啤酒中双乙酰检测方案(气相色谱仪)

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FSPJLPJ015啤酒双乙测的测定填充柱气相色谱法 F_SP_JL_PJ_015 啤酒 双乙酰的测定 填充柱气相色谱法 1 范围 本方法采用填充柱气相色谱法测定啤酒中双乙酰的含量。 本方法适用于各种类型啤酒中双乙酰含量的测定，结果表示为 mg/L，测定值保留二位小数。 2 原理 试样进入色谱柱时，由于在气液两相中分配系数不同，而使双乙酰、2，3-戊二酮、2，3-己二酮及其他组分得以完全分离。利用电子捕获检测器捕获低能量电子，而使基流下降产生信号，与标准样对照，根据保留时间定性，利用内标法定量。 双乙酰、2，3-戊二酮统称为联二酮，进入色谱柱前不经过加热处理，测得的是游离联二酮；于60℃加热 90min 后，测得的是包括前驱体转化在内的总联二酮。 3 试剂 3.1氯化钠 3.2担体： Chromosorb W (AW-DMS)， 80/100 目。 3..33固定液：聚乙二醇-20M (PEG-20M) 3.4双乙酰储备液， 5g/L 称取双乙酰 0.5g，精确至 0.1mg，用水溶解，并定容至100mL。该溶液在冷藏条件下可稳定1-2个月。 3.5双乙酰标准使用溶液， . g/L 吸取双乙酰储备液. mL， 置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。该溶液需临用时配置。 3.6内标储备液， 5g/L 称取2，3-己二酮0.5g， 精确至0.1mg，用水溶解，并定容至100mL。该溶液在冷藏条件下可稳定1-2个月。 3.77内标使用溶液， . g/L 吸取内标储备液液 mL， 置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。该溶液需临用时配置。3.82，3-戊二酮储备液， 5g/L 称取2，3-戊二酮 0.5g， 精确至 0.1mg，用水溶解，并定容至 100mL。该溶液在冷藏条件下可稳定1-2个月。 3.92，3-戊二酮标准使用溶液， .g/L 吸取 2，3-二二酮储备液.ImL， 置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。该溶液需临用时配置。 4 仪器 4.1气相色谱仪，配有电子捕获检测器(ECD) 4.2高精度恒温水浴箱，控温精度 0.1℃ 4.3顶空样品瓶，20mL 玻璃瓶 4.4上与顶空样品瓶配套的密封垫及铝帽 4.5紧口钳 4.6微量注样器， 50uL 4.7气密性注射器，5mL 5 试样制备 5.1测定游离联二酮的样品制备 取室温下的啤酒样品，缓缓倒入刻度试管中，用吸管去除泡沫及多余酒液至10mL，然后将酒液转入加有 4g 氯化钠的顶空样品瓶中，加入10pL 内标使用溶液(.Og/L)，立即加盖密封垫和铝帽后，用紧口钳压紧，用手摇匀 50S。 5.2测定总联二酮的样品制备 在400mL烧杯中，取啤酒100mL， 轻轻摇动脱气。然后通过两个杯子缓慢注流倒杯5次，使其很好暴气。缓缓倒入刻度试管中，用吸管吸取泡沫及多余酒液至 10mL， 然后将酒液转入加有4g氯化钠的顶空样品瓶中，加入10uL内标使用溶液，立即加盖密封垫和铝帽后，用紧口钳压紧，用手摇匀50S。 于60℃水浴中保温90min。冷却至室温后，轻轻拍打瓶盖使盖残留的液滴滴下。用手摇匀50S。 6 操作步骤 6.1色谱柱的制备 称取 Chromosorb W 本体 15.0g。另称取 1.50g 固定液 PEG20M (准确至1mg，其量相当于担体重量的10%)于另一小烧杯中。量取和担体等体积的无水甲醇，用一定量甲醇将 PEG20M 固定液完全溶解并转移至蒸发皿中，随后用剩余溶剂冲洗小烧杯一同并入蒸发皿，搅匀，然后边搅拌边将担体慢慢倒入，混匀。将蒸发皿置于50℃水浴上，不时搅拌翻动将溶剂蒸发，待蒸发至干时，移至90~95℃烘箱中烘 1h，取出冷至室温后，将此填料装入内径 3mmn33m 已洗净的玻璃柱中。通载气于180℃老老15h. 6.2色谱条件 根据不同仪器，通过试验选择最佳色谱条件，以使各组分的色谱峰获得完全分离。 6.3相对校正因子f值的测定 6.3.1标准溶液的制备 在顶空样品瓶中装入水 10mL 和氯化钠 4g，加入内标使用溶液、双乙乙和2，3-戊二酮标准使用溶液各10uL，立即加盖密封垫和铝帽后，用紧口钳压紧，用手摇匀 50S。该溶液所含三种标准物质的浓度各为 0.05mg/L。若预计扩大线性响应范围联二酮含量0.05mg/L时，应适当调整标准溶液的浓度(如0.10、0.15、0.20 mg/L)， 使其响应值成线性。 6.3.2标准溶液的测定 将按6.3.1制备的标准溶液放入30℃水浴中保温 30min，使气相达到平衡状态。用气密性注射器进样1.0mL，在选择好的色谱条件下进行分析，记录内标、双乙酰和2，3-戊二酮峰的保留时间和峰面积，以峰的保留时间定性，根据峰面积，以三次分析平均值求得相对校正因子f 值。 6.4样品的测定 6.4.1游离联二酮的测定 将按5.1制备的样品放入30℃水浴中保温 30min， 使气相达到平衡状态。在与f值测定的相同条件下进样，记录各组分的峰面积，用内标法计算酒样中游离联二酮的含量。 6.4.2总联二酮的测定 将按5.2制备的样品放入30℃水浴中保温 30min， 使气相达到平衡状态。在与f值测定的相同条件下进样，记录各组分的峰面积，用内标法计算酒样中总联二酮的含量。 7结果计算 按下式计算双乙酰(或2，3-戊二酮)的含量： 式中：f 双乙酰(或2，3-戊二酮)的相对质量校正因子； m； f值测定时，标准溶液中双乙酰(或2，3-戊二酮)的含量， mg/L； m. 内标的含量，nmg/L Ai1 f值测定时双乙酰(或2，3-戊二酮)的峰面积 As1 f值测定时内标的峰面积 x 酒样中双乙酰(或2，3-戊二酮)的含量， mg/L 酒样测定时双乙酰(或2，3-戊二酮)的峰面积A 酒样测定时内标的峰面积 结果保留二位小数。 8 精密度 同一样品两次测定值之差，不得超过平均值的10%。 9 参考文献 [1] GB/T 4928-2001 啤酒分析方法 附录C中C9双乙酰气相色谱法 [2]胡国栋，张晓磊等.啤酒科技，1999，(1)：23-25