【转帖】样品进样技巧

液相没用过手动进样方式，就是质谱分析的时候用过，那个注射器插在上面不带拔的，有时候做完方法后进样口会被污染导致峰形矮胖，谢谢楼主分享，可以参考一下

六通阀气体进样技巧分享











在气相色谱分析中，进样是定量分析误差的主要来源之一。由于进样系统的原理、结构、使用材料、进样时的温度、进样量、进样快慢、进样用的工具等都会对气相色谱分析的定性定量的重复性和正确性产生直接影响。在实际分析中由于样品的气、液、固、状态不同，分析目的不同，要求不同，用于GC的进样系统种类繁多，如：常压气体样品就有六通阀气体进样或注射针筒进样两种。以下我们仅以气体样品六通阀进样技术与技巧回纳总结几点，供常做气体分析的工作者参考。

常压气体样品采用医用注射器（1毫升~5毫升）通过注射隔垫注射进样，简单、灵活，但缺点时有样品反冲和渗漏，定



量误差大，重复性一般在2.5%以上。这是由于柱前压高于环境大气压力，样品气会沿注射管内壁渗漏造成的。这时固然可以通过在管内壁上涂一层高温真空硅脂进步气密性来弥补，但又会出现硅脂对有机物的吸附作用，定量误差仍然很大。若用六通阀定体积进样，不但操纵方便、迅速切结果也较正确。只要操纵公道又把握一定的技巧，重现性可小于0.5%。即使环境温度、压力变化或不同校正起来也很轻易方便。另外，六通阀还可以直接用于高压气体进样。

1． 分析了解您所配用的六通阀的工作原理、结构和样品直接接触阀材料是否适合你的分析要求；

2． 由于阀的气密性差异很大（0.1~0.6Mpa）,接进您的气路系统时，能否保证不漏气?否则不但影响仪器的稳定性，且不能保证仪器进样的重现性;

3． 定量管体积: 在灵敏度满足要求的情况下尽量小,最大定量管体积应在实验时，塔片数下降不超过10%为限。否则进一步增加进样量，只增加峰宽而不增加峰高，或者说，应使色谱峰宽基本不展宽时的进样量为最大定量管体积。对于填充柱一般不易大于5毫升；

4． 目前为了不影响液体注射进样，常把六通阀串接在汽化室的进口处，显然这种接法增加了一定的死空间。分析要求较高时，最好跨过汽化室直接进进色谱柱或把六通阀载气出口直接通过注射垫插进柱头；

5． 在环境温度下，样品组分有可能冷凝或含有微量液体气体样品时，应考虑六通阀（含导进仪器的管线）温度影响：a)把阀放进色谱柱箱；b)单独控温加热;

6． 样品予处理题目: a)应防止灰尘、机械颗粒进进阀内影响气密性或正常工作; b)避免高沸点杂质对阀的污染;

7． 取样方式: 为防止可能造成的环境中的气体成分对样品的污染或干扰，最好通过大注射器针头象液体进样一样打进定量管。不易用各种胶管或塑料管接进这可能：a)管材本身不纯净; b)各种管材原则上讲都会有渗透作用，这对痕量分析尤其不利。

8． 取样工具：目前常用的是金属镀膜取气袋、大注射器或专用取气钢瓶。除非要求极低，目前已很少采用球胆、塑料袋取气等；

9． 定量管内样品的气压：由于气体的含量和气压直接有关，为保证每次进样的重复性，取样后要使定量管的压力与大气压平衡，依据经验一般在取样后平衡20~30秒即可；

10． 冲洗定量管样品体积：由于被分析的气体样品浓度不同，为防止进较高浓度后又进较低浓度样品时，定量管中原有高浓度气体残留的干扰。取样时要求用新样品气对定量管进行冲洗，冲洗气量依据经验不小于定量体积的5倍。实际影响也可以通过实验峰的重现性来判定与选择；

11． 进样后什么时间，在把六通阀旋回到取样位置？

要视分析情况，如：进样后基线的波动性，定性定量的重复性来决定，依据经验一般是在进样数秒后（此时第一个色谱峰还未出现之前），把阀旋回到取样位置比较好。这时易消除阀气密性欠佳和定量管体积过大对基线或出峰地影响；

12． 如发现阀的气密性差或被污染有经验的操纵者可以对六通阀进行拆洗，但应留意阀体和阀瓣的密封面只准用柔软的棉织品擦、溶剂应用易挥发的己烷、丙酮、三氯甲烷等，清洗后用干燥空气吹干。但应特别留意，用于ECD的气体六通阀进样系统应避免使用含卤族的碳氢化合物（如：三氯甲烷）做清洗剂，否则这些干扰溶剂将长时间以痕量水平存在而出现怪峰。

怎么靠近右边那一侧有些字看不清楚啊

进样器



早期使用隔膜和停流进样器，装在色谱柱入口处。现在大都使用六通进样阀或自动进样器。进样装置要求：密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。HPLC进样方式可分为：隔膜进样、停流进样、阀进样、自动进样。



1．隔膜进样。用微量注射器将样品注入专门设计的与色谱柱相连的进样头内，可把样品直接送到柱头填充床的中心，死体积几乎等于零，可以获得最佳的柱效，且价格便宜，操作方便。但不能在高压下使用（如10MPa以上）；此外隔膜容易吸附样品产生记忆效应，使进样重
复性只能达到1~2%；加之能耐各种溶剂的橡皮不易找到，常规分析使用受到限制。



2．停流进样。可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新启动时往往会出现“鬼峰”；另一缺点是保留时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中，效果较好。



3．阀进样。一般HPLC分析常用六通进样阀（以美国Rheodyne公司的7725和7725i型最常见），其关键部件由圆形密封垫（转子）和固定底座（定子）组成。由于阀接头和连接管死体积的存在，柱效率低于隔膜进样（约下降5~10%左右），但耐高压（35~40MPa），进样量准确，重复性好（0.5%），操作方便。



六通阀的进样方式有部分装液法和完全装液法两种。①用部分装液法进样时，进样量应不大于定量环体积的50%（最多75％），并要求每次进样体积准确、相同。此法进样的准确度和重复性决定于注射器取样的熟练程度，而且易产生由进样引起的峰展宽。②用完全装液法进样时，进样量应不小于定量环体积的5~10倍（最少3倍），这样才能完全置换定量环内的流动相，消除管壁效应，确保进样的准确度及重复性。



六通阀使用和维护注意事项：①样品溶液进样前必须用0.45µm滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。②转动阀芯时不能太慢，更不能停留在中间位置，否则流动相受阻，使泵内压力剧增，甚至超过泵的最大压力；再转到进样位时，过高的压力将使柱头损坏。③为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。




4．自动进样。用于大量样品的常规分析。

应助达人

手动还没试过气体呢
这个比液体要求更严格吧

手动进样应该有气体进样器，估计差不多吧。

应助达人

估计这个比液体进样要麻烦的多

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　　气相手动进样针技巧告诉你

　　气相尖头进样针分为有留液注射器(常见1ul)与无留液注射器(常见10ul), 还有气体注射器(常见1ml)

　　气相的常规手动注射器进样技巧分为二类:

　　1. 一种是进液体样品(常见1ul/10ul), 又分为高浓度样品与含溶剂样品.

　　进针技巧, 扎针时感觉进样垫较紧, 则注样后拔针可快; 若扎针时感觉进样垫较松, 则注样后拔针可慢点. 一般教学时要求三快, 但熟练后自己掌握.

　　安捷伦进样垫设计时只要求紧一圈多的螺纹到底, 则进针技巧前10针可拔针快, 而后10针则拔针稍慢点, 最后10针慢慢拔出. 主要是为防止柱前压反冲出载气, 造成样品峰有拖尾和进样量不重现.

　　岛津进样垫设计手紧螺纹可调节, 刚装垫圈手紧压帽松点, 只要柱前压不漏气; 等进针十多针后再紧一下螺纹, 进针技巧同前面.

　　2. 另一种是进气体样品(常见1ml)

　　气体样品由于进样量大而且可压缩特点, 一般进样气后柱前压增加大, 则进样气后拔针稍慢点. 特别是柱前压在0.2-0.3Mpa 则进针要一次性有力地注射样气, 再按住针头与注射器一起缓缓拔针, 操作要求重现良好.

　　建议: 选1ml注射器要求筒内壁与兰芯杆的表面全部有磨沙毛面, 确保气密性良好.

液体进样稳定性比较好 气体进样受到的干扰因素较多