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流式细胞分析技术

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流式细胞术作为当代最先进的细胞定量分析技术之一,其工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数。默克密理博旗下Guava微毛细管细胞分析平台系列,可在短时间内迅速完成上百个样本的检测;在精确完成细胞活力计数的同时,还可实现细胞凋亡检测、分期;抗体工程细胞株的高效筛选;单抗生物学活性如EC50、ED50指标测定等功能。在高通量检测的基础上,维护成本几乎为零,大大提高了企业的生产效率,降低了生产风险。为高端现代化企业研发、生产、质控提供了全套解决方案!

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>激光检测体系更精确,且流体上样系统可大大降低背景噪音及样本间的相互干扰 流式细胞分析技术 在抗体研发生产中的解决方案 常青 Ph.D MM生命科学部高级产品科学家 2015-3-16 原理: 在细胞分子水平上通过单克隆抗体或特异性荧光染料对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。 特点: 1.可定性,也可定量 2.能同时从一个细胞中测得多个参数 3.灵敏度高:能区分不同样本间的微弱差异 4.速度快:可高速分析上万个细胞 5.可进行高通量检测 细胞株活性状态检测 单抗活性分析评价 抗体工程细胞株的高效筛选 保证数据精确性完整性 日常操作、维护简单(Guava) 细胞株活性状态检测 细胞株活性状态检测 Guava预设众多的细胞分析方案 ·细胞绝对计数和活力分析 (ViaCount) ·早期凋亡AnnexinV ·中期凋亡Multi-Caspase ·晚期凋亡 Tunel ·线粒体膜电位 ·细胞周期 Cell Cycle •细胞毒实验 细胞自噬 细胞增殖 ·预设检测模板 ·无需补偿调节 •数据获取一触即得 M ·内置分析模板 •批处理多数据平行比较 测定方法:1梯度稀释单抗,2固定浓度的靶细胞结合,34 加入抗人FITC标记的检测抗体,与单抗结合, 流式细胞仪读取单个肿瘤细胞平均荧光强度,作为判断抗体结合能力的依据。 计算方式: 【ED50:样品和标准品的半效浓度】 样品相对结合活性=标三品ED50-样品ED50×100% Guava解决方案: 1.导入预设的ED50实验模板,获取每组梯度浓度单抗结合后的肿瘤细胞的荧光强度,实验结果可以通过HeatMap功能,通过颜色的变化,直接显示。 (图1) 4-TCS1-E HeatMapIC-50 (图2) 2.软件自动计算ED50数值并生成ED50曲线,,所有的数据支持Excel 格式导出。 (图2) 生物学活性:表示产品特定生物学效应的定量测定,是反映抗体生物学性质的重要方法。主要包括细胞毒试验、免疫沉淀、体外细胞增殖差异测定等方法。 Guava解决方案: 1.检测 自动数据分析 ·预殳的细胞活力,增殖分析模块仅需5分钟完成孵育,上机直接检测, 35min/96样本 •将数据直接导入IC50的模板, ·软件自动生成IC50曲线, ·所有的数据支持Execl 格式导出。 1.自动化高通样本检测功能 2.支持大数据量分析 具有HeatMap功能,最高支持96X6个数据同时分析,通过颜色的深度,反应细胞多个相关参数的强度。 10ul血液样本即可完成检测,可实现一机多能,单样本多数据检测 FDA发布的《21 CFR Part 11》认证,是指“联邦法规21章第11款”,主要规定内容涉及电子记录和电子签名。 ● 食品、医药制造行业及化妆品行业多遵照此标准。 ● 只有遵照此标准,其厂商生产的产品才可以正常销往国外市场, 并且遵照此标准保留的数据才可以作为通过检验或者今后追溯的有效数据来源。 11.10(f) 所有机器操作的任何更改都必须经密码保护,配有唯一的ID和密码 数据以PDF/ Excel/FCS 且机器操作的所有的更改都将永久地(不能删除或更改)并通过电子手段(以便将来打印审核记录)保存。 等格式输出 此法规确保了电子数据的有效性和可靠性。 预设开关机清洗程序,一键式操作; 每日废液量小于50ml,处理简便; ·无需特殊耗材; ·减少有害物质对人体和环境的危害 洗液瓶 废液瓶 传统流式仪器废液量约为8000ml/天 Thank you for your attention! Merck Millipore

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默克化工技术(上海)有限公司为您提供《流式细胞分析技术》,该方案主要用于其他中null检测,参考标准《暂无》,《流式细胞分析技术》用到的仪器有guava easyCyte 8 微流式细胞分析仪、guava easyCyte 6-2L 微流式细胞分析仪、guava easyCyte 6HT-2L 微流式细胞分析仪、guava easyCyte 8HT 微流式细胞分析仪。

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