饮料中γ-羟基丁酸及其前体γ-丁内酯和1,4-丁二醇检测方案(液质联用仪)

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SSL-CA14-679Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-337 上海市徐汇区宜州路180号华鑫天地二期C801栋 咨询电话：021-34193996http：//www.shimadzu.com.cn LCMS-8045测定疑似毒品饮料中y-羟基丁酸及其前体y-丁内酯和1，4-·丁二醇含 量 LCMSMS-337 摘要：本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪 LC-30A 和三重四极杆质谱仪 LCMS-8045 联用测定疑似毒品饮料中y-羟基丁酸及其前体y-丁内酯和1，4-丁二醇含量的方法。该方法在2 min 内完成分析，线性良好，不同浓度标准样品平行测试6次，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在 0.26~0.48%和0.70~2.31%之间，仪器精密度良好。样品加标回收率在92.6~104.3%.该方法具有分析速度快、结果准确的优势，可用于饮料中y-羟基丁酸及其前体y-丁内酯和1，4-丁二醇含量的检测。 关键词：三重四极杆质谱饮料y-羟基丁酸Y-丁内酯1，4-丁二醇 近期，有媒体爆料，某些打着功能饮料的旗号，在KTV 等娱乐场所销售的代酒精饮料中被检测出高浓度的y-羟基丁酸和y-丁内酯。其中，y-羟基丁酸 (gamma-hydroxybutyric acid， GHB) 在我国是被列为一类精神药物进行严格管控的，滥用会造成暂时性记忆丧失、恶心、呕吐、头痛、反射作用丧失，甚至很快快去意识、昏迷及死亡，与酒精并用更会加剧其危险性。而y-丁内酯(gammabutyrolactone， GBL)和1，4-丁二醇(1， 4-butanediol， 1， 4-BD)是 GHB 的前体物质，两者在人 体内均可很快的代谢为 GHB。 鉴于此，准确检测饮料中y-羟基丁酸及其前体物质就显得非常必要。传统的检测方法多借助 GCMS来完成，其需要将目标物衍生后再进样分析。而本文利用岛津LCMS-8045，建立了快速准确检测饮料中y-羟基丁酸及其前体物质含量的方法。该方法前处理简单，不需要经过衍生，样品稀释过滤后即可进样分析，且分析速度快，准确性好，适合饮料中此类物质的定量检测。 图11目标物结构式(左： GHB，中：GBL，右：1，4-BD) 实验部分 1.1仪器 本实验使用岛津超高效液相色谱仪 LC-30A与三重四极杆质谱仪LCMS-8045联用系统。具体配置为 LC-30ADx2输液泵， DGU-20A，在线脱气机， SIL-20AC 自动进样器， CTO-20AC柱温箱， CBM-20A 系统控制器， LCMS-8045三重四极杆质谱仪， LabSolutions Ver. 5.89 色谱工作站。 1.2分析条件 液相条件 色谱柱：Shim-pack XR-ODSII(150 mm. Lx柱温：25℃2.0 mm I.D.， 2.2um)进样量：10uL流动相：A相-0.1%乙酸水溶液，B相-乙腈洗脱方式：等度洗脱，B相浓度为5%流速：0.3 mL/min 质谱条件 离子化模式：ESI，正负离子同时扫描加热气：空气10.0 L/min雾化气：氮气3.0 L/min干燥气：氮气10.0L/min碰撞气：氩气接口温度：300℃ DL 温度：200℃ 加热模块温度：400℃扫描模式：多反应监测(MRM)驻留时间： 50ms 延迟时间： 3ms MRM参数：见表1 表1.MRM优化参数 化合物 离子化模式 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bias (V) CE (V) Q3 Pre Bias (V) y-羟基丁酸 ESI(-) 103.1 85.1* 10.0 15.0 11.0 57.1 10.0 12.0 16.0 y-丁内酯 ESI(+) 87.2 45.1 -13.0 -25.0 -18.0 43.1 -15.0 -25.0 -20.0 1，4-丁二醇 ESI(+) 91.2 55.1 -15.0 -12.0 -22.0 73.1 -15.0 -10.0 -13.0 注：：*表示定量离子 1.3标准品溶液的配制 标准工作溶液配制：将标准品用甲醇或者超纯水溶解至1000.0 ug/mL，使用超纯水逐级稀释得到1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、500.0 ng/mL 的工作溶液备用。 1.4样品前处理方法 取饮料样品1mL，超纯水稀释后，以0.22 um 滤膜过滤，待用。 结果与讨论 2.1标准样品 MRM 色谱图 图220ng/mL标准样品色谱图(左： GHB， 中： GBL，右： 1，4-BD) 2.2线性范围 配制浓度分别为1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、500.0 ng/mL 的系列标准溶液，按1.2分析条件进样检测，外标法定量。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制校准曲线如图3所示，线性方程、线性范围和相关系数结果见表2。 图3校准曲线(左： GHB， 中： GBL，右：1，4-BD) 表2校准曲线参数 名称 校准曲线 线性范围(ng/mL) 相关系数R 准确度 (%) GHB Y=(2413.4)X+(945.6) 1-500 0.9979 85.4~111.1 GBL Y=(2379.9)X+(3704.9) 2-500 0.9982 88.3~114.6 1，4-BD Y=(10000.5)X+(9547.5) 2-500 0.9986 86.7~113.6 2.3精密度实验 对浓度分别为10.0和200 ng/mL 的标准样品连续6次进样，考察仪器的重复性，保留时间和峰面积的重复性结果如表4所示。仪器重复性良好。 表4保留时间和峰面积重复性结果(n=6) 名称 RSD%(10ng/mL) RSD%(200 ng/mL) R.T. Area R.T. Area GHB 0.47 2.31 0.41 0.81 GBL 0.30 2.08 0.26 0.70 1，4-BD 0.44 1.87 0.48 0.97 2.4实际样品测试和加标回收实验 样品按照1.4中方法处理后，进样分析，检测结果如表5所示。在样品中加标 0.5 mg/mL，计算加标回收率。 表5样品检测和加标回收实验 名称 检测浓度 稀释倍数 样品浓度 加标浓度 加标样品检测浓 回收率(%) (ug/mL) (mg/mL) (mg/mL) 度(mg/mL) GHB 0.11 4000 0.44 0.50 0.91 93.1 GBL 0.18 0.70 0.50 1.23 104.3 1，4-BD N.D. N.D. 0.50 0.46 92.6 注：样品由武汉市公安局禁毒支队实验室提供， N.D表示未检出 结论 本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪 LC-30A和三重四极杆质谱仪 LCMS-8045 联用测定疑似毒品饮料中y-羟基丁酸及其前体y-丁内酯和1，4-丁二醇含量的方法。该方法在2 min 内完成分析，线性良好，不同浓度标准样品平行测试6次，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在 0.26~0.48%和0.70~2.31%之间，仪器精密度良好。样品加标回收率在92.6~104.3%。该方法具有分析速度快、结果准确的优势，可用于饮料中y-羟基丁酸及其前体y-丁内酯和1，4-丁二醇含量的检测。 田岛津全球应用技术开发支持中心 本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8045联用测定疑似毒品饮料中γ-羟基丁酸及其前体γ-丁内酯和1,4-丁二醇含量的方法。该方法在2 min内完成分析，线性良好，不同浓度标准样品平行测试6次，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.26 ~ 0.48%和0.70 ~ 2.31%之间，仪器精密度良好。样品加标回收率在92.6 ~ 104.3%. 该方法具有分析速度快、结果准确的优势，可用于饮料中γ-羟基丁酸及其前体γ-丁内酯和1,4-丁二醇含量的检测。