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为什么同样条件下两天的吸光度却不同

紫外可见分光光度计(UV)

  • 各位老师好:
    这几天我和同事使用723分光光度计做水中碘化物的定值实验。在做标准曲线时,发现我们这几天做的吸光值都不相同(只同一浓度下所有条件均相同,仅相隔1到2天)现附实验数据:
    时间 浓度 10μg/L 8μg/L6 μg/L4 μg/L 2μg/L 0μg/L
    2012.8.13 吸光度1 0.3450.430 0.5160.656 0.7991.017
    2012.8.14 吸光度2 0.1340.215 0.316 0.454 0.578 0.784
    我们的样品处理方法是各取2ml标准液放入试管,加1ml过硫酸铵溶液,100度加热20min冷却后加亚砷酸1ml在31度下恒温15min。在加入硫酸铈铵1ml待半小时后测。我想问同样浓度同等条件下,为什么仅1到2天吸光值差这么多?是仪器原因吗?
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  • tutm

    第1楼2012/08/15

    两组数据主要是截距不同,斜率看上去相差不大,只是整个数据平移了。检查浓度零管吧,两天间不同了,是不是某一试剂问题?

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  • yzx2011

    第2楼2012/08/16

    应助达人

    谢谢老师的指导,我再实验一下看看

    tutm(tutm) 发表:两组数据主要是截距不同,斜率看上去相差不大,只是整个数据平移了。检查浓度零管吧,两天间不同了,是不是某一试剂问题?

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  • suiniubei

    第3楼2012/08/16

     我算了下,斜率相差不大.

     提醒注意一下:

    1 你的浓度数值精度不行. 怎么可能是8ug/ml, 6ug/ml呢?后面至少有小数点啊.分析中一般是四位有效数字,至少也得三位.你的浓度精度太差,所以相关系数较差,才0.9834及0.9885.

    2 你的浓度为0和管子的吸光度达到了1.0以上.对于普通的分光光度计来说,这个就很难成线性了.除非你用的是比较高级的分光计,像岛津2450这样的机子,或1800的,不然你是死活都做不成好的线性的。
     因此体系的浓度可适当降低。
     此外,10ug/ml那个点应丢掉,在中间可以插一个3ug/ml,或者1ug/ml的点较好。

    3 线性不好的原因还有可能来自于你的操作。你量取液体时如果不准,就会导致线性不好。这个是关键。而在机器上,谁来测差别不大的。除非他操作失误。所以,最关键的不是仪器这部分,而是前面的操作部分。

    4 吸光度不稳的原因很可能是物质分解。你可以考察一下。

    tutm(tutm) 发表:两组数据主要是截距不同,斜率看上去相差不大,只是整个数据平移了。检查浓度零管吧,两天间不同了,是不是某一试剂问题?

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  • tutm

    第4楼2012/08/16

    还有需要注意一下,上面加入过硫酸铵后加热过程。这时不要直接加热,应该放在水浴中加热,同时最好加个盖子,不然氧化产生的碘会蒸发跑掉,这样就测不准了。

    yzx2011(yzx2011) 发表:谢谢老师的指导,我再实验一下看看

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  • qianguiyun1

    第5楼2012/08/20

    应助达人

    应该是试剂分解导致颜色变淡,吸光度下降。

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