药品中盐酸去氧上腺素及其异构体检测方案

智能文字提取功能测试中

盐酸去氧上腺素及其对映异构体的手性拆分 去氧肾上腺素，为人工合成的拟肾上腺素类药物，主要是兴奋α受体，因此可以起到升高血压的作用，通过收缩血管使血压升高，它的作用比去甲肾上腺素较弱，但持续的时间较久，毒性较小。 本篇解决方案是提供一个盐酸去氧上腺素及其对映异构体的手性拆分方法。 分析过程 首先，我们使用键合相为β-环糊精的 Chiral CD-Ph 手性色谱柱(柱号：KYAD10196，填料批次：023)，使用25 mmol/L 磷酸二氢钾-甲醇为流动相对样品进行分析，结果如下，盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的分离度为4.32，能够得到良好的手性拆分。 HPLC Conditions： 色谱柱： Chiral CD-Ph S5； 4.6 mm i.d.×250 mm (KYAD10196) 流动相：25mmol/L磷酸二氢钾：甲醇=20：80 流 速：0.5 mL/min 温 度：30C 检测： PDA220nm 进样量： 10uL 浓度：客户提供：样品：1.4mg/mL(含有0.04%异构体)，溶剂为水。 注：峰上所标数字为分离度 然而随后我们发现，主峰保留时间随进样针数有往后漂移的现象，如下图所示。在20针之后保留时间的漂移变小，主峰保留时间基本稳定。 Minutes 在保留时间趋于稳定后，我们对样品溶液、标准对照溶液、异构体对照标准溶液和异构体加标样品分别进行了分析，结果如下图所示。在样品溶液中盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的分离度为4。 样品：1.4mg/mL(含有0.04%异构体) 标准对照：1.0247mg/mL 异构体对照： 50 ug/mL 异构体加标： 20 ug/mL (于1.26 mg/mL 盐酸去氧肾上腺素)；溶剂均为水。 随后，我们使用不同填料批次的 CD-Ph 色谱柱对样品溶液进行分析验证，其中色谱柱KYAD10161 (填料批次：022)在进样25针后，主峰保留时间基本稳定，此时盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的分离度为4.89，见下图。色谱柱 KYAD10159(填料批次：020)在进样20针后，主峰保留时间还是略有往后漂移，此时盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的分离度为5.81。 CD-Ph 色谱柱分析样品溶液结果(KYAD10161) CD-Ph 色谱柱分析样品溶液结果(KYAD10159) 由此可见，实验室使用 CD-Ph色谱柱，在不同填料批次的色谱柱上均可以实现盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的良好分离，分离度均在 4.0以上。 盐酸去氧上腺素及其对映异构体的手性拆分 去氧肾上腺素，为人工合成的拟肾上腺素类药物，主要是兴奋α受体，因此可以起到升高血压的作用，通过收缩血管使血压升高，它的作用比去甲肾上腺素较弱，但持续的时间较久，毒性较小。本篇解决方案是提供一个盐酸去氧上腺素及其对映异构体的手性拆分方法。 分析过程首先，我们使用键合相为β-环糊精的Chiral CD-Ph手性色谱柱（柱号：KYAD10196，填料批次：023），使用25 mmol/L磷酸二氢钾-甲醇为流动相对样品进行分析，结果如下，盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的分离度为4.32，能够得到良好的手性拆分。  HPLC Conditions ：色谱柱：Chiral CD-Ph S5; 4.6 mm i.d.×250 mm (KYAD10196)流动相：25 mmol/L磷酸二氢钾：甲醇= 20 ：80流   速：0.5 mL/min温   度：30 ℃检   测：PDA 220 nm进样量：10 µL浓  度：客户提供：样品：1.4 mg/mL（含有0.04%异构体），溶剂为水。注：峰上所标数字为分离度 然而随后我们发现，主峰保留时间随进样针数有往后漂移的现象，如下图所示。在20针之后保留时间的漂移变小，主峰保留时间基本稳定。  在保留时间趋于稳定后，我们对样品溶液、标准对照溶液、异构体对照标准溶液和异构体加标样品分别进行了分析，结果如下图所示。在样品溶液中盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的分离度为4。 样品：1.4 mg/mL（含有0.04%异构体）标准对照：1.0247mg/mL异构体对照：50 µg/mL异构体加标：20 µg/mL（于1.26 mg/mL盐酸去氧肾上腺素）；溶剂均为水。 随后，我们使用不同填料批次的CD-Ph色谱柱对样品溶液进行分析验证，其中色谱柱KYAD10161（填料批次：022）在进样25针后，主峰保留时间基本稳定，此时盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的分离度为4.89，见下图。色谱柱KYAD10159（填料批次：020）在进样20针后，主峰保留时间还是略有往后漂移，此时盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的分离度为5.81。  由此可见，实验室使用CD-Ph色谱柱，在不同填料批次的色谱柱上均可以实现盐酸去氧肾上腺素与其异构体之间的良好分离，分离度均在4.0以上。同时分析中发现，色谱柱平衡初期保留时间有逐渐往后漂移的现象，因此建议在进行该项目的分析时，最好使用流动相平衡24小时之后再进样分析，也可以边进样边平衡，直到保留时间稳定。