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解决HPLC柱压过高的办法
省部重点实验室
2012/05/02
私聊
厂商论坛
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。
1拆去保护柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;2把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查。
3将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动性)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;
4更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商联系。一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题,SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。
我补充几点:
1:柱压过高时检测的基本原理就是顺着路线走向检查各个“路口”,包括从流动相走出的通路,三通,两通都要检查,因为如果曾经使用过缓冲溶液和盐做流动相,没有维护好的话,会对各个通路造成影响,极有可能腐蚀有些零件中的小附件,比如一些垫片,需要及时更换;
2:检测柱子的话,有些朋友都回答了很多了,我就补充一点,如果发现是预柱堵的话,可以用超声(加纯乙醇,甲醇)一段时间,可以恢复
至于能不能用纯水冲洗,应该由柱子决定,影响柱压的最基本因素就是流动相的粘度,纯物质的粘度最低,但是一般不建议用纯水常时间冲洗,用高浓度有机相较好。柱子使用完毕也应该按照说明书的用纯溶剂保存。
3:如果确定柱子没有问题,是系统的问题,就需要用纯水常时间冲洗一下系统
4:柱子和系统都没有问题的话,就是检测器的问题,很有可能是检测池堵了,尝试一下不接柱子,光连检测器看看,就会发现了。如果是检测池堵了,那按照你检测池的说明,一个一个零件卸下来,有顺序的,而且要非常小心,一个不小心,你就装不回去了。把可以清洗的部件超声一下。有些象石英之类的是不能超声的!
5:最后也是最惨的,就是你的检测器坏了,或者到了使用的寿命了,也会出现莫明其妙的不正常柱压!
注意:
样品的处理,以及流动相的处理,其次就是如果你的柱子原来是甲醇或乙腈保存,现在要用含缓冲盐流动相,应该先用乙腈/水(15/85)或甲醇/水(15/85)类似比例冲柱子,短柱20~30分钟,长柱40分钟以上,然后在走流动相,不然,想想看,结果柱压也是一样越来越高的。
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私聊
dahua1981
第1楼
2012/05/02
应助达人
液相
柱压高的排除对实验员的要求比较高
0
发表回复
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