水中8 种激素检测方案(液质联用仪)

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Trusted Answers 前言 液质联用技术在环境检测中的应用 保护环境和治理污染是当前攸关国计民生的重大课题。其中环境检测工作为环境质量评价提供主要的评定依据，对环保工作起到至关重要的作用。随着人们健康意识的增加、环境污染的加剧，环境检测相关法规中大量增加微量有机污染物、农药、消毒副产物等指标项目。在应对低含量污染物检测方面，液质联用系统正在以其高灵敏度、高准确度以及高通量等特点在环境监测领域得到越来越广泛地应用。2017年4月生态环境部在“十三五”国家环境保护标准制修订项目清单中纳入一系列基于液相色谱质谱联用系统的检测标准，-9以此进一步规范环境检测工作。 作为全球著名的一体化分析仪器解决方案供应商，安捷伦在环境分析和法规遵循方面拥有超过40年的经验，可以提供水、土壤或空气中有机和无机化合物分析的最佳解决方案，，包括仪器、色谱工作站、消耗品和服务。安捷伦液质联用系统专业、灵活、稳定且可靠，其中的三重四极杆质谱系统具有多反应监测模式(MRM)，能够克服复杂基质的干扰，提供高选择性和高灵敏度的分析结果，是目前环境样品中痕量组分定量分析的黄金标准；而高分辨飞行时间质谱具有卓越的分辨率、质量精度和同时定性定量分析能力，特别适合环境样品中未知污染物的筛查和定性分析；在线固相萃取液质系统通过大体积进样在线富集，可实现目标分析物的高通量和超高灵敏度分析，消除手动方法中因操作者反复操作 SPE 而引入的人为误差，最大程度提高分析物的回收率，从而极大降低环境水样中痕量物质检测所需的人力、时间和溶剂成本。 基于安捷伦公司技术团队持续多年的技术投入和经验积累，现已形成一套针对环境系统相关检测项目的完备方案。本应用文集重点收录不同液质平台在环境常规检测项目中的应用，可以帮助您找到适合的分析方案，i让您对检测工作信心十足。 三重四极杆液质联用系统 环境水体与土壤中的全氟辛酸和全氟辛烷磺酸的测定 5 环境水、土壤和生物体中六溴环十二烷和四溴双酚A的测定 8 土壤和沉积物中15种苯胺和联苯胺类化合物的测定 10 水中氨基甲酸酯类农药的测定 13 水中19种磺胺类抗生素的测定 16 水中8种亚硝胺的测定 19 水中硝基苯酚类化合物的测定 21 水中苯氧羧酸类除草剂的测定 23 水中微囊藻毒素的测定 25 水中23种邻苯二甲酸酯类增塑剂的测定 27 水中丁基黄原酸的测定 30 水中16种有机磷农药的测定 32 水中28种全氟/多氟烷基化合物的测定 35 饮用水中卤乙酸类消毒副产物的测定 38 水中丙烯酰胺的测定 41 水中8种激素的测定 43 水中双酚A的测定 45 水中药物和个人护理用品 (PPCP) 的高通量检测 47 在线固相萃取液质联用系统 (Online SPE LC-MS) 在线 SPE-UHPLC/MS/MS 检测水中的新兴有机污染物 51 高灵敏度检测水中的痕量有机污染物 54 饮用水、地表水和地下水中的痕量除草剂的检测 58 水中微囊藻毒素的高灵敏度检测 62 水中4种β内酰胺类抗生素的检测 65 使用 UHPLC/Q-TOF MS 和精确质量数据库与谱库筛查和鉴定污水处理厂出水中的新兴污染物 69 对污泥中的环境污染物同时进行靶向定量和疑似物筛查 72 三重四极杆液质联用系统 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 环境水体与土壤中的全氟辛酸和全氟辛烷磺酸的测定 前言 本方法采用 WAX 柱，通过改变 pH值来控制全氟辛酸 (PFOA)和全氟辛烷磺酸 (PFOS)在柱上的保留能力，完成水样及土壤提取液的富集和净化，并用超高效液相色谱-三重四极杆质谱采用内标法定量测定。 样品采集与保存 样品的采集、运输及保存参照 GB 17378.3 和 HJ/T 166一般性规定。采集的样品运输至实验室后在4°C下避光保存，2周内完成样品前处理，1个月内完成样品分析。 样品前处理 取500mL水样，加入10 ng 13C-PFOA 及 10 ng 13C-PFOS标准替代物，混匀后经石英滤膜过滤。然后将样品以 3-5 mL/min 的流速通过预先经0.5%氨水甲醇溶液、甲醇和超纯水活化的 WAX 柱。上样完毕后，依次采用 8 mL 超纯水和8 mL乙酸缓冲液(pH=4)淋洗小柱，真空干燥1h后，使用8mL甲醇淋洗小柱，弃掉淋洗液。再使用6mL 0.5%氨水甲醇溶液洗脱小柱，收集洗脱液并氮吹浓缩至近干，然后加入10 ng 1C，-PFOA，使用甲醇定容至1mL， 经0.22 pm 滤膜过滤后转移至2mL PP材质的进样瓶中待测。 土壤样品干物质和水分参照 HJ613-2011进行测定。准确称取5.00 g阴干样品置于离心管中，加入10ng 13C-PFOA 及 10 ng 1C4-PFOS 标准替代物品。加入10mL甲醇水溶液 (v/v， 1/1)，涡旋混匀后室温下 200rpm 振荡30 min、室温下超声提取30min、6000 rpm 离心5 min。收集上清液。重复提取三次，合并上清液，用水稀释至甲醇含量低于10%。然后参照水样进行净化富集。 色谱条件 色谱柱： Agilent Poroshell 120 EC-C18 (100 mmx2.1 mm， 2.7 pm)流动相： A)2 mmol/L 乙酸铵水溶液， B)乙腈，梯度见下表 流速：0.3mL/min 柱温：35°C 进样量：5pL 表1. 时间 (min) B (%) 0 30 3 65 4 65 5 100 8 100 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，负离子模式 毛细管电压：2500V 喷嘴电压：0V 雾化气：30 psi 鞘气温度：350°C 鞘气流速：11L/min 干燥气温度：325°C 干燥气流速：6 L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电 压(V) 碰撞能 量(V) 驻留时间(ms) PFOA 413 369*/169 80 7*/18 50 13C，-PFOA 415 370*/169 80 7*/18 50 13C -PFOA 417 372*/169 80 7*/18 50 PFOS 499 99*/80 190 50*/54 50 1C -PFOS 503 99*/80 190 50*/54 50 注：*代表定量离子 色谱与质谱条件的优化 在优化后的色谱质谱条件下，目标化合物在 5 min 内实现基线分离。对于废水和底泥等复杂基质，当目标化合物流出色谱柱后，采用纯乙腈洗脱3 min， 尽可能使残留基质流出色谱柱。如果系统中 PFOA/PFOS 本底较高，可以在进样器前串联一支相同填料的色谱柱，将来自 LC 系统的干扰物进行捕集，从而将其与目标物分离，去除干扰，实现目标化合物的准确定量。 图1.PFOA和PFOS及其同位素内标(C-PFOA和"C-PFOS) 的提取 MRM 色谱图 线性范围与方法准确度和精密度 采用同位素稀释法进行定量，在0.50-200 pg/L 的浓度范围内PFOA 和 PFOS 的线性良好，回归系数均达到0.997。分别选择各种水和土壤作为基质来评价方法的准确度和精密度。考虑到环境样品中 PFOA/PFOS 的残留浓度相差较大，实验中针对不同基质采用不同的加标浓度。每个浓度水平重复6次测定。标准品在水样过滤或土样提取前加入，然后进行相应的提取净化过程。实验结果如表3所示，在测试的三个浓度水平下，PFOA 在纯水中的回收率在91.1%-94.1%之间，相对标准偏差(RSD) 在1.3%-4.8% 之间； PFOS的回收率在 88.0%-93.8%之间， RSD 在0.80%-5.3%之间。对于地表水和废水在相应的加标浓度下， PFOA 和 PFOS 的回收率分别介于88.4%-98.8%和 90.8%-97.3%之间， RSD 分别介于2.2%-14%和0.9%- 4.1%之间。对于空白土、土壤与底泥，在相应的加标浓度下， PFOA 的加标回收率介于98.5%-113%之间， RSD 介于0.6%-5.7%之间； PFOS的加标回收率在96.8%-111%之间，RSD 介于 0.4%-6.6%之间。以上结果表明，本方法能够准确可靠地检测各类环境水与土壤基质中痕量的 PFOA 和 PFOS。 表3.各种不同水与土壤基质中加标回收率与精密度 基质 加标浓度 PFOA PFOS 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD (%) 水空白 2.5 ng/L 91.1 2.6 88.0 5.3 40 ng/L 94.1 1.3 93.4 0.8 200 ng/L 92.0 4.8 93.8 5.3 河水 2.5 ng/L 90.7 14 95.5 4.1 40 ng/L 88.4 3.5 90.8 0.9 废水 200 ng/L 98.8 2.2 97.3 2.0 土空白 0.50 pg/kg 113 1.2 111 0.7 5.0 pg/kg 101 0.6 99.5 1.5 20 pg/kg 98.9 0.6 98.6 0.8 土壤 5.0 pg/kg 103 1.8 97.6 0.4 20 pg/kg 98.6 0.9 96.8 2.9 底泥 5.0 pg/kg 103 4.2 102 2.2 20 pg/kg 104 5.7 103 6.6 实际样品分析 使用本方法对北京地区地下水、地表水及周边土壤和沉积物进行了监测。监测结果表明：北京地区地表水及地下水 PFOA 和PFOS的残留水平处于几到几十 ng/L 浓度水平，受污染程度较低；周边地区的土壤及沉积物中 PFOA 及 PFOS 大部分均未检出。 本法应用弱阴离子交换柱进行样品前处理，结合超高效液相色谱三重四极杆质谱和同位素稀释法测定环境水体与土壤中的PFOA和 PFOS。该方法可有效富集并去除复杂样品中的基质干扰，灵敏度高，线性范围宽，回收率和精密度均满足准确定量要求，可用于环境水体与土壤基质中痕量 PFOA 和 PFOS的分析。 (详细数据参见5994-0437ZHCN) 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 环境水、二土壤和生物体中六溴环十二烷和四溴双酚A的测定 本方法用于检测环境水、土壤和生物体中的六溴环十二烷(HBCD) 和四溴双酚 A(TBBPA)。将样品提取后经无水硫酸钠脱水、硅胶柱净化浓缩后，使用超高效液相色谱与三重四极杆质谱联用技术进行检测，采用同位素稀释法进行定量，可灵敏、准确、、可靠地检测各基质样品中痕量的六溴环十二烷和四溴双酚A， 完全满足环境实验室监测要求。 样品前处理 量取 500 mL 水样于锥形分液漏斗中，加入内标使用液和 20 mL正己烷，剧烈振荡2 min。静置分层后，取上层正己烷，过无水硫酸钠柱脱水。再次加入20 mL 正己烷重复上述操作，合并2次萃取液，在40°C水浴下旋转蒸发浓缩至近干，加入5 mL正己烷复溶。移取提取液至已用10 mL 正己烷活化后的硅胶固相萃取柱(1g，6 mL)上，先用2mL正己烷淋洗，再用5mL二氯甲烷洗脱；洗脱液于 40°C下用氮气吹干，加1.00mL甲醇复溶，经0.22 um 有机相微孔滤膜过滤后分析。 土壤、沉积物和生物样品(均质后)，称取 5.00 g (准确至0.01g) 置于50mL离心管中，加入内标标准使用液和15mL正己烷，涡旋振荡1 min，超声振荡10 min 后，在 6000 r/min 下离心5 min， 将上清液转移至旋转蒸发瓶；残渣用 15mL 正己烷重复提取一次，所得上清液合并至旋转蒸发瓶，在40°C水浴下旋转蒸发浓缩至近干，加入5mL 正己烷复溶，后续净化过程同上述水样净化过程。 色谱条件 色谱柱： Agilent Poroshell 120 EC-C18 (100 mmx2.1 mm， 2.7 pm)流动相：A)水，B)乙腈，梯度见下表 流速：0.3mL/min 柱温：40°C 进样量：5uL 表 1. 时间 (min) B (%) 0 30 3 65 4 65 5 100 8 100 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，负离子模式 毛细管电压：3000V 喷嘴电压：2000V 雾化气：35 psi 鞘气温度：300°C 鞘气流速：11 L/min 干燥气温度：200°C 干燥气流速：6L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电 压(V) 碰撞能 量(V) 驻留时间 (ms) HBCD 640.7 78.9*/80.9 80 10*/17 100 3C-HBCD 652.7 78.9 80 10 100 TBBPA 542.7 78.9*/417.9 200 67*/46 100 C-TBBPA 554.8 78.9 200 62 100 注：*代表定量离子 色谱与质谱条件的优化 经色谱、质谱条件优化后， HBCD 三个同分异构体可实现基线分离，TBBPA、HBCD 及其同位素内标的典型 MRM 色谱图如图1所示。 图1. TBBPA、HBCD 及其同位素内标的 MRM 色谱图(1 pg/L) 线性范围与方法准确度和精密度 本方法采用同位素稀释法进行定量。在0.1-100.0 ug/L 的浓度范围内， TBBPA 和 HBCD 线性相关性良好，相关系数均达到0.999。以海水、海洋沉积物和海鱼作为基质，在不同的HBCD加标浓度水平下评价方法的准确度。实验结果如表3所示，在不同的加标浓度下，各基质中HBCD 的回收率均在68.3-118.2%之间。实验结果表明，本方法能够准确、可靠地检测各类海洋基质中痕量的 HBCD。 表3.海洋基质质 HBCD 加标回收率(%) 基质 加标浓度 a-HBCD 3-HBCD V-HBCD 海水 2ng/L 83.0 80.0 68.3 20ng/L 110.8 100.3 115.1 40 ng/L 102.6 107.0 103.0 沉积物 0.4ng/g 115.7 98.2 96.5 2ng/g 118.2 104.7 106.7 鱼 2ng/g 84.5 102.4 83.3 本方法采用硅胶柱进行样品净化和富集，使用超高效液相色谱和三重四极杆质谱联用技术，结合同位素稀释法，可测定不同基质样品中痕量的 TBBPA 和 HBCD。该方案可有效富集并去除复杂样品中的基质干扰，灵敏度高，线性范围宽，回收率满足准确定量的要求。 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 土壤和沉积物中苯胺类和联苯胺类化合物的测定 前言 本文采用安捷伦三重四极杆液质联用系统，建立了《土壤和沉积物苯胡类和联苯胺类的测定液相色谱-三重四极杆质谱法》标准中15种苯胺类和联苯胺类化合物的分析方案。 样品前处理 参见《土壤和沉积物苯胺类和联苯胺类的测定液相色谱-三重四极杆质谱法》标准中前处理过程。 色谱条件 色谱柱： Agilent Eclipse Plus C18 (100 mmx3.0 mm， 1.8 pum) 流动相： A)0.01%甲酸水溶液， B) 0.01%甲酸的甲醇溶液，梯度洗脱流速：0.4mL/min 柱温：40°C 进样量：10uL 表1. 时间(min) B(%) 0 15 9 95 10 95 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，正离子模式 毛细管电压：3000V 喷嘴电压：1000V 雾化气： 40 psi 鞘气温度：380°C 鞘气流速：12L/min 干燥气温度：300°C 干燥气流速： 8L/min 表2.多反应监测条件 表2.多反应监测条件(续) 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电压 (V) 碰撞能量(V) 联苯胺-d8 193 174 109 32 苯胺-d5 99 82 120 20 3，3-二氯联苯胺-d6 259 160 110 52 N-亚硝基二苯胺-d6 205 175 65 12 色谱与质谱条件的优化 经色谱、质谱条件优化后，15种苯胺类和联苯胺类化合物均可得到良好的色谱分离，浓度 0.5 ug/L的混合标样的 MRM 色谱图如图1所示。 校准曲线 本方法采用内标法进行定量。配制0.05-100 pg/L 浓度范围内的混标工作溶液，依次进样分析，建立校准曲线，结果如图2所示。从中可以看出，各化合物的线性相关性良好，相关系数均达到0.997以上，可实现对目标物准确定量。 图2.15种苯胺和联苯胺类化合物的校准曲线 结论 本文采用安捷伦超高效液相色谱和三重四极杆质谱联用技术，结合内标法，i2针对即将发布的《土壤和沉积物苯胺类和联苯胺类的测定液相色谱-三重四极杆质谱法》标准，建立了15种苯胺类和联苯胺类化合物的分析测试方法，该方法灵敏度高，线性范围宽，满足准确定量的要求。 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中氨基甲酸酯类农药的测定 前言 本文建立了快速检测环境样品中15种氨基甲酸酯分析方法。该方法快速、稳定、灵敏度高，完全满足环境实验室监测要求。 样品前处理 环境水样经摇匀后通过 0.22 um 滤膜过滤，添加适量内标后进样分析。 色谱条件 色谱柱： Agilent Eclipse Plus C18 (3.0 ×150mm， 1.8 pm) 流动相：A)0.1%甲酸水溶液，B)甲醇，梯度见下表 流速：0.3mL/min 柱温：40°C 进样量：20uL 表1. 时间(min) B(%) 0 5 1 60 7 85 7.1 100 10 100 后平衡时间：4 min 质谱条件 离子源：ESI，正离子模式 毛细管电压：3000V 喷嘴电压：0V 雾化气：35 psi 鞘气温度：300°C 鞘气流速： 11 L/min 干燥气温度：350°C 干燥气流速：5L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电压 (V) 碰撞能量(V) 甲萘威-D7 Carbaryl-D7 209 152 85 9 克百威-D3 Carbofuran-D3 225 165 54 9 甲硫威-D3 Methiocarb-D3 229 169 78 9 灭多威-D3Methomyl-D31 166 106 60 9 色谱与质谱条件的优化 经色谱质谱条件优化后，本方法可在10分钟内完成15 种氨基甲酸酯的定性定量分析，采用梯度洗脱得到的色谱峰峰形良好，典型色谱图如图1所示。 图1.15种氨基甲酸酯标样和4种同位素内标的 MRM 色谱图 1.Methomyl-oxime；2. Methomyl；3. Methomyl-D3；4.3-0H Carbofuran；5. Pirimicarb；6.Metolcarb；7.Bendiocarb；8. Propoxur；9. Carbofuran-D3；10. Carbofuran；11. Carbaryl-D7； 12.Carbaryl；13.Isoprocarb；14. Carbanolate；15.2，3，5-Trimethacarb；16.Fenobucarb； ( 1 7. Methiocarb-D3；18. M ethiocarb；19. P romecarb ) 本方法采用同位素稀释法进行定量，在2-100 ng/L 浓度范围内各氨基甲酸酯线性相关性良好，线性相关系数均大于0.999。使用空白水样配制浓度为2.0、10和100 ng/L 的加标样品，平行分析6次，考察方法的准确度和精密度。实验结果如表3所示，各氨基甲酸酯的回收率均在 70.8-124.4%之间，RSD在 0.69-7.57%之间。实验结果表明本方法能够准确、可靠地检测环境水中痕量氨基甲酸酯类化合物。 表3.氨基甲酸酯基质加标样品准确度和精密度实验结果(n=6) 化合物 2ng/L 10ng/L 100 ng/L 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD(%) 抗蚜威 Pirimicarb 70.8 3.29 83.6 2.15 106.1 4.36 速灭威 Metolcarb 106.8 1.95 83.9 3.78 99.7 4.27 残杀威 Propoxur 102.6 7.57 96.4 4.72 106.3 1.26 克百威 Carbofuran 87.4 1.05 90.7 6.32 105.1 2.67 甲萘威 Carbaryl 101.5 5.62 89.8 1.59 106.4 2.74 异丙威 Isoprocarb 78.2 2.59 88.0 0.77 108.1 1.59 仲丁威 Fenobucarb 102.5 7.98 80.1 1.49 100.6 4.82 猛杀威 Promecarb 96.7 4.62 83.7 1.48 106.6 2.88 灭虫威 Methiocarb 91.5 5.34 88.1 2.28 103.0 1.31 灭多威肟 Methomyloxime 117.2 7.10 99.7 3.27 124.4 3.40 混杀威2，3，5- Trimethacarb 86.3 10.60 90.6 7.36 115.1 0.69 恶虫威 Bendiocarb 76.6 5.76 88.5 7.92 109.0 0.84 氯灭杀威 Carbanolate 82.6 2.86 98.0 4.04 102.4 1.13 灭多威Methomyl 109.5 4.47 105.7 4.04 106.3 3.07 3-羟基克百威3-0H Carbofuran 100.6 6.56 85.3 2.13 94.9 1.21 结论 本实验采用直接进样和同位素稀释法测定水中氨基甲酸酯农药，该方法具有快速、灵敏度高、准确和稳定性好等特点，能够满足环境水质分析的要求。 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中 19种磺胺类抗生素的测定 前言 为准确监测饮用水水源、地表水和地下水等环境水体中磺胺类药物的残留水平，本文提供了一种基于液相色谱三重四极杆质谱平台同时检测19种磺胺类药物的快速、灵敏、准确的方法。 样品前处理 量取500 mL 水样，加入 EDTA 使最终浓度达到 0.5 g/L， 调节水样的 pH至4-7之间，加入回收替代物 (IS1、IS2和IS3)后，通过石英膜过滤。将过滤后水样以约5-10 mL/min 的流速加载到预活化的 AgilentBondElut PPL-SPE 柱 (500 mg， 6 mL)中，用5mL纯水淋洗后，真空干燥 SPE 柱，再用7mL含2%氨水的甲醇洗脱。洗脱液在40°C下用氮气干燥，使最终体积≤0.5mL， 加入进样内标(IS4)，用纯水定容至1mL， 充分涡旋混合，在13000 rpm 的转速下离心5分钟，得到上清液采用LC/MS/MS 进行分析。 色谱条件 表2.多反应监测条件 色谱柱： Agilent Poroshell 120 EC-C18 (2.1 mmx 150 mm， 2.7 pm)流动相： A)0.2%乙酸水溶液，B)甲醇，梯度见下表 流速：0.3 mL/min 柱温：35°C 进样量：2uL 表1. 时间 (min) B(%) 0 10 8 40 12 65 13 95 16 95 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，正离子模式 毛细管电压：3500V 喷嘴电压：500V 雾化气：30 psi 鞘气温度：350°C 鞘气流速：11L/min 干燥气温度：325°C 干燥气流速：6L/min 色谱与质谱条件的优化 经色谱、质谱条件优化后，几组同分异构体可实现基线分离，浓度 0.5 pg/L 的磺胺混合标样的 MRM 色谱图如图1所示。 图1.磺胺混合标样(0.5 pg/L) 的 MRM色谱图 方法的线性范围、准确度和精密度 本方法采用同位素稀释法进行定量，在 0.5-200 pg/L的浓度范围内所测试的磺胺类药物均表现出优异的线性，如图2所示，回归系数(R2)均高于0.996。 图2.0.5-200 pg/L 浓度范围内磺胺的线性回归系数(R) 在500 mL水样中分别添加 10、100和200ng磺胺，平行分析6次，考察方法的准确度和精密度。结果如图3所示，各磺胺的回收率均在70.5%-96.4%之间， RSD 在0.3%-12.3%之间，表明本方法能够准确、可可靠地检测环境水样中的痕量磺胺类化合物。 图3.水中三个浓度级别(20、200和400ng/L) 磺胺的回收率(%) 结论 本文所述方法采用安捷伦专利极性官能化反相聚合物 BondElut PPL SPE 小柱进行样品净化和富集，使用超高效液相色谱和三重四极杆质谱联用技术，结合同位素稀释法，可测定不同环境水体中的痕量的磺胺类化合物。该方法灵敏度高，线性范围宽，回收率和精密度均满足准确定量的要求。 (详细数据参见5994-1676ZHCN) 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中8种亚硝胺的测定 前言 本文建立了液相色谱三重四极杆质谱法测定水中8种亚硝胺类化合物的测定方法，组分包括N-亚亚基二甲胺 (NDMA)、N-亚硝基二乙胺 (NDEA)、N-亚硝基吗啉(NMOR)、N-亚硝基哌啶 (NPIP)、N-亚硝基吡咯烷 (NPYR)、N-亚硝基甲乙胺(NMEA)、N-亚肖基二丁胺 (NDBA)和N-亚硝基二丙胺 (NDPA)。 色谱条件 色谱柱： Agilent Poroshell 120 EC-C18 (100 mmx2.1 mm， 2.7 um)流动相： A)0.1%甲酸水溶液，B)甲醇，梯度见下表 流速：0.4mL/min 柱温：40°C 进样量：10 uL 表1. 时间(min) B(%) 0 5 1 20 5 95 7 95 后平衡时间：3 min 离子源：APCI，正离子模式 毛细管电压：3000V 电晕电流：4uA 蒸发室温温：250°C 雾化气：35psi 干燥气温度：325°C 干燥气流速： 4L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压 (V) 碰撞能量 (V) NDBA 159.2 41.1/57.1 80 25/14 NDEA 103.1 47.1/75.1 90 17/9 NDMA 75.1 43.1/58 90 18/12 NDPA 131.2 43.1/89.1 80 14/9 NMEA 89.1 43.1/61.1 80 11/12 NMor 117.1 45.1/87.1 80 21/11 NPip 115.1 41.1/69.1 100 25/15 NPyr 101.1 41/55.1 90 30/19 NDPA-d14 145.1 50.1/97 100 16/11 色谱与质谱条件的优化 经色谱、质谱条件优化后，可在7分钟内实现8种亚硝胺的有效分离和检测。8种亚硝胺和同位素内标的 MRM 色谱图如图1所示。 线性范围与方法准确度和精密度 配制浓度依次为 0 pg /L、10 ug /L、20 pg /L、40 pg /L、100pg /L 和200 pg /L的N-亚硝胺系列标准溶液，在该浓度范围内8种化合物的相关系数均大于0.995，线性关系良好。选取地表水作为实际样品，在5.0 pg/L 和 20.0 pg/L浓度水平下进行加标回收实验，每个浓度水平下配制6份平行样品，直接进样分析，并计算6次测定的相对标准偏差和加标回收率。结果如表3所列，加标回收率在 93.0%-99.2%之间，相对标准偏差(RSD) 在1.9%-5.3%之间。以上实验结果表明本方法能够准确、1可靠地检测地表水样中的痕量亚硝胺。 表3.地表水加标精密度与准确度结果(n=6) 化合物 5.0 pg/L 20.0pg/L 回收率(%) RSD (%) 回收率(%) RSD (%) NDMA 96.6 3.8 96.3 4.8 NMor 93.3 4.5 99.2 4.5 NMEA 94.4 2.5 99.2 3.0 NPyr 95.0 4.8 95.2 3.6 NDEA 93.5 5.3 97.9 3.2 NPip 94.0 3.9 93.0 2.7 NDPA 95.5 3.2 98.8 2.7 NDBA 95.3 2.9 98.4 1.9 本方法采用液相色谱三重四极杆质谱法多反应监测模式对水中8种亚硝胺化合物进行了分析测定，采用内标法定量，方法快速、准确、灵敏度高，能够满足现行检测需求。 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中硝基苯酚类化合物的测定 前言 本文采用超高效液相色谱和三重四极杆联用系统建立了直接进样测定水体中4种硝基苯酚化合物的方法。此方法与环保部最新颁布的《水质硝基酚类化合物的测定高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法》保持了一致性，并且安捷伦三重四极杆液质联用系统具有更加优异的线性范围和灵敏度。 色谱条件 色谱柱： Agilent Zorbax SB-C18 (2.1x100 mm， 1.8 um) 流动相：A)10 mmol/L 甲酸铵-甲酸水溶液， pH=4.0；B)甲醇；梯度见下表流速：0.2mL/min 柱温：30°C 进样量： 10 uL 表1. 时间(min) B(%) 0 25 8 60 9 95 10 95 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，负离子模式 毛细管电压：2500V 喷嘴电压：0V 雾化气：35 psi 鞘气温度：300°C 鞘气流速：12L/min 干燥气温度：250°C 干燥气流速： 5L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电 压(V) 碰撞能 量(V) 驻留时间(ms) 2，4，6-三硝基酚 228 182/198 110 16/12 20 2，4-二硝基酚 183 109/123 110 24/16 20 2，4-二硝基酚-d3 186 112/126 100 24/16 20 2，6-二硝基酚 183 64/79 110 24/20 20 4-硝基酚 138 46/92 100 40/20 20 色谱与质谱条件的优化 本方法可在10分钟内对4种硝基苯酚类化合物完成 LC-MS/MS的分析，典型色谱图见图1。从图中可以看出，采用此梯度洗脱程序得到的色谱峰具有良好的分离和峰形。 用超纯水将4种标准品的混合溶液稀释成10 ng/L-50 pg/L 的标准系列曲线，于每毫升标准系列溶液中加入10.0 pL 内标标准使用液，使内标的质量浓度为2.0 pg/L。在此浓度范围内，4 种硝基酚类化合物的线性相关系数均大于0.996，线性关系良好。对取自成都高新区地表水的空白样品中加入0.1 ng/mL(L1)和 10ng/mL (L2) 的混合标准品溶液，进样分析并计算其回收率。结果如图2所示，4种硝基苯酚类化合物的回收率在83%-118%之间。 L1 L2 图2.地表水中硝基苯酚化合物加标回收率 本方法使用安捷伦三重四极杆液质联用系统对4种硝基苯酚类化合物进行检测，该方法具有快速、高灵敏度、准确和稳定性好等特点，能够满足环境水质分析的要求。 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中苯氧羧酸类除草剂的测定 前言 生态环境部于2015年12月月布了 HJ 770-2015《水质苯氧羧酸类除草剂的测定液相色谱/串联质谱法》，对水中苯氧羧酸类除草剂的检测进行了规范。本文使用Agilent 6470 三重四极杆液质联用系统，建立了快速检测地表水中8种苯氧羧酸除草剂的分析方法。该方法可以在低浓度下进行测定，灵敏度是原标准方法的50-100倍，且仪器仍呈现了良好的稳定性。 样品前处理 环境水样经摇匀后通过 0.22 um 滤膜过滤，添加适量内标后进样分析。 色谱条件 色谱柱： Agilent Zorbax SB-C18 (2.1x100 mm， 1.8um) 流动相：A)2 mmol/L乙酸铵水溶液，B)乙腈，梯度见下表 流速：0.2 mL/min 柱温：40°C 进样量：10uL 表1. 时间(min) B(%) 0 12 1 12 5 50 5.5 95 8 95 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，负离子模式 毛细管电压：3000V 喷嘴电压：0V 雾化气： 35 psi 鞘气温度：300°C 鞘气流速： 12L/min 干燥气温度：260°C 干燥气流速：6L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电压 (V) 碰撞能量 (V) 2，4，5-TP 269/267 197/195 70 12/12 2，4，5-T 255/253 197/195 70 10/12 2，4-DB 249/247 163/161 60 5/5 2，4-DP 235/233 163/161 70 12/12 MCPB 229/227 143/141 60 5/8 2，4-D 221/219 163/161 70 12/12 MCPP 215/213 143/141 80 12/15 MCPA 227/225 169/167 70 12/12 2，4-D-13C 227/225 163/161 70 12/12 色谱与质谱条件的优化 本方法可在8分钟内对8种苯氧羧酸类除草剂完成 LC/MS/MS分析，采用梯度洗脱得到的色谱峰峰形良好，典型色谱图如图1所示。 7.3 图1.8种苯氧羧酸类除草剂混合标样(50 ng/mL) 的 MRM 色谱图 线性范围与精密度 采用本文所述方法在 50 ng/L-100 ug/L 浓度范围内对8种苯氧羧酸类除草剂的线性相关性进行讨论，每种化合物均采用了8个浓度等级，每个等级重复进样3次，浓度跨度大于10，各化合物线性相关系数R²均大于0.99，线性相关性良好。在地表水空白基质样品溶液中添加苯氧羧酸类除草剂的混合标准溶液，加标浓度为100 ng/L， 平行分析10次，考察方法精密度。实验结果如表3所示，在低浓度加标浓度下，8种化合物的峰面积 RSD 值均在10%以内，重复性良好。 表3.地表水空白加标样品(100 ng/L) 峰面积的 RSD 值 进样序列号 2，4-D MCPA MCPP 2，4-DP 2，4，5-T 2，4，5-TP 2，4-DB MCPB 1 1635 1485 1298 2108 4042 2986 775 677 2 1622 1618 1112 2089 3910 2976 801 617 3 1767 1603 1335 1981 3984 3243 735 625 4 1889 1485 1343 2180 4311 2763 667 586 5 1717 1495 1371 2411 4050 2872 832 710 6 1938 1332 1186 2004 3721 2811 788 702 7 1732 1476 1274 2206 4363 2791 803 663 8 1750 1427 1472 2374 4305 2686 742 587 9 1733 1351 1249 2194 3905 2634 640 614 10 1661 1357 1457 2324 3833 3340 690 659 RSD值 509 6.8 8.6 6.8 5.4 7.9 8.6 7.0 实际水样的检测 采用本方法对成都市区府南河水和温江郊区地表水进行检查，结果均为未检出。 结论 本文使用三重四极杆液质联用系统成功实现了对水中8种苯氧羧酸类除草剂的高灵敏度、快速、稳定的定量分析。本方法各项参数完全满足水中苯氧羧酸类除草剂的限量检测和快速检测要求。 (详细数据参见5991-8661ZHCN) 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中微囊藻毒素的测定 前言 本文建立了采用安捷伦三重四极杆液质联用系统对六种微囊藻毒素进行灵敏而精确定量分析的方法。 样品前处理 环境水样经0.22 um 滤膜过滤后，直接进样分析。 色谱条件 色谱柱： Agilent Poroshell 120 EC-C18， 3.0x100 mm， 2.7 um 流动相：A)含0.1%甲酸和1 mmol/L氟化铵的水溶液， B)0.1%甲酸的乙腈溶液，梯度见下表 流速：0.4 mL/min 柱温：45C 进样量：10 uL 表1. 时间(min) B(%) 0 30 8 95 10 95 后平衡时间：3 min 离子源：ESI，正离子模式 毛细管电电：4500V 喷嘴电压：500V 雾化气：35psi 鞘气温度：380°C 鞘气流速： 12L/min 干燥气温度：350°C 干燥气流速： 8L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压 (V) 碰撞能量 (V) LR 995.6 213 200 58 995.6 135 200 110 RR 520.1 213 140 35 520.1 135 140 30 LA 910.5 213 170 50 910.5 135 170 75 LF 986.5 213 170 68 986.5 135 170 78 HtyR 1059.6 106.7 220 147 1059.6 103 220 155 HilR 1009.6 106.7 210 128 1009.6 103 210 160 色谱与质谱条件的优化 本方法可在10分钟内完成对6种微囊藻毒素的定性定量分析。其中 MC-RR 选择[M+2H12+作为母离子，其他化合物采用[M+H]*作为母离子。图1为6种微囊藻毒素标样的典型 MRM色谱图。。 线性范围与灵敏度 采用直接进样法，各化合物在 0.1-100 ug/L 浓度范围内观察到良好的线性关系。表3列出了各化合物的检测限 (LOD)和定量限(LOQ)，各化合物检测限在0.01-0.1 pg/L之间，低于饮用水和地表水法规规定的1pg/L的限量标准。。 表3.六种微囊藻毒素的检测限和定量限 LOD (ug/L) LOQ(pg/L) RR 0.01 0.05 HtyR 0.05 0.1 LR 0.1 0.5 HilR 0.05 0.1 LA 0.05 0.1 LF 0.05 0.1 方法准确度与精密度 按定量限浓度在空白地表水样品中添加各化合物制备混合标样，平行分析5次，考察方法的精密度。制备浓度为 0.5 pg/L空白地表水加标样品考察回收率。实验结果如表4所示，各微囊藻毒素的回收率均在93.7%-100.3%之间，RSD 在1.8%-7.1%之间，表明本方法能够准确、可靠地检测环境水中痕量的微囊藻毒素。 表4.微囊藻毒素回收率和重复性实验结果(n=5) 回收率(%) RSD(%) RR 98.0 1.8 HtyR 99.5 4.5 LR 94.8 4.2 HilR 93.7 5.3 LA 97.0 5.5 LF 100.3 7.1 结论 本文建立了直接进样定量测定微囊藻毒素 (MCs) 的简单且灵敏的方法。该方法灵敏度满足饮用水和地表水法规的限量标准，能够准确、可靠地检测环境水中痕量的微囊藻毒素。 (详细数据参见5994-0007EN) 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中23种邻苯二甲酸酯类增塑剂的测定 前言 邻苯二甲酸酯类化合物具有很强的拟雌激素样作用，可以导致机体内分泌紊乱，对人体的健康有严重的危害。本文采用液相色谱-三重四极杆质谱法分离检测环境水源中23种邻苯二甲酸酯类化合物，该方法简单、快速，具有较高的准确度和精密度。 色谱条件 色谱柱： Poroshell 120 EC-C18， 2.1x100 mm， 2.7um (分析柱)Poroshell 120 EC-C18，3.0x50 mm， 2.7 um(捕集柱，背景干扰高时连接于泵与进样器之间) 流动相：A)含0.1%甲酸和5 mmol/L乙酸铵的水溶液， B) 5 mmol/L 乙酸铵的甲醇溶液，梯度见下表 流速：0.3 mL/min 柱温：40°C 进样量：5uL 表1. 时间(min) B(%) 0 25 1 50 5 50 6 80 10 80 10.1 90 17 100 21 100 质谱条件 离子源：ESI，正离子模式 毛细管电电：3000V 喷嘴电压：0V 雾化气：40 psi 鞘气温度：350°C 革气流速： 11 L/min 干燥气温度：325°C 干燥气流速：6L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压 (V) 碰撞能量 (V) DIDP 447.3 307 104 1 DIDP 447.3 289 104 1 DIDP 447.3 149 104 25 DINP(前) 419.3 293 95 1 DINP(前) 419.3 275 95 1 DINP(前) 419.3 149 95 21 DNP(后) 419.3 275.2 95 3 DNP(后) 419.3 149 95 10 DNP(后) 419.3 126.9 95 15 DNP(后) 419.3 57.2 95 50 DEHP(前) 391.2 279 90 5 DEHP(前) 391.2 167 90 15 DEHP(前) 391.2 149 90 15 DNOP(后) 391.3 261.1 95 1 DNOP(后) 391.3 149 95 9 DNOP(后) 391.3 120.9 95 50 DBEP 367.3 248.9 90 7 DBEP 367.3 101.1 90 13 DHEPP 363.2 149 110 18 DHEPP 363.2 57.3 110 34 DNHP(后) 335.2 233 85 1 DNHP(后) 335.2 149 85 9 BMPP(前) 335.1 166.8 75 6 BMPP(前) 335.1 149 75 20 DCHP 331.2 167 72 9 DCHP 331.2 148.9 72 21 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电压 (V) 碰撞能量(V) DPhP 319.1 225.1 70 4 DPhP 319.1 77.2 70 41 BBP 313.2 149 90 7 BBP 313.2 91.1 90 25 DEEP 311.2 221 70 1 DEEP 311.2 73.2 70 7 DNPeP(后) 307.2 149 92 15 DNPeP(后) 307.2 65.1 92 61 DIPeP(前) 307.1 219.3 92 2 DIPeP(前) 307.1 149 92 15 DMEP 283.2 207.2 70 1 DMEP 283.2 59.3 70 20 DBP(后) 279.2 205.1 72 1 DBP(后) 279.2 149 72 9 DIBP(前) 279.2 205.1 72 1 DIBP(前) 279.2 149 72 9 DPrP(后) 251.1 191 72 1 DPrP(后) 251.1 149 72 9 DIPrP(前) 251 149 72 9 DIPrP(前) 251 65 72 53 DAP 247.1 189 72 1 DAP 247.1 149 72 15 DEP 223.1 177 72 1 DEP 223.1 148.9 72 13 DMP 195.1 163 72 5 DMP 195.1 77 72 40 结果与讨论 色谱与质谱条件的优化 经色谱质谱条件优化后，)几组同分异构体均可实现基线分离，典型邻苯二甲酸酯混合标样的 MRM 色谱图如图1所示。 图1.邻苯二甲酸酯类化合物混标(50 pg/L)的色谱图 校准曲线与方法精密度 本方法采用外标法进行定量，在1.0-100.0 ug/L 的浓度范围内各氨基甲酸酯线性相关性良好，线性回归系数均达到0.992。以地表水作为实际样品，配制浓度为1.0 pg/L 的加标样品，平行分析6次，计算6次测定的相对标准偏差。结果如表3所示，各化合物相对标准偏差 (RSD) 在1.1%-9.6%之间，具有良好的重复性。 表3.地表水中邻苯二甲酸酯类精密度结果(n=6) 化合物 RSD (%) 化合物 RSD (%) DMP 9.6 DCHP 2.8 DEP 2.2 DEHP 3.7 DIPrP 1.8 DPhP 3.3 DAP 1.9 DNOP 1.1 DPrP 1.7 DNP 5.6 DIBP 7.0 BMPP 2.7 DBP 5.9 DIPP 3.1 DMEP 3.6 DHXP 2.3 DEEP 3.1 DHP 1.7 DPP (DNPeP) 1.5 DINP 5.0 BBP 2.4 DIDP 5.3 DBEP 2.4 结论 本文采用安捷伦三重四极杆液质联用系统，建立了测定23种邻苯二甲酸酯类增塑剂的方法，该方法在 1.0-100.0 pg/L 的浓度范围具有良好的线性关系和优异的重复性，能满足环境水样中增塑剂定量分析的需求。 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中丁基黄原酸的测定 丁基黄原酸盐即黄药，是一种捕集能力较强的浮选药剂，在矿产浮选捕集过程中，丁基黄原酸盐大部分会留在矿石表面，但仍有很少部分随废水排入地表水，污染饮用水源和环境，因而丁基黄原酸盐已被列为集中式生活饮用水、地表水源地特定监测项目之一。《地表水环境质量标准》 (GB 3838-2002)中规定丁基黄原酸标准限值为0.005 mg/L ；《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)中规定标准限值为0.001 mg/L。为了配套现行环境质量标准和污水排放标准，2018年12月生态环境部发布了《水质丁基黄原酸的测定液相色谱-三重四极杆串联质谱法》(HJ1002-2018)，采用直接进样-超高效液相色谱/质谱测定水中丁基黄原酸。该方法操作简单、快速，具有较高的准确度和精密度。 样品前处理 采集实际样品后，置于棕色玻璃瓶中；用氨水溶液将其 pH 调节至9-10，于4℃以下冷藏避光保存；在48小时内完成分析。分析前采用孔径 0.22 um的滤膜(亲水性聚丙烯、玻璃纤维或亲水性聚四氟乙烯)进行过滤，添加适量内标后直接进样分析。 色谱柱： Agilent Poroshell HPH-C18，50 mm x2.1 mm， 1.9 pm流动相：A)氨水溶液和 (pH9.5)，B)乙腈，梯度见下表 流速：0.3 mL/min 柱温：40°C 进样量：5pL 表1. 时间(min) B (%) 0 5 0.5 5 2 95 3 95 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，负离子模式 毛细管电压：2000V 喷嘴电压：1000V 雾化气：30 ps 鞘气温度：350°C 鞘气流速： 11 L/min 干燥气温度：150°C 干燥气流速：6L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压(V) 碰撞能量(V) 丁基黄原酸 148.9 72.9/70.9 74 7/17 1C -2，4-D(木标物) 227 169 80 8 质谱与色谱条件的优化 丁基黄原酸在碱性条件下稳定，故采用氨水溶液 (pH9.5)和乙腈为流动相，，色谱柱需采用耐碱性的反相 C18色谱柱。丁基黄原酸极性较大，在反相柱上保留较弱。定量分析采用内标法，以同位素标记的2，4-二氯苯氧乙酸(C(-2，4-D) 为内标物。丁基黄原酸及同位素内标的典型 MRM 色谱图如图1所示。 图1.丁基黄原酸及内标的MRM 色谱图 校准曲线与方法的准确度和精密度 本方法采用内标法进行定量，在0.5-100 ug/L 的浓度范围内丁基黄原酸线性相关性良好，线性回归系数均达到0.991。以地表水作为实际样品，在5.0 pg/L 加标浓度下进行加标回收实验，配制6份平行样品，直接进样分析，计算6次测定的相对标准偏差和加标回收率。结果见表3，平均加标回收率为85.4%，相对标准偏差 (RSD) 为 3.4%。结果表明本方法能够准确、可靠地检测水中的丁基黄原酸。 表3.地表水中丁基黄原酸添加回收实验结果 编号 测定浓度(pg/L) 编号 测定浓度(pg/L) 1 4.29 5 4.07 2 4.36 6 4.13 3 4.38 平均值 4.27 4 4.43 RSD(%) 3.4 结论 采用安捷伦超高效液相色谱和三重四极杆质谱联用技术，结合内标法，可测定不同环境水体中的丁基黄原酸。该方法灵敏度高，线性范围宽，回收率和精密度均满足准确定量的要求。 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中16种有机磷农药的测定 前言 本文开发了一种快速有效分析多种水源16种常见有机磷农药的方法，该方法基于三重四极杆液质系统采用动态多反应监测模式(dMRM)实现高灵敏度的定量分析，具有方便、快速、灵敏度高等特点，满足环境水源中有机磷检测的要求。 色谱条件 色谱柱： Agilent ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18 (2.1 x100 mm， 1.8 um) 流动相：A)含0.01%甲酸和 5 mmol/L 甲酸铵的水溶液；B)含0.01%甲酸和5mmol/L 甲酸铵的甲醇溶液；梯度见下表 流速：0.3mL/min 柱温：45°C 进样量：2uL 表1. 时寸 (min) B(%) 0 5 0.8 40 3.5 40 5 60 6 60 12 65 17 95 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，正离子模式 毛细管电电：3500V 喷嘴电压：400V 雾化气：40 psi 鞘气温度：380°C 革气流速： 11 L/min 干燥气温度：325°C 干燥气流速：9L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电压(V) 碰撞能量(V) 保留时间(min) 乙基谷硫磷 346 137.1 80 20 10.6 346 97 32 346 77.1 45 346 160 10 346 132 10 谷硫磷 318.1 261 80 14 7.71 318.1 132 8 毒虫畏 359.1 155.1 120 10 14.35 359.1 99 10 蝇毒磷 363 306.9 120 15 13.82 363 227 20 甲基内吸磷 231 89 80 10 4.6 231 61 35 敌敌畏 223 109 120 10 4.5 221 145 15 221 127 20 221 109 15 乐果 230 199 80 8 3.17 230 125 20 杀螟硫磷 278 125 120 16 9.63 278 109 12 倍硫磷 279.1 246.8 115 4 13.01 279.1 168.9 12 279 109.1 24 279 105.1 20 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压(V) 碰撞能量(V) 保留时间(min) 马拉硫磷 331 285 80 5 9.41 331 127 5 速灭磷 225.1 193 100 15 3.55 225.1 127 15 氧化乐果 214 183 80 5 1.95 214 125 20 对硫磷 292 264 100 5 12.21 292 236 10 292 97 32 292 94.1 45 甲基对硫磷 264 125 120 20 8.19 264 79 40 三唑磷 314.1 162.1 120 20 10.13 314.1 119 20 敌百虫 256.9 221 120 5 3.24 256.9 109 15 色谱和质谱条件优化 优化色谱质谱条件以得到最佳的分离度和灵敏度。图1显示了优化后的典型的色谱图，在21分钟内完成了16种有机磷农药的分析。 图1.水样中16种有机磷农药(5pg/L)的色谱图 线性范围与方法准确度和精密度 所有化合物在1.0-100.0 ug/L 的浓度范围内均得到良好的线性关系，线性回归系数R²均达到0.998。选择地下水作为基质来评价方法的准确度和精密度，配制浓度为5 pg/L 基质加标样品，平行制备分析6次，计算回收率和相对标准偏差(RSD)。实验结果如表3所示，各有机磷化合物回收率在75.5%-117.5%之间 ((除敌百虫外)， RSD 在 3.2%-8.1%之间。实验结果表明该方法准确、可靠。 表3.有机磷加标回收率与精密度(n=6) 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD(%) 氧化乐果 84.5 7.3 马拉硫磷 106.7 3.4 乐果 117.5 4.9 杀螟硫磷 105.0 5.0 敌百虫 142.4 4.3 三唑磷 105.8 3.2 速灭磷 110.3 4.0 乙基谷硫磷 105.8 4.5 甲基内吸磷 99.2 6.0 对硫磷 105.0 3.7 敌敌畏 92.4 3.7 倍硫磷 75.5 8.1 谷硫磷 111.9 4.6 蝇毒磷 102.5 3.4 甲基对硫磷 110.2 6.7 毒虫畏 106.9 3.2 结论 本文介绍了采用高效液相色谱三重四极杆质谱测定环境水源中16种有机磷农药的方法，该方法简便，高效，具有出色的回收率、重现性和灵敏度。 (详细数据参见 5991-5304CHCN) 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中28种全氟/多氟烷基化合物的测定 本方法利用超高效液相色谱与三重四极杆质谱联用系统筛查、鉴定并定量分析水样中28种痕量全氟/多氟烷基化合物(PFAS)。采用水样对该方法进行评估，并用外标法进行定量分析。结果表明，在特异性、线性、检测限、准确度和精密度方面均获得了令人满意的结果。该方法可用于同时检测并定量分析试剂、自来水、地表水、地下水和废水基质中的 PFAS残留物。 样品前处理 将水样用甲醇稀释(1：1 v：v)， 然后过滤 (Captiva NY/GF 0.2 pm， 部件号5190-5132)，用乙酸将 pH 调节至酸性。 色谱条件 色谱柱： Agilent Zorbax SB-C18 (100 mm x2.1 mm， 1.8 um) 捕集柱： Agilent Zorbax SB-C18 (50 mm x 3.0 mm， 1.8 pm) (背景干扰高时连接于泵与进样器之间) 流动相：A)0.1%乙酸水溶液， B) 0.1%乙酸的甲醇溶液，梯度见下表 流速： 0.4mL/min 柱温：50°C 进样量： 30 uL 表1. 时间(min) B(%) 0 5 14 95 15 100 18 100 后平衡时间：7 min 质谱条件 表2.多反应监测条件 离子源：ESI，负离子模式 毛细管电压：3500V 喷嘴电压：2000V 雾化气：30 psi 鞘气温度：375°C 革气流速：12L/min 干燥气温度：250°C 干燥气流速： 8L/min 系统适用性 利用动态多反应监测(dMRM) 检测 PFAS。 在定量分析中，通过 MS/MS 离子对的相对强度比率和保留时间能够将目标分析物与潜在的干扰物区分开。图1为 28 种PFAS 的典型 MRM色谱图。 图1.28种 PFAS标样(80ng/L) 的 MRM色谱图 线性范围与方法准确度和精密度 在5-200 ng/L 的浓度范围内，对该方法进行评估。所有化合物的线性回归系数R²值均高于 0.99。在萃取之前向样品中加入分析物标准溶液制备浓度为 160 ng/L 的加标样品，平行测定六次，用于测定准确度和精密度，所有样品的内标加标浓度也为160 ng/L。图2显示了浓度为160 ng/L 的 28种 PFAS 加标样品的准确度和精密度结果。 实际样品测试 利用经过评估的方法分析几种未知水样。样品分析结果和替代物加标回收率如表3所示。替代物加标回加率在 70%-130%范围内，并且所有检测的 PFAS 均小于检测限。 表3.样品分析结果和替代物加标回收率 注：代用品回收率中的空单元格表示本研究中的原生化合物无可用的稳定同位位标准品或或包括在内 结论 本文介绍了采用高效液相色谱三重四极杆质谱测定环境水源中16种有机磷农药的方法，该方法简便，高效，具有出色的回收率、重现性和灵敏度。 (详细数据参见5991-5304CHCN) 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 饮用水中卤乙酸类消毒副产物的测定 前言 卤乙酸作为饮用水氯化消毒中一类主要的消毒副产物，可引起 DNA 损伤，导致遗传毒性，成为饮用水监测中被广泛关注的消毒副产物，本文开发了一种快速有效分析饮用水中11种卤乙酸类、溴酸盐和氯酸盐消毒副产物的方法，该方法方便、快速、灵敏度高，完全满足法规中卤乙酸检测的要求。 色谱条件 色谱柱： Agilent InfinityLab Poroshell 120 HPH-C18 (3.0x150 mm， 2.7 pm)流动相： A)0.05%甲酸水溶液，B)甲醇，梯度见下表 流速：0.25mL/min 柱温：40°C 进样量：20uL 表1. 时间(min) B(%) 0 5 9 95 后平衡时间：3 min 离子源：ESI，负离子模式 毛细管电压：2500V 喷嘴电压：0V 雾化气：40 psi 鞘气温度：150°C 鞘气流速： 10L/min 干燥气温度：120°C 干燥气流速：6L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碎裂电压(V) 碰撞能量(V) 保留时间(min) BrO3- 126.9 110.9 90 24 2.71 CIO3- 82.9 67.1 25 24 2.93 DCAA 127 83 85 6 4.31 MCAA 93 35 80 7 4.44 M13CAA 94 35 80 7 4.44 BCAA 173 81 49 5 4.80 MBAA 137 79 80 8 5.09 DBAA 217 173 85 3 5.38 TCAA 161 117 65 2 6.06 BDCAA 163 81 60 6 6.36 CDBAA 207 79 80 3 6.66 TBAA 251 79 50 24 6.93 色谱与质谱条件的优化 优化色谱质谱条件以得到最佳的分离度和灵敏度。图1显示了优化后的典型的色谱图，在12分钟内完成了11种卤乙酸类消毒副产物的分析。 图1.饮用水中11种卤乙酸类消毒副产物(2ug/L)色谱图 线性范围与方法准确度和精密度 所有化合物在 0.02-100.0 ug/L 的浓度范围内均得到良好的线性关系，线性回归系数R”均达到0.997。选择饮用水作为基质来评价方法的准确度和精密度，分别配制浓度为1 pg/L 和100 pg/L 卤乙酸基质加标样品，平行制备分析6次，计算回收率和相对标准偏差 (RSD)。实验结果如表3所示，各化合物的回收率在84%-107%之间， RSD 均小于14%。以上结果证明该方法准确、可靠。 表3.饮用水中卤乙酸加标回收率与精密度(n=6) 1 pg/L 100 pg/L 回收率(%) RSD (%) 回收率(%) RSD (%) MCAA 98.0 7.0 106.7 7.4 MBAA 100.9 9.2 95.6 4.9 DCAA 100.5 0.8 94.0 3.3 DBAA 98.0 2.4 96.2 2.1 TCAA 97.4 4.2 98.7 4.7 TBAA 101.5 13.7 104.2 4.7 BCAA 99.3 4.4 98.2 3.2 BDCAA 100.7 1.7 96.4 4.0 CDBAA 98.4 9.0 88.5 12.6 Br03- 84.1 3.5 102.9 8.4 CIO3- 88.9 4.9 100.0 9.4 实际样品分析 采用上述方法检测巴西圣保罗城收集的6个饮用水样品，实验结果如表3所示。其中 TCAA 在检出的卤乙酸中含量最高，超过总浓度的80%。实际样品中 S6 样品中的卤乙酸总量超过USEPA 规定的 60 pg/L 的限量标准。 表3.圣保罗城6个饮用水样水检测结果 (ug/L) S1 S2 S3 S4 S5 S6 MCAA 0.45±0.01 0.41±0.01 - 1.29±0.06 5.75±0.16 MBAA - 0.07±0.01 0.37 +0.01 DCAA 0.74±0.04 - 0.27±0.03 1.67±0.02 5.59±0.03 44.81±0.93 DBAA - - 0.06±0.01 0.48±0.01 TCAA 34.90±0.12 25.47±0.73 31.91±0.11 1.02±0.03 31.83±0.35 32.56±0.35 TBAA 0.25±0.01 0.16±0.02 0.28±0.03 0.28±0.04 0.13±0.02 BCAA - 0.15±0.01 0.85±0.03 6.69±0.20 BDCAA 4.19±0.05 3.59±0.05 3.76±0.04 0.13±0.01 4.63±0.05 4.48±0.03 CDBAA 0.57±0.03 0.46±0.02 0.70±0.04 0.02±0.004 0.54±0.03 0.47±0.04 BrO3- - - - - CIO3- 1.56±0.01 2.06±0.04 0.43±0.02 0.62±0.06 1.33±0.05 1.09±0.07 总计 41.10 29.70 37.30 3.00 45.10 95.70 本文介绍了一种简单、快速、准确可靠的液质方法，用于分析饮用水中的卤乙酸、溴酸盐和氯酸盐。该方法可以直接进样，无需任何制备或预富集步骤，从而大大提高了检测效率。该方法比 USEPA 557 方法快五倍，，回收率在84.2%-107%之间，RSD 低于 14%。实验结果表明，该方法准确可靠，适用于饮用水中卤乙酸、溴酸盐和氯酸盐的残留分析。 ( (详细数据参见5994-1275EN) ) 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中丙烯酰胺的测定 前言 本文介绍了一种利用液相色谱质谱联用系统来分析水中丙烯酰胺的方法。该方法简便易用，重现性良好，且灵敏度高，可以满足环境水中丙烯酰胺检测的实际要求。 色谱条件 色谱柱： Agilent Polaris Amide-C18(150 x3.0 mm，3 pm) 流动相：A)0.1%甲酸水溶液，B)乙腈，梯度见下表 流速：0.4 mL/min 柱温：30°C 进样量： 5uL 表1. 时间 (min) B(%) 0 0 3 0 3.5 90 6.5 90 7 0 10 0 质谱条件 离子源：ESI，正离子模式 毛细管电压：4000V 喷嘴电压：0V 雾化气：40 psi 鞘气温度：325°C 鞘气流速： 11L/min 干燥气温度：250°C 干燥气流速： 7 L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压(V) 碰撞能量 (V) 丙烯酰胺 72 55 30 10 丙烯酰胺 72 44 30 30 13C-丙烯酰安 73 56 30 10 色谱与质谱条件的优化 丙烯酰胺极性较强，出峰早，而常规C18柱基本不耐受纯水流动相，一般文献中多采用 AQ 柱对丙烯酰胺进行分析。本文比较了 Agilent Poroshell 120 SB-Aq (2.7 pm， 3.0 mm x 100mm)色谱柱和 Agilent PolarisAmide-C18 (3 pm， 150x3.0mm) 色谱柱。利用 SB-AQ 色谱柱进行分析时，丙烯酰胺的保留时间为1 min 左右，极性干扰物对丙烯酰胺会有一定的干扰；选择 Polaris 色谱柱，丙烯酰胺的保留时间为 3.0 min 左右，可大大减小极性干扰物的影响，获得较高的回收率。图1显示了色谱质谱条件优化后的典型的色谱图，在10分钟内完成了丙烯酰胺的分析。 图1.丙烯酰胺及内标物(20 pg/L)色谱图 线性范围 丙烯酰胺在 2-200.0 ug/L 的浓度范围内具有良好的线性关系，线性相关系数 R2 为0.9986，结果如图2所示。 图2.丙烯酰胺的校准曲线 结论 本文建立了一种采用三重四极杆液质联用系统测定环境水中丙烯酰胺残留的分析方法。该方法简便易用，线性范围宽，满足环境水源中丙烯酰胺的检测要求。 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中8种激素的测定 前言 本文开发了一种采用三重四极杆液质联用系统直接进样检测环境水中8种激素的方法。该方法采用 100uL 大体积进样以提高灵敏度，可以直接检测地表水和饮用水中含量为 ng/L级的激素，有助于节省前处理时间，同时提高检测效率和可靠性。 色谱条件 色谱柱： Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (150 mm x2.1 mm， 2.7 um)流动相： A)5 mmol/L 乙酸铵水溶液，B)乙腈，梯度见下表 流速：0.3 mL/min 柱温：25°C 进样量：100pL 表1. 时间(min) B(%) 0 30 10 100 11 100 后平衡时间：4 min 离子源：ESI，正/负离子模式 毛细管电压：3000V 喷嘴电压：0V(正离子模式)/500V(负离子模式)雾化气： 40 psi 鞘气温度：350°C 鞘气流速：11 L/min 干燥气温温：250°C 干燥气流速：8L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压(V) 碰撞能量(V) 保留时间(min) 极性 17-a-Ethinyles-tradiol 295.2 183/145 150 40/40 6 负 17-B-Estradiol 271.2 183/145 160 45/45 5.5 负 4-Androstene-3，17-dione 287.2 109/97 110 25/20 6.3 正 Equilin 267.1 223/143 140 35/35 6.1 负 Estriol 287.1 171/145 180 40/45 2.8 负 Estrone 269.2 183/145 150 40/40 6.2 负 Progesterone 315.2 109/97 120 25/20 8 正 Testosterone 289.2 109/97 120 25/20 5.6 正 色谱与质谱条件的优化 采用动态 MRM 采集方式，经色谱质谱条件优化后，i，可以在15分钟内完成了8种激素的分析。图1显示了自来水中8种激素 (100 ng/L) 的色谱图。 以图2所示的雌酮为例，在1.0-500.0 ng/L 的浓度范围内具有良好的线性关系，线性回归系数R²高于0.998。所有8种激素均具有良好的线性。 图2.雌酮校准曲线(1.0-500.0 ng/L) 结论 本文建立了一种直接进样测定水中8种常见激素的方法。该方法简便、快速、灵敏，可有效检测环境水样中的痕量的激素。 ( (详细数据参见5994-0317EN) ) 三重四极杆液质联用系统 水中双酚A的测定 本文提供了一种采用三重四极杆液质联用系统直接进样检测双酚A的参考方法，适用于环境水源中双酚A的检测。 色谱条件 色谱柱： Agilent Poroshell 120 EC-C18 (100 mm x3.0 mm， 2.7 pm)流动相： A)2 mmol/L乙酸铵水夜液，B)甲醇，梯度见下表 流速：0.4 mL/min 柱温：40°C 进样量：5uL 表1. 时间(min) B(%) 0 60 4.5 90 7 95 7.5 95 后平衡时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI，负离子模式 毛细管电电：4000V 喷嘴电压：1500V 雾化气：35 psi 鞘气温度：380°C 鞘气流速：10L/min 干燥气温度：350°C 干燥气流速：8L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压(V) 碰撞能量(V) 保留时间(min) Bisphenol A 227.1 133.1 120 24 4.12 Bisphenol A 227.1 212.1 120 16 4.12 典型色谱图与线性范围 图1显示了经色谱质谱条件优化后双酚A的典型色谱图。在0.5-100.0 pg/L 的浓度范围，双酚A具有良好的线性关系。 图1.双酚A (1.0pg/L)的 MRM色谱图 三重四极杆液质联用系统 AgilentTrusted Answers 水中药物和个人护理用品(PPCP)的高通量检测 本文采用安捷伦三重四极杆液质联用系统，建立了测定环境水中药物和个人护理用品(PPCP)的分析方法。文中利用直接进样方式，应用动态 MRM 采集模式实现了同时对环境水中377 种 PPCP 快速准确的筛查和定量分析，包括抗生素类104种、兴奋剂类29种、激素类46种、精神类48种、解热镇痛类28种、抗过敏类13种、心血管类20种、农药48种以及其他类41种。该方法具有高通量、高灵敏度和覆盖范围广等特点，适合于环境行业 PPCP高通量的筛查和检测。 样品前处理 实际水样采用 0.22 um 滤膜过滤后直接进样20pL 进行分析。 色谱条件 色谱柱： Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18， 2.1 x100 mm， 1.8 pm 流速：0.3 mL/min 柱温：40°C 进样量：20uL 正离子模式流动相：A)含 5 mmol/L 乙酸铵和 0.02%乙酸的水溶液， B)乙腈，梯度见下表 表1. 时间 (min) B(%) 0 5 4.5 5 11 100 15 100 后平衡时间：3 min 负离子模式流动相： A)0.005%乙酸水溶液， B)乙腈，， 梯度见下表 表2. 时间 (min) B(%) 0 5 0.5 5 6 100 9 100 后平衡时间：3min 质谱条件 离子源：ESI，正/负离子模式 毛细管电压：3000V 喷嘴电压：0V(正)/2000V(负) 雾化气：40 psi 鞘气温度：380°C 鞘气流速：12L/min 干燥气温度：250°C(正)/200°C(负) 干燥气流速：16L/min (正) 12L/min(负) 动态多反应监测条件见应用简报5991-8660ZHCN 色谱与质谱条件的优化 通过分析混合标准溶液对仪器方法进行优化，可在20 min 内对377 种 PPCP 进行有效分离。各化合物响应良好，绝大多数化合物检测限可低于 10 ng/L， 灵敏度足够高，无需进行样品富集。图1显示了100 ng/L PPCP 混合标准样品的提取离子色谱叠加图。 图1.377种 PPCP混合标准样溶液(浓度100ng/L) 在正离子模式(A)和负离子模式(B)下的MRM 色谱叠加图 线性范围 采用本文所述方法在10 ng/L-100 pg/L的浓度范围内对 377种 PPCP的线性相关性进行考察。如图2所示正离子模式下的阿特拉津和负离子模式下的布洛芬为例，校准曲线的线性相关系数(R)分别为 0.996 和0.995，线性关系良好，大多数化合物的线性相关系数均大于0.99。 图2.阿特拉津(A)和布洛芬(B)的校准曲线(浓度范围10-10'ng/L) 浓度为 100 ng/L 实际水样加标样品，连续进样7针，计算各化合物的相对标准偏差。结果如图3所示， 超过78%的化合物相对 RSD 小于20%，表明该方法具有良好的精密度。 图 3.100 ng/L 加标浓度下连续进样7针所得各化合物RSD 分布图 实际样品分析 实际水样取自北京某湖泊及周边水域，在10个不同位置分别取10个水样，采用 0.22 pm 滤膜过滤后直接进样 20 pL 进行分析检测。结果如表3所示，共检测到13种PPCP， 其中尼泊金甲酯浓度超过4 pg/L，林可霉素、舒必利、副黄嘌呤、阿特拉津、氟康唑、氟苯尼考在部分水样中的浓度超过 100 ng/L。 浓度为 100 ng/L 实际水样加标样品，按方法进样定量分析；计算回收率。结果如图4所示，大多数样品回收率在80%-120%之间，回收率良好。 <50% 50-80% 80-120% 120-160% >160% 图4.100 ng/L加标浓度下各化合物回收率分布图 本文采用 Agilent 1290 Infinity II液相色谱/6495三重四极杆液质联用系统，应用动态 MRM 方式成功实现了同时对环境水中377种 PPCP的高灵敏度、快速、简单、准确的筛查和定量分析。本方法通过直接进样方法即可满足常规检测要求，有助于省掉繁琐的样品富集和净化步骤，从而显着提高样品分析通量。 样品编号 扑热息痛 2-氨基苯 并咪唑 副黄嘌呤 舒必利 可铁宁 林可霉素 氟康唑 磺胺甲 恶唑 氯苯那敏 莠去津 益康唑 尼泊金甲酯 氟甲砜霉素 1 5.8 45.8 47.0 19.4 82.6 43.0 24.5 13.5 84.0 43.4 9336.2 68.2 2 - 4.7 45.3 11.5 10.7 31.9 64.3 17.8 12.9 70.6 14.2 4548.3 31.0 3 4.3 - - 3.6 8.3 10 56.5 10.0 18.1 46.9 7.3 8265.4 9.1 4 4.9 2.7 38.4 23.8 19.5 51.9 144 17.1 11.9 24.0 8.7 9906.1 15.6 5 - 9.5 29.5 53.8 28.8 104 69.6 49.1 10.6 54.6 14.7 4289.8 127.4 6 1.7 3.8 43.8 22.8 20.5 66.8 53.1 - 11.5 33.2 22.6 9879.2 12.6 7 - 7.1 69.1 90.2 23.8 160 79.9 40.7 14.2 62.6 5.4 7010.9 279.5 8 92.7 8.3 144.7 88.4 25.7 164.3 85.9 39.8 40.1 55.9 10.0 6581.0 146.9 9 6.1 42.5 52.7 20.3 99.8 64.2 33.9 11.2 31.3 8.9 5288.0 35.5 10 4.5 21.2 285.5 137.4 6.6 560.7 70.7 54.1 40.1 240.8 5.7 5420.9 197.9 在线固相萃取液质联用系统(Online SPE LC-MS) 在线固相萃取液质联用系统 Agilent(Online SPE LC-MS)Trusted Answers 在线 SPE-UHPLC/MS/MS检测水中的新兴有机污染物 本文介绍了一种将在线 SPE 与超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC/MS/MS) 联用的方法，用于同时测定环境水基质中的新兴有机污染物(EOC)。共筛选出87种污染物作为目标化合物，包括58种药物和个人护理用品(PPCP)、22种全氟烷基物质 (PFAS)和7种有机磷阻燃剂 (PFR)。通过优化在线固相萃取样品富集参数和 LC/MS 分离检测条件，对该方法在饮用水、地表水和污水处理出水等环境水中的87种化合物进行了性能评价。优化后的方法具有良好的线性、分析灵敏度、准确度和精密度，可有效地用于环境水基质中新兴有机污染的高通量筛查。 色谱条件 分析柱： Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (3.0 mm x 50 mm， 2.7 um)富集柱： Agilent PLRP-S (2.1x12.5 mm，15-20 um) 上样流动相：0.05%甲酸水溶液 上样流速：1 mL/min 上样时间：4 min 流动相： A)0.05%乙酸水溶液，B)乙腈，梯度见下表 流速：0.3 mL/min 柱温：30°C 进样量：1.8mL 表1. 时间(min) B(%) 0 5 4 5 9 40 16 100 21 100 后平衡时间：9 min 质谱条件 离子源：ESI，正/负离子模式 毛细管电压：3500V 喷嘴电压：500V 雾化气：45psi 鞘气温度：350°C 鞘气流速：7L/min 干燥气温度：300°C 干燥气流速： 7L/min 动态多反应监测条件见应用简报 5994-1819EN 图1.安捷伦在线 SPE液质联用系统示意图 采用两位十通阀控制两个 SPE 柱交替进行样品富集和分析 固相萃取富集柱的选择 采用标准样品在三种pH值(3、7和10)下，对六种在线固相萃取富集柱的适用性进行评估。按目标化合物在物理化学性质方面的差异，选出20种具有代表性的化合物来展示每个富集柱的回收结果。实验结果如图2所示。在不同 pH值下，利用 PLRP-S 能够使大多数化合物获得最佳回收率。因此，选择PLRP-S作为富集柱。 图2.在不同 pH值下六种固相萃取富集柱的绝对回收率 富集、色谱和质谱条件的优化 在优化后的在线固相萃取和色谱质谱条件下，87种目标化合物可有效的分离检测，保留时间在7-20 min 之间，典型的MRM 色谱叠加图如下图3所示。 图3.纯水中所有87种分析物(100 ng/L) 的叠加 MRM 色谱图 为减小基质对定量准确度的影响，选择同位素内标稀释法进行定量。方法的线性在纯水中进行评估，实验结果如图4A所示，在1.0-200 ng/L 的浓度范围内，87种目标化合物中85种化合物的线性回归系数(R)高于0.98，线性关系良好， 可用于定量分析。双氯芬酸 (DLOA) 和 N，N-二乙基间甲苯胺 (DEET)的线性不理想，其原因在于纯水中这两种化合物的背景很高，因此只能对其进行定性分析。 在饮用水 (DW)、地表水 (SW)和污水处理出水(WWE)三种环境水基质中对方法的灵敏度进行了评价。如图4B所示， 对于所有可定量测量的85种化合物(不包括 DLOA 和 DEET)，在饮用水中的定量限 (LOQ) 均低于 10 ng/L；在地表水中，7种化合物的定量限在 10-20 ng/L 之间，其余化合物的定量限则低于10 ng/L ；在污水处理出水中，15种分析物的定量限在10-20 ng/L 之间，其余分析物的定量限低于 10 ng/L。在饮用水、地表水和污水处理出水中，85种化合物中分别有76%、65%和48%的化合物的定量限低于 5 ng/L。这些结果表明，该方法具有出色的灵敏度。 通过测量三种水基质中添加 25 ng/L 和 100 ng/L标准品来评估方法的准确度和精密度，结果如图4C所示。从图中可以看出，在饮用水、地表水和污水处理出水中，87%以上的化合物的回收率在60%-130%之间，相应的 RSD 在20%以内。回收率较低的分析物主要是长链 PFAS、PFR 和几种极性化合物。结果表明该方法具有良好的准确度。 图4.方法评估实验结果：A)线性(1.0-200 ng/L)； B) 饮用水(DW)、地表水(SW)和污水处理出水(WWE)中的定量限； C) 25 ng/L 和100 ng/L加标浓度下的回收率 结论 ( 本文介绍了一种同时测定环境水中的87种新兴有机污染物(EOC) 的方法，该方法将在线 SPE 与超高效液相色谱-串联质 谱 (UHPLC/MS/MS) 联用，具有高通量、线性范围广、准确灵 敏等特点，能够可靠地应用于实际水样的分析。该方法可推广到水中其他有机污染物的物线 SPE 分析。 ) ( (详细数据参见5994-1819EN) ) 在线固相萃取液质联用系统 Agilent(Online SPE LC-MS)Trusted Answers 高灵敏度检测水中的痕量有机污染物 农药、药物、个人护理产品和工业化学品在日常生活中应用广泛，对水源造成了极大的污染。全球各地的法规对这些有机污染物的限值要求(尤其是在饮用水中)可能在亚 ppt 至低 ppt (ng/L) 范围之间波动。为确保这种低浓度定量分析， LC/MS分析前通常需要进行样品富集。典型的离线富集方法是使用固相萃取或液相萃取大体积样品。这一过程不仅耗时，还会产生大量化学废弃物。在线 SPE 解决方案提供了自动化在线样品富集，极大的提高了检测的灵敏度和工作效率。本研究对一组包含51种污染物的化合物进行分析。所研究的分析物包括农药、农药代谢物、药品、全氟化合物、增塑剂等。在负离子模式下分析约25%的化合物，本文采用在线 SPE-液质联用系统，在正负离子快速切换电喷雾电离模式下，对51种化合物进行了检测。通过线性、检测限(LOD)和相对标准偏差(RSD) 几方面证明了该系统的出色性能。 色谱条件 分析柱： Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (3.0 mm x250 mm， 2.7 um) 富集柱： Agilent PLRP (2.1x12.5mm，15-20 um) 上样流动相：0.1%甲酸水溶液 上样流速：1.5mL/min 上样时间：4 min 流动相：A)含0.01%乙酸、1 mmol/L 乙酸铵和 0.1 mmol/L氟化铵的水溶液；B)含0.01%乙酸的乙腈溶液；梯度见下表 流速：0.4mL/min 柱温：40°C 进样量： 900 pL 表1. 时间 (min) B(%) 0 2 4 2 6 40 16.5 98 18 98 后平衡时间：3min 质谱条件 离子源：ESI，正/负离子模式 毛细管电压：4000V(正离子模式)/3500V(负离子模式) 喷嘴电压：500V 雾化气：45psi 鞘气温度：375°C 革气流速：12L/min 干燥气温度：250°C 干燥气流速： 11 L/min 图1.安捷伦在线 SPE 液质联用系统示意图 采用两位十通阀控制两个 SPE 柱交替进行样品富集和分析 方法线性 在乙腈中配制浓度为 0.5 mg/L的储备液，包含除含氟化合物以外的所有分析物。将14 uL 上述储备液以及 3.5 uL 含氟化合物(2mg/L储备液)加入 13.98 mL Millipore 水中，使加标浓度达到500 ng/L。使用该溶液配制8个校准浓度(200、100、50、20、10、5、2.5和1.25 ng/L)。每个浓度重复进样六次，采集相应数据。采用线性拟合和1/x加权得到的大多数校准曲线的R²值优于0.99。图2显示了六种典型化合物的校准曲线。 图2.典型化合物的校准曲线 方法灵敏度 图3显示了水中浓度为 10 ng/L 的51种化合物的色谱图。许多化合物可以在低于1.25 ng/L 的最低校准点的浓度下被检出。 图3.10ng/L标准样品 MRM 色谱图 定量限(LOQ)由信噪比(S/N) 高于10的最低校准点进行计算，在六次重复测定中至少有四次定量准确度要在80%-120%之间。图4显示了51种化合物检测灵敏度分布图。可以看出，86%的分析物能够在低于10 ng/L 的浓度下得到准确定量。 <5ppt 5-10 ppt 10-20 ppt >20ppt 图4.51种化合物的定量限分布图 方法精密度 在1.25-500 ng/L的浓度范围内，采集六次重复进样的结果，计算各化合物定量限下的 RSD (六次重复测定中至少四次测定结果的准确度为80-120%)。实验结果如图5所示。除一种化合物以外，所有 RSD 均低于20%，反映出两个交替使用的富集小柱性能的一致性。 图5.51种化合物精密度实验结果(n=6) 图6展示了在交替使用两个富集小柱的情况下，浓度为20ng/L 的样品6次分析的叠加色谱图。从该图中可以看出，多次进样的峰面积和保留时间具有良好的稳定性。 图6.20 ng/L样品六次分析所得到的叠加色谱图 实验结果表明，使用安捷伦在线 SPE 富集三重四极杆液质联用系统能够对水中的痕量有机污染物进行高灵敏度检测。在进样量为900 uL 的情况下，大多数分析物能够以低至 ng/L 级的浓度得到准确定量。除一种化合物外，均获得了优异的线性和精密度。该方法提供了与常规离线 SPE 方法相媲美的检测灵敏度，并节省了分析时间、工作量和溶剂用量。 ( (详细数据参见 5991-8767ZHCN) ) 在线固相萃取液质联用系统(Online SPE LC-MS) 饮用水、地表水和地下水中的痕量除草剂的检测 前言 本文介绍了采用安捷伦伦线 SPE 富集液质联用系统分析水中27种痕量除草剂的方法。该方法符合德国 DIN 标准38407-36，适用于测定与地表水和饮用水质量相关的中性除草剂和除草剂代谢物。 色谱条件 分析柱： Agilent ZORBAXEclipse Plus C18 (2.1x150 mm， 3.5 um)富集柱： Agilent PLRP (2.1 x12.5 mm， 15-20 um) 上样流动相：水 上样流速： 1mL/min 上样时间：2min 流动相：A)含0.1%甲酸和 5 mmol/L甲酸铵的水溶液；B)含0.1%甲酸、5 mmol/L甲酸铵和5%水的乙腈；梯度见下表 流速：0.4mL/min 柱温：30°C 进样量：900uL 表1. 时间(min) B(%) 0 2 2 2 2.5 2.5 12 100 22 100 后平衡时间：10 min 质谱条件 离子源：ESI，正离子模式 毛细管电压：3500V 喷嘴电压：500V 雾化气：45 psi 鞘气温度：300°C 鞘气流速：12L/min 图1.安捷伦在线 SPE 贡联联用系统示意图 采用两位十通阀控制两个 SPE 柱交替进行样品富集和分析 干燥气温度：260°C 干燥气流速：9L/min 表2.多反应监测条件 母离子 子离子1 碰撞能量1(V) 子离子2 碰撞能量2(V) 碎裂电压(V) 保留时间(min) 2，6-二氯苯甲酰胺 191 109 40 172.9 16 100 6.5 甲草胺 270.1 238.1 4 45.1 28 75 11.2 莠去津 216.1 174 16 104 28 105 8.89 脱乙基莠去津 188.1 104 28 68.1 36 105 6.73 脱异丙基莠去津 174.1 104.2 24 68.1 32 95 6.12 啶酰菌胺 343 307 16 271 32 130 10.66 除草定 261 205 8 188 28 105 7.74 卡马西平 237.1 194.1 16 192 20 135 7.93 毒虫畏 359 155 8 99 28 70 11.41 杀草敏 222 92.2 24 104.2 20 125 6.73 杀草敏 160 130.1 24 88 36 120 5.51 毒死蜱 350 97 32 198 16 95 13.53 绿麦隆 213.1/215 72.1 20 72.1 20 100 8.66 敌草隆 233.1/235 72 16 72 16 100 9.05 甜菜呋 304.1 121.1 27 161.2 31 85 10.84 异丙隆 207.1 72.1 20 165 8 85 8.92 环草定 235.1 153.1 12 136.1 36 70 8.09 甲霜灵 280.2 220 8 192.1 16 70 8.89 苯嗪草酮 203.1 175.1 12 104.1 24 105 6.57 吡唑草胺 278.1 210.1 4 134.1 20 85 9.54 异丙甲草胺 284.1 252.1 12 176.1 24 90 11.14 嗪草酮 215.1 187.2 25 84 29 105 8.32 二甲戊乐灵 282.2 212.2 4 194 16 125 13.57 喹氧灵 308 196.9 36 262 52 150 13.19 西玛津 202.1 104 24 124 16 120 7.94 特丁津 230.1 174 12 104 32 105 10.05 脱乙基特丁津 202.1 146 12 104 28 80 8.06 结果与讨论 方法线性 优化色谱质谱条件，测定四种水样：((包括自来水、地下水和两种不同地表水)中的27种除草剂。图2显示了27种除草剂的典型色谱图(自来水标准溶液， 50 ng/L)。 配制含有27种除草剂的1000 ng/L 储备液，逐级稀释制备一系列浓度最低为 10 ng/L的工作溶液，分别进样分析以绘制校准曲线。大多数化合物在 10-500 ng/L 的浓度范围内具有极好的线性，相关系数高于 0.999。 图2.27种除草剂标准样品(50 ng/L)的 MRM 色谱图 方法准确度和精密度 分别采用自来水、地下水和地表水配制不同浓度的加标样品，平行分析4次，计算方法的加标回收率和相对标准偏差 (RSD)。结果列于表3中。从中可以看出，所分析的各种水样中的绝大部分除草剂均具有良好的表观回收率。在实验中交替使用2个捕集柱富集样品，各次运行之间的重现性非常出色，峰面积RSD 普遍低于5%。 自来水 地下水 加标浓度 (ug/L) 回收率(%) RSD(%) 加标浓度(ug/L) 回收率(%) RSD(%) 杀草敏 0.08 111 4.3 0.05 128 3.8 2，6-二氯苯甲酰胺 0.05 100 5.0 0.16 123 3.1 脱异丙基莠去津 0.1 112 1.7 0.08 123 1.7 苯嗪草酮 0.08 115 1.9 0.1 120 1.4 杀草敏 0.1 98 1.2 0.12 77 1.0 脱乙基莠去津 0.05 106 1.0 0.16 89 1.7 嗪草酮 0.08 115 1.9 0.1 110 1.2 除草定 0.1 129 2.0 0.08 118 2.6 西玛津 0.08 113 1.5 0.1 102 2.4 卡马西平 0.1 106 0.4 0.05 107 1.4 脱乙基特丁津 0.05 116 0.9 0.16 111 0.3 绿麦隆 0.08 113 0.9 0.1 114 0.3 吡唑草胺 0.08 119 0.3 0.05 124 1.3 甲霜灵 0.05 112 1.0 0.08 116 0.9 莠去津 0.08 130 1.6 0.05 161 2.2 环草定 0.05 111 1.1 0.12 107 2.1 异丙隆 0.12 116 0.9 0.05 114 1.5 敌草隆 0.08 119 0.9 0.05 114 1.0 甜菜呋 0.1 104 6.8 0.12 117 12.3 啶酰菌胺 0.08 122 1.1 0.1 119 2.2 特丁津 0.1 127 0.6 0.12 128 0.6 甲草胺 0.08 120 0.5 0.1 129 1.3 异丙甲草胺 0.08 115 0.3 0.16 118 0.9 毒虫畏 0.05 124 1.2 0.12 121 2.1 毒死蜱 0.12 35 6.9 0.05 108 0.8 喹氧灵 0.08 96 8.9 0.16 76 3.8 二甲戊乐灵 0.1 139 8.6 0.12 103 1.5 表3.27种除草剂的准确度和精密度实验结果(续) 地表水1 地下水2 加标浓度(ug/L) 回收率(%) RSD(%) 加标浓度(ug/L) 回收率(%) RSD(%) 杀草敏 0.319 87 3.7 0.297 57 13.2 2，6-二氯苯甲酰胺 0.1 109 3.3 0.092 84 9.9 脱异丙基莠去津 0.16 105 0.9 0.05 85 2.5 苯嗪草酮 0.05 102 2.1 0.18 79 2.5 杀草敏 0.05 94 1.8 0.16 73 7.4 脱乙基莠去津 0.1 132 1.8 0.14 116 4.1 嗪草酮 0.18 102 1.5 0.062 98 2.4 除草定 0.05 110 5.3 0.3 92 5.2 西玛津 0.16 107 2.0 0.05 99 2.2 卡马西平 0.137 121 1.2 0.274 123 0.8 脱乙基特丁津 0.08 115 2.1 0.1 111 0.8 绿麦隆 0.068 110 0.6 0.16 103 0.4 吡唑草胺 0.16 132 1.1 0.1 118 0.2 甲霜灵 0.1 115 1.2 0.353 113 1.0 莠去津 0.3 117 1.0 0.1 107 1.7 环草定 0.18 100 1.1 0.1 92 2.6 异丙隆 0.117 111 0.8 0.182 103 1.4 敌草隆 0.3 120 1.0 0.11 110 1.5 甜菜呋 0.05 112 11.9 0.3 94 3.8 啶酰菌胺 0.16 120 1.5 0.108 107 1.2 特丁津 0.05 127 0.8 0.16 113 1.4 甲草胺 0.3 124 1.5 0.05 109 2.7 异丙甲草胺 0.05 120 1.2 0.1 106 1.7 毒虫畏 0.16 122 1.5 0.1 109 3.4 毒死蜱 0.1 94 2.0 0.16 79 3.6 喹氧灵 0.1 59 4.7 0.05 44 6.0 二甲戊乐灵 0.16 87 2.2 0.05 64 7.5 地下水和地表水是饮用水生产的来源，监测除草剂浓度十分重要。本文介绍了一种安捷伦在线 SPE 富集液质联用系统测定水中除草剂的方法。实验证明，对于不同水源中的大多数目标化合物，该系统能够实现高达95%的表观回收率，并可获得高度重现的结果，大多数化合物刎峰面积精度小于5%。自动富集处理使常规的三重四极杆质谱仪能获得更低的检测限并快速完成水样分析，无需进行耗时耗力的样品前处理或使用 SPE柱进行离线富集。 ( (详细数据参见 5991-2405CHCN) ) 在线固相萃取液质联用系统(Online SPE LC-MS) 水中微囊藻毒素的高灵敏度检测 本文介绍了采用安捷伦在线 SPE 富集液质联用系统检测6种微囊藻毒素的方法，包括 MC-RR、MC-HtyR、MC-LR、MC-HilR、MC-LA 和 MC-LF。 色谱条件 色谱柱： Agilent Poroshell 120 EC-C18， 3.0 × 100 mm， 2.7 um富集柱： Agilent PLRP， 2.1 × 12.5 mm， 15-20 um 上样流动相：水 上样流速：1mL/min 上样时间： 4min 流动相：A)0.1%甲酸和1 mmol/L 氟化铵的水溶液， B) 0.1%甲酸的乙腈溶液，梯度见下表 流速：0.4 mL/min 柱温：45°C 进样量：1800uL 表1. 时间(min) B(%) 0 30 4 30 12 95 14 95 后平平时间：3 min 质谱条件 离子源：ESI， 正离子模式 毛细管电压：4500V 喷嘴电压：500V 雾化气：35psi 鞘气温度：380°C 鞘气流速：12L/min 干燥气温度：350°C 干燥气流速： 8L/min 表2.多反应监测条件 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压 (V) 保留时间 (min) LR 995.6 213 200 58 995.6 135 200 110 RR 520.1 213 140 35 520.1 135 140 30 LA 910.5 213 170 50 910.5 135 170 75 LF 986.5 213 170 68 986.5 135 170 78 HtyR 1059.6 106.7 220 147 1059.6 103 220 155 HilR 1009.6 106.7 210 128 1009.6 103 210 160 图1.安捷伦仑线 SPE 液质联用系统示意图 采用两位十通阀控制两个 SPE 柱交替进行样品富集和分析 结果与讨论 色谱与质谱条件的优化 经色谱质谱条件的优化，可在17分钟内完成对6种微囊藻毒素的高灵敏度定量分析。其中 MC-RR 选择[M+2H]2+作为母离子，其他化合物则采用[M+H]*作为母离子。图2为6种微囊藻毒素标样的 MRM 色谱图。 图2.6种微囊藻毒素标样(2ng/L) 的 MRM 色谱图 线性范围与灵敏度 采用在线 SPE 富集法，各化合物在2-2000 ng/L 的浓度范围内具有良好的线性。表3列出了各化合物的检测限和定量限，各化合物检测限在 0.05-0.5 ng/L之间，可实现饮用水和地表水中痕量微囊藻毒素的直接检测。 表3.六种微囊藻毒素的检测限和定量限 LOD (ng/L) LOQ (ng/L) RR 0.05 0.2 HtyR 0.2 1 LR 0.5 2 HilR 0.2 1 LA 0.2 1 LF 0.2 1 方法准确度与精密度 按定量限浓度在空白地表水样品中添加各化合物制备混合标样，，平行分析5次，考察方法的精密度。制备浓度为 2 ng/L的空白地表水加标样品来考察回收率。结果如表4所示。各微囊藻毒素的回收率均在 76.6%-86.3%之间， RSD 在 3.0%-8.8%之间。实验结果表明本方法能够准确、可靠地检测环境水中痕量的微囊藻毒素。 表3.微囊藻毒素回收率和重复性实验结果(n=5) 回收率(%) RSD (%) RR 80.4 5.8 HtyR 86.0 7.6 LR 76.6 5.3 HilR 86.3 8.8 LA 84.2 6.4 LF 82.4 3.0 结论 本文建立了在线SPE 直接进样定量测定微囊藻毒素 (MCs)的高灵敏方法，该方法可以直接检测地下水和饮用水中亚 ppt 含量的微囊藻毒素。 (详细数据参见 5994-0007EN) 在线 SPE 富集和直接进样法检测水中4种β内酰胺类抗生素 本文介绍了利用安捷伦在线SPE/ 直接进样自动切换液质联用系统分别采用在线富集和直接进样法检测水中4种内酰胺类抗生素(包括氨苄西林、阿莫西林、青霉素Ⅴ和哌拉西林)的方法。这些化合物是β内酰胺类抗生素的代表，它们的环境和生态毒理学性质是科学界的研究热点。 色谱条件 色谱柱： Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18， 50x2.1 mm，1.8um 富集柱： Agilent PLRP， 2.1x12.5mm，15-20 um 上样流动相：水 上样流速：1.5mL/min上样时间：2min流动相： A)27 nmol/L 氨水， pH8 ； B) 13 umol/L 甲酸的乙腈溶液，梯度见下表流速：0.4mL/min 柱温：40°C 进样量：1500uL 表1. 时间(min) B(%) 0 5 2 5 3 25 9 38 9.1 100 12 100 后平衡时间：2 min 离子源：ESI，，.正/负离子模式 毛细管电压：4500V 喷嘴电压：1000V正离子模式/1500V负离子模式雾化气：30 psi 鞘气温度：350°C 鞘气流速：11L/min 干燥气温度：200°C 干燥气流速：6L/min 表2.多反应监测条件 极性 母离子 碎裂电压(V) 子离子 碰撞能量 (V) 阿莫西林 负 364.1 125 319.9 4 222.9 8 206.4 20 氨苄西林 负 348.1 90 304.1 4 206.9 8 74 36 青霉素Ⅴ 负 349.1 90 207.9 4 113.9 16 92.2 32 哌拉西林 正 518.2 150 159.9 8 142.2 20 114.9 72 图1.在线 SPE/直接进样自动切换液质联用系统示意图：A)在线富集模式， B)直接进样模式 结果与讨论 直接进样法 经色谱质谱条件优化后，可在12分钟内得到4种β内酰胺类抗生素良好的分离和峰形。氨水可以增强化合物响应强度，而乙腈中添加的乙酸可以使极性小的哌拉西林和青霉素V的峰形尖锐对称。4种浓度分别为 100 ng/L的内酰胺类抗生素混合标样的色谱图(进样量100uL)如图2所示。按信噪比为3：1所对应的浓度来计算方法检测限。由表3所列的结果可知，各种抗生素的检测限在1-5 ng/L 之间。将1 pg/L抗生素混合标样重复分析12次以考察方法精密度，结果发现各种抗生素峰面积的相对标准偏差 (RSD) 均小于2%，具有优异的重复性。 图2.4种中酰胺类抗生素标样(100 ng/L)的 MRM色谱图 表3.4种内酰胺类抗生素直接进样法检测限和重复性实验结果 LOD (ng/L) RSD (%，n=12) 阿莫西林 5 1.8 氨苄西林 1 1.5 哌拉西林 2 1.3 青霉素V 1 1.8 采用在线 SPE 富集系统进样1.5mL， 经PLRP 小柱在线富集后采用与直接进样法相同的液质条件进样分析。图3是各种内酰胺类抗生素加标浓度为 100 ng/L 的水样通过在线 SPE 富集(进样1.5mL)和直接进样(进样100uL) 得到的色谱图对比，其中标记星号的色谱峰为通过直接进样法得到的色谱峰。 图3.在线 SPE富集(进样量1.5mL)和直接进样(进样量100pL) 的 MRM 色谱对比图(浓度100 ng/L， 星号表示直接进样结果) 与直接进样法相比，氨苄西林、哌拉西林和青霉素Ⅴ的回收率在 51.7%-94.1%之间，表明这三种抗生素在 PLRP柱上具有足够的保留，其中极性较低的哌拉西林和青霉素Ⅴ表现出较高的回收率。而阿莫西林的回收率仅为6.5%，且峰形展宽，因此该在线 SPE 富集法不适用于阿莫西林的检测。以信噪比为3：1计算方法检测限，由表4中所列的结果可知，各抗生素的检测限在0.2-0.5 ng/L 之间，为直接进样法的1/5 左右。图4显示了浓度为 0.5 ng/L 的氨苄西林、哌拉西林和青霉素Ⅴ的 MRM 色谱图。将 5ng/L 的抗生素混合标样重复分析5次，计算峰面积相对标准偏差 (RSD)，结果列于表4中。除阿莫西林外，各种抗生素的 RSD 在 1.9%-5.3%之间，略低于直接进样法。 表4.内酰胺类抗生素在线 SPE 富集法实验结果 LOD (ng/L) RSD (%，n=5) 回收率(%) 阿莫西林 - - 6.5 氨苄西林 0.2 5.3 51.7 哌拉西林 0.5 3.7 94.1 青霉素V 0.2 1.9 83.9 图4.氨苄西林、哌拉西林和青霉素V混合标样(0.5 ng/L) 的 MRM 色谱图 本文利用安捷伦伦线 SPE/直接进样自动切换液质联用系统分别采用在线富集和直接进样法检测水中的4种内酰胺类抗生素。实验结果表明，直接进样法检测限在1-5ng/L 之间，且具有优异的精密度。而在线 SPE 富集法通过大体积进样在线富集，可以取得更高的检测灵敏度(除阿莫西林外)，适用于水中痕量抗生素的高灵敏度高通量检测。 ( (详细数据参见5991-8017EN) ) 高分辨液质联用系统 高分辨液质联用系统 使用UHPLC/Q-TOF MS 和精确质量数据库与谱库筛查和鉴定污水处理厂出水中的新兴污染物 前言 本文介绍了一种采用高分辨质谱和环境污染物筛查精确质量谱库来筛查城市污水处理厂(WWTP)出水中的农药、药物和个人护理用品及其代谢物和转化产物的方法。采用该方法筛查了中欧四家污水处理厂的出水样品，实验结果清晰地显示了高分辨质谱的筛查工作流程和环境专用数据库在监测筛查复杂环境样品中潜在污染物工作中的价值。 样品前处理 水样使用玻璃纤维过滤器过滤，储存于-20°C下。测量前将样品解冻，转移至HPLC样品瓶中。 色谱条件 色谱柱： Agilent ZORBAX RRHD SB-Aq， 2.1x150 mm， 1.8 um 流动相：A) 含1 mmol/L 乙酸铵和 0.1%乙酸的水溶液；B) 0.1%乙酸的乙腈溶液；梯度见下表 流速：0.4mL/min 柱温：40°C 进样量：100uL 表1. 时间(min) B(%) 0 0 2 0 14 98 16 98 19 0 离子源：ESI，正/负离子模式 毛细管电压：4500V(正) /3500V(负) 喷嘴电压：500V(正)/500V(负) 雾化气：30 psi 鞘气温度：350°C 鞘气流速：12L/min 干燥气温度：160°C 干燥气流速： 16 L/min 全离子 MS/MS模式： 质量范围：50-1200 amu 扫描速率：3幅谱图/秒 碰撞能量：0/20/40V 自动MS/MS模式： MS 质量范围：100-1200 amu MS/MS质量范围：50-1200 amu 扫描速率：5幅谱图/秒 碰撞能量：20V 污染物的靶向筛查与定量 采用优化后的色谱质谱条件，采集390种环境污染物标样的质谱数据，采用安捷伦 PCDL 数据库管理软件建立靶向数据库，收录各化合物名称、分子式、保留时间和标准二级谱图等信息。利用建立好的靶向数据库，对污水处理厂出水样品中的污染物进行靶向筛查和定量分析。在390种目标化合物中，在正离子化模式下检出315种化合物，在负离子化模式下检出75种化合物。通过直接进样 100 uL 至 UHPLC Q-TOF MS 系统，加标自来水样品中60%以上的化合物可以在10 ng/L 或更低的浓度下检出，35%的化合物在10-100 ng/L的浓度范围内被检出，而仅有5%的化合物在200 ng/L 或更高的浓度下被检出。对于大多数目标化合物， 可使用一个或多各特定的碎片离子作为定性离子，并且分子离子和碎片离子的质量准确度通常优于5 ppm。图1显示了一些重要污染物实例的提取离子色谱图、质谱图和校准曲线。 图1.红霉素(正离子化模式)、布洛芬(负离子化模式)、双氯芬酸(负离子化模式)和喹氧灵(正离子化模式)的分子离子和碎片离子的 EIC 色谱图、质谱图以及校校曲线 使用环境污染物筛查 PCDL 数据库进行疑似污染物筛查的工作流程 采用安捷伦环境污染物筛查 PCDL 数据库对污水处理厂的出水样品进行更广泛的疑似污染物筛查。在定性分析中，除精确质量、同位素分布和参考保留时间外，精确质量二级碎片信息对于鉴定潜在的候选物也是至关重要的。在 Agilent MassHunter工作站中，可采用全离子 MS/MS 和自动 MS/MS 两种工作流程，自动完成数据采集、提取分子离子和二级质谱，并与数据库中的参比谱图进行匹配，得到最终可靠的筛查结果。 在全离子 MS/MS 工作流程中，无需进行母离子选择，可在低能量通道中提取化合物精确质量，在高能量通道中采集不同碰撞能量下的化合物二级碎片。数据分析时采用工作站中分子式查找算法，结合环境筛查数据库提供的化合物分子式和标准二级质谱信息，自动进行精准质量、同位素分布、二级特征碎片和保留时间的匹配。图2显示了污水处理厂 Al 出水样品中缬沙坦的筛查结果。图2A 为低能量通道下得到的分子离子色谱图与碎片离子色谱图的叠加图。所有五个碎片离子均与母离子共流出。这一现象也体现在图2B的共流出曲线中。详细的鉴定结果(包括共流出得分)如图2C的化合物表格所示，当分子离子的 EIC 和至少一个以上的碎片离子表现出良好的共流出时，其共流出得分会大于90(满分100)，如同时分子离子峰和碎片离子峰的质量准确度优于 5 ppm， 即可实现准确可靠的鉴定。 图2.污水处理厂 AI的出水样品中缬沙坦的母离子和碎片离子的叠加谱图(A)、共流出曲线(B)以及包括共流出得分的化合物鉴定结果(C) 采用全离子筛查工作流程，在污水处理厂 Al 的出水中鉴定出血管紧张素受体阻滞剂坎地沙坦、厄贝沙坦和氯沙坦等，还鉴定出在之前工作流程中(靶向筛渣)未检出的药物和个人护理用品，包括甲红霉素、非索非那定、西他列汀、塞利洛尔和苯基苯并咪唑磺酸等化合物。此外，还检出九种其他农药(敌草胺、嘧霉胺、咪唑菌酮、环草定、二甲吩草胺、啶酰菌胺、地乐酚、咯菌腈和戊菌唑)以及全氟辛酸 (PFOA)和几种有机磷酸酯(磷 酸三乙酯、磷酸三(2-氯乙基)酯、磷酸三丁酯和磷酸三苯酯)。在 AZ 样品中，检出了缬沙坦、坎地沙坦、厄贝沙坦、非索非那定、甲红霉素、文拉法辛及其代谢物去甲基文拉法辛、西酞普兰、西替利嗪、氯吡格雷、利托那韦和全氟壬酸。 自动MS/MS筛查工作流程 自动 MS/MS 筛查工作流程通过采集目标化合物的精确质量MS/MS 谱图并与谱库中的标准谱图进行匹配来验证化合物，适用于污染物含量低，碎片离子响应强度低，易受基质干扰以及没有标准谱图的完全未知化合物的定性分析等情况。图3显示了使用自动 MS/MS 工作流程检测的化合物示例。在AZ出水中检出三聚氰胺，谱库得分为85.3，其具有若干工业用途，是农药环丙氨嗪的代谢物。在Al出水中检出苯甲地那铵，谱库得分为91.5，它是已知最苦的化合物，在个人护理用品中用作苦味剂。 图3.利用自动 MS/MS工作流程测得的污水处理厂出水样品AZ中三聚氰胺的 MS/MS质谱对比图(A)和出水样品AI中苯甲地那铵的 MS/MS 质谱图(B)的对比 结论 本文开发了一种筛查和定量分析水样中的环境污染物的方法，并将其应用于污水处理厂出水检测中。该方法利用安捷伦环境污染物筛查 PCDL 数据库、全离子 MS/MS 及自动 MS/MS 筛查工作流程，可快速准确地完成环境水样中的污染物筛查工作。 (详细数据参见5991-6627CHCN) 高分辨液质联用系统 对污泥中的环境污染物同时进行靶向定量和疑似物筛查 前言 本文介绍了一种使用 Agilent 6546 LC/Q-TOF MS 系统用于环境样品中的污染物定性定量分析的工作流程。该工作流程结合安捷伦环境污染物数据库及谱库(PCDL) 和新版 MassHunter 定量分析软件，可以同时进行靶向定量和未知物筛查分析，可一次进样在受监管化合物的定量分析的同时，筛查数千种新型污染物。 色谱条件 色谱柱： Agilent InfinityLab Poroshell EC -C18， 2.1 × 100 mm， 1.9 um 流动相：正离子模式：A)0.1%甲酸水溶液， B) 0.1%甲酸乙腈溶液负离子模式： A)1 mmol/L 氟化铵水溶液，B)乙腈 梯度见下表 流速：0.4mL/min 柱温：30°C 进样量：1pL 表1. 时间(min) B(%) 0 2 0.5 2 15.5 100 19.5 100 20 2 后平衡时间：2 min 质谱条件 甲氧苄啶 离子源：ESI，正/负离子模式 毛细管电压：3500V 喷嘴电压：500V 雾化气：30 psi 鞘气温度：350°C 鞘气流速：12L/min 干燥气温度：225°C 干燥气流速：12 L/min 采集模式：全离子 MS/MS 质量范围：50-1050m/z 扫描速率：8幅谱图/秒 图2.目标化合物的提取离子色谱图 碰撞能量：0/10/20/40V 数据分析工作流程 在 Agilent MassHunter 工作站中，首先采用优化后的色谱质谱条件，在正负离子模式下采集样品的全离子 MS/MS 数据。然后在定量软件中从安捷伦环境污染物数据库(包含1451种环境污染物信息))1中导入化合物，设置定量方法，每个化合物以母离子为定量离子，至少两个 MS/MS 碎片离子为定性离子。在定量软件中同时进行靶向化合物的定量分析和疑似物筛查，最后生成结果报告。整个工作流程如图1所示。 图1.靶向定量分析和疑似物筛查工作流程 靶向定量分析 通过监测污泥中添加的23种具有代表性的环境污染物，可以评估6546 LC/Q-TOF 系统的定量分析性能。图2显示了目标化合物的典型提取离子色谱图。在0.1-1000 pg/L 浓度范围内考察目标化合物的线性范围，各化合物线性关系良好，校准曲线如图3所示。表2中显示了各化合物的检测下限 LLOD (信噪比 S/N>3)和校准曲线线性回归系数(R)。 图3.目标化合物的校准曲线 化合物名称 定量离子 R2 LLOD (pg/L) AHTN/吐纳麝香 [M+H]+ >0.99 5 卡马西平 [M+H]* >0.99 1 DEET/避蚊胺 [M+H]+ >0.99 0.5 双氯芬酸 [M+H]+ >0.99 25 二氢茉莉酸甲酯 [M+H]+ >0.98 50 依法韦仑 [M+H]+ >0.99 5 氟尼辛 [M+H]+ >0.99 0.5 氟西汀 [M+H]+ >0.99 0.5 氟伏沙明 [M+H]+ >0.99 1 拉莫三嗪 [M+H]+ >0.98 0.1 甲芬那酸 [M+H]+ >0.99 5 美托洛尔 [M+H]+ >0.99 0.5 咪康唑 [M+H]+ >0.99 0.5 甲基炔诺酮 [M+H]+ >0.99 2.5 磺胺甲恶唑 [M+H]+ >0.99 50 三氯卡班 [M+H]+ >0.98 50 甲氧苄啶 [M+H]+ >0.99 0.1 雌酮(E1) [M-H] >0.99 2.5 炔雌醇(EE2) [M-H] >0.99 5 2-苯基苯酚(邻苯基苯酚) [M-H] >0.99 0.99 吉非罗齐 [M-H >0.99 5 雌三醇 [M-H] >0.99 5 4-叔-辛基酚 (4-(1，1，3，3-四甲丁丁基)-苯酚) [M-H] >0.99 0.99 疑似物筛查 MassHunter 定量软件内置的LC Screener 工具可鉴定结果标注不同颜色，绿色表示母离子和子离子的质量精度及共流出、同位素分布和保留时间都符合设定的误差范围，确定为阳性检出的污染物。如图4所示，在负离子模式下检出了所有六种目标化合物，此外还检出了其他两种化合物。橙色表示该化合物需要审查，红色表示该化合物未在样品中检测到。 图4.MassHunter LC Screener工具可疑化合物筛查结果 图5是基质加标样品的部分汇总报告，显示了负离子模式下靶向定量和疑似物筛查结果。 图5.负离子模式下基质加标样品的汇总报告(部分) 结论 本工作流程结合环境污染物筛查数据库和 MassHunter 定量软件的新功能，可以同时进行目标化合物定量和未知物筛查分析，适用于环境样品中污染物的高通量筛查和定量工作。 ( (详细数据参见5994-0750ZHCN) ) 查找当地的安捷伦客户中心： www.agilent.com/chem/contactus-cn 免费专线： 800-820-3278，400-820-3278(手机用户) 联系我们： LSCA-China_800@agilent.com 在线询价： www.agilent.com/chem/erfq-cn www.agilent.com 安捷伦对本资料可能存在的错误或由于提供、展示或使用本资料所造成的间接损失不承担任何责任。 ( 本文中的信息、说明和技术指标如有变更，恕不另行通知。 ) 本文开发了一种采用三重四极杆液质联用系统直接进样检测环境水中 8 种激素的方法。该方法采用 100μL 大体积进样以提高灵敏度，可以直接检测地表水和饮用水中含量为 ng/L 级的激素，有助于节省前处理时间，同时提高检测效率和可靠性。