氨基酸组成

傅里叶近红外能测量出小麦种氨基酸的组成含量吗？这个氨基酸不是和水分淀粉相平行的一个指标，而是小麦当中各种氨基酸的组成，大概有17种，例如：赖氨酸、谷氨酸、丝氨酸等各种氨酸的含量。有哪位坛友知道么？

http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/09/06/A1378379551.jpg 氨基酸是蛋白质的基础组成单位，通过研究蛋白质中氨基酸的性质和组成来预测蛋白质的结构和功能，蛋白质氨基酸残基组成分析主要是通过氨基酸分析仪来完成的，本文推荐了2个基于氨基酸组成进行蛋白质预测软件。基于氨基酸组成的蛋白质预测软件根据组成蛋白质的20种氨基酸的物理和化学性质可以辨析电泳等实验中的未知蛋白质，也可以分析已知蛋白质的物化性质。ExPASy工具包包涵的程序：AACompIdent：与把氨基酸序列在SWISS-PROT库中搜索不同，AACompIdent工具利用未知蛋白的氨基酸组成去确认具有相同组成的已知蛋白。该程序分析时需提交的相关信息包括：蛋白质的氨基酸组成、等电点pI和分子量(如果知道)、正确的物种分类及特别的关键词。此外，用户还需在六种氨基酸“组合”中作出选择，这影响到分析如何进行。例如，某种“组合”会把残基Asp/Asn(D/N)和Gln/Glu(Q/E)组合成 Asx(B)和Glx(Z);或者某种残基会在分析中被完全除去。对数据库中的每一个蛋白序列，算法会对其氨基酸组成与所查询的氨基酸组成的差异打分。由电子邮件返回的结果被组织成三级列表：第一张列表中的蛋白都基于特定的物种分类而不考虑pI和分子量;第二张列表包含了不考虑物种分类、pI和分子量的全体蛋白;第三张列表中的蛋白不但基于特定物种分类，并且将 pI和分子量也考虑在内。虽然计算所得结果各不相同，但零分表明了该序列与提出的组成完全相符。AACompSim：AACompIdent的一个变种，AACompSim提供类似的分析，但与前者以实验所得的氨基酸组成为依据进行搜索不同，后者使用SWISS-PROT中的序列为依据。有报道称，氨基酸组成在物种之间是十分保守的(Cordwell等，1995)，并且通过分析氨基酸的组成，研究者能从低于25%序列相似性的蛋白之间发现弱相似性(Hobohm和Sander，1995)。因此，在“传统的”数据库搜索基础上辅以组成分析，能为蛋白质之间关系提供更多见解。PROSEARCH：PROPSEARCH也提供基于氨基酸组成的蛋白质辨识功能。用144种不同的物化性质来分析蛋白质，包括分子量、巨大残基的含量、平均疏水性、平均电荷等，把查询序列的这些属性构成的“查询向量”与SWISS-PROT和PIR中预先计算好的各个已知蛋白质的属性向量进行比较。这个工具能有效的发现同一蛋白质家族的成员。可以通过Web使用这个工具，用户只需输入查询序列本身。分子量搜索(MOWSE)分子量搜索(MolecularWeightSearch，MOWSE)算法利用了通过质谱(MS)技术获得的信息。利用完整蛋白质的分子量及其被特定蛋白酶消化后产物的分子量，一种未知蛋白质能被准确无误地确认，给出由若干实验才能决定的结果。由于未知蛋白无需再全部或部分测序，这一方法显著地减少了实验时间。MOWSE的输入是一个纯文本文件，包含一张实验测定的肽段列表，分子量范围在0.7到4.0Kda之间。计算过程基于在OWL非冗余蛋白质序列库中包含的信息。打分基于在一定分子量范围内蛋白中一个片段分子量出现的次数。输出的结果是得分最佳的30个蛋白的列表，包括它们在OWL中的条目名称、相符肽段序列、和其它统计信息。模拟研究得出在使用5个或更少输入肽段分子量时，准确率为99%。该搜索服务可通过向mowse@daresburg.ac.uk发送电子邮件实现。为获得更多关于查询格式的细节信息，可以相该地址发送电子邮件，并在消息正文中写上“help”这个词。蛋白质氨基酸组成分析用盐酸在110 ℃将蛋白或多肽水解成游离的氨基酸，用氨基酸分析仪测定各氨基酸的含量。采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法，对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。仪器基本结构同普通HPLC相似，但针对氨基酸分析进行了细节优化(例如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等等)通常细分为两种系统：蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统)，利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸，速度较快，基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸，速度较慢，基线一般不如钠盐系统好。分析效果：从目前已知的氨基酸分析方法比较来看，除灵敏度(即最低检测限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC：0.5 pmol;氨基酸分析仪：10 pmol)，其他如分离度、重现性、操作简便性、运行成本等方面，都优于其他分析方法。蛋白质氨基酸残基组成分析的主要步骤包括：首先是蛋白被水解为氨基酸，其次是采用离子色谱等方法进行游离的氨基酸含量和组成的分析。总之利用蛋白可以分析氨基酸，利用氨基酸也可以研究蛋白质。

氨基酸分子组成分析可用离子折射仪么？

1.1概述1.1.1氨基酸基本的理化性质 一、基本物理学性质 包括基本组成和结构、溶解性、酸碱性质、立体化学、熔点、沸点、光学行为、旋光性、疏水性等。 (一）溶解性质根据氨基酸侧链与水相互作用的程度可将氨基酸分作几类。含有脂肪族和芳香族侧链的氨基酸，如Ala、Ile、Leu、Met、Pro、Val及Phe、Tyr，由于侧链的疏水性，这些氨基酸在水中的溶解度均较小；侧链带有电荷或极性集团的氨基酸，如Arg、Asp、Glu、His、Lys和Ser、Thr、Asn在水中均有比较大的溶解度；但根据电荷及极性分析也有一些例外，如脯氨酸属于带疏水基团的氨基酸，但在水中却有异常高的溶解度。 （二）氨基酸的疏水性 氨基酸的疏水性，是影响氨基酸溶解行为的重要因素，也是影响蛋白质和肽的物理化学性质（如结构、溶解度、结合脂肪的能力等）的重要因素。 按照物理化学的原理，疏水性可被定义为：在相同的条件下，一种溶于水中的溶质的自由能与溶于有机溶剂的相同溶质的自由能相比所超过的数值。估计氨基酸侧链的相对疏水性的最直接、最简单的方法就是实验测定氨基酸溶于水和溶于一种有机溶剂的自由能变化。 一般用水和乙醇之间自由能变化表示氨基酸侧链的疏水性，将此变化值标作△G′。 不同氨基酸的△G′值如下表所示。当氨基酸的△G′值为正时，其侧链具有疏水性，倾向于处在蛋白分子的内部； △G′为负时，其侧链是亲水的，倾向于处在蛋白分子的表面。需要注意的是，赖氨酸通常是蛋白质分子中亲水性的氨基酸残基，但它的△G′是正值，这是由于它的侧链含有优先选择有机环境的4个-CH2-基。 （三）氨基酸的光学性质 氨基酸中的苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸分子中由于有共轭体系，因此可以吸收近紫外光。它们的最大吸收波长（λmax)分别为260nm、275nm、278nm；在吸收最大波长光线的时候还会发出荧光。

小弟最近在做氨基酸组成分析，用岛津20A做的，是柱前衍生的PITC法，对于定性分析，现在相对较稳定，但对于定量分析效果很不理想，我一般测试蛋白多肽类产品，水解后测试绝对量，回收率少的可怜，只有15-20%，那位好心人帮帮我，看怎么提高氨基酸组成分析的回收率，或者有好的资料分享一下，小弟在此万分感谢。

把蛋白完全水解成氨基酸，可以在pmol到nmol水平上分离和定量。虽然氨基酸的序列信息已经无法得到，但是组成蛋白的氨基酸种类及含量信息可以得到,利用氨基酸的指纹信息可以鉴定蛋白。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=155679]小麦籽粒氨基酸碳氮稳定同位素的测定与分析[/url]………………………………………………………………………………[color=#00008B]【目的】利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-燃烧-同位素比值质谱仪（gas chromatography-combustion-isotope ratio masss pectrometry,GC-C-IRMS）测定小麦籽粒氨基酸碳氮稳定同位素组成。【方法】以小麦临汾50744为材料,水解得到其籽粒蛋白质氨基酸,将氨基酸标准样品以及小麦籽粒氨基酸衍生化为N-新戊酰基,O-异丙醇（N-pivaloyl-isopropyl,NPP）氨基酸酯,利用GC-C-IRMS测定其碳氮稳定同位素组成。【结果】氨基酸标准样品的碳氮同位素组成分析表明,NPP氨基酸酯的平均重现性δ^13C为0.47‰,δ^15N为0.28‰,并没有产生大的同位素分馏,因此δ^13C和δ^15N都能得到满意的测定结果。运用GC-C-IRMS测定了小麦临汾50744籽粒蛋白质氨基酸的稳定碳氮同位素的自然丰度,其中δ^13C的变化范围在-28.7‰到-34.7‰,δ^15N的变化范围为-6.2‰到9.5‰。采用系统聚类分析进行分类,根据δ^13C可以将氨基酸分为两类 根据δ^15N可以将氨基酸分为三类。【结论】运用GC-C-IRMS结合NPP氨基酸酯衍生物可以测定小麦籽粒氨基酸的稳定碳氮同位素,这对于揭示氨基酸代谢途径的差异以及逆境胁迫下氨基酸的合成差异具有重要的意义。[/color]

http://www.dikma.com.cn/Goods/index/cid/154氨基酸组成测定是蛋白质组学、食品质量检测以及药品质量检测中的重要分析项目。由于该分析项目涉及的化合物种类繁多，且需要柱前或柱后衍生技术，对分析方法和分析产品具有较高要求。 下面列出氨基酸混标(18种)-详细信息货号中文名称英文名称CSA号规格53-AAS18-5ML 氨基酸混标(18种)-现货AMINO ACID STANDARD SOLUTION 5mL氨基酸均以 2.5 μmol/mL 浓度溶于 0.1N HCl 溶液，但L-胱氨酸浓度为 1.25μmol/mL53-A8949-10MGAsp(L-天冬氨酸)L-ASPARTIC ACID SIGMAULTRA56-84-8≥99% (TLC) 10mg12-O-74Glu(L-谷氨酸)L-(+)-Glutamic acid 56-86-02g56-84960-10GSer(L-丝氨酸)L-SERINE56-45- 119g12-O-37Gly(甘氨酸)Glycine56-40-65g53-H6034-25GHis(L-组氨酸)L-HISTIDINE NON-ANIMAL SOURCE CELL CUL71-00-125g[c

为制定国家标准提供依据，减少假冒的婴幼儿配方奶粉；运用植物-土壤相互作用，治理湘江流域矿区重金属污染……昨日，在中南林业科技大学召开的产学研工作会议上，一项项该校的科技成果成为关注焦点。省教育厅厅长张放平说，2006年至2009年，全省高校共计转让技术创新成果1319项，为企业提供技术服务3041项，自办企业转让科研成果683项，总计新增产值1134亿元，为全省经济发展注入了源头活水和强劲动力。 研究婴幼儿配方奶粉的中南林业科技大学食品科学与工程学院的任国谱老师对记者说，婴幼儿配方奶粉中蛋白质含量是一个宏观指标，可以通过添加很多非乳蛋白来实现，客观上给造假者提供了机会。而蛋白质是由氨基酸构成的，直接检测氨基酸的组成模式，要比对蛋白质的检测精确和可靠得多。为了寻找婴幼儿配方奶粉中必需氨基酸的打假模式，他们的项目根据中国奶牛品种和地域的分布，采集相应的生鲜奶样，分析其氨基酸组成，规定婴幼儿配方奶粉的必需氨基酸模式，大大减少假奶粉的机会。 中南林业科技大学联合湖南省环境保护研究所，围绕湘江流域污染治理、农村重金属污染治理等开展合作，技术成果“景观型-组合人工湿地污水处理技术”目前已在长沙市河西先导区洋湖、梅溪湖、雨花区圭塘河、湘潭市水府庙水库、昆明滇池等地进行推广应用。

待鉴定的样品为合成多肽的副产物，怀疑其中一个或多个氨基酸是D型构象(其对照品是全L型构象)，现想验证这一假设。首先想到用测其旋光度和全L型对照品旋光度进行对比的方法进行鉴别，但测定旋光度需要样品量较多，而该待鉴定样品仅2-5mg，方法不可行。于是想采用圆二色光谱的方法鉴别，不知采用此方法需多少量的样品？如果该样品和全L型对照品的圆二色光谱不一致，能否用此方法断定两者是对应或非对应异构体(两者的分子量相同，氨基酸组成也相同)？谢谢指教！

最近忙氨基酸分析，用柱前衍生。发现样品有一个峰很高，尤其是水解之后更高。它不是17中氨基酸标准品中的一个，不知道是什么。。。。。。。。这样的话我怎么得知它是什么氨基酸呢？我算总量的时候可不可以用峰面积估算出这个峰代表的氨基酸的含量? 可不可以用质谱做？但是样品比较复杂。。。。。。。。。。。。。要怎么办呢？大侠们出手试试

有没有兄弟伙用安捷伦的氨基酸试剂包测定氨基酸的？没有氨基酸分析仪，自由安捷伦1200二元泵要测定氨基酸，具了解氨基酸有专门的分析包，不知怎么样！

请问醋中的氨基酸态氮与氨基酸怎样换算?

我以前搞过段时间食品中氨基酸分析，以下是一点自己的笔记。供参考。由于涉及到了一些公司的内容。所以，我不敢透露更具体的。理解。主要样品：含脂肪的肉汤，肉块等。氨基酸分析测试室使用安捷伦1100系列HPLC仪器，通过柱前衍生法分析氨基酸。我司提供食品，保健品，饲料等游离和水解氨基酸含量测试。仪器配置和原理：四元泵梯度切换——自动进样器——柱——紫外检测器——记录仪自动进样器是通过吸取OPA（邻苯二醛）和FMOC-Cl加入样品和标准品中，使样品和标准品中的氨基酸接上荧光基团，在分析柱中分离，后用荧光检测器检测。荧光法检测精度高，检测限低。样品前处理原理和操做步骤：游离氨基酸前处理原理：通过使用三氯乙酸溶液作为蛋白质变性剂，沉淀蛋白质，而不破坏溶液中氨基酸。与公司前处理比较：公司使用热水浴提取固体或液体样品。该方法不能有效地去处样品中（汤，肉等）蛋白质，致使样品中蛋白质悬浮于样品中，污染色谱柱，仪器。由于样品处理简单，对于复杂样品可能提取效率稍差。大致操作步骤：称样——10%三氯乙酸定容——放置——滤过——离心方法优点：能有效去处蛋白质，而不破坏样品中氨基酸。水解氨基酸原理：分析蛋白质或多肽氨基酸组成，需将各肽键裂解为游离氨基酸。一般使用强酸或强碱。本次学习是使用6mol/L盐酸消解，提取。操作步骤：称样于消解管——加盐酸——抽真空——封口——烘箱消解——定容——蒸干——加水溶解——离心——上样分析

问题如题，天然氨基酸和人工氨基酸结构不同，近红外能够鉴别出来么，还是需要中红外技术？有没有相关的资料可以查询？坐等大家帮忙

用沃特世e2695做游离氨基酸，用沃特世氨基酸衍生包进行衍生，样品结果偏大，什么原因

请教各位老师一个问题。我们有一个混合氨基酸，想用氨基酸分析仪检测。但有的检测实验室讲，高纯度的氨基酸用氨基酸分析仪检测误差会比较大，这种说法有道理吗？谢谢！

液相测氨基酸的时候能够测出来氨基酸的单标，但是混合后总有两三个氨基酸峰出不来。单标脯氨酸检测不到，侧混合标样的时候并没有看到有未分开的重叠峰啊。

单位进了一台全自动氨基酸分析仪,刚安装好,练练手,同事拿了一瓶复合氨基酸(瓶上标注made in USA, 据说市面上很畅销),我们测了氨基酸含量,竞然主要成分是谷氨酸,占氨基酸总量的85%,我戏说以后烧菜不用放味精,放一片复合氨基酸就行,可这玩艺要几百元一瓶,一瓶(谷氨酸)要顶一大箱味精!

近几年来由于饲料工业迅猛发展，对饲料产品的品质控制已经从常规的营养分析转到了微量分析，对饲料品质的评价已经从粗蛋白含量的高低，改为观测各种氨基酸含量是否符合要求，所以准确测定氨基酸含量就成了关键一环。本实验验证不同品牌的氨基酸分析仪在不同的实验室测定氨基酸含量是否有差别。

氨基酸分析仪分析的柱子为阳离子交换柱，要求分析之前要去除核酸，为什么呢？核酸对柱子有什么影响吗？还是说核酸的存在会影响氨基酸的测定？

[size=3][font=宋体]氨基酸检测最早是用氨基酸分析仪，不过早过时了，现在用[/font][font=Times New Roman]HPLC[/font][font=宋体]的比较多，采用[/font][font=Times New Roman]HPLC[/font][font=宋体]柱后衍生的方法，不过弊端太多，做初步的检测还可以，但做科研课题就不行了。最好的方法是用质谱技术。多达[/font][font=Times New Roman]42[/font][font=宋体]种氨基酸的含量测定，采用质谱技术并使用[/font][font=Times New Roman]44[/font][font=宋体]种氨基酸同位素对内标，精确度和重复性都有很好的保证，和传统的毛细管电泳法、[/font][font=Times New Roman]HPLC[/font][font=宋体]法、氨基酸分析仪比较，无论是从精度上、还是检测的范围上和检测结果的准确度上都有了很大的提高和改善。[/font][/size][font=宋体][size=3]检测氨基酸的种类有：[/size][/font][font=宋体][size=3]一：必需氨基酸：[/size][/font][font=宋体][size=3]精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸（蛋氨酸）、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸。[/size][/font][font=宋体][size=3]二：必需氨基酸衍生物（神经内分泌新陈代谢）：[/size][/font][size=3][font=宋体]γ[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]氨基丁酸、甘氨酸、丝胺酸、牛磺酸、酪氨酸。[/font][/size][size=3][font=宋体]三：氨[/font][font=Times New Roman]/[/font][font=宋体]能量新陈代谢：[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]a-[/font][font=宋体]氨基已二酸、天门冬酰胺、天门冬氨酸、瓜氨酸、谷氨酸[/font][/size][font=宋体][size=3]、谷氨酰胺、鸟氨酸。[/size][/font][font=宋体][size=3]四：硫新陈代谢：[/size][/font][size=3][font=宋体]半胱氨酸、胱硫醚[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]、同型半胱氨酸。[/font][/size][font=宋体][size=3]五：附加代谢物：[/size][/font][size=3][font=宋体]α[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]氨基正丁酸[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]、丙氨酸、鹅肌肽[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]b-[/font][font=宋体]丙氨酸、[/font][font=Times New Roman]b-[/font][font=宋体]氨基异丁酸、肌肽、乙醇胺、δ[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]羟基赖氨酸[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]、羟化脯氨酸、[/font][font=Times New Roman]1-[/font][font=宋体]甲基组氨酸、[/font][font=Times New Roman]3-[/font][font=宋体]甲基组氨酸、磷酸乙醇胺、磷酸丝氨酸、脯氨酸、肌氨酸、精氨[/font][font=Times New Roman]([/font][font=宋体]基[/font][font=Times New Roman])[/font][font=宋体]琥珀酸、羟化瓜氨酸。[/font][/size][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][size=3][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]为了配合人体全谱氨基酸营养代谢组学的研究，公司成功开发出[b]《全谱氨基酸营养代谢组学分析系统》[/b]软件[/font][/size][font=宋体][size=3]随着科技的发展和人类的进步，营养代谢组学逐渐进人了现代科学的研究范畴，发展成一门很重要的学科。[/size][/font][size=3][font=宋体]代谢组学是继基因组学和蛋白质组学之后新近发展起来的一门学科，是系统生物学的重要组成部分。在营养支持方面代谢组学与系统生物学的其他技术一并用于研究营养表[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]型[/font][font=Times New Roman](nutritional phenotype)[/font][font=宋体]，后者被定义为基因组、蛋白质组、代谢组、功能和行为因素的集成系统。[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]以前难以完成如此复杂的测定，而代谢组学技术的应用，可以测定许多营养代谢物与疾病及健康的关系。[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]因此，代谢组学是唯一适合探索营养与代谢复杂关系的研究方法。[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]　　[/font][/size][font=宋体][size=3]氨基酸是人类营养的基础，是最重要的营养组分，因此对氨基酸的研究又是营养组学中最为重要的一环。人类对氨基酸的研究比较广泛和系统。《全谱氨基酸营养代谢组学分析系统》软件正是汇集了这方面的研究资料，给客户一系统的分析参考。[/size][/font][size=3][font=宋体]《全谱氨基酸营养代谢组学分析系统》是和全谱氨基酸检测技术相配套的一套软件分析系统。通过对人体内[/font][font=Times New Roman]42[/font][font=宋体]种氨基酸的精确检测，来揭示人体内详细的氨基酸代谢状况。[/font][font=Times New Roman]42[/font][font=宋体]种氨基酸不仅包含了[/font][font=Times New Roman]8[/font][font=宋体]种必需氨基酸、[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]种半必需氨基酸，同时也包含了[/font][font=Times New Roman]20[/font][font=宋体]种组成蛋白的基本氨基酸和各个代谢途径中重要的氨基酸，可以从不同的代谢路径中提示人体的健康状况。不管是神经内分泌系统、氨能量代谢系统或者是硫代谢等等，各种代谢途径都可以检测到。是截止目前国际上最科学、最系统、最完善的氨基酸营养代谢组学系统。[/font][/size][font=宋体][size=3]《全谱氨基酸营养代谢组学分析系统》通过对全谱氨基酸检测结果的科学分析，和目前科学提供的理论，给客户提示检测结果的临床意义和营养补充调节建议，同时专业医生或者营养师又可以通过软件提供的每种氨基酸的详细代谢图谱来分析各个代谢路径是否出了问题，来进一步的指导。[/size][/font][size=3][font=Times New Roman][/font][/size]

如题：氨基酸态氮含量等同于氨基酸含量吗？

为什么氨基酸自动分析仪只能测定17种氨基酸，570nm下16种，440nm下1种，还有三种应该是天冬酰胺、谷氨酰胺、色氨酸，这三种测定不出的原因是什么？

氨基酸分析技术的特点与内涵文章来源：国家产品质量安全与法信息中心网 添加时间：2009-7-19 3:13:19 点击：1510摘要：在传统蛋白质分析技术基础上，结合现代分析仪器技术发展优势，针对氨基酸分析技术难点及存在问题，概括比较分析评价当前氨基酸分析技术特点。关键词：蛋白质 氨基酸 分析技术 研究进展1 前言迄今为止，自然界中已发现180多种氨基酸，其中参与蛋白质合成的氨基酸只有20多种，称为基本氨基酸。氨基酸主要有两种存在形式，一种是以游离态存在于生理体液(血浆、尿)、食品(酒、饮料)中；另一种是以结合态存在于肽和蛋白质中。蛋白质在乳中含量为3.0%~3.5%，是乳的主要成分，对乳品的理化特性和营养价值有重要的影响。由于国标法对蛋白的检测是通过检测样品含氮量而得到的，实际上是将样品消化分解，经蒸馏碱吸收后，测定的挥发性“氨基氮”，因而部分不法商贩用添加外源动植物蛋白粉或脲等含氮化合物（虚“氮”）来增加原料乳的氮含量，钻传统检测方法表征“虚氮”的漏洞，以蒙混过关。这些掺入水解动物蛋白或者含氮化合物的乳粉因其氨基酸的组成不合理，根本不能代表动、植物蛋白，不易消化，所以营养价值低下，导致人体吸收利用率降低，严重地影响到婴幼儿的生长发育和智力水平。因此，对氨基酸分析方法的研究与改进逐渐得到各国家、全社会的高度重视。在一般情况下，质量监督检验单位在市场上抽到产品进行检验所得的数据中，蛋白质含量实际上是用总氮含量表示的，所以在加工企业常规检验时、含氮化合物、水解动物蛋白等杂蛋白是测不出来的，因此需要建立快速分析、测定乳制品中蛋白质、氨基酸的检测方法，保障乳制品的质量与安全。,1958年，Spackman等首先提出了用阳离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质中的氨基酸，实现了氨基酸分析的自动化。其后，人们不断地发展新的氨基酸分析方法，柱前衍生反相高效液相色谱法、高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法、毛细管电泳法、蛋白质芯片技术等相继应用于氨基酸分析。现已是多种氨基酸分析方法并存、互补。本文就目前应用于氨基酸分析的主要方法作一比较分析。,,2 氨基酸分析技术的光谱分析优势及特点利用光谱探针方法定量分析蛋白质的研究在国际上十分活跃，其中，对有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法和金属离子-有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法的研究倍受重视。 2.1 有机染料结合分光光度技术因为有机染料结合分光光度法测定蛋白质操作简便，比较灵敏，又不需特别的仪器，方法应用比较广泛。现在研究较多的可作为探针的染料分子中，大部分都含有带正电荷的亲水性基团如羟基、磺酸基、酚羟基及不带电荷的疏水性基团，如苯环。这类方法的基础是在溶液pH小于等电点时，蛋白质的肽键亚胺和N端氨基质子化成阳离子，若有阴离子染料存在时，由于电荷作用，蛋白质便与染料结合沉淀或改变结合染料的光吸收特性，借染料颜色的减褪或变化的程度测定蛋白质的含量。已经应用的染料有酸性橙红、考马斯亮蓝G-250、溴甲酚绿、溴甲酚紫、埃铬青R和溴酚蓝。2.2金属离子-有机染料结合分光光度技术近几年发展了利用金属离子和有机染料特别是荧光染料形成配合物体系结合光光度法来测定蛋白质含量。金属离子与含有-OH或C=O的有机染料相遇时，氧原子中的孤对电子可顺利进人杂化轨道，形成稳定的配合体系，在酸性条件下，该体系遇到结构不对称的蛋白质分子时，互相极化产生静电作用而结合成新的大分子团，改变了原体系的光谱性能，从而能定量测定蛋白质的含量。该方法具有灵敏度高、线性范围广、干扰离子少、操作简单、快速及适用于常规应用等特点。2.3 荧光光度分析技术荧光法是定量测定蛋白质的另一种常用方法通常比分光光度法更灵敏。常用的方法有内源荧光法、荧光探针法、荧光偏振、时间分辨荧光法及激光诱导时间分辨免疫分析法。2.3.1 内源荧光分析技术蛋白质中存在着Tyr、Trp、phe残基，能够吸收270~300 nm的紫外光而发出紫外荧光。当测定体系中加入小分子配体（SM）时，SM与蛋白质发生相互作用，会导致蛋白质荧光的猝灭，利用SM对蛋白质内源荧光的猝灭这一现象可以确定蛋白质与SM的作用类型及其结合部位等。2.3.2 外源荧光分析技术对于蛋白质的研究仅利用其内源荧光是不够的，需要通过外源荧光性质的研究才能获得更多关于蛋白质分子的各种信息，这就使得荧光探针对蛋白质分析有着极其重要的意义，这已成为蛋白质微量检测及溶液的构相分析中不可缺少的手段之一。在外源荧光法中，又可分为有机荧光探针法和稀土荧光探针法。作为一个好的荧光探针应满足以下条件：探针分子与蛋白质分子的某一微区必需有特异性的结合，并且结合比较牢固；探针的荧光必须对环境条件敏感；蛋白质分子与探针结合后不影响其原来的结构和特性。在满足这些条件的基础上可进行蛋白质的测定和与金属离子结合的计量化学等。与光度法类似，蛋白质在和某些具有荧光特性的染料结合后，能引起荧光强度的变化，并且在一定浓度范围内与蛋白质浓度成正比，因此可用于蛋白质的测定。利用这些化合物在不同蛋白质分子中量子产率、峰位及谱带的变化，就可探测蛋白质分子结合区的极性、疏水性的大小，从而推论构象的稳定情况及变化等。2.3.3 荧光偏振分析技术利用荧光体在转动扩散速度上的差异而导致偏振荧光的差别，建立了荧光偏振测定法。利用荧光偏振还可以研究：酶与荧光底物的结合程度；蛋白质聚合与解离；蛋白质从螺旋到无规卷曲的研究。,3 氨基酸分析技术的色谱分析优势及特点3.1 柱后衍生高效阳离子交换色谱分析技术高效阳离子交换色谱（HPCEC）-柱后茚三酮衍生光度检测分离测定氨基酸是一种经典的氨基酸分析方法。此方法是利用氨基酸在酸性条件下形成阳离子而在阳离子交换柱中分离，分离后的氨基酸用茚三酮衍生、紫外可见光检测器检测。该方法以阳离子交换树脂为固定相、酸性缓冲液流动相，在柱后流出液中加入茚三酮使氨基酸生成具有可见光吸收的衍生物进行检测，具有重现性好、仪器稳定、结果可靠、适合于大量常规样品分析等优点。另外，由于衍生化反应发生在氨基酸与其物质分离之后，因而避免了其他物质的干扰，适合复杂样品中氨基酸的分析。其缺点是仪器复杂、体积大、费用高。此外，由于脯氨酸的测定波长在440nm，而其他氨基酸的测定波长为570nm，因脯氨酸不能和其他氨基酸同时测定。氨基酸分析自动仪就是基于阳离子交换色谱分离、柱后茚三酮衍生光度检测技术设计的。商品化的自动氨基酸分析仪是在20世纪60年代初问世，目前的自动氨基酸分析仪已实现了程控自动化和数据处理电脑化，分析时间已缩短至1 h以内。氨基酸自动分析仪实际上属专门用来分析氨基酸的高效液相色谱仪，其优点是高压、快速、灵敏，试剂和样品用量少、重现性好、分析结果稳定。广泛用于食品、医学、农业以及微生物等领域。3.2 柱前衍生反相高效液相色谱分析技术近20年来，柱前衍生反相高效液相色谱法（RP-HPLC）分析氨基酸得到了迅速发展，逐渐取代柱后衍生高效阳离子交换色谱（HPCEC）在许多领域中的应用。RP-HPLC分析方法更加快速灵敏。与专业氨基酸分析的自动分析仪不同，HPLC仪适用性更广、更灵活。RP-HPLC要求将氨基酸在柱前转化为适于反相色谱分离并能被灵敏检测的衍生物，柱前衍生的关键在于衍生试剂的选择。选择衍生试剂的标准是能与各氨基酸定量反应，每种氨基酸只生成一种化合物且产物有一定的稳定性，不产生或易于排除干扰物，操作简单，色谱分离分辨率高、检测灵敏度高，分析时间短，便于实现自动化和使产物能在不同型号的高效液相色谱仪上测定。目前比较常用的柱前衍生试剂有邻苯二甲醛（OPA）、异硫氰酸苯酯（PITC）、氯甲酸芴甲酯（FMOC-Cl）及丹酰氯（Dansyl-Cl）。衍生后的氨基酸一般键合在C18柱上，利用液液分配原理进行分离。流动相多以乙酸盐或磷酸盐缓冲液为主，以乙腈、甲醇或四氢氟喃为调节剂。由于氨基酸衍生物仍保留着两性化合物的特点，除改变调节剂之外，还可通过调节缓冲液pH值、离子强度、柱温等使之达到理想的分离。当然，不同衍生物所选用的柱型、流动相以及氨基酸的洗脱时间和顺序不尽相同。柱前衍生反相高效液相色谱法可用于分析蛋白质水解液、生理体液和食品等样品中的氨基酸。当与质谱技术结合时，采用电离喷雾质谱（ESI-MS）或电离喷雾串联质谱（ESI-MS/MS）联用技术方式，借助计算机的联机检索，可以实现高通量筛选和鉴定蛋白质混合体系。目前，，蛋白质组研究的高效液相色谱-质谱联用的方式有一维色谱-质谱联用技术、多维色谱-质谱联用技术以及亲和色谱-质谱联用技术等。一维色谱-质谱技术仅能分析一些不太复杂的蛋白质体系，而对复杂的多肽混合物常不能满足分离的要求。多维色谱分离的方法在某种程度上满足了对复杂蛋白质混合分离鉴定的要求。,,,3.3 两种氨基酸直接分析技术大多数氨基酸不具备生色团，因此无法利用分光光度法直接检测，故需采用化学衍生技术，使之生成可在紫外或可见光区有吸收的化合物，或者采用荧光法检测。但对于分析工作者来讲，尤其是在新化合物研制的过程中，面对多种未知的降解物，如采

我最近在做拉曼检测，请问一下氨基酸的拉曼光谱容易测得吗？氨基酸的水溶液可以测得拉曼光谱吗？

用氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量，配制不同pH的柠檬酸钠缓冲液的作用是什么？是淋洗不同的氨基酸？如果用732阳离子树脂吸附氨基酸，用氨水来淋洗，测定氨基酸总量，原理上可行吗？谢谢！

酱油氨基酸在灭菌时候取样，测得氨基酸1.14，然后经过灭菌，过滤后，装瓶.过了几天再次测得氨基酸1.02（两次测定的时间差在一个星期左右），而且酱油总酸升高，这是怎么没事