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【原创】对LC的认识（8）

厂商论坛

  • 今天继续对版友关心的问题谈我的认识。
    首先有版友提到提到关于怎么样防止柱子脏的问题，这是个仁者见仁、智者见者的问题。总体上说要保证分析的样品足够“干净”，也就是在前处理上下功夫，有很多基本的手段，像离心、固相萃取、过0.22微米膜等等。我有个不确切的认识，一般我都是保证样品几乎没什么颜色才进样的，因为有颜色的目标组分它们的紫外吸收一般都较强，所以浓度可以在浓度尽可能低下进样分析。样品的进样浓度肯定不能大，一般在紫外检测器检测，有几十个毫吸光度的响应就足够了，记住样品浓度大肯定带来的杂质组分相应就多；还有一个方面柱子最好定期的维护，一般用小流速的甲醇冲洗，也可以用10%的异丙醇不接检测器冲洗，关于为什么要用异丙醇我解释下：一方面是因为异丙醇的洗脱能力较强，可以把柱子内的杂质尽可能排除，另一方面是异丙醇可以增大样品的溶解性和提高溶剂的兼容性，像异丙醇，四氢呋喃等等都有这个作用。最后再设置个梯度用过甲醇和水冲洗柱子。
    有版友还提到过怎么才能增加对色谱柱的认识。实际上认识色谱柱并不难，一般我们接触最多的也就是反相柱，搞清楚一点，反相柱填料硅胶用的最多，通过硅胶上游离的硅羟基和硅烷试剂的作用可以在硅胶上键合不同的官能团。如果官能团的是非极性的或者弱极性的，那么就是反相柱。像C18柱，苯基柱，等等，如果官能团是极性的就是正相柱，像氰基柱，氨基柱，硝基柱，等等。我个人认为弄清楚最基本的几种柱子就行了，比如氨基柱，比如hilic柱子，它们的共同点都是可以反相使用的正相柱，它们使用的流动相、使用的注意事项等等弄清楚就行了。
    大家在柱子上面有什么疑问提出来共同讨论，谢谢。
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  • dzh2188

    第1楼2010/10/10

    就柱子保护上面，我觉得使用保护柱还有有一定的效果的，只是使用保护柱当然要增加投入，增加换保护柱的劳动；再有就是管道压力会相应的提高一些。还有就是不熟练的话保护柱容易漏夜。

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  • xue2009

    第2楼2010/10/10

    对，我也就是考虑保护住压力变大等等一些劣势所以没提到，补充的很好

    dzh2188(jlf123) 发表:就柱子保护上面，我觉得使用保护柱还有有一定的效果的，只是使用保护柱当然要增加投入，增加换保护柱的劳动；再有就是管道压力会相应的提高一些。还有就是不熟练的话保护柱容易漏夜。

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    第3楼2010/10/10

    其实提高的并不明显，一般相对于本柱的压力来说，不算什么，哈哈
    不过你想得很周到

    dzh2188(jlf123) 发表:就柱子保护上面，我觉得使用保护柱还有有一定的效果的，只是使用保护柱当然要增加投入，增加换保护柱的劳动；再有就是管道压力会相应的提高一些。还有就是不熟练的话保护柱容易漏夜。

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  • 东方逸

    第4楼2010/10/10

    期待楼主继续，帖子不错。

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  • 土老冒豆豆

    第5楼2010/10/11

    应助达人

    很少见人用四氢呋喃来洗柱子的，异丙醇倒很常见。

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    第6楼2010/10/11

    是的，我也没见过~
    以前有个师姐，流动相中加过四氢呋喃，压力特别高~

    土老冒豆豆(土老冒豆豆) 发表:很少见人用四氢呋喃来洗柱子的，异丙醇倒很常见。

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  • ruby70303

    第7楼2010/10/12

    用这两个洗柱子，压力都会很高的

    环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:是的，我也没见过~
    以前有个师姐，流动相中加过四氢呋喃，压力特别高~

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  • isee

    第8楼2010/10/12

    异丙醇洗是不错的选择

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  • ruby70303

    第9楼2010/10/12

    低流速冲洗

    isee(isee) 发表:异丙醇洗是不错的选择

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  • 19861005

    第10楼2010/10/12

    呵呵，四氢呋喃可以洗柱子，见过一次

    土老冒豆豆(土老冒豆豆) 发表:很少见人用四氢呋喃来洗柱子的，异丙醇倒很常见。

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