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细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验,而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。 为什么细胞解冻后缺少活力,活细胞占比较低?这种现象可能主要由以下几种原因所导致: 1)培养物冻存液等质量欠缺 解决方案 a.确保用来制备储存物(冻存液)的起始培养物需要保证其健康、无微生物污染、处于生长对数期后期状态。 b.收获细胞时需要小心翼翼,避免细胞损伤。 2)储存物冻存方法不当 解决方案 a.在液氮冷冻细胞时,确保细胞、培养基和其他试剂的浓度,以及冻存实验步骤依照供应商的建议。一般来说,冻存应该缓慢,大约1-3°C/min以减少冰晶形成。 b.使用电子可编程或机械冷冻装置以确保一致的、适当速率的冷冻。 c.选择最合适的细胞冷冻保护剂。如果使用甘油,不要将其存储在光照下,因为曝光会使甘油转化为有对细胞毒性的丙烯醛。 3)储存物保存不当 解决方案 a.储存物应时刻保持在-130℃,理想情况是置于液氮中,以确保较大的细胞活性。 b.如果将细胞直接浸入液氮中,容易造成液氮泄露到冻存管内,解冻时会有冻存管爆炸的风险。所以一般储存在液氮上方的气相环境中。 4)细胞解冻方法不当 解决方案 a.一般来说,细胞应该快速解冻、使用预热的培养基、尽快移除含有冷冻保护剂的培养基防止细胞活力下降。 b.确保小心操作细胞。不要涡旋或高速离心,因为低温保存后的特别容易受到损伤。
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上海远慕生物科技有限公司为您提供《细胞解冻后缺少活力,活细胞占比较低解决方案》,该方案主要用于其他中细胞检测,参考标准《暂无》,《细胞解冻后缺少活力,活细胞占比较低解决方案》用到的仪器有C57小鼠血清、N6培养基维生素溶液、VERO绿猴肾细胞。
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