闭合环状质粒

分子生物学（基因工程）的实验中，经常要做细胞质粒DNA的提取和检测工作，以便获得运载基因的载体DNA；或用于实行电泳检测分析，了解样品是否含有质粒DNA（包括重组质粒DNA），判断其分子量大小，区别不同质粒等等。因此质粒DNA的提取是基因工程实验中最常用的手段之一。质粒是一种染色体外的稳定遗传银子，大小从1kb到200kb不等，大多数来自细菌的质粒是双链、共价闭合环状的分子，并以超螺旋形式存在于宿主的细胞质中。它是细菌内的共生型遗传因子，主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，质粒具有自主复制和转录能力，能在子代细胞中保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息。质粒的分离是利用质粒DNA和染色体DNA在变性与复性中的差异来达到的目的。当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，由于染色体DNA与质粒DNA拓扑构型不同，染色体DNA双螺旋结构解开，而共价闭合质粒DNA的氢键虽被断裂，但两条互补链彼此相互盘绕仍会紧密地结合在仪器。当加入中和液后，溶液pH恢复至中性，在高盐浓度的情况下，染色体DNA之间交联形成不溶性网状结构并与蛋白质SDS复合物等形成沉淀；不同的是质粒DNA复性迅速而准确，保持可溶状态而留在上清中。这样，通过离心可沉淀大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质。除去沉淀后上清中的质粒可用酚氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。前面提取质粒DNA的方法就是实验室常用的碱裂解法，该法的操作过程如下：首先讲含有质粒的细菌接种到培养基，经过大约12小时的恒温摇陪后弃去上清液，加入中和液后用漩涡混匀器将溶液充分混匀，然后加入碱液进行沉淀，这就是变性与复性，最后的操作就是实验室常用的沉淀的分离、纯化。分离、纯化DNA首先取上清液，加入分离液后采用漩涡混匀器混匀溶液，离心取上清液，加入无水乙醇后混匀，离心后弃上清液，干燥DNA即可。这个实验中常用到漩涡混匀器进行溶液混匀，意大利VELP公司推出多种型号的漩涡混匀器可满足每一个实验室的需要和安全标准。特别是红外漩涡混匀器，这是VELP公司的专利，该漩涡混匀器一旦检测到试管即自动开始震动混匀，不需要施加任何外力，震动速度可调，时间可设，漩涡混匀器稳定性高，非常适合细胞质粒提取实验。

安捷伦EI离子源闭合很费劲，有知道怎么回事的么？各位帮帮忙，新手啊http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09508.gif

一般环状烯烃氢的耦合常数较开链烯烃小许多，其内在原因是什么？

第一节概述 　　把一个有用的目的DN***段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。　　质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。质粒的复制和转录要依赖于宿主细胞编码的某些酶和蛋白质，如离开宿主细胞则不能存活,而宿主即使没有它们也可以正常存活。质粒的存在使宿主具有一些额外的特性,如对抗生素的抗性等。F质粒(又称F因子或性质粒)、R质粒(抗药性因子)和Col质粒(产大肠杆菌素因子)等都是常见的天然质粒。　　质粒在细胞内的复制一般有两种类型:紧密控制型(Stringent control)和松驰控制型(Relaxed control)。前者只在细胞周期的一定阶段进行复制,当染色体不复制时,它也不能复制,通常每个细胞内只含有1个或几个质粒分子,如F因子。后者的质粒在整个细胞周期中随时可以复制,在每个细胞中有许多拷贝,一般在20个以上,如Col E1质粒。在使用蛋白质合成抑制剂-氯霉素时,细胞内蛋白质合成、染色体DNA复制和细胞分裂均受到抑制,紧密型质粒复制停止,而松驰型质粒继续复制,质粒拷贝数可由原来20多个扩增至1000-3000个,此时质粒DNA占总DNA的含量可由原来的2%增加至40-50%。　　利用同一复制系统的不同质粒不能在同一宿主细胞中共同存在,当两种质粒同时导入同一细胞时,它们在复制及随后分配到子细胞的过程中彼此竞争,在一些细胞中,一种质粒占优势,而在另一些细胞中另一种质粒却占上风。当细胞生长几代后,占少数的质粒将会丢失,因而在细胞后代中只有两种质粒的一种，这种现象称质粒的不相容性(Incompatibility)。但利用不同复制系统的质粒则可以稳定地共存于同一宿主细胞中。质粒通常含有编码某些酶的基因,其表型包括对抗生素的抗性,产生某些抗生素,降解复杂有机物,产生大肠杆菌素和肠毒素及某些限制性内切酶与修饰酶等。　　质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。大多质粒载体带有一些多用途的辅助序列,这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、产生用于序列测定的单链DNA、体外转录外源DNA序列、鉴定片段的插入方向、外源基因的大量表达等。一个理想的克隆载体大致应有下列一些特性：（1）分子量小、多拷贝、松驰控制型；（2）具有多种常用的限制性内切酶的单切点；（3）能插入较大的外源DN***段；（4）具有容易操作的检测表型。常用的质粒载体大小一般在1kb至10kb之间，如PBR322、PUC系列、PGEM系列和pBluescript（简称pBS）等。　　从细菌中分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤:培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细胞;分离和纯化质粒DNA。采用溶菌酶可以破坏菌体细胞壁,十二烷基磺酸钠(SDS)和Triton X-100可使细胞膜裂解。经溶菌酶和SDS或Triton X-100处理后,细菌染色体DNA会缠绕附着在细胞碎片上,同时由于细菌染色体DNA比质粒大得多,易受机械力和核酸酶等的作用而被切断成不同大小的线性片段。当用强热或酸、碱处理时，细菌的线性染色体DNA变性,而共价闭合环状DNA(Covalently closed circular DNA，简称cccDNA)的两条链不会相互分开，当外界条件恢复正常时，线状染色体DN***段难以复性,而是与变性的蛋白质和细胞碎片缠绕在一起,而质粒DNA双链又恢复原状,重新形成天然的超螺旋分子,并以溶解状态存在于液相中。在细菌细胞内,共价闭环质粒以超螺旋形式存在。在提取质粒过程中，除了超螺旋DNA外，还会产生其它形式的质粒DNA。如果质粒DNA两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,形成松驰型的环状分子,称开环DNA(Open circular DNA, 简称ocDNA)；如果质粒DNA的两条链在同一处断裂,则形成线状DNA(Linear DNA)。当提取的质粒DNA电泳时,同一质粒DNA其超螺旋形式的泳动速度要比开环和线状分子的泳动速度快。

为什么电感高频等离子炬产生的环状结构造成的电学屏蔽的中心通道更利于样品进入炬焰？

有哪位大佬知道环状角鲨烷的来源吗？我们资料上说环状角鲨烷可以说明是天然来源，没有则来源于合成。

请教一下，六元环状化合物的顺反异构在核磁上能区别吗？是不是耦合常数的差别啊？

在一般测定中大家是否观察到环状等离子体的形状,[em31]

[b][font=宋体]一、质粒提取的原理：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]质粒是细胞内的一种环状的小分子[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]，是进行[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组的常用载体。作为一个具有自身复制起点的复制单位独立于细胞的主染色体之外，质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]上携带了部分的基因信息，经过基因表达后使其宿主细胞表现相应的性状。在[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组中，质粒或经过改造后的质粒载体可通过连接外源基因构成重组体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]从宿主细胞中提取质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]，是[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术中最基础的实验技能。分离质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]有三个步骤：培养细菌使质粒扩增，收集和裂解细菌，分离和纯化质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在质粒提取过程中，由于机械力、酸碱度、试剂等的原因，可能使质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]链发生断裂。所以，多数质粒粗提取物中含有三种构型的质粒：共价闭合环状[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]cccDNA[/font][font=宋体]）： 质粒的两条链没有断裂；超螺旋开环[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]ocDNA[/font][font=宋体]）： 质粒的一条链断裂；松弛的环状分子线形[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]lDNA[/font][font=宋体]）： 质粒的两条链均断裂；线性分子质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的分子构型 。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]琼脂塘凝胶电泳模式图可分为：松弛线性的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]； 松弛开环的[/font][font=Calibri]OC[/font][font=宋体]构型； 超螺旋的[/font][font=Calibri]SC[/font][font=宋体]构型。由于琼脂糖中加有嵌入型染料溴化乙锭，因此，在紫外线照射下[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]电泳带成橘黄色。 道中的[/font][font=Calibri]SC DNA[/font][font=宋体]走在最前沿，[/font][font=Calibri]OC DNA[/font][font=宋体]则位于凝胶的最后边；道中的[/font][font=Calibri]L DNA [/font][font=宋体]是经核酸内切限制酶切割质粒之后产生的，它在凝胶中的位置介于[/font][font=Calibri]OC DNA [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]SC DNA [/font][font=宋体]之间。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]二、质粒提取方法[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的提取方法主要有碱裂解法、煮沸法、酚氯仿裂解法。跟据不同的实验目的和仪器设备择取不同的实验方案。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、质粒提取的常见问题[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]时间控制问题[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]裂解时间太长，加入溶液[/font][font=Calibri]P2[/font][font=宋体]后裂解时间不应超过[/font][font=Calibri]5 [/font][font=宋体]分钟；吸附时间不够；溶解时间不够都会导致质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]提取实验失败。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]大肠杆菌老化[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]建议涂布平板培养后，重新挑选新菌落进行液体培养。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]质粒拷贝数低[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由于使用低拷贝数载体引起的质粒[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]提取量低，可更换具体相同功能的高拷贝数载体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]溶液使用不当[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]溶液[/font][font=Calibri]P2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]P3 [/font][font=宋体]在温度较低时可能出现浑浊，应置于[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]℃保温片刻直至溶解为清亮的溶液，才能使用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]吸附柱过载[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]不同产品中吸附柱吸附能力不同，如果需要提取的质粒量很大，请分多次提取。若用富集培养基，例如[/font][font=Calibri]TB [/font][font=宋体]或者 ×[/font][font=Calibri]YT [/font][font=宋体]菌液体积必须减少；若质粒或宿主菌是非常高的拷贝数或生长率，则需调整[/font][font=Calibri]LB [/font][font=宋体]培养液体积。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]质粒未全部溶解[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]洗脱溶解质粒时，可适当加温或延长溶解时间。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]乙醇残留[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]漂洗液洗涤后应离心尽量去除残留液体，树脂型试剂盒漂洗后应晾干树脂，再加入洗脱缓冲液。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8.[/font][font=宋体]洗脱液加入位置不正确[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]洗脱液应加在硅胶膜中心部位以确保洗脱液会完全覆盖硅胶膜的表面达到最大洗脱效率。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]9.[/font][font=宋体]洗脱液不合适[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]只在低盐溶液中才能被洗脱。洗脱效率取决于[/font][font=Calibri]pH [/font][font=宋体]值。最大洗脱效率在[/font][font=Calibri]pH7.0[/font][font=宋体]～ [/font][font=Calibri]8.5 [/font][font=宋体]间。当用水洗脱时确保其 [/font][font=Calibri]pH [/font][font=宋体]值在此范围内，如果[/font][font=Calibri]pH [/font][font=宋体]过低可能性导致洗脱量低。洗脱时将灭菌蒸馏水或洗脱缓冲液加暖至 [/font][font=Calibri]60 [/font][font=宋体]℃后使用有利于提高洗脱效率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]10.[/font][font=宋体]洗脱体积太小[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]洗脱体积对来回收率有一定影响。随着洗脱体积的增大回收率增高，但产品浓度降低。为了得到较高的回收率可以增大洗脱体积[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州能够提供快速、高通量、高品质以及个性化的[url=https://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]质粒[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]DNA[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]制备服务[/b][/url]。不仅满足实验室研究人员的小量质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备需求，也可为生物工业用户和医药公司等提供大规模的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备服务。义翘神州升级改造后的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备平台，采用[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级别的生产线，对过程和最终产品的严格管控，确保了最终产品质量符合客户需求。义翘神州可以提供从μ[/font][font=Calibri]g[/font][font=宋体]级别，[/font][font=Calibri]mg[/font][font=宋体]级别至[/font][font=Calibri]g[/font][font=宋体]级别不同规模的科研级和工业级别的质粒生产服务，满足不同的需求。详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service[/font][/font]

当抗原与相应抗体形成一个接触面时，如二者比例适当，接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。一、材料（1）免疫血清：免疫兔抗人血清。（2）抗原：人血清。（3）小沉淀管、毛细吸管、橡皮头、生理盐水。二、方法（1）取小沉淀管2只，以毛细吸管吸取抗人血清约0.2ml，加入第一管，加时注意不能有气泡。（2）以毛细吸管吸取生理盐水0.2 ml 加入第二管。（3）用毛细吸管吸入血稀释0.2ml 加入各管，加时应注意使抗原溶液缓缓由管壁流下，轻浮于血清面上，使成一明显界面，切勿使之相混。（4）置室温中10~20分钟，观察液面有无乳白色沉淀环，若有则为阳性。

当抗原与相应抗体形成一个接触面时，如二者比例适当，接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。一、材料（1）免疫血清：免疫兔抗人血清。（2）抗原：人血清。（3）小沉淀管、毛细吸管、橡皮头、生理盐水。二、方法（1）取小沉淀管2只，以毛细吸管吸取抗人血清约0.2ml，加入第一管，加时注意不能有气泡。（2）以毛细吸管吸取生理盐水0.2 ml 加入第二管。（3）用毛细吸管吸入血稀释0.2ml 加入各管，加时应注意使抗原溶液缓缓由管壁流下，轻浮于血清面上，使成一明显界面，切勿使之相混。（4）置室温中10~20分钟，观察液面有无乳白色沉淀环，若有则为阳性。

如 直链葡萄糖 和 环状葡萄糖。

为什么大环状的GPC测出来的分子量会偏小呢？

一、实验目的与原理质粒多为一些双链、环状的DNA分子，是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作，进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。提取质粒的基本步骤分为三步：①细菌的培养和质粒的扩增②细菌菌体的裂解③质粒DNA的纯化本实验采取的菌体裂解方法为碱解法，质粒纯化方法为梯度离心法。二、材料与试剂1、材料：大肠杆菌2、仪器：超净工作台，培养箱，摇床，恒温水浴锅，台式离心机，取液器一套，低温冰箱，冷冻真空干燥机，电泳仪，水平电泳槽，紫外观测仪3、试剂：Solution I 25 mM Tris-Hcl(pH7.4) 10 mM EDTA(pH8.0) 50 mM葡萄糖 高压灭菌，4℃保存 Solution II 0.2 M NaOH, 1%SDS 现配现用 Solution III 5 N KAc pH4.8 高压灭菌，4℃保存 3 M NaAc PH5.2, 高压灭菌，4℃保存。异丙醇，溶菌酶（8 mg/ml），酚/氯仿，无水乙醇，70％乙醇，LB培养基，电泳试剂三、操作步骤1、细菌繁殖LB培养基，2 ml/20ml，37℃，200rpm，摇一摇，过夜2、离心10 min，5000 rpm, 4℃；弃上淸液3、沉淀（菌体细胞）预冷的TES缓冲液洗涤，离心10 min，5000 rpm, 4℃加入预冷的1 ml Solution I，冰浴，10 min4、重新悬浮，加入150 ul溶菌酶母液，室温放置5 min5、加入1.2 ml Solution II, 冰浴，5 min6、加入0.9 ml预冷乙酸钾，混匀，离心10 min，12000 rpm, 4℃7、加入1.5 ml异丙醇，-20℃冰箱内放置15 min8、离心10 min，12000 rpm, 4℃9、取沉淀，悬于400 ul TE缓冲液中10、加入40 ul，3 M NaAc11、酚/氯仿，抽提，乙醇沉淀12、离心10 min，12000 rpm, 4℃13、取沉淀，冷冻干燥，再悬浮于50 ul TE缓冲液中。14、电泳检测提取DNA的质量四、结果与分析超螺旋结构DNA

苯是有机化学工业基本原料之一，是在1825年由英国物理学家和化学家法拉第（Michael Faraday，1791－1867）通过分离煤焦油而首先发现的。1834年，德国科学家E• F• 米希尔里希（Mitscherlich，1794－1863）将此液体命名为苯。随后，苯的分子量和分子式也由化学家相继确定，但是如何确定苯的结构式却成了一个难题。　　德国化学家凯库勒（Friedrich August Kekule，1829－1896）是一位极富想象力的学者，他曾提出了碳原子四价学说和碳原子之间可以相连成-C-C-链状结构这一重要学说。在此基础上，于1865年，他提出了苯的环状结构学说，他认为苯的结构可想象为6个链形碳原子闭合而成。他在提出了多种开链式结构而又因其与实验结果不符而被一一否定之后，终于悟出闭合链的形式是解决苯分子结构的关键，他先以(Ⅰ)式表示苯结构，1866年他又提出了(Ⅱ)式，后简化为(Ⅲ)式（图2），也就是我们现在所说的凯库勒式，由此确定了苯的结构。　　苯的结构理论的确立，促进了近代结构理论的发展，对有机化学的贡献是巨大的。

环状磷酸酯做液相色谱对于柱温、柱压、溶剂，有什么要求？

本人做NITI合金电解双喷，根据大部分文献配方 硝酸：甲醇=1:3 、温度-30℃、 电压自己设定为12V 。 试样磨至40um透光率10，双喷约10S后报警，但碰出的试样边缘一圈喷穿，几乎呈圆环状，中心却没有孔急求有这方面经验的朋友指点，感激不尽！

现在小学生使用的铅笔盒分好多种，不知这个有没有检测过呢？

为什么屏蔽圈要用银的不能用铜的呢？

哥哥/姐姐好，我是研三妹子。在用ASE350，已经萃取肉样中的哌嗪（建立方法，在肉中加药），采取过：1、硅藻土肉样研磨后加标；2、肉样加水匀浆后加标混匀；3、标液（二氯甲烷溶解哌嗪）直接加到滤纸片上，隔着硅藻土放肉样等等，也尝试了40-160温度以及静态萃取次数，冲洗体积百分数等的优化，收率均不到20，之后使用真空离心浓缩仪以及衍生化过程都是可以的。请问哥哥问题出在哪儿可能？ASE不适合哌嗪（C4H10N2，极性弱碱性，环状对称）药物吗？因后续有浓缩和酸酐衍生化过程，尽量不带如水，请高手支招儿，路人捧场！~谢。。。

质粒提取柱（大中/硅胶膜）CommaAffin™质粒中提柱http://www.biocomma.cn/images/nucleic-11.jpg产品组成外管医疗级PP，15ml，耐受酸碱和大部分的 有机溶剂 ，用来收集离心液。内管医疗级PP，耐受酸碱和大部分的 有机溶剂 ，底部鲁尔接口设计，方便离心液收集。直径11.0mm筛板特殊 纤维材料 ，在高速离心过程中，支撑硅胶膜，保证硅胶膜的完整性，耐受酸碱和大部分的 有机溶剂 ，厚度仅为0.3-0.5mm，孔径50um，孔隙率只有不到百分之二十，相比市场上同类产品，比面积小，静电小，DNA吸附极低。硅胶膜孔径1um，高盐低pH值选择性吸附DNA、RNA，低盐高pH值释放DNA、RNA压圈医疗级PP，固定筛板与硅胶膜。CommaAffin™质粒大提柱http://www.biocomma.cn/images/nucleic-3.jpg产品组成外管医疗级PP，50ml，耐受酸碱和大部分的 有机溶剂 ，用来收集离心液。内管医疗级PP，耐受酸碱和大部分的 有机溶剂 ，底部鲁尔接口设计，方便离心液收集。直径24.0mm筛板特殊 纤维材料 ，在高速离心过程中，支撑硅胶膜，保证硅胶膜的完整性，耐受酸碱和大部分的 有机溶剂 ，厚度仅为0.3-0.5mm，孔径50um，孔隙率只有不到百分之二十，相比市场上同类产品，比面积小，静电小，DNA吸附极低。硅胶膜孔径1um，高盐低pH值选择性吸附DNA、RNA，低盐高pH值释放DNA、RNA压圈医疗级PP，固定筛板与硅胶膜。CommaAffin™核酸中/大提柱可用在核酸提取过程（见图1）中过柱结合、洗涤、洗脱步骤中核酸吸附量：CommaAffin™质粒中提柱：0-100ug 规格：15ml离心管+吸附柱CommaAffin™质粒大提柱：0-500ug 规格：50ml离心管+吸附柱 http://www.biocomma.cn/images/nucleic-7.jpg 图1 质粒提取过程适用范围：核酸提取原理是在特定溶液环境下（高盐、低pH)使核酸吸附在固相介质（硅胶膜）上，洗涤去除杂质后，再改 变溶液环境使DN A溶解到纯水或TE中。质粒DNA提取：抽提缓冲液，或者结合液中需要胍盐（如硫氰酸胍等） 辅助DNA吸附到膜上。【注意事项】 1.上柱前溶液的PH值应小于7；2.洗涤液中的乙醇浓度不得低于50%，一般55%--80%之间。3.最后洗脱，可以用去离子水或者TE（10 mmol/LTris-Cl，1 mmol/L EDTA (pH8.0)）。如果长期保存DNA，建议使用TE。订购信息Cat#品名柱管规格包装004407质粒中提过滤管20ml50套/包004410质粒中提过滤管30ml50套/包004416质粒大提过滤管60ml20套/包

PE2000 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]ICPMS[/color][/url]仪器仓门打开了，合不起来了，不知道什么原因

姓名：王晋之时间：2021-07-08题目：β环糊精在食品领域中的应用及原理[align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=left][/align][align=center][font='calibri'][size=24px][color=#000000]β环糊精在食品领域中的应用及原理[/color][/size][/font][/align][font='times new roman']摘要：[/font][font='times new roman']本文综述了近年来β-环糊精及其衍生物在食品领域对不同疏水性功效成分的增溶作用，重点讨论了黄酮类化合物、多酚类化合物、香豆素类化合物和菇类化合物等客体分子与β-环糊精及其衍生物形成稳定包合物时包台方式的差异，并对β-环糊精及其衍生物在增溶方面的应用进行了综述。[/font][font='times new roman']关键词：[/font][font='calibri']β环糊精，水溶性，包合物，食品应用[/font][font='times new roman'][size=14px]，限量，检测方法[/size][/font][align=left][font='calibri'][size=13px]1、 [/size][/font][font='calibri'][size=13px]引言[/size][/font][/align][align=left][font='calibri']虽然一些功效成分是动植物生长所必需的，但是它们有着诸多缺点，如水溶性差、易挥发、易光解、易氧化等，以致于难以发挥作用。为使这类功效成分在我们的生产生活中有效利用，往往需要增大用量，这不仅造成了浪费，而且某些成分可能会在体内蓄积而产生毒副作用。因此，改善这些功效成分的水溶性、稳定性对促进健康、节约资源具有非常重要的意义。环糊精，作为-种具有内疏水、外亲水空腔结构的超分子化合物，可以与一些小分子化合物形成包合物，从而提升它们的水溶性、稳定性,掩蔽不良风味，提高其可接受度等。上述研究已经引起了学术界的广泛关注,并在工业上得到了开发应用。由于β_环糊精的空腔更适合与多种客体分子包合,故而其用途广,用量大，研究人员围绕β-环糊精及其衍生物开展了大量有益的工作，本文就此作-综述。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]二、β环糊精的增溶原理[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]1. [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]β环糊精简介[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（1）β环糊精结构[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']环糊精常用的有以下三种: a-环糊精(a-CD) 、β-环糊精(β-CD) 、γ-环糊精(γ-CD) 。其中β-环糊精来源广泛，价格也较为低廉，在工业上最为常用。β环糊精是 由7个葡萄糖分子连接而成的环状大分子，其空腔结构适合大多数疏水性分子嵌入。图1为β环糊精的结构简图。[/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107251442598111_1179_1608728_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='times new roman'][color=#000000]图1. [/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]β环糊精的结构[/color][/font][/align][align=left][font='calibri']环糊精本质上是一种天然环状低聚糖，是淀粉在淀粉酶作用下的降解产物,为内部中空的截锥状结构，截锥的内部具有疏水性，外部具有亲水性,有增溶的作用。此外，客体分子被环糊精封装后,还能有效减少由于光照、氧气等其他环境因素造成的功效成分的降解3],因而已被广泛用于食品领域。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（2）β环糊精增溶原理[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']在β环糊精分子中，由于葡萄糖单位的椅式构象，环糊精呈现截锥状结构，伯羟基分布于截锥的窄口端，两个仲羟基分布在宽口端，中心腔内排列着葡萄糖单位的骨架碳和醚氧，这使得环糊精空腔内部具有疏水性，羟基能与周围的水分子形成氢键，因而空腔外部呈现亲水性。此外，研究还表明，由于β-环糊精分子中，2位和3位羟基会形成一个环状的分子间氢键， 若是以其它基团取代易形成分子间氢键的羟基基团，会显著增加其水溶性，这也侧面显示出β-环糊精的衍生物的水溶性优于其本身。在水溶液中，由于环糊精分子与水分子之间的氢键作用，水分子可以在环糊精分子周围形成一个“笼子” ，协助环糊精分子将水溶性差的客体分子的一部分或整个分子困在环糊精空腔中(即包合到环糊精的疏水空腔中)，形成稳定的疏水性客体分子/环糊精的包合物,进而增加客体分子的水溶性。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（3）β环糊精的代表性衍生物及其特点[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']由于天然β-环糊精存在水溶性低(25°C, 18.5 mg/mL),肾毒性强等缺点，因而在食品领域的使用受到了-定限制。因此，通过化学修饰改善β-环糊精的性质，从而开发一系列水溶性、 安全性更好的烷基化、羟丙基化、丁基醚化的-环糊精衍生物一直 是一个重要的研究方向与β-环糊精相比， 衍生化的β环糊精性能从多个方面得到提高，如甲基化-β-环糊精的生物耐受性、吸附性、生物利用度、水溶性、稳定性都明显提升，组织毒性和刺激性明显减小 羟丙基-β-环糊精不仅水溶性得以提高，而且生物活性也更为优越。由于疏水性客体分子的结构不同，具有不同衍生化基团的环糊精分子与之包合时，可通过比较包合物的功能活性等差异来选择更适合包合的环糊精。常见的β-环糊精衍生物有甲基-β-环糊精，羟乙基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精，磺丁基-β-环糊精，羧甲基-β-环糊精，羟丁基-β-环糊精，苄基-β-环糊精，氨基-β-环糊精，任意甲基化-B-环糊精等,表1对其主要特点进行了归纳。[/font][/align][table][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]方法[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]优点及用途[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,5][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]甲基化[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]医药、保健品：生物利用度提高，释放可调，稳定性增强；[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]化妆品：减少微生物污染，掩蔽不良气味，促进透皮吸收，减少刺激；[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]分析化学：全甲基化环糊精用于手性化合物的分离，具有良好的色谱性能。[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,7][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]羟乙基、丙基、丁基化[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]食品：提高营养分子的稳定性和长效性，掩盖气味；[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]化妆品：用作稳定剂、乳化剂、去味剂，降低有机分子对皮肤黏膜的刺激，防止有效成分挥发/氧化；[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]医药、保健品：用作注射剂、增溶剂和赋形剂，提高药物生物利用度，降低药物毒副作用；[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]农药：作为洗脱剂，防止药物成分挥发、氧化、光解。[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]羟丙基化/戊基化[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]分析化学：对映选择性高，利于分离手性化合物。[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]苄基化[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]分析化学：作为无紫外吸收的客体分子探针、化学合成保护基、异构体分离填料。[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]磺丁基化[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]作为药用辅料。[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,3][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]羧甲基化[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]医药：用于注射药、口服药、鼻部、眼部用药；[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]分析化学：手型化合物的分离。[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]氨基化[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]化学合成：作为超分子结构搭建的中间体，特定反应的催化剂。[/color][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]表[/color][/size][/font][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1 [/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px]β环糊精衍生物主要特点及应用[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][align=left][font='calibri']其中[/font][font='宋体'][color=#000000]羟乙基、丙基、丁基化的β环糊精衍生物在食品添加剂领域使用更为频繁。这是因为，从结构特征上看，许多食品有效成分分子大多具有多个羟基，其尺寸形状与环糊精空腔大小的匹配程度、氢键的形成难易程度对于二者的包合起着至关重要的作用,因此,在选择环糊精与之进行包合时，由于当环糊精分子中带有羟基时更有利于二者之间氢键的形成，因此多选用羟丙基β-环糊精的环糊精衍生物。[/color][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（4）β环糊精的衍生物与不同客体分子形成包容物的示意图[/color][/size][/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107251443000738_2760_1608728_3.jpeg[/img][font='times new roman'][size=14px][color=#000000] [/color][/size][/font][font='times new roman'][color=#000000]图2. [/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]β环糊精与萜类物质形成的包合物结构[/color][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000] [/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107251443002324_8425_1608728_3.jpeg[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107251443003707_3568_1608728_3.jpeg[/img][font='times new roman'][color=#000000]图3. [/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]β环糊精与黄酮、脂肪醇和多酚类物质形成的包合物结构[/color][/font][/align][align=left][font='times new roman'][color=#000000]图4. [/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]β环糊精与香豆素形成的包合物结构[/color][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]三、β环糊精在食品领域的应用[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]1. [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]β环糊精应用简介[/size][/font][/align][align=left][font='calibri']食品中存在多种营养成分，包括脂溶性维生素，酚类化合物，脂肪酸、精油等。它们中多数因易氧化、不耐光、不耐热、水溶性差等因素限制了其在食品中的应用，而环糊精封装可有效提高其在加工和储运中的稳定性，也可增加其生物利用度。此外，一些活性成分的风味令人难以接受,但有时为了达到治疗目的必须服用，经环糊精包合也可改善其口感。比如，赵星华等研究发现用β-环糊精将芳樟醇包合后，可以有效减少其挥发、增加其稳定性和水溶性并较好地掩盖其刺激性气味 从复杂基质中提取的多酚类化合物极易在高温和光照下分解，不稳定性、吸湿性严重影响利用率，使用环糊精封装可有效解决这些问题，同时使目标分子拥有更优的物理化学性质，如抗氧化剂活性和稳定性。再如，类胡萝卜素是一类分布广泛的重要脂溶性色素,因其在预防癌症等疾病方面有重要作用而备受关注，然而类胡萝卜素的水溶性较差，在光、热、氧的存在下非常不稳定，当形成环糊精包合物后其水溶性及稳定性都有了较大提高。精油中的酚类化合物可以作为食品添加剂，具有优越的抗氧化性、防腐性。丁香酚是一种黄色油状液体，是精油中具有强抗氧化能力的佼佼者,具有较强的自由基清除能力。但丁香酚易挥发、水溶性低,而将J香酚与环糊精进行包合后，可以提高其在水中的溶解度，并且增加了其耐热稳定性和抗氧化活性。环糊精与食品有效成分进行包合后，在胃肠道内释放出来,经小肠吸收,多余部分随着人体代谢排出体外。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]2. [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]β环糊精在我国应用的限量[/size][/font][/align][table][tr][td][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#333333]食品分类号[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#333333]食品名称[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#333333]最大使用量[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#333333]备注[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]05.02.01[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail136.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]胶基糖果[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]20.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]05.02.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail137.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]除胶基糖果以外的其他糖果[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]15.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]（仅限压片糖果）用于除胶基糖果以外的其他糖果仅限其他功能，关于食品用香料新品种2-乙酰氧基-3-丁酮、食品添加剂β-环状糊精等4种扩大使用范围的公告（2017年 第10号）[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]06.07[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail170.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]方便米面制品[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail193.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]预制肉制品[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.02.01[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail194.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]调理肉制品（生肉添加调理料）[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.02.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail195.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]腌腊肉制品类（如咸肉、腊肉、板鸭、中式火腿、腊肠）[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail196.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]熟肉制品[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.01[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail197.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]酱卤肉制品类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.01.01[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail198.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]白煮肉类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.01.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail199.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]酱卤肉类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.01.03[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail200.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]糟肉类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail201.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]熏、烧、烤肉类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.03[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail202.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]油炸肉类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.04[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail203.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]西式火腿（熏烤、烟熏、蒸煮火腿）类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.05[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail204.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]肉灌肠类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.06[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail205.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]发酵肉制品类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.07[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail206.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]熟肉干制品[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.07.01[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail207.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]肉松类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.07.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail208.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]肉干类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.07.03[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail209.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]肉脯类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.08[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail210.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]肉罐头类[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]08.03.09[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail211.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]其他熟肉制品[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]1.0 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.02.03[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail314.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]果蔬汁（浆）类饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.03.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail320.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]植物蛋白饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.03.03[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail321.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]复合蛋白饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.03.04[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail322.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]其他蛋白饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.04[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail323.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]碳酸饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.04.01[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail324.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]可乐型碳酸饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.04.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail325.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]其他型碳酸饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.05[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail326.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]茶、咖啡、植物（类）饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.05.01[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail327.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]茶（类）饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.05.02[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail328.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]咖啡（类）饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.05.03[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail329.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]植物饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.07[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail335.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]特殊用途饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]14.08[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail336.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]风味饮料[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]固体饮料按稀释倍数增加使用量[/color][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]16.06[/color][/size][/font][/align][/td][td][align=left][url=http://www.foodcta.com/tjj/spxlDetail379.html][font='宋体'][size=13px][color=#000000]膨化食品[/color][/size][/font][/url][/align][/td][td][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]0.5 (g/kg)[/color][/size][/font][/align][/td][td][/td][/tr][/table][align=left][font='宋体'][size=14px][color=#000000]表[/color][/size][/font][font='宋体'][size=14px][color=#000000]2 [/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px]β环糊精在食品中应用的限量[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]3. [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]β环糊精的检测方法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=14px][color=#000000]在GB 1886.180[/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#000000]-2016食品安全国家标准中有明确规定，大致分为旋光法和HPLC法，具体步骤见国标。[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]四、结语[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px]环糊精的包合能力和其他多种特性使其在食品等领域均有重要应用。了解影响包合物形成的各种因素是制备理想的环糊精包合物的前提。另外，由于环糊精本质上是一种多糖，从安全的角度考虑将其用于食品等与人体健康有关的领域也更为可靠。尽管环糊精在增溶方面有广阔的应用前景，但对于研究生物利用度等方面还待更深入的研究。[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]参考文献：[/color][/size][/font][/align][font='times new roman'][1]Kurkov S V, Loftssont. Cyclodextrins[J]. International Journal of Pharmaceutics, 2013, 453(1): 167-180.[/font][font='times new roman'][2]郑雯，王远,袁田青,等.响应面试验优化羟丙基β-环糊精包合植物甾醇的水溶性改性I工艺[J].食品科学, 2017, 38(20): 161-168.[/font][font='times new roman'][3] YuanC, JinZ Y, Xu X M, et al. Preparation and stability of the inclusion complex of astaxanthin with hydroxypropyl-β-cyclodextrin[J]. Food Chemistry, 20[/font][font='times new roman']08, 109(2): 264-268.[/font][font='times new roman'][4] .LimaP S S, Lucchese A M, Araujo-Filho H G, et al. Inclusion of terpenes in cyclodextrins: preparation, characterization and pharmacological approache[/font][font='times new roman']S[J]. Carbohydrate Polymers, 2016, 151: 965-987.[/font][font='times new roman'][5]Loftsson T, Brewster M E. Cyclodextrins as functional excipients: methods to enhance complexation efficiency[J]. Journal of Pharmaceutical Sciences, 20[/font][font='times new roman']12, 101(9): 3019-3032.[/font][font='times new roman'][6]王晖.羟丙基磺丁基-β环糊精对肾脏的生物效应研究[D].南京:南京师范大学, 2011.[/font][font='times new roman'][7]张毅民，张惠莹,刘红莎,等不同温度下碳酸二甲酯对β 环糊精的改性研究[J].精细化工, 2013, 30(5): 544-548.[/font][font='times new roman'][8] Vasilaki A, Hatzikamari M, Stagkos-Georgiadis A, et al. A natural approach in food preservation: Propolis extract as sorbate alternative in non-carbonate[/font][font='times new roman']d beverage[J]. Food Chemistry, 2019, 298(15): 1-8.[/font][font='times new roman'][9] Szente L, Szejti J. Highly soluble cyclodextrin derivatives: chemistry, properties, and trends in development[J]. Advanced Drug Delivery Reviews, 1999,[/font][font='times new roman']36(1): 17-28.[/font][font='times new roman'][10]Wei Y Q, Zhang J, Zhuo Y, et al. Characterization of glabridin/hydroxypropyl-β-cyclodextrin inclusion complex with robust solubility and enhanced bioact[/font][font='times new roman']ivity[J]. Carbohydrate Polymers, 2017, 159: 152-160.[/font][font='times new roman'][11]吴丽红.用环糊精及其衍生物提高化妆品稳定性的研究[D].广州:华南理工大学, 2012.[/font][font='times new roman'][12]马晓明,谢伯泰,姚孙贤,等甲基化-β-环糊精的特性及其在化学和化工产品中的应用[J].四川化工，2008, 11(4): 16-20.[/font][font='times new roman'][13]戴荣继,周伟. 3种全烷基化β→环糊精作毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]固定相的研究[J].分析化学, 1995, 23(4): 374-377.[/font][font='times new roman'][14]张志，雪梅.羟丙基β-环糊精对阿苯达唑增溶作用的研究[J].甘肃畜牧兽医，2014, 44(12): 92-94.[/font][font='times new roman'][15]苏爱华,陆光裕,卓仪荣.部分羟乙基化β环糊精的制备[J].海峡药学, 1999, 11(2): 6-7.[/font]

1、 分子生物学：是一门从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。 2、 医学分子生物学：是分子生物学的一个重要分支，又是一门新兴交叉学科。它是从分子水平上研究人体在正常和疾病状态下的生命活动及其规律，从分子水平开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。 3、酶工程：过去主要是通过生物化学方法从各种材料中提取、制备酶制剂。现在主要应用基因工程技术制取酶制剂。 4、蛋白质工程：过去主要是采用化学方法对纯化的蛋白质进行结构改造，制备出有特定功能的蛋白质。现在主要应用基因工程技术，从改造目的基因的结构入手，在受体细胞中表达不同结构的蛋白质。 5、微生物工程：又称发酵工程是利用微生物特定性状，使微生物产生有用物质或直接用于工业化生产的技术。 6、DNA的甲基化：DNA的一级结构中，有一些碱基可以通过加上一个甲基而被修饰，称为DNA的甲基化。 7、 CG岛：在整个基因组中存在一些成簇、稳定的非甲基化CG，这类CG称为CG岛。 8 、信使RNA：从DNA分子转录的RNA分子中，有一类可作为蛋白质生物合成的模板，称为信使RNA。 9、顺反子：由结构基因转录生成的RNA序列亦称为顺反子。 10、 帽子结构：5端第1个核苷酸是甲基化鸟嘌呤核苷酸，它以5端三磷酸酯键与第2个核苷酸的5端相连，而不是通常的3、5磷酸二酯键。 11 、核酶：在没有任何蛋白质（酶）存在的条件下，某些RNA分子也能催化其自身或其它RNA分子进行化学反应，即某些RNA具有酶样的催化活性，这类具有催化活力的RNA被命名为核酶。 12、 蛋白质的变性：蛋白质分子爱到物理化学因素（如加热、紫外线、高压、有机溶剂、酸、碱等）的影响时，可使维持空间结构的次级键断裂，性质改变，生物活性丧失，称为蛋白质的变性。 13、蛋白质的复性：导致蛋白质变性的因素除去后，某些蛋白质又可重新回复天然构象，表现出天然蛋白质的生物活性，称为蛋白质的复性。 14、 基因：是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位，是指贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。 15、 基因组：细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和称为基因组。 16、 操纵子：是指数个功能上相关联的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。转录单位：储存RNA和蛋白质肽链序列信息的结构基因与指导转录起始部位的序列（启动子）和转录终止的序列（终止子）共同组成转录单位。 17、 启动子：是RNA聚合酶结合的区域，操纵基因实际上不是一个基因，而是一段能被特异阻遏蛋白识别和结合的DNA序列。 18、 质粒：是细菌细胞内携带的染色体外的DNA分子，是共价闭合的环状DNA分子，能独立进行复制。 19 、质粒的不相容性：具有相同复制起始位点和分配区的两种质粒不能共存于一个宿主菌，这种现象称为质粒的不相容性。 20、 转位因子：即可移动的基因成分，是指能够在一个DNA分子内部或两个DNA分子之间移动的DNA片段。 20、自私DNA：核生物基因组中也存在一些可移动的遗传因素，这些DNA顺序并无明显生物学功能，似乎为自己的目的而组织，故有自私DNA之称。 21、 自杀基因：将某些细菌、病毒和真菌中特异性的基因转导入肿瘤细胞，此基因编码的特异性酶类能将原先对细胞无毒或毒性极低的前体物质在肿瘤细胞内代谢成毒性物质，达到杀死肿瘤的目的，这类前体转移酶基因称为自杀基因。 22 、断裂基因：真核生物的结构基因是不连续的，编码氨基酸的序列被非编码序列所打断，因而被称为--在编码序列之间的序列称为内含子，被分隔开的编码序列称为外显子。 23、 顺式调控元件（顺式作用元件）：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的DNA序列。 24 、反式作用因子：一些蛋白质因子可通过结合顺式作用元件而调节基因转录活性，这些蛋白质因子称为反式作用因子。真核细胞内含有大量的序列特异性的DNA结合蛋白，其中一些蛋白的主要功能是使基因开放或关闭，称为反式作用因子，简称反式因子。 25、 启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。

[font=宋体][font=宋体]质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，当前通常用其来特指细菌、真菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]分子。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]在基因工程领域，质粒常常被当做基因的载体使用。在分子生物学中，质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]被当做基因运载工具具有非常广泛的应用。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]在质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的应用过程中，其纯度对于酶切、[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增等实验结果有着比较大的影响，因此需要保证质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]提取的纯度和效率。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]在细菌中提取质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]通常按照以下步骤进行[/font][font=Calibri]:[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]第一步，培养细菌，使质粒扩增[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体] [font=宋体]第二步，进行细菌的收集和裂解[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体] [font=宋体]第三步，质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的分离和纯化。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]在质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的提取过程中，其提取效果和其大小呈现出正比例关系，越小越容易进行提取，这主要是由于，如果质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]比较大的话，其特性机会和染色体[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]比较接近，这样想要将二者分离开来难度就会变大。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]在进行质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的分离时，适宜的条件是非常重要的，主要包括[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值、[/font][font=Calibri]SDS[/font][font=宋体]浓度、时间和溶菌温度等，在适宜的条件下质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和染色体[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]才能够更好的分离开来。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]细菌浓度对于质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的提取也是非常重要的，如果细菌的浓度比较高，那么在溶菌时，溶菌液很难和细菌液充分混合，导致溶菌不彻底的问题，这样会造成质粒的回收率比较低；[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]而如果细菌溶度比较低，溶菌液和菌液均分混合，会造成溶液中含有较多的蛋白质、染色体以及菌体碎片，在这样的情况下，沉淀时质粒回合这些物质共沉，进而导致质粒的回收率也会比较低。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]在生物学的相关研究之中，细菌质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的提取是比较常规的技术和操作，主要的方法有碱裂解法、煮沸法以及[/font][font=Calibri]SDS[/font][font=宋体]裂解法等，下面对碱裂解法进行介绍。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]碱裂解法[/font][/b][font=宋体] [font=宋体]碱裂解法是当前应用比较广泛的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]提取方法，这种方法的优点在于提取的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]纯度高，操作便捷，缺点是需要较长的提纯时间。研究人员在缩短这一方法的提纯时间方面做了大量的研究，但是没有得到理想的效果，当前这一方法提取[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的时间都在[/font][font=Calibri]1.5h[/font][font=宋体]以上。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]碱裂解法提取质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的基本原理[/font][font=Calibri]:[/font][font=宋体]首选，在菌液中加入溶液Ⅰ，细菌细胞悬浮，同时其中的[/font][font=Calibri]EDTA[/font][font=宋体]会和[/font][font=Calibri]Ca2+[/font][font=宋体]以及[/font][font=Calibri]Mg2+[/font][font=宋体]鳌合，起到抑制[/font][font=Calibri]DNase[/font][font=宋体]活性的作用；然后，加入溶液Ⅱ，将细胞裂解，在这个过程中蛋白质和少量质粒将会变质；[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]再次，加入溶液[/font][font=宋体]Ⅲ，使多数蛋白质以及染色体[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]被沉淀，并使得质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]复性。其中，该方法中起到裂解细菌作用的主要是溶液Ⅱ中的[/font][font=Calibri]NaOH[/font][font=宋体]，正因如此该方法被称为碱裂解法，如果将其换为[/font][font=Calibri]SDS[/font][font=宋体]，也能够提取出少量的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]，这是由于[/font][font=Calibri]SDS[/font][font=宋体]也是碱性的，可以一定程度上破坏细菌的细胞膜。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]在这一方法中需要注意，[/font][font=Calibri]NaOH[/font][font=宋体]溶液要现用现配，这个主要是由于其能够和空气中的[/font][font=Calibri]CO2[/font][font=宋体]反应，从而使溶液的碱性降低，这样会影响提纯的效率。[/font][/font][font=宋体] [font=宋体]另外在加入溶液[/font][font=宋体]Ⅱ之后，操作时间不能够过长，这是因为染色体[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]在碱性条件下片段会慢慢断裂。另外需要注意的是，在操作过程中，混匀是一定要轻柔，从而在保证细菌沉淀可以充分的扩散在试剂中的前提下，避免已变性质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和染色体基因组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]被机械剪切。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]此外，在溶液[/font][font=宋体]Ⅲ加入之后，其中的[/font][font=Calibri]SDS[/font][font=宋体]会和蛋白质结合，会产生大量的沉淀，[/font][font=Calibri]SDS[/font][font=宋体]还会和醋酸钾结合，生成[/font][font=Calibri]PDS[/font][font=宋体]，这一物质的溶解度远低于[/font][font=Calibri]SDS[/font][font=宋体]，从而可以将大部分蛋白质和染色体[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]共沉淀，进而获得质粒。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州能够提供快速、高通量、高品质以及个性化的[url=http://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]质粒[/b][/url][/font][font=Calibri][url=http://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]DNA[/b][/url][/font][font=宋体][url=http://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]制备服务[/b][/url]。不仅满足实验室研究人员的小量质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备需求，也可为生物工业用户和医药公司等提供大规模的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备服务。义翘神州升级改造后的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备平台，采用[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级别的生产线，对过程和最终产品的严格管控，确保了最终产品质量符合客户需求。义翘神州可以提供从μ[/font][font=Calibri]g[/font][font=宋体]级别，[/font][font=Calibri]mg[/font][font=宋体]级别至[/font][font=Calibri]g[/font][font=宋体]级别不同规模的科研级和工业级别的质粒生产服务，满足不同的需求。更多详情可以参看：[/font][font=Calibri]http://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体]质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的质量和纯度对于生命科学实验至关重要。本文将系统地介绍确定质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]质量[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]纯度的最佳方法，包括实验室检测与生物信息学分析，旨在为研究人员提供专业、准确和可靠的评估手段。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]引言[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]在生物科学研究中扮演着关键角色，涉及基因表达、基因治疗、基因组编辑等多个领域。因此，确保质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的质量和纯度对于实验的成功至关重要。随着技术的不断发展，确定质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]质量[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]纯度的方法也在不断改进和完善。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]质量的评估[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]评估质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]质量的方法主要包括电泳分析、酶切鉴定和生物信息学比对。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.1 [/font][font=宋体]电泳分析：琼脂糖凝胶电泳是最常用的方法。通过观察电泳图谱，可以判断[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]是否完整，是否存在降解现象。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.2 [/font][font=宋体]酶切鉴定：使用限制性内切酶对质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]进行酶切，再通过电泳分离酶切产物。如果酶切产物的大小与预期一致，说明质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的结构是正确的。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.3 [/font][font=宋体]生物信息学比对：利用基因组学和序列分析工具，对质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的序列进行比对，检测是否存在突变、插入或缺失等变异。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]纯度的评估[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]评估质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]纯度的方法主要包括紫外分光光度计测定、高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法和生物信息学分析。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.1 [/font][font=宋体]紫外分光光度计测定：在[/font][font=Calibri]260[/font][font=宋体]纳米处测定吸光度值，可以计算出[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的浓度。同时观察[/font][font=Calibri]A260/A280[/font][font=宋体]比值，纯度良好的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]在该波长下的吸光度值应该较高，且[/font][font=Calibri]A260/A280[/font][font=宋体]比值应接近[/font][font=Calibri]1.8[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.2 [/font][font=宋体]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法（[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]）：可以分离和测定质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的组成和浓度，具有较高的灵敏度和特异性，能够检测到低浓度的杂质。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.3 [/font][font=宋体]生物信息学分析：利用软件工具对质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的序列进行分析，预测可能的杂质成分，如蛋白质、[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]结论[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]确定质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]质量[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]纯度的最佳方法需要综合运用多种手段。实验室检测方法如电泳分析、紫外分光光度计测定和高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法提供了快速、直观的结果。而生物信息学分析则从序列和组分的角度提供了深入的洞察，使研究人员能够更全面地了解质粒的属性和潜在问题。结合这两类方法，研究人员可以获得关于质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]质量[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]纯度的准确、可靠的信息，从而确保实验结果的准确性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供快速、高通量、高品质以及个性化的[url=https://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]质粒[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]DNA[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service][b]制备服务[/b][/url]。不仅满足实验室研究人员的小量质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备需求，也可为生物工业用户和医药公司等提供大规模的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备服务。义翘神州升级改造后的质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]制备平台，采用[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级别的生产线，对过程和最终产品的严格管控，确保了最终产品质量符合客户需求。义翘神州可以提供从μ[/font][font=Calibri]g[/font][font=宋体]级别，[/font][font=Calibri]mg[/font][font=宋体]级别至[/font][font=Calibri]g[/font][font=宋体]级别不同规模的科研级和工业级别的质粒生产服务，满足不同的需求。详情关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/plasmid-dna-preparation-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

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