外泌体中纯化分离检测方案(离心机)

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Techcomp天美Application 使用日立超速离心机进行外泌体(Exosome)的分离纯化 什么是外泌体(Exosome)? 一外泌体是细胞衍生的膜泡，!呈现于生物体液，唾液，血液，尿，羊水，等体液内.外泌体是由脂质双层形成，从细胞分泌出来，大小在20-200纳米之间.外泌体在细胞内的信号传导中起到了重要的作用，故很多研究人员认为外泌体可以用于预诊断，治疗，及作为生物标记物. 本文将介绍使用日立超速离心机对外泌体进行纯化分离 步骤1：从唾液，i，血液，尿液，等样品收集外泌体混合物，并进行清洗. 步骤2：使用用克沙醇(iodixanol) 进行密度梯度离心来纯化外泌体. 浓缩的外泌体溶液 5%碘克沙醇 10%碘克沙醇 20%碘克沙醇 40%碘克沙醒+ 离心条件+ 日立超速离心机CP-NX系列+ 日立 P32ST水平转头+ 24，000rpm(100，000×g)+ 18小时、4℃+ 日立 P32ST 水平转头 日立超速高心机 CP-NX+ (上加载型) 天美(中国)科学仪器有限公司 北京市朝阳区天畅园7号楼(100107) t010-64010651 010-64060202 techcomp@techcomp.cn w www.techcomp.cn Techcomp天美 步骤3：分馏收集溶液并进行密度测试离心分离后，每2ml溶液进行分布收集成17个样品管，并对每管溶液进行屈光计检测. 根据每管溶液的屈光值进行密度计算. 步骤4：确定含有外泌体的收集管 图1.显示离心后每管溶液计算的密度值+ 外泌体应该存在于密度在1.15~1.19 g/cm3 的收集管，所以可以大概确定收集管No.12及 No. 13是纯化的外泌体.+ 图2：使用iodixanol 后离心的状态 步骤5：清洗外泌体并保存. 使用 PBS 清洗外泌体并保存在4℃.(如果保存时间长，可以存储在-80℃) Reference ： “Exosome Analysis Master Lesson"published from YODOSHA CO.， LTD. in 2014+如有任何问题，请随时联系天美(中国)科学仪器有限公司 外泌体是细胞衍生的膜泡，呈现于生物体液, 唾液, 血液, 尿, 羊水, 等体液内. 外泌体是由脂质双层形成，从细胞分泌出来，大小在20 - 200 纳米之间. 外泌体在细胞内的信号传导中起到了重要的作用, 故很多研究人员认为外泌体可以用于预诊断, 治疗, 及作为生物标记物.本文将介绍使用日立超速离心机对外泌体进行纯化分离。