植物叶绿素中荧光参数检测方案(叶绿素)

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叶绿素荧光动力学技术可快速、无损伤的反映叶片光合功能内在特征。植物长期处于不良环境中，会出现叶绿素含量降低，光合作用速率下降，进而表现为荧光参数发生变化。通过分析植物叶绿素荧光参数，可以直接反应植物的光合能力、胁迫状况等重要的生理状态。因此，叶绿素荧光参数的测量一直为学者所重视。调制-饱和-脉冲式荧光仪的出现，使得叶绿素荧光野外测量变得方便，其中应用最广泛的叶绿素荧光参数为暗适应条件下的PSII最大光化学效率Fv/Fm与光适应条件下的光量子产量Y(II)。天津师范大学刘东华老师与山西大同云冈区园林管理处张慧敏老师研究了铝胁迫下蚕豆的叶绿素荧光参数和叶绿素含量变化。结果表明：铝胁迫抑制蚕豆幼苗生长，随着处理时间的延长和处理浓度的增加，铝毒害现象加重。蚕豆幼苗根系受铝毒害程度大于茎叶。铝胁迫对蚕豆叶片的色素含量和叶片的潜在光化学效率（Fv/Fm）影响不大。低浓度Al3+（10μM）胁迫对叶绿素荧光参数的影响较小，高浓度Al3+（100μM）胁迫则明显降低了叶片实际光化学量子效率(ΦPSⅡ)和表观光合电子传递速率（ETR）。试验选取大小均一饱满的蚕豆300粒，自来水浸泡2d，待种子露白后，置于黑暗条件下生根。根长约2~3cm时用蒸馏水培养，并移至阳光充足的地方生长。待蚕豆幼苗的第一对叶片完全展开，第二对叶片刚生长时，移入配制的不同浓度 Al3+（10μM、50μM、100μM）的Hoagland营养液中培养，对照组幼苗生长在 Hoagland营养液中。pH控制在5.5。每盆20株，营养液用气泵持续通气。每天观察处理期间蚕豆的生长情况，每隔5d更换处理液。试验结果：对照组及铝处理组叶片的Fv/Fm 值无显著性差异（P>0.05）。各 Al3+ 处理组与对照组叶片的Fv/Fm值在 0.80~0.83 之 间，属 正 常 范 围。100μM Al3+处理3d的蚕豆幼 苗 叶 片 中Fv’/Fm’值 降 低，与 对 照 组 及 10μM、50μM处理 组相比差异显著（P<0.05）。6d后，尽管各 Al3+处理组与对照组的 Fv’/Fm’值无显著差异（P>0.05），但Al3+处理组 Fv’/Fm’值低于对照组。50μM 和100μM Al3+ 处理9d后，幼苗叶片中的Fv’/Fm’值比对照组显著降低（P<0.05）（表１）。Al3+ 胁迫下，蚕豆幼苗叶片光合色素含量的变化如表２所示。结果表明，实验过程中，各 Al3+ 处理组的叶绿素ａ(Chla)、叶绿素ｂ(Chlb)含量以及叶绿素a+b含量与对照组相比无明显差异（P>0.05）。仪器推荐CCM-300叶绿素含量测量仪是使用叶绿素荧光比率对叶绿素含量测量的一种新型仪器。可以直接算出叶绿素含量mg/m2，与传统的化学测量方法和吸收性测量方法相比结果高度相关，测量结果可靠，不受叶片或样品大小、厚度和形状的影响，它可以对非常小的叶片以及难以测量样品的叶绿素含量进行非破坏性测量，测量迅速可靠。 PSK叶绿素荧光参数快速测量仪采用调制饱和脉冲原理，可测量植物的叶绿素荧光参数Fv/Fm,Y(II)，计算植物的光量子产额及相对电子传递速率，同时可测量PAR、叶温、相对湿度等环境参数。Fv/Fm测量仪，配套暗适应叶夹用于暗适应测量。测量参数：Y(II)或ΔF/Fm‘、ETR、PAR、T、FMS或FM’、Fs、α(叶片吸收)。监测模式：可使用电脑，长时间监测Y(II)、ETR、PAR、叶温、相对湿度及NPQ。1END1