乳酸中醋酸检测方案(液相色谱仪)

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HitachiHigh-TechLC Application Sheet在乳酸发酵监测中的应用AS/LC-027 糖质在厌氧状态下，通过乳酸菌加以分解，作为分解产物产生乳酸的反应被称之为乳酸发酵。乳酸饮料及酸奶、腌菜等在生产中利用了乳酸发酵，所以含有乳酸成分。此次，尝试使用通用性较高的UV检测系统，对乳酸发酵过程中乳酸的生成进行了监测。另外，在对乳酸的生成进行监测的同时，还对TCA循环中有无柠檬酸、苹果酸、琥珀酸的蓄积进行了确认。结果显示，初始培养基中所含的有机酸成分在乳酸发酵过程中并未增加。 在有机酸分析中，通常使用有机酸分析专用柱(离子排除模式)，而此次我们将介绍乳酸出峰时间更早、价格更低的反相色谱柱的测定例。本次使用的是适用于有机酸等极性较高的化合物测定的LaChrom C18-AQ色谱柱(低碳ODS)。 ◆LaChrom C18-AQ色谱柱的概要◆ 低碳ODS柱：该ODS柱通过抑制硅胶表面的疏水性，使得即使使用100%的水系溶液也能够实现稳定的分析。在糖、核酸以及有机酸等高极性化合物的分离中具有很好的效果。另外，由于是反相柱，也可以使用有机溶剂进行清洗。 ◆乳酸发酵的概要· ■有机酸标准样品测定例(反相模式) 成分名称 苹果酸 乳酸 醋酸 柠檬酸 琥珀酸 浓度(mg/L) 50 500 250 250 50 <测定条件> 色谱柱 ： LaChrom C18-AQ(5pm) 4.6 mm I.D.x250 mm 流动相 ：1mmol/LHSO4， 8 mmol/LNaSO4 流速 ：1.0 mL/min 柱温 ：25℃ 检测波长 ： UV 210 nm 进样量 ：20pL 【有机酸标准样品的测定例】 乳酸在40~2000 mg/L的范围内，决定系数1.000，得到了良好的线性。 培养样品测定例(培养时间及乳酸监测) 【培养时间与有机酸的经时变化】 <培养样品的制备> 50 g/L葡萄糖/10mLMRS培养基 灭菌(高压蒸气灭菌)←接种乳酸菌(无氧状态) 培养(30℃) 上清液 ←以超纯水稀释10倍 过滤FPore Size 0.45 pm 分析样品(20uL) 20000- 培养时间(小时) 【培养时间与有机酸的浓度变化】 主要仪器配置：：(Chromaster5110 泵、5210自动进样器(带温控装置)、5310柱温箱、5410UV检测器 @Hitachi High-Technologies CorporationPage. 注意：本资料所示数据仅为测定例用数据而非可保证仪器性能的数据。Page.(@DHitachi High-Technologies Corporation 糖质在厌氧状态下，通过乳酸菌加以分解，作为分解产物产生乳酸的反应被称之为乳酸发酵。乳酸饮料及酸奶等在生产中利用乳酸发酵，所以含有乳酸成分。本实验使用通用型UV检测器，监测发酵过程中乳酸的生成。同时还对TCA循环中有无柠檬酸、苹果酸、琥珀酸进行了确认。