海默病,已成为Tymora内部生物标志物开发工作和为外部客户工作的重点。Iliuk指出,虽然血浆被广泛认为是临床诊断阿尔茨海默病生物标志物的最切实可行的替代样本,但帕金森病的研究显示了尿液EVs作为神经退行性疾病生物标志物来源的潜力。他说:“我们在血浆方面做了相当多的工作,我认为那是主要关注的地方。但是我们最近一直在研究尿液。现在还处于非常初期的阶段,人们对其作为一种可行的样本还存在很多犹豫,因为它距离大脑太远了,所以并不是一个合情合理的选择。但我认为帕金森病的研究表明神经退行性疾病的标志物可以传播到尿液中并被检测到。”福克斯基金会支持了许多其他在尿液中寻找帕金森病蛋白标记物的努力,包括2021年由马克斯普朗克生物化学研究所蛋白质组学和信号转导部门主任Matthias Mann实验室发表的蛋白质组学研究,该研究确定了几种潜在的帕金森病蛋白标志物。文章链接:https://www.nature.com/articles/s43856-023-00294-w
  • 全自动固相萃取仪-GC/MS分析血液、尿液、饮料中的安眠药
    在刑事化验工作中,经常会遇到安眠药筛选检验,因为各种安眠药经常被犯罪分子用于麻醉抢劫、麻醉凶杀等。对于常见安眠药的提取检验,普遍采用的液-液提取法需根据药物的性质,在酸、碱条件下分别萃取净化,操作费时而且耗费大量有机溶剂。相对液-液萃取法而言,固相萃取法操作简便,所用溶剂少,回收率高,净化效果好,是很有前景的检材前处理方法。本方法采用睿科 Fotector系列全自动固相萃取仪和津杨GDX-403树脂柱净化尿液中的巴比妥和安定两种常见安眠药的固相萃取方法。该方法操作简便,回收率高,完全可以用于实际办案中。仪器、耗材睿科Fotector Plus / Fotector-02HT全自动固相萃取仪津杨GDX-403树脂(400 mg/3mL)Agilent 7890A/5975C气相色谱/质谱联用仪色谱柱Agient HP-5M(50m×250μm×0.25μm)离心机漩涡混匀器甲醇、乙醇、无水乙醚均为分析纯试剂实验用水直接使用自来水样品提取与前处理样品前处理取尿样2mL于离心管中,加入pH=6缓冲液5 mL,超声5 min,1000 r/min离心15 min,将上清液置于样品瓶中,GDX-403柱装在全自动固相萃取仪上,按图1进行固相萃取。洗脱液浓缩至干用乙醇定容至1mL,供GC/MS检测。固相萃取净化条件表-1. 固相萃取净化条件全自动固相萃取仪睿科Fotector Plus 60位or Fotector-02HT固相萃取柱津杨GDX-403树脂(400 mg/3mL)淋洗pH 6.0 磷酸盐缓冲液,水洗脱无水乙醚样品净化步骤以0.5 mL/min的速度上样7 mL待测液,2 mL磷酸缓冲溶液润洗样品瓶,吹干小柱10 min,最后以3 mL的无水乙醚,以0.5 mL/min的速度洗脱样品,氮吹浓缩至0.5 mL以下,定容至1 mL。详细步骤见图-1。图-1. Fotector Plus / Fotector-02HT 尿液中安眠药固相萃取净化方法检测条件气相色谱质谱联用条件GC-MS检测条件:进样口温度290 ℃,不分流进样,进样量1.0mL;载气为高纯He气,恒流模式,流速为1.0 mL/min;电子轰击电离源(EI),离子源温度230 ℃,接口(传输线)温度280 ℃,质量分析器温度150 ℃,全扫描模式(Scan),电子倍增器检测电压1576 V。GC程序升温程序:初始温度50 ℃,保持1 min;以20℃/min速度升温至150℃,保持2 min;以10℃/min速度升温至300℃,保持5 min。定量离子及保留时间表-2. 2种安眠药的保留时间及离子碎片项目CAS保留时间离子碎片巴比妥Barbital57-44-310.218156,141安定Diazapam439-14-520.324256,283标准样品色谱图图-2. 2种安眠药的色谱图(2 μg/L)方法可行性验证基质影响图-3中标准品和空白基质加标的全扫描叠加图可以看出,尿样基质非常复杂,采用全扫描干扰严重。采用SIM模式,样品基质对测定干扰较小(图-4),巴比妥156的检测几乎没有基质效应,但是安定化合物256处有一定的基质抑制作用,导致样品响应值有所下降。故采用基质工作标准曲线进行定量,以免基质效应对检测产生影响。图-3. 尿样基质加标和标准品全扫描叠加图(黑色,标准品;蓝色,样品加标)图-4. 尿样基质加标和巴比妥选择离子(156,左)安定选择离子(256,右)扫描叠加图扫描叠加图(黑色标品,蓝色为样品加标)样品加标回收率测试在2 μg/mL的加标水平下,样品经过前处理提取,萃取后,用Fotector plus/Fotector-02HT全自动固相萃取仪净化,巴比妥的回收率在91.2~96.7%之间,RSD=2.4%(n=3),安定的回收率在74.3~85.2%之间,RSD=5.7%(n=3),完全满足公安系统检测对回收率的要求,回收率如表-3所示:表-3. 加标回收率(%)化合物定量离子R1R2R3AvgRSD巴比妥15694.691.296.794.22.4安定25678.274.385.279.25.7结果与讨论采用GDX403树脂萃取柱,通过睿科Fotector系列全自动固相萃取仪净化和气质联用仪检测,对尿样中巴比妥和安定的检测,可取得较好的结果,完全适用于公安系统实际办案中。
  • 合作研究|岛津HPLC-ICPMS助力砷中毒患者尿液中砷形态研究
    导读 临床金属组学是金属组学的一个分支,主要研究尿液、血液和组织中的金属组。砷中毒的临床诊断主要依据尿中总砷的浓度,由于不同形态砷的毒性差异很大,分析尿中总砷超标的砷形态,可为精确治疗提供依据,也可用于了解砷中毒患者经二巯基丙烷钠治疗后体内砷的去向。首都医科大学附属北京朝阳医院职业病与中毒医学科是国家临床重点专科,多年来承担着中毒事件的处置工作。近期,岛津企业管理(中国)有限公司与该单位合作,利用LC20-Ai+ICPMS-2030测定了砷中毒患者经过治疗后不同时间段内尿液中不同形态和价态砷的含量分析。合作文章发表在Atomic Spectroscopy期刊上,岛津应用工程师宋晓红老师为第一作者,首都医科大学附属北京朝阳医院职业病与中毒医学科李惠玲老师为通讯作者。 砷中毒主要由砷化物引起,其中以毒性较大三氧化砷(俗称砒霜)多见,还包括二硫化砷(雄黄)、三硫化二砷(雌黄)及砷化氢等。一般经口、皮肤或伤口吸收,当体内的砷蓄积到中毒量,机体会产生一系列病理生理变化及其临床表现,临床表现为急性胃肠炎、神经系统、肝和砷功能损害等,严重者可危及生命。 (期刊截图) 砷形态分析强有力手段图1. 岛津LC-20Ai+ICPMS-2030元素形态分析联用系统• 全PEEK的泵头和管路,更好的惰性• TRM软件同时控制LC和ICPMS方法参数设置• 节约气体,提高工作效率 方法建立:文章中尝试了不同的梯度洗脱条件,优化了砷化合物的分离度和检测灵敏度。表1.和表2.分别为优化的色谱参数和梯度洗脱参数。图2.为在表1.和表2.设定的参数条件下,各砷化合物的色谱图。 表1. 色谱参数表2. 梯度洗脱参数图2. 色谱图1. 砷胆碱(AsC)+ 砷甜菜碱(AsB) 2. 二甲基砷(DMA) 3. 亚砷酸(As(Ⅲ)) 4. 一甲基砷(MMA) 5. 砷酸(As(Ⅴ)) 临床应用取服用雄黄粉后引起砷中毒患者的尿样进行尿砷形态分析,该患者随机尿检结果显示尿砷浓度6.7 µg/mL。采用二巯基丙磺酸钠治疗后,收集该患者的尿样进行尿砷浓度测定评估疗效。检测结果显示(见表3.),尿中AsC+AsB均未检出,其余形态砷在治疗过程中浓度逐渐下降,其中As(III)降低明显,至第16天未检出。第15天总砷结果显示<0.1 µg/mL,低于中毒限值。雄黄中溶于水的As(III)及As(V),进入体内后,一般认为砷在体内的简要代谢过程为:iAs(Ⅲ)→iAs(Ⅴ)→MMA(Ⅴ)→MMA(Ⅲ)→DMA(Ⅲ)→DMA(Ⅴ)→尿排出。本研究发现雄黄摄入后砷在体内代谢导致患者尿中DMA和MMA增高,明显高于健康人群。在用二巯基丙磺酸钠治疗后,As(III)被络合排出体外,其余各种形态的砷也逐渐减少。 表3. 砷中毒患者治疗后尿液测定结果(ng/mL)结论建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(LC-ICP-MS)测定尿液中形态砷含量的检测方法,用于评估总砷超标患者体内形态砷的浓度。该方法可应用于健康人尿液、接受砷剂治疗的患者尿液和其他砷中毒患者尿液中砷形态的分析 专家观点 文章通讯作者李惠玲老师表示:砷的毒性与其存在的形态密切相关,生物样品中砷形态分析需要精准可靠的联用技术和仪器设备。岛津LC-20Ai和ICPMS-2030联用完成了砷中毒患者的中毒筛查及治疗过程中尿砷形态的检测。该方法实现了尿中砷形态良好的分离,准确度、灵敏度及稳定性均满足检测的需求。
  • 301万!宜丰县县乡应急医疗体系建设(尿液分析系统、原子荧光光度计等设备)采购项目
    项目编号:伟华-YF2022-004-01包项目名称:宜丰县县乡应急医疗体系建设(尿液分析系统、原子荧光光度计等设备)采购项目 01包采购方式:公开招标预算金额:2615000.00 元最高限价:2615000.00采购需求:采购条目编号采购条目名称数量单位采购预算(人民币)技术需求或服务要求宜购2022B000584554宜丰县县乡应急医疗体系建设项目(尿液分析系统、全自动尿液分析仪等)01包1批2615000.00元详见公告附件项目编号:伟华-YF2022-004-02包项目名称:宜丰县县乡应急医疗体系建设(尿液分析系统、原子荧光光度计等设备)采购项目 02包采购方式:公开招标预算金额:400000.00 元最高限价:400000.00采购需求:采购条目编号采购条目名称数量单位采购预算(人民币)技术需求或服务要求宜购2022B000584775宜丰县县乡应急医疗体系建设项目(原子荧光光度计等)02包1批400000.00元详见公告附件合同履行期限:签订合同后30个工作日内。本项目不接受联合体投标。
  • 厦大牵头研制!全球首个戊型肝炎病毒抗原尿液检测试剂盒获批上市!
    25日,记者从厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心获悉,近日,由厦门大学、中国食品药品检定研究院和万泰生物联合研制的戊型肝炎病毒抗原尿液检测试剂盒(胶体金法、荧光免疫层析法)获得国家药品监督管理局批准上市。该试剂为全球首个以尿液抗原为靶标的戊肝诊断试剂,填补了相关产品和技术空白,其临床评估结果显示检测准确度为98.58%,对全球戊肝患者的临床诊断与治疗管理具有重大意义。戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是全球范围内病毒性肝炎最主要的病原体之一。全球每年新发HEV感染2000万例,死亡44000例。在我国,戊肝是急性病毒性肝炎的首要病因,其发病人数正逐年上升。慢性肝病患者、孕妇、老年人是HEV感染的高危人群。慢乙肝患者重叠感染HEV后,与未重叠感染HEV的患者相比,肝衰竭发生风险升高至10.9倍,死亡风险升高至8.54倍。有报道显示孕妇特别是妊娠晚期孕妇,感染HEV后的病死率高达15%~25%,且死胎率、早产率高。老年人感染HEV容易导致重型肝炎,占比达14%。我国现阶段戊肝的临床诊断主要依赖HEV IgM抗体检测(《戊型病毒性肝炎诊疗规范》,2009),但仅依赖血清学检测指标难以判断是否为戊肝现症感染,因此亟需病原学检测方法。作为RNA病毒,HEV的核酸检测存在操作复杂、成本高、易污染等问题,因而未能大规模的推广和使用。HEV抗原检测虽然是更便捷的诊断手段,但此前的抗原试剂存在灵敏度不高、阳性周期短等问题。研究团队以尿液中pORF2抗原为靶标研制了全球首个HEV抗原尿液检测试剂盒,首次在全球范围内将临床肝炎的诊断与治疗指导由血液或者粪便靶标转移至尿液中。据介绍,尿液抗原检测为戊肝临床诊断提供了最有效的手段。同时其采样简便、安全无创、检测快速,将极大提高戊肝临床诊断可及性和诊断效率,尤其是在戊肝主要流行的非洲、东南亚等发展中地区。该试剂具有我国自主知识产权,在戊肝诊断方面实现了重要突破,为全球肝炎防治贡献了中国力量。据悉,该试剂近期将投入市场,未来将出现在医院、疾控中心等场所用于戊肝的快速精准诊断。
  • Naica数字PCR用于取样困难病人的血浆、粪便、尿液等复杂样本新冠病毒检测
    截止目前,针对疫情相关人群做新冠肺炎筛查时,主要采用鼻咽拭子核酸检测,原因是方便快捷,适合大规模筛查。但是,对于一些无症状感染者或轻症感染者来说,感染后病情恢复得很快,可能3至5天咽部核酸就检测不到了。通过研究发现,一部分感染者粪便或肛拭子核酸阳性的持续时间比上呼吸道持续时间更长。因此,增加肛拭子等复杂样本的核酸检测能够提高感染者检出率,减少漏诊。日前,湖南省疾控研究人员对已经确诊的3例新型冠状病毒肺炎患者不同时间的全血、尿液、粪便标本同时进行qPCR和Naica数字PCR(cd-PCR)的核酸检测,并比较了两种方法检测各类样本中2019-nCoV的差异性,提出改进2019-nCoV核酸检测的综合策略,为核酸检测阴性患者提供更多诊断支持。本实验中数字PCR在病例发病早、中、晚期标本中均能检测到阳性微滴,而qPCR漏检了发病小于5天的标本,检测到的阳性核酸均以中晚期为主。这也解释了受检测方法灵敏度的局限性,目前大部分假阴性患者都处于疾病发展的早期。此外,在本次实验中数字PCR在重症病例的三种标本中均测到阳性微滴,但因为血、尿和可疑粪便的标本病毒载量偏低,qPCR检测均为阴性。总之,数字PCR技术可以有效克服qPCR灵敏度不足的难题,捕捉到病毒载量较低的血液、尿液和可疑的粪便或肛拭子标本,是qPCR的有益补充,为帮助临床医生准确判断早期感染及患者是否真正痊愈起到了积极的作用,对2019-nCoV的长期监控有重要的意义。Naica数字PCR技术进行新冠病毒检测,依托高灵敏度、全封闭、判读快捷等优势,可应用于以下场景:1. 低浓度样本检测,如ct值37个循环的样本,ct值为零的高危密接样本,排除假阴性结果;2. 医院样本的准确复核;3. 出院标准的确证;4. 阳性病人的出院后定期跟踪检测;5.取样困难病人的复杂样本检测:血浆、粪便、尿液等;6.捐献库、样本库、血库中样本新冠筛查;7.群采检测和单采群检,提高日检测能力,筛选灵敏度高。新冠相关文章:• 文献速递|湖南省疾控两篇连发Naica™ 数字PCR系统检测精子/全血/尿液/粪便中的 新冠病毒SARS-CoV-2• 数字PCR方法高灵敏度群体检测新冠病毒解决方案:基于Naica自动化数字PCR系统• 深蓝云生物最新三通道高灵敏全封闭数字PCR检测新冠病毒整套方案• Naica数字PCR系统解决方案抗击Covid-19,可靠检测SARS-CoV-2病毒同时获得病毒载量
  • 应用指南--OPSI 开放式进样端口与expression CMS 联用快速检测尿液中的芬太尼
    目前,执法机构和检验从业人员对滥用药物的快速和简便分析方法的需求很大。2017年,芬太尼 fentanyl 已成为滥用最广泛的合成阿片类药物,甚至已经成为一个公共健康问题。芬太尼是一种快速合成止痛药,药效几乎是吗啡的100倍。 随着市场需求日益增多,AIS 开发了一种简单快速的尿液芬太尼筛查方法,即 Touch Express OPSI 开放式采样端口与 expression CMS 小型台式质谱仪相结合实现快速筛查。OPSI 开放式采样端口技术由 AIS ESI 电喷雾电离源升级开发而来,提供了一个快速检测解决方案。实验方法芬太尼(1.0 mg/ml)和芬太尼- d5 (100ug/ml)作为标准溶液。标液 2.5、5、10、25、50、100、250、500 和1000 ng/ml ,芬太尼- d5:100 ng/ml,绘制校准曲线。然后采用液-液萃取法制备样品(LLE)。将1.5 mL 1/1乙酸乙酯/己烷加入 0.5 mL 尿液样本中,涡旋 20 s,静置 2 min。然后 1.0 mL 上清转移到干净的 2ml 离心瓶中,在真空蒸发器中蒸发至干燥。用 250ul 甲醇对干燥的提取物进行处理,然后进行 OPSI-CMS 分析。溶剂以 250µl/min 的速度输送到开放式采样区域。在文丘里效应作用下,溶剂在开口处形成一个弯月面,样品沿着管路进入质谱仪的离子源。将对照和添加芬太尼的尿液样本按顺序实验结果
  • 广东省分析测试协会发布《尿液中多环芳烃代谢物的测定 液液萃取-超高效液相色谱串联质谱法(征求意见稿)》
    各有关单位及专家:由广东省分析测试协会组织制订的《尿液中多环芳烃代谢物的测定 液液萃取-超高效液相色谱串联质谱法》团体标准已完成征求意见稿,根据《广东省分析测试协会团体标准制修订工作程序》,现公开征求意见。欢迎各有关单位及专家提出修改意见,并请于2024年4月1日之前将《征求意见表》(附件3)反馈到下面指定邮箱。联系人:1.谭磊,15088099264,jsutanlei@126.com2.协会秘书处,020-37656885-227,gdaia@fenxi.com.cn附件:1. 《尿液中多环芳烃代谢物的测定 液液萃取-超高效液相色谱串联质谱法(征求意见稿)》2. 《尿液中多环芳烃代谢物的测定 液液萃取-超高效液相色谱串联质谱法(征求意见稿)》编制说明3. 征求意见表广东省分析测试协会2024年3月1日附件1 《尿液中多环芳烃代谢物的测定 液液萃取-超高效液相色谱串联质谱法(征求意见稿)》.pdf附件2 《尿液中多环芳烃代谢物的测定 液液萃取-超高效液相色谱串联质谱法(征求意见稿)》编制说明.pdf附件3 征求意见表.doc
  • ACQUITY UPLC XevoTQ-S同时测定猪尿液中21种β-受体激动剂
    今年3月,瘦肉精事件引发全国拉网式排查,瘦肉精事件闹得沸沸扬扬,10年间瘦肉精屡禁不绝,添加瘦肉精喂出来的猪不仅颜色光亮,而且可以增加猪的瘦肉率,现在人们都关注身材,不吃肥腻的肉,这也导致饮食习惯吃瘦肉,而添加瘦肉精的猪肉正好符合当今人们的饮食习惯,瘦肉精事件一出大家都在徘徊这肉还吃不吃? 简介瘦肉精:一类动物用药的统称,任何能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。 目前,能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂的药物。与传统瘦肉精盐酸克伦特罗同属“肾上腺受体激动剂”的莱克多巴胺等同类药物同样也能提高猪的瘦肉率。盐酸克伦特罗的检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、胶体金免疫层析法、高效液相色谱法、气质联用法及液质联用法。国家标准GB/T 5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的测定中规定方法为气相色谱-质谱法(GC-MS)、高效液相色谱法、酶联免疫法,其方法检出限均为0.5ug/kg。SN/T 1924—2007 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法采用LC/MS/MS法,该方法具有高灵敏度等优点被普遍使用。本文使用UPLC/XEVO TQ-S对猪尿液中的β-受体激动剂进行分析。实验方法UPLC条件LC系统: ACQUITY UPLC® 运行时间: 10min色谱柱: ACQUITY® BEH C18 1.7μm,2.1mm x 100mm流动相A: 0.1%甲酸水流动相B: 乙腈流速: 0.40mL/minMS条件MS系统: Xevo TQ-S离子模式: ESI+毛细管电压: 3.5kv源温度: 150℃雾化气温度: 500℃雾化气流速: 900L/hr锥孔气流速: 20 L/hrMRM条件:Quanpedia数据库Quanpedia是沃特世特有的一种可扩展和可搜索的数据库,为您提供LC/MS/MS定量方法信息,目前数据库已有超过1200种化合物,包括色谱方法、质谱方法、定量方法等,您可自由选择其中的任意化合物或化合物种类自动形成您所需的方法,无需再重新进行方法开发过程。下图为数据库得到的方法信息:自动生成MRM方法: 样品制备样品制备参照GB/T 22286-2008《动源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定》进行。■ 量取2.0mL猪尿液样品,加入8mL 0.2M的PH为5.2的乙酸钠缓冲液,充分混匀■ 加入50μLβ-Glucuronidase/aryl sulfatase混匀,于37℃水浴水解过夜■ 水解液振荡15min,在5000r/min条件下离心分离10min后,取4mL上清液中添加100uL 10ng/mL的内标溶液混匀,加入5mL 0.1M高氯酸混合均匀,并调节溶液PH值到1±0.3。以5000r/mim条件下离心分离10min后,移取上清液并用10M的氢氧化钠溶液调节PH值到11。■ 加入10mL饱和氯化钠溶液和10mL异丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液,离心分离后取有机相,在40℃水浴下用氮气将其吹干■ 提取残渣中加入5mL 0.2M乙酸钠缓冲液(PH5.2),超声混匀溶解残渣■ 样品净化(如下图所示),使用Oasis MCX(3cc/60mg)小柱■ 净化后的洗脱液用氮气吹干,用流动相溶解定容至1.0mL,过0.22μm滤膜,待进样分析 下图为数据库得到的方法信息: 固相提取净化过程Oasis MCX(3cc/60mg):实验结果与讨论本方法才用一次进样同时监测猪尿液样品中的21种β-受体激动剂进行检测,在灵敏度、分离度方面获得满意的结果。与常规的串联四极杆质谱仪不同的是,Xevo TQ-S为您提供最好的定量数据的同时,还为您提供高质量的光MS/MS信息。对猪尿液中含0.5ug/L的受体激动剂样品,启用PICs(子离子确认扫描)功能,可在不影响MRM定量的同时得到各化合物子离子扫描图,与标样子离子图进行匹配,对样品中阳性结果定性起到帮助判断的作用。 结论本方法采用多离子反应监测(MRM)方式对21种β-受体激动剂进行检测,具有快速、准确、灵敏度高、分析周期短、适用范围广等优点。适用各类动物组织或动源性食品等的测定。IntelliStart技术可以使得开发分析方法过程变成流线型工作流程。这意味着需要更少的时间来开发方法,大大提高工作效率。强大的Quanpedia数据库包含上千种化合物的方法,自动生成方法文件让你轻松简单快速应对各种突发事件。PICs(子离子确认扫描)功能为您提供最好的定量数据的同时,还为您提供高质量的光谱MS/MS信息,对样品中阳性结果定性起到帮助判断的作用。关于沃特世公司 (www.waters.com)50多年来,沃特世公司(NYSE:WAT)通过提供实用和可持续的创新,使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步,从而为实验室相关机构创造了业务优势。作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者,沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。2010年沃特世拥有16.4亿美元的收入和5,400名员工,它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 联系人:张林海沃特世公司市场部86(21) 61562642lin_hai__zhang@waters.com 周瑞琳 (Grace Chow)泰信策略(PMC)020-83569288grace.chow@pmc.com.cn
  • 北京预防医学会发布《母乳、血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的测定》等6项团体标准征求意见稿
    由北京预防医学会批准立项的《母乳、血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的测定》《韭菜中氯酸盐和高氯酸盐的测定 离子色谱-质谱/质谱法》《空气中16种多环芳烃的测定 气相色谱三重四级杆质谱法》《工作场所空气有毒物质测定乙醇胺的离子色谱法》《新型冠状病毒感染样本采集包装运输及检测规范》(修订)和《新型冠状病毒感染样本意外溢洒事故处理规范》(修订)等6项团体标准的征求意见稿已完成。根据《北京预防医学会团体标准管理办法(2023年版)》的要求,现在网上公开征求意见,欢迎提出宝贵意见。请将意见填入附件《意见反馈表》中,于2024年3月2日之前,以E-mail或电话的方式反馈至我会。若各单位了解到该标准内容涉及专利权/商标权,请将涉及专利权/商标权的相关情况一并反馈。联系人:侯宏电话:010-64407272E-mail:ttbz7272@163.com北京预防医学会2024年2月1日1-2编制说明-母乳血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的测定编制说明.pdf1-1征求意见稿-母乳血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的测定.pdf2-1征求意见稿-韭菜中氯酸盐和高氯酸盐的测定 离子色谱-质谱质谱法.pdf1-3验证报告1-母乳血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的测定.pdf2-2编制说明-韭菜中氯酸盐和高氯酸盐的测定 离子色谱-质谱质谱法.pdf2-3验证报告1-韭菜中氯酸盐和高氯酸盐的测定 离子色谱-质谱质谱法.pdf1-4验证报告2-母乳血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的测定.pdf3-2编制说明-空气中16种多环芳烃测定-?相?谱三重四级杆质谱法.pdf3-1征求意见稿-空气中16种多环芳烃测定-气相色谱三重四级杆质谱法.pdf3-3验证报告1-空气中16种多环芳烃测定-气相色谱三重四级杆质谱法(通州疾控).pdf2-4验证报告2-韭菜中氯酸盐和高氯酸盐的测定 离子色谱-质谱质谱法.pdf4-1征求意见稿-工作场所空气有毒物质测定 乙醇胺的离子色谱法.pdf4-2编制说明-工作场所空气有毒物质测定乙醇胺的离子色谱法.pdf4-3验证报告1-工作场所空气有毒物质测定(通州疾控).pdf3-4验证报告2-空气中16种多环芳烃测定-气相色谱三重四级杆质谱法(朝阳疾控).pdf5-2修订说明-新型冠状病毒感染样本采集包装运输及检测规范.pdf5-1征求意见稿-新型冠状病毒感染样本采集包装运输及检测规范.pdf4-4验证报告2-工作场所空气有毒物质测定(丰台疾控).pdf附件7 意见反馈表.docx6-2修订说明-新型冠状病毒感染样本意外溢洒事故处理规范.pdf6-1征求意见稿-新型冠状病毒感染样本意外溢洒事故处理规范.pdf
  • 沃特世发布解决方案:使用Waters Xevo TQS和ACQUITY UPLC快速分析猪尿液中的21种β -受体激动剂
    瘦肉精:一类动物用药的统称,任何能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。 目前,能够实现这种功能的物质是一类叫做β-受体激动剂的药物,将其混入猪饲料进行饲养,能促进猪的生长速度、提高瘦肉率,同时使肉色鲜红,卖相更好。与传统瘦肉精盐酸克伦特罗同属“肾上腺受体激动剂”的莱克多巴胺等同类药物同样也能提高猪的瘦肉率。 盐酸克伦特罗的检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、胶体金免疫层析法、高效液相色谱法、气质联用法及液质联用法。国家标准GB/T5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的测定中规定方法为气相色谱-质谱法(GC-MS)、高效液相色谱法、酶联免疫法,其方法检出限均为0.5μg/kg。SN/T 1924—2007 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法采用LC-MS-MS法,该方法因具有高灵敏度等优点被普遍使用。本文使用UPLC/Xevo TQ-S对猪尿液中的21种β-受体激动剂进行了分析。 QUANPEDIA是沃特世特有的一种可扩展和可搜索的数据库,提供LC-MS-MS定量方法信息,目前数据库已有超过1200种化合物,包括色谱方法、质谱方法、定量方法等,可以自由选择其中的任意化合物或化合物种类自动形成所需的方法,不需要再进行手动方法开发过程。 下图为数据库得到的方法信息: 自动生成MRM方法: 样品制备: 样品制备参照GB/T 22286-2008《动源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定》进行。 1.量取2.0 mL猪尿液样品,加入8 mL 0.2M的pH 5.2的乙酸钠缓冲液,充分混匀。2.加入50 Lβ-Glucuronidase/aryl sulfatase混匀,于37 °C水浴水解过夜。3.水解液振荡15min,在5000r/min条件下离心分离10min后,取4mL上清液中添加100 μL 10 ng/mL的内标溶液混匀, 加入5 mL 0.1M高氯酸混合均匀,并调节溶液pH值到1±0.3。以5000 r/mim条件下离心分离10 min后,移取上清液并用10M的氢氧化钠溶液调节pH值到11。4.加入10 mL饱和氯化钠溶液和10 mL异丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液,离心分离后取有机相,在40℃水浴下用氮气将其吹干。5.提取残渣中加入5mL 0.2M乙酸钠缓冲液(pH 5.2),超声混匀溶解残渣。6.样品净化(如下图所示),使用Oasis MCX(3cc/60mg)小柱。7.净化后的洗脱液用氮气吹干,用流动相溶解定容至1.0mL,过0.22μm滤膜,待进样分析。 ?固相提取净化过程Oasis MCX(3 cc/60mg): 结果与讨论: 本方法采用一次进样同时监测猪尿液样品中的21种β-受体激动剂进行检测,在灵敏度、分离度等方面均获得满意的结果。 图1. 21种β-受体激动剂总离子流图。 图2. 猪尿液基质中0.01ng/mL克伦特罗连续7针进样重复性(峰面积RSD=0.42%)。 与常规串联四极杆质谱仪不同的是,Xevo TQ-S在提供最好的定量数据的同时,还可以提供高质量的光谱MS/MS信息。对猪尿液中含0.5ng/mL的受体激动剂样品,启用PICs(子离子确认扫描)功能,可在不影响MRM定量的同时得到各化合物子离子扫描图,与标样子离子图进行匹配,对样品中阳性结果定性起到帮助判断的作用。 图3. 猪尿液基质中0.5 ng/mL沙丁胺醇子离子扫描图。 图4. 猪尿液基质中0.5 ng/mL克伦特罗子离子扫描图。 图5. 猪尿液基质中0.5 ng/mL莱克多巴胺子离子扫描图。 结论: 本方法采用多离子反应监测(MRM)方式对21种β-受体激动剂进行检测,具有快速、准确、灵敏度高、分析周期短、适用范围广等优点,适用于各类动物组织或动物源性食品等的测定。 IntelliStart技术可以使得开发分析方法过程变成流线型工作流程。这意味着需要更少的时间来开发方法,大大提高工作效率。强大的QUANPEDIA数据库包含上千种化合物的方法,自动生成方法文件让您轻松简单快速应对各种突发事件。PICs(子离子确认扫描)功能提供最好的定量数据的同时,还可以提供高质量的光谱MS/MS信息,对样品中阳性结果定性起到帮助判断的作用。
  • 文献速递|湖南省疾控两篇连发Naica™ 数字PCR系统检测精子/全血/尿液/粪便中的新冠病毒SARS-CoV-2
    Paper -1:全球新型冠状病毒肺炎疫情日益严峻,除了齐心协力对抗病毒外,科研人员也在对新冠病毒进行更深入的研究,比如疫苗研发,感染后患者生理机能是否会受影响等。其中,关于新冠对生殖方面的影响一直备受关注,迄今为止,已在精液和精子中检测到27种病毒。那么在新冠大流行的背景下,SARS-CoV-2(covid-19)是否存在于精液中呢?如果精液样本中存在极低病毒载量的SARS-CoV-2(covid-19),一旦被使用,那么必定会有传染风险。湖南省疾病预防控制中心以湖南省人类精子库在大流行期间和之后收集的冷冻精液为研究对象,开展了一项回顾性研究,并发表在《Reproductive BioMedicine Online》杂志上。 研究包括来自100个供体的100对精液和血液样本,考虑到两种标本的病毒载量均较低,所以研究人员使用了自主改良的一步法-单管巢式定量PCR(OSN-qRT-PCR)进行SARS-CoV-2(covid-19)检测。此外,为了避免出现“假阴性结果”,使用Naica™ 数字PCR(cd-PCR)对来自阴性精液样品的RNA进行了第二轮群体检测。结果:对于单个血液和精液样本,分别检测了核衣壳蛋白(N)和开放阅读框(ORF-1ab)基因,在100对样本中均呈阴性。此外,根据cd-PCR结果,群体检测的RNA样本中,每孔均 20,000个微滴,并且均不存在阳性液滴。结论:冠状病毒大流行期间和之后,湖南省人类精子库冷冻保存的精液均不含SARS-CoV-2(covid-19),可以安全使用。Paper -2:本研究对已经确诊的3例新型冠状病毒肺炎患者按照不同时间的全血、尿液、粪便标本同时进行qPCR和Naica™ 数字PCR(cd-PCR)的核酸检测,并比较了两种方法检测各类样本中2019-nCoV的差异性,提出改进2019-nCoV核酸检测的综合策略,为核酸检测阴性患者提供更多诊断支持。本实验中数字PCR在病例发病早、中、晚期标本中均能检测到阳性微滴,而qPCR漏检了发病小于5天的标本,检测到的阳性核酸均以中晚期为主。(表2)这也解释了受检测方法灵敏度的局限性,目前大部分假阴性患者都处于疾病发展的早期。此外,在本次实验中数字PCR在重症病例的三种标本中均测到阳性微滴,但因为血、尿和可疑粪便的标本病毒载量偏低,qPCR检测均为阴性。(表3)总之,数字PCR技术可以有效克服qPCR灵敏度不足的难题,精准捕捉到病毒载量较低的血液、尿液和可疑的粪便或肛拭子标本,是qPCR的有益补充,为帮助临床医生准确判断早期感染及患者是否真正痊愈起到了积极的作用,对2019-nCoV的长期监控有重要的意义。两篇Paper均采用了--Naica™ 数字PCR平台法国Stilla Technologies公司的Naica™ 数字PCR技术在进行核酸检测时具有独特的优势。系统利用cutting-edge微流体创新型芯片—Sapphire芯片作为数字PCR过程的耗材。样品通过毛细通道网格以30,000个微滴的形式进入2D芯片中。3色荧光检测仪器,整个流程只需要2.5小时,并可进行数据的质控和结果追溯分析,获得的数据真实可靠。操作流程:原文链接:Paper1:doi.org/10.1016/j.rbmo.2020.11.015Paper2:doi:10.3969/j.issn.1006-3110.2020.11.009
  • 中国研究型医院学会发布《尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则》等13项团体标准公开征求意见稿
    各有关单位和专家:根据《中国研究型医院学会团体标准制定管理办法》有关规定,标准起草组已完成《人源性细胞存储服务通用要求》等13项团体标准征求意见稿的编制工作,现公开征求意见。欢迎有关单位及专家对标准内容提出修改意见和建议,并于2023年8月10日前将《征求意见反馈表》以邮件的形式反馈至我会。联系人:孙浩 邮箱:tbcrha@163.com附件1.《人源性细胞存储服务通用要求》2.《神经系统变性疾病生物样本与数据库建设规范 第1部分:通用要求》3.《神经系统变性疾病生物样本与数据库建设规范 第2部分:人类脑脊液样本采集与处理》4.《神经系统变性疾病生物样本与数据库建设规范 第3部分:死亡供者脑组织样本的采集与处理》5.《基质辅助激光解吸电离飞行时间核酸质谱法体细胞突变检测通则》6.《耳聋基因筛查临床实践标准》7.《耳聋基因诊断与遗传咨询临床实践标准》9.《尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则》10.《人类生物样本库自动化样本处理质量管理体系指南》11.《人类肿瘤生物样本信息采集规范》12.《石蜡样本制作微阵列组织芯片通用技术规范》13.《适用于临床研究的间充质干细胞资源库建设与管理规范》14.《中国研究型医院学会团体标准征求意见汇总处理表》中国研究型医院学会2023年7月10日(征求意见稿)人源性细胞存储服务通用要求.doc(征求意见稿)神经系统变性疾病生物样本与数据库建设规范 第1部分:通用要求.doc(征求意见稿)神经系统变性疾病生物样本与数据库建设规范 第2部分:人类脑脊液样本采集与处理.docx(征求意见稿)神经系统变性疾病生物样本与数据库建设规范 第3部分:死亡供者脑组织样本的采集与处理.doc(征求意见稿)基质辅助激光解吸电离飞行时间核酸质谱法体细胞突变检测通则.docx(征求意见稿)耳聋基因筛查临床实践标准.docx(征求意见稿)耳聋基因诊断与遗传咨询临床实践标准.docx(征求意见稿)尿液有机酸气相色谱-质谱联用检测方法通则.docx(征求意见稿)胶乳免疫比浊技术实验室测定标准.doc(征求意见稿)人类生物样本库自动化样本处理质量管理体系指南.docx(征求意见稿)人类肿瘤生物样本信息采集规范.docx(征求意见稿)石蜡样本制作微阵列组织芯片通用技术规范.docx(征求意见稿)适用于临床研究的间充质干细胞资源库建设与管理规范.docx 中国研究型医院学会团体标准征求意见汇总处理表.doc
  • 文献解读丨基于LCMS-IT-TOF的中药同系物代谢物鉴定方法的建立:五味子木脂素在大鼠体内代谢的性别差异
    本文由中国药科大学药物代谢与药代动力学重点实验室所作,发表于DRUG METABOLISM AND DISPOSITION 38:1747–1759, 2010。 中药通常被定义为一种治疗方案,它不是由单一化合物与单一靶点相互作用组成的,而是几种化合物与多个靶点相互作用的协同药理干预。由于天然产物具有多种多样的生物活性和药用潜力,几乎每个文明都积累了使用它们的经验和知识。 最近,西方制药公司开始更喜欢用纯净的天然产品,而不是粗提取物作为药物原料。然而,在识别通过联合用药来有效对抗疾病的天然化合物或受自然启发化合物方面存在巨大的挑战。此外,体内可能存在的大量代谢物、有害药物相互作用的固有风险以及多组分制剂不可预测的药代动力学特性仍需解决。因此,中药代谢研究不仅是中药现代化的关键,而且对新药的开发具有重要意义。 中药代谢研究是一项艰巨的任务,由于中药成分复杂,代谢途径复杂,缺乏标准品,目前尚处于起步阶段。本研究基于液相色谱-离子阱-飞行时间质谱技术,建立了快速鉴定和分类中药成分代谢物的技术平台。 以五味子木脂素提取物为例,完成了体外和体内代谢研究。在体外研究中,对五种典型五味子的代谢产物进行了鉴定和结构表征。主要的代谢途径有去甲基化、羟基化及去甲基-羟基化。在体内研究中,在大鼠尿液中检测到44种代谢物。根据体外代谢规律,对这些代谢产物进行了快速鉴定和分类,并证实羟基化是木脂素在大鼠尿液中的主要代谢途径。 此外,根据在0 - 12、12 - 24和24 - 36小时采集的尿液样本的相对强度,计算雌性和雄性大鼠代谢产物的“相对累积排泄”(RCE)。结果发现,RCE存在很大的性别差异。对于大多数代谢物,雌性大鼠的RCE显著低于雄性大鼠。综上,目前开发的木脂素五味子代谢研究方法和途径将在中药代谢研究中得到广泛应用。 图1 基于液相色谱-质谱联用技术开发的中药代谢平台和工作流程图2 用LC-IT-TOF/MS测定NADPH存在时,五味子木脂素A及其代谢物在雌性(A)和雄性(B)大鼠肝脏S9中的EICs,以及五味子木脂素A可能代谢物的裂解途径(C-F)。虚线方块:潜在的去甲基化位点 虚线圆圈:潜在的羟基化位点。 综上所述,本研究基于LC-IT-TOF/MS单一平台,为解决中药代谢领域的关键问题——包括代谢产物的鉴定和分类,开发了一套系统方法论(图1)。在此基础上,利用LC-IT-TOF/MS平台对五味子木脂素的代谢产物进行了系统鉴别和分类。 首先,利用基于诊断片段离子的扩展策略对五味子木质素提取物中的五味子木脂素进行快速鉴定,并在此过程中对31种五味子木脂素进行了结构特征鉴定。 其次,基于LC-IT-TOF/MS,对5种五味子木脂素成分的标准品在肝脏和肠道S9系统中的代谢命运进行逐一研究,其主要生物转化方式包括去甲基化(-CH3)、羟基化(+OH)和去甲基化-羟基化(-CH3+OH)。 文献题目《Development of a Systematic Approach to Identify Metabolites for Herbal Homologs Based on Liquid Chromatography Hybrid Ion Trap Time-of-Flight Mass Spectrometry: Gender-Related Difference in Metabolism of Schisandra Lignans in Rats》 使用仪器岛津LC–IT-TOF/MS 作者Yan Liang, Haiping Hao, Lin Xie, An Kang, Tong Xie, Xiao Zheng, Chen Dai, Kun Hao, Longsheng Sheng, and Guangji Wang Key Laboratory of Drug Metabolism and Pharmacokinetics, China Pharmaceutical University, Nanjing, People’s Republic of China
  • 大鼠气管狭窄对能量代谢和呼吸的影响
    -大鼠气管狭窄对能量代谢和呼吸的影响-关键词:塔望科技,动物能量代谢监测系统,全身体积描记系统,阻塞性睡眠呼吸暂停,气道阻塞,导致内分泌类疾病,肥胖症,糖尿病,代谢类疾病,大小鼠能量代谢监测系统...论文摘要阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)病人,经过治疗后,代谢生理健康还是不能恢复。在成功移除大鼠气管阻塞物(OR)后,维持呼吸稳态的同时,伴随有体温调节和能量代谢的异常。本研究比较了气道阻塞(AO)和轻度气道阻塞(mAO)移除后的呼吸稳态与能量代谢。结果显示,移除气管堵塞物后大鼠进食量永久性增加。同时,血清胃饥饿素、下丘脑促生长素受体1a(GHSR1a))和磷酸化Akt比率升高。 其中PI3K/Akt 通路与正常代谢密切相关,该通路异常会导致过度肥胖、胰岛素耐受和II型糖尿病。研究表明,为达到代谢健康状态,阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)患者需要终生注重饮食和内分泌健康。实验计划实验结果图A和B气管直径,对照组C:1.81±0.1mm,气道阻塞组AO:1.04±0.1mm,轻度气道阻塞组mAO:1.19±0.12mm,阻塞物移除组OR:1.87±0.11mm图C气道阻力,AO和mAO组气道阻力分别增加71%和35%。图D呼吸频率。图E潮气量。图F分钟通气量,在室内空气呼吸,AO和mAO组分钟通气量分别增加294%和64%,而OR组与对照组没有明显差别。图G二氧化碳敏感性,AO和mAO组二氧化碳敏感性分别增加59%和25.5%,而OR组与对照组没有明显差别。图A,相对对照组,AO、mAO和OR组的进食量分别增加50.9%、20%和10.7%图B,AO和mAO组白天和黑夜进食量均增加,OR只是在黑夜进食量增加。图C图D图E图F,只有AO组每次进食量增加,进食次数差异均不明显。进食量增加主要是由于每次进食时间延长,再加上夜间“微进餐”(micro meals)图G和图H,AO、mAO和OR组的血清胃饥饿素和GHSR-1a明显增加图I:AO、mAO和OR组的p-AKT/AKT比率分别上升25%、16%和15%图A和D,AO组和mAO组的能量消耗分别增加26.5%和10.2%。图B和C,能量消耗增加与氧气消耗量和二氧化碳产生量增加有关。图E图F和图G,AO组的活动量和体温明显降低。参考文献Yael Segev , Haiat Nujedat1, EdenArazi , Mohammad H.Assadi & ArielTarasiuk.”Changes in energy metabolism and respiration in diferent tracheal narrowing in rats” [J].Scientifc Reports. (2021) 11:19166塔望科技提供的相关仪器方案 大鼠全身体积描记系统可对清醒自由活动动物呼吸参数进行测量,如呼吸频率,潮气量,气道高反应性测试(Airway hyperresponsiveness,AHR)等。测试过程中,动物可以处于清醒自由状态,避免了创伤性气管切开及麻醉的影响,使实验过程更加简便,用于呼吸系统模型动物对药物等反应性研究,呼吸性药物的药理和毒理学研究,特别适合于大批量动物快速初筛试验,适合长期跟踪研究和重复性筛查。动物能量代谢监测系统主要用于实时监测和记录小动物代谢运动相关指标,定性定量测量分析动物行为活动及其与呼吸代谢的相互关系,广泛应用于营养、肥胖、糖尿病、心血管等代谢相关性疾病研究。可选择参数包括能量消耗,食物和水分摄取,取食和饮水模式,空间位置,总的活动量和转轮次数,体重,心率,体温及自动化的行为分析等,所有数据都可同步化储存到计算机内小动物麻醉机吸入式动物气体麻醉机,将挥发性麻醉剂或具有麻醉性的气体,途经动物的呼吸道进入体内产生麻醉效果。其麻醉起效快并且复苏快、深度易控制、动物的发病和死亡率低、已被全球科研工作者和宠物临床医师广泛认可和应用。END
  • ATAGO(爱拓)UG-α尿比重测量仪通过计量局认证评审鉴定
    近日,由华南国家计量测试中心广东省计量科学研究院专家评审组对ATAGO(爱拓)尿液比重测量仪进行了计量认证现场评审。广东省计量科学研究院是华南国家计量测试中心(简称SCM)作为国内获得国家认可委员会认可项目最齐全的校准实验室,是华南地区计量标准装置最全,覆盖领域 最广,检测质量最好的法定计量技术机构。   经现场SCM委员会审核,评审专家组对ATAGO(简称:爱拓)尿液比重测量仪给予了肯定,评审组专家认为ATAGO 尿液比重测量仪 检测环境、仪器设备和标准方法应用均能满足检测标准要求,顺利通过计量认证评审。 UG-α尿液比重测量仪 UG-α尿液比重测量仪 校准鉴定证书 UG-α尿液比重测量仪,PAL-10S 数字式手持数显尿比重折射计两款产品在临床医学、体育检测过程中所展示的功能及便携性。通过折光率与尿比重曲线,可以直接读取尿比重值,针对温度变化的自动温度补偿功能。快速,方便,高效。选型提示:人类、犬类、猫科等其折射率与尿比重的对应曲线是不同的,可以因检测对象不同对应选择相应的型号。成功被应用单位举例:北京国家反兴奋剂中心、2008北京奥组委、2010广州亚组委等 ATAGO(爱拓)UG-α尿液比重测量仪计量结果 鉴定计量局SCM委员会一致认为:ATAGO(简称:爱拓)仪器研制开发的“UG-α尿液比重测量仪”技术均达到国内领先水平,同意通过计量局认证鉴定资格。ATAGO(爱拓)为您提供100种以上物质浓度检测方案,欢迎您的咨询。官方网站:http://www.atago-china.com企业QQ:800064900广州分公司电话:86-20-38108256/38106065/38106057上海办事处电话:86-21-61131991/61131992/61131993
  • GC/MS将成为尿路感染诊断快速准确的新方法
    如果初步代谢组学研究得到证实,那么尿路感染的诊断即可通过GC/MS检测尿路代谢物来实现。   尿路感染涵盖的感染范围很广,是世界各地常见的泌尿疾病。一般尿路感染的诊断方法是检测细菌培养后的尿液,但是这种方法并不准确,约有20%的女性感染者被误诊为阴性。   荷兰莱顿大学医学中心的科学家们已经另辟蹊径的采取了基于代谢组学的诊断方法。在尝试了核磁共振和LC/MS之后,现在他们利用配备大气压化学电离源(APCI)的GC/MS将代谢组学技术应用在临床工作中。   研究者检测了尿路感染患者的尿液,并采用统计学来分析特殊代谢分子的水平。这些特殊代谢分子可看做是感染现象的生物标志物。他们对比了特殊代谢分子在感染患者尿液和未感染控制样本中的含量,果然在感染样本中比未感染样本高出很多。   感染病人尿液的乳酸浓度远高于未感染尿液样本,而乳糖水平在二者中含量与乳酸相反。这两种化合物与细菌活性相关联。其它与肾功能相关的化合物浓度也发生了变化。   在这个阶段,科学家有望构建一个生物标志物系列作为尿路感染的指示器。如果在进一步的分析研究后他们成功了,那么一个快速、自动化的确诊尿路感染的方法将取代现有方法。 编译:郭浩楠
  • 基于光纤传感的尿比重仪
    仪器名称 基于光纤传感的尿比重仪 单位名称 深圳大学 联系人 李学金 联系邮箱 lixuejin@szu.edu.cn 成果成熟度 □正在研发 &radic 已有样机 □通过小试 □通过中试 □可以量产 合作方式 □技术转让 &radic 技术入股 □合作开发 □其他 成果简介: 基于光纤传感的尿比重仪是一种新型肾功能及人体体液溶质含量的监控仪器。采用先进的光纤传感技术,可实现高灵敏的实时在线检测(现有比重仪做不到),并能大大缩小仪器的体积。 本仪器的灵敏度比市场上现有尿比重仪高10倍以上,并能实现检测即时数显和实时记录等功能。还可以通过转换标定体系,转换成液体浓度、折射率等量的检测。 应用前景: 基于光纤传感的尿比重仪主要用于检测人体尿液的比重值,用于临床医学上诊断肾脏的浓缩功能,并可用于初步诊断糖尿病、蛋白尿、急性肾炎、高热、脱水、尿崩症、尿毒症、慢性肾小球肾炎、急性肾炎多尿期等;也可以反映一些疾病的程度,如糖尿病患者,如果血糖升高,尿比重值也会相应升高。 另外,本仪器还可广泛用于各种液体的浓度、折射率的检测或监控,如酿酒过程中,酒精浓度的监控;各种化学药剂生产过程中的浓度监控(相比电学的方法,采用光学的检测方法,不但灵敏度高,而且在易燃易爆环境中使用安全可靠);环境水体污染程度检测等。 本仪器可应用于人体健康指标智能监测,安装于小便池中,人们可以通过每次小便及时得知自己的健康情况,是一种新型的智能家居。随着&ldquo 智慧城市&rdquo 列入十二五规划的一项重要内容,物联网应用技术将得到一个新的发展和完善。智能家居做为物联网最广泛的应用,不管是在物联网的大浪潮下、还是在智慧城市建设中都有着广泛的前景,蕴含着巨大的市场潜力。 知识产权及项目获奖情况: 已获得专利,专利名称:一种液体比重仪,专利号:201520045154.2
  • 长沙清查行动!整楼封锁,逐一尿检!目前毒检方式,你知道几种?
    红网时刻1月14日讯 1月13日晚10点,长沙警方出动300名警力封锁清查了“城市经典”大楼,对楼内所有人员逐一尿检,并在一宾馆里发现一名男子毒 品尿检呈阳性,随即该男子被警方带至坡子街派出所进一步调查。毒 品主要通过刺激人体的中枢神经系统,使吸食者产生兴奋、抑制的一种依赖性麻醉药品或者精神药品。吸食毒 品会引起诸如消化系统、血液系统、呼吸系统、生殖系统等诸多脏器的严重损伤。毒 品种类多种多样,不论哪一种,都在危害着自己、危害着家庭以及社会。随着法庭科学领域及其相关领域的技术不断更新,针对人体内不同生物检材的毒 品检验鉴定技术也在持续发展。在生物检材的选取方面,根据现场情况或检材本身特点越来越向无损性、保护隐私等方向发展。体内摄毒检验中常见的生物检材有血液、尿液、唾液、毛发等,摄毒命案中还可提取针眼皮肤、胃内容物、肝、肾等生物组织进行检验,以完成入体途径、血浓度、死因等体内链条的鉴定。此外,还有指甲、胎粪等非常规检材,也能提供许多有价值信息。当前体内毒 品痕量检测有几种?唾液多应用在毒驾检查中,采集方式安全无创伤,不受时间、地点、性别、隐私的影响。唾液中毒 品来源于摄毒后残留在口腔中的原体,一般在摄毒后12~24h后原体消除,后期有一些来源于经过体内代谢后进入唾液的毒 品原体和代谢物。因此,检验结果可能会出现两个极端,唾液中毒 品浓度较低或极高。血液和尿液是常规检验体内毒 品的检材。毒 品在血液检材中有效检验时间窗一般是几分钟、几小时到几天,血液因不同个体间血容量相近差异性小,则作为毒 品定量、测定中毒量和致死量的最 佳检材。在尿液检材中有效检验时间窗一般是1天到数天。尿液由于含毒 品原体或代谢物浓度高,是应用于筛查鉴定缩小范围的首 选检材。GA510 尿液痕量毒 品快速检测系统,由奥谱天成与中国科学院稀土材料研究所联合研制,尿液毒 品快速检测仪,选配 4G 模块、身份证识别模块和可补光摄像头,可用于公安民警外出现场执法使用,现场对吸毒人员进行拍照和身份验证。设备内置大容量电池,充满电能使用一天(检测 100 人份),并现场打印结果作为公安禁毒民警现场查验处置依据。毛发是近些年来摄毒检验中较为热门的检材,其能反映远期较长时间(1个月前至半年甚至更长时间)的摄毒信息。一般头发的生长速率为 1~1.2cm/ 月,对错过案发时血尿等检材提取期的案件,头发可提供案发当时摄毒信息。一般来说,尿液中的毒 品成分在吸毒后6-10 天就无法检出,而毛发几个月甚至几年都不一定会脱落,忠实地记录着身体里发生过的情况。也就是说,只要头发足够长,毛发就可以反映主人的吸毒情况!例如女性几十厘米长的头发,甚至可以反映几年内的吸毒情况。GA500 智能毛发痕量毒 品检测系统,由奥谱天成与上海市公安局联合研发,手持式毛发毒 品快速检测仪,标配 4G模块和可补光摄像头,并标配身份证识别模块,非常适用于公安民警外出现场执法使用。
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