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样品从分析到制备后的现象分析

厂商论坛

  • 请问各位做过样品纯化的砖家，帮小的分析一下下面这个情况的原因吧。
    我在色谱上样品能分析出来，但是在专门的制备仪器上却没有峰出现了？
    请问是样品量太小，柱子对样品形成了死吸附，还是检测器选错了，我做的样品是蛋白或者核酸偶联的纳米材料，检测器都是用的紫外的。
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  • xiongbb

    第1楼2012/04/05

    分析的柱子和制备柱填料一样么？用的流动相比例呢？

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  • valentinayuan

    第2楼2012/04/06

    如果是蛋白样品的话紫外检测器肯定没问题，因为蛋白分子中有芳香族氨基酸在280nm处有特征吸收，会不会是上样量太小导致

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  • belindayy

    第3楼2012/04/06

    可以考虑几个方面：上样量；是不是特征吸收，波长是否合适；用什么溶剂，是不是溶剂有吸收

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  • lixuesw

    第4楼2012/04/06

    用的柱子是一样的
    流动相是缓冲盐、乙腈

    xiongbb(xiongbb) 发表:分析的柱子和制备柱填料一样么？用的流动相比例呢？

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  • lixuesw

    第5楼2012/04/06

    有这种可能，但是可以用单独的紫外检测器检测出蛋白的存在，可是在制备仪器上没有峰

    valentinayuan(valentinayuan) 发表:如果是蛋白样品的话紫外检测器肯定没问题，因为蛋白分子中有芳香族氨基酸在280nm处有特征吸收，会不会是上样量太小导致

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  • lixuesw

    第6楼2012/04/06

    上样量小，但是是特征吸收，波长合适的280，用的溶剂也合适，在色谱和紫外检测下都能检测出来

    belindayy(belindayy) 发表:可以考虑几个方面：上样量；是不是特征吸收，波长是否合适；用什么溶剂，是不是溶剂有吸收

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  • valentinayuan

    第7楼2012/04/09

    估计就是上样量小的原因了

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