新鲜香港牡蛎（生蚝）酶解产物OH中蛋白质和脂肪的检测

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牡蛎酶解产物对产后缺乳症泌乳功能改善作用探究热带海洋学报 JOURNAL OF TROPICAL OCEANOGRAPHY海洋资源开发 doi: 10.11978/20220752023年 第 42卷 第 2期: 141–152 热带海洋学报142Vol. 42, No. 2 / Mar., 2023 http://www.jto.ac.cn 牡蛎酶解产物对产后缺乳症泌乳功能改善作用探究 ① 韦雪 1,秦小明 1, 2,谌素华 1,张锴佳 1,林海生 1, 2,郑惠娜 1, 2,高加龙 1, 2 1. 广东海洋大学食品科技学院 ,国家贝类加工技术研发分中心 (湛江 ),广东省水产品加工与安全重点实验室 ,广东省海洋生物制品工 程实验室 ,广东省亚热带果蔬加工科技创新中心 ,广东湛江 524088; 2. 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心 (大连工业大学 ),辽宁大连 116034 摘要 :文章以香港牡蛎 (Crassostrea hongkongensis )为原料制备牡蛎酶解产物 (oyster hydrolysis, OH),分析其基本营养成分和氨 基酸组成 ,并探究其对甲磺酸溴隐亭致产后缺乳症大鼠的泌乳功能改善作用。结果表明 : OH 粗蛋白含量较高 ,其次是总糖 ,而脂肪含量较低 ,肽含量为 33.4%; OH 中必需氨基酸占总氨基酸的 39.8%,且含有较高比例的支链氨基酸。动物试验结果表 明 :相较于模型组 , OH 高剂量组大鼠泌乳量显著增加 (p < 0.05)且优于阳性对照组 ; OH 各剂量组均极显著提高了缺乳大鼠乳 腺组织器官指数 (p < 0.01),其效果接近于阳性对照组 ,但未能恢复到正常水平 ;苏木精 –伊红染色观察结果显示 , OH 各剂量组 乳腺组织腺泡较多 ,腺泡呈现圆形且充盈 ,内有较多的分泌物 ,腺泡有明显扩大增生 ,相较于模型组 ,有明显的恢复 ;与模型组 比较 , OH 各剂量组血清和乳腺组织催乳素 (prolactin, PRL)、催乳素受体 (prolactin receptor, PRLR)含量显著提高 (p < 0.05),说 明 OH 能够促进缺乳大鼠催乳素分泌 ,而血清多巴胺 (dopamine, DA)的含量极显著降低 (p < 0.01),表明 OH 能够降低由溴隐 亭导致的多巴胺含量过高。此外 , OH 能显著提高乳腺组织中乳糖 (lactose, LC)、甘油三酯 (triglyceride, TG)含量 (p < 0.05),提 高了乳汁营养成分 ; OH 各剂量组血液中平均血红蛋白 (mean corpuscular hemoglobin concentration, MCHC)、红细胞 (red blood cell, RBC)的数量也显著增加 (p < 0.05),对产后气血不足有一定的改善作用。因此 , OH 能够改善缺乳症状 ,提高产后泌乳量 ,具有促进泌乳的潜力。 关键词 :牡蛎酶解产物 ;产后缺乳 ;甲磺酸溴隐亭 ;泌乳量 中图分类号 : P745.3 文献标识码 : A 文章编号 : 1009-5470(2023)02-0141-12 StudyontheeffectofOysterhydrolysatesonimprovingLactationfunctionin Postpartum hypogalactism WEI Xue1, QIN Xiaoming1, 2, CHEN Suhua1, ZHANG Kaijia1, LIN Haisheng1, 2, ZHENG Huina1, 2, GAO Jialong1, 2 1. College of Food Science and Technology, Guangdong Ocean University, National Research and Development Branch Center for Shellfish P P r r o o c c e e s s s s i i n n g g ((Z Z h h a a n n j j i i a a n n g g )),, G G u u a a n n g g d d o o n n g g P P r r o o v v i i n n c c i i a a l l K K e e y y L L a a b b o o r r a a t t o o r r y y o o f f A A q q u u a a t t i i c c P P r r o o d d u u c c t t s s P P r r o o c c e e s s s s i i n n g g a a n n d d S S a a f f e e t t y y ,, G G u u a a n n g g d d o o n n g g P P r r o o v v i i n n c c e e E E n n g g i i n n e e e e r r i i n n g g L L a a b b o o r r a a t t o o r r y y f f o o r r M M a a r r i i n n e e B B i i o o l l o o g g i i c c a a l l P P r r o o d d u u c c t t s s ,, G G u u a a n n g g d d o o n n g g P P r r o o v v i i n n c c i i a a l l S S c c i i e e n n c c e e a a n n d d T T e e c c h h n n o o l l o o g g y y I I n n n n o o v v a a t t i i o o n n C C e e n n t t e e r r f f o o r r Subtropical Fruit and Vegetable Processing, Zhanjiang 524088, China; 2. Collaborative Innovation Center of Seafood Deep Processing, Dalian Polytechnic University, Dalian 116034, China Abstract: In this paper, oyster hydrolysis products were prepared from Crassostrea hongkongensis as raw materials, and the basic nutrition and amino acid composition of oyster hydrolysis products were analyzed, and the improvement effect of oyster hydrolysis products on the lactation function of rats with postpartum lactation caused by Bromocriptine mesylate was explored. The results showed that protein content of oyster hydrolysis products was higher, which is followed by sugar, fat content was lower, and peptide content was 33.4%. The essential amino acids in oyster hydrolysis products accounted for 39.8% of the total amino acids and contained a high proportion of branched amino acids. The results of animal experiment showed that compared with model group, the lactation volume of rats in oyster hydrolysis products of high-dose group was significantly increased (p < 0.05), which was better than that in the positive control group. The index of mammary tissue and organ in each oyster hydrolysis products dose group was significantly increased (p < 0.01), which was close to the positive control group, but did not return to normal level. HE staining showed that there were more acinus in mammary gland tissues in all oyster hydrolysis products dose groups, which were round and full with more secretions, and the acinus had obvious enlargement and hyperplasia. Compared with the model group, the acinus had obvious recovery. Compared with model group, the contents of prolactin (PRL) and prolactin receptor (PRLR) in serum and mammary tissue of oyster hydrolysis products groups were largely increased (p < 0.05), indicating that oyster hydrolysis products could promote the secretion of prolactin in lactation-deficient rats, while the content of serum dopamine (DA) was greatly decreased (p < 0.01). These results showed that oyster hydrolysis products can reduce the high level of dopamine induced by bromocystine. In addition, oyster hydrolysis products strongly increased the contents of lactose (LC) and triglyceride (TG) in breast tissue (p < 0.05), and improved the nutritional composition of milk. The average hemoglobin (MCHC) and red blood cell (RBC) contents in all oyster hydrolysis products dose groups were also greatly increased (p < 0.05), which had a certain improvement effect on postpartum deficiency of qi and blood. Conclusion: Oyster hydrolysis products can improve the symptoms of lactation deficiency and increase milk yield after delivery, which has the potential to promote lactation. Key words: oyster hydrolysates; postpartum lactation deficiency; bromocriptine mesylate; amount of lactation 产后缺乳是哺乳期妇女常见的疾病 ,主要症状是 无乳可下 ,乳房堵塞 ,乳量不能够满足婴幼儿喂养需 求。《中国儿童发展纲要 (2011—2020年 )》要求纯母 乳喂养率需提高至 50%,但目前我国的纯母乳喂养率 仅为 29.2% (吴缃琦等 , 2017;林超 , 2020),而导致母乳 喂养率低的主要原因是产后缺乳 (Gupta et al, 2017)。近年来 ,受到生活压力以及饮食结构变化等因素的影 响 ,产后缺乳人群逐年增长 (中国发展研究基金会 ,2019)。目前治疗产后缺乳的方法主要是药物治疗 ,而 药物治疗具有一定的毒副作用 ,因此寻找一种对产后 缺乳患者安全有效的促进泌乳天然活性物质 ,满足婴 儿喂养需求具有重要意义。 造成产后缺乳的病因复杂 ,中医将产后缺乳归结 为两种类型 ,一种是 “气血虚弱 ”型 ,另一种是 “肝郁气 滞 ”型 (林国兴等 , 2021),并提出 “虚则补之 ,实则泻之 ”的治疗方法。现代研究表明 ,乳腺泌乳过程受机体神 经内分泌系统调控。催乳素 (prolactin, PRL)与催乳素 受体 (prolactin receptor, PRLR)的结合具有促进乳腺的 发育 ,维持泌乳的作用 , PRL 分泌水平过低 ,乳腺发育 不良是造成产后缺乳的重要因素。下丘脑分泌催乳素 抑制因子 (prolactininhibitingfactor,PIF)、多巴胺 (dopamine, DA)与垂体多巴胺受体结合均能够抑制垂 体前叶腺嗜酸细胞分泌 PRL,影响乳腺发育 ,从而导 致产后缺乳 (Mccann et al, 1984;林曼 , 2018)。产后缺 乳常用造模药物是甲磺酸溴隐亭 ,甲磺酸溴隐亭是一 种多巴胺能激动剂 ,其功能与下丘脑分泌的 PIF 相似 ,能直接作用于垂体的 PRL 分泌细胞 ,增加 DA 含量 , 抑制 PRL 分泌和加速 PRL 降解 ,临床上用于治疗由 于 PRL 分泌过高引起的溢乳综合征 (底爱英等 , 2013),其作用效果与产后缺乳症状相同 (Otto et al, 2015)。 我国海洋生物资源丰富 ,海洋生物资源的高值化利 用是海洋产业发展的重要经济增长点 (吴园涛等 ,2012)。香港牡蛎俗称 “白肉 ”“大蚝 ”,主要分布在广东、广西以及海南等地 ,是两广主要养殖品种 , 2020年牡蛎 养殖产量约 542.5万 t (农业农村部渔业渔政管理局等 ,2021)。研究报道牡蛎具有抗氧化 (Zhang et al, 2019)、改 善学习记忆 (朱国萍等 , 2021)、保护肠黏膜 (叶子晴等 ,2022)、免疫调节 (Xu et al, 2016)、改善肠道微生物 (Xiang et al, 2021)、改善皮肤光损伤 (Peng et al, 2020)、抗黑色素 (Jae et al, 2019)、降血压 (Wang et al, 2008)等生 物活性。据《傅青主女科》记载 ,牡蛎对女性具有活血 化瘀、消肿散结的功效 ,牡蛎可作为治疗乳腺增生的中 药组分之一。此外 ,已有研究支持牡蛎能够改善哺乳动 物泌乳能力 ,如胡培丽等 (2014)研究报道鱼牡蛎生乳灵 胶囊能够促进哺乳期大鼠乳汁分泌 ;谌素华等 (2021)研 究表明牡蛎酶解产物能提高哺乳期大鼠泌乳量 ,可见牡 蛎酶解产物对改善和保护女性泌乳功能具有潜在作 用。牡蛎作为食疗保健的重要原料来源 ,已有研究大都 集中于牡蛎对正常哺乳期动物相关泌乳激素的影响 ,针 对产后缺乳模型动物的泌乳影响尚未见报道。因此 ,本 试验以牡蛎酶解产物为研究对象 ,采用甲磺酸溴隐亭构 建产后缺乳大鼠模型 ,评价牡蛎酶解产物对产后缺乳症 的作用功效 ,为牡蛎酶解产物应用于催乳产品开发提供 理论基础 ,为哺乳期妇女带来更多帮助。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 试验原料 试验用新鲜香港牡蛎购于湛江海鲜批发市场。 1.1.2 试验动物 无特定病原体 (specific pathogen free, SPF)级健康 远交群 (sprague dawley, SD)大鼠 54只 ,购于珠海百试 通生物科技有限公司 , 动物生产许可号 SCXK(粤 )2020-0051:其中雄性大鼠 18只 ,雌性大鼠 36只 ,雄鼠体质量 220 ~ 260g,雌鼠体质量 200 ~ 220g 。 1.1.3 试剂 动物蛋白酶 (酶活 8.7×104U·g −1,广西南宁庞博 生物有限公司 );甲磺酸溴隐亭 (上海源叶生物科技有 限公司 );补血生乳颗粒 (九芝堂股份有限公司 );大鼠 催乳素 (prolactin, PRL)酶联免疫试剂盒 (广州鼎国生 物科技有限公司 );大鼠催乳素受体 (PRLR)酶联免疫 试剂盒 (广州鼎国生物科技有限公司 );大鼠多巴胺 (dopamine, DA)酶联免疫试剂盒 (广州鼎国生物科技 有限公司 );大鼠乳糖 (lactose,LC)、甘油三酯 (triglyceride, TG)酶联免疫试剂盒 (广州鼎国生物科 技有限公司 ); 4%多聚甲醛固定液 (广州鼎国生物科技 有限公司 );纯度大于 99.5%的水合氯醛 (AR)(上海源 叶生物科技有限公司 )。 1.1.4 仪器与设备 Lynx6000高速落地离心机 (Thermo 公司 ,美国 );5810R 型高速台式冷冻离心机 (Eppendorf 公司 ,德国 ); FD8508冷冻干燥机 (ilshin 公司 ,韩国 );Varioskan Flash 全波长扫描式酶标仪 (Thermo 公司 ,美国 ); RM2020石蜡切片 ; DMI4000B 智能型倒置荧光显微 镜 (Leica 公司 ,德国 ); 3H30RI 国产台式高速冷冻离心 机 (湖南赫西仪器装备有限公司 )。 1.2 方法 1.2.1 牡蛎酶解产物的制备 酶解条件参考李婉等 (2017)的方法并进行改进。将牡蛎肉与蒸馏水按照料水比 1 : 3进行匀浆 ,动物蛋 白酶加入量为 1000U·g −1,酶解温度为 53℃,调节 pH 为 7.0,酶解 4h 后 100℃沸水浴灭酶 10min,得到牡蛎 酶解液 ,冷却到室温后进行离心 (离心条件 : 3459g,20min)取上清液冷冻干燥后得到牡蛎酶解产物 (oyster hydrolysis, OH)。 1.2.2 OH 肽含量及基本营养成分测定 肽含量测定 :采用福林酚法 (张佩等 , 2022);水分 含量测定 :参考国标 GB5009.3-2016采用直接干燥法 ;脂肪含量测定 :参考国标 GB5009.6-2016采用索氏抽 提法 ;总糖含量测定 :采用苯酚硫酸法 ;粗蛋白含量测 定 :参考 GB5009.5-2016采用凯氏定氮法 ,转换系数为 6.25;灰分含量测定参考国标 GB5009.4-2016采用高 温灼烧法。 1.2.3 OH 氨基酸组成测定 参照 GB5009.124-2016《食品安全国家标准食品 中氨基酸的测定》。 1.2.4 试验动物分组及造模 将购买回来的试验大鼠雌雄分笼 ,适应性暂养一 周后 ,将雌鼠与雄鼠按 2 : 1的比例进行同笼交配 ,连 续同笼一周 ,直到母鼠阴道涂片观察到精子为止。将 受精的成功的母鼠与雄鼠分开饲养 ,在母鼠妊娠 20d 时 ,将其调整为每笼 1只妊娠鼠 ,并换窝放置干净 ,等 待分娩。取产仔时间前后相差不超过 24h 的 36只母 鼠作为试验对象 ,具体分组见表 1。参考董世起 (2015)的方法 ,除了空白组外 ,其他各组每天均用浓度为 0.5mg·mL −1、体积为 1mL·100g −1的甲磺酸溴隐亭灌 胃 ,构建产后缺乳模型 ,连续灌胃 8d 。 Tab. 1Grouping and treatment of animals 组别 母鼠数量/只 每窝仔鼠数量/只 处理方式 空白组(B组) 6 12 用 1mL·100g−1蒸馏水灌胃,每天一次 模型组(M组) 6 12 同时用甲磺酸溴隐亭溶液(浓度 0.5mg·mL−1、体积 1mL·100g−1)和 1mL·100g−1 蒸馏水灌胃,每天一次 阳性药物组(P组) 6 12 同时用甲磺酸溴隐亭溶液(浓度 0.5mg·mL−1、体积 1mL·100g−1)和补血生乳颗 粒(浓度 267mg·mL−1、体积 1mL·100g−1)灌胃,每天一次 牡蛎酶解产物低剂量组 (OH-L组) 6 12 同时用甲磺酸溴隐亭溶液(浓度 0.5mg·mL−1、体积 1mL·100g−1)和牡蛎酶解粉 (浓度 31.25mg·mL−1、体积 1mL·100g−1)灌胃,每天一次 牡蛎酶解产物中剂量组 (OH-M组) 6 12 同时用甲磺酸溴隐亭溶液(浓度 0.5mg·mL−1、体积 1L·100g−1)和牡蛎酶解粉 (浓度 62.5mg·mL−1、体积 1 mL·100g−1)灌胃,每天一次 牡蛎酶解产物高剂量组 (OH-H组) 6 12 同时用甲磺酸溴隐亭溶液(浓度 0.5mg·mL−1、体积 1mL·100g−1)和牡蛎酶解粉(浓度 125mg·mL−1、体积 1mL·100g−1)灌胃,每天一次 1.3 观察指标 1.3.1 母鼠每小时泌乳量测定 (Lin et al, 2017) 每日早上 08:00将仔鼠与母鼠分开 ,并称量分开 前每窝仔鼠体重 ,计为 W 1;仔鼠与母鼠分离 4h 后再次 称量仔鼠体重 ,计为 W 2,将仔鼠放回母鼠身边进行哺 乳 ,哺乳 1h 后称量仔鼠体重 ,计为 W 3 (公式 1): 1.3.2 仔鼠存活率 分娩结束后 ,将每只母鼠哺乳总仔鼠数量均调整为 12只 ,每天记录仔鼠存活数量 ,计算仔鼠存活率 (公式 2): 1.3.3 脏器指数、乳腺器官指数 通过注射 7%的水合氯醛将母鼠麻醉然后进行眼 球取血 ,采用脊椎脱臼法处死母鼠 ,将其解剖取出心 脏、胸腺、脾脏、肝脏、脾脏分别进行称重 ,记录各 个脏器组织质量 ;将母鼠第 3对左侧乳房取出 ,称重 ,记录乳腺组织质量 ,然后浸泡于 10%的甲醛固定液 ,计算脏器指数 (公式 3)和乳腺器官指数 (公式 4): 1.3.4 血清、乳腺组织 PRL 、PRLR 、血清 DA 含量 及乳腺组织中乳糖和甘油三酯含量测定 将采集到的血液进行以 2330g 离心 15min,取上 清液得到血清 ,按照 ELISA 试剂盒说明操作 ,酶标仪 进行测定。 大鼠处死后迅速分离乳腺组织 ,取大小适宜的 大鼠乳腺组织 ,加入生理盐水使用研磨珠研磨 ,制备 10%的组织匀浆液 , 1400g 离心 10min,取上清液备 用 ,按照 ELISA 试剂盒说明操作 ,酶标仪进行测定。 1.3.5 平均血红蛋白含量和红细胞数测定 采用全自动血液分析仪测定母鼠血常规 ,包括平 均血红蛋白含量 (meancorpuscularhemoglobin concentration,MCHCC)和红细胞数 (redbloodcell, RBC)测定。 1.3.6 乳腺组织切片观察 取出 1.3.3中固定后的乳腺组织 ,使用常规石蜡做 包埋切片 ,然后用苏木精 –伊红 (HE)染色 ,采用光学显 微镜 ,对母鼠的乳腺组织进行病理组织学检测 (蒋博 等 , 2022)观察乳腺组织结构。 1.4 数据统计分析 试验数据采用 SPSS 20.0软件进行单因素方差分 析 ,Origin2022作图。试验结果以 (均数 ±标准 差 )(X ±SD)表示 ,两两比较采用独立样本 t 检验 ,多组 间比较采用单因素方差分析。 2 结果与分析 2.1 OH 肽含量、基本营养成分分析 OH 肽含量、基本营养成分含量见表 2。酶解得 到的 OH 肽含量为 33.4%,稍高于杨发明等 (2020)测得 的肽含量 (25.26%)。OH 基本成分中蛋白质含量最高 ,为 45.09%,其次是总糖 ,含量为 33.83%,脂肪仅有 4.55%,因此 OH 属于一种高蛋白、低脂肪的物质。 Tab. 2Basic nutritional components of OH (X ±SD , n=3 ) 成分 肽/% 水分/% 脂肪/% 总糖/% 蛋白质/% 灰分/% OH 33.4±0.14 7.17±0.15 4.55±0.21 33.83±1.52 45.09±0.98 6.60±0.17 2.2 OH 氨基酸组成分析 OH 氨基酸种类齐全且分布均匀 ,游离氨基酸与水 解氨基酸中都含有 7种必需氨基酸 ,其中水解氨基酸中 EAA/TAA 为 39.8%, EAA/NEAA 为 66%,接近 FAO/WHO 推荐的理想蛋白质模式 (孙龙生 , 2011)。此外 ,水解氨 基酸中支链氨基酸占总氨基酸含量的 18.9% (表 3)。 2.3 乳腺器官指数、乳腺组织结构及脏器指数的测定 乳腺是哺乳动物特有的器官 ,乳腺的健康发育是 泌乳的前提。与 M 组比较 , P 组、OH 高、中、低剂量 组乳腺器官指数差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , OH 高、中、低剂量组差异不显著 (p > 0.05),表明 OH 能够 促进缺乳大鼠乳腺发育 ,使乳腺器官指数显著提高 ,其 作用效果接近于 P 组 ,但未能恢复到正常水平 (表 4)。 与 B 组比较 , M 组大鼠乳腺组织腺泡较少 ,结缔 组织增多 ,呈现萎缩状。与 M 组乳腺组织结构相比 , OH 各剂量组的大鼠乳腺组织腺泡较多 ,腺泡呈现圆 形且充盈 ,内有较多的分泌物 ,腺泡有明显扩大增生 ,且 OH 高剂量组的效果较明显 (图 1)。 脏器指数结果表明 , OH 各剂量组与 B 组和 M 组、P 组间各个脏器指数均无显著性差异 (p > 0.05),说明试验中灌胃的造模药物甲磺酸溴隐亭和牡蛎酶解 粉对大鼠脏器重量无影响 (表 5)。 表 3 OH 氨基酸组成表 Tab. 3Amino acid composition of OH 种类 水解氨基酸含量/(g·100g−1) 游离氨基酸含量/(g·100g−1) 天门冬氨酸(ASP) 3.81 0.74 苏氨酸(THR)* 1.67 1.37 丝氨酸(SER) 1.80 1.00 谷氨酸(GLU) 5.94 1.97 脯氨酸(PRO) 1.46 0.59 甘氨酸(GLY) 2.45 0.65 丙氨酸(ALA) 2.20 1.56 缬氨酸(VAL)* 2.16 1.30 蛋氨酸(MET)* 1.34 0.97 异亮氨酸(ILE)* 1.79 1.43 亮氨酸(LEU)* 2.79 2.39 酪氨酸 TYR 1.04 2.09 苯丙氨酸(PHE)* 1.57 2.02 赖氨酸(LYS)* 2.84 0.92 组氨酸(HIS) 0.48 0.27 精氨酸(ARG) 2.31 1.52 氨基酸总和(TAA) 35.60 20.80 必需氨基酸(EAA) 14.16 10.40 非必需氨基酸(NEAA) 21.44 10.40 EAA与 TAA比值/% 39.80 50.00 EAA与 NEAA比值/% 66.00 100.00 注 : *为必需氨基酸 表 4 乳腺器官指数 (X ±SD, n =6 ) Tab. 4 Mammary organ index (X ±SD , n=6 ) 组别 B组 M组 P组 OH-L组 OH-M组 OH-H组 指数 6.49±0.72 3.35±0.3## 5.65±0.69** 4.76±0.64##** 4.81±0.57##** 4.98±0.44##** 注 :与 B 组比较 , #表示差异显著 (p < 0.05), ##表示差异极显著 (p < 0.01);与 M 组比较 , *表示差异显著 (p < 0.05), **表示差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , △表示差异显著 (p < 0.05), △△表示差异极显著 (p < 0.01) 图 1 OH 对大鼠乳腺组织结构的影响 (×400) Fig.1 Effects of OH on mammary gland tissue structure of rats 表 5 脏器器官指数 (X ±SD, n =6 ) Tab. 5Organ index (X ±SD , n=6 ) 指标 B组 M组 P组 OH-L组 OH-M组 OH-H组 心脏指数 0.45±0.11 0.43±0.03 0.43±0.05 0.40±0.03 0.44±0.05 0.43±0.06 胸腺指数 0.09±0.02 0.11±0.02 0.12±0.01 0.11±0.01 0.11±0.02 0.12±0.02 脾脏指数 0.22±0.01 0.24±0.02 0.24±0.02 0.23±0.01 0.25±0.02 0.25±0.04 肝脏指数 3.94±0.42 3.41±0.37 3.20±0.22 3.20±0.24 3.28±0.21 3.41±0.21 肾脏指数 0.70±0.07 0.74±0.07 0.74±0.04 0.75±0.08 0.72±0.06 0.71±0.05 2.4 每小时泌乳量、泌乳量总和平均值和仔鼠存活 率的测定 泌乳量是直接反映催乳效果的指标。经过 8d 的给药 ,各组大鼠泌乳量均不同程度下降 ,但与 M 组比较 , OH 各剂量组下降程度较小。M 组大鼠的 每小时泌乳量从第 3d 起就开始表现出显著的减少 (p < 0.05);与 M 组比较 , OH 高剂量组从第 5d 开始 每小时泌乳量极显著 (p < 0.01), OH 中、低剂量组 每小时泌乳量与 M 组比较差异不显著 (p > 0.05)(表 6)。 表 6 每小时泌乳量 (X ±SD, n =6 )(单位 : g·h −1 ) Tab. 6Lactating capacity per hour (X ±SD , n=6) 时间 B组 M组 P组 OH-L组 OH-M组 OH-H组 第 1天 2.28±0.73 1.49±0.40## 3.35±0.50** 1.75±1.94 2.51±0.48** 2.93±0.50** 第 2天 2.29±1.04 2.57±1.04 2.07±0.86 0.81±1.82 1.21±0.41 3.19±0.32 第 3天 4.11±0.79 1.98±1.26# 1.60±0.77 2.33±0.77 0.89±0.83 2.02±0.57 第 4天 4.46±0.56 0.90±1.13## 2.17±0.77 0.71±1.42 1.99±0.88 1.74±0.12 第 5天 6.38±1.15 0.44±0.48## 1.05±0.98 1.77±1.24 0.67±0.41 2.47±1.00** 第 6天 6.20±1.1 0.03±0.48## 1.82±0.31** 1.05±1.39 0.13±0.66 2.79±0.89** 第 7天 4.88±1.62 0.39±0.51## 0.05±0.79 0.57±1.29 1.00±0.79 3.10±0.85** 第 8天 4.74±1.45 0.05±0.10## 1.64±2.10** 0.93±1.48 0.18±0.23 1.11±0.70 注 :与 B 组比较 , #表示差异显著 (p < 0.05), ##表示差异极显著 (p < 0.01);与 M 组比较 , *表示差异显著 ( p < 0.05), **表示差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , △表示差异显著 (p < 0.05), △△表示差异极显著 (p < 0.01) 与 B 组比较 , M 组每小时泌乳量总和平均值极显 著减少 (p < 0.01),说明甲磺酸溴隐亭致产后缺乳大鼠 模型造模成功。与 M 组比较 , OH 高剂量组大鼠的泌 乳量总和平均值极显著增加 (p <0.01),增加了 195.12% (表 7),与 P 组比较 , OH 高剂量组显著提高 (p < 0.05)。以上结果表明 OH 能使产后缺乳大鼠泌乳 量增加 ,且高剂量组增加效果较明显。 刚出生的仔鼠唯一的食物就是乳汁 ,通过测定仔 鼠存活率可以侧面反映母鼠泌乳量。在甲磺酸溴隐亭 的作用下 ,大鼠在哺乳期间乳汁不足 ,导致部分仔鼠出 现死亡现象。前 3天无仔鼠死亡现象 , M 组从第 5天开 始出现仔鼠死亡 ,从第 6天起 ,与 B 组比较 , M 组仔鼠存 活率差异极显著 (p < 0.01),到第 8天仔鼠存活率仅为 77.78%。与 M 组比较 ,OH 高剂量组仔鼠存活率在 第 6天有极显著差异 (p < 0.01), OH 中剂量组在第 5天出 现仔鼠死亡 ,第 6天仔鼠存活率具有显著差异 (p <0.05)、OH 低剂量组由于剂量较低以及个体差异 性 ,从第 4天开始就出现仔鼠死亡 ,与 M 组比较 ,差异不 显著 (p > 0.05)(表 8)。仔鼠存活率结果能从侧面反映 OH 能够提高大鼠泌乳量 ,从而提高仔鼠存活率。 Tab. 7Average total milk yield (X ±SD , n=6) 组别 B组 M组 P组 OH-L组 OH-M组 OH-H组 平均值 4.39±1.81 0.82±1.30##△△ 1.72±1.35##** 1.16±1.65## 1.08±1.09##△ 2.42±0.97##**△ 注 :与 B 组比较 , #表示差异显著 (p < 0.05), ##表示差异极显著 (p < 0.01);与 M 组比较 , *表示差异显著 (p < 0.05), **表示差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , △表示差异显著 (p < 0.05), △△表示差异极显著 (p < 0.01) 表 8 仔鼠存活率 (X ±SD, n =12 ) (单位 : %) Tab. 8Survival rate of their offspring (X ±SD , n=12) 组别 第 3天 第 4天 第 5天 第 6天 第 7天 第 8天 B组 100±0.00 100±0.00 100±0.00 100±0.00 100±0.00 100±0.00 M组 100±0.00 100±0.00 94.44±8.61 88.88±6.21## 84.72±3.40## 77.78±4.30## P组 100±0.00 100±0.00 100±0.00 98.61±3.40* 95.84±4.56** 87.50±4.57** OH-L组 100±0.00 97.22±4.30 98.61±3.40 98.61±3.40* 87.50±4.57##△△ 81.94±3.40△ OH-M组 100±0.00 100±0.00 98.61±3.40 95.84±4.56 94.45±4.30** 84.72±3.40** OH-H组 100±0.00 100±0.00 100±0.00 100±0.00** 98.61±3.40** 93.06±3.40**△ 注 :与 B 组比较 , #表示差异显著 (p < 0.05), ##表示差异极显著 (p < 0.01);与 M 组比较 , *表示差异显著 (p < 0.05), **表示差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , △表示差异显著 (p < 0.05), △△表示差异极显著 (p < 0.01) 2.5 血清和乳腺组织 PRL 、PRLR 及血清 DA 的含量 测定 与 B 组比较 , M 组血清和乳腺组织 PRL 、PRLR 含 量明显减少 (p < 0.05);与 M 组比较 , P 组血清和乳腺组 织 PRL 、PRLR 含量显著增加 (p < 0.05)(图 2)。图 2a 显 示 :与 M 组比较 , OH 高、中剂量组血清、乳腺组织 PRL 含量均显著增加 (p < 0.05),血清中 OH 高剂量组作 图 2 缺乳大鼠血清和乳腺组织催乳素 (PRL, a)、催乳素受 体 (PRLR, b)的质量浓度 (X ±SD, n =6 ) 与 B 组比较 , #表示差异显著 (p < 0.05), ##表示差异极显著 (p < 0.01);与 M 组比较 , *表示差异显著 (p < 0.05), **表示差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , △表示差异显著 (p < 0.05), △△表示差异极显著 (p < 0.01) Fig. 2 Content of PRL (a) and PRLR (b) in mammary gland and serum of postpartum lactation deficient rats (X ±SD, n =6) 用效果最明显 (p < 0.01),中剂量组次之 (p < 0.05),低剂 量组不明显 (p > 0.05), OH 高、中剂量组乳腺组织 PRL 含量与 B 组差异不显著 (p > 0.05)。图 2b 显示 :与 M 组比 较 , OH 各剂量组血清和乳腺组织 PRLR 含量显著提高 (p < 0.05);血清 PRLR 含量测定结果表明 ,与 P 组比较 , OH 各剂量组无显著性差异 (p > 0.05),乳腺组织 PRLR 含量测定结果表明 ,与 B 组比较 , OH 各剂量组差异不 显著 (p > 0.05)。以上结果表明 , OH 能够增加缺乳大鼠 血清和乳腺组织 PRL 、PRLR 含量 ,且 OH 组血清和乳 腺组织 PRL 、血清 PRLR 含量与 P 组结果相似 ,基本可 达到阳性对照组水平。 与 B 组比较 ,M 组血清 DA 含量极显著增加 (p < 0.01), OH 各剂量组血清 DA 含量均极显著降低 (p < 0.01), P 组、OH 高剂量组与 B 组之间差异不显著 (p > 0.05)(图 3)。说明灌胃甲磺酸溴隐亭能够增加缺 图 3 缺乳大鼠血清多巴胺 (DA)质量浓度 (X ±SD, n =6 ) 与 B 组比较 , #表示差异显著 (p < 0.05), ##表示差异极显著 (p < 0.01);与 M 组比较 , *表示差异显著 (p < 0.05), **表示差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , △表示差异显著 (p < 0.05), △△表示差异极显著 (p < 0.01) Fig.3 ContentofDAinserumofpostpartumlactation deficient rats (X ±SD, n =6) 乳大鼠血清 DA 含量 ,而 OH 能够降低血清 DA 含量 ,作 用效果与剂量呈正相关 ,且 OH 高剂量组能基本恢复到 正常水平。 2.6 乳腺组织 LC 、TG 和血液 MCHC 、RBC 的含量 测定 LC 和 TG 是母乳的主要成分 ,乳腺组织上皮细胞 则是合成这两种物质的重要场所。OH 高、中剂量组 乳腺组织中 LC 的质量浓度均显著高于 M 组 (p < 0.05),低剂量组效果不明显 (p > 0.05); P 组、OH 高剂量组乳 腺组织 TG 浓度高于 M 组 (p < 0.05),而 OH 中、低剂量 组效果不显著 (p > 0.05)(图 4)。 图 4 缺乳大鼠乳腺组织中乳糖 (LC)和甘油三酯 (TG)含量 (X ±SD, n =6 ) 与 B 组比较 , #表示差异显著 (p < 0.05), ##表示差异极显著 (p < 0.01);与 M 组比较 , *表示差异显著 (p < 0.05), **表示差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , △表示差异显著 (p < 0.05), △△表示差异极显著 (p < 0.01) Fig.4 ContentofLCandTGinmammaryglandof postpartum lactation deficient rats (X ±SD, n =6) 与 B 组比较 , M 组 MCHC 、RBC 含量显著降低 (p > 0.05);与 M 组比较 , P 组、OH 高、中、低剂量组 MCHC 、RBC 含量均显著增高 (p < 0.05)。与 P 组比 较 , MCHC 含量差异不显著 (p > 0.05),与 B 组比较 , RBC 差异不显著 (p > 0.05)。提示灌胃甲磺酸溴隐亭 会导致大鼠平均血红蛋白含量、红细胞数降低 ,而 OH 可使缺乳大鼠平均血红蛋白含量、红细胞数增加 ,且 MCHC 、RBC 含量与 P 组效果相似 , RBC 甚至恢 复到 B 组水平 (图 5)。 3 讨论 乳母膳食成分的摄入可直接影响乳汁营养成分 ,而母乳作为婴幼儿最佳营养来源 ,其成分安全性关乎 婴幼儿健康成长 (林怀美等 , 2021)。相关研究表明 ,乳 汁中的乳糖、脂肪、蛋白质含量与膳食中的碳水化合 图 5 缺乳大鼠平均血红蛋白质量浓度 (MCHC)和红细胞数 (RBC)(X ±SD, n =6 ) 与 B 组比较 , #表示差异显著 (p < 0.05), ##表示差异极显著 (p < 0.01);与 M 组比较 , *表示差异显著 (p < 0.05), **表示差异极显著 (p < 0.01);与 P 组比较 , △表示差异显著 (p < 0.05), △△表示差异极显著 (p < 0.01) Fig. 5 Content of MCHC and RBC of postpartum lactation deficient rats (X ±SD, n=6) 物、脂肪含量及蛋白质含量有相关性 (杨华等 ,2017)。OH 基本营养成分含量丰富 ,是一种高蛋白低 脂肪的物质 ,而喂食高蛋白、低碳水化合物膳食的哺 乳期大鼠能显著提高血清中 PRL 浓度以及乳腺中的 SNAT2蛋白丰度 (Velázquez-Villegas et al, 2015),因此 OH 对母乳的合成具有积极作用 ,对产妇体型的恢复 影响较小。OH 氨基酸含量丰富 ,种类齐全 ,游离氨基 酸中 ,蛋氨酸 (4.67%)、赖氨酸 (9.71%)等必需氨基酸含 量较高 ,而蛋氨酸、赖氨酸可以通过激活乳腺上皮细 胞中的信号传导及转录激活蛋白 5 (signal transducer and activator of transcription, STAT5)、哺乳动物雷帕 霉素靶蛋白 (mammalian target of rapamycin, mTOR)信 号通路来增加β -酪蛋白 mRNA 的丰度 ,促进乳腺上 皮细胞乳蛋白合成 ; OH 中支链氨基酸比例高 (18.9%),而支链氨基酸能在乳腺组织代谢中发挥调节作用 ,如 亮氨酸可激活哺乳动物 mTOR 信号通路靶点 ,促进乳 腺上皮细胞蛋白质合成 (Lei et al, 2012)。同时 , OH 中 还含有较高比例的精氨酸 (7.3%),而精氨酸能够通过 调节乳腺组织 miRNAs 潜在地促进乳腺组织的发育 (Zhou et al, 2021a)。近年来 ,肽对乳腺上皮细胞乳蛋 白合成的影响受到广泛关注 ,肽能够促进乳腺发育 ,且 其合成乳蛋白的效率优于游离氨基酸 ,而小肽的浓度 和肽包含的氨基酸组成是影响乳蛋白合成的重要因素 (付琳等 , 2020),而血液中的肽与氨基酸结合能够形成 肽结合氨基酸，并通过多肽转运体运输到乳腺上皮细 胞 ,进入细胞后水解为游离氨基酸 ,能够上调哺乳动物 mTOR 信号通路 (Zhou et al, 2021b)。通过试验观察可 知 , OH 能够使乳腺组织腺泡充盈 ,腺泡数量增加 ,其 可能是 OH 中的肽 (33.4%)和游离氨基酸 (50%)经乳腺 快速吸收和利用 ,促进了乳腺的发育 ,可能加快了泌乳 蛋白的合成 ,与谷子林等 (2020)发现 ,在基础日粮中添 加复方中药小肽 ,可以提高母兔泌乳能力以及仔兔存 活率有相似的结论 ,从仔鼠存活率的变化对比结果也 可以再次论证 , OH 可以促进乳腺发育 ,提高哺乳期泌 乳量和子代的存活性能。 乳汁的分泌过程极其复杂 ,人类的泌乳调节机制 属于 PRL 依赖型 ,与鼠类接近。PRL 属于一种多肽类 激素 ,当处于哺乳状态时 , PRL 与乳腺组织中的 PRLR 结合能够激活 JAK2/STAT5信号通路 ,促进乳腺发育 ,刺激并维持泌乳 (Zhang et al, 2019; Paré et al, 2020),目 前许多催乳剂都是通过提高 PRL 的分泌来实现催乳 效果 (Luke et al, 2021),通过添加外源性 PRL 也能够促 进乳腺的发育 (Josephine et al, 2008),因此 PRL 的分泌 水平提高是解决缺乳问题的关键。灌胃甲磺酸溴隐亭 后 ,模型组大鼠血清和乳腺组织 PRL 、PRLR 含量减 少 ,泌乳量降低 ,成功复制出产后缺乳模型。灌胃 OH 组血清和乳腺组织 PRL 、PRLR 含量均显著提高 ,血 清 DA 含量极显著降低 ,该结果与胡培丽等 (2014)、谌素华等 (2021)等研究结果一致。推测 OH 可能通过 介导下丘脑 –垂体 –卵巢轴负反馈调节机制 ,降低血清 中 DA 含量 ,而低水平的 DA 与多巴胺 D2受体的结合 位点减少 ,垂体 PRL 分泌得到释放 ,因此血清与乳腺 组织 PRL 、PRLR 含量增加 , PRL 与 PRLR 结合位点 增加 ,调节产后缺乳激素水平恢复正常 ,使泌乳通道顺 畅 ,改善缺乳症。 LC 是乳腺中乳汁渗透压调节剂 ,是影响产奶量的 关键因素 ;乳中主要的脂类物质是 TG, TG 的合成量 是评定外源脂肪酸能否促进乳汁中脂肪合成的重要指 标 (Lin et al, 2016;李君等 , 2019),而乳腺组织是合成 TG 和 LC 的重要场所。本文结果表明 , OH 各剂量组 参考文献 References 谌素华 ,秦小明 ,章超桦 ,等 , 2021.牡蛎酶解产物对超负荷哺乳 大鼠泌乳的影响 [J].南方水产科学 , 17(6): 107–114. CHEN SUHUA,QINXIAOMING,ZHANGCHAOHUA,etal,2021. Effects of enzymatic hydrolysate products of oyster on lactation in overloaded lactating rats[J]. South China Fisheries Science, 17(6): 107–114 (in Chinese with English abstract). 底爱英 ,高文生 , 2013.溴隐亭治疗垂体泌乳素腺瘤的研究进展 均能够提高乳腺组织中 LC 含量 ,而 TG 测定结果表 明 , OH 高剂量组 TG 含量较模型组显著 ,但中、低剂 量组效果不明显。其原因可能是 LC 、TG 的合成需 要葡萄糖 ,脂肪等前体物质 ,而 OH 中糖相对于脂肪来 说含量较高 ,因此可能对乳腺组织中 LC 以及 TG 的合 成产生一定影响 , LC 、TG 的增加从侧面反映 OH 对 乳汁的合成 ,乳成分的调节具有一定的影响。中医理 论认为母乳为气血所化 ,无血不成乳 (高亚红 , 2016),产后气血亏虚是导致缺乳的重要原因。采用甲磺酸溴 隐亭建立的产后缺乳模型母鼠形体消瘦 ,四肢末端近 似苍白 ,与中兽医诊断的 “气血亏虚 ”型产后缺乳症状 相似 (王一飞等 , 2018)。本试验的阳性对照为补血生 乳颗粒 ,其功效主要是补益气血 ,通络生乳 ,阳性对照 组与 OH 组均提高了 MCHC 含量及 RBC 数量 ,且和 阳性对照组相比无明显差别 ,推测 OH 对机体血红蛋 白的合成、红细胞数量的增加具有促进作用 (曾新斌 ,2011),对 “气血亏虚 ”型产后缺乳具有改善作用。 4 结论 牡蛎酶解产物能够使乳腺组织腺泡增加 ,腺泡充 盈 ,显著提高产后缺乳大鼠的泌乳量 ,从而提高仔鼠存 活率 ,证实了牡蛎酶解产物具有一定的促进泌乳功 效。其可能与提高血清和乳腺组织中的 PRL 、PRLR 含量 ,降低血清中 DA 水平 ,改善乳腺组织发育相关。同时 , OH 还提高了乳腺组织中 LC 、TG 含量 ,间接证 明 OH 对催乳起到一定的作用 ,此外 , OH 能够提高 MCHC 以及 RBC,对产后气血虚弱有一定的改善作 用。本试验就牡蛎酶解产物对产后缺乳症的影响进行 了初步探究 ,证实了牡蛎酶解产物是一种能够改善缺 乳症的天然活性物质 ,此外 ,牡蛎作为一种药食同源的 物质 ,安全性较高 ,与传统的中药汤剂与药物治疗相比 有较大的优势 ,牡蛎酶解产物在催乳产品方面的应用 能为食疗理论和现代营养学的有机结合提供参考依 据。但目前 ,牡蛎酶解产物促进泌乳的机制尚不够完 善 ,仍需要更进一步探究。 [J].脑与神经疾病杂志 , 21(1): 78–80. DI AIYING, GAO WENSHENG, 2013. Research progress of bromocryptotine in thetreatmentofpituitaryprolactinadenoma[J].Journalof Brain and Nervous Diseases, 21(1): 78–80 (in Chinese with English abstract). 董世起 , 2015.催乳汤对产后缺乳模型大鼠的治疗作用及其机制 研究 [D].北京 :中国农业大学 : 103. DONG SHIQI, 2015. Therapeutic effects and mechanism of traditional galactopoietic decoction on rats with puerperal hypogalactia[D]. Beijing: China Agricultural University: 103(in Chinese with English abstract). 付琳 ,张丽 ,王高富 ,等 , 2020.小肽调控奶牛乳腺乳蛋白合成的 作用机制 [J].动物营养学报 , 32(5): 1989–1996. FU LIN, ZHANGLI,WANGGAOFU,etal,2020.Regulation mechanismofsmallpeptidestomilkproteinsynthesisin bovine mammarygland[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 32(5): 1989–1996 (in Chinese with English abstract). 高亚红 , 2016.产妇泌乳以及产后康复中应用补气益血组方干预 的临床价值分析 [J].当代医学 ,22(36):175–176.GAO YAHONG, 2016. Analysis of clinical value of intervention of invigoratingQiandinvigoratingbloodinlactationand postpartum rehabilitation of parturient[J]. Contemporary Medicine, 22(36): 175–176 (in Chinese with English abstract). 谷子林 ,刘亚娟 ,陈赛娟 ,等 , 2020.复方中药小肽对母兔泌乳性 能及配种受胎率的影响 [J].中国兽医学报 , 40(11): 2246–2250. GU ZILIN, LIU YAJUAN, CHEN SAIJUAN, et al,2020. Effects of compound traditional Chinese medicine small peptide on lactation performance and breeding conception rate of female rabbits[J]. Chinese Journal of Veterinary Science,40(11): 2246–2250 (in Chinese with English abstract). 农业农村部渔业渔政管理局 ,全国水产技术推广总站 ,中国水产 学会 , 2021.中国渔业统计年鉴 [M].北京 :中国农业出版社 . FISHERYADMINISTRATIONBUREAUOFMINISTRY OF AGRICULTURE AND RURAL AFFAIRS, NATIONAL FISHERIES TECHNOLOGY EXTENSION CENTER, CHINASOCIETYOFFISHERIES,2021.Chinafisheries statistical yearbook[M]. Beijing: China Agriculture Press (in Chinese with English abstract). 胡培丽 ,梁怿 ,林飞 , 2014.鱼牡蛎生乳灵胶囊促进大鼠泌乳功能 的实验研究 [J].癌变 ·畸变 ·突变 , 26(4): 285–287. HU PEILI, LIANG YI, LIN FEI, 2014. Function of Yu-mu-li-shengru-ling capsule in facilitating milk secretion in rats[J]. Carcinogenesis,Teratogenesis&Mutagenesis,26(4):285–287 (in Chinese with English abstract). 蒋博 ,汪金林 ,王海燕 ,等 , 2022.鲟鱼头汤对产后缺乳大鼠泌乳 功能的促进作用 [J/OL].食品科学 ,1–12.JIANGBO, WANG JINLIN, WANG HAIYAN, et al, 2022. Study on the effectofsturgeonheadsouponpromotingpostpartum lactationdeficiencyrats[J/OL].FoodScience,1–12(in Chinese with English abstract) 李君 ,杨文卓 ,候霞飞 ,等 , 2019.油酸和亚油酸对山羊乳腺细胞 甘油三酯含量及乳脂合成相关基因表达的影响 [J].中国畜 牧兽医 ,46(2):380–386.LIJUN,YANGWENGZHUO, HOU XIAFEI, et al, 2019. Effects of oleic acid and linoleic acid on triglyceride content and gent and gene expression[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 46(2): 380– 386 (in Chinese with English abstract). 李婉 ,曹文红 ,章超桦 ,等 , 2017.牡蛎酶解产物的组成特点及其 体外免疫活性 [J].食品工业科技 , 38(16): 35–42. LI WAN, CAO WENHONG, ZHANGCHAOHUA, et al,2017. Composition characteristics of oyster enzymatic hydrolysate and its immune activity in vitro[J]. Science and Technology of FoodIndustry,38(16):35–42(inChinesewithEnglish abstract). 林超 , 2020.浅析我国婴儿喂养的现状和应对策略 [J].决策探索 (下 ), 12: 91–92. LIN CHAO, 2020. Analysis of the status quo and coping strategies of infant feeding in China[J]. Decision Exploration(part2),12:91–92(inChinesewithEnglish abstract). 林国兴 ,刘志勇 ,李芳 , 2021.中医药膳治疗产后乳少的研究现状 [J].江西中医药 ,52(2):78–80.LINGUOXIN,LIU ZHIYONG, LI FANG, 2021. Research Status of Postpartum HypogalactiaTreatedwithTraditionalChineseMedicine Diet[J].JiangxiJournalofTraditionalChineseMedicine,52(2): 78–80 (in Chinese with English abstract). 林怀美 ,陈淑音 ,林跃进 ,等 , 2021.母乳成分分析与乳母膳食的 相关性研究 [J].基层医学论坛 ,25(29):4147–4149.LIN HUAIMEI, CHEN SHUYING, LIN YUEJIN, 2021. Study on the relationship between breast milk composition analysis and lactating mother’s diet[J]. The Medical Forum, 25(29): 4147–4149 (in Chinese with English abstract). 林曼 , 2018.槲皮素对产后缺乳模型小鼠的治疗作用及其机制研 究 [D].广东 :广东药科大学 . LIN MAN, 2018. Study on the therapeutic effect and mechanism of quercetin on postpartum lactation deficiency model mice[D]. Guangdong: Guangdong Pharmaceutical University (in Chinese with English abstract). 孙龙生 ,魏凯 ,安振华 ,等 , 2011.水产动物理想蛋白质模式研究 进展 [J]. 动物营养学报 , 23(9): 1453–1458. SUN LONGSHENG,WEIKAI,ANZHENGHUA,etal,2011. Recent Advances in Ideal Protein Pattern for Aquatic Animals[J].ChineseJournalofAnimalNutrition,23(9):1453–1458 (in Chinese with English abstract). 王一飞 ,宋阳 ,陈宝艳 ,等 , 2018. “米酒鸡 ”食疗方对产后缺乳母 鼠催乳素受体及 β 酪蛋白表达的影响 [J].广州中医药大学 学报 , 35(4): 689–693. WANG YIFEI, SONG YANG, CHEN BAOYAN, et al, 2018. Effects of rice wine cooking chicken recipe for food therapy on expression of prolactin receptor and β -casein in mice with postpartum hypogalactia[J]. Journal of GuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine,35(4): 689–693 (in Chinese with English abstract). 吴缃琦 ,孙晓勉 ,何珊茹 , 2017. 6个月内婴儿纯母乳喂养现状及 影响因素分析 [J].中国儿童保健杂志 , 25(1): 90–93. WU XIANGQI, SUN XIAOMIAN, HE SANRU, 2017. Analysis of the status and influencing factors ofthe exclusive breastfeeding among six months infants[J]. Chinese Journal of ChildHealthCare, 25(1): 90–93(inChinesewithEnglish abstract). 吴园涛 ,任小波 ,孙恢礼 , 2012.关于我国海洋生物资源领域科技 布局的若干思考 [J].热带海洋学报 ,31(1):79–84.WU YUANTAO, REN XIAOBO, SUN HUILI, 2012. Thoughts on science and technology layout of marine biological resources researchinChina[J].JournalofTropicalOceanography,31(1): 79–84 (in Chinese with English abstract). 许丹 ,林峰 ,朱小语 ,等 , 2016.牡蛎肽对免疫抑制小鼠免疫功能 的影响 [J].北京大学学报 (医学版 ), 48(03): 392–397. XU DAN, LIN FENG, ZHU XIAO YU, et al, 2016. Immunomodulatory effect of oyster peptide on immunosuppressed mice[J]. Beijing Da Xue Xue Bao (Health sciences), 48(3): 392–397 (in Chinese with English abstract). 杨发明 ,林海生 ,秦小明 ,等 , 2020.牡蛎酶解产物促进皮肤软组 织创伤愈合的作用 [J].上海海洋大学学报 , 29(4): 632–640. YANG FAMING, LIN HAISHENG, QIN XIAOMING, et al,2020.Effectofenzymolysisproductsofoysteronwound healingofskin[J].JournalofShanghaiOceanUniversity,29(4): 632–640 (in Chinese with English abstract). 杨华 ,刘黎明 , 2017. 297例乳母膳食对乳汁成分的影响 [J].中国 妇幼健康研究 , 28(8): 897–899. YANG HUA, LIU LIMING,2017. Influence of mother’s diet on ingredients of breastmilk in 297 cases[J]. Chinese Journal of Woman and Child Health Research, 28(8): 897–899 (in Chinese with English abstract). 叶子晴 ,赵祥弹 ,蔡冰娜 ,等 , 2022.牡蛎酶解物减轻 5-FU 对荷瘤 小鼠肠黏膜损伤的作用研究 [J/OL].热带海洋学报 , 41(5):105–116. YE ZIQING, ZHAO XIANGTAN, CAI BINGNA, etal,2022.Oysterhydrolysatesalleviate5-fluorouracil-inducedintestinalmucosalinjuryonS180tumor-bearing mice[J]. Journal of Tropical Oceanography, 41(5): 105–116. http://kns.cnki.net/kcms/detail/44.1500.p.20211224.1151.002. html (in Chinese with English abstract). 曾新斌 , 2011.牡蛎粗多糖对热应激雄性动物血液生化指标及生 精功能的影响 [D].福建 :福建农林大学 . ZENG XINGBIN,2011. Study on polysaccharide oyster on animals in blood indexes and the function of production sperm under heat stress condition[D]. Fujian: Fujian Agriculture and Forestry University (in Chinese with English abstract). 张佩 ,陈忠琴 ,曹文红 ,等 , 2022.牡蛎抗氧化及降糖肽的结构特 征及其体外模拟消化特性 [J].食品与发酵工业 , 48(21):196–203. ZHANG PEI, CHEN ZHONGQIN, CAO WENHONG, et al, 2022. Structural characteristics of antioxidant and hypoglycemic peptides from oyster (Crassostreahongkongensis)andtheirsimulateddigestive propertiesinvitro[J].FoodandFermentationIndustries,48(21): 196–203 (in Chinese with English abstract). 中国发展研究基金会 , 2019.中国母乳喂养影响因素调查报告 [R/OL]. (2019-2-28)[2019-5-31]. https://cdrf.org.cn/jjh/pdf/mu.pdf. CHINA DEVELOPMENT RESEARCH FOUNDATION, 2019. A surveyoffactorsinfluencing breastfeeding in China[R/OL]. (2019-2-28)[2019-5-31]. https://cdrf.org.cn/jjh/pdf/mu.pdf(inChinesewithEnglish abstract). 朱国萍 ,章超桦 ,曹文红 ,等 , 2021.牡蛎酶解产物对小鼠学习记 忆的影响 [J].广东海洋大学学报 ,41(4):84–92.ZHU GUOPING, ZHANG CHAOHUA, CHAO WENHONG, et al,2021. Effect of Oyster Hydrolysates on Ameliorating LearningandMemoryinMice[J].JournalofGuangdong OceanUniversity,41(4):84–92(inChinesewithEnglish abstract). GUPTAPM,PERRINECG,CHENJIAN,etal,2017. MonitoringtheWorldHealthOrganizationGlobalTarget 2025forExclusiveBreastfeeding:ExperienceFromthe United States[J]. Journal of Human Lactation, 33(3): 578–581. JAE H H, JOON S B, YEUNG J C, et al, 2019. Anti-melanogenic effectsofoysterhydrolysateinUVB-irradiatedC57BL/6J miceandB16F10melanomacellsviadownregulationof cAMP signaling pathway[J]. Journal of Ethnopharmacology,229: 137–144. JOSEPHINEFT,BARBARAKV,RUSSELLCH,2008. Historical perspectives of prolactin and growth hormone as mammogens,lactogensandgalactagogues--agogforthe future![J]. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia,13(1): 3–11. LEI JIAN, FENGDINGYUAN,ZHANG YONGLIANG, et al,2012. Nutritional and regulatory role of branched-chain amino acidsinlactation[J].Frontiersinbioscience(Landmark edition), 17(7): 2725–2739. LINMAN,WANGNA,YAOBEI,etal,2017.Quercetin improves postpartum hypogalactia in milk-deficient mice via stimulating prolactin production in pituitary gland[J]. Phytotherapy Research, 32(8): 1511–1520. LIN YE, SUN XIAOXU, HOU XIAOMING, et al, 2016. Effects of glucose on lactose synthesis in mammary epithelial cells from dairy cow[J]. BMC Veterinary Research, 12: 81. LUKE E G, MARY E W, DONNA T G, 2021. What evidence do we have for pharmaceutical galactagogues in the treatment of lactation insufficiency?–a narrative review[J]. Nutrients,11(5): 974. MCCANN S M, LUMPKIN M D, MIZUNUMA H, et al, 1984. Peptidergic and dopaminergic control of prolactin release[J]. Trends in Neurosciences, 7(4): 127–131. OTTOC,SÄRNEFÄLTA,LJUNGARSA,etal,2015.A neutralizingprolactinreceptorantibodywhosein vivo application mimics the phenotype of female prolactin receptor-deficientmice[J].Endocrinology,156(11):4365–4373. PARÉP,REALESG,PAIXÃO-CÔRTESVR,etal,2020. Molecular evolutionary insights from PRLR in mammals[J]. General and Comparative Endocrinology, 309: 113791. PENG ZHILAN, CHEN BEIBEI, ZHENG QIANSHENG, et al, 2020. Ameliorativeeffectsofpeptidesfromtheoyster(crassostrea hongkongensis)proteinhydrolysatesagainstuvb-inducedskin photodamage in mice[J]. Marine Drugs, 18(6): 288. VELÁZQUEZ-VILLEGASLA,LÓPEZ-BARRADASAM, TORRES N, et al, 2015. Prolactin and the dietary protein/carbohydrate ratio regulate the expression of SNAT2amino acid transporterinthemammaryglandduring lactation[J]. Biochimica et Biophysica Acta, 1848(5): 1157–1164. WANG JIAPEI, HU JIANEN, CUIJINZHE, et al, 2008. Purification and identification of a ACE inhibitory peptide fromoysterproteinshydrolysateandtheantihypertensive effectofhydrolysateinspontaneouslyhypertensiverats[J]. Food Chemistry, 111(2): 302–308. XIANGXING-WEI,ZHENGHUI-ZHEN,WANGRUI,etal,2021. Ameliorative effects of peptides derived from oyster (crassostrea gigas) on immunomodulatory function andgut microbiotastructureincyclophosphamide-treatedmice[J]. Marine Drug, 19(8): 456. ZHANG FENG, QIN XUE, BAI TING, et al, 2021. Postpartum FatigueandInhibitedLactation[J]. BiologicalResearchfor Nursing, 24(1): 128–139. ZHANGZIRAN,SUGUOWAN,ZHOUFEIBAI,etal,2019. Alcalase-hydrolyzed oyster (Crassostrea rivularis)meatenhancesantioxidantandaphrodisiac activities in normal male mice[J]. Food Research International, 120: 178–187. ZHOUGANG,XUQIAOYUN,WUFEIFAN,etal,2021a. Arginine alters miRNA expression involved in development and proliferation of rat mammary tissue[J]. Animals, 11(2):535. ZHOUMIAOMIAO,XULIANBIN,ZHAOFENGQI,etal,2021b.Regulationofmilkproteinsynthesisbyfreeand peptide-bound amino acids in dairy cows[J]. Biology, 10(10):1044.