液相流动相的问题

配好的缓冲液,用之前用滤膜过滤了吗?用完以后拿大比例的水长时间冲洗一下

用之前要用滤膜过滤。用完以后拿大比例的水（90%-95%），长时间冲洗一下，在用有机相冲洗。

我也经常用缓冲盐当流动相，没有堵的情况，经常用水和有机相维护系统应该没问题。

磷酸盐做流动相,用前先过滤.一定要当天用当天配,防止长菌

我是每次都过滤缓冲盐的,冲洗也有,但是还是会有这种情况,用别的缓冲盐这种情况出现比较少!!

这是由于有脏物微粒和缓冲液盐析所造成的堵塞。1、使用磷酸盐缓冲溶液作流动相时(一般不超过0.03M),应先用0.45μ的水系滤膜过滤（常用负压抽滤）。2、除气泡后再上机。3、用完后,先用超纯水1.0ml/min冲洗仪器40-60分钟,再用HPLC级甲醇冲洗封灌20分钟。不会出现泵堵塞现象。4、另外注意，所配好的缓冲液不用时应放4℃冰箱保存，且常配常用（一般不超过4天），否则会滋长细菌。5、（1）如果缓冲液中加入一定比例的有机溶剂如甲醇/乙腈等,则用0.45μ的有机系滤膜过滤。（2）、有机相一般在使用前加入，且比例不宜太大，以防使用过程中出现盐析。