化妆品中8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质检测方案(液质联用仪)

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SSL-CA22-046Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-618 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn LC-MS/MS 测定化妆品中8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质 LCMSMS-618 摘要：本文采用岛津三重四极杆液质联用仪建立了化妆品中8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质定量分析方法。该方法中，四种成分在1~100 ng/mL线性范围内线性良好，相关系数均大于0.999，准确度为91.6~108.6%。精密度实验中，2 ng/mL示准溶液重复分析6次，保留时间 RSD <0.3%；峰面积 RSD<3%。实际样品加标实验中，0.1和1 ug/g加标回收率分别为95.1~114.5%和85.2~88.6%。实验结果表明，该方法能快速准确地测定化妆品中8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质含量。 关键词：化妆品禁用物质8-甲氧基补骨脂素 呋喃香豆素 8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质均属于呋喃香豆素。呋喃香豆素是一类具有很强生物活性的天然产物，在自然界中广泛存在，分布于伞形科、芸香科、豆科、菊科等植物中。呋喃香豆素作为天然植物的光敏剂，能增加生物体内对 UVA 的敏感性。而对于正常人群来讲，呋喃香豆素的光敏性质对人体皮肤的一种伤害，如果将呋喃香豆素做为香料用于化妆品，会产生许多副作用，轻则引起皮肤红斑、浮肿、色素沉着过度、老化等，重则引起皮肤损伤，甚至皮肤癌。 由于呋喃香豆素类化合物的光化学毒性，该类化 合物的使用受到了严格的限制。我国《化妆品卫生规范》(2015年版)就规定了8-甲氧基补骨脂素等呋喃香豆素禁止在化妆品中使用。因此，建立化妆品中8-甲氧基补骨脂素等呋喃香豆素类成分的检测方法，对于化妆品的监督管理及维护消费者的健康和权益都具有重要意义。 本文参考《化妆品卫生规范》(2015年版)采用LC-MS/MS建立了8-甲氧基补骨脂素等4种呋喃香豆素的定量方法，方法准确、简便。 实验部分 1.1仪器 本实验采用岛津超高效液相色谱仪 LC-40D XS 与三重四极杆质谱仪 LCMS-8040 联用系统。 具体配置为： 输液泵： LC-40Dxs×2 系统控制器：SCL-40脱气机： DGU-403自动进样器：SIL-40Cxs 柱温箱： CTO-40S 色谱工作站： LabSolutions Ver. 5.99 1.2分析条件 液相色谱条件 色谱柱： Shim-pack GIST C18 (50 mm x2.1 mm l.D.， 2 um， P/N： 227-30001-02，岛津(上海)实验器材有限公司) 流动相：A相-超纯水，B相-甲醇 进样体积：2uL 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为50%，时间程序见表1。 表1 梯度洗脱时间程序 Time(min) Module Command Value 0.01 Pumps Pump B Conc. 50 4.00 Pumps Pump B Conc. 90 5.00 Pumps Pump B Conc. 90 6.00 Pumps Pump B Conc. 100 10.00 Pumps Pump B Conc. 100 10.10 Pumps Pump B Conc. 50 15.00 Pumps Pump B Conc. 50 质谱条件 离子源：ESI(+)接口电压：4.5kV雾化气：氮气3.0 L/min干燥气：氮气15.0 L/min DL温度：200℃ 加热块温度：400℃ 扫描模式：MRM MRM 参数：见表2 表2 MRM参数 No. 中文名 英文名 CAS. No. 离子对 Q1 Pre (V) CE Q3 Pre (V) 1 8-甲氧基补骨 298-81-7 217.15>202.15* -17.0 -21.0 -20.0 脂素 Methoxsalen 217.15>174.15 -17.0 -28.0 -17.0 2 5-甲氧基补骨 5-Methoxyp- soralen 484-20-8 217.15>202.15* -12.0 -22.0 -19.0 脂素 217.15>174.15 -12.0 -29.0 -30.0 271.20>203.15* -21.0 -11.0 -20.0 3 482-44-0 欧前胡内酯 Imperatorin 271.20>147.15 -21.0 -35.0 -27.0 4 三甲沙林 Trioxsalen 3902-71-4 229.20>142.15* -18.0 -25.0 -23.0 229.20>173.25 -18.0 -22.0 -17.0 注：*表示定量离子 1.3标准品配制 对照品储备液：称取标准品适量，用甲醇溶解稀释成1mg/mL； 标准溶液：取适量对照品储备液，用水稀释，配制浓度为：1、2、5、10、20、50、100 ng/mL 的标准溶液。1.4样品前处理 准确称取0.5 g膏霜类样品至15mL离心管中，加入10mL甲醇，混合均匀，超声20 min， 12000 r/min离心5 min， 0.22 um 滤膜过滤。 结果与讨论 2.1标准溶液色谱图 Q217.15>202.15(+) 8.41e3 Q217.15>202.15(+) 9.05e3 图1 四种化合物对照溶液色谱图 (1ng/mL) 2.2校准曲线 按1.2中的分析条件进行测定，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，采用外标法建立标准曲线，结果如图2所示。四种组分在1~100 ng/mL线性浓度范围内，线性相关性良好，线性相关系数大于0.999， 准确度为91.6~108.6% 图2四种组分校准曲线 2.3精密度实验 按照1.2分析条件，将浓度为2 ng/mL的对照品溶液重复分析6次。4个化合物保留时间 RSD 小于 0.3%，峰面积 RSD 小于3%，具体结果见表3所示。 表3 对照品溶液(2ug/mL)保留时间和峰面积精密度结果(n=6) No. 化合物 保留时间 RSD(%) 峰面积 RSD(%) 1 8-甲氧基补骨脂素 0.26 2.18 2 5-甲氧基补骨脂素 0.19 2.26 3 欧前胡内酯 0.20 2.80 4 三甲沙林 0.23 2.04 2.4样品含量测定 按照1.4中供试品溶液处理方法对某乳液样品进行处理，上机分析，样品中检出5-甲氧基补骨脂素，色谱图如图3所示，对实际样品进行加标实验，加标量为0.1和1ug/g，重复实验3次，定量及加标结果如表4所示。 图3 样品中5-甲氧基补骨脂素色谱图 表4 乳液样品中4种化合物定量及加标结果 No. 化合物 样品中浓度 (ug/g) 加标量：0.1ug/g 加标量：1ug/g 加标后平均 回收率(%) RSD(%) 加标后平均 回收率(%) RSD(%) 浓度 浓度 1 8-甲氧基补骨旨 / 0.104 103.8 3.30 0.880 88.0 2.83 2 5-甲氧基补骨脂 0.036 0.131 95.1 7.12 0.918 88.2 2.03 3 欧前胡内酯 / 0.101 101.2 2.27 0.852 85.2 3.19 4 三甲沙林 0.115 114.5 5.21 0.868 86.8 0.84 结论 本文采用岛津LCMS-8040三重四极杆液质联用仪建立了化妆品中8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质定量分析方法。该方法中，四种成分在1~100 ng/mL 线性范围内线性良好，相关系数均大于0.999， 准确度为91.6~108.6%。精密度实验中，2ng/mL标准溶液重复分析6次，保留时间 RSD <0.3%；峰面积RSD<3%。实际样品加标实验中，0.1和1 ug/g加标回收率分别为95.1~114.5%和85.2~88.6%。实验结果表明，该方法能快速准确地测定化妆品中8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质含量。 岛津应用云 本文采用岛津LCMS-8040三重四极杆液质联用仪建立了化妆品中8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质定量分析方法。该方法中，四种成分在1~100 ng/mL线性范围内线性良好，相关系数均大于0.999，准确度为91.6~108.6%。精密度实验中，2 ng/mL标准溶液重复分析6次，保留时间RSD <0.3%；峰面积RSD<3%。实际样品加标实验中，0.1和1 μg/g加标回收率分别为95.1~114.5%和85.2~88.6%。实验结果表明，该方法能快速准确地测定化妆品中8-甲氧基补骨脂素等4种禁用物质含量。