松茸粉中提取松茸多糖的研究检测方案(其它常用设备)

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DOI ：10. 13268j. cnki. fbsic.2008.06.002第6期(总第97)中国林副特产Forest By-Product and Speciality in ChinaNo. 6(GSNO. 97Dec 20082008年12月 么宏伟等：微波、超声波萃取技术提取松茸多糖的研究2008年第6期 微波、超声波萃取技术提取松茸多糖的研究 么宏伟，张学义，冯 磊，吴洪军，谢晨阳，赵凤臣 (黑龙江省林副特产研究所，黑龙江省非木质林产品研发重点实验室，黑龙江牡丹江157011) 摘 要：松茸多糖因具有抗肿瘤、增强免疫力、降血脂、抗病毒等生物活性作用，而越来越受到人们的重视，黑龙江林副特产研究所对松茸多糖的提取进行了研究。1)采用微波萃取技术，对微波萃取功率、微波萃取时间、料液比3个因素进行正交试验和分析，确定微波萃取的最佳工艺参数为微波功率660W，萃取时间 45min，料液比1*25；2)采用超声波技术对松茸中水溶性粗多糖提取工艺进行了优化，并用硫酸-蒽酮法测定了松茸多糖的含量，结果表明，在超声功率180W、超声时间 13min，提取温度100℃的条件下进行提取，料液比1*20，多糖提取率最高；3)比较超声和微波萃取松茸多糖的提取率，可知微波萃取方法更加优于超声方法，有更加广阔的应用前景。 关键词：松茸多糖；超声波；微波；萃取 Micro Wave and Ultrasound ExtractionTechnology Polysaccharides of Tricholoma matsutake Yao Hongwei， Zhang Xueyi， Feng Lei. Wu Hongjun， Xie Chenyang. Zhao Fengchen (Heilongjiang Institute of Forest By-product and Speciality， Key laboratory of Forest By-productand speciality， Heilongjiang Mudanjiang 157011) Abstract： Polysaccharide Tricholoma matsutake has the action of anti-tumor， anti-virus ，strengthen immunity and decreasing fat in blood. This paper mainly studied the extraction of Tricholoma matsutake poly-saccharide. 1)Microwave extracting technology was used in the study.Orthogonal test were done and an-alyzed on extraction power， extraction time， material and liquid ratio. The optional technology conditionswere as follow： extraction power was 660W， extraction time was 45 min， material and liquid ratio was 1*25.2)The experiment adopted ultrasound wave technology to improve the method of polysaccharidesextraction from Tricholoma matsutake by water， and its content was determined by colorinetry of sulfuri-cacid anthrone. The results showed that the extraction rate of polysaccharides is max when 180 W ultra-sound power is used for 13 min and extraction temperature was 100℃ material and liquid ratio was 1：20.3) Comparison of microwave extraction and ultrasonic extraction rate of polysaccharide Tricholomamatsutake， we can see microwave extraction method is better than the ultrasound method， there are morewidely used. Key words： Polysaccharides Tricholoma matsutake ；Ultrasonic；Microwave ；Extract. 300mg/L、亚硫酸钠 300mg/L、醋酸锌 250mg/L组成的复合护色液可达到最佳护色效果。 3.2 最佳保脆复配剂和与护色复配剂的最佳比例 乳酸钙100mg/L、氯化钙50mg/L、氯化镁150mg/L组成的复合保脆剂可达到最佳保脆效果。护色剂与保脆剂的最佳配比为12. 3.3)蕨菜净菜加工品耐储存时间 4℃冰箱可冷藏 10d，菌落总数小于3个。 3.4伟制品质量检验 甘肃出入境检验检疫局中心实验室对制品进行了理化、微生物等质量指标的检验，各项指标均符合要求(报告编号WTZ06216)。 ( 参 5 考 文 1 献 ) ( [1 ] 万新，李发建.蕨菜快速护绿、保脆与保鲜试验[J].湖 ) ( 北农业科技，2003(4)：67. ) ( 12] 梁嘉陵.蕨菜的保绿技术初探[J].中国林副特产，1996 (4)：9-10. ) ( 131 李彬.蕨菜护色工艺的研究[J].农牧产品开发，2001 (1)：11-13. ) ( 4 周志，陈根洪，汪兴平.蕨菜护色技术及质量控制研究 [』.食品工业科技，2004(4)：111-112. ) ( 151 高勇，邵尾娇.蕨菜干制过程中的护色与揉搓工艺[J]. 福建农业：2001(3)：14. ) ( [6] 孙汉巨，陈从贵，刘明.蕨菜冷冻干燥的工艺研究|J]. 食品科技，2003(5)：44-46. ) ( 171 车刚，王桂林，李成华，等.蕨菜真空冷冻干燥工艺研究 [J.黑龙江八一农垦大学学报，2004(3)：41. ) ( 作者简介：杨成生(1962一)，男，高级工程师。 ) ( 电话：0931-4683507。 E - mail：csyang259 @163.com ) 前言 松口蘑(俗称松茸)〔 Tricholoma matsutake (S.Itoet Imai)Sing]，是一种共生菌，中文学名松口蘑，属于担子菌门，担子菌纲，伞菌目，口蘑科，口蘑属，是世界上最珍稀名贵的食用菌之一，被称为"蘑菇之王"。又名松蕈(菌谱)、松菇、松蘑、真松茸、老人头、老鹰嘴、包皮菌、青冈菌、合菌、台草菌(本草纲目)、大脚菇、松菌(云南)、鸡丝菌(西藏)，为中国国家二级濒危保护物种山。松茸子实体中等至较大，菌盖直径5~20cm，扁半球形至近平展。菌内肉白色。菌褶白色或稍带乳黄色。菌柄较粗壮，长6~13.5cm，粗1.5~3.5cm。菌环生菌柄的上部。孢子印白色，光滑，宽椭圆形至近球形12。主要分布在日本、朝鲜半岛及我国东北、西南和台湾地区3，其风味独特、口感滑润、富有弹性；食后香气满口，鲜香别具一格；富含蛋白质、脂肪、纤维素、多种氨基酸。能延缓组织器官衰退，改善心血管功能，促进新陈代谢，提高人体抗病能力，抗细胞突变和增长率，增加免疫功能；具有益胃补气、强心补血、健脑益智、理气化痰、驱虫以及治疗糖尿病和抗癌等作用!4。 近年来，关于松茸子实体粗多糖提取方法的研究主要为热水浸提法、酶提法等。热水浸提法提出的主要是胞外多糖，提取率较低。而加入纤维素酶、果胶酶和蛋白酶等酶法提取，有利于胞壁内多糖的溶出，提高多糖提取率，但生产成本高，同时产物分离较困难。本文研究超声波破壁技术和微波萃取方法提取松茸多糖：(1)采用微波处理方法从对微波功率、微波时间、料液比各因素进行研究，确定最佳的工艺；(2)采用超声波技术从超声功率、超声时间和提取温度、料液比对松茸水溶性粗多糖热水浸提提取工艺进行了优化；(3)比较微波和超声方法，对松茸多糖提取率的高低，以及各自的优缺点。 2 材料与方法 2.1 试验材料 2.1.1 原料 经过超微粉碎的松茸粉，由黑龙江省林副特产研究所提供，贮存于干燥器中。 2.1.2 试剂 (1)蒸馏水：分析纯，市售。(2)无水乙醇：分析纯，质量分数99.7%天津市东丽区天大化学试剂厂。(3)丙酮：分析纯，质量分数￥99.5%天津市东丽区天大化学试剂厂。(4)氯仿：分析纯、质量分数99.0%天津市富宇精细化工有限公司。(5)正丁醇：分析纯，质量分数99.0%天津市富宇精细化工有限公司。(6)浓硫酸：分析纯，质量分数95%哈尔滨市新达化工厂。。(7)蒽酮：分析纯，质量分数99.0%天津市科密欧化学试剂开发中心。(8)硫硫： 分析纯，性状：黄色或浅黄色针状结晶，溶于醇、苯和热氢氧化钠溶液，不溶于水，上海化学试剂采购供应五联化工厂。 蒽酮试剂：称取0.2g蒽酮和1g硫脲置于烧杯中，缓慢加入100ml浓硫酸，边加边搅拌，溶解后呈黄色透明溶液，将其贮存于棕色试剂瓶中，现用现配，置冰箱中可存放约2周。 (9)葡萄糖：分析纯，比旋光度[a]20为+52.5~十53.0度，天津市广成化学试剂有限公司。 1mg/L葡萄糖溶液：精确尔取105℃烘干至恒重的葡萄糖0.2g，用水定容至200ml。 2.1.3 仪器设备 SHIMADZU 电子天平：长沙市八方科学仪器有限公司；WP700P21微波炉：格兰仕公司；JY92-IIDN超声波细胞粉粹机：宁波新芝生物科技股份有限公司；H-1650高速台式离心机：长沙湘仪离心机有限公司；冰箱：海尔公司；DK-98-1型真空冷冻干燥装置：天津市泰斯特仪器有限公司；电磁炉：上海奔腾企业有限公司；UV755B紫外分光光度计：上海精密科学仪器有限公司。 2.2 试验方法 2.2.1 松茸多糖提取率及纯度的测定 2.2.1.1 多糖含量的测定方法：蒽酮分光光度法 (1)原理：糖与硫酸反应，脱水生成羟甲基呋喃甲醛，再与蒽酮合成蓝色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓度成正比。本实验的松茸提取液经醇析，冷冻干燥后，获得粗多糖，没有单糖及寡糖等的干扰，因此，用此法可测的纯多糖的含量。 (2)操作方法：a.制作标准曲线 葡萄糖标准溶液：先配成 1g/L 葡萄糖溶液，然后分别吸取1、2、4、6、8、10ml，分别置于100ml 容量瓶中，用水定容至刻度，可得10、20、40、60、80、100mg/L的葡萄糖系列浓度溶液。 吸取上述标准溶液1ml，分别置于25ml比色管中，沿壁加入5ml蒽酮试剂，混匀，盖上塞，在沸水浴中加热10min，取出于流动水冷却 20min 后，在 620nm 波长下，以试剂空白试剂空白调零，测A620。 标准曲线如下图2-1： 图2-1 葡萄糖标准曲线 b.测定粗多糖中的纯多糖含量 将由1g松茸所提取的经真空冷冻干燥至恒重的粗多糖，研磨，用少量蒸馏水溶解，并用蒸馏水定容到100ml。取1ml稀释10倍，则吸光值A620+代入y=0.0048x，最终计算纯多糖的量. 2.2.1.2 松茸多糖提取率的测定 将不同条件微波萃取得到的松茸萃取液经过滤、去蛋白质、醇析、真空冷冻干燥，得水溶性松茸多糖粗制品。按下式计算松茸多糖提取率： 多糖提取率=(多糖质量/提取前样品质量)×100% 2.2.1.3 松茸多糖纯度测定 纯度=(纯多糖质量/粗多糖质量)×100% 2.2.2 微波萃取松茸多糖 2.2.2.1 提取工艺 松茸粉→加入蒸馏水→搅拌混匀→微波处理过滤→脱色→去蛋白质→乙醇沉析→4℃静置12h→离心(4000 r/min， 15 min)→沉淀用适量乙醇洗涤2遍，再用丙酮洗涤→冰箱中冷冻→真空冷冻干燥→松茸粗多糖→检测 2.2.2.2 操作方法 (1)称量：利用电子天平称取1.0g经超微粉碎的松茸粉，置于500 ml烧杯中。每次做3个平行样.(2)加入蒸馏水：按一定的料液比加入一定量的蒸馏水，并搅拌混匀。(3)微波处理：按各种设定条件(提取时间、微波功率、液料比)进行微波提取。微波提取过程为间歇微微处理，每次 2min，中间停歇，补加损失的水分，使提取液体积保持相对恒定。(4)过滤：将微波处理液过滤。(5)脱色：加入3倍体积10%过氧化氢于80℃水浴加热脱色，温度不宜过高，否则会引起多糖的降解。(6)去蛋白质：将脱色液倒入分液漏斗中，滤液与 Sevag 试剂(氯仿与正丁醇以4：1体积比混合)以3*1的体积比混合，与分液漏斗中震荡30min，静止 3h分层，下层为白色蛋白质，分液除去。反复萃取2~3次，至游离蛋白质完全除去。(7)乙醇沉析：加入5倍体积的无水乙醇，使乙醇终浓度体积分数80%左右，4℃冰箱中静置12h.(8)离心、洗涤：于离心机中4000r/min，离心15 min. 收集沉淀，依次用无水乙醇、丙酮洗涤沉淀，将纯溶性杂质及脂类除去。(9)真空冷冻干燥、检测：将沉淀转移到已恒重的平皿中，放在冰箱中冻藏，再真空冷冻干燥，得松茸粗多糖。用蒸馏水将多糖溶解，并定容到一定的体积，采用蒽酮-硫酸法测多糖的含量，即可知纯多糖的量。 2.2.2.3 微波萃取松茸多糖条件的初步筛选 (1)微波处理时间对多糖得率影响。设定料液比为1：25，微波功率为 660W，微波处理时间分别为30、 40、50、60min.按照2.2.2.2的操作步骤进行试验，选取多糖提取率较高的微波处理时间。(2)微波功率对多糖得率影响。设定料液比为1：25，微波处理时间为50min， 微波的功率依次为480、540、600、660、700W，按照2.2.2.2的操作步骤进行试验，可得提取率较高的微波功率。(3)料液比对多糖得率的影响。设定微波功率为660W， 微波处理时间为 50min，料液比依次为1*5、1.1：15、125、1‘35.按照2.2.2.2的操作步骤进行试验，可筛选出提取率较高的料液比。 2.2.2.4 微波正交试验设计。影响微波萃取的主要因素为微波功率、萃取时间、料液比，本试验以多糖提取率为考察指标，由上述的单因素试验，初步筛选出各单因素的最佳工艺范围，并在各因素的较好水平左右选取2个水平，利用Ly(3)正交表筛选最佳微波萃取条件、因素及水平。 由单因素试验选择微波萃取松茸多糖正交试验的因素及水平如表2-1： 表2-1 微波萃取Lg(3)正交试验的因素和水平 因 素 水平 A B C 料液比 萃取功率/W 萃取时间/min 1 120 700 45 2 1：25 660 50 3 1*30 600 55 2.2.3 超声波优化松茸多糖的提取 2.2.3.1 提取工艺 松茸粉→加入蒸馏水→搅拌混匀→水煮1.5h→超声→水煮1.5h过滤→脱色→去蛋白质→乙醇沉析→4℃静置12h→离心(4000 r/min， 15 min)→沉淀用适量乙醇洗涤2遍，再用丙酮洗涤→冰箱中冷冻→真空冷冻干燥→松茸粗多糖→检测 2.2.3.2 操作方法。其基本操作与2.2.2.2大致相同，区别如下： (1)水煮：将水浴锅设置不同温度，对松茸多糖进行冷凝回流提取。 (2)超声：水水提提液转移到离心管中，按料液比定容至相应的体积。设置超声的功率、时间、间歇/工作时间为2s，开始超声。 2.2.3.3 超声提取松茸多糖条件的初步筛选 (1)超声时间对多糖提取率的影响。设定超声功率为200W，料液比为1：25，水提取温度为100℃超声时间选取10、20、30min.按照2.2.3.2的操作步骤进行试验，初步筛选最佳的超声时间范围。(2)超声功率对多糖提取率的影响。设定料液比为1：25，水提取温度为100℃超声时间为 10min.超声功率依次为120、160、200、240W，按照2.2.3.2的操作步骤进行试 验，初步筛选最佳的超声功率范围。。(3)料液比对多糖提取率的影响。设定超声功率为160W，水提取温度为100℃，超声时间为 10min，料液比依次为1：5、1：15、125、1*35，按照2.2.3.2的操作步骤进行试验，可筛选出提取率较高的料液比。(4)提取温度对多糖得率的影响。设定超声功率为160W，超声时间为10min，料液比依次为1*15.提取温度依次为60、80、100℃安照2.2.3.2的操作步骤进行试验，可筛选出提取率较高的提取温度。 2.2.3.4 超声正交试验设计 影响超声浸提的主要因素为超声功率、超声时间、料液比、提取温度，本试验以多糖提取率为考察指标，由上述的单因素试验，初步筛选出个单因素的最佳工艺范围，并在各因素的较好水平左右选取两个水平，利用 L(3)正交表筛选最佳超声条件、因素及水平。由上述的单因素试验，筛选出各因素好水平.并在其左右各选择两个水平进行正交试验，筛选条件及水平如下表2-2所示： 表2-2 超声提取Lg(3)正交试验的因素和水平 因 素 水平 A B C D 料液比 超声时间/min 超声功率/W 提取温度/℃ 1 120 7 140 90 2 115 10 160 95 3 1‘10 13 180 100 3结果与分析 3.1 松茸多糖微波萃取条件的筛选结果 微波提取松茸多糖工艺的单因素优化主要包括：提取时间、微波功率、液料比。针对这几个因素，分别在保持其它因素相同的条件下进行单因素实验，考察各因素对松茸纯多糖得率的影响。 3.1.1微波处理时间对多糖得率影响 按不同的微波处理时间(分别为30、40、50、60min)、液料比为25‘1、660W 的条件辅助提取多糖，纯多糖的得率结果依次为8.01%、10.00%、10.58%、10.42%。依此结果作图3-1如下。 图3-1 微波处理时间对多糖得率影响 由图3-1可知，在开始微波处理的50 min 内，提取时间对松茸纯多糖得率有较明显影响，纯多糖得率随提取时间的延长而提高。如果微波处理时间过短，则 物料中微波能积蓄少，不足以使物料中水分产生强烈汽化反应，细胞内压力小，膨胀爆破效果差，因此细胞破壁率低，目的物萃取率亦较低；微波处理时间过长，不但会由于微波能的过剩，造成物料的焦糊和变性，影响萃取的正常进行，而且促进非多糖类物质的溶出，使产品的纯度降低，表现为产品得率降低。本研究微波处理时间选择50 min. 3.1.2 微波处理功率对多糖得率影响 按不同的微波功率(依次为480、540、600、660、700W)、处理时间为50min、液料质量比为251的条件辅助提取多糖并计算纯多糖的得率，结果依次为8.92%、9.96%、10.20%、10.58%、10.04%。依此结果作图3-2如下： 图3-2 微波处理功率对多糖得率影响 由图3-2可知，当微波功率在660W 以下时，纯多糖得率随微波功率的增加而不断增加，但微波功率为540W时，增加速度明显减缓，并在微波功率为 660W时达到最大值。如果微波功率过低，则微波振荡能较小，不足以产生破壁效应，导致萃取率下降。本研究中微波功率为660W 时萃取效果最好，继续增大微波功率，提取率没有增加，反而使物料发生焦糊，被处理成分发生严重变性，对萃取介质的渗入造成较大的阻碍，导致有效成分萃取率下降。综合各种利弊，选660W较适。 3.1.3 液料比对多糖得率影响 按不同的液料比(依次为1*5、1：15、125、135)，处理时间为50 min， 微波功率为 660W 的条件辅助提取多糖并计算纯多糖的得率，结果依次为8.99%、9.98%、10.58%、10.02%。依此结果作图2-3如下： 由图3-3可知，随着液料比的加大，松茸纯多糖得率不断提高，当料液质量比达到1*25后.多糖得率增速减缓。萃取时适当的固液比可以提高多糖的溶出 率，固液比过小，则溶剂量过少，造成萃取体系渗透压过高，阻碍多糖的进一步溶出。固液比过大，会增加处理量及能量吸收，在一定的微波功率和萃取时间下萃取效果减弱。本研究中料液比为1*25时萃取效果最好。 3.1.4 正交试验结果 由单因素试验结果，选择微波萃取松茸多糖正交试验的因素及水平如表3-1： 表3-1 微波萃取 Lg(3)正交试验的因素和水平 因 素 水 平 A B C 料液比 萃取功率/W 萃取时间/min 1：20 700 125 660 1：30 600 不同提取时间、微波功率、液料比对松茸纯多糖得率影响的正交试验结果见表3-2。 表3-2 微波萃取Lg(3)正交试验结果 试样号 因 素 与 水 平 ——提取率/% A B C 2 1(120) 1(700) ](45min) 10.33 2(660) 2(50min) 11.13 3(600) 3(55min) 10.50 2(1：25) 2 10.75 2 3 11.17 6 3 10.21 3(1：30) 1 3 10.71 2 11.25 9 3 2 10.45 k 10.65 10.60 10.60 k? 10.71 11.18 10.78 k3 10.80 10.39 10.79 R 0.15 0.79 0.19 由表3-2中R值可知：各因素对多糖提取率的影响程度强弱次序为B>C>A， 即微波萃取功率影响最大，其次是微波萃取时间，料液比影响最小。因为A因素对提取率影响最小，且A2、As无显著性差异，为降低萃取液浓缩能耗，本研究采用次要水平A2，因此最佳微波萃取条件为A2BC，即微波萃取功率为660W，微波萃取时间为 45min，料液比为125，按此工艺进行萃取，松茸多糖提取率高达11.25%。 将所得得真空冷冻干燥粗制品 0.1125g，研磨，用蒸馏水溶解，定容到100ml。取1ml稀释10倍，测吸光值，A620为0.490，代入y=0.0048x，最终计算纯多糖为102.08mg，纯度达90.74%。 3.2 超声波优化松茸多糖提取条件的筛选结果 超声波优化松茸多糖提取工艺的优化主要包括：超声时间、超声功率、提取温度、液料比。针对这几个因素，分别在保持其它因素相同的条件下进行单因素实验，考察各因素对松茸纯多糖得率的影响。确定松 茸水溶性粗多糖提取中较优的超声功率和超声时间范围，料液比、水浸提温度。 3.2.1 超声时间对多糖提取率的影响 超声功率为200W，料液比为1*25，水提取温度为1000℃超声时间 10、20、30 min， 提取率依次为9.87%、9.58%、9.01%。依此结果作图3-4如下： 图3-44超声时间对多糖提取率的影响 由图3-4可知，随超声时间的延长，多糖的提取率反而降低。因长时间工作会使液体过热，使得多糖分子在超声波的剪切作用下发生破坏和降解。因此，初步筛选超声时间10min。 3.2.2 超声功率对多糖提取率的影响 料液比为1*25，水提取温度为100℃超声时间为10min， 超声功率依次为120、160、200、240W，提取率依次为10.42%、10.98%、9.87%、9.52%。依此结果作图3-5如下： 图3-5超声功率对多糖提取率的影响 由图3-5可知，随超声功率加大，提取率加大，当超过一定限度，提取率有所降低。因超声波功率提高时，水的循环加速，传质被加强，扩散、溶解速度加快，同时，超声波产生的强烈振动引起细胞内部结构的变化，使松茸多糖由细胞转移到溶液中，所以，一定范围内提高功率可以提高多糖的提取率。当超声波功率超过160W 时，可能因为超声波的剧烈震荡使多糖降解，从而使得多糖的提取得率开始下降。因此，初步筛选超声超声功率160W。 3.2.3 料液比对多糖提取率的影响 超声功率为160W， 水提取温度为100℃，超声时间为 10min，料液比依次为15、、115、1：25、1·35.提取率依次为10.89%、11.03%、10.98%、10.82%依此结果作图3-6如下： 图3-6 料液比对多糖提取率的影响 由图3-6可知，随提取液增多，提取率有增加的趋势，当提取液过多时，提取率有所下降。因为提取液过少时，提取不充分，使得多糖提取率过低；提取液太多时，超声波辐射被溶剂大量吸收，而不能完全作用于物料，从而影响多糖得率。而且溶液太多会增加后续工艺中提取液醇沉中的乙醇用量。因此初步选择料液比为115. 3.2.4 提取温度对多糖得率的影响 超声功率为160W，超声时间为10min，料液比依次为1*15，提取温度依次为 60、80、100℃，多糖提取率分别为8.59%9.01%、11.03%。依此结果作图3-7如下： 图3-7提取温度对多糖得率的影响 由图3-7可知，随提取温度的升高，多糖的提取率增加。初步筛选的提取温度为100℃。 3.2.5 正交试验结果 由上述的单因素试验，筛选出各因素好水平，并在其左右各选择两个水平进行正交试验，筛选条件及水平如下表3-3所示： 表3-3 超声提取Lg(3)正交试验的因素和水平 因 素 水平 A B C D 料液比 超声时间/min 超声功率/W 提取温度/℃ 1：20 7 140 2 115 160 3 1：10 180 100 正交试验结果如下表3-4所示： 由表3-4中R值可知：各因素对多糖提取率的影响程度强弱次序为B>DC>A，即超声时间影响最大，其次是水浸提的温度，然后是超声的功率，料液比影响最小。因此最佳超声辅助提取条件为A牛B：C3D，即超声功率为180W，提取温度100℃，超声时间为 13min，料液比为1：20，按此工艺进行提取，松茸多糖提取率高达11.13%纯度达90.28%。 表34 超声提取L(3*)正交试验结果 试样号· 因 素 与 水 平 提取 A B C D /% 1(1：20) 1(7min) 1(140W) 1(90℃) 10.341 2 2(10min) 2(160W) 2(95℃) 10.60 3 3(13min) 3(180W) 3(100℃) 11.13 4 2(1：15) 2 3 10.31 2 2 3 10.52 6 2 3 10.64 3(110) 3 10.19 8 3 2 11.08 2 10.41 10.69 10.28 10.69 10.42 10.49 10.74 10.44 10.48 10.56 10.73 10.62 10.84 0.20 0.46 0.25 0.42 3.3 微波与超声方法比较 微波及超声辅助浸提松茸多糖，是近几年研究的比较多的方法，打破了传统水浸提方法浸提时间长、提取率低的缺点，使松茸多糖的提取研究上了一个新的台阶。微波萃取与超声提取松茸多糖的提取率大小相差不大，微波萃取的方法更高一些，但此法耗电量较大，微波功率稍高，易出现焦糊状态，破坏松茸多糖。超声方法，将细胞壁破碎，使松茸胞内多糖被浸提到提取剂中，不会受到破坏。 4 结论 4.1 在提取时间、微波功率、液料比几个主要影响因素的单因素实验基础上，采用正交实验法对微波辅助提取松茸多糖工艺条件进行了优化，其最佳提取条件为：提取时间45 min、微波功率660W、液料质量比为25‘1，此时松茸粗多糖得率为11.25%纯度90.74% 4.2对超声时间、超声功率、料液比、水浸提温度进行单因素试验，初步确定最佳工艺的条件范围，再通过正交试验确定最佳工艺，即超声功率为中高火，提取温度100℃，超声时间为 13min，料液比为1：20，松茸多糖提取率高达11.13%纯度达90.28%. 4.3微波萃取松茸多糖的提取率比超声方法稍高，大约高出0.12%，且提取的松茸多糖纯度也比较高。 ( 参 考 文 献 ) ( [1] 弓明钦、陈羽，王凤珍.等.松茸[M].昆明：云南科技出 版社，1999：129. ) ( [21 高辉，塔莉，孙希卓.松茸研究进展[J].吉林蔬菜，2008 (3). ) ( 3] 袁天凤，段彬，邱道持，等.松茸的地理分布与生态研究 [J.中国食用菌，2006，25(4)：14-17. ) ( [4] 傅禄敏，李玉花.松口蘑的研究特点[J].食用菌学报， 2003，10(3)：49-55. )    微波与超声辅助浸提松茸多糖，是近几年研究比较多的方法，打破了传统水浸提方法浸提时间长、提取率低的缺点。使松茸多糖的提取研究上了一个新的台阶。微波萃取与超声提取松茸多糖的提取率大小相差不大，微波萃取的方法更高一些，但此法耗电量较大，微波功率稍高，易出现焦糊状态，破坏松茸多糖。超声方法，将细胞壁破碎，使松茸胞内多糖被浸提到提取剂中，不会受到破坏。