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固相萃取常见问题解决方案

xiongbb

2012/01/28

现在固相萃取的应用越来越多，好处不多说了，而且固相萃取住基本都是一次性的，会出现各种各样的问题。下面列举了一些常见的问题，即兴想的，如果还有其它问题，跟帖，我尽量挑着会的回答。

列举之前，先说一些建议：

1、选择正规的固相萃取厂家，可以保证spe柱的稳定；一般认为具有独立键合能力的厂家比较稳定；
2、认真对待固相萃取的过程；
3、如果有条件，可以选择一款自动的固相萃取仪器；

话不多说了，下面列举问题：红色字体是解决办法；

1、目标化合物回收率低：

（1） spe柱没有很好的预处理；选择合适的溶剂活化spe柱，如果有需要避免spe柱干涸；

（2） Spe柱极性不合适；选择对目标物有明显选择性的spe柱；

（3）目标化合物对样品的亲和力大于与spe柱的亲和力；改变极性或者样品的ph使目标物在样品中的亲和力降低；

（4）当大体积样品经过spe柱时候，spe柱填料的活性降低；在样品中添加少量的活化液；

（5）洗脱溶剂强度不够强，无法将目标物从spe柱上洗脱；改变洗脱强度或ph，增加洗脱溶剂对目标物的亲和力，或者破坏spe柱和目标物之间作用力；

（6）洗脱溶剂体积太小；增加体积；

（7）淋洗液强度太大；更换淋洗液种类；

（8）目标物不可逆吸附在spe柱上；这个就困难了，只能更换spe柱；

（9）目标物保留不完全；考虑流速、柱容量；

2、固相萃取重现性差：

（1）样品添加到spe柱的时候，spe柱已经干涸；重新对spe柱进行活化；

（2）Spe柱超容量；降低样品量或者增加大规格spe柱；

（3）样品过柱流速不稳；降低流速；

（4）洗脱液流速太快；降低流速，或者洗脱液分2次洗脱；

（5）目标物在样品中的溶解度太大，样品过柱时与样品同时过柱，保留不完全；改变样品极性或者ph而改变目标化合物的溶解度；

（6）Spe柱用极性溶剂处理而洗脱溶剂是不兼容的非极性溶剂；洗脱之前充分干燥spe柱；

（7）淋洗液清洗杂质的同时清洗掉部分目标物，取决于流速、spe柱、极性等；降低淋洗液强度；

（8）洗脱体积小；增大洗脱体积；

3、洗脱的馏分含有干扰物：

（1）干扰物与目标物同时被洗脱；选择合适的淋洗液清洗杂质；选择合适亲和力的spe柱；

（2）干扰物来自spe柱；充分预处理spe柱；用两根不同极性的spe柱除去干扰物；

4、spe柱流速降低或阻塞

（1）样品中存在大量颗粒物；对样品进行离心，过滤；

（2）样品溶剂粘度大；对样品进行稀释；

5、用反相柱从含有蛋白的基质中萃取目标物：

（1）目标物和蛋白质建合使分析物通过spe柱而没有保留；通过改变样品中的ph或者用水对样品稀释破坏蛋白键合；加酸去除蛋白质；加入有机溶剂去除蛋白质，离心后用水或缓冲盐将上清液稀释至有机溶剂含量少于10%；

6、用常规柱萃取蛋白质的回收率低：

（1）蛋白质体积太大不能进入萃取柱的微孔；用大孔柱或者离子交换柱；

（2）蛋白质不可逆的被吸附在反相spe柱上；蛋白质在spe柱担体微孔内变性；用大孔柱或离子交换柱；

有说的不对的，指出来，我会修改。

还有如果上述不能解决你的问题，我有绝招：

1、有困难找百度；
2、有困难找厂家，你告诉他，给我做好了应用，我就买你家柱子，一般厂家不会拒绝的；

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arvid2007

第1楼2012/01/28

楼主是高手啊，总结得这么仔细

0

imtoxiner

第2楼2012/01/28

楼主加油！

0

greenz

第3楼2012/01/29

楼主那么晚还在发帖子？？太厉害了，佩服佩服

0

ionbaby

第4楼2012/01/30

我想知道的是自动固相萃取为什么那么贵呢？贵在哪里？有没有可以推荐的品牌，我正准备买。。。谢谢！还有就是快速溶剂萃取，貌似也特别的贵，不知道有没有高手给介绍一下。。。

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xiongbb

第5楼2012/01/30

国产的推荐agela

进口的推荐吉尔森 carpiler

你是做哪个方面呢？

一般贵在概念上了。哈哈
ionbaby(ionbaby) 发表:我想知道的是自动固相萃取为什么那么贵呢？贵在哪里？有没有可以推荐的品牌，我正准备买。。。谢谢！还有就是快速溶剂萃取，貌似也特别的贵，不知道有没有高手给介绍一下。。。

0

zjzy

第6楼2012/01/30

都是经验之谈那，学习学习，好贴，可以收藏起来，以备以后实验用呢

0

yigaozizi

第7楼2012/01/31

多谢楼主贡献这么多经验！学习！

0

爱涂涂

第8楼2012/01/31

楼主总结的好仔细感谢分享这么好的东西

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ionbaby

第9楼2012/02/02

我也觉得这玩意应该不会那么贵，原理上都是很简单的，几十万，十几万，似乎都是贵了些，1-3万还能接受一下
xiongbb(xiongbb) 发表:国产的推荐agela

进口的推荐吉尔森 carpiler

你是做哪个方面呢？

一般贵在概念上了。哈哈

0

llltoo

第10楼2012/03/02

推荐Reeko的Fotector全自动固相萃取。

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