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【讨论】【第三届网络原创大赛&极限体验征文】我与月旭的柱子情缘

zqy0797

2010/07/31

维权声明：本文为zqy0797原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的，均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。

认识月旭已经是几年前的事了，当时销售给我推荐一款纯水柱，而我们用无有机相的色谱条件几乎不多，意味用这个类型的柱子不是特别多，也就没考虑。几年之后，又在仪器信息网看到了老朋友，才知道那个柱子的公司中文名字叫月旭。

最近做氨基酸样品，也是被柱子问题缠扰，个别峰分离度不好，造成数据无法报出，而原来的柱子供应商早已经涨了价，这个价可不小哦，涨了1000大洋呢，说句不好听的，拿这个钱都可以再买个柱子了。可怜我是小公司，本着省钱的理念，找到了月旭咨询，还好S版主一下给我推荐了适合我口味的柱子（难怪版面也做的这么合大家的口味，呵呵！）。好，切入正题，说说我做的工作。

我拿到柱子就进行了活化处理，然后就进行了氨基酸的测定。具有代表性的用柱前衍生的氨基酸分析方法，包括有用衍生试剂的邻苯二甲醛、异硫氰酸苯脂、荧光胺、氯化丹酰等, 还有AccQ-Tag法。反应操作各不相同，有的在室温下只须混合即可快速反应，有的在反应中必须加热，还有的反应后必须净化等。但是我们已经习惯了用2,4-二硝基氟苯做衍生化试剂，毕竟自己熟悉的方法，做起来得心应手，改方法除了定位，还要区考查数据可靠性，确实麻烦！先列下成果吧：

色谱条件：
仪器：Waters 2695, 紫外检测器，自动进样
色谱柱：Ultimate AA，4.6m*250mm，5um
波长：355nm，柱温：30℃，流速：1.0ml/min
流动相：（公司机密，不好透露，跟文献上的差不多），进行梯度洗脱

分离度不用我说，大家一看就知道，拿去与文献上的色谱图比较，就知道柱子的性能了，由于工作站的原因，无法列出具体的理论塔板数。柱子的性价比还是相当高的。

总结：
此次试用，所有氨基酸的峰全部分开。虽然有很多方法都是做18种氨基酸，但是我只做17种氨基酸，因为色氨酸在样品处理的过程中其实已经被破坏，所以做18种没有什么意义。但是用用的是2,4-二硝基氟苯做衍生化试剂，属于剧毒物质，据说有腐蚀性，弄到皮肤上洗不下来（深受受其害），所以要注意安全，另外现在市场上这个试剂属于巨毒试剂，很难买到，我们也在考虑改其他方法，欲知后事，期待下回吧，因为很晚了，要睡觉啦！

精
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huaibeijiayuan

第1楼2010/08/01

把原来色谱柱分析的谱图拿上来比较一下看看

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小卢

第2楼2010/08/01

这末班车干的，就还剩一个小时啊！
看图形，分离的是相当好啊！

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zxhcnf

第3楼2010/08/01

很好的分析方法和谱图，看来2,4-二硝基氟苯是一种很好的衍生化试剂，不知道衍生后的化合物稳定性如何，因为我们经常用的是异硫氰酸苯酯来做衍生化试剂

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samanthalas

第4楼2010/08/02

呵呵！我来上传一下文献上的内容：

0

samanthalas

第5楼2010/08/02

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samanthalas

第6楼2010/08/02

大家也可以讨论一下，自己检测氨基酸的方法是什么，各种方法有什么优缺点。

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zxhcnf

第7楼2010/08/02

感谢小S版主把整篇论文贴出来，上好的教材啊！获益良多，感谢分享！

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小不董

第8楼2010/08/03

应助达人

衍生不好做，很多人做不好，所以很多人也不原意做衍生。

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东风恶

第9楼2010/08/04

异硫氰酸苯脂衍生法（柱前），也是用月旭的色谱柱分析18种氨基酸。

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samanthalas

第10楼2010/08/05

我一直期待着东风恶版主来看看这个帖子啊，到底异硫氰酸苯脂衍生法，和本贴的2，4-二硝基苯氟衍生的方法，哪个谱图好呢？
东风恶(luoleqc) 发表:异硫氰酸苯脂衍生法（柱前），也是用月旭的色谱柱分析18种氨基酸。

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