应用于糖类化合物的分离纯化

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快速液相制备色谱系统搭配ELSD检测器应用于糖类化合物的分离纯化摘要糖类化合物是由碳、氢、氧三元素组成的有机物。从化学结构上看，糖类是多羟基醛酮以及它们的多聚体，在化学式的表现上类似于“碳”与“水”的聚合，故又称碳水化合物，根据其结构不同，可分为单糖、双糖和多糖。糖类化合物具有众多的用途，涵盖了食品、医药、能源、工业等多个领域。它们不仅在食品工业中用于调味和增加口感，还在医药领域用于药物生产和治疗疾病，同时也是能源和工业生产中的重要原料。糖类化合物的广泛应用为人类的生活带来了便利，也推动了相关产业的发展。近年来糖类化合物的研究有两个方向： ①化学家致力于糖类化合物的人工合成，这主要是为社会发展作长远打算，使人类食物将有可能逐步摆脱对农业的依赖。②研究糖类化合物与生命的关系，因为在生命体内糖与蛋白质、核酸常不可分离。糖类化合物分离纯化检测由于缺乏发色基团，导致其无紫外吸收或紫外吸收很弱，常规快速液相制备色谱系统通常只配备紫外 (UV) 检测器，不能检测缺乏发色基团的目标化合物。而蒸发光散射检测器（Evaporative Light-scattering Detector）是通用型检测器，可以检测挥发性低于流动相的化合物，特别是没有紫外吸收的有机物质。本案例主要探讨使用SepaBean machine快速液相制备色谱系统搭配ELSD检测器（蒸发光散射检测器）对糖类化合物进行制备纯化，为糖类化合物的制备纯化提供了一种可行的方案。实验部分样品来自某高校课题组，无TLC信息。样品及杂质均无紫外吸收，但根据文献描述，点板比例大概为2：1，样品易溶于乙酸乙酯。实验方案对样品进行Flash制备纯化的实验参数设置如表1所示。                                    表1. Flash制备实验参数仪器SepaBean machine U200色谱柱E系列正相分离柱（不定形，40-60μm，60Å，订货号：E-8101-0004）检测波长254nm；280nm；ELSD（增益值:Auto）上样量200mg流动相石油醚/乙酸乙酯流速15mL/min洗脱梯度柱体积/CV溶剂B/%0040100结果与讨论:图1：分离纯化色谱图样品量200mg用乙酸乙酯溶解硅胶拌样，采用干法上样，选择先用4g规格的E-8101分离柱进行分离纯化，得到的分离纯化谱图如上图所示。根据分离纯化谱图可以看出杂质与目标物已达到基线分离，分离纯化效果较好，由于组分没有发色基团，因此紫外吸收较弱，采用外接ELSD检测器进行辅助检测，ELSD检测信号较高，同时可以看出紫外吸收和ELSD的同步性基本一致，不会造成收集组分的损失，满足客户需求，从而为糖类化合物的分离纯化方案研究提供了一种可行的方案。关于产品SepaFlash E系列色谱柱（E系列） ▶ SepaFlash E系列快速分离柱采用高质量硅胶装填，性价比优越，纯化首选；▶全新柱管设计，更经济环保；▶ 具有标准的Luer-Lok进液口和Luer-Slip出液口，兼容各种快速液相制备色谱系统；▶ 自动化机械灌装，分离度高，重现性好；▶ 分离柱柱体采用专利技术设计，耐压好，无漏液；高质量无定形硅胶，粒径40-63µm孔径60Å（比表面积500 m²/g，pH 6.5–7.5，上样量0.1–10%）产品编码柱尺寸上样量流速(ml/min)柱长度(mm)柱内径(mm)最大工作压力(psi/bar)包装规格        （根/盒）小包装大包装E-8101-00044 g4 mg–0.4 g15–40105.812.4300/20.736120E-8101-001212 g12 mg–1.2 g30–60124.521.2300/20.724108E-8101-002525 g25 mg–2.5 g30–60172.721.3300/20.72080E-8101-004040 g40 mg–4.0 g40–70176.026.7300/20.71560E-8101-008080 g80 mg–8.0 g50–100248.530.9250/17.21020E-8101-0120120 g120 mg–12 g60–150261.537.2250/17.2816E-8101-0220220 g220 mg–22 g80–220215.959.4200/13.848E-8101-0330330 g330 mg–33 g80–220280.359.8200/13.836E-8101-0800800 g800 mg–80 g100–300382.978.2100/6.93—E-8101-16001600 g1.6 g–160 g200–500432.4103.8100/6.92—E-8101-30003000 g3 g–300 g200–500509.5127.5100/6.91—E-8101-50005 kg5 g–500 g200–500770127.5100/6.91—E-8101-010K10 kg10 g–1 kg300-1000850172.5100/6.91—