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近期要购买半制备高效液相色谱,请问要注意哪些技术参数?

综合仪器采购

  • 本人所在的实验室想购买一台半制备型的高效液相色谱,主要用来分离酶和多糖,请问要注意哪些技术参数才能满足我的要求?谢谢
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  • richies

    第1楼2011/12/13

    分离酶有点困难吧?

    酶是蛋白质,会有2个问题,一个是分子量过大,一般的HPLC的100A填料最大分子量也就到10KD,即使用300A也就到20-50KD

    二,大部分的酶是怕有机溶剂的,在有机体系中,蛋白质会变性的

    同理,多糖也是只能做点寡聚糖,太大分子量的多糖在HPLC上面也做不了

    因此,建议LZ买中压色谱,用凝胶来做制备

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  • feng861024

    第2楼2011/12/13

    半制备色谱要分离酶之类的大蛋白,存在填料的问题,就像楼上所说的。

    如果要分离大物质的话可以使用中压制备,或者使用没有填料的场流分离系统来分离。

    前者的纯度要低一点可以在95%左右,后者的纯度可以在99%以上。

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  • hongyestn

    第3楼2011/12/14

    谢谢你的建议,目前我们用分析HPLC纯化酶用到的是缓冲盐系统,酶失活率不会很大,但就是制备的量太小,所以想买个半制备型的高效液相,分离多糖分子量在1、2万左右,也不会很大吧

    richies(richies) 发表:分离酶有点困难吧?

    酶是蛋白质,会有2个问题,一个是分子量过大,一般的HPLC的100A填料最大分子量也就到10KD,即使用300A也就到20-50KD

    二,大部分的酶是怕有机溶剂的,在有机体系中,蛋白质会变性的

    同理,多糖也是只能做点寡聚糖,太大分子量的多糖在HPLC上面也做不了

    因此,建议LZ买中压色谱,用凝胶来做制备

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  • richies

    第4楼2011/12/15

    如果你们可以用HPLC来分离你所要的物质,那么就根据你们所需要的分离条件来选择制备色谱

    主要是2个方面,一个是流量,一个是压力

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  • xiaowang268

    第5楼2011/12/15

    主要还是要先定个价格区间

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  • richies

    第6楼2011/12/15

    参数都没,咋订价格区间

    50ml的和500ml的价格区别大了

    再说,是单泵还是双泵,要不要走梯度,做多少颗粒的柱子,压力多少

    xiaowang268(xiaowang268) 发表:主要还是要先定个价格区间

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  • 小虾米

    第7楼2011/12/15

    凝胶来做制备是不错的选择

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  • hongyestn

    第8楼2011/12/15

    最近看到waters purifer100好像还不错,有用过这款的吗?

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  • richies

    第9楼2011/12/16

    Purifer 100好像不是WATERS的吧?我印象中这个东西是GE AKTA的

    不知道是不是我记错了

    hongyestn(hongyestn) 发表:最近看到waters purifer100好像还不错,有用过这款的吗?

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  • hongyestn

    第10楼2011/12/16

    对对对,是我记错了,ge akta purifer 100,有没有它的规格参数?我找不到

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