成孔毒素

原标题：“纳米海绵疫苗”能“扣留”成孔毒素 可避免耐药性金黄色葡萄球菌感染恶化 科技日报讯 据物理学家组织网近日报道，美国加州大学圣地亚哥分校纳米工程师开发出一种“纳米海绵疫苗”，经小鼠实验证明，其能大量吸收耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）产生的成孔毒素——无论在血管还是在皮肤，因此能预防MRSA放出的alpha-溶血素造成的影响恶化，可作为一种安全高效的抗毒素疫苗。相关论文发表在近日的《自然·纳米技术》上。 纳米海绵是在“类毒素疫苗”平台的基础上开发出来，是一种生物兼容粒子。其内核是高分子聚合物，外面包裹着红血细胞膜，直径约85纳米，1000个疫苗才有一根头发粗细。在注射后2周左右，就能从体内排清。 每个红血细胞膜都能“抓住”并“扣留”金黄色葡萄球菌放出的alpha-溶血素，不需要通过热处理或化学反应破坏毒素结构。嵌入毒素颗粒后，纳米海绵能作为疫苗，引发小鼠免疫系统的抗体与毒素中和，使注射了致死剂量毒素的小鼠免于死亡。 类毒素疫苗对抗的是毒素或毒素组，而不是产生该毒素的细菌。细菌变异会使抗生素抗性下降，而类毒素疫苗提供了一种有前景的方法，不会对抗生素产生依赖。论文高级作者、该校雅各布工程学院纳米工程教授张良方（音译）说：“直接瞄准alpha-溶血素还有另一个好处，因为这些毒素生成了有毒环境作为防御机制，让免疫系统在对抗金黄色葡萄球菌时更加困难。” 除了MRSA和其他金黄色葡萄球菌感染之外，纳米海绵疫苗的方法还能用于生产抗多种毒素的疫苗，包括大肠杆菌（E.coli）和幽门螺杆菌（H.pylori）。而且，纳米海绵疫苗比由热处理金黄色葡萄球菌制成的类毒素疫苗更加安全高效。经一次注射后，使用热处理类毒素疫苗的小鼠仅10%生存下来，而用纳米海绵疫苗的小鼠生存率达50%；经两次加强注射，纳米海绵疫苗小鼠的生存率达到100%，热处理类毒素疫苗小鼠为90%。 本研究是研究小组今年初提出的“吸收体内多种成孔毒素的纳米海绵——从细菌蛋白质到蛇毒”项目的连接。成孔毒素会在细胞膜上造孔，使细胞泄露而死亡。它们非常强大，能杀死免疫细胞，因此大部分候选疫苗只能用加热或经过化学处理的毒素，破坏它的某些蛋白以削弱其毒性，但这也会削弱对抗毒素的免疫反应。 “加热越多，蛋白结构受到的破坏也越多，因为免疫细胞识别的正是这种结构，并制造抗体来对抗它。”张良方解释说，纳米海绵类毒素疫苗避免了这一问题，它的方法是“扣留”而不改变，就像给一个危险的罪犯带上了手铐，而当毒素攻击包裹着红细胞膜的纳米粒子时，“不会产生任何影响，它们只是把毒素锁定在那里。”来源：中国科技网-科技日报 作者：常丽君 2013年12月27日

槽最近听说检测黄曲霉毒素，这个应该是毒素吧，槽查了网址，是个致癌物撒，应该就是一种毒素吧？？？这个东东既然这么恐怖，槽们农村哪些粮食发霉就不敢吃啦http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09507.gif

请问，疾控系统是不是要改测黄曲霉毒素的国标啊，好象是改成荧光光度法和液相的方法，真的吗？？那样原来的仪器怎么办啊？

我做食品安全检测方面的论文，希望大家能提供一些生物毒素和中毒控制常见毒物检测技术方面的资料。 谢谢大家！有的话，麻烦传到haijun.yunfeng@yahoo.com.cn谢谢了

cavalry119在来信中提到：在内毒素的正式干扰试验中，其结果判定为 供试品溶液及检查用水应呈阴性，含内毒素的样品及用检查用水稀释的内毒素标准品应为阳性，试验为有效，其他的都能懂，但是正式干扰试验就是为了确定供试品的最大的不干扰测定浓度，供试品溶液呈阴性的话，那后面的内毒素的半定量检测中，还需要对供试品进行稀释，这样供试品不也一样应该呈现阴性嘛？

A型肉毒毒素曾被美容院宣称为“美容除皱神药”。7月底，这种肉毒毒素被医药监管部门列为毒性药品，加强了监控管理。但近日记者发现，大量不明来源的“肉毒毒素”正在悄然流入市场，并风靡于京城大大小小的整形美容机构。　　整形机构依旧大力推广　　被列入毒性药品管理的A型肉毒毒素，从生产到经营理应面临更为严格的控制。然而，记者经过调查发现，众多美容整形机构对于A型肉毒毒素的使用仍然极不规范，存在重大安全隐患。　　9月1日至4日，记者调查发现，在北京多家美容整形机构，注射肉毒毒素除皱仍是主推的项目之一。“除皱针”、“瘦脸针”这两个肉毒毒素的代名词也频频出现在很多美容整形机构的宣传册，依旧被大力推广着。　　9月4日，北京伊美尔长岛医院一位张姓工作人员向记者介绍，该院依旧提供肉毒毒素注射除皱的服务。同日，伊美尔幸福医院的一位李姓工作人员也表示，该院可以进行注射除皱。据称，两院所用的肉毒毒素都是兰州生物制品研究所生产的衡力A型肉毒毒素。此外，北京伊美尚整形机构及一些生活美容机构也称，可以提供肉毒毒素进行除皱，产品依旧为“衡力A型肉毒毒素”。　　“现在正规的综合性医院想要进肉毒毒素都很难，何况是普通的整形美容机构，更别提生活美容机构了”。9月5日，北京市海淀区一家综合性医院皮肤科医生透露，现在肉毒毒素市场混乱，很多假冒产品流入市场。据这位不愿透露姓名的医生介绍，一些整形美容机构的肉毒毒素进货渠道与综合性医院的进货渠道完全不同，因此其货品的质量很值得怀疑。　　9月4日，北京中关村整形医院皮肤科副主任医师苏明山介绍，自7月底以来，A型肉毒毒素的管理就相当严格了，在医院“一人一次处方只能开一针，剂量在100单位，且不能在科室里储存，使用的情况需要每天登记”。　　然而，9月4日，北京伊美尔长岛医院门诊部客服部一位朱姓咨询师表示，伊美尔给顾客注射肉毒毒素时没有什么限制，“任何时间都可以打”。　　货源来历不明　　尽管肉毒毒素的“除皱”功能一直未获国内认证，但是偷偷使用这种药物“去皱”，在国内美容整形界已是公开的秘密。被纳入毒性药品管理后，通过正规渠道供应的肉毒毒素因被严格限制而数量有限。然而，市场上美容整形机构的肉毒毒素供应量并未见少，那些市场上号称的肉毒毒素究竟来自何方？　　9月3日，记者在网络上看到多家提供衡力A型肉毒毒素的卖家，且均称自己的货品为正品，并称向北京多家整形美容机构供货。一位卖家甚至表示，可以向记者提供来自法国的肉毒毒素。记者查询得知，目前经允许在国内上市的肉毒毒素，并无出身法国的。　　此外，很多声称代理A型肉毒毒素产品的卖家也活跃在网络上。4日，记者联系了淘宝上一位名为“浪漫满屋0202”的北京卖家。该卖家表示，所提供的衡力A型肉毒毒素来自于国药控股。　　然而，该卖家的说法并未得到国药控股的印证。9月4日，国药控股北京有限公司一位工作人员介绍，该公司“A型肉毒毒素已经缺货很长一段时间了”，该工作人员还强调，在列入毒性药品管理后，任何单位要进A型肉毒毒素，都必须出示医疗机构经营许可证。而“浪漫满屋0202”却坦诚，自己只是开了一个针灸工作室，并非医疗机构。　　事实上，A型肉毒毒素不仅在药品批发企业出现短缺，生产厂家也对其流入市场进行了严格把控。9月4日，国内唯一一家正规A型肉毒毒素生产单位——兰州生物制品研究所A型肉毒毒素咨询处一位工作人员介绍，需要进货的单位，必须出示医疗机构经营许可证明。“主营科目仅为美容整形的，不会准予采购”。　　根据国家食品药品监督管理局联合卫生部于7月21日发布的《关于将A型肉毒毒素列入毒性药品管理的通知》，A型肉毒毒素生产企业须将A型肉毒毒素年度生产计划、生产情况及指定经销商及时报所在地省级药监部门备案,并将生产企业指定经销商的情况通报药监部门。此外，按照规定，药品批发企业只能将A型肉毒毒素制剂销售给医疗机构，未经指定的药品经营企业不得购销A型肉毒毒素制剂。　　不可用于美容　　即便使用正规渠道获得的A型肉毒毒素，不少美容整形机构却违反国家相关规定，利用肉毒毒素为顾客“除皱”、“瘦脸”。　　9月4日，国家药监局药品安全监管司特殊药品监督处一位工作人员表示，目前在国内上市的肉毒毒素批准的适应证并无“除皱”一项。记者查询得知，目前国内批准上市的两个A型肉毒毒素保妥适和衡力，主要适用于眼脸痉挛、面肌痉挛等成人患者及某些斜视等，并无美容“除皱、瘦脸”项目。　　根据《关于将A型肉毒毒素列入毒性药品管理的通知》，医疗机构医师应当根据A型肉毒毒素药品说明书中的适应证、药理作用等开具处方。　　对此，伊美尔长岛医院的工作人员称，并未获得此通知，并表示医院作为正规的医疗机构，可以使用肉毒毒素进行除皱、瘦脸。至于处方的开具，则由医生来进行“操作”。不过，在伊美尔长岛医院，上述朱姓咨询师在看完记者的脸型，并让记者做出简单的几个动作之后，便作出了记者可以“注射A型肉毒毒素瘦脸”的判断，并称如记者愿意的话，可以安排医生开具处方并进行注射。　　北京市卫生局12320一位工作人员表示，按照国家规定，医疗机构应在适应证范围之内使用A型肉毒毒素，如有违背应按照相关规定进行处罚。　　本报记者 朱瑞娟 实习生 洪丽 付丽红（责任编辑：盛卉）

关于举办中德食品安全风险监测技术交流暨食品中真菌毒素和河豚毒素检测技术研讨班的函本次培训将邀请德国联邦风险评估研究所(BfR)Hensel教授及国家食品安全风险评估中心吴永宁研究员等著名专家进行报告和授课，并有多名长期从事实验室毒素检测的技术专家进行授课和实验指导。 主要内容有：(一)欧盟与德国的食品安全与组织结构体系；(二)德国的风险评估与风险交流，BfR的工作任务与特点；(三)欧盟参比实验室体系和设在BfR的国家参比实验室介绍；(四)中国食品安全风险监测体系与现状；(五)真菌毒素检测技术研究进展；(六)河豚毒素检测技术研究进展；(七)质谱检测技术及应用；(八)食品中黄曲霉毒素检测操作技术；(九)面粉及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测操作技术；(十)玉米及其制品中伏马毒素检测操作技术；(十一)海产品中河豚毒素检测操作技术。一、培训对象 各级疾控中心及有关单位从事食品安全风险监测或毒素检测相关专业技术人员。二、时间和地点 时间：2014年5月12日报到，13-16日培训； 地点：浙江铁道大厦(杭州市城站广场8号，电话：0571-87830688)。三、其他事项(一)本培训班属于国家级继续医学教育项目(项目编号：2014-12-06-013(国))，学员学习结束后经考试合格授予国家级Ⅰ类学分10分；(二)参加培训学员每人收取资料费600元，食宿、差旅费自理；(三)请参加人员4月30日前登陆以下网站网上注册报名http://www.cdc.zj.cn/bornwcms/meeting/index.html，会议注册码为cfvb79，请注意区分大小写，报名成功后务必记住6位数字用户码，以便查询和修改。

一、概述：黄曲霉毒素主要是两种霉菌黄曲霉及 A.paraticus的二级代谢物。这些霉菌在湿热的环境和耕作土地上污染的植物产生。黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1，AFM1）属于自然界强烈的致癌物质之一，是从牛奶中分离出来的黄曲霉毒素的代谢产物。本试剂盒利用酶联吸附测定法（ELISA）对牛奶和奶粉中的AFM1含量进行快速、定量检测。二、原理本试剂盒是利用直接竞争酶联吸附微孔模式进行检测，灵敏度可达20 ng/kg（ppt）。样品或标准品中游离的黄曲霉毒素M1与酶标抗原竞争结合包被在微孔中的抗体上的结合位点，奶制品黄曲霉毒素M1快速检测，经洗板洗去多余的酶标抗原与黄曲霉毒素M1后加入反应底物，上海佑隆生物科技有限公司,佑隆生物科技,其与酶标物作用而成蓝色，加入反应停止液后颜色由蓝色转变为黄色，黄色越深则表明黄曲霉毒素M1越少，用酶标仪在450 nm处测定光吸收值可准确定量检测样品中的黄曲霉毒素M1的污染水平。三、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器1、试剂：庚烷，二氯甲烷，甲醇，PBS缓冲液（pH 7.2，奶制品黄曲霉毒素M1快速检测，3.35 g Na2HPO4 ▪ 12H2O，0.2 g KH2PO4，0.2 g KCl，8 g NaCl，加蒸馏水至1000 ml）2、仪器：微孔板酶标仪，涡旋振荡器或超声波粉碎仪或摇床，离心机及离饣心管，20 μL、200 μL、1 mL[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]，氮吹仪或旋转蒸发仪。四、结果判定用酶标仪在450 nm处测得每孔的光吸收值（A）绘制标准曲线。通过标准曲线可准确定量样品中黄曲霉毒素M1的含量。通过标准曲线计算所得值乘以样品处理的稀释因子即为实际样品中黄曲霉毒素M1的含量。标准曲线：横坐标为黄曲霉毒素M1标准品浓度，纵坐标为百分比（即各标准品孔和样品孔光吸收值除以0 ppt标准品孔光吸收值再乘以100%所得）

蓝藻（也称蓝细菌）是地球上最早出现的光合自养生物，它们利用水作为电子供体，利用太阳能将二氧化碳还原成有机化合物，并释放出自由氧。蓝藻广泛分布于淡水、咸淡水、海水和陆生环境。蓝藻能产生一系列毒性很强的天然毒素（称为蓝藻毒素,Cyanotoxin），根据化学结构可分为三类：环肽、生物碱和脂多糖内毒素。当湖泊、河流等蓝藻大量繁殖而形成水华时，其中的鞘丝藻、束丝藻、Umezakia、拟柱胞藻，主要是拟柱胞藻(Clindrospermopsis)细胞破裂，产生拟柱胞藻毒素(又称筒胞藻毒素Cylindrosperm opsin)，简称CYN，分子式是C15H21N5O7S，分子量415.4，易溶于水、甲醇、二甲亚砜；是具有细胞毒性、肝毒性、神经毒性和遗传毒性的生物碱毒素，拟柱胞藻毒素是蛋白质合成的抑制剂，可能通过抑制蛋白质合成能导致肠胃炎、肝损伤、肾损伤、肠损伤，可能危及人体的健康。WHO《饮用水水质准则》对拟柱孢藻毒素表示了关注，暂时没有提出健康指导值。 我们已经完成该检测方法的确认，开始进行该藻毒素的检测了。

一、背景信息　　近日，媒体曝光了广西梧州和广东肇庆两地市场所出售的部分散装花生油存在黄曲霉毒素超标情况。黄曲霉毒素是什么?毒性怎样?本期将为您解读。　　二、专家解读　　(一)黄曲霉毒素的污染在世界范围内广泛存在。　　黄曲霉毒素(Aflatoxin，AF)最早被发现于1960年，是黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillusparasiticus)的次级代谢产物，目前已分离鉴定出12种以上，常见的有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、B2a、G2a、BM2a和GM2a等。黄曲霉毒素的热稳定性非常好，常规烹调和加热法不易分解。　　世界范围内黄曲霉毒素的污染相当广泛，包括谷物、坚果和籽类以及牛乳等，尤以玉米、花生被污染的程度最严重。其主要原因是食物在田间未收获前被黄曲霉等产毒菌浸染，在适宜的气温和湿度等条件下繁殖并产毒，或未经充分干燥，在储藏期间产生大量毒素。食用油也存在容易受黄曲霉毒素污染的问题，但通过原料筛选、碱炼、吸附等控制手段可以使成品油中黄曲霉毒素降到非常低的水平。　　(二)摄入量决定黄曲霉毒素是否引起急性中毒。　　世界范围内曾报道数起人类的黄曲霉毒素急性中毒，如非洲的霉木薯饼中毒，印度的霉玉米中毒等。2004-2005年肯尼亚暴发了迄今史上最大规模的黄曲霉毒素急性中毒事件，中毒千余人，死亡125人，中毒玉米中检出黄曲霉毒素B1的含量高达4400ppb(μg/kg)，是罕见的黄曲霉毒素中毒事件。黄曲霉毒素中毒的症状一般为一过性发烧、呕吐、厌食、黄疸、腹水、下肢浮肿等肝中毒症状，严重者出现暴发性肝功能衰竭、死亡。　　根据我国及世界其他国家的标准规定，黄曲霉毒素的含量如果在安全限量范围之内，并不会对消费者的健康构成风险。　　(三)全球已高度重视对食品中黄曲霉毒素的控制。　　黄曲霉毒素B1是影响人和动物健康的主要真菌毒素之一，也是全球食品安全控制中最主要的真菌毒素。2003年联合国粮农组织(FAO)发布的全世界食品和饲料真菌毒素法规报告中显示，除国际食品法典委员会(CAC)的规定以外，全球100多个国家和地区制定了各类食品中黄曲霉毒素限量标准。食品中黄曲霉毒素B1的限量范围为1-20ppb，黄曲霉毒素总量(AFB1、B2、G1、G2)的限量范围为0-35ppb。　　2011年我国发布的《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》(GB2761-2011)中规定花生及其制品中黄曲霉毒素B1的限量为20ppb。　　(四)“土榨油”看似原生态实存安全隐患。　　近年来，“纯天然”和“原生态”成为部分消费者的追求，除了购买“土榨油”外，也有使用家用榨油机自制油的方式。对于这两种榨油方式，专家认为存在较大安全隐患。除了原料品质是否过关的问题，“土榨油”或自榨油还存在下列问题：未经过精炼加工，杂质多，易氧化变质;榨油设备不易彻底清洗干净，残留的油渍及谷物残渣在氧化后会产生霉变，食品安全隐患很大;此外，资源利用率低，会造成很大浪费。　　三、专家建议　　(一)科研人员应加大“从田间管理到加工过程”对黄曲霉毒素污染及控制手段的研究力度，为保证食品安全提供更加有效的科技支撑。　　(二)以玉米、花生等为主要原料的食品生产、加工企业，特别是“土榨油”生产作坊，应严格执行食品安全国家标准和相关技术规范，积极采取有效措施，重视原料安全，严格把关每一个生产环节，确保产品的质量和安全。　　(三)媒体应注重全面、科学、客观报道，采用相应领域权威专家的专业观点，以正确解读国家相关标准法规，引导消费者理性认识和理解黄曲霉毒素的危害，避免公众过度恐慌。　　(四)消费者应注意培养良好的消费习惯，注意产品的标签、标识，做到在保质期内妥善储藏。特别应注意通过正规可靠渠道购买食用油，不要片面迷信“纯天然”和“原生态”制品。来源：国家食药监局

1 神经毒素神经毒素主要包括：鱼腥藻毒素如鱼腥藻毒素-a (Anatoxin-a)、鱼腥藻毒素-a(s) (Anatoxin-a(s))、高类鱼腥藻毒素-a (Homoanatoxin-a)；麻痹性或瘫痪性贝毒素(Paralytic Shellfish Poisoning, PSP)如石房蛤毒素(Saxitoxin)、新石房蛤毒素(Neosaxitoxin)和膝沟藻毒素(Gonyautoxin)等；腹泻性贝毒素(Diarrhetic Shellfish Poisoning, DSP)如大田软海绵酸(Okadaic acid, OA)和鳍藻毒素1-3(Dinophysistoxin, DTX)等；记忆丧失性贝毒素(Amnesic Shellfish Poisoning, ASP)；神经性贝毒素(Neurotoxic Shellfish Poisoning, NSP)及西加鱼毒素(Ciguatera Fish Poisoning, CFP)( 尹伊伟，2000)。鱼腥藻毒素-a是一种低分子质量的生物碱(图1-2)，相对分子质量为165(Hitzfeld B C, 2000-II)。目前发现鱼腥藻、颤藻、束丝藻(Aphanizomenon)、柱孢藻(Cylindrospermum)和微囊藻可以产生鱼腥藻毒素-a。高类鱼腥藻毒素-a (图1-3)是从美丽颤藻(O. formosa)中分离到的一种鱼腥藻毒素-a的同系物，它用丙酰基替代了鱼腥藻毒素-a中C-2上的乙酰基。鱼腥藻毒素-a是神经递质乙酰胆碱的类似物，它可与乙酰胆碱受体结合，但乙酰胆碱酯酶或真核生物中的任何酶均不能降解它。它与乙酰胆碱受体结合后可使肌肉因过度兴奋而痉挛，如果动物的呼吸系统受到影响，动物会因窒息而死亡。鱼腥藻毒素-a(s)是N-羟基鸟嘌呤的单磷酸酯(图1-4)，到目前为止仅从北美洲发现，由水华鱼腥藻(A.flos-aquae)和A.Lemmermannii产生。鱼腥藻毒素-a(s)可以阻止乙酰胆碱酯酶对乙酰胆碱的降解，使肌肉因过度兴奋而痉挛(Henriksen P, 1997)。 图1-2 鱼腥藻毒素-a分子结构图Figure 1-2 Structure of anatoxin-a 图1-3 高类鱼腥藻毒素-a分子结构图Figure 1-3 Structure of homoanatoxin-a 图1-4 鱼腥藻毒素-a(s)分子结构图Figure 1-4 Structure of anatoxin-a(s)麻痹性贝毒素是一类烷基氢化嘌呤化合物，形似三环化合物，是一种非蛋白质毒素。分子结构如图1-5所示。类似于具有两个胍基(guanidyl)的嘌呤核，为非结晶、水溶性、高极性、不挥发的小分子物质，在酸性条件下稳定，碱性条件下发生氧化，毒性消失；毒素遇热稳定，并不被人的消化酶所破坏。其中毒性最强的为STX、neoSTX、GTX1、GTX3和dcSTX(1300Mu• μmol-1)，但其他几种毒素很容易水解成毒性成份。其来源生物均为甲藻，如有毒膝沟藻(Gonyaulax)、亚历山大藻(Alexandrum)和Pyrodinium等。麻痹性贝毒的强度是通过转换成STX的毒性来表达的。这些毒素主要是由海洋中的赤潮藻甲藻产生的，可在贝类中累积进而危害人类。由于这些毒素最早是从摄食有毒藻类的贝类体内发现，故被称作贝毒。在淡水中PSP主要存在于水华束丝藻(Aph. flos-aquae)、卷曲鱼腥藻(A.circinalis)、Lyngbyawollei和C. raciborskii中(Bialojan C, 1988)。麻痹性贝毒素也是到目前为止赤潮藻毒素中分布最广、危害最大的一类，主要包括石房蛤毒素及其四氢呋喃衍生物，发现的有近三十种(表1-1)，由分子结构中R4基团的不同，可分为四类：氨基甲酸酯类、N-磺酰氨甲酰基类、脱氨甲酰基类和脱氧脱氨甲酰基类。其中石房蛤毒素(STX)已被收入《化学武器公约》中禁止化学品的第二类清单。我国也将PSP毒素列为贝类产品的常规检测指标之一。 图1-5 麻痹性贝毒素分子结构图Figure 1-5 Structures of Paralytic Shellfish Poisons (PSPs)麻痹性贝毒是一类神经肌肉麻痹剂，可以作用于细胞膜上的钠通道使之关闭，抑制动作电位的产生，使乙酰胆碱不能释放，从而导致神经麻痹。其毒理作用为阻断细胞钠离子通道，造成神经系统传输障碍而产生麻痹作用。对人体的中毒量为600~5000Mu，致死量为3000~30000Mu，目前尚无对症解毒剂。PSP的毒性为LD50=3.4×10-9。联合国卫生组织规定，100g贝类可食部分的PSP毒力超过80ug(400Mu)时不得食用(丘建文，1991)。海洋生物中，由于贝类对麻痹性贝毒具有极强的抵抗性，因此这种毒素就在贝类体内储存积累，人类或动物食用这些有毒贝类会产生一系列神经麻痹症状，严重的可能致命。由于其对人类健康造成危害，因此成为赤潮毒素中最受关注的一种，许多国家已在贝类生产、贸易过程中，对此毒素制订了严格的监测和管理条例。与贝类相比，鱼类对这种毒素却极为敏感。腹腔注射时，其对鱼类的半致死剂量(LD50)为(4~12)×10-6，口服为(100~750)×10-6，给药后5~15min，鱼类即失去平衡，0~60min就出现死亡。因此，在此类赤潮发生时，常出现鱼类大量死亡现象，欧洲的北海及北美的东北海岸都曾发生因麻痹性贝毒中毒的大规模死鱼事件，死亡的鱼类有玉筋鱼和鲱鱼等。值得注意的是，本来源于藻类的贝毒，许多是通过浮游动物的摄食而传递给鱼类，从而引起鱼类的死亡。因此，麻痹性贝毒对鱼类的危害，既可通过藻细胞本身的胞外分泌物也可通过摄食染毒的其他动物使鱼类中毒。不过由于麻痹性贝毒对鱼类的毒性很高，毒素不会在鱼体内大量残留，中毒死亡鱼体肌肉内的残留毒素含量很低。我国虽未有因麻痹性贝毒中毒而引起鱼类死亡的报道，但已有产生这类毒素的藻类赤潮发生，而且能产生麻痹性贝毒的藻类在我国海域普遍存在，因此，应高度警惕这类赤潮的发生(尹伊伟，王朝晖等，2000)。2 脂多糖内毒素脂多糖内毒素是蓝藻细胞壁的组成部分，由脂A、核心寡糖和O特异多糖组成，其中脂A分子结构式如图1-6所示。目前已从裂须藻(Schizothrix calcicola)，颤藻，鱼腥藻，微囊藻和Anacystis中分离到。蓝藻脂多糖内毒素的脂A与格兰氏阴性细菌的脂多糖不完全相同，种类更多，而且往往含有少量的磷酸。脂多糖内毒素包括细胞毒性生物碱(Alkaloid)、皮肤毒性生物碱和刺激性毒物——脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS) (Metcalf J S, 2004)。

今年5月，浙江宁波、舟山等地上百名消费者在食用淡菜（贻贝的俗称）后，出现了腹泻、呕吐等症状。后经检测发现，他们食用的来自福建省福清的淡菜受到了腹泻性贝类毒素的污染。因受污染，淡菜不得不退市一个多月。6月，浙江省海洋与渔业局联合发出《关于进一步加强采捕期淡菜质量安全监管工作的通知》明确要求，重点抽检麻痹性贝类毒素、腹泻性贝类毒素和大肠杆菌。 “有毒赤潮藻类产生的毒素经贝类或鱼类摄取后在其体内转化累积为贝类毒素，被人摄食后就会危及食用者的身体健康和生命安全。”中国计量科学研究院生物研究室傅博强博士介绍了水产品受有毒赤潮污染的情况。全世界每年由有毒鱼类、贝类引起的食物中毒事件超过两万件，死亡率为1%。其中麻痹性贝毒（PSP）和腹泻性贝毒（DSP）是分布最广、危害最大的贝类毒素。 国家标准《农产品安全质量 无公害水产品安全要求》（GB 18406.4-2001）对水产品中的贝类毒素含量进行了规定：麻痹性贝毒限量≤80μg/100g，腹泻性贝毒限量≤60μg/100g。其实，贝类毒素离我们的日常生活并不遥远。据国家海洋局东海环境监测中心2004～2005年的研究，长江口水产品贝类毒素检出时段主要集中在5～6月和8～9月，麻痹性贝毒和腹泻性贝毒的检出率分别在5%和12%左右，敏感种类为养殖的紫贻贝。我国还是亚洲贝类产品出口第一大国，2010年我国贝类产品出口量26.07万吨，出口额11.58亿美元，在世界贝类产品出口总量中占14%。目前世界各国都制定了严格的贝类毒素限量要求。在我国贝类产品的出口贸易中，需要采用相关的标准方法对贝类毒素的含量进行检测，严格执行我国及贝类进口国关于贝类毒素的限量标准。不管是在我国水产品市场上还是在国际贸易中，准确检测贝类产品中贝类毒素的含量对保障食品安全、保障国际贸易的公平公正都显得格外重要。

一、概述随着社会工业化进程的加快，人类在工农业生产及日常生活中，向水体排入大量含氮、磷的污染物，加速了湖泊的富营养化(Eutrophication)，藻类(Algae)由此而获取丰富的营养而大量繁殖。最近的调查表明，亚太地区54%的湖泊富营养化，欧洲、非洲、北美洲和南美洲的比例分别是53%，28%，48%和41%，我国则是60%。在富营养化的淡水水体中，当有适宜的化学物理条件时，水体中的藻类短时间内大量繁殖并聚集的生态异常现象称为水华（Water Blooms, 也称湖靛）；这一现象若发生在海洋里则通常称为赤潮（Red Tide）。淡水水体富营养化危害最大的一个表征是水华的出现，每年夏、秋季节，在一些淡水湖泊均会形成大量水华，致使水质日趋恶化。当水华出现时，水面被厚厚的蓝绿色湖靛所覆盖，甚至在岸边大量堆积。在藻体大量死亡分解的过程中，不但散发恶臭，破坏景观；同时大量消耗水中溶解氧，使鱼类窒息死亡；尤其是藻类能释放生物毒素——藻毒素(Algae Toxins)，这些类次级代谢产物严重危害人类和其他生物的安全。随着富营养化的加剧，藻类水华发生的频率和幅度也增加，有毒水华对水环境的危害和生物安全更日益引起广泛的关注。淡水中蓝绿藻属(Cyanobacteria，Blue-green Algae)分泌产生的蓝藻毒素是目前已经发现的污染范围最广，研究最多的一类藻毒素。其中的微囊藻毒素LR (Microcystin-LR)是目前已知的毒性最强的、急性危害最大的一种淡水蓝藻毒素。由于未及时地检测水质情况的污染变化及采取相应的控制措施，致使这些毒素富集于鱼类或贝类中并通过食物链传递，直接存在于饮用水或娱乐用水中，严重威胁人类的健康，全球已经发生了多起有关藻毒素中毒并引起死亡的事故。近年来淡水藻类污染已成为一个全球性的环境问题。

细菌内毒素1 设备：电冰箱、恒温水浴箱、超净工作台、旋涡混合器、计时器2 用具：剪刀、镊子、无热原空安瓿5mg/支、浮板、封口膜、精密[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url](50ml-250ml、250ml-1000ml)、吸头(50ml-250ml、250ml-1000ml)、PH试纸3 试剂3.1 细菌内毒素工作标准品：用于仲裁鲎试剂的灵敏度和各种阳性对照。3.2 鲎试剂：为冻干品制剂，灵敏度为0.25EU/ ml，规格为：0.1ml/支3.3 细菌内毒素检查用水：内毒素含量不超过0.03EU/ml注射用水。(BET水)3.4 0.1mol/L HCl溶液、0.1mol/L NaOH溶液（临用时用细菌内毒素检查用水配制）。3.5 清洁液：75％酒精4 操作步骤4.1 鲎试剂灵敏度复核试验：鲎试剂灵敏度定义为在本检查法规定的条件下能检测出内毒素标准溶液或供试品溶液中的最低内毒素浓度，用EU/ml表示。4.2 根据鲎试剂灵敏度的标示值(λ)，将细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟，然后制成2.0λ、1.0λ、0.5λ或0.25λ四个浓度为内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒钟，按检查法项下试验，每一浓度平行做4支，同时用细菌内毒素检查用水做2支阴性对照，如最大浓度2.0λ管均为阳性，最低浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管均为阳性，按下式计算，反应终点浓度的几何平均值，即为鲎试剂灵敏度的测定值（λc）。λc=lg-1(∑x/4)当λc在0.5λ-2.0λ（包括0.5λ-2.0λ）时，方可用于细菌内毒素检查，并以λ为该批鲎试剂的灵敏度。5 干扰试验5.1 用细菌内毒素检查用水和未检出内毒素的供试品溶液或其不超过最大有效稀释倍数的稀释液分别将同一支细菌内毒素工作标准品制成含细菌内毒素工作标准品2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ四种浓度的内毒素溶液。用细菌内毒素检查用水和供试品溶液制成每一浓度平行做4支，另取细菌内毒素养检查用水和供试品溶液各做2支阴性对照管。如果最大浓度2.0λ管均为阳性，最低浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管均为阴性时，按下式计算，用细菌内毒素检查用水制成的内毒素标准溶液的反应终点浓度的几何平均值（Es）和用供试品溶液或其稀释液制成的内毒素溶液的反应终点浓度的几何平均值(Et)。Es=lg-1(∑xs/4)Et=lg-1(∑xt/4)当Es在0.5 λ-2.0λ，且当Et在0.5Es和2.0Es时，则认为供试品在该浓度下I 干扰试验。6 检查法6.1 精密称取土霉素检品适量，加0.1mol/L HCl溶液适量溶解，加0.1mol/L NaOH溶液适量，调节PH在6.5-7.5之间，加BET水稀释至一定浓度，备用。6.2 取装量为0.1mol/L的鲎试剂5支，备用。6.3 NC管的制备：取0.2ml BET水加入一支鲎试剂中，摇匀。6.4 PC管的制备：取0.1ml BET水溶解一支鲎试剂，加0.1ml用BET水稀释的含2λ的内毒素工作标准品的溶液，摇匀。6.5 PPC管的制备：取0.1ml BET水溶解鲎试剂，加0.1ml的用供试品的稀释液稀释的含2λ内毒素工作标准品，摇匀。6.6 供试品管的制备：取0.1ml BET水溶解鲎试剂，加0.1ml的供试品稀释液，摇匀。6.7 以上各管按顺序排列，置浮板上，放置37±1℃的恒温水浴箱中，保温1小时±2分钟。7 结果判断：将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180°时，管内凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性（+）。凝胶从管壁滑脱者并不能保持完整者为阴性（-），供试品管2支均为阴性（-）。应认为符合规定；如2支为阳性（+），应认为不符合规定。如2支中1支为正（+），1支为负（-），按上述方法另取4支供试品管复试。4支中1支为（+），即认为不符合规定。阳性对照品为（-）或供试品阳性对照品管为(-)，或供试品阴性对照品为（+），试验无效。[em62]

细菌内毒素的概念 　　细菌内毒素，英文称作Endotoxin，是G-菌细胞壁个层上的特有结构，内毒素为外源性致热原，它可激活中性粒细胞等，使之释放出一种内源性热原质，作用于体温调节中枢引起发热。内毒素的主要化学成分为脂多糖中的类脂A 细菌内毒素这个概念在1890年的时候就已被提了出来，它是在研究发热物质过程所引成的，1933年Boivin最先由小鼠伤寒杆菌提取出来，进行化学免疫学方面的研究，到1940年时候，Morgan使用志贺氏痢疾菌阐明了细菌内毒素是由多糖脂质及蛋白质三部分所组成的复合体，到了1950年以后，随着生物学，物理化学，免疫学以及遗传学等的进步发展，细菌内毒素的研究工作，尤其是其化学结构组成及各种生物活性间的关系也更加明确起来。 细菌英文叫Bacteria：为原核生物中的一类单细胞微生物由二分裂法繁殖。若按革兰氏染色法可将细菌分为G+菌和G-菌两大类。这两类细菌细胞壁的结构和化学组成存在很大差异。唯有肽聚糖为其共同成分，但其含量的多少和肽链的性质有所不同，见下表：细胞壁结构革蓝氏阳性菌革蓝氏阴性菌厚度厚，15—50薄，10—15肽聚糖含量多，占胞壁干重50—80%少，占胞壁干重10%左右脂类含量少，约1—4%多，约11—22%磷壁酸有无外膜无有脂蛋白无有脂多糖无有 细胞壁较薄，厚约10－15nm，结构也较复杂。肽聚糖含量低，仅占细胞干生10％左右，层薄又较疏松，因肽聚糖之间仅四肽侧链直接联结，缺乏五肽桥；肽聚糖居于细胞最内层，外面由内向外还有脂蛋白，外膜和脂多糖的三层聚合物。 （1）脂蛋白（lipoprotein） 由类脂和蛋白质构成，联结在外膜与肽聚糖层之间，类脂一端经非共价键联结到外膜的磷脂上，另一端由共价键联结到肽聚糖肽链中的二氧基庚二酸 残基上，使外膜和肽聚糖层构成一个整体。 （2）外膜（outer membrane） 是革兰氏阴性菌细胞壁的重要结构，位于肽聚糖的外侧，其结构类似细胞膜，为液态的磷脂双层，其中镶嵌一些特异蛋白质，穿透外膜的内外双层，呈液态镶嵌体。外膜中间有微小孔道，容许水溶性的小分子通过，以进行细胞内外的物质运输和交换。除此之外，外膜还能防止胰蛋白酶和溶菌酶等进入，起到保护性屏障作用。（3）脂多糖（lipopolysaccharide,LPS） 由多糖O抗原、核心多糖和类脂A(lipid A)组成（图1-8），位于最外层。多糖O抗原向外，由若干个低聚糖的重复单位组成的多糖链，即革兰氏阴性菌的菌体抗原（O抗原），有特异性。核心多糖由庚糖、半乳糖、2-酮基-3-脱氧辛酸（2-keto-3-deoxyoctonic acid, KDO）等组成，所有革兰氏阴性细菌都有此结构。类脂A是以脂化的葡萄胺二糖为单位，通过焦磷酸酯键组成的一种独特的糖脂化合物，具有致热作用，是革兰氏阴性细菌内毒素的毒性成分。 细菌内毒素即：许多病原性细菌所产生的毒素。 一般细菌毒素可分为两类，一类为外毒素（Exotoxin）；它是一种毒性蛋白质，是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。产生外毒素的细菌主要是革兰氏阳性菌。如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、金黄色葡萄球菌以及少数革兰氏阴性菌。另一类为内毒素（Endotoxin）。是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有结构。细菌在生活状态时不释放出来，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。

“龙虾门”发病原因又添新推论 　　南京餐饮商会昨发布称，可能是龙虾体内的兽用抗生素与洗虾粉螯合产生新的毒素　　今年7月下旬至8月底，南京出现了23例因食用龙虾而引发横纹肌溶解症的病例，“龙虾门”成为全国关注的事件。9月，中国疾病预防控制中心和南京市食品安全委员会办公室联合召开新闻发布会，确定23个疑似小龙虾致病病例初步确定为哈夫(Haff)病，与食用小龙虾有关。但食用多年为何独独今年发病？全国食客众多，患者为何集中在南京？发病为何集中在七八月份？“龙虾门”事件也留下了几个“未解之谜”。　　昨天，在对23名病例发生的场所、时间、地域、背景和食用方式进行了追踪分析后，南京餐饮商会召开新闻发布会，发布“龙虾门”最新推论，提出南京“龙虾门”是一系列偶然因素的集合，有可能是大雨后流入市场的南京周边家禽池塘龙虾，经过强力化学品洗涤后，龙虾脏器内的药物残留(一次污染)和洗虾粉(二次污染)产生螯合反应，由此产生的螯合物引起了横纹肌溶解症。　　龙虾门新推论　　大雨后“泛塘”　　龙虾游至易捕河中　　被捕捞后　　用强力化学品清洗　　兽用抗生素与化学品产生新毒素　　高温烹饪后　　毒素发挥作用　　食用引发哈夫病　　“龙虾门”新说　　致病毒素可能是两次化学污染的螯合物　　9月份，小龙虾致使肌肉溶解被确定与国际上的哈夫病类似，但致病物质是生物毒素还是化学毒素仍旧不确定。　　对于这个结论，南京餐饮商会副会长、龙虾专业委会员主任刘振海提出了另外一种推论。刘振海说，在事件发生后，他带着东南大学、中国药科大学等一些专家到龙虾产地的源头进行了暗访，并在多位专家的帮助下，撰写了一份名为《龙虾的化学污染与横纹肌溶解症》的调查报告，历时一个月。他认为，小龙虾本身存在毒素的说法难以站得住脚。　　23例中有15例在8个家庭里发生，8例在4家小饭店，而家庭和小饭店消耗龙虾量仅占市场的10%左右，绝大多数都是品牌饭店消耗的。如果是龙虾本身存在生物毒素，那么品牌饭店的发病几率要远远高于家庭和小饭店。这反映了龙虾来源的问题。品牌饭店弃之不用的小规格和大规格的残空龙虾，以及不残不空的经化学品清洗过的黑体或黑头的大中规格龙虾，基本上流向了小饭店和农贸市场。从患者自述的情况来看，购买的其实就是被清洗过的黑体或黑头龙虾。　　“我认为问题并不像专家推测的那么复杂。”刘振海说，本次龙虾门事件，可能是南京周边地区的家禽池塘龙虾，在大雨之后流入市场，被俗称吊白块之类的强力化学品清洗后，由残留在龙虾脏器内的兽用抗生素和吊白块螯合产生新的毒素，消费者选择不恰当的食用方法后，引发横纹肌溶解症。

总体上说，霉菌毒素产生的条件取决于多方面，经常需要关注的主要包括以下五个方面因素：1、原料生物性因素：即大部分植物原料的生物学属性改变，或品系改良天然抗病力的下降，导致霉菌毒素的产生和污染。例如玉米、小麦、燕麦、大麦、花生等最易滋生9-10种霉菌毒素;大米、高粱易滋生4-5种霉菌毒素;大豆、棉花等易滋生1-2种霉菌毒素。目前我国主要种植的各种玉米尚无抗霉菌毒素品系。2、原料种植过程中的因素：多大数谷物在田间种植期间如果遇到干旱、洪涝的恶劣气候均会产生霉菌毒素。例如玉米在生长过程中要经历播种、分叶、拔节、抽雄、灌浆、乳熟、结实等不同阶段，尤其在后三个阶段期间非常容易因天气变化导致在田间发生霉变。这也就是为什么人们根据毒素污染的阶段将霉菌毒素分为田间毒素和仓储毒素两类。3、原料收获过程中的因素：谷物未完全成熟、机械磨损，昆虫鼠害损伤等均易造成霉菌毒素污染。4、饲料及原料生产储存过程中的因素：值得注意的是，霉菌的孢子总是常规存在于饲料及原料之中，等待适宜温度和湿度，进而萌发并代谢出霉菌毒素。因此在饲料及原料的生产加工和储存过程中对温度、湿度的控制尤其关键。通常玉米的水分含量超过14%，饼粕类水分超过12%即非常容易产生霉菌毒素。另外一个常知的因素温度也会让我们产生误解而犯下错误，大部分霉菌繁殖最佳温度是 25 -- 35ºC，但是人们忽略的是低温0--10 ºC同样会有霉菌的繁殖，例如黄曲霉毒素在潮热的环境下容易产生，而像呕吐毒素在0 ºC就可以产生，玉米赤霉烯酮在10 ºC时就可以产生。因此产自于北方的谷物原料中一样经常含有霉菌毒素的污染，只是霉菌毒素的种类不同于来自南方的原料。5、饲料销售及使用过程中的因素：饲料厂产品库内堆积、运输到养殖场的装载环、养殖场的场内存放、畜舍饲喂系统的再污染等因素造成了霉菌毒素的二次污染问题，这也需要饲料生产企业和养殖企业共同重视。

伏马毒素的危害伏马毒素（Fumonisin，FB）是由镰刀菌属在一定的温度和湿度下产生的水溶性代谢产物，对食品污染的情况在世界范围内普遍存在，主要污染玉米及玉米制品。动物试验和流行病学资料已表明，伏马菌素主要损害肝肾功能，能引起马脑白质软化症和猪肺水肿等，并与我国和南非部分地区高发的食道癌有关，现已引起世界范围的广泛注意。伏马毒素的检测国内外已建立了多种方法。伏马毒素的分析方法通常包括提取、纯化、分离和检测几个步骤。目前，大多数方法均采用免疫亲和柱（Pribolab）纯化样品，应用HPLC或GC结合不同的检测器进行。伏马毒素伏马毒素（B1, B2,和B3)是由镰孢菌(霉)属念珠菌产生的真菌毒素。在世界范围内都发现了伏马毒素污染玉米的现象。研究表明伏马毒素可以诱发老鼠患肝癌，猪的肺水肿和马的脑脊髓白质病。在一些地区中玉米中伏马毒素含量很高，在这些地区（比如中国和非洲）人的食道癌具有高发性。适用PriboFast伏马毒素试剂盒原理是竞争酶联免疫反应，用于检测玉米中的伏马毒素。原理这个 Pribolab伏马素素检测试剂盒的原理是固相直接竞争酶联免疫反应。聚苯乙烯微孔板中包被伏马毒素的特异性抗体，这种抗体和伏马毒素的各个亚型都有很好的交叉反应。利用90%的甲醇从样品中提取伏马毒素，把提取的样品和HRP（辣根过氧化物酶）标记的伏马毒素混匀并加入对应的孔检测。酶标记毒素与标准品或样品中的伏马毒素竞争与包被在微孔底部的抗体结合。孵育一段时间后，倒出孔里的液体，清洗除去没有反应的物质后加入显色底物（TMB），在酶的作用下孔里将会出现蓝色。显色颜色的深浅与结合物的量成正比例的关系，与标准品或样品中伏马毒素的量成反比例关系。所以，标准品或样品中的伏马毒素浓度越高，显色的蓝色将会越浅。加入酸，终止反应，底物颜色由蓝色变为棕黄色。微孔板放进酶标仪里，在OD450nm读取吸光度值。样品的吸光度值与试剂盒中标准OD值相比较，相对应得出结果。提取步骤中需要的材料研磨器；烧杯：125ml；天平：量程为20g量筒：100ml甲醇：每个样品36ml 蒸馏水：每个样品4ml滤纸 ：用针孔过滤器代替；漏斗测定步骤：100μL或200μL 单道或多道移液器；计时器； 洗瓶；吸水纸；450nm 滤光片的酶标仪警告和注意事项1、使用前将所有的试剂拿到室温（19℃-27℃）。2、试剂贮存在2℃到8℃，不要使用过期的产品。不要冰冻试剂盒。3、没有用完的试剂不要回收到原试剂瓶中。操作过程中按照要求精确量取试剂体积。4、整个操作过程要严格按照要求的时间和温度。5、不要用口移取试剂或样品。6、终止液里含有酸，不要与皮肤和眼睛接触。如果有接触，一定要用清水清洗。7、所有的材料、试剂和仪器可能被样品或标准品中的伏马毒素污染，在操作过程中一定要戴手套。8、使用完毕，处理好所有的材料、试剂和仪器。样品提取步骤注意：样品必须按照有关规定收集1、配制90%的甲醇溶液（每个样品需要：4ml蒸馏水+36ml甲醇）2、研磨代表性样品（使50%的样品可以通过一个20目的滤网）。3、称量20g研磨过滤后的样品加入40ml 90%的甲醇溶液，样品稀释比为1:2(w/v)。

黄曲霉毒素是天然存在的霉菌产生的一种毒素，已经被证明对人体容易产生癌症，是一类致癌物质。美国联邦政府有关法律规定人类消费食品和奶牛饲料中的黄曲霉毒素含量不能超过20ppb，人类消费的牛奶中的含量不能超过0.5ppb。而其它动物饲料中的含量不能超过300ppb。黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素 M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，薄层层析法(TLC)，酶联免疫法（ELISA）等。而使用黄曲霉毒素M1 免疫亲和柱则能够快速而准确的提纯纯化并浓缩样品中黄曲霉毒素M1组分，使得后面的分析更加轻松简单。PriboFast黄曲霉毒素总量亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素（B1,B2,G1,G2），从而对黄曲霉毒素总量（B1,B2,G1,G2）样品起到非常针对性的纯化作用，过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素总量（B1,B2,G1,G2）含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的，以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。PriboFast黄曲霉毒素总量亲和柱用于定性、定量检测谷物、副食品、酒类等食品和饲料等样本中的黄曲霉毒素总量（B1,B2,G1,G2）时的样品前处理。柱容量：≥200ng 回收率：80-90%可用于快递纯化检测牛奶，奶粉等样本中的黄曲霉毒素M1。

外毒素与内毒素的主要区别： 区别要点 外毒素 内毒素 来源 革兰阳性菌与部分革兰阴性菌 革兰阴性菌存在部位 由活菌分泌到菌外，少数是细菌崩解后释出 细胞壁组分，菌裂解后释出 化学成分 蛋白质 脂多糖 稳定性 60～80℃，30分钟被破坏160℃，2～4小时才被破坏 　　外毒素与内毒素的主要区别：区别要点　　外毒素　　内毒素　　来源　　革兰阳性菌与部分革兰阴性菌　　革兰阴性菌　　存在部位　　由活菌分泌到菌外，少数是细菌崩解后释出　　细胞壁组分，菌裂解后释出　　化学成分　　蛋白质　　脂多糖　　稳定性　　60～80℃，30分钟被破坏　　160℃，2～4小时才被破坏　　作用方式　　与细胞的特异受体结合　　刺激宿主细胞分泌细胞因子、血管活性物质　　毒性作用　　强，对组织器官有选择性毒害效应，引起特殊临床表现　　较弱，各菌的毒性效应大致相同，引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DIC等　　抗原性　　强，刺激机体产生抗毒素；甲醛液处理脱毒形成类毒素　　弱，刺激机体产生的中和抗体作用弱；甲醛液处理不形成类毒素

本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰氏阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。 细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。 本试验操作过程应防止微生物和内毒素的污染。 细菌内毒素的量用内毒素单位（EU ）表示，1EU 与1 个内毒素国际单位（IU ）相当。 细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。 细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于试验中的赏试剂灵敏度复核、干扰试验及各种阳性对照。 细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.O15EU／ml（用于凝胶法）或0.005EU / ml （用于光度侧定法）且对内毒素试验无干扰作用的灭菌注射用水。 试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。耐热器皿常用干热灭菌法（250℃ 、30 分钟以上 ) 去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。若使用塑料器械，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器械。

防止产毒真菌直接污染食物，是防止真菌毒素污染食物的一种简单、经济的方法。预防真菌毒素污染食品，必须立足于以下两个方面：①隔离和消灭产毒真菌源区，尽量减少产毒真菌及其毒素污染无毒食品，造成二次污染。要防止粮食、油料等原料不被真菌污染，把好粮食、油料的入库质量关，如入库粮食不仅要作水分、杂质、带虫量以及一些品质指标的检测，而且应作粮油的带菌量、菌相及真菌毒素含量的检测。②严格控制易染真菌毒素及其毒素的食品的贮藏、运输等环境条件，抑制微生物在食品中大量繁殖及产生毒素。食品及饲料中的真菌只有在一定的温度和湿度条件下才能产生毒素，只要严格控制食品和饲料的贮藏温度及水分就能减少甚至完全抑制真菌毒素的产生。

真菌毒素浓缩器是一套操作简捷，用途广泛的有机溶剂快速蒸发浓缩系统，应用于不同真菌毒素检测方法（TLC,HPL,GC,LC-MS)的前处理样品浓缩干燥。通过强力的真空系统和独立干浴加热装置完成对萃取溶液的浓缩，为实验室提供快速的, 专业的真菌毒素溶剂蒸发/浓缩方案。Pribolad真菌毒素浓缩器安全，高效的对样品进行蒸发和浓缩；避免多个样品之间的交叉污染，确保整个浓缩系统的安全性和高效性；根据浓缩溶剂类型选择适宜的加热温度；通过真空阀调控实现一个或多个样品同时浓缩。

它是采用免疫原理和胶体金层析技术制成快速检测牛奶、食品、饲料中的霉菌毒素的残留量检测限是10ppb 饲料 谷物用黄曲霉毒素总量检测卡，黄曲霉毒素B1检测卡检测限是0.5 ppb 原奶生鲜奶 黄曲霉毒素M1检测卡检测限是50ppb 饲料 谷物 玉米赤霉烯酮检测卡检测限是1ppb 饲料 谷物 赭曲霉毒素检测卡检测限100ppb 伏马毒素检测卡检测限0.3毫克每千克 液态奶、奶粉 三聚氰胺检测卡

【内容摘要】赭曲霉毒素是一种无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液中，微溶于水。该化合物相当稳定，在乙醇中置冰箱避光保存一年以上而不破坏。有较高的耐热性，制罐头的豆子经漂白、加盐及在番茄酱中加热1h后，仍然能存留56％的赭曲霉毒素。赭曲霉毒素A是一种与人类健康密切相关的霉菌毒素，是人类可能的致癌剂。除了潜在的遗传毒性和致癌性外，赭曲霉毒素A也是一种具有免疫抑制、神经毒性以及致畸性的物质。赭曲霉毒素最初是从南非的赭曲霉毒株中分离出来的，由赭曲霉(Asper—gillus ochracets)、洋葱曲霉(Aspergillus alliaceus)、鲜绿青霉(PencillilJⅡlviridicatum)、徘徊青霉等代谢产生，包括7种结构类似的化合物，赭曲霉毒素A是其中毒性最强的物质，是自然界中的主要天然污染物。在一些国家的食品中，赭曲霉毒素A的污染率可达2％～30％。该化合物主要表现为肾脏毒性。在巴尔干地方性肾病流行区，6%～18%人群的血液中能检出赭曲霉毒素A。(1)结构与性质赭曲霉毒素是分子结构类似的一组化合物，包括赭曲霉毒素A、B、C、D和a等，其中赭曲霉毒素A是主要的污染物。赭曲霉毒素是一种无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液中，微溶于水。在紫外光下赭曲霉毒素A呈绿色荧光。该化合物相当稳定，在乙醇中置冰箱避光保存一年以上而不破坏。有较高的耐热性，制罐头的豆子经漂白、加盐及在番茄酱中加热1h后，仍然能存留56％的赭曲霉毒素，赭曲霉毒素的化学结构如图4—2所示。(2)食品中赭曲霉霉素的来源与分布赭曲霉毒素是曲霉属和青霉属的某些菌种产生的二次代谢产物，产毒菌种见表4—2。[color=#075

南方农村报讯：近日，“圣元”奶粉风波越闹越大。到底是什么造成女婴性早熟，卫生部尚未给出权威结论。有媒体报道称，源头可能在于饲料的霉菌毒素超标。 南方农村报记者采访了饲料业人士，他们表达了另一种观点，饲料中的霉菌毒素玉米赤霉烯酮超标通过牛奶再伤害女婴基本不可能。[b] 关注玉米赤霉烯酮[/b] 近日，《新京报》采访一位饲料业人士张先生，他指出，“添加雌激素不会给奶企带来经济效益，所以激素可能在饲料原料中产生。张先生介绍，奶牛的能量饲料很多是用玉米副产品加工而成，而玉米出现倒伏后，会发酵产生一种霉菌毒素--玉米赤霉烯酮，这种霉菌毒素有雌激素作用，可以导致人或动物流产、性早熟。” 南方农村报记者了解到，作为主要的霉菌毒素之一，玉米赤霉烯酮确实具有类似雌激素的作用。今年5月，在花都举办的研讨会上，华南农业大学教授张守全曾指出，作为一种类雌激素，玉米赤霉烯酮污染很容易导致母猪假孕，如果饲料中的玉米赤霉烯酮毒素太高，将对动物造成伤害。 百奥明公司是专门研究霉菌毒素和脱霉剂的国际动保公司，定期发布霉菌毒素研究报告。该公司中国技术经理王金勇博士告诉记者，根据该公司对168份样品的抽捡，今年1-6月，饲料及饲料原料中的霉菌毒素总体污染情况比去年降低。但玉米赤霉烯酮的污染水平却大幅提高，我国饲料中的玉米赤霉烯酮平均值为616.2ppb,远高于去年的平均值375ppb. 王金勇博士认为，今年天气反常，是玉米赤霉烯酮污染增加的主要原因。他认为，业界需要高度关注玉米赤霉烯酮污染问题，今后，随着天气越来越反常，玉米及饲料的污染只会更加严重。

检测黄曲霉毒素M1牛奶质控样，用试剂盒做的合格，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]做的只有真值的一半。同批检测的牛奶M1能力验证样，试剂盒与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]结果一致，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]做的回收率107%，这个可能是什么原因呢？

细菌内毒素标准品溶液的制备，在美国药典中是“根据包装说明书上的标准和内毒素储备标准溶液的标签上关于制备和贮存的说明”进行储备液的制备，再由“充分混合内毒素储备标准溶液后，用细菌内毒素试验检查用水（BET检查用水）稀释，制成适当的系列稀释液，即得BET检查用内毒素标准溶液。”这具体是一个怎样的制备过程？而在中国药典中，标准品溶液的制备，按照说明书上步骤加内毒素检查用水后在漩涡混合器上进行15min的混合。但是，我公司所购买内毒素工作标准品说明书上提到的是进行5min的混合。这两个时间如何取舍。如果按中国药典上进行15min的混合，时间会不会过长，如此会不会对标准品有所影响？

鉴于目前恒天然奶粉出肉毒杆菌一事，一起学习一下肉毒杆菌和肉毒素。肉毒杆菌的全名叫肉毒梭状杆菌（也叫肉毒梭菌Clostridium botulinum），是一种革兰氏阳性厌氧杆菌，其生长繁殖及产毒的最适温度为18～30℃。肉毒杆菌广泛分布于土壤、淤泥及动物粪便中，其中土壤是重要污染源，它可借助食品、农作物、水果、海产品、昆虫、禽类等传播到各处。肉毒杆菌家族一共兄弟7个，本身其实没有毒性，但其中有4个能在厌氧环境下（比如肠道、密闭发酵食品）产生肉毒毒素。食品在加工、贮藏过程中被肉毒杆菌污染，食前对带有毒素的食品又未加热或未充分加热，就易引起中毒。在我国的新疆、青海等少数民族地区几乎每年都会出现自制发酵肉制品导致的肉毒中毒、甚至死亡。肉毒毒素（botulinum toxin，AX）是肉毒杆菌产生的含有高分子蛋白的神经毒素，是目前已知在天然毒素和合成毒剂中毒性最强烈的生物毒素，它主要抑制神经末梢释放乙酰胆碱，引起肌肉松弛麻痹，特别是呼吸肌麻痹是致死的主要原因。肉毒毒素真正被大众了解，是因为一些明星注射肉毒来除皱。虽然这个毒素的毒性比较大，一点点就能毒死人，但它本身对热不稳定，煮开几分钟就破坏掉了，真正难解决的是它的芽孢。肉毒杆菌在感觉不舒服的时候就像作茧一样用一些蛋白和糖类物质把自己包起来，然后就能“刀枪不入”，一般的加工手段都杀不死它。等它重新进入合适的环境，比如人的肠道，它又能苏醒过来继续干坏事。成人由于肠道里面的菌群早已站稳了脚跟，少量的肉毒杆菌是斗不过这些“地头蛇”的，因此对成人的危险性相对较小。但婴儿尤其是1岁以下的小宝宝，正常菌群还处于建设阶段，这个时候肉毒杆菌来捣乱的话，有可能对宝宝造成较大影响。　　我国乃至全世界都没有乳粉中肉毒杆菌的限量标准，因为肉毒杆菌在乳品中并不是常见的污染物，而标准的管理是要考虑成本的，正因如此，各国都不把它写入标准。但这并不意味着根本不管，比如这次恒天然是在企业的质量控制中发现的问题。用标准管理有限的问题，用过程的控制实现更全面的安全保障，这才是科学的食品安全管理理念。对于负责任的大企业，其质控项目数量和质控要求都是远远高于国家标准要求的。