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HPLC填料的选择

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  • 基质
    HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。陶瓷性质的无机物基质主要是硅胶和氧化铝。陶瓷性质的无机物基质刚性大，在溶剂中不容易膨胀。HPLC级的有机聚合物是基于交联的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小，更易压缩。溶剂或溶质容易渗入有机质基质中，导致填料颗粒膨胀，结果减少传质，最终是的柱效低。

    硅胶
    硅胶是HPLC填料最普遍的基质。除了具有无机物基质共有的高强度，还提供了一个表面，可以通过成熟的硅烷化技术键合范围很广的配基，制成反相、离子交换、疏水作用、亲水作用或分子排阻色谱。硅胶基质填料适用广泛的溶剂，从极性到非极性。它的弱点是在水溶性碱性流动相中不稳定。通常，硅胶基质的填料推荐的常规分析pH范围为2-8。

    聚合物填料
    高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯基质的填料是用于普通压力下的HPLC。当然，它们的压力限度比大多数的无机填料的压力限度低。苯乙烯-二乙烯苯基质疏水性强。使用任何流动相，在整个pH范围内稳定。因为能承受强酸强碱性的洗脱液，所以可以用NaOH或强碱来清洗色谱柱。甲基丙烯酸酯基质本质上比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更强，但它可以通过适当的功能基修饰变成亲水性的。这种基质不如苯乙烯-二乙烯苯那样耐酸碱，但也可以承受在pH13下反复冲洗。所有的聚合物基质在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。用于HPLC的高交联度聚合物填料，其膨胀和收缩要有限制。因为溶剂或小分子渗入聚合物基质中，小分子在聚合物基质中的传质比在陶瓷性基质中慢，所以造成小分子在这种基质中柱效低。对于大分子像蛋白质或合成的高聚物，聚合物基质的效能比得上陶瓷性质的基质。因此，聚合物基质广泛用于分离自然的或合成的高聚物。

    氧化铝
    氧化铝由于硅胶相同的良好物理性质，而且也能耐较大的pH范围。它也是刚性的，不会在溶剂中收缩或膨胀。但与硅胶不同的是，氧化铝的键合相在水相的流动相中不稳定。不过，已经出现了在水相中稳定的氧化铝键合相，并显示出优秀的pH稳定性。

    选择正确的基质

    硅胶 氧化铝 苯乙烯-二乙烯苯 甲基丙烯酸酯

    有机溶剂 +++ +++ ++ ++
    pH范围 + ++ +++ ++
    膨胀/收缩 +++ +++ + +
    耐压 +++ +++ ++ +
    表面化学性质 +++ + ++ +++
    效能 +++ ++ + +

    +++好 ++一般 +差

    硅胶基质的填料被用于大部分的HPLC分析，尤其是小分子量的被分析物，聚合物填料用于大分子量的被分析物质，主要用来制成分子排阻和离子交换柱。
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  • samanthalas

    第1楼2012/08/15

    一般色谱操作者都不太知道这个吧?
    上次我遇到一个药物分析的博士,他说他就知道一个C18柱啊.

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  • 东风恶

    第2楼2012/08/15

    以前，不是有药典培训吗，应该会知道这些的吧。

    samanthalas(samanthalas) 发表:一般色谱操作者都不太知道这个吧?
    上次我遇到一个药物分析的博士,他说他就知道一个C18柱啊.

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  • arvid2007

    第3楼2012/08/15

    这个要看如果他深入理解了C18，那也挺有学问的

    samanthalas(samanthalas) 发表:一般色谱操作者都不太知道这个吧?
    上次我遇到一个药物分析的博士,他说他就知道一个C18柱啊.

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  • fengmo4668

    第4楼2012/08/15

    难道，一个C18柱，就可以造就一个药物分析博士？？
    天呐，你们大家都是几料博士啊？

    samanthalas(samanthalas) 发表:一般色谱操作者都不太知道这个吧?
    上次我遇到一个药物分析的博士,他说他就知道一个C18柱啊.

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  • fengmo4668

    第5楼2012/08/15

    没有横向比较，光对C18一个纵向的钻研，可能钻研的深啊？？
    反正我是不信。

    arvid2007(arvid2007) 发表:这个要看如果他深入理解了C18，那也挺有学问的

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  • huaibeijiayuan

    第6楼2012/08/15

    看的不是很懂，慢慢学习

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  • sixingxing

    第8楼2014/07/18

    多看书，多学习！

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